实验一 分光光度计的性能检查
1紫外可见分光光度计期间核查方法
1紫外可见分光光度计期间核查方法紫外可见分光光度计是一种常用的实验仪器，用于测量物质在紫外可见光区域的吸光度。
在实验室中，对仪器的准确性和稳定性进行定期核查十分重要，以确保测量结果的准确性和可靠性。
以下是紫外可见分光光度计核查的方法和步骤。
1.校准仪器首先，需要使用校准溶液对紫外可见分光光度计进行校准。
选择一种已知浓度和吸光度的参考溶液，如工作曲线中的标准溶液。
在不同浓度下测量吸光度，并利用标准曲线进行校准。
确保校准过程中环境条件的稳定性，如温度、湿度等。
2.检查光源检查和确保光源的正常运行。
使用光源检测器来测量光源的强度和稳定性。
将光源放置在所需波长下进行测量，并记录测量结果。
比较测量结果与光源的规格要求，确保光源的工作正常。
3.检查检测器使用检测器标定溶液进行检测器的校准。
使用已知浓度的参考溶液，测量吸光度，并利用已知的吸光度值对检测器进行校准。
确保检测器的灵敏度和线性范围。
4.检查光学路径使用标定溶液检查和校正光学路径。
在没有样品的情况下，使用标定溶液进行测量，并根据标准吸光度值进行校正。
确保光学路径的准确性和一致性，以提高测量结果的精确性。
5.检查进样系统检查进样系统的正常运行。
确保进样系统能够正确吸取和释放样品，并且不会产生干扰或污染。
使用已知浓度的标准溶液进行进样系统的校准，以确保准确的进样和测量。
6.清洁和维护定期清洁和维护仪器，以确保仪器的性能和工作效率。
定期清洁光学元件，如光栅、镜片等，以去除灰尘和污垢。
定期校正仪器以保持其工作性能和准确性。
总结：在使用紫外可见分光光度计之前和定期使用期间，进行核查并校准仪器是保证测量结果准确性和可靠性的关键。
通过校准仪器、检查光源和检测器、检查光学路径和进样系统，并定期进行清洁和维护，可以确保仪器的正常运行和测量结果的准确性。
(精)仪器分析实验讲义
实验一722 型分光光度计的性能检测一、目的1、学会使用分光光度计2、掌握分光光度计的性能检验方法二、提要1、分光光度计的性能好坏，直接影响到测定结果的准确性，因此新购仪器及使用一定时间后，均需进行检验调整。
2、利用KMnO4溶液的最大吸收峰值来检验波长的精度。
3、用同种厚度的比色皿，由于材料及工艺等原因，往往造成透光率的不一致，从而影响测定结果，故在使用时须加以选择配对。
三、仪器与试剂1、722 型分光光度计；2、小烧杯；3、坐标纸；4、滴管；5、擦镜纸；6、KMnO4溶液；四、操作步骤1、吸收池透光率的检查（测定透光率）吸收池透光面玻璃应无色透明，并应无水、干燥。
检查方法如下：以空气的透光率为100%，则比色皿的透光率应不低于84%，同时在450nm、650nm 处测其透光率，各透吸收池透光率差值应小于5%。
2、吸收池的配对性（测定透光率）同种厚度的吸收池之间，透光率误差应小于0.5%。
检查方法如下：将蒸馏水分别注入厚度相同的几个吸收池中。
以其中任一个比色皿的溶液做空白，在440nm 波长处分别测定其它各比色皿中溶液的透光率，然后选择相差小于0.5% 的吸收池使用。
3、重现性（光度重复性）（测定透光率）仪器在同一工作条件下，用同种溶液连续测定7 次，其透光率最大读数与最小读数之差（极差）应小于0.5%。
检查方法如下：以蒸馏水的透光率为100%，用同一KMnO4溶液连续测定7 次，求出极差，如小于0.5%，则符合要求。
4、波长精度的检查（测定A）为了检查分光系统的质量，可用KMnO4溶液的最大吸收波长525nm 为标准，在待检查仪器上测绘KMnO4溶液的吸收曲线。
检查方法如下：取3.0×10-5mol/L 的KMnO4溶液，以蒸馏水为空白，在460nm~580nm 范围内，分别测定460、480、500、510、520、522、524、525、526、528、530、540、550、560、570、580nm 波长处的吸光度，在坐标纸上绘出吸收曲线。
分光光度计的性能检查
分光光度计的性能检查（1）波长校正：使用光电比色计或分光光度计，在更换光源灯、重新安装、搬运或检修后，以及仪器工作不正常时，都要进行波长校正。
就是正常工作的仪器，每隔一个月也要检查一次波长，必要时进行校正，这样才能保证波长读数与通过样品的波长符合，保证仪器的最大灵敏度。
方法常用谱钕滤光片校正法，适用于721型仪可见光区的波长校正，常以585nm或529nm处的吸收峰或T%为标准。
鉴于721型仪器的出射光波长较宽，不易将573nm和585nm 的两峰或两谷分开，校正时易产生误差，故推荐用529nm处的峰或谷为标准来进行波长校正。
校正时，将仪器按要求预热。
要求电源电压稳定。
波长度盘置580nm处，T%调至最大，在比色杯处放一白纸条，观察是否有光强均匀、边缘无光晕或杂光的光斑，如不符合要求，可调节灯泡位置使其符合要求，是为波长校正的粗调。
再把灵敏度扭置于“1”（最低档），波长度盘对准529nm，电表机械零点为零，在光路空白时调T%为100%T，并反复查零点和100%T 稳定情况。
将谱钕滤光片插入光路，慢慢旋转波长度盘，找到透光率最低的一点（向左右微旋波长度盘时，该点透光率值均增加），这一点即为波长529nm。
检查波长度盘的指示值是不是529nm，如指示值为534nm，此时波长工误差为5nm，超出规定（±1nm）必须进行调整。
调整方法：将波长度盘对准529nm，从光路取出谱钕滤光片，光路空白时调电表指针到100%T，再将谱钕滤光片插入光路。
打开仪器左侧小盖板，找到波长校正螺丝（3个中左侧柄长的一个）；反时针方向微微调节（负误差时顺时针方向），使电表指针的指示T%为最低。
反复检查波长误差情况，直到符合仪器技术指标为止。
盖好左侧小盖板，校正结束。
有些高档仪器如岛津UV-260型双光束分光光度计，可使用氢灯或置谱钕滤光片于测定比色槽内，编入滤工扫描程序后，仪器即可自动地在一定波长范围内进行波长校正。
紫外可见光分光光度计的性能检查
紫外可见光分光光度计的性能检查
1、比色皿透光率的检查：以空气的透光率为100%，测量比色皿的透光率，应不低于84.0%,
同时在450.0nm和650nm处分别测空比色皿的透光率，透光率差应不小于5.0%。
（注意2个比色皿都要检查）
2、比色皿的配对性：将0.008mol/L的重铬酸钾溶液注入厚度相同的比色皿中。
以其中一个
比色皿溶液作为空白溶液，在440nm波长处测定另外一个比色皿的透光率，相差应小于
0.5%。
3、重复性：以蒸馏水的透光率为100%，用同一重铬酸钾溶液连续测定7次，求出极差（最大值与最小值之差），如小于0.5%，则符合要求。
4、吸光度的准确性：取60mg/L的重铬酸钾溶液，在350nm处测定其吸光度，计算其吸光系数E1%1cn与规定的吸光系数（106.6）比较，相对偏听偏信差应在±1.5%
实验数据与结果分析
4 A= E1cn= （E测-E规）/ E规×100%=。
红外分光光度计校验操作规程
红外分光光度计校验操作规程一、设备准备1.检查仪器的工作环境是否符合要求，保持室温在20℃左右，相对湿度在40%~60%之间。
2.检查光源、检测器、光谱仪等各部分的连接是否牢固，无松动或接触不良。
3.校验所需的标准物品和试样应具备良好的保存条件，保证其稳定性。
二、仪器清洁1.用纯水和洁净纸巾擦拭仪器的外观，保持仪器表面的清洁。
2.用纯水和洁净纸巾擦拭光源、检测器和光谱仪的各个部分，保持其表面的干净。
三、基线校准1.打开红外分光光度计的电源，预热一段时间，使仪器达到稳定工作状态。
2.在没有样品的情况下，按照仪器使用说明书的要求进行基线校准，保证仪器对零点的准确性。
四、灵敏度校准1.准备灵敏度校准曲线所需的标准物品，确保其纯度和浓度的准确性。
2.将标准物品逐一放入红外分光光度计中进行测量，并记录各个浓度点的吸光度值。
3.根据吸光度与浓度的关系，绘制灵敏度校准曲线。
五、波数校准1.准备红外标准物品，确保其波数准确。
2.将红外标准物品放入红外分光光度计中进行测量，并记录其吸光度值。
3.根据红外标准物品的波数值，调整仪器的波数刻度，使其与标准物品吻合。
六、测量操作校验1.使用准备好的标准物品和试样，按照红外分光光度计的测量方法进行测量。
2.每次测量完毕后，清洁标准物品的外观，并记录吸光度值。
3.对同一标准物品进行多次测量，以验证测量结果的重复性。
七、数据处理1.对测量结果进行数据处理，计算样品的红外吸光度值。
2.分析校准曲线和测量结果，评估仪器的准确性和灵敏度。
八、校验结果分析1.根据校验结果，判断红外分光光度计的性能是否满足要求。
2.若校验结果不符合要求，应及时调整仪器或进行故障排除。
九、记录与报告1.对每次校验操作进行详细的记录，包括仪器的状态、使用的标准物品和试样、测量结果等。
2.根据记录，生成校验报告，明确红外分光光度计的性能和可靠性。
校验频率和方法应根据仪器的使用情况和性能要求来确定，一般建议每隔一定时间或每次使用前进行校验。
紫外-可见分光光度计的校正
实验一紫外-可见分光光度计的校正及使用分光光度计定性分析一、实验目的1. 了解紫外和可见光光度计的构造；2. 学会分光光度计的波长准确度和吸收池配套性检验方法；3. 了解紫外和可见光光度计的校正基本方法；4. 掌握利用分光光度计对物质进行定性分析。
二、实验学时3学时三、仪器与试剂1、仪器紫外-可见分光光度计；镨钕滤过片；容量瓶（50mL）；天平；烧杯（200mL）；2、试剂去离子水； 95%乙醇；防晒霜；苯；质量分数0.006000%重铬酸钾的0.001mol/L高氯酸标准溶液：称取已经干燥过的重铬酸钾60.00mg，移入1L容量瓶中，用蒸馏水溶解，加入1mL的1.0mol/L高氯酸，再用蒸馏水稀释溶液质量为1000.0g，避光密封保存。
四、实验原理紫外吸收光谱主要产生于分子价电子在电子能级间的跃迁，是研究物质电子光谱的分析方法。
通过测定分子对紫外光的吸收，可以对物质进行定性和定量测定。
利用紫外分光光度法对物质进行定性分析：选择合适的溶剂（非极性），使用有足够纯度单色光的分光光度计，在相同的条件下测定相近浓度的待测试样和标准品的溶液的吸收光谱，然后比较二者吸收光谱特征：吸收峰数目及位置、吸收谷及肩峰所在的位置等；分子结构相同的化合物应有完全相同的吸收光谱。
紫外-可见分光光度计的主要部件包括光源、波长选择器、吸收池、检测器及测量系统等。
1. 光源：能发射所需波长范围的光的器件。
可见光源常用钨丝灯(或碘钨灯)，波长范围约为320～2500nm；紫外光源常用氢灯(或氘灯)，波长范围约为200～350nm。
2. 波长选择器：能从光源辐射光中分离出一定波长范围光的器件。
通常为滤光片、棱镜或光栅。
固定波长选择器常用滤光片，连续变化波长选择器常用棱镜或光栅。
3. 吸收池：盛放待测样品溶液的容器。
该容器应具有两面互相平行、透光且有精确厚度的平面。
按材质可分为玻璃和石英两种。
玻璃吸收池用于可见光波长范围的测定；石英吸收池用于紫外光及可见光波长范围的测定。
分光光度计性能检查
1、分光光度计的性能检查（1）波长校正：使用光电比色计或分光光度计，在更换光源灯、重新安装、搬运或检修后，以及仪器工作不正常时，都要进行波长校正。
就是正常工作的仪器，每隔一个月也要检查一次波长，必要时进行校正，这样才能保证波长读数与通过样品的波长符合，保证仪器的最大灵敏度。
方法常用谱钕滤光片校正法，适用于721型仪可见光区的波长校正，常以585nm或529nm处的吸收峰或T%为标准。
鉴于721型仪器的出射光波长较宽，不易将573nm和585nm的两峰或两谷分开，校正时易产生误差，故推荐用529nm处的峰或谷为标准来进行波长校正。
校正时，将仪器按要求预热。
要求电源电压稳定。
波长度盘置580nm处，T%调至最大，在比色杯处放一白纸条，观察是否有光强均匀、边缘无光晕或杂光的光斑，如不符合要求，可调节灯泡位置使其符合要求，是为波长校正的粗调。
再把灵敏度扭置于“1”（最低档），波长度盘对准529nm，电表机械零点为零，在光路空白时调T%为100%T，并反复查零点和100%T稳定情况。
将谱钕滤光片插入光路，慢慢旋转波长度盘，找到透光率最低的一点（向左右微旋波长度盘时，该点透光率值均增加），这一点即为波长529nm。
检查波长度盘的指示值是不是529nm，如指示值为534nm，此时波长工误差为5nm，超出规定（±1nm）必须进行调整。
调整方法：将波长度盘对准529nm，从光路取出谱钕滤光片，光路空白时调电表指针到100%T，再将谱钕滤光片插入光路。
打开仪器左侧小盖板，找到波长校正螺丝（3个中左侧柄长的一个）；反时针方向微微调节（负误差时顺时针方向），使电表指针的指示T%为最低。
反复检查波长误差情况，直到符合仪器技术指标为止。
盖好左侧小盖板，校正结束。
有些高档仪器如岛津UV-260型双光束分光光度计，可使用氢灯或置谱钕滤光片于测定比色槽内，编入滤工扫描程序后，仪器即可自动地在一定波长范围内进行波长校正。
分光光度性能检查实验报告
实验题目：分光光度性能检查实验目的：（1）掌握分光光度计性能检查方法（2）熟悉分光光度计操作实验原理：实验材料：（1）仪器：翱艺A560双光束分光光度计，石英比色皿（2）试剂：60mg/L K2Mn O4，61.2mg/L K2Cr2O7,0.005mol/L H2S O4溶液，蒸馏水实验内容：（1）波长精度的检查（波长扫描）：本次实验需先进行建立基线，再进行波长扫描。
通过测绘K2Mn O4溶液在400-600nm波长范围的吸收曲线，观察最大波长=525+（-）2nm（2）重复性（光度测量）：以H2S O4溶液为为空白，用61.2mg/L K2Cr2O7溶液在350nm波长处连续测6次，记录透光率T值，求出极差（3）吸光度的准确度（多波长分析）：取61.2mg/L K2Cr2O7溶液在235nm、257nm、313nm、350nm波长处测定吸光度，计算其吸收系数，并与规定的吸收系（1）波长扫描：思考：（1）同种比色皿透光率的差异对测定有什么影响？进入比色皿的选定光线应该是稳定的，它在比色皿中被溶液吸收一部分能量后再穿出比色皿而加入光电池产生电信号得到读书，然后再进行结果计算。
若比色皿本身透光率的差异出现差异而出现的不是溶液对光线的吸收，而这个差异产生的电信号数值又算在样品溶液的电信号内，这就产生了读数的误差，最终导致结果法误差（2）检查分光光度计的波长精度、重复性对测定有什么实际意义？波长精度和重复性的改变可使分光光度计的定量分析造成误差，定性分析或结构分析判断错误，故为确保分析结果的准确性，应在仪器安装完成或使用一段时间后要进行一次检查或校正反思：（1）初次使用，不熟悉操作步骤（2）比色皿的使用需要注意，手持毛面，若有水或溶液则同拭镜纸向同一个方向擦拭。
分光计实验报告
分光计实验报告
实验目的，通过使用分光计测定溶液中某一种物质的吸光度，从而了解溶液中物质的浓度和吸收光谱特性。
实验仪器，分光光度计、玻璃仪器、溶液样品。
实验原理，分光光度计是利用溶液对特定波长的光的吸收来测定物质的浓度的仪器。
在实验中，我们将通过测定溶液对特定波长的光的吸收来确定溶液中某一种物质的浓度。
实验步骤：
1. 将分光光度计预热15分钟。
2. 调零，将空白比色皿放入分光光度计中，调节到零吸光度。
3. 取一定体积的溶液样品，放入比色皿中。
4. 将比色皿放入分光光度计中，调节波长。
5. 记录吸光度值。
6. 用标准曲线法或标准溶液法计算出样品的浓度。
实验结果，通过实验测定，得到了溶液对特定波长的光的吸光度值。
根据标准曲线法或标准溶液法计算出了溶液中某一种物质的浓度。
实验分析，根据实验结果，我们可以得出溶液中某一种物质的浓度，进而了解了溶液中物质的吸收光谱特性。
通过实验，我们也可以对溶液中物质的浓度和吸收光谱特性有了更深入的了解。
实验结论，分光计实验是一种非常重要的实验方法，通过实验可以准确测定溶液中物质的浓度和吸收光谱特性，为化学分析提供了重要的数据支持。
通过本次实
验，我们对分光计的使用有了更深入的了解，也对溶液中物质的浓度和吸收光谱特性有了更深入的认识。
总结，分光计实验是一项非常重要的实验，通过实验我们可以了解溶液中物质的浓度和吸收光谱特性，为化学分析提供了重要的数据支持。
希望通过本次实验，能够加深对分光计的理解，为今后的实验工作打下坚实的基础。
紫外可见光分光光度计的性能检查
紫外可见光分光光度计的性能检查
1、比色皿透光率的检查：以空气的透光率为100%，测量比色皿的透光率，应不低于84.0%,
同时在450.0nm和650nm处分别测空比色皿的透光率，透光率差应不小于5.0%。
（注意2个比色皿都要检查）
2、比色皿的配对性：将0.008mol/L的重铬酸钾溶液注入厚度相同的比色皿中。
以其中一个
比色皿溶液作为空白溶液，在440nm波长处测定另外一个比色皿的透光率，相差应小于
0.5%。
3、重复性：以蒸馏水的透光率为100%，用同一重铬酸钾溶液连续测定7次，求出极差（最大值与最小值之差），如小于0.5%，则符合要求。
4、吸光度的准确性：取60mg/L的重铬酸钾溶液，在350nm处测定其吸光度，计算其吸光系数E1%1cn与规定的吸光系数（106.6）比较，相对偏听偏信差应在±1.5%
实验数据与结果分析
4 A= E1cn= （E测-E规）/ E规×100%=。
分光光度计的性能检验
实验名称：分光光度计的性能检验一、实验目的1、掌握分光光度计的重现性、波长精度检查等性能检验方法。
2、熟悉分光光度计的使用方法。
二、实验原理1、分光光度计的性能好坏，直接影响到测定结果的准确性，因此，新购仪器及使用一段时间后，均需进行检验调整。
2、利用镨钕滤光片的特征吸收峰值检验波长精度。
3、同种厚度的吸收池，由于材料及工艺等原因，往往造成透光率的不一致，从而影响测定结果，故在使用时需加以选择配对。
三、仪器与试剂1、仪器：紫外—可见分光光度计（配镨钕滤光片）。
2、试剂：高猛酸钾溶液、蒸馏水。
四、实验内容与步骤取两个干净的比色皿，将其中一个用蒸馏水润洗两到三遍，最后倒入蒸馏水（注意不要超过比色皿体积的三分之二）；另一个用高锰酸钾溶液润洗两到三遍，最后倒入高锰酸钾溶液（注意不要超过比色皿体积的三分之二）。
然后将两个比色皿放入风光光度计中，以蒸馏水作为空白对照检测高锰酸钾的吸收波长。
在电脑上输入开始波长:590.0 nm；结束波长:420.0 nm开始检测。
五、注意事项1、仪器预热时必须打开样品室盖，因样品室盖是光闸门的开关，打开时，光闸门处于关的位置，可避免光电倍增管照光，延长光电倍增管的使用寿命。
2、大幅度改变测试波长时，需要等数分钟后，才能正常工作。
（因波长大幅移动时，光能量变化急剧，光电管受光后响应缓慢，需一定光响应平衡时间。
）3、每台仪器所配套的吸收池不能与其他仪器上的吸收池单个调换。
4、仪器使用完毕后，用随机提供的塑料套罩住，在套子内应放数袋硅胶，以免灯室受潮。
反射镜发霉或沾污会影响仪器能量。
5、吸收池每次使用完毕后，应立即用蒸馏水洗净，用吸水纸揩干，存于吸收池的盒内。
6、仪器工作1个月左右或搬动后，要重新进行波长精确性等方面的检查，以确保仪器的使用和测定的精确。
六、数据处理结论：由图表可知，高锰酸钾的最大吸收波长为525.0nm,与理论值相等，说明此仪器的波长精确性很好。
七、思考题1、同种吸收池透光度的差异对测定有何影响？答：进入比色皿的选定光线应该是稳定的(强度稳定、波长稳定），它在比色皿中被溶液吸收一部分能量后再穿出比色皿而加入光电池产生电信号得到读数，然后进行结果计算。
分光光度计期间核查方法
分光光度计期间核查方法
一、检查目的
为使检验实验室XXX型分光光度计正常运行，确保检验数据的准确、可靠，特制定本方法。
二、适用范围
适用于本实验室内部的XXX型分光光度计期间核查。
三、检查方法
1．按仪器设备操作规程对设备通电运行。
2．检查波长精度：以镨钕干涉光片，于波长585nm处测定吸收峰。
3．检查灵敏度：以10.00mg/L重铬酸钾溶液注入10mm比色皿内，于440nm 波长处，以蒸馏水比较测定。
四、评定依据
以上方法作为评定仪器性能的依据是JJG 178-96技术规范，具体评定指标为：
（1）波长精度要求：对镨钕干涉光片波长585nm处吸收峰允许波长误差为±3nm ；
（2）灵敏度要求：对10.00mg/L重铬酸钾溶液吸光度读数≥0.01E为合格。
五、期间核查周期
期间核查周期为一年，时间安排在分光光度计年度检定周期中间进行（一般为7月份）。
六、期间核查结果处理
对以上检查结果，应填写“仪器设备期间核查记录”，于年底统一归档。
在期间核查过程中若发现仪器工作不正常或评定指标未能达到规定要求，应及时通
知设备管理员，由设备管理员组织有关人员确定，并组织维修或送检，维修后的仪器经检查或检定达到技术性能要求后方能投入使用。
XXXXXXXX实验室
方法起草人：方法批准人：
年月日年月日。
实验一 分光光度计的性能检验
注意事项
• • 1.待测溶液装量应超过比色皿 ，但也不 待测溶液装量应超过比色皿2/3， 待测溶液装量应超过比色皿 能装得太满。 能装得太满。 2.实验过程中，注意不要将溶液撒入机器 实验过程中， 实验过程中 内部，如果发生上述情况， 内部，如果发生上述情况，请及时清理干 净。 3.比色皿用后，请洗净后，用95%乙醇浸 比色皿用后，请洗净后， 乙醇浸 比色皿用后 长期不用，请擦干后，收好。 泡，长期不用，请擦干后，收好。
实验一
分光光度计的性能检验
目 的
• （1）学会使用分光光度计。 • （2）掌握分光光度计的性能 检验方法。
实验原理
• （1）分光光度计的性能好坏，直接影响到测 ）分光光度计的性能好坏， 定结果的准确性， 定结果的准确性，因此新购仪器及使用一定时 间后，均需进行检验调整。 间后，均需进行检验调整。 （2）利用 ）利用KMnO4溶液的最大吸收值来检验波 长的精度。 长的精度。 （3）同种厚度的比色皿，由于材料及工艺等 ）同种厚度的比色皿， 原因，往往造成透光率的不一致， 原因，往往造成透光率的不一致，从而影响测 定结果，故在使用时需加以选择配对。 定结果，故在使用时需加以选择配对。
•
操作步骤2 操作步骤
• 3.重现性 重现性 仪器在同一工作条件下(440)，用同种溶液 ， 仪器在同一工作条件下 连续测定7次 透光率最大读数与最小读 连续测定 次，其透光率最大读数与最小读 数之差(极差 应小于0.5%。 极差)应小于 数之差 极差 应小于 。 检查方法如下:以蒸馏水的透光率为 检查方法如下 以蒸馏水的透光率为100%, 以蒸馏水的透光率为 用同一K 溶液连续测定7次 用同一 2Cr2O7溶液连续测定 次，求出极 如小于0.5%，则符合要求。 差，如小于 ，则符合要求。
仪器分析实验报告
实验一 紫外－可见分光光度计的性能检验一、实验目的1.掌握紫外－可见分光光度计性能的检验方法2.学会UV-1100型紫外－可见分光光度计的使用方法二、实验原理分光光度计的性能的好坏，直接影响到测定结果的准确程度。
因此，要对仪器进行性能检查，以保证测定结果的准确性。
三、仪器和试剂UV －1100型紫外－可见分光光度仪石英比色皿（一对）擦镜纸K 2Cr 2O 7溶液 KMnO 4溶液蒸馏水四、实验内容及操作步骤1. 比色皿的配对性 将蒸馏水注入到比色皿中，以其中一个比色皿作空白，在 440 nm 波长处分别测定其他各比色皿中的透光率。
2.波长精度的检查 用KMnO 4溶液的最大吸收波长525nm 为标准，在待测仪器上测绘KMnO 4溶液的吸收曲线，若测得的最大吸收波长在525±1nm 以内，则仪器的波长精度符合使用要求。
3. 重复性 以0.02mol/L 的H 2SO 4溶液的透光率为100%，用同一K 2Cr 2O 7溶液连续测定7次，求出极差，如小于0.5%，则重复性符合要求。
4.吸收值的准确度考察 取K 2Cr 2O 7溶液，在以下波长处测定并计算其吸收系数，并与规定的吸收系数比较，如下表所示，其相对偏差在±1%以内，则吸收值的准确度符合要求。
波长/cm235 （最小） 257 （最大） 313 （最小） 350 （最大） 吸收系数1%1E cm 123.0～126.0 142.8~146.247.0~50.3 105.5~108.5五、思考题1. 同种比色皿透光度的差异对测定有何影响？2. 检查分光光度计的重复性对测定有什么实际意义？实验二、吸收曲线的测绘及吸收系数的测定一、实验目的1. 掌握测绘吸收曲线的方法实验三、分光光度法测定槐花中总黄酮的含量一、实验目的1.掌握用标准曲线法测定槐花中总黄酮含量的方法2.巩固紫外－可见分光光度计的操作方法二、实验原理黄酮类化合物分子结构中多含有羰基和羟基等结构，这些结构可与金属盐类试剂如铝盐、铅盐等生成有色配合物。
分光光度计的性能检验实验讨论及心得
分光光度计的性能检验实验讨论及心得摘要：本文介绍了不同分光光度计在实际使用中的性能检验实验，通过实验分析得出，不同分光光度计所能获得的结果是不一样的。
文章以实际应用实验为基础，通过实验讨论和分析得出结论。
关键词：分光光度计；性能检验；实验总结；导读：分光光度计作为常用测定气体成分计量仪器，在各种工业中广泛应用。
但由于某些仪器在工作中会产生测量误差甚至错误，因而会影响测量值的准确度和使用效果。
因此我们在对分光光度计测量结果分析和性能检验时，应该尽可能地避免出现误差或者错误。
本文就采用传统光学仪器在工业中使用时出现偏差问题作出分析讨论。
1概述分光光度计是一种用于气体分析的光学仪器，它主要用于测定气体成分，如一氧化碳、氮氧化物、二氧化碳、二氧化硫、二氧化氮、甲烷、氢气、氧气、硫化氢、乙烷、氟化氢、乙炔、二氧化碳等。
根据测量原理不同：它可将光信号转换成电信号或数字信号。
通过信号转换器转换成电信号或数字信号，然后将其转换成标准信号到传感器。
通过传感器发出信号通过计算机后得到该信号所对应气体体积分数以百分比来表示气体成分。
分光光度计目前在我国已有较长历史积累过程，从简单的测定试样中提取、到简单测定高浓度天然气成分、再到各种工业气体成分等都有广泛应用。
它根据气体成分由不同组成程度和类型被测量气体体积分数反映出来，这一过程通常需要十几个小时完成，测量结果直接与仪器本身的精度、准确度以及操作使用时所产生的环境影响相关联。
2分光光度计结构分光光度计由三部分组成，分别为传感器、换能器、光学系统。
其中传感器的作用是将被测气体波长变化通过光栅放大；换能器是气体波长变化测量过程中产生的电磁辐射（电磁干扰）对仪器的影响；光学系统是对测量结果进行计算和分析的光学元件。
分光光度计通常有以下几种类型:1)单片机方式：采用单片机作为测量仪器。
这种方式主要是为了减少干扰信号（如图1),也不会对分光光度计带来任何影响（如图2)。
2)双片机方式：双片机是指一个被测气体波长与另一个被测气体波长之比小于10:1即为正确测量值；两个被测气体波长之比大于10:1即为错误测量值。
实验一紫外-可见分光光度计的性能检验
实验二
吸收曲线的测绘及 吸收系数的测定
一、实验目的
1、掌握测绘吸收曲线的方法 2、学会测定吸收系数
二、实验原理
1、若溶剂固定不变，化合物吸收曲线所出现的λmax、 λmin或λ(S)为一定值，且数目也一定，为鉴别化合物提 供了有力的证据。
2、百分吸收系数是指当溶液浓度为1%，液层厚度为1cm
二、实验原理
气相色谱法是采用气体作流动相（载气） 流经色谱柱进行分离分析的方法。主要由 气源部分、进样部分、色谱柱、柱温箱、 检测器和数据处理系统组成。
三、仪器与试剂
岛津GC-2014气相色谱仪（FID检测器） 樟脑对照品溶液 试剂均为A.R纯
四、实验内容及操作步骤
（一）启动GC-2014气相色谱仪 （二）参数的设定 （三）打开N2000色谱工作站 （四）运行GC-2014气相色谱仪 （五）进样
2.对照药材溶液的制备：取五味子 对照药材1g，同法制成对照药材 溶液。
3.对照品溶液的制备：取五味子甲 素对照品，加三氯甲烷制成每ml
4. 吸取上述三种溶液各2μl，点于同一硅胶
GF254薄层板上，以石油醚（30～60℃） －甲酸乙酯－甲酸（15∶5∶1）的上层溶 液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外 光灯（254nm）下检视。供试品色谱中， 在与对照药材和对照品色谱相应的位置上， 显相同颜色的斑点。
4．活化 将阴干的薄层板至于110℃ 烘箱中活化30分钟，置于有干燥器中 备用。
四、思考题
1．薄层板的铺制过程中应 注意哪些问题？
实验五 薄层色谱定性分 析
（五味子的定性鉴别）
一、实验目的
1. 掌握薄层色谱的定性分析方法。
2. 熟悉薄层板的点样方法。
二、实验原理
实验一分光光度计性能检测.
实验⼀分光光度计性能检测.实验⼀分光光度计性能检测【实验⽬的】1、掌握分光光度计的性能检测，包括波长检测、杂光检测以及⽐⾊⽫配对。
2、掌握分光光度计的使⽤⽅法。
【实验原理】1、波长检测：⑴可见光区域的黄光波段⽐较狭窄，适⽤于光度计波长的粗测；⑵镨钕滤光⽚在529nm±1?2nm处有较好的吸收峰，适⽤于光度计波长的细测。
2、杂光检测：镨钕滤光⽚在585nm 处吸光度A 最⼤，透光率T 最⼩，所产⽣的透光与杂光成正⽐，因此可⽤其透光率表⽰杂光的⼤⼩。
3、⽐⾊⽫配对：⼀套⽐⾊⽫之间的材质、厚薄、⾊泽、空⽩吸收等应该⼀致，误差⼩于0.5%才能配套使⽤。
【试剂与器材】1、镨钕滤光⽚、⽩纸条、⿊纸⽚、蒸馏⽔等；2、722 型分光光度计、⽐⾊⽫。
【操作步骤】⼀、操作1、波长检测(1) 粗测：调仪器波长旋纽⾄580nm 处，打开遮光板，在⽐⾊槽中光路经过处放⼀⽩纸条，观察是否有均匀的黄光。
⑵细测：调波长⾄529nm处，打开遮光板，调0%T，盖上遮光板以空⽓调100%T，将镨钕滤光⽚插⼊光路，测出A 值。
再在529nm附近每隔1?2nm,各测其A值。
2、杂光检测(1) 调波长为585nm，盖上遮光板，⽤⿊纸挡住⽐⾊⽫光路，调0%T。
(2) 盖上遮光板，⽤空⽓作空⽩调100%T。
(3) 插⼊镨钕滤光⽚，盖上遮光板，测出585nm时的T%，即为杂光⽔平。
3、⽐⾊⽫配套( 1 )选取⼏⽀⼤⼩、材质、⾊泽相同的⽐⾊⽫，洗净，装⼊占⽐⾊⽫体积2/3 的蒸馏⽔(D.W.) ，擦⼲，放⼊⽐⾊槽。
(2)在585nm处，调第1⽀⽐⾊⽫透光度为100%T，依次测出其他⼏⽀⽐⾊⽫的T%。
不合格的需反复剔除极端值，或重新配对，直⾄有2个以上的⽐⾊⽫合格。
⼆、结果及讨论【参考范围】1、波长的检测：在529nm ±1nm 处有最⼤吸收值为合格。
2、杂光的检测：T% < 5涵合格。
3、⽐⾊⽫配套：T max % -T min% W 0. 5%为合格⽐⾊⽫配套。
紫外分光光度仪的性能测定
实验报告课程名称：_________大学化学实验P________指导老师：_____ ____成绩：__________________ 实验名称：___紫外分光光度仪的性能测定___实验类型：_____验证性_____同组学生姓名：__ ___ 一、实验目的和要求（必填）二、实验内容和原理（必填）三、主要仪器设备（必填）四、操作方法和实验步骤五、实验数据记录和处理六、实验结果与分析（必填）七、讨论、心得一、实验目的和要求1、掌握紫外分光光度仪的性能测试内容及测定方法（中国药典方法）。
2、熟悉紫外分光光度仪的操作方法。
3、了解紫外分光光度仪的构造原理。
二、实验原理1、紫外-可见分光光度计的检测原理：利用某些物质的分子吸收200-800nm光谱区的辐射进行分析测定的方法，属于分子吸收光谱。
紫外分光光度计按光路不同可分为：（1）单光束分光光度计。
特点：使用时来回拉动吸收池→移动误差、对光源要求高、比色池配对。
（2）双光束分光光度计。
特点：不用拉动吸收池，可以减小移动误差、对光源要求不高、可以自动扫描吸收光谱。
（3）双波长分光光度计。
特点：利用吸光度差值定量、消除干扰和吸收池不匹配引起的误差。
2、紫外-可见分光光度计的性能好坏，会直接影响到测定的结果准确性，因此在使用前需进行检验校正。
3、利用重铬酸钾溶液在规定波长处的吸收系数来检验仪器吸光度的准确性。
4、同种厚度的比色皿，由于材料与工艺的不同往往会导致其透光率不一致，从而会影响到测定结果，故使用时需加以选择配对。
5、光的吸收谱曲线和光吸收定律a、光强度：光强度市直单位时间内照射在单位面积上的光的能量。
用字母I 表示，它与单位时间照射在单位面积上的光子的数目有关，与光的波长没有关系b、透射率：T=It/I0 T愈大，物质对光的吸收愈少，T=0%，光全部被吸收，T=100%，表示光全部透过专业：____ _____姓名：_____ ______学号：_______日期：________地点：___ ___装订线装订线c 、吸光度：A=- logT= log I0/It ，A 越小，物质对光的吸收越少；A=0，表示光全部透过；A=无穷，光全部吸收d 、郎伯-比尔吸收定律A=k1b k1：比例系数，b ：液层厚度——郎伯定律 A=k2c k2：比例系数，c ：溶液浓度——比尔定律 A=kbc三、主要仪器与试剂仪器 型紫外分光光度计，试剂 重铬酸钾溶液、蒸馏水、擦镜纸、碘化钠溶液、亚硝酸钠溶液。
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实验一分光光度计的性能检查
(一)实验目的
1、掌握分光光度计的性能检查指标。
2、熟悉仪器检查的意义及一般检查方法。
3、了解分光光度计的正确使用方法。
(二)实验原理
分光光度计利用单色器(光栅、棱镜)获得单色光，仪器的波长读数应有一定的准确度，测量溶液的透光率(或吸光度)应具有足够的灵敏度和重现性。
当溶液浓度改变时，仪器测定值的改变在一定范围内应符合Beer定律，即仪器应具有较好的线性。
成套比色皿中各比色皿的透光性能应相同。
实际工作中，同厚度的比色皿由于材料、工艺等原因，往往透光率不一致，影响测定结果，故使用前需进行配对性试验。
(三)仪器与试剂
仪器: 分光光度计；比色皿；镨钕滤光片；电子天平；容量瓶。
试剂: K2Cr2O7、CuSO4、CoCl2、蒸馏水。
(四)实验步骤
1、比色皿配对性检查同种厚度的比色皿之间，透光率误差应小于0.5%。
检查方法如下: 精密移取0.02mol/L的K2Cr2O7，溶液10m1至25m1容量瓶，用水稀释至刻度，摇匀，备用。
取稀释后的溶液分别注入厚度相同的几个比色皿中。
在440.0m波长处，以空气做空白，调透光率为100%。
分别测定各比色皿中溶液的透光率，然后选择相差不大于0.5%的比色皿配对使用。
2.波长精度检查测量800～812nm范围内，不同波长下镨钕滤光片的透光率，通过记录T值最小时，即A最大时的波长λ，进行仪器波长精度确认(波长值应在806～810nm内，符合要求)。
3.线性误差分别在440、510、690nm处测量表3-3中K2Cr2O7、CoCl2、CuSO4三种溶液的不同浓度的吸光度，根据K=（A1+A2+A3）/(C1+C2+C3)；
A误差=（A'-A）/A'×100%计算其线性误差。
4.灵敏度(ΔA/ΔC，μg/ml) 测量表3-4中K2Cr2O7、CoCl2、CuSO4三种溶液的不同浓度的吸光度，计算不同波长下仪器的灵敏度（ΔA/ΔC）。
5.重现性(ΔT) 取2000μg/mlCuSO4溶液，在690nm连续测定7次透光率，计算T max与T min之差。
（如小于0.5%，则符合要求）
(五)数据记录与处理
1、比色皿配对性检查（表3-1）
表3-1 配对性检查结果表
比色皿号 1 2 3 4
测量值（T）100%
ΔT应小于0.5%。
2、波长精度检查测量800～812nm范围内，不同波长下镨钕滤光片的透光率（表3-2）
表3-2 波长精度检查结果表
λ800 801 802 803 804 805 806 T
807 808 809 810 811 812 λ
T
T值最小时，即A最大时波长λ与808nm相对比，波长偏差应小于2nm。
3、线性误差按照表3-3中溶液的不同浓度测定吸光度，并记录。
表3-3 线性误差检查结果表
溶液C（μg/ml）λmax A K A' A误差
K2Cr2O7
30
90
150
440
A1
A2
A3
CoCl2
2000
6000
10000
510
A1
A2
A3
CuSO4
2000
6000
10000
690
A1
A2
A3
4、灵敏度(ΔA/ΔC，μg/ml)测量下表中三种溶液的不同浓度的吸光度，计算不同波长下仪器的灵敏度（表3-4）.
表3-4 灵敏度检查结果表
溶液C1（μg/ml）C2（μg/ml）λ（nm）ΔA ΔA/ΔC K2Cr2O7300 330 440
CoCl22000 2200 510
CuSO42000 2200 690
各溶液灵敏度测定值在规定范围内（见附录2），说明仪器有较高的灵敏性。
5.重现性(ΔT)CuSO42000μg/ml在690nm连续测定7次透光率，T max与T min之差小于0.5%，说明仪器重现性符合要求（表3-5）。
表3-5 重现性检查结果表
次数 1 2 3 4 5 6 7 ΔT T
(六)注意事项
在不同波长下测定时，注意用空白溶剂调整T为100%。
(七)实验提示
在进行不同样品溶液测定时，需要强化比色皿的润洗以保证溶液浓度一致。
(八)思考题
1、哪些性能指标是在日常测定工作中经常需要进行检查的? 为什么?
2、影响波长精度的因素有哪些?
附:
1、线性误差规定表
吸光度范围线性误差
0.1～0.3 ±6%内
0.3～0.6 ±3%内
0.6～0.8 ±4%内
2、灵敏度规定表
溶液灵敏度（吸光度/μg/ml）测定波长重铬酸钾≥0.01/2.5 440nm
氯化钴≥0.01/150 510nm
硫酸铜≥0.01/150 690nm。