BCA-MA42-01-01质量手册
BCA蛋白质定量试剂盒说明书
M 100mM
1M 100mM 100mM 100mM 20mM 200mM
4M 50mM
10mM
干扰物质 去垢剂 NP 40 TRITON X-100 SDS TWEEN20 混合物&极性化合物 PMSF Acetone Ethanol Glycerol Urea DMSO Sucrose
1 小时内即可完成蛋白质定量检测。本试剂盒含有牛血清白蛋白（BSA） 溶液作为蛋白质标准溶液，测定范围为 20～2000 ug/ml。
操作步骤：
1. 标准品的稀释：用与样品相同缓冲体系的稀释剂按下表对 BSA 标准品进
行稀释：
BSA 标准浓度配制表
管号 稀释剂体积 BSA 体积（来源） BSA 终浓度（ug/ml）
4. 微管测定方法： 1） 分别取 25ul 表格中新鲜配制的 BSA 标准液和待测样品，加入到 96 孔板中。 2） 每孔中加入 200ul BCA 工作液，并充分混匀。 3） 加盖，37℃孵育 30min 后冷却至室温或室温放置 2h。 4） 用紫外分光光度计于 562nm 处检测其吸光度。 5） 根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。
*PA115-01 试剂盒所携带的试剂可满足 50 次微管检测和 500 次微板检测。 **PA115-02 试剂盒所携带的试剂可满足 250 次微管检测和 2500 次微板检测。
储存条件：
BCA 试剂 A 和 BCA 试剂 B 室温储存。 BSA 标准品-20℃保存。
本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。
3. 标准比色杯测定方法： 1） 吸取 0.1ml 的每种标准品和待测样品置于合适的管中。 2） 加入 2.0ml 的 BCA 工作液, 彻底混匀。 3） 加盖，37℃孵育 30min 后冷却至室温或室温放置 2h。 4） 用紫外分光光度计于 562nm 处检测其吸光度。 5） 根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。
BCA蛋白定量试剂盒
BCA 蛋白定量试剂盒简介：目前世界上最常用的蛋白浓度检测方法是：BCA 蛋白定量试剂盒(BCA Protein Assay Kit)和Bradford 蛋白定量试剂盒(Bradford Protein Assay Kit)。
BCA 法与传统方法相比，更简单、更稳定、更灵敏度。
BCA 法测定蛋白浓度兼容性亦很好，不受大部分样本中其他成分的影响，对于5%以内的SDS 、Triton X-100、Tween 20、 Tween 80具有很好的兼容性。
BCA 法测定蛋白浓度易受螯合剂、高浓度的还原剂影响， BCA Protein Assay Kit 在50～1000μg/ml 浓度范围内有较好的线性关系， 其最小检出量为25μg/ml 。
组成：操作步骤(仅供参考)：1、 取1ml 蛋白标准配制液加入到蛋白标准(BSA)(20mg)中，充分溶解后配制成20mg/ml的蛋白标准溶液，配制后可立即使用，溶解后的蛋白标准溶液应-20℃保存。
2、 取适量20mg/ml 蛋白标准，稀释至终浓度为500μg/ml 或所需浓度。
3、 根据样品数量，按试剂(A):试剂(B)=50:1的比例配制BCA 工作液，即取50份BCA 试剂A 和1份BCA 试剂B ， 充分混匀，即获得BCA 工作液。
4、 将标准品按0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20μl 加到96孔板的标准品孔，加稀释液补足至20μl 。
5、 加适当体积待测蛋白样本到96孔板的样品孔中。
6、 各孔加入200μl 配置好的BCA 工作液, 37℃放置20～30min 。
7、 测定562nm 波长处的吸光值，如无562nm ，540～595nm 之间的波长也可。
8、 根据标准曲线计算出样品的蛋白浓度。
注意事项：1、 蛋白标准(BSA)粉末溶解于蛋白标准配制液后，即获得蛋白标准原液，该原液中含有防腐剂，不影响后续检测，该蛋白标准原液-20℃长期保存。
30302 BCA蛋白定量试剂盒说明书
BCA蛋白定量试剂盒货号: 30302规格: 500微孔仅供研究使用FOR RESEARCH USE ONLY北京华肽先锋生物科技有限公司BEIJING SINOPEPT BIOTECH CO.,LTDBCA 蛋白定量试剂盒货 号：30302 产品规格：微板法500T产品简介：BCA 蛋白定量法原理是在碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu +,Cu+与BCA 试剂形成紫色络合物，其吸光值与蛋白浓度成正比。
测定在562nm 处的吸收值，做标准曲线并计算待测蛋白的浓度。
本试剂盒检测灵敏度高，对不同种类蛋白质检测变异系数小，操作简单。
产品组成：1. 稀释标准品：用与样品相同缓冲体系的稀释液按下表稀释标准品（建议稀2. 配置BCA 工作液：根据标准品和样品的数量，将试剂A 和试剂B 以50︰1的体积比混匀。
3. 试管检测（线性范围：20-2000μg/ml ）1） 将0.1ml 样品与稀释好的标准品分别添加于试管中；2） 向各试管中加入2ml BCA 工作液，37℃水浴中孵育30min 或者RT 孵育2h （样品：BCA 工作液=1︰20）； 3） 37℃冷却至室温；4） 用分光光度计测定562nm 处的吸光值（若无562nm 滤光片可以选择接近波长的滤光片进行测定，比如560nm 或者570nm ）； 5） 绘制标准曲线，计算样品中的蛋白浓度；6） 如果所得到的蛋白浓度不在检测范围内，请重新稀释样品至BCA 线性范围内进行再次测定。
4. 微孔板检测 (线性范围：20-2000μg/ml)1） 将25μl 样品与稀释好的标准品分别添加于96孔板的微孔中； 2） 各孔中加入200μl BCA 工作液，充分混匀（样品：BCA 工作液=1︰8） 3） 盖上96孔板盖，37℃孵育30分钟或者室温孵育2h ； 4） 37℃孵育的样品需要冷却至室温；5） 用酶标仪测定562nm 处的吸光值（若无562nm 滤光片可以选择接近波长的滤光片进行测定，比如560nm 或者570nm ）； 6） 绘制标准曲线，计算样品中的蛋白浓度；7） 如果所得到的蛋白浓度不在检测范围内，请重新稀释样品至BCA 线性范围内进行再次测定。
BCA蛋白定量试剂盒(Thermo)使用指南
INSTRUCTIONSPierce® BCA Protein Assay Kit23225 Pierce BCA Protein Assay Kit, sufficient reagents for 500 test-tube or 5000 microplate assays 23227 Pierce BCA Protein Assay Kit, sufficient reagents for 250 test-tube or 2500 microplate assays Kit Contents:BCA Reagent A, 1000mL (in Product No. 23225) or 500mL (in Product No. 23227), containingsodium carbonate, sodium bicarbonate, bicinchoninic acid and sodium tartrate in 0.1M sodiumhydroxideBCA Reagent B, 25mL, containing 4% cupric sulfateAlbumin Standard Ampules, 2mg/mL, 10 × 1mL ampules, containing bovine serum albumin (BSA)at 2mg/mL in 0.9% saline and 0.05% sodium azideStorage: Upon receipt store at room temperature. Product shipped at ambient temperature.Note: If either Reagent A or Reagent B precipitates upon shipping in cold weather or during long-termstorage, dissolve precipitates by gently warming and stirring solution. Discard any kit reagent thatshows discoloration or evidence of microbial contamination.Table of ContentsIntroduction (1)Preparation of Standards and Working Reagent (required for both assay procedures) (2)Test Tube Procedure (Sample to WR ratio = 1:20) (3)Microplate Procedure (Sample to WR ratio = 1:8) (3)Troubleshooting (4)Related Thermo Scientific Products (5)Additional Information (5)References (6)IntroductionThe Thermo Scientific Pierce BCA Protein Assay is a detergent-compatible formulation based on bicinchoninic acid (BCA) for the colorimetric detection and quantitation of total protein. This method combines the well-known reduction of Cu+2 to Cu+1 by protein in an alkaline medium (the biuret reaction) with the highly sensitive and selective colorimetric detection of the cuprous cation (Cu+1) using a unique reagent containing bicinchoninic acid.1 The purple-colored reaction product of this assay is formed by the chelation of two molecules of BCA with one cuprous ion. This water-soluble complex exhibits a strong absorbance at 562nm that is nearly linear with increasing protein concentrations over a broad working range (20-2000µg/mL). The BCA method is not a true end-point method; that is, the final color continues to develop. However, following incubation, the rate of continued color development is sufficiently slow to allow large numbers of samples to be assayed together.The macromolecular structure of protein, the number of peptide bonds and the presence of four particular amino acids (cysteine, cystine, tryptophan and tyrosine) are reported to be responsible for color formation with BCA.2 Studies with di-, tri- and tetrapeptides suggest that the extent of color formation caused by more than the mere sum of individual color-producing functional groups.2 Accordingly, protein concentrations generally are determined and reported with reference to standards of a common protein such as bovine serum albumin (BSA). A series of dilutions of known concentration are prepared from the protein and assayed alongside the unknown(s) before the concentration of each unknown is determined based on the standard curve. If precise quantitation of an unknown protein is required, it is advisable to select a proteinstandard that is similar in quality to the unknown; for example, a bovine gamma globulin (BGG) standard (see Related Thermo Scientific Products) may be used when assaying immunoglobulin samples.Two assay procedures are presented. Of these, the Test Tube Procedure requires a larger volume (0.1mL) of protein sample; however, because it uses a sample to working reagent ratio of 1:20 (v/v), the effect of interfering substances is minimized. The Microplate Procedure affords the sample handling ease of a microplate and requires a smaller volume (10-25µL) of protein sample; however, because the sample to working reagent ratio is 1:8 (v/v), it offers less flexibility in overcoming interfering substance concentrations and obtaining low levels of detection.Preparation of Standards and Working Reagent (required for both assay procedures) A.Preparation of Diluted Albumin (BSA) StandardsUse Table 1 as a guide to prepare a set of protein standards. Dilute the contents of one Albumin Standard (BSA) ampule into several clean vials, preferably using the same diluent as the sample(s). Each 1mL ampule of 2mg/mL Albumin Standard is sufficient to prepare a set of diluted standards for either working range suggested in Table 1. There will be sufficient volume for three replications of each diluted standard.Table 1. Preparation of Diluted Albumin (BSA) StandardsVial Volume of Diluent(µL)Volume and Source of BSA(µL)Final BSA Concentration(µg/mL)A 0 300 of Stock 2000B 125 375 of Stock 1500C 325 325 of Stock 1000D 175 175 of vial B dilution 750E 325 325 of vial C dilution 500F 325 325 of vial E dilution 250G 325 325 of vial F dilution 125H 400 100 of vial G dilution 25I 400 0 0 = BlankVial Volume of Diluent(µL)Volume and Source of BSA(µL)Final BSA Concentration(µg/mL)A 700 100 of Stock 250B 400 400 of vial A dilution 125C 450 300 of vial B dilution 50D 400 400 of vial C dilution 25E 400 100 of vial D dilution 5F 400 0 0 = BlankB.Preparation of the BCA Working Reagent (WR)e the following formula to determine the total volume of WR required:(# standards + # unknowns) × (# replicates) × (volume of WR per sample) = total volume WR required Example: for the standard test-tube procedure with 3 unknowns and 2 replicates of each sample:(9 standards + 3 unknowns) × (2 replicates) × (2mL) = 48mL WR requiredNote: 2.0mL of the WR is required for each sample in the test-tube procedure, while only 200 µl of WR reagent is required for each sample in the microplate procedure.2.Prepare WR by mixing 50 parts of BCA Reagent A with 1 part of BCA Reagent B (50:1, Reagent A:B). For the aboveexample, combine 50mL of Reagent A with 1mL of Reagent B.Note: When Reagent B is first added to Reagent A, turbidity is observed that quickly disappears upon mixing to yield a clear, green WR. Prepare sufficient volume of WR based on the number of samples to be assayed. The WR is stable for several days when stored in a closed container at room temperature (RT).Procedure Summary (Test-tube Procedure, Standard Protocol)Test-tube Procedure (Sample to WR ratio = 1:20)1.Pipette 0.1mL of each standard and unknown sample replicate into an appropriately labeled test tube.2.Add 2.0mL of the WR to each tube and mix well.3.Cover and incubate tubes at selected temperature and time:•Standard Protocol: 37°C for 30 minutes (working range = 20-2000µg/mL)•RT Protocol: RT for 2 hours (working range = 20-2000µg/mL)•Enhanced Protocol: 60°C for 30 minutes (working range = 5-250µg/mL)Notes:•Increasing the incubation time or temperature increases the net 562nm absorbance for each test and decreases both the minimum detection level of the reagent and the working range of the protocol.•Use a water bath to heat tubes for either Standard (37°C incubation) or Enhanced (60°C incubation) Protocol. Usinga forced-air incubator can introduce significant error in color development because of uneven heat transfer.4.Cool all tubes to RT.5.With the spectrophotometer set to 562nm, zero the instrument on a cuvette filled only with water. Subsequently, measurethe absorbance of all the samples within 10 minutes.Note: Because the BCA assay does not reach a true end point, color development will continue even after cooling to RT.However, because the rate of color development is low at RT, no significant error will be introduced if the 562nm absorbance measurements of all tubes are made within 10 minutes of each other.6.Subtract the average 562nm absorbance measurement of the Blank standard replicates from the 562nm absorbancemeasurement of all other individual standard and unknown sample replicates.7.Prepare a standard curve by plotting the average Blank-corrected 562nm measurement for each BSA standard vs. itsconcentration in µg/mL. Use the standard curve to determine the protein concentration of each unknown sample. Microplate Procedure (Sample to WR ratio = 1:8)1.Pipette 25µL of each standard or unknown sample replicate into a microplate well (working range = 20-2000µg/mL).Note: If sample size is limited, 10µL of each unknown sample and standard can be used (sample to WR ratio = 1:20).However, the working range of the assay in this case will be limited to 125-2000µg/mL.2.Add 200µL of the WR to each well and mix plate thoroughly on a plate shaker for 30 seconds.3.Cover plate and incubate at 37°C for 30 minutes.4.Cool plate to RT. Measure the absorbance at or near 562nm on a plate reader.Notes:•Wavelengths from 540-590nm have been used successfully with this method.•Because plate readers use a shorter light path length than cuvette spectrophotometers, the Microplate Procedure requires a greater sample to WR ratio to obtain the same sensitivity as the standard Test Tube Procedure. If higher 562nm measurements are desired, increase the incubation time to 2 hours.•Increasing the incubation time or ratio of sample volume to WR increases the net 562nm measurement for each well and lowers both the minimum detection level of the reagent and the working range of the assay. As long as allstandards and unknowns are treated identically, such modifications may be useful.5.Subtract the average 562nm absorbance measurement of the Blank standard replicates from the 562nm measurements ofall other individual standard and unknown sample replicates.6.Prepare a standard curve by plotting the average Blank-corrected 562nm measurement for each BSA standard vs. itsconcentration in µg/mL. Use the standard curve to determine the protein concentration of each unknown sample.Note: If using curve-fitting algorithms associated with a microplate reader, a four-parameter (quadratic) or best-fit curve will provide more accurate results than a purely linear fit. If plotting results by hand, a point-to-point curve is preferable to a linear fit to the standard points.A.Interfering substancesCertain substances are known to interfere with the BCA assay including those with reducing potential, chelating agents, and strong acids or bases. Because they are known to interfere with protein estimation at even minute concentrations, avoid the following substances as components of the sample buffer:Ascorbic Acid EGTA Iron Impure SucroseCatecholamines Impure Glycerol Lipids TryptophanCreatinine Hydrogen Peroxide Melibiose TyrosineCysteine Hydrazides Phenol Red Uric AcidOther substances interfere to a lesser extent with protein estimation using the BCA assay, and these have only minor (tolerable) effects below a certain concentration in the original sample. Maximum compatible concentrations for many substances in the Standard Test Tube Protocol are listed in Table 2 (see last page of Instructions). Substances were compatible at the indicated concentration in the Standard Test Tube Protocol if the error in protein concentration estimation caused by the presence of the substance was less than or equal to 10%. The substances were tested using WR prepared immediately before each experiment. Blank-corrected 562nm absorbance measurements (for a 1000µg/mL BSA standard + substance) were compared to the net 562nm measurements of the same standard prepared in 0.9% saline. Maximum compatible concentrations will be lower In the Microplate Procedure where the sample to WR ratio is 1:8 (v/v). Furthermore, it is possible to have a substance additive affect such that even though a single component is present at a concentration below its listed compatibility, a sample buffer containing a combination of substances could interfere with the assay.B.Strategies for eliminating or minimizing the effects of interfering substancesThe effects of interfering substances in the Pierce BCA Protein Assay may be eliminated or overcome by one of several methods. •Remove the interfering substance by dialysis or gel filtration.•Dilute the sample until the substance no longer interferes. This strategy is effective only if the starting protein concentration is sufficient to remain in the working range of the assay upon dilution.•Precipitate the proteins in the sample with acetone or trichloroacetic acid (TCA). The liquid containing the substance that interfered is discarded and the protein pellet is easily solubilized in ultrapure water or directly in the alkaline BCA WR.4A protocol detailing this procedure is available from our website. Alternatively, Product No. 23215 may be used (seeRelated Pierce Products).•Increase the amount of copper in the WR (prepare WR as 50:2 or 50:3, Reagent A:B), which may eliminate interference by copper-chelating agents.Note: For greatest accuracy, the protein standards must be treated identically to the sample(s).Related Thermo Scientific Products15041 Pierce 96-Well Plates, 100/pkg.15075 Reagent Reservoirs, 200/pkg.15036 Sealing Tape for 96-Well Plates, 100/pkg.23209 Albumin Standard Ampules, 2mg/mL, 10 × 1mL ampules, containing bovine serum albumin (BSA) 23208 Pre-Diluted Protein Assay Standards: Bovine Serum Albumin (BSA) Set, 7 × 3.5mL23212 Bovine Gamma Globulin Standard, 2mg/mL, 10 × 1mL ampules23213 Pre-Diluted Protein Assay Standards, (BGG) Set, 7 × 3.5mL aliquots23235 Pierce Micro BCA Protein Assay Kit, working range of 0.5-20µg/mL23236 Coomassie Plus (Bradford) Assay Kit, working range of 1-1500µg/mL23215 Compat-Able™ Protein Assay Preparation Reagent Set23250Pierce BCA Protein Assay Kit−Reducing Agent CompatibleAdditional InformationA.Please visit our website for additional information including the following items:•Frequently Asked Questions•Tech Tip protocol: Eliminate interfering substances from samples for BCA Protein AssayB.Alternative Total Protein Assay ReagentsIf interference by a reducing substance or metal-chelating substance contained in the sample cannot be overcome, try the Thermo Scientific Coomassie Plus (Bradford) Assay Kit (Product No. 23236), which is less sensitive to such substances.C.Cleaning and Re-using GlasswareExercise care when re-using glassware. All glassware must be cleaned and given a thorough final rinse with ultrapure water.D.Response characteristics for different proteinsEach of the commonly used total protein assay methods exhibits some degree of varying response toward different proteins. These differences relate to amino acid sequence, pI, structure and the presence of certain side chains or prosthetic groups that can dramatically alter the protein’s color response. Most protein assay methods use BSA or immunoglobulin (IgG) as the standard against which the concentration of protein in the sample is determined (Figure 1). However, if great accuracy is required, prepare the standard curve from a pure sample of the target protein.Typical protein-to-protein variation in color response is listed in Table 3. All proteins were tested at 1000µg/mL using the 30-minute/37°C Test Tube Protocol. The average net color response for BSA was normalized to 1.00 and the average net color response of the other proteins is expressed as a ratio to the response of BSA.Figure 1: Typical color response curves for BSA and BGG using the Standard Test Tube Protocol (37°C/30-minute incubation). Table 3. Protein-to-protein variation. Absorbance ratios (562nm) for proteins relative to BSA using Protein Tested Ratio Albumin, bovine serum 1.00 Aldolase, rabbit muscle 0.85 α-Chymotrypsinogen, bovine 1.14 Cytochrome C, horse heart 0.83 Gamma globulin, bovine1.11 IgG, bovine 1.21 IgG, human 1.09 IgG, mouse 1.18 IgG, rabbit 1.12 IgG, sheep1.17 Insulin, bovine pancreas 1.08 Myoglobin, horse heart0.74 Ovalbumin 0.93 Transferrin, human 0.891.02 Standard Deviation 0.15Coefficient of Variation14.7%Cited References1. Smith, P.K., et al. (1985). Measurement of protein using bicinchoninic acid. Anal. Biochem . 150:76-85.2. Wiechelman, K., et al. (1988). Investigation of the bicinchoninic acid protein assay: Identification of the groups responsible for color formation. Anal Biochem . 175:231-7.3. Kessler, R. and Fanestil, D. (1986). Interference by lipids in the determination of protein using bicinchoninic acid. Anal. Biochem . 159:138-42.4.Brown, R., et al. (1989). Protein measurement using bicinchoninic acid: elimination of interfering substances. Anal. Biochem . 180:136-9.Product ReferencesAdilakshami, T. and Laine, R.O. (2002). Ribosomal protein S25 mRNA partners with MTF-1 and La to provide a p53-mediated mechanism for survival ordeath. J. Biol. Chem. 277:4147-51.Fischer, T., et al. (1999). Clathrin-coated vesicles bearing GAIP possess GTPase-activating protein activity in vitro. Proc. Nat. Acad. Sci. 96:6722-7. Prozialeck, W.C., et al. (2002). Chlamydia trachomatis disrupts N-cadherin-dependent cell-cell junctions and sequester β-catenin in human cervicalepithelial cells. Infection and Immunity 70:2605-13.Roberts, K.P., et al. (2002). A comparative analysis of expression and processing of the rat epididymal fluid and sperm-bound forms of proteins D and E.Biology of Reproduction 67:525-33.Triton ® is a registered trademark of Rohm & Haas Co.Brij ®, Tween ® and Span ® are registered trademarks of ICI Americas. Zwittergent ® is a registered trademark of American Hoechst Corporation.This product (“Product”) is warranted to operate or perform substantially in conformance with published Product specifications in effect at the time of sale, as set forth in the Product documentation, specifications and/or accompanying package inserts (“Documentation”) and to be free from defects in material and workmanship. Unless otherwise expressly authorized in writing, Products are supplied for research use only. No claim of suitability for use in applications regulated by FDA is made. The warranty provided herein is valid only when used by properly trained individuals. Unless otherwise stated in the Documentation, this warranty is limited to one year from date of shipment when the Product is subjected to normal, proper and intended usage. This warranty does not extend to anyone other than the original purchaser of the Product (“Buyer”).No other warranties, express or implied, are granted, including without limitation, implied warranties of merchantability, fitness for any particular purpose, or non infringement. Buyer’s exclusive remedy for non-conforming Products during the warranty period is limited to replacement of or refund for the non-conforming Product(s).There is no obligation to replace Products as the result of (i) accident, disaster or event of force majeure, (ii) misuse, fault or negligence of or by Buyer, (iii) use of the Products in a manner for which they were not designed, or (iv) improper storage and handling of the Products.Current product instructions are available at /pierce . For a faxed copy, call 800-874-3723 or contact your local distributor. © 2011 Thermo Fisher Scientific Inc. All rights reserved. Unless otherwise indicated, all trademarks are property of Thermo Fisher Scientific Inc. and its subsidiaries. Printed in the USA.Table 2. Compatible substance concentrations in the BCA Protein Assay (see text for details).§* Diluted with ultrapure water.** Detergents were tested using high-purity Thremo Scientific Surfact-Amps Products, which have low peroxide content.-- Dashed-line entry indicates that the material is incompatible with the assay.§ For a more extensive list of substances, download Tech Tip # 68: Protein Assay Compatibility Table from our website. This Tech Tip includes compatible substances for all of our protein assays and enables easy comparisons.。
BCA 蛋白定量中文说明thermo
说明书Pierce®BCA Protein Assay Kit（Pierce® BCA 蛋白定量分析试剂盒）NCI3225CH NCI3227CH2436.0目录号描述NCI3225CH Pierce BCA Protein Assay Kit（Pierce BCA 蛋白定量分析试剂盒），试剂可用于500 次试管或5000 次微孔板分析NCI3227CH Pierce BCA Protein Assay Kit（Pierce BCA 蛋白定量分析试剂盒），试剂可用于250 次试管或2500 次微孔板分析试剂盒组分：BCA 试剂A，1000mL（产品目录号NCI3225CH）或500mL（产品目录号NCI3225CH)。
含有溶解于0.1M 氢氧化钠中的碳酸钠、碳酸氢钠、二喹啉甲酸（BCA）以及酒石酸钠。
BCA 试剂B，25mL，含有4%的硫酸铜白蛋白标准品，2mg/mL，10 1mL 安瓿，包含浓度为2mg/mL 的牛血清白蛋白（BSA）和0.05%的叠氮化钠，溶解于0.9%生理盐水中。
储存：在收到试剂盒后将其储存于室温。
常温运输。
注：如果在寒冷天气进行运输，或在保存期间，试剂A 或试剂B 发生沉淀，可通过对溶液进行温和加热和搅拌，将沉淀溶解。
当试剂盒发生变色，或证明有微生物污染时，请将试剂丢弃。
目录产品简介 (2)标准品和工作液的制备（两种检测方案均适用） (3)试管检测方案（样品与工作液的比例=1:20） (4)微孔板检测方案（样品与工作液的比例=1:8） (6)常见问题及解决方案 (7)Thermo Scientific 相关产品 (8)附加信息 (9)参考文献 (11)产品简介Thermo Scientific Pierce BCA 蛋白定量分析试剂盒是一种基于二喹啉甲酸（BCA），利用比色法测定总蛋白浓度的蛋白定量试剂盒，可与去污剂兼容。
本方法将双缩脲反应和显色反应结合在一起：前者为在碱性介质中，蛋白质可将Cu2+还原成Cu1+ 的反应，后者为使用含有二喹啉甲酸（BCA）1 的独特试剂，利用比色法检测Cu1+，具有高灵敏度和高选择性的特点。
BCA蛋白质检测试剂
BCA Protein AssayBCA 蛋白质定量货号Cat ： 包装规格 微孔检测 WB051试剂A 25 ml 试剂B 1.0 ml BSA （1mg/ml ） 5ml125次WB052试剂A 100ml 试剂B 2.5 ml BSA （1mg/ml ） 25ml500次贮存：蛋白标准-20℃保存（其他4℃，有效期一年）。
产品特点：1.准确灵敏：BCA 试剂的蛋白质测定范围是20－2000μg/ml,采用加强方法可检测到5μg/ml。
2.快速：45分钟内完成测定。
3.可在微孔板中进行。
4.相对于其他方法干扰因素较少。
5.不同蛋白质分子的变异系数远小于Bradford。
6.不受低浓度的EDTA、EGTA、DTT、硫酸铵、脂类的干扰7.标准曲线接近直线，可以单点定标。
注意：1.在低温条件或长期保存出现沉淀时，可搅拌或37℃温育使溶解, 如发现细菌污染则应丢弃。
2.高浓度EDTA、EGTA、DTT、硫酸铵、脂类会影响检测结果，改用Bradford 法测定。
3. 试剂A 与试剂B 用应密闭保存。
操作步骤：1. 配制工作液: 根据标准品和样品数量，试剂A 与试剂B 按50:1配制适量BCA工作液，充分混匀。
BCA 工作液室温24小时内稳定。
2. 标准曲线制备与操作。
编号 1 2 3 4 5 6 去离子水µl 107.5 5 2.5 0 蛋白标准µl 0 2.5 5 7.5 10 样品µl10 BCA工作液µl200200200 200200200混匀，37℃放置30分钟，冷却到室温，测定A562的吸光度（540-595nm之间也可接受），根据标准曲线计算出蛋白浓度注：样品和试剂比可以按比例放大或缩小。
微孔检测时，可以按比例缩小，但总体积不小于100ul 。
附表：以下是不干扰本方法测定的物质浓度：注意：试剂有腐蚀性，如接触皮肤眼睛等，请用大量水清洗，或就医。
特种设备质量手册word版
《特种设备安装、改造、维修质量保证手册》批准发布令我公司的《特种设备安装、改造、维修质量保证手册》是依据TSG Z0004-2007《特种设备制造、安装、改造、维修质量保证体系基本要求》、《特种设备安全监察条例》、国质检锅［2003］174号文发布的《机电类特种设备制造许可规则（试行）》、国质检锅［2003］251号文发布的《机电类特种设备安装改造维修许可规则（试行）》及有关安全技术法规和机电类特种设备有关标准规程编制的，它是阐明本企业特种设备质量方针并描述质量体系的文件，是企业机电类特种设备质量管理的纲领性文件，也是向顾客提供机电类特种设备质量保证的依据。
本手册于2011年01月01日发布并正式实施，并委托质量保证工程师全权组织本手册的贯彻执行，机电类特种设备质量保证体系相关的部门及人员，必须遵照执行。
本手册的支持性文件-----特种设备质量保证手册程序文件（管理制度），工艺守则，授权总工程师批准发布，一并实施。
法人代表：批准日期：2011年01月01日郑州铁路装备制造有限公司任命书（第28号）为贯彻执行TSG Z0004-2007《特种设备安装、改造、维修质量保证体系基本要求》加强对质量管理体系运作的领导，特任命：张军伟同志为郑州铁路装备制造有限公司质量保证工程师兼任技术负责人。
同时任命各相关质量控制系统的责任人如下：李杰同志为郑州铁路装备制造有限公司材料质控责任师；尹建丽同志为郑州铁路装备制造有限公司工艺质控责任师；马裕海同志为郑州铁路装备制造有限公司质量检验负责人；范建伟同志为郑州铁路装备制造有限公司安装调试质控责任师；刘富军同志为郑州铁路装备制造有限公司最终检验质控责任师；总经理：2011年1月15日目录《特种设备质量保证手册》批准发布令-------------------------------------------------------------1人员授权和任命书---------------------------------------------------------------------------------------2目录---------------------------------------------------------------------------------------------------------4前言---------------------------------------------------------------------------------------------------------51 引用或采用的法规标准-----------------------------------------------------------------------------62 术语、定义和缩写-----------------------------------------------------------------------------------73 质量方针及质量目标--------------------------------------------------------------------------------94 管理职责---------------------------------------------------------------------------------------------105 质量体系-----------------------------------------------------------------------------------------------196 文件和资料控制--------------------------------------------------------------------------------------207 合同控制-----------------------------------------------------------------------------------------------208 设计控制-----------------------------------------------------------------------------------------------209 材料、零部件控制-----------------------------------------------------------------------------------2110 工艺控制-----------------------------------------------------------------------------------------------2111 焊接控制-----------------------------------------------------------------------------------------------2112 热处理控制--------------------------------------------------------------------------------------------2213 无损检测质量控制-----------------------------------------------------------------------------------2214 检验与试验控制--------------------------------------------------------------------------------------2315 设备和检验试验装置控制--------------------------------------------------------------------------2316 不合格品控制-----------------------------------------------------------------------------------------2317 质量改进和服务--------------------------------------------------------------------------------------2318 人员培训-----------------------------------------------------------------------------------------------2419 整机安装调试-----------------------------------------------------------------------------------------2420 管理评审-----------------------------------------------------------------------------------------------2521 执行中国特种设备许可制度的规定--------------------------------------------------------------26前言企业概况：郑州铁路装备制造有限公司成立于2010年5月，是按照郑州铁路局资源整合、优势互补的工业改革思路，吸收合并郑州铁路局装卸机械厂、郑州铁路局工务机械厂、郑州铁路局机车车辆配件厂、郑州铁路物泰玻璃有限公司四个创建于50、60年代的既有老工业企业，整合场地、设备、人才优势资源，承继30余项生产资质、20多项专利技术而成的现代化工业制造企业。
BCA法蛋白测定试剂盒（BCA）英文说明书
BCA Protein Assay Reagent(bicinchoninic acid)The Thermo Scientific Pierce BCA Protein Assay Kit remains one of the most popular protein quantization methods worldwide.Used in more labs than any other detergent-compatible protein assay, Pierce BCA Reagents provide accurate determination of protein concentration with most sample types encountered in protein research. The Pierce BCA Assay can be used to assess yields in whole cell lysates and affinity-column fractions, as well as to monitor protein contamination in industrial applications. Compared to most dye-binding methods, the BCA Assay is affected much less by protein compositional differences, providing greater protein-to-protein uniformity.Highlights:∙Colorimetric– estimate visually or measure with a standard spectrophotometer or plate reader (562nm)∙Excellent uniformity– exhibits less protein-to-protein variation than dye-binding methods∙Compatible– unaffected by typical concentrations of most ionic and nonionic detergents∙Moderately fast– much easier and four times faster than the classical Lowry method∙High linearity– linear working range for BSA equals 20 to 2000µg/mL∙Sensitive– detect down to 5µg/mL with the enhanced protocolBCA Protein Assay Applications:∙Studying protein:protein interactions∙Measuring column fractions after affinity chromatography∙Estimating percent recovery of membrane proteins from cell extractsHigh-throughput screening of fusion proteinsStandard curves. Typical standard curves for bovine serum albumin(BSA) and bovine gamma globulin (BGG) in the BCA Protein Assay.Kits include ampules of Albumin Standard.How the BCA Protein Assay Detects Protein:The BCA Protein Assay combines the well-known reduction of Cu2+ to Cu1+ by protein in an alkaline medium with the highly sensitive and selective colorimetric detection of the cuprous cation (Cu1+) by bicinchoninic acid. The first step is the chelation of copper with protein in an alkaline environment to form a light blue complex. In this reaction, known as the biuret reaction, peptides containing three or more amino acid residues form a colored chelate complex with cupric ions in an alkaline environment containing sodium potassium tartrate.In the second step of the color development reaction, bicinchoninic acid (BCA) reacts with the reduced (cuprous) cation that was formed in step one. The intense purple-colored reaction product results from the chelation of two molecules of BCA with one cuprous ion. The BCA/copper complex is water-soluble and exhibits a strong linear absorbance at 562 nm with increasing protein concentrations. The BCA reagent is approximately 100 times more sensitive (lower limit of detection) than the pale blue color of the first reaction.The reaction that leads to BCA color formation is strongly influenced by four amino acid residues (cysteine or cystine, tyrosine, and tryptophan) in the amino acid sequence of the protein. However, unlike the Coomassie dye-binding methods, the universal peptide backbone also contributes to color formation, helping to minimize variability caused by protein compositional differences.For more information, see the article "Chemistry of Protein Assays" in the Protein Methods Library.References:o Smith, P.K., et al. (1985). Anal. Biochem.150, 76-85.o Sorensen, K. (1992). BioTechniques12(2), 235-236.o Ju, T., et. al. (2002). J. Biol. Chem.277, 178-186.o Shibuya, T., et. al. (1989). Tokyo Ika Daigaku Zasshi47(4), 677-682.o Hinson, D.L. and Webber, R.J. (1988). BioTechniques6(1), 14, 16, 19.o Akins, R.E. and Tuan, R.S. (1992). BioTechniques12(4), 496-7, 499.o Tylianakis, P.E., et. al.(1994). Anal. Biochem.219(2), 335-340.o Gates, R.E. (1991). Anal. Biochem.196(2), 290-295.o Stich, T.M. (1990). Anal. Biochem.191, 343-346.o Tuszynski, G.P. and Murphy, A. (1990). Anal. Biochem.184(1), 189-191.。
碧云天BCA Kit manual
14.Wang Yichao, Zou Quanming, Ren Jianmin, Liu Jian,Wang Xiaoqin. Preparation and character of microspheres of Helicobacter pylori whole cell protein encapsulated by chitosan - alginate. West China Journal of Pharmaceutical Sciences. 2005,20(5):375-7.
2. Wu RC, Chen DF, Liu MJ, Wang Z. Dual effects of cycloheximide on U937 apoptosis induced by its combination with VP-16. Biol Pharm Bull. 2004 Jul;27(7):1075-80.
3. 根据样品数量，按50体积BCA试剂A加1体积BCA试剂B(50:1)配制适量BCA工作液，充分混匀。例如5ml BCA试剂A加 100µlBCA试剂B，混匀，配制成5.1ml BCA工作液。 BCA工作液室温24小时内稳定。
4. 将标准品按0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20µl加到96孔板的标准品孔中，加标准品稀释液补足到20µl。 5. 加适当体积样品到96孔板的样品孔中，加标准品稀释液到20µl。 6. 各孔加入200µl BCA工作液，37℃放置20-30分钟。
(质量管理手册)质量手册第版第次修订
（质量管理手册）质量手册第版第次修订GSCLAB/SC-2015 质量手册依据：CNAS—CL01《检测和校准实验室能力认可准则》受控标识：Control Indentification:版次编号：A/2Doc. No.：文件编号：GSCLAB/SC-2015File NO.:分发编号：05Attn. No.起草：徐广岁Prepared by审核：张剑平Reviewed by确认：李继伟Validated by批准：眭世荣Approved by发布日期：2015年04月01日 2016年01月11日第2次修订实施日期：2016年01月12日广东蚂标检测技术有限公司 发布01 发 布 令广东蚂标检测技术有限公司（以下简称“蚂标检测实验室”）为使检测工作满足客户、法定管理机构、认可组织的要求，保证检测工作质量，根据CNAS-CL01《检测和校准实验室能力认可准则》、CNAS-CL52:2014《CNAS-CL01《检测和校准实验室能力认可准则》应用要求》和CNAS-CL11《检测和校准实验室能力认可准则在电气检测领域的应用说明》，编制了本实验室《质量手册》。
本手册描述了本实验室管理体系，包括本实验室质量方针、质量目标和管理体系所包括的过程顺序及相互作用。
实施日期： Implement date ：2016年01月12日01发布令版 次第A 版 第1次修订实施日期2015年8月2日本实验室发布的与质量有关的程序和规定必须符合《质量手册》的要求，全体员工应严格遵守《质量手册》，保证检测结果的公正性、科学性和准确性。
本手册已经审定，现予以颁布，自2015年08月02日起实施。
批 准： 日 期：02 目录封面……………………………………………………………………………………………………………………第1页 01发布令………………………………………………………………………………………………………………第2页 02目 录………………………………………………………………………………………………………………第3页 03修订页………………………………………………………………………………………………………………第5页 04实验室简介…………………………………………………………………………………………………………第6页 05公正性声明…………………………………………………………………………………………………………第7页 1.质量手册说明………………………………………………………………………………………………………第8页 2.质量手册管理………………………………………………………………………………………………………第10页 3.质量方针与目标……………………………………………………………………………………………………第13页 4.管理要求4.1组织..............................................................................................................................第16页 4.2管理体系..................................................................................................................... 第25页 4.3文件控制..................................................................................................................... 第28页 4.4要求、标书和合同的评审 (30)02目录版 次 第A 版 第1次修订 实施日期2015年08月02日4.5检测工作分包 (32)4.6服务和供应品的采购 (34)4.7服务客户 (35)4.8投诉 (36)4.9不符合检测工作的控制 (37)4.10改进 (38)4.11纠正措施 (40)4.12预防措施 (41)4.13记录控制 (42)4.14内部管理体系审核 (43)4.15管理评审 (45)5.技术要求5.1总则 (48)5.2人员 (49)5.3设施和环境条件 (51)5.4检测方法及方法的确认 (53)5.5设备 (55)5.6测量溯源性 (57)5.7抽样 (59)5.8检测物品的处置 (60)5.9检测结果质量的保证 (61)5.10结果报告 (63)质量手册附件附件1 程序文件目录 (66)附件2 本实验室内部组织结构图 (67)附件3 外部组织结构图 (68)附件4 授权人签字情况表...................................................................................................... 第69页 附件5 管理体系运行图......................................................................................................... 第70页 附件6 关键岗位人员任命书................................................................................................... 第71页 附件7 关键管理人员委托人一览表.......................................................................................... 第72页 附件8 检测能力表............................................................................................................... 第73页 附件9 人员情况一览表......................................................................................................... 第75页 附件10 管理体系职责分配表................................................................................................... 第76页 附件11 检测实验室平面图............................................................................................. ...... 第77页 附件12 量值溯源图 ................................................................................................... ...... 第78页 附件13 检测仪器设备一览表....................................................................................... (79)03 修订页03修订页版 次 第A 版 第2次修订 实施日期2016年01月12日序号章节号页码修订次数版号修订内容修订人批准人日期修改前修改后1 / / / A/0 A/1 实验室注册为独立法人，质量手册中出现“广东标准光组件重点实验室”处，均更改为“广东蚂标检测技术有限公司”徐广岁李继伟2015-08-022 01 2 1 A/0 A/1 实施日期由2015年4月1日修改为2015年8月2日徐广岁李继伟2015-08-023 04 6 1 A/0 A/1 实验室简介更改徐广岁李继伟2015-08-024 5.2.4.3 49 2 A/1 A/2 增加CL11:2015要求徐广岁李继伟2016-01-115 5.3.4.0 51 2 A/1 A/2 增加CL11:2015要求徐广岁李继伟2016-01-116 5.3.4.1 52 2 A/1 A/2 增加CL11:2015要求徐广岁李继伟2016-01-117 5.4.4.6 55 2 A/1 A/2 增加CL11:2015要求徐广岁李继伟2016-01-118 5.4.4.7.255 2 A/1 A/2 增加CL11:2015要求徐广岁李继伟2016-01-119 5.8.4.2 61 2 A/1 A/2 增加CL11:2015要求徐广岁李继伟2016-01-111 5.9.4.1 62 2 A/1 A/2 增加CL11:2015要求徐广岁李继伟2016-01-104 实验室简介广东蚂标检测技术有限公司成立于2015年7月，其前身为佛山市南海区联合广东新光源产业创新中心（以下称创新中心）标准光组件实验室。
医疗器械质量手册(最新)
章节号 标题
章节号：0.1
版本：A 第 1页 修改次数0 共 1 页
GB/T19001和YY/T0287
对应的标准条款 0.1 目录 0.2 《质量手册》颁布令 0.3 质量方针发布令 0.4 公司概况 0.5 任命书 0.6 《质量手册》说明 0.7 《质量手册》修改控制 1.0 公司组织机构图 2.0 质量管理体系结构图 3.0 质量管理体系过程职能分配表 4.0 质量管理体系 4.1 文件控制程序 4.2 质量记录控制程序 5.0 管理职责 5.1 质量方针 5.2 管理策划控制程序 5.3 职责和权限与沟通 5.4 管理评审控制程序 6.0 资源管理 6.1 人力资源控制程序 6.2 设施控制程序 6.3 工作环境控制程序 7.0 产品实现 7.1(1) 产品实现的策划程序 7.1(2) 风险管理程序 7.2 与顾客有关的过程控制程序 7.3 （删减） 7.4(1) 采购控制程序
附录一：
进货检验控制程序 销售和服务提供控制程序 标识和可追溯性控制程序 仓储管理控制程序 监视和测量装置的控制程序 测量、分析和改进 顾客反馈控制程序 内部审核程序 过程和产品的监视和测量控制程序 不合格品控制程序 数据分析控制程序 改进控制程序 忠告性通知发布和实施控制程序 质量跟踪和不良事件报告控制程序. 纠正和预防措施控制程序
总经理： 王华 2013年5月 10日
诸城市金润医疗器械有限 公司 质量方针和质量 目标
章节号：0.5
版本：A 修改次数0
第1页
共 1 页
质量方针：
依法经营、质量第一
质量目标： 医疗器械安全有效达到100%； 顾客满意率＞98%； 顾客投诉处理率100% 质量承诺: 满足医疗器械法规要求； 确保质量管理体系持续有效； 对顾客的投诉做到在24小时内回应。
BCA法蛋白含量测定试剂盒说明书
货号：MS3202 规格：100管/96样BCA法蛋白含量测定试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定，测定意义：样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。
此外，可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。
测定原理：碱性条件下，蛋白质中半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及肽键，能将Cu2+还原成Cu+；2分子的BCA与Cu+结合，生成紫色络合物，在540-595nm有吸收峰，562nm处吸收峰最强。
自备实验用品及仪器：台式离心机、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、移液器和蒸馏水。
试剂组成和配制：试剂A：液体20mL×1瓶，4℃保存。
试剂B：液体0.4mL×1支，4℃保存。
标准品：液体2mL×1支，4℃保存。
工作液配制：临用前请根据拟用工作液体积（样本数×0.2mL），将试剂A和B按照50：1 的比例混合，盖紧后充分混匀。
样品中可溶性蛋白质提取：1.液体样品：澄清液体样品可以直接测定。
2.组织样品：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液（自备，根据需要选用酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水）冰浴匀浆，10000rpm，4℃离心10min，取上清，即待测液。
3. 细菌、细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后10000rpm，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
测定操作：1. 可见分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长到562 nm，蒸馏水调零。
第1页，共2页计算公式：Cpr (mg/mL)= C标准品×（A测定管－A空白管）÷（A标准管－A空白管）=0.5×（A测定管－A空白管）÷（A标准管－A空白管）Cpr (mg/g 鲜重)= C标准品×（A测定管－A空白管）÷（A标准管－A空白管）÷ W =0.5×（A测定管－A空白管）÷（A标准管－A空白管）÷ WW: 样本质量，g注意事项：BCA法蛋白含量测定试剂盒，适用于测定蛋白浓度在20-5000μg/ml样品。
BCA-MA42-01-01质量手册
BCA-MA42-01-01质量手册Quality Manual质量手册文件编号：BCA-MA4.2-01-01版本：01编写：Bill Lin 日期：2009-03-20Tom Song 日期：2009-03-20Tom Song 日期：2009-03-20生效日期：2009-04-01宝马格（中国）工程机械有限公司颁布令公司贯彻实施ISO 9001:2008标准以证实公司有能力稳固地提供满足顾客和适用法律法规要求的产品。
通过质量治理体系的有效实施，包括连续改进质量治理体系的过程，以及保证符合顾客与适用的法律法规要求，从而增强顾客中意。
《质量手册》是公司质量治理体系的法规性文件，是指导公司建立、实施、保持、连续改进质量治理体系的纲领和行动准则。
今予以颁布实施，公司全体职员必须遵照执行。
公司总经理：宋功成2009 年3 月23 日0.1 目录0.2 公司简介BOMAG（宝马格）是一家世界领先、规模最大的压路机专业制造商，提供用于土壤、沥青和垃圾填埋场的压实设备以及稳固土路搅拌机和沥青路面现场冷再生气。
BOMAG于1957年成立于德国，至今已拥有2000名遍布世界各地的职员，19个产品大类，6个位于德国的分公司，8个海外分公司，1个位于新加坡的销售办事处以及500个遍布120个国家的销售代理商。
到2006年，BOMAG集团的销售额共达到6.5亿欧元。
BOMAG的压实机械可用于从场地、交通路面到水库的建设，同时也为不同规模的垃圾填埋以及用于修补已损坏的沥青路面和爱护道路稳固提供专用设备。
为配合压路机的作业，BOMAG公司开发研制了世界领先的许多智能化测量及治理系统，以操纵压实的作业过程和作业结果，为各种道路提供有效的爱护。
宝马格（中国）工程机械有限公司为BOMAG设在中国的子公司，负责在中国生产制造符合宝马格设计要求的压实机械。
BOMAG通过提供多元优质的产品组合及服务，持续满足了全球客户差异化的市场需求！宝马格(中国)全称：宝马格（中国）工程机械有限公司法人代表：Martin Ochotta公司地址：上海市工业综合开发区环城西路2808 号注册资本：14，500，000 RMB占地面积：43，000 M2经营范畴：压路机产品的制造和销售总经理：宋功成职员数：105 人（截至2009年3月）0.3 质量手册讲明本手册对宝马格（中国）工程机械有限公司的质量治理体系的范畴、有关职责权限和运作要求等做出了规定。
蛋白质含量测定法（BCA法）标准操作规程SOP
蛋白质含量测定法（BCA法）标准操作规程SOP蛋白质含量测定法（BCA法）标准操作规程文件编码：SOPXXXX目录1. 目的 (1)2. 范围 (1)3. 职责 (1)4. 依据 (1)5. 定义 (1)6. 内容 (1)6.1. 原理 (1)6.2. 实验材料 (1)6.3. 操作步骤 (2)6.4. 结果计算 (3)6.5. 判定标准 (4)6.6. 注意事项 (4)7. 相关文件 (5)8. 附件 (5)9. 变更历史 (5)1.目的1.1.规范蛋白质含量检测（BCA法）的操作过程。
2.范围2.1.本规程适用于BF02及其它适合于BCA法的样品（原液或成品）的蛋白质含量测定。
3.职责3.1.方法学研究员负责严格执行本规程规定；3.2.方法学研究室负责人负责本规程的培训并监督本规程的执行。
4.依据4.1.《中国药典》2015年版，通则0731“蛋白质含量测定法”，第四法2,2，-联喹啉-4,4，-二羧酸法（BCA法）5.定义5.1.BCA：2,2，-联喹啉-4,4，-二羧酸法5.2.BSA：牛血清白蛋白5.3.TCA：三氯乙酸5.4.EDTA：乙二胺四乙酸5.5.EGTA：乙二醇-双-(2-氨基乙醚)四乙酸5.6.DTT：二硫苏糖醇6.内容6.1.原理依据蛋白分子在碱性溶液中将Cu2+还原为Cu+，2,2，-联喹啉-4,4，-二羧酸（BCA）与Cu+结合形成紫色复合物，该复合物在562nm处有最大吸收值。
在一定浓度范围内，其溶液颜色深浅与蛋白质浓度呈正比，以蛋白质对照品溶液（BSA）作标准曲线，采用比色法测定供试品中蛋白质的含量。
6.2.实验材料6.2.1. 试药与试液6.2.1.1. 超纯水：电阻率不低于18.2MΩ·cm ，本方法所有试液均用超纯水配制。
6.2.1.2. 铜-BCA 试液：取2, 2'-联喹啉-4，4'-二羧酸钠l.0g ，无水碳酸钠2.0g ，酒石酸钠0. 16g ，氢氧化钠0. 4 g 与碳酸氢钠0.95g ，加水使溶解成100ml ，调节pH 值至11.25,作为甲液，甲液室温保存不超过6个月；另取4 % 硫酸铜溶液作为乙液，乙液室温保存不超过6个月，临用前取甲液、乙液，按体积比（甲液：乙液=50:1）进行混匀后使用。
42i氮氧化物分析仪 中文说明书
热电42i氮氧化物分析仪技术资料方法标准：ISO7996-1985方法名称：化学发光法山东美吉佳环境科技有限公司目录第一章简介（性能和工作原理）第二章使用说明书第三章设备保养维修操作规程一、仪器安装二、校准三、日常维护保养四、故障诊断和排除第一章简介产品性能42i 化学发光法分析仪结合检测技术，轻松利用菜单驱动软件和高级诊断提供了极其卓越的适应性和可靠性。
42i 分析仪具有以下的特征：·320*240液晶图像显示·菜单驱动软件·区域可定量程·用户自选单/双/自动量程模式·多重用户自定义模拟输出·模拟输入选择·高灵敏度·快速响应时间·全量程线性·独立NO-NO2-Nox量程·NO2 转化炉可替代选择·用户自选数字输入/输出容量·标准通讯特色包括RS232/485和以太网·C-Link, MODBUS协议,以及流动数据协议工作原理42?i 分析仪原理是基于一氧化氮(NO)与臭氧(O3)的化学发光反应产生激发态的NO2分子，当激发态的NO2分子返回基态时发出一定能量的光, 所发出光的强度于NO的浓度呈线性关系，42i分析仪就是利用检测光强来进行NO的检测, 其化学反应式如下:NO + O3── NO2 + O2+ h仪器在进行二氧化氮(NO2)的检测时必须先将NO2转换成NO，然后再通过化学发光反应进行检测。
NO2是通过钼转换器完成NO2到NO的转换. 其转换器的加热温度约为325℃（可选不锈钢转化器加热温度为625℃）。
如图1-1所示, 样品气通过标有SAMPLE的进气口被抽入42i分析仪，然后样气经颗粒物过滤器过滤，到达一电磁阀，由该电磁阀选择样气的路径是直接到达反应室(测NO方式)，还是先经过NO2到NO转换器后再进入反应室(测NO X 方式)。
在反应室前装有限流毛细管和流量传感器, 以控制和测量样气的流量。
BCA蛋白浓度测定试剂盒完整版
1•总共需要的WR的体积可以通过以下公式计算出来：
（标准液+未知液）X（平行数目）X（每个样品中加入的WR体积）=总共所需 的WR体积
例如：标准的试管程序有三个未知液，每个样品做两组重复：
（标准液9mL+未知液3mL）X（平行数目2）X（2mL）二总共所需的WR体积48mL注意：试管程序中每个样品管加2.0ml WR
4、冷却到室温
5、用酶标仪测量在562nm或接近562nm的读数
注意：1)这种方法中波长在540-590nm的范围内都能被成功的测量
2因为读板器使用的光线长度比分光光度计的比色皿要短，所以微型板程序需 要使用样品比例比较大的工作试剂去获得与标准试管程序相同的灵敏度。如果需 要高于562nm的测量，要将培养时间增加到2h.
大分子结构的蛋白质，肽键的数量和存在的四个特定氨基酸（半胱氨酸,胱氨酸，色 氨酸和酪氨酸）据说是与BCA形成颜色产物的原因。因此，蛋白浓度的测量通常要 参照标准的一个常见的蛋白质如牛血清白蛋白。一系列已知浓度的蛋白质稀释液 是为与之相近的未知蛋白质浓度测定准备的。因为每一个未知浓度的测定都需要 基于标准曲线。如果需要将一个未知蛋白精确定量，选择一个与未知蛋白特性相 似的标准蛋白是可取的。例如，当测定免疫球蛋白时牛血清丙种球蛋白可以被当 做标准蛋白。以下给出了两种检测过程：
光度就不会引进明显的误差。
6、所有的单个标准品与所测的样品重复在562nm测得的吸光度都要减去在562nm测得
的所有空白标准品的吸光度平均值。
微型板程序(样品：WR=1:8)
1、用移液管移取25ul的WR到每一个标准品与未知样品所在的微型板中
(worki ng ran ge=20-2000ug/ml)
BCA蛋白检测试剂(二喹啉甲酸)
BCA蛋白检测试剂（二喹啉甲酸）BCA蛋白定量试剂应用：蛋白质：蛋白质相互作用研究测量柱分数亲和层析后膜蛋白的细胞提取物的百分回收率估算的融合蛋白的高通量筛选亮点：色度-估计目视或测量标准的分光光度计或酶标仪（562nm）优良的均匀性-展品较少的蛋白质，蛋白质的变化比染料结合的方法兼容-不受大多数离子和非离子型洗涤剂的典型浓度适度快速-更容易和4倍的速度比传统的Lowry法高线性-对BSA的线性工作范围相当于20〜2000μg/mL敏感-检测液5μg/ml增强协议。
如何BCA蛋白定量试剂检测蛋白质：BCA蛋白测定相结合的公知的还原的Cu2+为Cu1+蛋白在碱性介质中的高灵敏度和选择性的二喹啉甲酸亚铜阳离子（铜1+）由比色法检测。
第一个步骤是在碱性环境中，以形成光的蓝色络合物与蛋白质的螯合铜。
含有三个或更多个氨基酸残基的肽在该反应中，被称为双缩脲反应，生成有色络合物配合物与二价铜离子在碱性环境中，含有酒石酸钠钾。
在第二步骤中的彩色显影反应，二辛可宁酸（BCA）与减少（亚铜）的第一个步骤中形成的阳离子反应。
激烈的紫色色反应产物的查询结果从两个分子的BCA 螯合与一个一价铜离子。
的BCA/铜配合物是水溶性的，并表现出强的线性增加蛋白质浓度在562nm处的吸光度。
的BCA试剂是更敏感（检测下限）的第一反应比淡蓝色的颜色的约100倍。
BCA颜色形成的反应，导致由四个位的氨基酸序列的蛋白质的氨基酸残基（半胱氨酸或胱氨酸，酪氨酸和色氨酸）的强烈影响。
然而，不像在考马斯亮蓝染料结合的方法中，普遍的肽骨架也有助于颜色的形成，有助于最大限度地减少由蛋白质组成差异引起的变异。
产品详细说明：。
BCA蛋白浓度测定试剂盒使用说明书
产品简介
蛋白质定量是蛋白质研究的基础工作之一。博奥森开发的BCA蛋白质检测试剂(bicinchonic acid)是理想的蛋白质定量方法;是当前比Lowry法更优越的专用于检测总蛋白质含量的产品。该方法以快速灵敏、稳定可靠，对不同种类蛋白质检测的变异系数非常小而倍受专业人士的青睐。BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。在组织细胞裂解实验中，常用浓度的去垢剂SDS，TritonX-100，Tween不影响检测结果，但受螯合剂(EDTA，EGTA)、还原剂（DTT，巯基乙醇）和脂类的影响。实验中，若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高，可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。该产品不受此影响，因此与之配合使用，可免除您实验中的许多烦恼。
基本原理
碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+，Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物，测定其在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。
主要特点
1.准确xx,线性xx:
BCA试剂的蛋白质测定范围是10－2000ug/ml；
2.快速：45分钟内完成测定，比经典的Lowry法;还原为Cu+，Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物，测定其在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。
主要特点
1.准确xx,线性xx:
BCA试剂的蛋白质测定范围是10－2000ug/ml；
2.快速：45分钟内完成测定，比经典的Lowry法快4倍而且更加方便。
3.经济实用：
在微孔板中进行测定，可大大节约样品和试剂用量。
4.不受样品中离子型和非离子型去污剂影响。
5.检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马氏亮蓝。
BCA蛋白浓度测定-酶标仪法
BCA 法测定蛋白浓度-酶标仪一、药品1.BCA 蛋白浓度测定试剂盒（ P0012， 500 次酶标仪，碧云天），含以下成分：a)BCA 试剂 A （P0012-1， 100ml ，碧云天），室温保存b)BCA 试剂 B （ P0012-2， 3ml ，碧云天），室温保存c)蛋白标准（ 5mg/ml BSA ）（ P0012-3， 1ml ，碧云天）， -20 度保存二、仪器和试剂1.酶标仪（测定波长为 540-595nm之间， 562nm最佳），水浴锅2.96孔单条可拆酶标板（平底）3.15 ml 离心管 1个（准备 BCA 工作液用）4. 1.5 ml 离心管 1个（准备蛋白标准品工作液用）5.单道移液器和枪头， 8道移液器（排枪）和枪头6.PBS三、操作步骤1.水浴锅调至 37℃。
2.蛋白标准品工作液（ 1 mg/ml ）的配制：将蛋白标准品（5mg/ml ）从 -20℃冰箱中取出，完全溶解并混匀。
取60μl 蛋白标准品（ 5mg/ml ），加入 240μl PBS，即稀释 5倍，即配成蛋白标准品工作液（ 1 mg/ml ）。
3.计算 BCA 工作液总量 = 0.2 ml（×样本数 +8）×2×1.1（标准品和样本均需测复孔）。
BCA工作量按 50体积的 BCA 试剂 A 加上 1体积的 BCA 试剂 B配制（即50:1），需充分混匀。
BCA工作液室温 24小时内稳定。
样本数 (n)1~56~78~1011~1213~1415~1617~1920~2122~2324~26A （ ml）6789101112131415B（ ml）0.120.140.160.180.20.220.240.260.280.3总量 (ml) 6.127.148.169.1810.211.2212.2413.2614.2815.34.按下表配制 8 个蛋白标准液（ S0~S7），充分摇匀。
企业文件编码规则及部门代码
文件编码建议按如下规则：1. 文件编码结构：抬头码：通常是公司简写文件阶层码：表明文件是哪一层的，比如，属于质量手册的用QM来表示文件类别码：代表过程，比如：用5来代表与管理职责相关的文件序列码：比如，在第5部分，用01来表示质量目标，用02来表示管理评审等等文件版本码：表明文件的版本2. 各部分详细规则：抬头码：公司简写，用大写英文表示文件阶层码：用大写英文表示，其中，一级文件质量手册用QM表示，二级文件程序文件用QP表示，三级作业文件等三级文件用QW表示，四级表单用QR表示，外来文件用ED表示。
文件类别码：代表文件所属过程，为管理规范，用一位阿拉伯数字表示。
特规定为文件类别码与ISO9001各个大点相对应：代码......表示过程......标准4 ...... 与体系策划、文件、记录管理相关的......质量管理体系5 ...... 与管理职责、质量目标、管理评审相关......管理职责6 ...... 与资源管理相关......资源管理7 ...... 与产品实现过程相关......产品实现8 ...... 与产品、过程测量和监视、持续改进有关......测量、分析与改进文件序列码：为两位阿拉伯数字，本部分，从01开始，直到99，在实际编写中，尽量与标准条文小点对应，比如：比如，在第5部分，用01来表示质量目标，用02来表示管理评审等等文件版本码：表明文件的版本，用一位大写英文字母和一位阿拉伯数字组成，如：A/0。
比如：ABC/QP/501—A/0阅读者能够很清楚地知道，这个文件是一个关于管理职责部分的A/0版程序文件ABC/QW/501—A/1关于管理职责部分的A/1版本的三级文件ABC/QR/501—A/1关于管理职责部分的A/1版本的记录表单ABC/ED/501—A/1关于管理职责部分的A/1版本的外来文件采用上述编码规则的好处在于：阅读者清楚文件分类和属性编写者清楚，在新编一个文件的时候，如何进行明确准确编码。
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Quality Manual 质量手册文件编号：BCA-MA4.2-01-01版本：01编写：Bill Lin 日期：2009-03-20 审核：Tom Song 日期：2009-03-20 批准：Tom Song 日期：2009-03-20生效日期：2009-04-01宝马格（中国）工程机械有限公司颁布令公司贯彻实施ISO 9001:2008标准以证实公司有能力稳定地提供满足顾客和适用法律法规要求的产品。
通过质量管理体系的有效实施，包括持续改进质量管理体系的过程，以及保证符合顾客与适用的法律法规要求，从而增强顾客满意。
《质量手册》是公司质量管理体系的法规性文件，是指导公司建立、实施、保持、持续改进质量管理体系的纲领和行动准则。
今予以颁布实施，公司全体员工必须遵照执行。
公司总经理：宋功成2009 年3 月23 日0.1 目录0.2 公司简介BOMAG（宝马格）是一家世界领先、规模最大的压路机专业制造商，提供用于土壤、沥青和垃圾填埋场的压实设备以及稳定土路搅拌机和沥青路面现场冷再生机。
BOMAG于1957年成立于德国，至今已拥有2000名遍布世界各地的员工，19个产品大类，6个位于德国的分公司，8个海外分公司，1个位于新加坡的销售办事处以及500个遍布120个国家的销售代理商。
到2006年，BOMAG集团的销售额共达到6.5亿欧元。
BOMAG的压实机械可用于从场地、交通路面到水库的建设，同时也为不同规模的垃圾填埋以及用于修补已损坏的沥青路面和维护道路稳定提供专用设备。
为配合压路机的作业，BOMAG公司开发研制了世界领先的许多智能化测量及管理系统，以控制压实的作业过程和作业结果，为各种道路提供有效的保护。
宝马格（中国）工程机械有限公司为BOMAG设在中国的子公司，负责在中国生产制造符合宝马格设计要求的压实机械。
BOMAG通过提供多元优质的产品组合及服务，不断满足了全球客户差异化的市场需求！宝马格(中国)⏹全称：宝马格（中国）工程机械有限公司⏹法人代表：Martin Ochotta⏹公司地址：上海市工业综合开发区环城西路2808 号⏹注册资本：14，500，000 RMB⏹占地面积：43，000 M2⏹经营范围：压路机产品的制造和销售⏹总经理：宋功成⏹员工数：105 人（截至2009年3月）⏹电话：0086-21-33655566⏹传真：0086-21-336555050.3 质量手册说明1）本手册对宝马格（中国）工程机械有限公司的质量管理体系的范围、相关职责权限和运作要求等做出了规定。
2）本手册适用于宝马格（中国）工程机械有限公司的各职能部门和生产场所的质量管理。
3）质量手册的管理a．质量手册的编制与修订本手册的编制、审核、批准与修订按《文件管理程序》执行。
公司质量部负责按《文件管理程序》对质量手册进行归口管理和控制。
b．质量手册的发放控制质量手册的正本由质量部负责归档，其副本分为“受控”和“非受控”两种，手册“受控”本的发放控制按《文件管理程序》执行。
“非受控”本的发放由使用部门提出申请，经部门经理签署，管理者代表审批后方可发放，同时质量部进行登记，但不做修订、更换等控制。
4）质量手册的解释权归管理者代表或其授权人。
1.0 质量管理体系目的公司依据ISO 9001:2008标准，结合公司实际，建立并实施质量管理体系，以达到以下目的：1）证实公司有能力稳定地提供满足顾客和适用法律法规要求的产品。
2）通过质量管理体系的有效实施，包括持续改进质量管理体系的过程以及保证符合顾客与适用的法律法规要求，从而增强顾客满意。
2.0 质量方针和质量目标2.1 质量方针我公司的质量方针是：作为全球压实机械的先驱，质量是我们企业文化的一部分。
我们始终追求通过提供顶级质量的压实产品，以期满足并超越客户的期望。
我们承诺关注细节，加强对整个供应链的管理控制并持续进行过程改善。
2.2 质量目标（见附录A）3.0 质量管理体系范围3.1 公司质量管理体系依据以下标准：1）I SO 9001:2005 质量管理体系——基础和术语；2）I SO 9001:2008 质量管理体系——要求。
3.2 质量管理体系范围：3.2.1公司质量管理体系的范围为压路机产品的制造和销售。
3.2.2 删减说明：公司上述压实机械产品的设计由宝马格德国总部负责，本公司根据设计的技术要求策划和实施产品制造。
为此，本质量管理体系不包含产品的设计和开发，在引用ISO 9001:2008标准时删减了标准第7章之7.3款“设计和开发”的要求内容，此删减不会影响公司产品质量以及本公司对顾客的承诺和相关的法律法规的要求。
特此说明。
3.3公司质量管理体系过程见图1。
3.4公司质量管理体系组织机构见附录B。
3.5 公司产品实现过程见附录C。
3.6 公司质量管理体系过程中的产品实现的主要运作程序见附录D。
4.0 质量管理体系4.1 总要求4.1.1 公司根据ISO 9001:2008标准要求建立质量管理体系，形成文件，加以实施和保持，并持续改进其有效性。
公司通过建立质量管理体系：a) 确定质量管理体系所需的过程及其在组织中的应用，这些过程包括与管理活动、资源提供、产品实现和测量有关的过程；b) 确定这些过程的顺序、相互作用和接口关系；c) 确定为确保这些过程有效运作和控制所需的准则和方法，；；d) 确保可以获得必要的资源和信息，以支持这些过程的运作和监视；e) 监视、测量和分析这些过程；f) 实施必要的措施，以实现对这些过程所策划的结果和对这些过程的持续改进；4.1.2 公司按ISO 9001:2008标准要求，通过识别、确定、监控、测量分析等对过程进行管理管理这些过程。
公司的质量管理过程见3.3节。
4.1.3 针对所外包的任何影响产品符合性的过程，公司通过本质量管理体系对其实施控制，参见7.4节。
4.2 文件要求4.2.1 公司质量管理体系文件包括：a. 质量手册，质量方针和质量目标；b. 程序文件；c. 作业指导文件，包括质量目标实施方案、职位描述、管理规定及各类操作规程等；d. 质量记录（各类作业记录表单）。
（公司质量管理体系的主要程序见附录D《程序文件清单》）4.2.2 质量手册1）质量手册阐述了公司的质量方针、质量目标，并概述了公司质量管理体系要求和控制原则，是本公司长期遵循的纲领性文件；2）公司质量手册由管理者代表负责编写，公司总经理负责审核和批准颁布。
3）质量手册内容包括：a．质量方针；b．质量管理体系范围，包括删减部分细节和理由；c．建立的质量管理体系文件化程序或引用的文件化程序；d．质量管理体系过程间相互关系描述。
4）质量手册的管理详见手册0.3节和《文件管理程序》。
4.2.3 文件控制公司制定并实施《文件管理程序》，以确保：a. 文件发布前得到批准，以确保文件是充分与适宜的；b. 必要时对文件评审与更新，并再次批准；c. 文件的更改和现行修订状态得到标识；d. 在使用处可获得有关版本的适用文件；e. 文件保持清晰，易于识别；f. 外来文件得到识别，并控制其分放；g. 防止作废文件的非预期使用，若因任何原因而保留作废文件时对这些文件进行适当的标识。
4.2.4 记录的控制1）必须保存相关记录以证明达到规定的产品和过程的要求且质量管理体系运行有效。
2）公司质量记录的填写、标识、收集、编目、归档、贮存、防护、检索、保存期限和处置由各职能部门按《记录管理程序》进行控制，以提供符合要求和质量管理体系有效运行的证据。
3）所有质量记录应字迹清晰，易于识别，保管方式应便于存取和检索。
质量记录贮存的场地应适宜，如必要时干燥、通风、防磁、防光等，以防止记录的变质、丢失或损坏。
注:：形成文件a.BCB-QM4.2-01《文件管理程序》b.BCB-QM4.2-02《记录管理程序》5.0 管理职责5.1 管理承诺5.1.1 公司致力于营造一个有质量意识，满足客户要求的公司环境，建立、实施、保持并持续改进质量管理体系，制定质量方针及质量目标，并通过体系的有效运行达到并争取超越客户的期望。
5.1.2 在质量管理体系的建立、实施、保持和改进中，本公司坚持以下原则，并通过PDCA循环完善和发展质量管理体系：●以客户为关注焦点，●领导重视，●全员参与，●过程方法，●管理系统方法，●基于事实的决策方法，●持续改进，●与供方的互利关系。
5.1.3总经理通过以下活动对其建立、实施、保持及持续改进质量管理体系有效性的承诺提供证据：a）采取培训、宣传或会议等方式向公司全体员工及时传达满足顾客和法律法规要求的重要性；b）制定适合公司发展方向的质量方针；c）确定质量目标；d）进行管理评审，识别改进机会并作出决策；e）确保资源的获得（包括人、财、物、时间等）。
5.2 以顾客为中心5.2.1 公司总经理承诺以顾客满意为目标，不断提高全员的质量意识，确保顾客的要求得到确定和满足。
5.2.2 首先，充分理解“以客户为关注焦点”这一质量管理原则的重要性，并贯穿在整个管理活动中，鼓励所有员工，在任何情况下将得到的涉及产品质量、公司服务水平和市场变化的信息向公司管理层报告。
5.2.3其次，各阶层充分理解客户的需要和期望。
通过顾客沟通、订单评审等活动来识别客户的需要和期望，并由此转化为公司的实施要求，经过产品实现和测量等过程来达到客户的要求，最终使客户满意。
5.3 质量方针5.3.1 本公司质量方针见2.0节。
5.3.2 总经理负责制定质量方针并确保质量方针：1）与组织的宗旨相适应；2）包含对符合要求和持续改进质量管理体系有效性的承诺；3）提供制定和评审质量目标的框架；4）在公司内得到沟通和理解；5）在持续适宜性方面得到评审。
5.3.3质量方针由总经理制定，并以正式文件形式发布，纳入本手册，其他人无权修改质量方针。
5.3.4 总经理确保采用培训、宣传、会议和目标分解等方法，在全公司内贯彻和执行公司质量方针，并利用管理评审对质量方针进行评价，当组织内外环境发生变化，本公司的质量方针不能适应变化时，则重新制定或修订质量方针。
5.4 策划5.4.1 质量目标a) 质量目标是对质量方针的展开，也是公司各职能和层次上所追求并加以实现的主要工作目标。
质量目标是公司质量方针的具体落实，也是评价公司质量管理体系有效性的重要判定指标。
b) 建立公司的质量目标是总经理的职责。
总经理负责按质量方针的框架组织制定质量目标，并分解到公司各部门，形成各部门的工作目标。
总经理应确保公司内相关职能和层次上所建立的质量目标与质量方针相一致。
c) 质量目标应经总经理批准发布。
d) 本公司的质量目标见《公司质量目标》（见附录A）。
e) 质量目标应是可测量的。
各职能部门定期收集相关的质量记录提交给质量部，质量部进行统计并上报总经理，总经理将结果与设定的目标进行比较，找出差距和原因以便实现持续改进。