RP_HPLC法测定人血浆中头孢他美浓度_邓晓彬
RP_HPLC_UV法测定人血浆及痰液中的莫西沙星浓度
中国新药杂志2009[作者简介] 黄琳,女,硕士研究生。
[通讯作者] 余勤,女,副教授,主要从事体内药物分析及药动学研究。
联系电话:(028)85422709,E m ai:l sunny999@to 。
临床研究RP HPLC UV 法测定人血浆及痰液中的莫西沙星浓度黄 琳,余 勤,梁茂植,秦永平,南 峰,向 瑾(四川大学华西医院GCP 中心临床药理研究室,成都610041)[摘要] 目的:建立反相高效液相色谱法以测定人血浆及痰液中莫西沙星浓度,用于比较莫西沙星在血浆及支气管分泌物的分布情况。
方法:以乙腈沉淀血浆和痰液中的蛋白质,采用YMC C 18色谱柱(150mm 4.6mm,5 m ),柱温为室温,流动相为乙腈 0.01m o l L -1磷酸二氢钾(22!78),磷酸二氢钾用磷酸调节pH 值至2.70,流速为1.0mL m i n -1。
以乳酸环丙沙星为内标,检测波长为296nm 。
结果:血浆样品中的莫西沙星在0.0781~10m g L -1范围内线性关系良好(r =0.9956,w =1/C 2);预处理回收率为90.45%~91 82%,方法回收率为96.91%~102.00%,日内RSD 为1.17%~3.91%,日间RSD 为1.84%~3.13%。
痰液标本中的莫西沙星在0.1563~20m g L -1范围内线性关系良好(r =0.9913,w =1/C 2);预处理回收率88.01%~91 78%,方法回收率85.12%~114.27%,日内RSD 为1.70%~5.26%,日间RSD 为2.48%~4 56%。
结论:本方法快速、灵敏、准确、简便,适用于盐酸莫西沙星的血浆及痰液中的浓度测定。
[关键词] 盐酸莫西沙星;反相高效液相色谱;血药浓度;痰液浓度[中图分类号]R927.2;R978.26 [文献标志码]A [文章编号]1003-3734(2009)15-1419-05D eter m i nati on of moxifloxaci n i n hu man plas ma and sputu m by RP HPLC UVHUANG Lin ,YU Q i n ,LI ANG M ao zh,i Q IN Y ong pi n g ,NAN Feng ,X I A NG Ji n (Depart m ent of C linical Phar m acology,W est China H os p ital ,Chengdu 610041,Ch i n a)[Abstract] Objective :To develop a RP H PLC m ethod for deter m i n ing the concentrati o n of m ox iflox ac i n i n hum an p las m a and sputum.M et hods :The protein i n p las m a and sputu m w as precipitated by acetonitrile ,and sub sequen tl y quantified by a RP H PLC equipped w ith a YM C C 18co l u m n (150mm 4.6mm,5 m ).The sa m ples w ere assayed at roo m te mperature .The m ob ile phase consisted of aceton itrile 0.01m ol L-1potassi u m d i h ydr ogenphosphate (22!78,p H o f buffer so l u tion w as ad j u sted to 2.70by phosphoric ac i d ).F lo w ra te w as 1.0mL m in -1.The detecti o n w avelength w as set at 296nm.C i p rofl o xac i n w as used as the i n terna l standar d .R esults :The li n earity o f ca li b rated curves of plas m a sa m ple w as i n the range o f 0.0781~10mg L-1(r =0.9956,w =1/C 2).The pretreat m ent recovery was 90.45%~91.82%.The m ethodolog ical recovery w as 96.91%~102.00%.The w it h i n day RSD s were in the range o f 1.17%~3.91%and i n ter day RSDs of 1.84%~3.13%.The li n earity of cali b ra ted curves o f spu t u m sa m ple w as i n the range of 0.1563~20m g L-1(r =0.9913,w =1/C 2).The pretreat m entrecovery w as 88.01%~91.78%.The m ethodolog ical recovery w as 85.12%~114.27%.The w ith i n day RSD s w ere in t h e range o f 1.70%~5.26%and inter day RSDs of 2.48%~4.56%.C onclusion :The sensitive ,accu rate and easily m anipulated assay o ffered a satisfactory tool for the phar m acok i n etics and relative b i o ava il a bility of m ox ifl o xac i n i n plas m a and sputu m sa m ples .[K ey w ords] m ox ifloxaci n ;RP HPLC ;plas m a concentration;sputum concentrati o n中国新药杂志2009年第18卷第15期盐酸莫西沙星(m ox ifl o xac i n )为8 甲氧基氟喹诺酮类抗菌药,其抗菌作用机制为干扰II 和I V 拓扑异构酶。
RP-HPLC法测定头孢克肟的有关物质
RP-HPLC法测定头孢克肟的有关物质张慧文;关倩明;林玲;肖彦琨【摘要】目的建立测定头孢克肟有关物质的RP-HPLC方法.方法采用Hypersil BDS C_(18)(4.6mm×250mm,10μm)色谱柱,流动相为0.1mol/L醋酸铵缓冲液(用氨试液调pH为7.0)-乙腈(96:4),流速1.0mL/min,检测波长254nm,柱温35℃.结果头孢克肟在0.10-49.33μg/mL浓度范围内,峰面积与浓度呈良好线性关系(r=1.0000);最低检测限为0.18ng;各有关物质与主成份均达到基线分离.结论本法简便、专属,可用于头孢克肟有关物质的测定.【期刊名称】《中国抗生素杂志》【年(卷),期】2010(035)003【总页数】5页(P209-213)【关键词】头孢克肟;有关物质;RP-HPLC【作者】张慧文;关倩明;林玲;肖彦琨【作者单位】广州市药品检验所,广州,510160;广州市药品检验所,广州,510160;广州市药品检验所,广州,510160;广州市药品检验所,广州,510160【正文语种】中文【中图分类】R978.1~+1头孢克肟(cefixime)是第一个上市的第三代口服头孢菌素，在其C-7位上连接有苯甘氨酸类的基团，该结构有利于口服吸收；其抗菌谱广、杀菌力强，尤其对淋球菌、肺炎链球菌、变形菌、产气杆菌、沙雷菌属等具有高度抗菌活性，体内分布广，并对各种细菌所产生的β-内酰胺酶具有很好的稳定性，可抑制大多数革兰阴性菌包括嗜血菌属、奈瑟球菌属和肠杆菌科的大多数菌种，临床主要用于治疗呼吸道感染、耳鼻咽喉感染、胆道炎、胆囊炎及尿道感染等[1,2]。
在现版药典中，《中国药典》2005版尚未收载头孢克肟的质量标准，《英国药典》2008版[3]和《美国药典》31版[4]均有收载，且均采用HPLC法测定头孢克肟有关物质，但采用离子对试剂四丁基氢氧化氨与乙腈(75∶25)为流动相。
RP—HPLC法测定人血浆中头孢拉定的浓度
取 空 白血 浆 ５ ０ Ｉ ， 入 头孢 拉 定 标 准系 列溶 液 ５ ｌ ０ ｌ加 ｘ ０ ， 配 制 成 相 当 于 头 孢 拉 定 血 浆 浓 度 为 ０５ １ ２０ ５０ １．、 ．、． ．、．、００ ０、 ２ ．、００ ／ 的血 浆样 品 ， “ ．” 下依 法操 作 并 进行 色 ００ ４ ． ｇｍｌ 按 ２１ 项 谱 分 析 。 以头 孢 拉 定 与 内标 物 的 峰 面积 比值 为横 坐 标 （ ， Ｘ） 头 孢 拉定 浓 度 （ 为 纵 坐标 进 行 线 性 回 归 ， 标 准 回归 曲线 Ｙ） 得 方 程 Ｙ ００ ７４ ＋ ．３ Ｘ， ０９ ９ ９ ｒ ５ ， 性 范 围为 ０５ ＝ ．５ １ ４８ ８ ｒ ． （ － ） 线 ＝ ９ ｂ ．～ ４ ． ｚ／ ｌ ００￣ ｍ 。最 低检 测 限为 ０２ ｇｍ （／ ３ 。 ｇ ，５ｉ ／ ｌＳＮ＝ ） ｘ
２４标 准 曲 线 的 制 备 ．
高效 液相 色普 仪 ：Ｃ ９ Ｌ 一 Ａ泵 （ 日本 岛 津公 司 ） Ｓ Ｄ ６ Ｖ 、Ｐ 一 Ａ 型 紫外 可 见 检 测 器 （ 日本 日立 公 司 ）Ｎ３ ０ 、 ０ ０色谱 工 作 站 （ 浙 江大 学 ）ＸＷ－ ０型涡 旋混 合 器 （ 海手术 器 械 厂 ）Ｔ Ｌ １ Ｇ ； ８ 上 ；Ｇ 一 ６ 型离 心沉 淀 器 （ 海安 亨科 学仪 器 厂 ） 上 。
药物 之 一 。 目前头 孢 拉定 在 国内应 用 广泛 ，对 头 孢 拉定 的
研 究 很多 。头 孢拉 定 在组 织体 液 中分 布 良好 ，它在 心肌 、 子 宫 、 、 列腺 和 骨组 织 中 皆可获有 效 浓度 。 中脑组 织 中药 肺 前 其 物浓 度仅 为 同期 血 药浓 度 的 ５ １ ％，脑 脊 液 中浓 度更 低 。 ％～ ０ 血浆 蛋 白结 合 率 为 ６ １ ％。 口服 ０５ ｇ后 ６ｈ累 积排 出给 ％～ ０ ． 药 量 的 ９ ％以上 。头 孢拉 定 在体 内很少 代谢 ， 磺 舒可 减 少 ０ 丙 本 品 经 肾排 泄 。 口服本 品 后 吸 收迅 速 ， 空腹 口服 ０５ｇ 于给 ． ，
RP-HPLC法测定人血浆和尿液中美罗培南浓度
RP-HPLC法测定人血浆和尿液中美罗培南浓度孙亚欣;肇丽梅;朱旭;邱枫;何晓静;李明珠【摘要】Objective To develop a simple and rapid HPLC method for the simultaneous determination of meropenem in human plasma and urine. Methods Plasma samples were deproteinized with acetonitrile followed by extraction with dichloromethane and injection of the upper aquous phase and urine samples were diluted with mobile phase. The analysis was conducted on a Capcell Pak MG Clg column. The flow rate was 1.0 mL/min and the column temperature was 30 °C. The dete cting wavelengh was at 298 nm. The mobile phase consisted of acetonitrile-0.02 mol/L biphosphate sodium(10:90). Results The linear range of meropenem in plasma and urine samples were 0.2 - 100.0 |xg/mL and 2-1 000 μg/mL respectively. The average extraction recovery ratio in plasma and urine samples were 80.4% and 101. 1% ,and the average method recovery ratio in plasma and urine samples were 99. 2% and 100.3% .respectively. The RSD of intra- and inter-day were both less than 8. 8%. Conclusion The method is simple,rapid and accurate,which is suitable for the study of pharmacokinetics of meropenem.%目的建立测定人血浆和尿液中美罗培南含量的RP-HPLC法.方法血浆样品经乙腈沉淀蛋白,二氯甲烷2次提取去杂质,取水相进样；尿液稀释后直接进样.以甲硝唑为内标,色谱柱为Capcell Pak MGC18(4.6 mm× 150 mm.5μm)柱,流动相为乙腈-0.02 mol/L NaH2 PO4溶液(体积比10:90),流速为1.0 mL/min,检测波长为298 nm,柱温为30℃.结果美罗培南在血浆样品和尿样中的线性范围分别为0.2～100.0μg/mL和2～1000 μg/mL,提取回收率平均值分别为80.4％和101.1％,方法回收率平均值分别为99.2％和100.3％,日内、日间RSD值均低于8.8％.结论该方法简便、灵敏、专属性强,能满足人血浆和尿液中美罗培南含量测定及药动学研究的需要.【期刊名称】《广东药学院学报》【年(卷),期】2011(027)006【总页数】4页(P567-570)【关键词】美罗培南;高效液相色谱法;药动学【作者】孙亚欣;肇丽梅;朱旭;邱枫;何晓静;李明珠【作者单位】中国医科大学附属盛京医院临床药理研究室,辽宁沈阳 110004;中国医科大学附属盛京医院临床药理研究室,辽宁沈阳 110004;中国医科大学附属盛京医院临床药理研究室,辽宁沈阳 110004;中国医科大学附属盛京医院临床药理研究室,辽宁沈阳 110004;中国医科大学附属盛京医院临床药理研究室,辽宁沈阳110004;中国医科大学附属盛京医院临床药理研究室,辽宁沈阳 110004【正文语种】中文【中图分类】R917美罗培南(meropenem)是一种人工半合成的广谱碳青霉烯类抗生素，它同其他β-内酰胺类抗生素一样,通过抑制细菌细胞壁的合成而起杀菌作用。
HPLC-UV法测定人血浆及尿中头孢他美钠的浓度
ｐ ｌ ａ ｓ ｍａ ａ ｎ ｄ ｕ ｉ ｒ ｎ ｅ ． Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ Ｔ ｈ ｅ ａ ｓ ｓ ａ ｙ ｗ ａ ｓ ｃ ｏ ｎ ｄ ｕ ｃ ｔ ｅ ｄ ｏ ｎ ａ ＨＰ Ｌ Ｃ － ＵＶ ｓ ｙ ｓ ｔ ｅ ｍ ｃ ｏ ｎ ｓ ｉ ｓ ｔ ｅ ｄ ｏ ｆ Ｕ ｌ ｔ ｉ ｍａ ｔ ｅ Ｘ Ｂ — Ｃ ． 。 （ １ ５ Ｏ×
Ｚ ｈ ａ ｎ ｇ Ｌ ｉ ， － ， Ｑｉ ｎ Ｙ ｏ ｎ ｇ — ｐ ｉ ｎ ｇ ， Ｎａ ｎ Ｆ ｅ ｎ ｇ ， Ｘ ｉ ａ ｎ ｇ Ｊ ｉ ｎ ， Ｙ ｕ Ｑｉ ｎ ， Ｌ ｉ ａ ｎ ｇ Ｍａ ｏ — ｚ ｈ ｉ ａ ｎ ｄ Ｚ ｈ ａ ｎ ｇ Ｄａ ｎ ２
成都 ６ １ ０ ０ ４ １ ；２四川大学华西药学院，成都 ６ １ ０ ０ ４ １ ） （ １ 四川 大学华西 医院国家药物临床试验机构临床药理研 究所 ，
摘要 ： 目的 建立ＨＰ Ｌ Ｃ ． ｕ ｖ法测定人血浆及尿中头孢他美钠的浓度 。方法 采用Ｕｌ ｔ ｉ ｍａ ｔ ｅ Ｘ Ｂ ． Ｃ ， （ １ ５ ０×４ ． ６ ｍｍ， ５ ｇ ｍ） 色谱
中 图分 类 号 ：Ｒ ９ ７ ８ ． １ 文献 标 志 码 ：Ａ
ＨＰＬＣ— ＵＶ ｄｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｃ ｅ ｆ ｅ ｔ ａ ｍｅ ｔ ｓ ｏ ｄ ｉ ｕｍ ｉ ｎ ｈｕ ｍａ ｎ ｐｌ ａ ｓ ｍａ ａ ｎｄ ｕ ｒ ｉ ｎｅ
４ ． ６ ｍｍ． ５ ￣ ｔ ｍ） ． Ｔ ｈ ｅ ｍｏ ｂ ｉ ｌ ｅ ｐ ｈ ａ ｓ ｅ ｗｅ ｒ ｅ ａ ｃ ｅ ｔ ｏ ｎ ｉ 仃 ｉ １ ｅ 一 ２ ０ ｍｍｏ ｌ ／ Ｌ ａ ｍｍｏ ｎ ｉ ｕ ｍ ａ ｃ ｅ ｔ ａ ｔ ｅ （ ９ ０ ： １ ０ ， ｐ Ｈ ｗａ ｓ ａ ｄ ｊ ｕ ｓ ｔ ｅ ｄ ｔ ｏ ５ ． ０ ８ ｗｉ ｔ ｈ ａ ｃ ｅ ｔ ａ ｔ ｅ ａ ｃ ｉ ｄ ） ａ ｎ ｄ ａ ｃ ｅ ｔ ｏ ｎ ｉ ｔ ｒ ｉ ｌ ｅ ． １ ０ ｍｍｏ ｌ ／ Ｌ ａ ｍｍｏ ｎ ｉ ｕ ｍ ｆ ｏ ｒ ｍａ ｔ ｅ （ ９ ０ ： １ ０ ． Ｖ ／ ｐ Ｈ ｗａ ｓ ａ ｄ ｊ ｕ ｓ ｔ ｅ ｄ ｔ ｏ ３ ． ５ ３ ｗｉ ｔ ｈ ｆ ｏ ｍａ ｒ ｔ ｅ
HPLC法测定人血浆中头孢克肟的浓度
ｂ ａ ｔ ｃ ｈ ｗ ｅ ｒ ｅ ｌ ｅ ｓ ｓ ｔ ｈ ａ ｎ ５ ％ ．Ｔ ｈ ｅ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｗ ａ ｓ ｓ ｅ ｎ ｓ ｉ ｔ ｉ ｖ ｅ．ａ ｃ ｃ ｕ ｒ ａ ｔ ｅ ．ｐ ｒ ｅ ｃ ｉｆ ｃ ｌ ｉ ｎ ｉ ｃ ａ ｌ ａ ｐ ｐ ｌ ｉ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ．
第４ １ 卷第 １ ０期
２ ０ １ ３年 ５月
广
州
化
工
Ｖｏ １ ． ４１ Ｎｏ ．１ ０ Ｍａ ｙ ． ２ ０１ ３
Ｇｕ ａ ｎ ｇ ｚ ｈ ｏ ｕ Ｃ ｈ ｅ ｍｉ ｃ ａ ｌ Ｉ ｎ ｄ ｕ ｓ ｔ ｒ ｙ
Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ法 测 定 人 血 浆 中 头 孢 克 肟 的 浓 度
Ａｂｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ：Ａ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｆ ｏ ｒ ｔ ｈｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｍ ｉ ｒ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｃ ｅ ｉ ｆ ｘ ｉ ｍｅ ｉ ｎ ｈ ｕｍａ ｎ ｐ ｌ ａ ｓ ｍａ ｗａ ｓ ｅ ｓ ｔ ａ ｂ ｌ ｉ ｓ ｈ ｅ ｄ ．Ｔｈ ｅ ｓ ｅ ｐ ａ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｗａ ｓ ｃ ａ ｒ ｒ ｉ ｅ ｄ
Ｖ ／ Ｖ ） ，流速 ：１ ． ０ ｍ Ｌ・ ａｉ ｒ ｎ ～，柱温 ：４ ４℃ ，检测波长 ：２ ８ ８ ｎ ｍ。结果显示 ：建立的 Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ法 在 ０ ． ０ ４ ５－ ４ ． ５ ｇ・ ｍ Ｌ 范围 内线性 关 系 良好 ，定量下限为 ０ ． ４５ ０ ｇ・ ｍＬ ～；相对 回收率为 １ ０ １ ． ２ ％ ～１ ０ ５ ． １ ％ ；提取 回收率 为 ７ ２ ． ７ ％～ ７ ２ ． ８ ％ ；批 内、批间 Ｒ Ｓ Ｄ均小 于５ ％ ，该法灵敏 、准确 、精密度高 ，适用 于临床研究 。
徐 大 星 ，尧 爱 珉 ，冯 芳
高效液相色谱法测定人血浆中头孢地尼的浓度
高效液相色谱法测定人血浆中头孢地尼的浓度方阅;郑恒;刘皋林【摘要】目的:建立测定人血浆中头孢地尼含量的高效液相色谱(HPLC)方法.方法:血浆样品用高氯酸沉淀蛋白,采用Ultimate C18色谱柱(5 μm,2 504.6 mm),以乙腈:0.025 mol·L-1磷酸二氢钠缓冲盐溶液(pH 3.24)=15∶85作为流动相进行分离,检测波长为286 nm,流速为1.0 mL·min-1.结果:头孢地尼血药浓度30～2 500 ng·mL-1范围内线性关系良好,最低检测浓度为30 ng·mL-1.方法回收率(n=5)分别为76.41%,63.78%,66.44%,日内和日间精密度均小于15% .结论:该法操作简单、灵敏、准确、重现性好,适用于头孢地尼临床药代动力学研究.【期刊名称】《中国临床医学》【年(卷),期】2010(017)006【总页数】3页(P924-926)【关键词】头孢地尼;高效液相色谱;血浆【作者】方阅;郑恒;刘皋林【作者单位】上海市第一人民医院药剂科,湖北武汉,200080;华中科技大学同济医学院附属同济医院药剂科,湖北武汉,430030;上海市第一人民医院药剂科,湖北武汉,200080【正文语种】中文【中图分类】R978.1+1头孢地尼(cefdinir)是口服第3代头孢菌素类抗生素,通过抑制细菌细胞壁的合成而发挥抗菌作用[1]。
本品抗菌谱较广,对革兰阳性和阴性细菌均有较好的抗菌作用;另外,头孢地尼对β-内酰胺酶稳定,对一些产酶的细菌也有较好的抗菌作用[2]。
因此,检测头孢地尼的药代动力学情况及临床血药浓度的变化,可使临床医师更好掌握最佳的用药时间,最佳、最有效的用药剂量,以及把不良反应降到最低而保持有效治疗作用的最小用药剂量,使其在临床上得到更好、更有效地应用。
然而有关头孢地尼血药浓度的测定方法,国内外虽已有相关文献报道,如微生物方法[2]、液质联用法[3]及最先进、最准确的高效液相色谱(HPLC)检测法,但此法检测时间长[5]。
人血浆中头孢地尼浓度的HPLC测定法及药物动力学研究
注意缺陷多动障碍 (ADHD )是儿童期尤其是学龄儿童最常 见的一种行为障碍 [1 ] 。患病率在 1% ～10%之间 。因其对学习 、 生活有明显的影响 ,而且有些症状可持续到成年期 。智力可以正 常或接近正常 ,伴有学习困难 、人际关系和自我评价低下 。发病 率男孩数倍于女孩 。不良的家庭环境及社会环境对患病及预后 均有明显影响 。有人把这种失调比喻为一个交响乐队失去协调 性及和谐性 。本文旨在从父母教育方式中对儿童的打骂行为入 手 ,分析 ADHD儿童的行为问题与父母行为的相关影响因素 。 1 资料与方法 1. 1 一 般 资 料 2003 年 11 月 至 2006 年 12 月 就 诊 门 诊 的 ADHD 儿童 72例 ,其中男性 47例 ,女性 25例 ,年龄为 6～15岁 。
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Journal of C linica l and Experim en tal M ed icine V ol. 6, N o. 11 N ov. 2007
人血浆中头孢地尼浓度的 HPLC测定法 及药物动力学研究
短篇论著
杨祥明 侯静 敖钢城 (安陆市中医院 湖北 安陆 432600)
1. 2 诊断标准 按照诸福棠《实用儿科学 》的八条行为标准 。 主要根据患儿的家长和老师提供的病史 ,临床表现特征 。《美国 精神障碍诊断和统计手册 》第 4 版 (DSM - IV )中的 ADHD 及破 坏性行为障碍包括对立违抗障碍 、品行障碍的诊断标准与父母进 行访谈并诊断 ,排除广泛性发育障碍 ,精神发育迟滞 ,器质性精神 障碍 ,神经精神系统疾病及药物副作用等 。 1. 3 工具和方法 1. 3. 1 Achenbach 儿 童行 为 量 表 [2 ] ( child behaviour checklist, CBCL ) 由儿童父母填写 ,行为问题共 113项 ,分为 8个分量表 , 包括 :退缩 、躯体主诉 、焦虑 /抑郁 、社交问题 、思维问题 、注意问 题 、违纪行为 、攻击行为 。又分为内化 、外化性行为问题两个维
反相高效液相色谱法测定血清中头孢他美浓度研究分析
反相高效液相色谱法测定血清中头孢他美浓度研究分析(南京先声东元制药有限公司质量部江苏南京211800）【摘要】目的：建立反相高效液相色潽法测定人血清中头孢他美浓度的方法。
方法：选用lichrosorb 反相色谱柱(4．6 mm×200mm×5μm，agilent technologies)，以0.1％冰醋酸溶液-乙腈(75：25)为流动相，检测波长为265 nm，流速1.0ml／min，柱温为室温。
结果：该方法下头孢他美的检出限为3.029ng/ml，在0.25μg/ml～10.0μg/ml浓度范围内线性关系良好，方法的重现性、重复性和稳定性良好。
结论：利用反相高效液相色谱法测定头孢他美在人血清中的浓度具有高灵敏、线性范围广、重现性好的特点，可以将此方法用于监测头孢他美体内生物利用度情况。
【关键词】反相高效液相色谱法;血清浓度;头孢他美【中图分类号】r96【文献标识码】b【文章编号】1004-5511（2012）04-0270-02 头孢他美酯［1］为第三代口服头孢菌素类药物，口服后在肠道内代谢为头孢他美发挥抗菌作用。
对绝大多数的革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌具有较好的抗菌作用，对耐头孢菌素的沙雷菌属、柠檬酸菌属、肠杆菌属具有较强的抗菌活性，且对β-内酰胺酶稳定，为广谱抗生素。
临床上应用广泛。
本文对反相高效液相色谱法测定血清中头孢他美浓度的方法进行研究，为监测头孢他美血药浓度变化及体内生物利用度情况提供依据。
1.仪器及方法1.1仪器与试剂:仪器：agilent1200高效液相色谱仪（安捷伦科技有限公司）试剂：冰醋酸：色谱纯（天津科密欧化学试剂有限公司）乙腈、甲醇：色谱纯（dikma technologies inc）1.2色谱条件及系统适用性试验［2］:选用lichrosorb 反相色谱柱(4．6 mm×200mm×5μm，agilent technologies)，以0.1％冰醋酸溶液-乙腈(75：25)为流动相，检测波长为265 nm，流速1.0ml ／min，柱温为室温，进样量20μl。
RP-HPLC法测定人血浆中头孢拉定的浓度
ＲＰ－ＨＰＬＣ法测定人血浆中头孢拉定的浓度目的：建立测定血浆中头孢拉定浓度的高效液相色谱法。
方法：色谱柱为DiamonsilTM C18柱（200 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：0.05 mol/L KH2PO4-乙腈（85∶15）；柱温：35℃；流速：1.0 ml/min；检测波长：262 nm；进样量：20 μl。
结果：头孢拉定在0.5~40.0 μg/ml范围内有良好的线性关系，r=0.999 9；血浆中药物最低检测浓度为0.25 μg/ml（S/N=3）；提取回收率为75%；血浆中三种浓度回收率分别为(106.0±6.3)%、(103.0±4.6)%、(97.5±1.2)%，日内、日间RSD 分别为4.9%、2.6%、1.0%及7.9%、3.2%、1.9%。
结论：本法操作简单、快捷、专属性强，方法灵敏度和准确度均较高，适用于头孢拉定血药浓度及生物利用度的测定。
标签：头孢拉定；高效液相色谱；血药浓度头孢拉定是第一代头孢菌素类抗生素，是目前临床上用来治疗呼吸道、泌尿道和皮肤软组织等轻、中度感染的常用药物之一。
目前头孢拉定在国内应用广泛，对头孢拉定的研究很多。
头孢拉定在组织体液中分布良好，它在心肌、子宫、肺、前列腺和骨组织中皆可获有效浓度。
其中脑组织中药物浓度仅为同期血药浓度的5%~10%，脑脊液中浓度更低。
血浆蛋白结合率为6%~10%。
口服0.5 g后6 h累积排出给药量的90%以上。
头孢拉定在体内很少代谢，丙磺舒可减少本品经肾排泄。
口服本品后吸收迅速，空腹口服0.5 g，于给药1 h后可达血药峰浓度（Cmax=11~18mg/L），血消除半衰期(t1/2)约为1 h。
本文建立了测定血浆中头孢拉定浓度的高效液相色谱法。
本法操作简单、快捷、专属性强，方法灵敏度和准确度均较高，适用于头孢拉定血药浓度及生物利用度的测定。
1 仪器与试药1.1 仪器高效液相色普仪：LC-9A泵（日本岛津公司）、SPD-6A V型紫外可见检测器（日本日立公司）、N3000色谱工作站（浙江大学）；XW-80型涡旋混合器（上海手术器械厂）；TGL-16G型离心沉淀器（上海安亨科学仪器厂）。
高效液相色谱法测定人血浆头孢米诺钠浓度
高效液相色谱法测定人血浆头孢米诺钠浓度郑厚林;陈阳建【摘要】目的建立测定人血浆头孢米诺钠浓度的高效液相色谱法.方法血浆样品经10%高氯酸沉淀蛋白处理,以阿司匹林为内标,采用Hypersil ODS2色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为20 mmol·L-1醋酸铵溶液(加冰醋酸调节pH至4.50)-甲醇-0.1%三乙胺(85:10:5),流速为1.0 mL·min-1,柱温为25 ℃,检测波长为254 nm.结果头孢米诺钠在0.5～200.0 μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.999 7),最低检测限为0.5 μg·mL-1;高、中、低浓度日内RSD ≤5.16%、日间RSD≤7.37%;平均提取回收率83.20%(RSD=3.35%),平均方法回收率98.51%(RSD=1.37%).结论该方法操作简便,灵敏,快速,准确,适用于临床上血浆头孢米诺钠浓度的测定及药动学研究.【期刊名称】《医药导报》【年(卷),期】2011(030)011【总页数】3页(P1435-1437)【关键词】头孢米诺钠;色谱法;高效液相;血浆浓度【作者】郑厚林;陈阳建【作者单位】浙江省宁波市医疗中心李惠利医院药剂科,315040;浙江医药高等专科学校,宁波,315100【正文语种】中文【中图分类】R978.1;R969头孢米诺钠的含量测定方法多有报道[1-3]，但有关其血浆浓度测定的文献报道[4]并不多见，笔者在参考相关文献的基础上，建立了一种操作简便、快速、准确，并适用于临床上头孢米诺钠血浆浓度的测定及药动学研究的反相高效液相色谱法。
1 仪器与试药1.1 仪器日本岛津高效液相色谱仪，包括LC-10Advp型泵、SPD-10A型紫外检测器和CTO-10AS型柱温箱;N-3000色谱工作站(浙江大学智达信息工程研究所)。
WX-80A旋涡仪(上海医科大学仪器厂)，TGL-16G高速台式离心机(上海安亭科学仪器厂)，AB204-A电子分析天平(上海梅特勒-托利多仪器公司)，PHS-3C精密pH计(上海雷磁仪器厂生产)。
Rp-HPLC法测定人血浆中三唑仑的浓度
Rp-HPLC法测定人血浆中三唑仑的浓度摘要】目的建立以反相高效液相色谱法测定人血浆中血药浓度三唑仑的方法。
方法采用Diamonsil C18(250nm×4.6nm，5μm)色谱柱，流动相为甲醇：水(60:40)，流速为1.0ml/min，检测波长为234nm，柱温为25℃，采用蛋白沉淀法处理血浆样品。
结果三唑仑血浆浓度在7.70～38.50μg(r=0.9997)范围内线形关系良好，低、中、高三种浓度的平均相对回收率分别为101.23％、103.88％，102.25％，RSD均小于3％。
结论本方法简便、快速、准确、灵敏度高，可用于三唑仑血药浓度测定和人体药动学研究。
【关键词】三唑仑反相高效液相色谱法血药浓度三唑仑(diazepam) 具有抗惊厥、抗癫痫、抗焦虑、镇静催眠、中枢性骨骼肌松弛和暂时性记忆缺失（或称遗忘）作用。
三唑仑 , 又称海乐神、酣乐欣，淡蓝色片剂，口服后可以迅速使人昏迷晕倒，可溶于水及各种饮料中,三唑仑没有任何味道，见效迅速，药效比普通安定强45-100倍。
因此监测其血药浓度对临床治疗和中毒抢救均有重要意义。
本试验拟建立简便、快速、准确的反相高效液相色谱法测定的三唑仑血药浓度，为临床治疗和中毒抢救提供理论依据。
该药物的定性定、量方法，国内外文献有不同的报道，本文结合文献资料和实验筛选建立了相应的提取方法和色谱条件，结果方法简便、快速、重现性好，适合于临床血药浓度监测和药动学研究。
1 仪器与试药1.1仪器日本岛津LC-20AT高效液相色谱仪；Shimadzu LCSolution色谱工作站。
CPA225D电子分析天平；TGl6G型台式高速离心机；WH-2微型旋涡混合仪(上海沪西分析仪器厂有限公司)；艾科浦超纯水系统(Aquapro公司)。
1.2试药三唑仑化学对照品(中国药品生物制品检定所提供)；水为超纯水；甲醇(色谱纯)；乙酸铵(分析纯，北京化工厂)。
2 方法与结果2.1溶液的制备2.1.1 三唑仑标准贮备液精密称取于105℃干燥至恒重三唑仑对照品15.40mg置10ml棕色量瓶中，甲醇溶解后并定容至刻度，配得1.540 mg/ml标准贮备液，密封置于4℃冰箱保存。
RP-HPLC法测定人血浆中的头孢他美酸的浓度
RP-HPLC法测定人血浆中的头孢他美酸的浓度谢静;宋丽丽;庄展辉【期刊名称】《广东药学院学报》【年(卷),期】2001(017)001【摘要】目的：建立了血浆中头孢他美酸的HPLC测定方法并用于国产头孢他美特戊酯片的药动学研究。
方法：采用10%的高氯酸溶液直接沉淀血浆中的蛋白，取上清液在HpersilODS2柱上分析，流动相为V(乙腈)∶V(水)∶V(三乙胺)∶V(冰乙酸)=125∶875∶10∶5，采用UV检测器，于265nm处检测。
结果：头孢他美酸在0.1～20μg/mL范围内，峰面积与浓度线性关系良好(r=0.999991)，最低可定量浓度为0.1μg/mL，绝对回收率>85%，日内和日间RSD均<10%。
结论：该方法简易、准确，适用于头孢他美特戊酯片的药物动力学和生物利用度研究。
【总页数】2页(P48-49)【作者】谢静;宋丽丽;庄展辉【作者单位】深圳市人民医院药剂科，广东深圳 518000;河南大学制药厂;深圳市慢性病防治院【正文语种】中文【中图分类】R927.2【相关文献】1.RP-HPLC法测定人血浆和尿液中美罗培南浓度 [J], 孙亚欣;肇丽梅;朱旭;邱枫;何晓静;李明珠2.RP-HPLC法测定人血浆中头孢拉定的浓度 [J], 祖凤梅3.RP-HPLC法测定人血浆中美托洛尔浓度的临床应用 [J], 石保龙4.RP-HPLC法测定人血浆中奥美拉唑浓度及其在健康男性志愿者药代动力学研究[J], 胡玉荣;张楠;单丽红;田鑫;乔海灵5.异硫氰酸苯酯柱前衍生化RP-HPLC法测定人血浆中10种氨基酸的浓度 [J], 杨智;阳利龙;祝文兵;曹靖;何周康因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
HPLC法测定人血浆中头孢克肟的浓度
HPLC法测定人血浆中头孢克肟的浓度
徐大星;尧爱珉;冯芳
【期刊名称】《广州化工》
【年(卷),期】2013(041)010
【摘要】建立了人血浆中头孢克肟浓度测定方法.采用Phecda C18色谱柱,流动相:甲醇-0.075％三氟乙酸溶液(22∶78,v/v),流速:1.0mL·min-1,柱温:44℃,检测波长:288 nm.结果显示:建立的HPLC法在0.045 ～4.5μg·mL-1范围内线性关系良好,定量下限为0.045μg·mL-1；相对回收率为101.2％～105.1％；提取回收率为72.7％～72.8％；批内、批间RSD均小于5％,该法灵敏、准确、精密度高,适用于临床研究.
【总页数】4页(P159-161,208)
【作者】徐大星;尧爱珉;冯芳
【作者单位】中国药科大学药物分析教研室,江苏南京210009;中国药科大学药物分析教研室,江苏南京210009;中国药科大学药物分析教研室,江苏南京210009【正文语种】中文
【中图分类】R917
【相关文献】
1.离子对反相高效液相色谱法测定人血浆中头孢克肟的浓度 [J], 孙亚欣;肇丽梅;何晓静;邱枫;朱旭;赵冬梅
2.HPLC-MS/MS 法测定人血浆头孢克肟浓度的不确定度分析 [J], 李力;翟学佳
3.高效液相色谱法测定人血浆中头孢克肟浓度 [J], 张海波;张静;邵志高
4.高效液相色谱法测定人血浆中头孢克肟浓度 [J], 薛梅;吴振强;赖素萍
5.HPLC法测定人血浆中头孢克肟血药浓度 [J], 蔡爽;冯婉玉;李发美
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用HPLC法测定人血浆中头孢拉定浓度及药动学研究
用HPLC法测定人血浆中头孢拉定浓度及药动学研究侯常林;胡晓静;赵春杰【期刊名称】《药学服务与研究》【年(卷),期】2006(6)4【摘要】目的：建立测定头孢拉定在人体血浆中浓度的HPI。
C法，并计算药动学参数。
方法：18名健康志愿者单剂量VI服头孢拉定胶囊500mg，肘静脉取血并分取血浆，用甲醇沉淀血浆蛋白质，采用Hypersil ODS色谱柱（250mm×4．6mm，5μm），以乙腈-水-冰乙酸-三乙胺（10：90：0．14：0．16）作为流动相进行分离，检测波长262nm，流速为1．0mL／min。
结果：受试制剂和参比制剂中头孢拉定主要药动学参数：达峰时间tmax为（1．03±0．12）h和（1．03±0．12）h，峰浓度Cmax为（14．26±2．11）μg／mL和（14．13±2．11）μg／mL，消除相半衰期t1/23为（1．13±0．12）h和（1．11±0．12）h，AUC0～∞为（23．41±3．35）μg·h·mL^-1和（23．14±2．92）μg·h·mL^-1。
结论：该方法简便、准确、重现性好，适合头孢拉定的血药浓度测定。
受试制剂和参比制剂生物等效。
【总页数】3页(P283-285)【关键词】头孢拉定;色谱法;高压液相;血药浓度;药代动力学【作者】侯常林;胡晓静;赵春杰【作者单位】深圳万乐药业;沈阳药科大学药学院药物分析教研室【正文语种】中文【中图分类】R969.1【相关文献】1.HPLC法测定人血浆中盐酸二甲双胍的浓度及其在药动学研究中的应用 [J], 曲斌;杭太俊;江丽2.HPLC法测定中国健康人血浆中甲巯咪唑浓度及药动学研究 [J], 谢一凡;陈聪颖3.HPLC法测定中国健康人血浆中依帕司他浓度及药动学研究 [J], 谢一凡;陈聪颖;荣征星;赵咏桔;吴兰风;陈泽乃;陆阳;陈红专4.HPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中盐酸维拉帕米的血药浓度及其药动学研究 [J], 贾琪; 马文娟; 姚广哲; 欧阳慧子; 常艳旭; 何俊5.HPLC-MS/MS法测定人血浆中右旋雷贝拉唑和左旋雷贝拉唑浓度及其人体药动学研究 [J], 李相鸿;赵亚男;谢海棠;梁大虎;孙华;周理想;戴敏;杨斌;王伟佳;沈杰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
RP-HPLC法测定人血浆中头孢妥仑的含量
RP-HPLC法测定人血浆中头孢妥仑的含量李瑞明;宋桂军;马斌;张俊鹏;刘怡;赖宝龙;喻丽元;王振宁【期刊名称】《中国实用医药》【年(卷),期】2009(004)035【摘要】目的建立了RP-HPLC法测定人血浆中头孢妥仑的浓度.方法色谱柱Nucleodur C18 分析柱(4.6 mm×250 mm 5μm),流动相为0.03 %三氟乙酸缓冲液/乙腈(81/19,V/V),流速1.0 ml/min,检测波长为305 nm,柱温30℃,取上清液直接进样,进样量为20μL结果头孢妥仑线性范围为0.02～5.0μg/mL.头孢妥仑的最低检测限为0.02μg/mL,日内、日间RSD均小于5%,相对回收率为97.6%～104.5%,提取回收率均大于91.3%.结论这种验证方法灵敏、简便、可重复,足以用于药代动力学研究.【总页数】2页(P12-13)【作者】李瑞明;宋桂军;马斌;张俊鹏;刘怡;赖宝龙;喻丽元;王振宁【作者单位】510080,中山大学附属第一医院药学部;510080,中山大学附属第一医院药学部;510080,中山大学附属第一医院药学部;510080,中山大学附属第一医院药学部;510080,中山大学附属第一医院药学部;510080,中山大学附属第一医院药学部;510080,中山大学附属第一医院药学部;510080,中山大学附属第一医院药学部【正文语种】中文【相关文献】1.HPLC法测定人血浆中头孢妥仑的含量 [J], 王蒙;施爱明2.RP-HPLC法测定人血浆中苯巴比妥、苯妥英和卡马西平浓度 [J], 詹三华;李顺炜;毛名扬3.RP-HPLC法测定人血浆中头孢吡肟的含量 [J], 沈映冰;杨伟权;谢静文4.人血浆中头孢妥仑的HPLC测定 [J], 陈莉莉5.气相色谱法测定头孢妥仑匹酯中N,N-二甲基甲酰胺残留量 [J], 王晨; 李东伟; 崔晨辉; 王晶; 王彦广因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
RP-HPLC用于人血浆中头孢呋辛浓度的测定及其药代动力学的研究
RP-HPLC用于人血浆中头孢呋辛浓度的测定及其药代动力学的研究王萍;胡晓;李文【期刊名称】《南昌大学学报（医学版）》【年(卷),期】2009(049)007【摘要】目的建立一种RP-HPLC头孢呋辛人血浆药物浓度测定方法,并用于头孢呋辛酯片人体药代动力学的研究.方法采用RP-HPLC法测定头孢呋辛血药浓度,样品经过乙腈沉淀,氮气挥干,残渣用流动相再溶解.流动相:乙腈∶0.05 mol/L醋酸钠=10∶90;pH＝3.9;流速:1 mL/min.检测波长273 nm.结果头孢呋辛血浆浓度的标准曲线范围为0.11～10.56 mg/L(R2=0.9999),最低定量下限为0.11 mg/L;相对回收率在100%～104%之间,日内和日间RSD＜5%.结论该检测方法有很好的灵敏性、准确性和简易性.适用于头孢呋辛的血药浓度监测和人体药代动力学的研究.【总页数】4页(P25-27,44)【作者】王萍;胡晓;李文【作者单位】南昌大学医学院临床药理研究所,南昌,330006;南昌大学医学院临床药理研究所,南昌,330006;南昌大学医学院临床药理研究所,南昌,330006【正文语种】中文【中图分类】R969.1;R927.2【相关文献】1.RP-HPLC法测定人血浆依那普利拉浓度及其药代动力学研究 [J], 王宏良;费金钰;刘新义2.HPLC-UV法用于人血浆中罗红霉素的浓度测定及药代动力学和生物等效性研究[J], 张娟;张红;隋双明;刘建明;王萍;熊玉卿3.RP-HPLC法测定人血浆奥氮平浓度及其在健康志愿者的药代动力学研究 [J], 朱军;杨鸿;刘伟忠4.RP-HPLC法测定人血浆依那普利拉浓度及其药代动力学研究 [J], 王宏良; 费金钰; 刘新义5.RP-HPLC法测定人血浆中奥美拉唑浓度及其在健康男性志愿者药代动力学研究[J], 胡玉荣;张楠;单丽红;田鑫;乔海灵因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
HPLC法测定人血浆中头孢克洛浓度
HPLC法测定人血浆中头孢克洛浓度
张静;赵悦;刘广余;李健华;江翊国
【期刊名称】《药学与临床研究》
【年(卷),期】2002(010)003
【摘要】目的:采用高效液相色谱法测定人血浆中头孢克洛浓度.方法:以头孢拉定为内标,HPLC法测定.结果:头孢克洛的线性范围为0.25～30 μg/ml,回归方程为y=0.1105+0.0817x,r＝0.9995,最低检测浓度为0.125 μg/ml,日内RSD为
1.61%～3.54%,日间RSD为
2.15%～5.08%.结论:主要药代动力学参数与文献报道相似.
【总页数】3页(P11-13)
【作者】张静;赵悦;刘广余;李健华;江翊国
【作者单位】南京医科大学第一附属医院,南京,210029;南京医科大学第一附属医院,南京,210029;南京医科大学第一附属医院,南京,210029;徐州医学院,徐
州,221002;苏州市儿童医院,苏州,215003
【正文语种】中文
【中图分类】R97
【相关文献】
1.HPLC法测定人血浆中盐酸二甲双胍的浓度及其在药动学研究中的应用 [J], 曲斌;杭太俊;江丽
2.高效液相色谱法测定人血浆中头孢克洛浓度 [J], 钱南萍;魏润新;万维香
3.HPLC法测定人血浆中莫西沙星浓度及其在MDR-TB治疗中的临床应用 [J], 张婷婷; 卢弢; 徐然
4.HPLC-UV法测定人血浆中替考拉宁药物浓度的方法学研究及其临床应用 [J], 王彦改;沈芊;苏甦;王雪梅;姜德春;闫素英
5.HPLC法测定人血浆中奥卡西平活性代谢产物单羟基卡马西平的浓度 [J], 姚囡囡;周宇;付文倩;黄珊;宋洪涛
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高效液相色谱法测定人血浆中头孢拉定浓度
高效液相色谱法测定人血浆中头孢拉定浓度
庄江兴
【期刊名称】《海峡药学》
【年(卷),期】2002(014)004
【摘要】目的探讨用HPLC法测定人血浆中头孢拉啶浓度可行性. 方法用乙腈-1 mol·L-l 盐酸(95:5)混合沉淀血浆蛋白,在Spherisorb C 18柱上,以水-甲醇-3.86%醋酸钠溶液-4%酸醋溶液(800:240:15:3)为流动相进行分离,于 254mm检测.结果线性范围为1.0～128.0μg·mL-l,加样回收率为97 .8%～100.3%,日内RSD为0.93%～1.92%,日间RSD为1.65%～4.83%.结论本法简便,准确,重现性好,可用于患者临床血药浓度检测.
【总页数】1页(P53-53)
【作者】庄江兴
【作者单位】漳州市药品检验所,363000
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
【相关文献】
1.高效液相色谱-离子阱质谱法测定人血浆中的头孢拉定和青霉素G [J], 李晓东;尹利辉;冯玉飞
2.RP-HPLC法测定人血浆中头孢拉定的浓度 [J], 祖凤梅
3.高效液相色谱法测定人血浆中头孢拉定浓度 [J], 彭颖;方善康;金会
4.用HPLC法测定人血浆中头孢拉定浓度及药动学研究 [J], 侯常林;胡晓静;赵春杰
5.高效液相-串联质谱法测定人血浆中头孢拉定的质量浓度 [J], 潘杰;张全英;华雯妍;施爱明;朱艺芳;王蒙
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·586·Ch ina Pharmac y 2007Vo l .18No .8中国药房2007年第18卷第8期*副主任药师。
研究方向:药物管理与药物制剂。
电话:0731-*******。
E -mail :xdyyyjk @ RP -HPLC 法测定人血浆中头孢他美浓度邓晓彬1*,张献冲2(1.湖南劳动卫生职业病防治所附属医院,长沙市410007;2.中南大学药学院,长沙市410078)中图分类号R 969.1文献标识码A文章编号1001-0408(2007)08-0586-02摘要目的:建立以RP -HPLC 法测定人血浆中头孢他美浓度的方法。
方法:色谱柱为H yp ersil C 18,流动相为0.04%高氯酸溶液-乙腈(83∶17),柱温为40℃,流速为1.0m L ·m in -1,检测波长为265nm 。
结果:头孢他美检测浓度在0.125～8.0μg ·m L -1范围内与峰面积线性关系良好(r =0.9998),最低检出浓度为0.125μg ·mL -1,平均回收率为100.6%(RSD =1.2%);日内RS D ≤5.3%(n =5),日间RSD ≤4.0%(n =5)。
结论:本方法简便、灵敏、准确、重现性好,可为头孢他美酯胶囊药动学和生物利用度研究提供参考。
关键词RP -HPLC 法;头孢他美;血药浓度Determination of the Concentration of Cefetamet in Human Plasma by RP -HPLCDENG Xiaobin g (The Affilia ted Hos p ital ,H unan I nstitute of Labor H yg iene and Occu p ational M edicine ,Chang sha 410007,China )ZHANG Xianchon g (School of Pharmaceutical Sciences ,Central So uth Universit y ,Chan g sha 410078,China )ABSTRACT OBJECTIVE :To establish a RP -HPLC method for the determination of cefetamet in human p lasm a .M ETH _ODS :H yp ersil C 18w as used as colum n ,and 0.04%p erchloric acid -acetonitrile (83∶17)w as taken as mobile p hase .The col -umn temperature w as set at 40℃;The flow rate w as 1.0m L ·min -1and the detection w avelength w as 265nm .RES ULTS :The calibration curve show ed good linearity in a concent ration range of 0.125～8.0μg ·mL -1(r =0.9998),the minimum de -tect able concentration of cefetam et in plasma was 0.125μg ·mL -1,The average recovery rate w as 100.6%(RS D =1.2%).The wit hin -day RSD was less t han 5.3%(n =5)and the inter -day RSD was less than 4.0%(n =5).CONCLUS ION :T hemet hod is simple ,sensitive ,accurate and reproducibily and can be applied t o the pharmacokinetic and bioavailability study of cefet amet p ivoxil .KEY WORDS RP -HPLC ;Cefetamet ;Plasm a concent ration of dru g 比制剂口服后在人体内的药动学过程相似。
参考文献[1]苏德禹,徐朝焰,彭必新,等.阿莫西林-双氯西林治疗门诊感染患者临床观察[J ].中国临床药学杂志,2003,12(2):92.[2]国家药典委员会编.中华人民共和国药典(二部)[S ].2005年版.北京:化学工业出版社,2005:附录173.[3]陈红,张丹.RP -H PLC 法测定阿双西林片中阿莫西林双氯西林的含量[J ].药物分析杂志,2003,23(1):51.[4]蒋学华,陈得光,韦晓辉,等.阿双西林胶囊相对生物利用度研究[J ].中国临床药理学杂志,2000,16(3):198.(收稿日期:2006-10-09修回日期:2006-12-01)头孢他美酯(Cefetamet p ivoxil )是头孢他美(Cefet amet )的三甲基乙酰氧甲酯,为第3代口服头孢菌素,对革兰阴性菌及阳性菌均有抗菌活性,对链球菌、淋球菌、黏膜布兰球菌、流感嗜血杆菌、大肠杆菌、肺炎杆菌及变形杆菌均有较好抗菌作用,对多种β-内酰胺酶稳定[1,2]。
头孢他美酯为一前体药物,在体外无抗菌活性,口服后迅速吸收,并很快被肠壁和/或肝脏的非特异性酯酶水解为头孢他美而显示抗菌活性。
本试验通过建立头孢他美的RP -H PLC 定量方法,为头孢他美酯胶囊的药动学和生物利用度研究提供参考。
1材料1.1仪器1100高效液相色谱仪,包括G 1315B 二级管阵列检测器、G 1313A 自动进样器、色谱化学工作站(美国A g ilent 公司);AG 285电子分析天平(德国梅特勒公司);KS -600D 超声清洗机(宁波科生仪器厂);12-24型微量高速离心机(美国IEC 公司)。
1.2试药头孢他美酯胶囊(浙江震元制药有限公司,规格:0.125g ·粒-1,批号:060115);盐酸头孢他美对照品(浙江震元制药有限公司,含量:99.5%);乙腈、甲醇为色谱纯,其余试剂均为分析纯。
2方法[3]2.1色谱条件色谱柱:H ypersil C18(200m m×4.6m m,5μm);流动相[3]:0.04%高氯酸溶液-乙腈(83∶17);柱温:40℃;流速:1.0m L·min-1;检测波长:265nm。
2.2血样处理取血浆样品200μL于1mL离心管中,加6%高氯酸200μL,涡旋振荡1min,15000r·min-1离心10min,取上清液20μL进样。
外标法以峰面积进行定量分析。
2.3标准曲线的绘制准确称取头孢他美对照品25.5m g,置于25m L容量瓶中,用甲醇溶解并定容至刻度,摇匀,得1.02mg·mL-1的头孢他美对照品贮备液,置冰箱中冷藏,备用。
临用前以甲醇逐步稀释成不同浓度的系列对照品溶液,分别精密量取适量,加入200μL空白血浆中,配制成浓度为0.125、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0μg·mL-1的标准血浆,按“2.2”项下方法处理。
并按“2.1”项下色谱条件进样测定,以头孢他美峰面积(A)对浓度(C)进行线性回归,得回归方程为C=19.25A—0.36(r=0.9998)。
结果表明,头孢他美检测浓度在0.125～8.0μg·mL-1范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9998),定量下限浓度为0.125μg·m L-1。
色谱详见图1。
由图1可知,头孢他美峰形好,血浆内源性物质及其它杂质不干扰样品的分离测定,其保留时间约为6.3min。
2.4精密度试验于离心管中精密加入不同量的头孢他美对照品溶液适量,再精密加入空白血浆200μL,涡旋振荡1min,配成浓度分别为0.25、1.0、4.0μg·m L-1的标准血浆样品,按“2.2”项下方法操作,于日内和日间(连续3d)对每种浓度重复测定5次,记录峰面积,计算日内和日间RSD,考察日内、日间精密度,结果详见表1。
表1精密度试验结果(n=5)Tab1Results of p recisions(n=5)血浆浓度/μg·m L-1RSD/%日内日间0.255.34.01.03.74.24.01.82.32.5回收率试验分别取适量头孢他美对照品溶液于离心管中,精密加入空白血浆200μL,涡旋振荡1min,配成浓度各为0.25、1.0、4.0μg·m L-1的标准血浆样品,按“2.2”项下方法操作,每种浓度重复测定5次,记录峰面积。
将峰面积代入标准曲线计算血浆浓度,以测得值与加入值的比值计算回收率,结果详见表2。
表2回收率试验结果(n=5)Tab2Results of recovery test(n=5)加入量/μg·m L-1测得量/μg·m L-1回收率/%/%RS D/%0.250.25100.11.01.00100.0100.61.24.04.07101.8x2.6人体血药浓度测定笔者应用本文建立的测定方法,测定了18名健康受试者口服头孢他美酯胶囊0.5mg后的血药浓度。
经计算其部分药动学参数为:A UC0～∞为(25.3±5.31)μg·h·m L-1,t ma x为(2.68±0.57)h,C m ax为(4.68±0.95)μg·m L-1。
3讨论头孢他美酯胶囊口服后在胃肠道经非特异性酯酶作用发生水解,生成有抗菌活性的游离酸———头孢他美,水解近乎完全[2],体内无法检测到头孢他美酯原型药物,故测定其体内活性代谢产物头孢他美的浓度。
笔者采用二级管阵列检测器(DAD)在200～370nm波长范围内对样品溶液进行紫外扫描,发现在235、265nm波长处均有一吸收峰。
考虑到波长越大血浆中的内源性杂质吸收越小,对药物峰的干扰越小,故选择265nm为检测波长。
本法将样品只经简单去蛋白处理后直接进样,不涉及萃取、萃取溶剂转移和蒸发浓集等过程,又采用自动进样器进样,进样准确度较高,标准曲线各管与样品各管测定时的条件较一致,且获得了足够高的灵敏度,故可采用外标法直接定量分析。
本试验操作过程简单、快速,检测结果准确、灵敏度高、重现性好,可作为头孢他美酯胶囊药动学和生物利用度研究的方法。