高效液相色谱法在中药含量测定方面的应用
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高效液相色谱法在中药含量测定方面的应用高效液相色谱技术(HPLC)是一种重要的分离与分析技术,其具有高压、高速、高效、高灵
敏度、消耗样品少、色谱柱可反复使用、测定样品量少,容易回收等优势。
近年来,高效液相色谱检测中药的研究非常多,本文就HPLC在不同药物类型的中药活性成分中的应用进行综述,以供临床参考。
1.生物碱类成分含量测定
生物碱结构复杂在植物界分布较广,大多具有生理活性,为许多中草药及药用植物的有效成分。
郑丽娜等人[1]表明高效液相色谱法测定山豆根中苦参碱和氧化苦参碱的含量,此方法线性关系良好,精密度、稳定性、重现性均较好,回收率较高.
2.中药甙类成分的含量测定
甙类在高等植物较为普遍,其种类繁多,结构不一,生理活性具有多样性,已成为目前研究天然药物很重要的一大类成分。
黄秋妹[2]采用高效液相色谱法,以甲醇:0.1%磷酸溶液(17∶83)为流动相,检测波长为233nm,流速为1mL?min-1. 结果,线性范围为0.08445~
42.225mg,r值均为0.9999;回收率为99.46%,RSD分别为1.93%,1.74%。
3 .蒽醌类成分含量测定
中药中以蒽醌及其衍生物为主的蒽醌类成分较为普遍,其中何首乌及制何首乌中以蒽醌类活性成分为主。
彭贵龙等[3]人表明高效液相色谱法对大黄酸、大黄素和大黄酚分别在
0.0001~12.50μg/mL、0.0002~25.00μg/mL、0.00018~22.50μg/mL 范围内线性关系良好,相关系数(r)均大于0.9999,定性检测限(S/N=3)依次是:0.0703 ng/mL、0.0282 ng/mL、0.0871 ng/mL;样品回收率为88.39%~107.2%。
高效液相色谱法操作简单快速、定量准确、灵敏度高、成本低,为何首乌中蒽醌类化合物的检测分离及含量测定提供了一个有效的科学方法.
4 .黄酮类成分含量测定
酮类化合物数量之多位列天然酚性中化合物之首,植物体内其主要与糖结合成甙,小部分以甙元形式存在。
异黄酮可作为葛属植物质量的直接参考依据。
叶家宏等[4]人采用高效液相色谱法对制剂中葛根素、5.种游离蒽醌、毛蕊异黄酮苷进行定量分析.结果葛根素、毛蕊异黄酮苷、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的线性范围分别为0.077~1.54 μg(r=0.999 9),0.057 ~1.72 μg(r=0.999 9),0.016~0.49 μg(r=0.999 9),0.020 ~0.61 μg(r=0.999 9),0.018~0.54 μg(r =0.999 9),0.017 ~0.52 μg(r =0.999 9),0.023 ~0.70 μg(r=0.999 9),平均回收率依次为103.00%(RSD=1.37%,n=6),98.48%(RSD=1.95%,n=6),102.58%(RSD=1.84%,n=6),99.04%(RSD=1.81%,n=6),102.30%(RSD=1.71%,n=6),99.79%(RSD=1.83%,n=6),98.76%(RSD=1.75%,n=6).
6.香豆素类成分的含量测定
香豆素由酪氨酸衍生而来,是植物体内存在的一类具有 C6-C3 基本骨架的化学成分,是一些天然药物的指标活性成分。
毛志青等[5]人表明在一定的浓度范围内,花椒毒酚、佛手柑内酯、欧前胡素和异欧前胡素的浓度与峰面积线性关系良好且具备良好的加样回收率。
该试验建立的HPLC方法简便易行,可用于白芷中4个活性成分的含量测定.
7. 萜类成分的含量测定
萜类化合物结构复杂、种类较多、生理活性更是多种多样。
采用HPLC法可检测出一些中药萜类成分的含量。
王菊等[6]人表明本HPLC法操作简便、准确可靠,适用于莪术中莪术二酮、莪术醇、吉玛酮、呋喃二烯、β-榄香烯等5种倍半萜类成分的定量分析.
8.有机酸类成分的含量测定
有机酸广泛存在植物界的各个部位,许多有机酸具有生理活性,采用HPLC 法能测定多种有机酸的含量。
王建寰等[7]人表明原儿茶酸0.252~6.30 μg?mL-1、绿原酸4.51~112.8
μg?mL-1、咖啡酸0.133~3.32 μg?mL-1、阿魏酸0.112~2.80 μg?mL-1内均呈良好的线性关系(r>0.999),平均加样回收率、精密度、重现性和稳定性均符合有关规定.高效液相色谱法测定金银花操作简便,结果准确,为该类药材的入药及资源利用提供了依据.
9. 甾酮、甾醇类成分含量测定
中草药中含有甾酮、甾醇类成分则被视为具有生理活性,采用HPLC法能对其含量进行测定。
张薇薇等[8]人表明高效液相色谱法操作简便、灵敏、准确,具有良好的重复性和稳定性,适用于人工虫草和天然虫草中麦角甾醇的含量测定。
麦角甾醇进样量在0.1977~3.9549μg 范围内与峰面积呈良好线性关系(r=1.000),平均加样回收率为99.51%,RSD=0.56%(n=9)。
参考文献
[1] 郑丽娜,任海勇,李素君,等.基于急毒的山豆根生物碱类物质质量控制方法学研究[J].中国药物警戒,2012,(9):516-519.
[2] 黄秋妹.HPLC法测定八味肉桂片中芍药苷的含量[J].海峡药学,2009,21(3):50-51.
[3] 彭贵龙,周光明,杨远高,等.高效液相色谱同时测定何首乌中大黄酸、大黄素和大黄酚
的含量[J].四川大学学报(自然科学版),2014,(2):349-353.
[4] 叶家宏,段园园,申卫红,等.三黄桃葛胶囊中7种成分含量测定研究[J].中国药
业,2014,23(5):33-36.
[5] 毛志青,孟祥乐,李亚利,等.HPLC法测定白芷中4个香豆素类成分的含量[J].中国药
师,2011,14(2):205-207.
[6] 王菊,陆兔林,毛春芹,等.高效液相色谱法同时测定不同产地莪术饮片中5种倍半萜类
成分的含量[J].中国医院药学杂志,2012,32(24):1954-1957.
[7] 王建寰,张霞.高效液相色谱法测定金银花中4种有机酸含量[J].宁夏医科大学学
报,2013,35(3):350-352.
[8] 张薇薇,龚韬,韩东河,等.RP-HPLC测定人工虫草和天然虫草中麦角甾醇含量[J].中国中医药信息杂志,2014,(4):67-69.。