新城疫病毒HN蛋白单克隆抗体的制备及其抗原捕捉ELISA方法的建立
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新城疫病毒HN蛋白单克隆抗体的制备及其抗原捕捉ELISA
方法的建立
田莉莉;李丽
【期刊名称】《中国农学通报》
【年(卷),期】2012(28)17
【摘要】为建立一种快速的新城疫病毒病原检测方法。
本研究以原核表达的重组HN蛋白免疫7周龄BALB/c雌鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,经间接ELISA方法筛选,成功获得了1株能稳定分泌抗新城疫病毒HN蛋白的McAb杂交瘤细胞,命名为4E8,4E8亚类鉴定为重链属于IgG2a,轻链属于κ链。
以多克隆抗体作为包被抗体、单克隆抗体4E8作为检测抗体,通过双抗夹心ELISA各个反应条件的优化,建立检测新城疫病毒抗原捕捉ELISA方法。
该方法对EDSV、ITLV、IBV、IBDV不发生交叉反应,其敏感性比HA试验要高4倍以上,与RT-PCR相比较,符合率、敏感性和特异性分别为95.6%、93.3%、96.1%。
本研究建立的NDVAC-ELISA有良好的重复性、敏感性和特异性,可应用于新城疫病毒感染的早期诊断。
【总页数】5页(P92-96)
【关键词】新城疫病毒;HN蛋白;单克隆抗体;抗原捕捉ELISA;诊断
【作者】田莉莉;李丽
【作者单位】辽宁医学院畜牧兽医学院
【正文语种】中文
【中图分类】S855.3
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