血清蛋白抗体检测

血清蛋白抗体检测
此处着重介绍近年来新发展的颗粒凝胶免疫法在检测抗-IgA同种型方面的应用。

微量血凝抑制试验用于检测抗同种异型抗体。

由于需要特殊的同种异型Ig，因此一般实验室较少检测本项目。

这里仅做简单介绍。

（一）颗粒凝胶免疫法
1.检验方法学
（1）原理：
高密度合成多聚体有色颗粒上包被有人源多克隆IgA，将其与待检血清混合，若血清中含有抗-IgA抗体，则会引起这种有色颗粒发生凝集反应。

反应混合物通过加入到凝胶过滤基质中离心，发生凝集的有色颗粒不能通过凝胶间隙而留在凝胶上层，呈阳性反应。

未凝集的颗粒则通过凝胶间隙沉积在凝胶管的底部，呈阴性反应。

（2）器材：
凝胶卡离心机，涡旋仪，微量加样器。

（3）试剂：
抗-IgA检测试剂盒（内含凝胶卡、指示微粒、阴性对照血清及阳性对照血清）。

（4）操作：
1）在凝胶卡上适当位置标记待检样本名称，并设阴性、阳性对照。

2）血清样本解冻，离心1500g，10分钟。

3）吸取10μl待检血清加入到对应微管的反应孔腔中，同时加入阴性和阳性对照。

4）将指示微粒悬液置于涡旋仪上轻微混匀。

5）在已加入血样标本的微管反应孔加入50μl微粒悬液。

6）将凝胶卡室温（18～25℃）孵育5分钟。

7）离心10分钟。

8）按说明书要求观察和记录凝聚结果。

2.方法学评价
快速、简易、准确度高。

3.质量保证
血样和试剂使用之前务必达到室温；每一系列试验都要设阳性和阴性对照；冷冻或解冻状态下的血清在操作之前先离心；凝胶卡在使用之前如发现有气泡，有水滴在管壁上应先离心。

4.参考范围
阴性。

5.临床意义
临床输血前与IgA缺乏检测联用可快速检测严重IgA缺乏者是否含有抗-IgA，从而预防IgA输血过敏反应发生。

（二）微量血凝抑制试验
1.抗同种异型抗体筛检
被检血清在V型96孔微量反应板上作倍比稀释，以已知Gm、Km 抗原的抗D IgG致敏RhD阳性红细胞作为指示系统。

如有凝集反应，则为阳性，显示有抗IgG同种异型抗体，反之为阴性。

2.抗同种异型抗体特异性鉴定
将具有IgG同种异型抗体的血清与一组已知Ig同种异型的谱血清反应。

含有特异性抗体的血清可被相应抗原中和，而不与致敏红细胞发生凝集反应。

根据反应格局确定抗体特异性。