维生素C片3种含量测定方法的比较分析

维生素C片3种含量测定方法的比较分
析
摘要：目的对比维生素C片3种不同含量测定方法的准确性和可靠性。

方法应用紫外-可见光分光光度法、碘量法和高效液相色谱法针对维生素C片
中维生素C相应的含量加以测定。

结果通过实验观察，紫外-可见光分光光度法、碘量法和高效液相色谱法测定结果为标示量的98.5%-102.3%、98.6%-102.2%
和98.3%-100.4%，这几种维生素C含量测定方法所测定的结果都在《中国药典》
中所规定的93.0%-107.0%范围内。

结论三种维生素C含量测定方法在测定结
果上差异不明显，都能够应用于维生素C片质量的控制。

关键词：维生素C片；含量测定；比较分析
关于维生素C片，其是一种维生素类非处方药物，呈现为白色，或是略微带
有黄色的片剂[1]。

应用于坏死病的预防，也能够应用于紫癜和各种急慢性传染病
的辅助性治疗中。

现行的《中国药典》通过碘量法对维生素C片相应的含量进行
测定，但高效液相色谱法和紫外-可见光分光光度法两种方法也是维生素C含量
测定比较常用的两种方法。

本次研究应用上述三种方法实施维生素C含量的测定，对比三种测定方法的可靠性与准确性，现做出如下报告。

1 资料和方法
1.1 仪器、试剂和试药
仪器及容器：TU-1901双光束可见分光光度计，AG135电子天平，岛津LC-
20AB液相色谱仪，25ml酸式滴定管。

试剂和溶液：甲醇、乙腈都是色谱纯，水是超纯水，稀醋酸，碘滴定液。

试药：维生素C对照品采购于中国食品药品检定研究院，共计六批样品，详
见表一所示。

表一样品资料
编号生产企业批号规格
A四川依科制药有限公司151203
0.1g/片
B广东恒健制药有限公司150902
0.1g/片
C广东南国药业有限公司150802
0.1g/片
D
河北天成药业股份有限公
司
715113
03
0.1g/
片
E
广东华南制药集团有限公
司
151103
0.1g/
片
F华中制药股份有限公司
201507
96
0.1g/
片
1.2 方法
（1）高效液相色谱法。

将《中国药典》和有关文献资料作为参考，Agilent ZORBAX SB-Aq柱（4.6mm×250mm，5μm），流动相：5mmol/L磷酸二氢钾溶液（磷酸调节pH值2.0），流速：1.0 mL/min，检测波长：264nm，柱温：30度，进样量：10μL[2]。

对照品与供试品，加入醋酸溶液（新沸过的冷水：稀醋酸
=10:1）溶解并稀释，至维生素C相应的含量在10μg/mL左右，使用0.45μm滤膜过滤，取续滤液进样分析。

（2）紫外-可见光分光光度法。

对照品与供试品，
加入醋酸一定量的醋酸溶液（新沸过的冷水：稀醋酸=10:1），稀释，至维生素C
相应的含量在10μg/mL左右，使用0.45μm滤膜过滤，取续滤液，使用紫外-可
见光分光光度计依法进行244nm波长位置相应吸光度的测定，采用相同的方法，
使用醋酸溶液（新沸过的冷水：稀醋酸=10:1）进行空白对比试验。

（3）碘量法。

取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于维生素C 0.2g），置100ml量瓶中，加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml的混合液适量，振摇使维生
素C溶解，并稀释至刻度，摇匀，迅速滤过，精密量取续滤液50ml，加淀粉指示
液1ml，立即用碘滴定液（0.05mol/L）滴定至溶液显蓝色并持续30秒钟不褪[3]。

2 结果
2.1 线性关系考察
进行对照品系列溶液的相应配置，根据高效液相色谱法实施线性试验，相应
的回归方程是Y=30.556X－3.582 4 r=1。

结果显示维生素C在2.214-
16.605μg/mL浓度范围中和峰面积呈现为较好的线性关系。

然后根据紫外光分光
光度法实施线性试验，相应的回归方程是Y =0.0579X－0.003 r=0.999 9，结果
显示维生素C处于2.214-16.605μg/mL浓度范围和吸光度值之间呈现为较好的
线性关系。

2.2 重复性试验
精密称取相同批号的适量样品，共6份，采用以上几种方法分别实施维生素
C相应含量的测定，计算含量平均值和相对标准差的结果详见表二所示。

表二重复性实验结果
组别平均含量RSD（%）
高效液相色谱法100.60.4
100.5 1.5
紫外-可见光分光光
度法
碘量法99.80.6
2.3 回收率实验
取来维生素C含量已知的6份相同批次药品，各份为10mg，进行精密称定，根据已知含量的100%进行8.6mg维生素C对照品的加入，根据以上几种方法实施回收率相应的测定，实验结果详见表三所示。

表三回收率实验结果
组别回收率（%）RSD（%）
高效液相
99.60.4
色谱法
紫外-可见
99.30.4
光分光光度法
碘量法100.00.2
3 讨论
（1）溶剂的选取。

针对维生素C片来讲，其处于干燥的空气环境下比较稳定，然而水溶液不是十分稳定。

本次实验研究所选用的溶剂是醋酸溶液（新沸过的冷水：稀醋酸=10:1），能降低维生素C的氧化速度，但在整个操作过程中，用时越短越好。

（2）碘标准溶液的使用期限。

关于碘标准溶液，其应在标定的期限中加以应用，长期进行放置以后，也许会出现沉淀的情况。

因此，在对其进行实际应用之前，应执行振摇操作，以保证其均匀性，淀粉指示液需要临时用予以新配处理，确保使用碘量法进行测定的结果在准确性相互一致。

（3）色谱柱
的选取。

维C银翘片中维生素C相应含量的测定，应用氨基柱，在前期阶段的实
验中，观察到氨基柱需要比较长的平衡时间，保留时间比较容易发生漂移。

本次
实验研究选取的流动相是5mmol/L磷酸二氢钾溶液（使用磷酸调节pH值为2.0），亲水性C18柱，保留时间较为稳定，且具有比较良好的分离效果。

（4）几种方
法的对比分析。

比较几种维生素C相应含量的测定方法，都具有自身的优势特点。

针对紫外-可见光分光光度法而言，这种测定方法快速、精准，且比较简单，然
而在专属性方面较差。

针对碘量法而言，这种测定方法成本投入比较小，操作上
相对简单，灵敏度较低，受到人为因素的影响比较大。

针对高效液相色谱法而言，这种测定方法存在精准、灵敏度高和重现性好等诸多方面的优势，然而其也存在
一定的不足，诸如耗时较长，需要投入更多的成本。

综上所述，几种维生素C含量测定方法在结果上并无明显差异，都可以应用
在维生素C片质量控制工作的开展中。

参考文献：
[1]鲁瑞娟，许秋梅. QNMR法测定片剂中维生素B_6的含量[J]. 绍兴文理学
院学报（自然科学），2018，38（03）:61-65.
[2]刘炳坤，罗丽珠. 铈量法等测定维生素C片含量的比较[J]. 中国处方药，2019，17（07）:28-29.
[3]蒋江云. HPLC法测定维生素C片含量[J]. 齐鲁药事，2012，31
（11）:642-643+656.。