实验8——Vc含量的测定
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1. 引言
实验八：VC含量的测定 （2, 6-二氯靛酚法）
维生素C是一种己糖醛基酸，有抗坏血病 的作用，所以又称作抗坏血酸。维生素C广泛 存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特
别是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑
桔等食品中含量尤丰富。
OH
OH Hபைடு நூலகம்OO
HO OH
维生素C是一种水溶性维生素，在酸性介 质中很稳定，既使加热也不破坏；但在碱性 介质中不稳定，易于分解，特别在碱性条件 下加热，可大部分或全部破坏。它们易受空 气、光、热、酶、金属离子等的影响。
V1：滴定样品消耗染料的体积（mL） V2 ：滴定空白消耗染料的体积（mL） V3 ：滴定时吸取样品溶液的体积（mL） V4 ：样品定容的体积（mL）
6. 注意事项
（1）所有试剂配制最好用重蒸水。 （2）某些水果、蔬菜（如橘子、西红柿等）浆 状物泡沫太多，可加数滴丁醇或辛醇。 （3）提取的浆状物如不易过滤，亦可离心，留 取上清液进行滴定。
（4）整个操作过程要迅速，防止还原型抗坏血 酸被氧化。滴定过程一般不超过2min。滴定所 用的染料不应小于1mL或多于4mL，如果样品含 抗坏血酸太高或太低时，可酌情增减样液用量或 改变提取液稀释度。
（5）贮存过久的罐头食品，可能含有大量的亚 铁离子（Fe2+），要用8%的醋酸代替2%草酸。 这时如用草酸，亚铁离子可以还原2, 6-二氯靛酚 ，使测定数字增高，使用醋酸可以避免这种情况 的发生。
（2）2, 6-二氯靛酚溶液的标定：取5mL标准抗 坏血酸溶液于150mL三角瓶中，加入5mL2%草 酸溶液，用2, 6-二氯靛酚溶液滴定至微红色，且 15s不褪色。计算出1mL染料相当于抗坏血酸的 毫克数。另取2%草酸溶液10mL做空白。
滴定度T（mg/mL）=
C×V
V1-V2
T：每mL2, 6-二氯靛酚溶液相当于抗坏血酸的毫克数 C：抗坏血酸的浓度，mg/mL V：吸取抗坏血酸的体积，mL V1：滴定抗坏血酸消耗染料的体积，mL V2：滴定空白消耗染料的体积，mL
3. 实验材料、仪器与试剂 材料：枣 仪器：三角瓶、研钵、移液管、漏斗、铁架
台、容量瓶，滴定管、分析天平 试剂： 2%草酸溶液
标准抗坏血酸溶液（0.2mg/mL） 0.02% 2, 6-二氯靛酚
4. 实验步骤
（1）样品处理：称取4g枣，放在研钵中，加入 少许2%草酸溶液研碎，再转入100mL容量瓶中 ，加2%草酸定容至刻度，过滤备用。
（3）样品溶液的测定：吸取滤液10mL，用 已标定的2, 6-二氯靛酚溶液滴定至出现微红 色，且15s不褪色为止，记下消耗染料的体积 。同时，取10mL2%草酸做空白实验。
5. 结果计算
抗坏血酸含量（mg/100g）=（V1-V2）×T×V4 ×100 W×V3
T：滴定度（mg/mL）
W：样品的质量（g）
酚，本身则氧化为脱氢型。在酸性溶液中， 2, 6-二氯靛酚呈红色，还原后变为无色 。一 旦溶液中的VC全部被氧化时，则滴下的染料 立即使溶液变成粉红色。所以，当溶液从无 色变成微红色时即表示溶液中的VC刚刚全部 被氧化，此时即为滴定终点。
2, 6-二氯靛酚： 氧化态：深蓝色 碱 性：深蓝色
还原态：无色 酸 性：浅红色
维生素C具有较强的还原性，氧化后的 产物称为脱氢抗坏血酸，仍然具有生理活性 ，进一步水解则生成2, 3-二酮古乐糖酸，失 去生理作用。
O
C
14
HO C O
HO C
HC
HO CH
H2C OH
还原型
－ 2H ＋ 2H
O
C
14
OC O
OC
HC
HO CH
H2C OH
氧化型
2. 实验原理 还原型抗坏血酸能还原染料2, 6-二氯靛
实验八：VC含量的测定 （2, 6-二氯靛酚法）
维生素C是一种己糖醛基酸，有抗坏血病 的作用，所以又称作抗坏血酸。维生素C广泛 存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特
别是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑
桔等食品中含量尤丰富。
OH
OH Hபைடு நூலகம்OO
HO OH
维生素C是一种水溶性维生素，在酸性介 质中很稳定，既使加热也不破坏；但在碱性 介质中不稳定，易于分解，特别在碱性条件 下加热，可大部分或全部破坏。它们易受空 气、光、热、酶、金属离子等的影响。
V1：滴定样品消耗染料的体积（mL） V2 ：滴定空白消耗染料的体积（mL） V3 ：滴定时吸取样品溶液的体积（mL） V4 ：样品定容的体积（mL）
6. 注意事项
（1）所有试剂配制最好用重蒸水。 （2）某些水果、蔬菜（如橘子、西红柿等）浆 状物泡沫太多，可加数滴丁醇或辛醇。 （3）提取的浆状物如不易过滤，亦可离心，留 取上清液进行滴定。
（4）整个操作过程要迅速，防止还原型抗坏血 酸被氧化。滴定过程一般不超过2min。滴定所 用的染料不应小于1mL或多于4mL，如果样品含 抗坏血酸太高或太低时，可酌情增减样液用量或 改变提取液稀释度。
（5）贮存过久的罐头食品，可能含有大量的亚 铁离子（Fe2+），要用8%的醋酸代替2%草酸。 这时如用草酸，亚铁离子可以还原2, 6-二氯靛酚 ，使测定数字增高，使用醋酸可以避免这种情况 的发生。
（2）2, 6-二氯靛酚溶液的标定：取5mL标准抗 坏血酸溶液于150mL三角瓶中，加入5mL2%草 酸溶液，用2, 6-二氯靛酚溶液滴定至微红色，且 15s不褪色。计算出1mL染料相当于抗坏血酸的 毫克数。另取2%草酸溶液10mL做空白。
滴定度T（mg/mL）=
C×V
V1-V2
T：每mL2, 6-二氯靛酚溶液相当于抗坏血酸的毫克数 C：抗坏血酸的浓度，mg/mL V：吸取抗坏血酸的体积，mL V1：滴定抗坏血酸消耗染料的体积，mL V2：滴定空白消耗染料的体积，mL
3. 实验材料、仪器与试剂 材料：枣 仪器：三角瓶、研钵、移液管、漏斗、铁架
台、容量瓶，滴定管、分析天平 试剂： 2%草酸溶液
标准抗坏血酸溶液（0.2mg/mL） 0.02% 2, 6-二氯靛酚
4. 实验步骤
（1）样品处理：称取4g枣，放在研钵中，加入 少许2%草酸溶液研碎，再转入100mL容量瓶中 ，加2%草酸定容至刻度，过滤备用。
（3）样品溶液的测定：吸取滤液10mL，用 已标定的2, 6-二氯靛酚溶液滴定至出现微红 色，且15s不褪色为止，记下消耗染料的体积 。同时，取10mL2%草酸做空白实验。
5. 结果计算
抗坏血酸含量（mg/100g）=（V1-V2）×T×V4 ×100 W×V3
T：滴定度（mg/mL）
W：样品的质量（g）
酚，本身则氧化为脱氢型。在酸性溶液中， 2, 6-二氯靛酚呈红色，还原后变为无色 。一 旦溶液中的VC全部被氧化时，则滴下的染料 立即使溶液变成粉红色。所以，当溶液从无 色变成微红色时即表示溶液中的VC刚刚全部 被氧化，此时即为滴定终点。
2, 6-二氯靛酚： 氧化态：深蓝色 碱 性：深蓝色
还原态：无色 酸 性：浅红色
维生素C具有较强的还原性，氧化后的 产物称为脱氢抗坏血酸，仍然具有生理活性 ，进一步水解则生成2, 3-二酮古乐糖酸，失 去生理作用。
O
C
14
HO C O
HO C
HC
HO CH
H2C OH
还原型
－ 2H ＋ 2H
O
C
14
OC O
OC
HC
HO CH
H2C OH
氧化型
2. 实验原理 还原型抗坏血酸能还原染料2, 6-二氯靛