肺炎衣原体的检测及临床意义

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肺炎衣原体的检测及临床意义
一、生物学形状
1. 形态染色
肺炎衣原体的原体形态多样,电镜下可呈现典型的梨形,平均直径为0.38 μm。

肺炎衣原体包涵体不含糖原,故碘染色阴性。

2. 培养特性
鸡胚对肺炎衣原体不敏感,因此一般不用鸡胚传代,而HL和Hep-2 细胞株较易分离和传代,但在第一代细胞培养中很少形成包涵体,离心能促进肺炎衣原体对细胞的感染。

3. 抗原与分型
肺炎衣原体具有属特异性抗原和种特异性抗原,属特异性抗原主要为细胞壁的脂多糖和分子质量为39.5 kD 的主要外膜蛋白;种特异性抗原为98 kD 的主要外膜蛋白。

肺炎衣原体只有一个血清型。

4. 基因组
TW-183 株基因组全长1225 935 bp,G+C摩尔分数为40.57%,无质粒、前菌体和转座子样序列存在。

AR-39 株的基因组全长1 229 858 bp,G+C 摩尔分数为40.6%,研究还发现AR39株基因组中存在前噬菌体,不同来源的TWAR 株具有94%以上的DNA 同源性,与沙眼衣原体和警鹅热衣原体基因组的DNA 同源性均小于10%。

5. 抵抗力
抵抗力较弱,易受各种理化因素的影响。

对药物的抗菌谱类似于其他衣原体,对磺胺类耐药。

二、微生物学检验
1. 标本采集
由于痰液标本对培养细胞有毒性,因此,临床上通常采集咽拭子。

也可用气管镜采集气管内痰液或肺泡灌洗液。

接种细胞培养的标本宜用膜式滤菌器除去杂菌,不加抗生素。

若进行血清学试验,可取患者的外周血。

2. 标本直接检查
2.1 显微镜检查
姬姆萨染色或免疫荧光 McAb 染色检测肺炎衣原体包涵体及原体,方法简便,但阳性率较低。

2.2 核酸检测
采用PCR 技术检测肺炎衣原体DNA,不仅敏感性高,且可与其他两种衣原体进行区分
3. 分离培养与鉴定
目前通常采用细胞培养法,取咽拭子或下呼吸道标本,接种Hep-2 细胞或Hela229 细胞,再用肺炎衣原体McAb直接或间接法荧光染色,以是否出现包涵体而作出结论性报告。

4. 血清学试验
4.1 微量免疫荧光(MIE)法
该法是目前最常用的血清学方法,以TWAR 株的原体为抗原,检测患者肺炎衣原体抗体。

若IgM 抗体效价>1:16 和(或)IgG 抗体效价1:512 或双份血清抗体效价高了4倍或4 倍以上者,可诊断为急性感染;若IgM 抗体效价1:16 或IgG 抗体效价在1:(8~256),则为既往感染。

该法特异性、敏感性均较高,且可用于区分原发感染和再感染。

4.2 补体结合抗体检测
以衣原体属的原体为抗原进行补体结合试验,若抗体效价>1:64 和(或)双份血清抗体效价升高了4 倍或4 倍以上者,均可诊断为急性感染,但不能区分是哪种衣原体感染。

三、临床意义
肺炎衣原体是人类呼吸道疾病的重要病原体,主要引起成人及青少年的非典型肺炎,同时还可致支气管炎、咽炎、鼻窦炎及扁桃体炎等急性呼吸道感染。

感染后潜伏期平均约30 天,临床多表现为咽痛、声音嘶哑、发热,咳嗽(干咳为主),以及胸痛、头痛不适和疲劳等。

外周血白细胞计数大多正常。

老年患者临床表现可能较为严重,有时甚至是致死性的尤其是合并细菌感染或存在慢性阻塞性肺部等基础疾病时。

此外,发现肺炎衣原体感染与冠心病、心肌梗死、扩张型心肌病等心血管疾病以及脑血管疾病等具有相关性,其发生机制有待研究。

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