HJ587-2010 水质阿特拉津的测定 高效液相色谱法方法验证

方法验证报告
项目名称：水质阿特拉津的测定
方法名称：《HJ587-2010水质阿特拉津的测定高效液相色谱法》
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1实验室基本情况
1.1人员情况
实验室检测人员已通过《HJ587-2010水质阿特拉津的测定高效液相色谱法》
的培训，熟知标准内容、检测方法及样品数据采集和处理等，考核合格，得到公司技术负责人授权上岗。

1-1参加验证的人员情况登记表
姓名性别年龄职务或职称所学专业从事相关分析工作年限
1.2检测仪器/设备情况
设备编号设备名称规格型号计量/检定状态不确定度
液相色谱仪
1.3检测用试剂情况
试剂名称生产厂家、级别、规格备注甲醇
二氯甲烷
阿特拉津标准溶液
1.4环境设施和条件情况
实验室具有检定合格的温湿度计，环境可以控制在标准要求范围内，满足检测环境条件。

另外实验室配备了洗眼器、喷淋设施、护目镜、灭火器等的安全防护措施，符合实验室安全内务的要求。

2实验室检测技术能力
2.1方法原理及适用范围
本方法用二氯甲烷萃取水中阿特拉津，萃取液经过无水硫酸钠干燥后，用浓缩器浓缩至近干，以甲醇定容，通过具有紫外检测器的高效液相色谱仪进行测定。

以保留时间定性，外标法定量。

当样品取样体积为100ml时，本方法的
检出限为0.08μg/L，测定下限为0.32μg/L。

2.2试样的制备
用量筒量取100ml样品于205ml分液漏斗中，加入5g氯化钠摇匀。

用20ml 二氯甲烷分两次萃取，每次10ml，于振荡器上充分振摇5min。

注意手动振摇放气。

静置分层后，将有机相通过装有无水硫酸钠的漏斗，接至浓缩瓶中，注意无水硫酸钠充分淋洗。

合并两次二氯甲烷萃取液。

用浓缩仪浓缩至近干立即用甲醇定容至1.00ml，供分析。

试样保存在4℃冰箱中，在40天内分析完毕。

2.3标准曲线的绘制
取不同量的阿特拉津标准使用液（10mg/l），用甲醇稀释，配置成浓度为0.030﹑0.050﹑0.100﹑0.500﹑1.00μg/ml的标准系列，贮存在棕色小瓶中，于4℃冰箱中存放。

通过自动进样器分别移取5种浓度的标准使用液10.0μl，注入液相色谱，得到不同浓度的色谱图。

以色谱响应值为纵坐标，阿特拉津的浓度为横坐标，绘制标准曲线。

标准曲线线性试验结果见表2.1，相关系数均大于等于0.999。

表2.1阿特拉津标准系列0
管号12345标准使用溶液(μl) 3.0 5.01050100甲醇(μl)997995990950900阿特拉津浓度(μg/ml)0.030.050.10.5 1.0
标准曲线线性试验结果见表2.2。

表2.2各目标化合物曲线线性表
序号名称曲线方程相关线性系数1阿特拉津Y=2.1307-0.00490.9998
2.3检出限、测定下限确认
方法检出限参考《HJ168-2010环境监测分析方法标准制修订技术导则》附录A.1方法检出限确定，以4倍检出限作为方法测定下限，按照样品分析的全部步骤，重复n(n≥7)次空白试验，将各测定结果换算为样品中的浓度或含量，计算n次平行测定的标准偏差，按以下公式计算方法检出限
MDL=t(n-1,0.99)×S
式中：
MDL--------方法检出限；
n-------------样品的平行测定次数；S------------n 次测定的标准偏差。

其中，当自由度为n-1，置信度为99%时t 值可参考表4.2取值。

表2.3t 值表
平行测定次数（n ）
自由度（n-1）
t (n-1,0.99)76 3.14387 2.99898 2.896109 2.8211110 2.7641615 2.60221
20
2.528
液液萃取法，取水样体积为100ml，浓缩定容体积为1.0ml （1000μl ），样品中组分质量浓度（μg/L ）={曲线中质量浓度（mg/L ）×1000μl/100ml}⨯1000，即样品中组分质量浓度=曲线中质量浓度（mg/L ）⨯10。

方法的检出限为0.08μg/L ，测定下限为0.32μg/L 。

用浓度0.1mg/L 配制7个浓度为0.04mg/L 的样品，上机测试，平行测试7次。

计算化合物7次结果的标准偏差（SD），方法检出限（MDL）等于3.143*SD（当n 等于7时，t 值为3.143）
表2.4方法检出限、测定下限测试数据表
由表2.4可知，阿特拉津的方法检出限为0.05μg/L ，小于标准检出限0.08μg/L，合格。

2.4精密度确认
取HPLC 级别甲醇加入阿特拉津标液，制备浓度为1.0mg/L 、5.0mg/L 的空白样品，分别平行测定，根据6次测定值，计算化合物的相对标准偏差。

精密度结果见表2.5。

表2.5 1.0μg/l、5.0μg/l 样品精密度测试数据表
序号名称
测定值（mg/L）
标准偏差
S
方法检出限（mg/L）
方法检出
限（μg/L）
标准检出限(μg/L)
测定下限(μg/L)
1
2
3
4
5
6
7
1
阿特拉津
0.042
0.039
0.041
0.044
0.040
0.041
0.040
0.0015
0.005
0.05
0.08
0.32
名称
空白样品加标
标曲上的质量浓度（mg/L ）
---
精密度结果：含量为1μg/l的样品相对标准偏差为2.85%，含量为5μg/l的样品相对标准偏差为0.77%，精密度良好。

2.5准确度确认
取蒸馏水加入阿特拉津标液，制备浓度为2.0μg/l的空白样品，进行萃取后，分别平行测定，根据6次测定值，计算化合物的相对标准偏差。

相对误差结果见表2.6。

表2.6准确度（2.0μg/l）测试数据表
名称6次测定值
平均值（μg/L）阿特拉津123456
标曲上质
量浓度浓
度
(mg/L)
0.1860.1980.1930.1980.1960.1940.194
质量浓度
(μg/L) 1.86 1.98 1.93 1.98 1.96 1.94 1.94
相对误差
（%）
-6.9-1.1-3.6-0.8-2.2-2.9---综合以上数据可见，空白加标2.0μg/l时，相对误差小于标准要求的相对误差13%，合格。

表2.6准确度（样品加标1.0μg、5.0μg）测试数据表名称标曲所得6次测定值
阿特拉津123456
样品
含量
加标量（mg/L）0.010.0500.0520.0510.0520.0520.0510.042 0.050.0890.0920.0920.0880.0840.0910.042
浓度（mg/L)123456
阿特拉
津
0.10.1000.0950.0950.0950.0990.100
0.50.4820.4820.4770.4750.4780.485
空白样品加标
浓度（μg/L)
质量浓度（μg/L）
标准
偏差S
平均值
（μg/L）
相对标
准偏差
（%）
阿特拉
津1.0 1.000.950.950.950.99 1.000.02770.97 2.85 5.0 4.82 4.82 4.77 4.75 4.78 4.850.0368 4.800.77
加标量（μg）1.0 5.04 5.17 5.11 5.16 5.18 5.1 4.2 5.08.889.209.158.828.359.07 4.2
方法加标回收率（%）1.084.097.091.096.098.090.0-5.093.610099.092.483.097.4-
标准要求加标回收率（%）1.0
76.1
-100
76.1
-100
76.1
-100
76.1
-100
76.1
-100
76.1
-100
-5.0
76.6
-113
76.6
-113
76.6
-113
76.6
-113
76.6
-113
76.6
-113
-
3方法验证结论
（1）化合物标准曲线,相关系数为0.9998,线性良好。

（2）检出限结果：检出限为0.05μg/l,测定下限为0.20μg/l。

（3）精密度结果：含量为1μg/l的样品相对标准偏差为2.85%，含量为5μg/l的样品相对标准偏差为0.77%，精密度良好。

（4）综合以上数据可见，空白加标2.0μg/l时，相对误差小于标准要求的相对误差13%，合格。

样品加标1.0μg、5.0μg时,加标回收率范围为76.1-100%，76.6-113%，合格。

（5）该方法具有良好线性，同时具有较好的精密度和准确度，因此本实验室具备该项目的检测能力。