磷的检测方法

本标准参照采用国际标准ISO 3946-1982《淀粉及其衍生物磷总含量测定方法》。

1 主题内容与适用范围
本标准规定了分光光度法测定淀粉及其衍生物磷总含量的方法。

本标准适用于磷总含量小于5%(m/m)的淀粉及其衍生物样品。

2 术语磷总含量：淀粉及其衍生物样品中磷元素的全部含量。

以样品磷元素总重量对样品原重量的重量百分比来表示。

3 原理通过用硫酸/硝酸混合物破坏有机物质,并将磷酸盐转化为正磷盐,通过加入钼酸铵和还原剂,再形成磷酸钼,在波长825nm上用分光光度计测定吸光度,并转化成磷总含量。

4 试剂在测定过程中,只可使用分析纯的试剂和蒸馏水,或至少纯度相当的水。

4.1 硫酸/硝酸溶液：由一份体积的浓度96%(m/m)、ρ20为1.84g/mL的硫酸与一份体积的浓度65%(m/m)、ρ20为1.38g/mL的硝酸相混合而成。

4.2 硝酸：65%(m/m)、ρ20为1.38g/mL溶液。

4.3 抗坏血酸溶液：50g/L,该溶液只保存于冰箱内,保存时间最多为48h。

4.4 钼酸铵溶液：在一个1L烧瓶中,将10.6g钼酸铵四水化合物(NH4)6·Mo7o4·4H2O溶于500mL 水中,再加入500mL的10mol/L硫酸溶液使之混合并冷却至室温。

4.5 氢氧化钠溶液：10mol/L。

4.6 磷标准溶液
4.6.1 储液：称取无水正磷酸二氢钾0.4393g,精确至0.5mg,并溶于水中,再定量地移入1000mL容量瓶中,加水至刻度,并混合均匀,该标准溶液的每mL含100μg的磷。

正磷酸二氢钾使用前须在干燥烘箱内烘1h,干燥烘箱控制在105±2℃,然后放入干燥器中冷却至室温。

4.6.2 标准溶液：用吸管吸取10mL储液(4.6.1)注入250mL的容量瓶内,加水至刻度,摇匀,该标准溶液的每mL含4μg的磷。

5 仪器
5.1 容量瓶：容量分别为50、100、200、250和500mL。

5.2 锥形瓶：容量为50mL。

5.3 消化瓶：容量为100mL。

5.4 吸管：容量分别为1、2、5、10、15和25mL。

5.5 冷水浴槽：温度能控制在15～25℃之间。

5.6 沸水浴槽。

5.7 加热器。

5.8 干燥器：内有充足有效的干燥剂。

5.9 分光光度计：能被调至825nm波长,并备有适当的比色皿,光路长度为1.0cm。

5.10 分析天平。

6 分析步骤在2h内进行标准曲线的制作和测定。

6.1 标准曲线的制作
取七只50mL的锥形瓶(5.2),用吸管(5.4)分别将1.0、2.0、3.0、4.0、5.0和10.0 mL的磷标准溶液(4.6.2)放入其中六只锥形瓶内,它们分别对应于4、8、12、16、20和40 μg的磷。

七只锥形瓶分别加入水,使每只瓶的总体积为30mL,并混合均匀。

用吸管,按次序先加入4mL钼酸铵溶液(4.4),再加入2mL抗坏血酸溶液(4.3),每加入一只即混合均匀。

将七只锥形瓶置于沸水浴槽(5.6)中10min,然后插入冷水浴槽(5.5)中,使之冷却至室温。

定量地将烧瓶内溶液各倒入50mL容量瓶(5.1)中,加水至刻度,混合均匀。

用分光光度计(5.9)在波长825nm时测定吸收率,并以磷的毫克数作为吸收率的函数, 画出标准曲线。

6.2 样品的准备将样品混合均匀。

称取0.5g样品(6.2),精确至0.0002g,此重量而得到的吸收率应在范围0.1～0.7之间,若不符合,则按
下表调整样品量。

磷总含量估计值,% (m/m) 样品量g(见6.2) 稀释体积mL(见6.4) 等分体积mL(见6.5) ＜0.05 0.500 100 25
0.05～0.10 0.600 100 10
0.10～0.25 0.500 100 2
0.25～0.50 0.500 200 2
0.50～1.00 0.250 250 2
1.00～
2.00 0.125 250 2
2.00～5.00 0.125 500 2
6.3 消化将样品(6.2)倒入消化瓶(5.3),加入15mL的硫酸/硝酸溶液(4.1),并使之混合均匀, 将烧瓶置于加热器(5.7)上,渐渐加热至瓶内液体微沸,继续煮沸直至棕色气体变成白色,液体变成澄清为止。

若溶液出现深暗色不褪去,在继续蒸煮同时,逐滴加入硝酸溶液(4.2)使之消失。

待冷却后,加入10mL水并加热至瓶内再次出现白色蒸气为止,以除去过量的硝酸溶液。

6.4 样品液的制备再将瓶内溶液(6.3)冷却,并加入45mL水,用氢氧化钠溶液(4.5)将pH值提高到7。

再将瓶内溶液定量地移入一个具有适当容量的容量瓶(5.1)内,加水至刻度,并充分摇匀。

6.5 测定取一等分样品液(见表),将其放入50mL的锥形瓶。

用吸管,按次序先加入4mL钼酸铵溶液(4.4),再加入2mL抗坏血酸溶液(4.3),加后立刻混合。

将锥形瓶置于沸水浴槽(5.6)中10min,再放入冷水浴槽(5.5)中,使之冷却至室温,定量地移入50mL的容量瓶(5.1)内,加水至刻度,摇匀。

用分光光度计(5.9)在825nm波长时测定该溶液吸收率。

从标准曲线(6.1)上读出相应的磷的毫克数。

6.6 空白测定用水代替样品进行空白测定。

6.7 测定次数对同一样品(6.2)进行二次测定。

7 结果的表示
7.1 计算方法淀粉及其衍生物的磷总含量是以样品磷总重量对样品原重量百分比表示,为
m1×V0×100
X=─────────
m0×V1×10**6
式中：X--样品磷总含量,%；
m0--样品的重量,g；
m1--从标准曲线上确定的样品液的磷重量,mg；
V0--样品液(6.4)的定量体积,mL；
V1--用于测定的样品液的等分体积,mL。

如允许差符合要求,取二次测定的算术平均值为结果。

7.2 允许差分析人员同时或迅速连续进行二次测定,其结果之差的绝对值：当磷总含量大于0.2% 时,应不超过算术平均值的2%；当磷总含量小于0.2%时,应不超过算术平均值的0.004%。

GB/T 6438—92
1 主题内容与适用范围
本标准规定了测定饲料中粗灰分测定方法。

本标准适用于配合料、浓缩料及各种单一饲料中粗灰分的测定。

2 引用标准
GB 1.4 标准化工作导则化学分析方法标准编写规定
3 方法原理
试料在550℃灼烧后所得残渣，用质量百分率来表示。

残渣中主要是氧化物、盐类等矿物质，也包括混入饲料中的砂石、土等，故称粗灰分。

4 仪器与设备
4.1 实验室用样品粉碎机或研钵。

4.2 分样筛孔径0.45mm（40目）。

4.3 分析天平分度值0.0001g。

4.4 高温炉有高温计且可控制炉温在550±20℃。

4.5 坩埚瓷质，容积50mL。

4.6 干燥器用氯化钙（干燥试剂）或变色硅胶作干燥剂。

5 试样的选取和制备
取具有代表性试样，粉碎至40目。

用四分法缩减至200g，装于密封容器。

防止试样的成分变化或变质。

6 测定步骤
将干净坩埚放入高温炉，在550±20℃下灼烧30min。

取出，在空气中冷却约
1min，放入干燥器冷却30min，称其质量。

再重复灼烧，冷却、称量，直至两次质量之差小于0.000 5g为恒质。

在已恒质的坩埚中称取2～5g试料（灰分质量0.05g以上），准确至0.000 2g，在电炉上小心炭化，在炭化过程中，应将试料在较低温度状态加热灼烧至无烟，尔后升温灼烧至样品无炭粒，再放入高温炉，于550±20℃下灼烧3h。

取出，在空气
中冷却约1min，放入干燥器中冷却至30min，称取质量。

再同样灼烧1h，冷却，称量，直至两次质量之差小于0.001g为恒质。

7 分析结果计算和表述
粗灰分含量（％）按下式计算：
粗灰分（％）=〔（m2－m0）/（m1－m0）〕×100
式中：
m 0──
为恒质空坩埚质量，g；
m
1
──为坩埚加试料的质量，g；
m
2
──为灰化后坩埚加灰分的质量，g。

所得结果应表示至0.01％。

8 允许差
室内每个试样应称两份试料进行测定，以其算术平均值为分析结果。

粗灰分含量在5％以上，允许相对偏差为1％；粗灰分含量在5％以下，允许相对偏差为5％。

GB/T 6438—92
1 主题内容与适用范围
本标准规定了测定饲料中粗灰分测定方法。

本标准适用于配合料、浓缩料及各种单一饲料中粗灰分的测定。

2 引用标准
GB 1.4 标准化工作导则化学分析方法标准编写规定
3 方法原理
试料在550℃灼烧后所得残渣，用质量百分率来表示。

残渣中主要是氧化物、盐类等矿物质，也包括混入饲料中的砂石、土等，故称粗灰分。

4 仪器与设备
4.1 实验室用样品粉碎机或研钵。

4.2 分样筛孔径0.45mm（40目）。

4.3 分析天平分度值0.0001g。

4.4 高温炉有高温计且可控制炉温在550±20℃。

4.5 坩埚瓷质，容积50mL。

4.6 干燥器用氯化钙（干燥试剂）或变色硅胶作干燥剂。

5 试样的选取和制备
取具有代表性试样，粉碎至40目。

用四分法缩减至200g，装于密封容器。

防止试样的成分变化或变质。

6 测定步骤
将干净坩埚放入高温炉，在550±20℃下灼烧30min。

取出，在空气中冷却约
1min，放入干燥器冷却30min，称其质量。

再重复灼烧，冷却、称量，直至两次质量之差小于0.000 5g为恒质。

在已恒质的坩埚中称取2～5g试料（灰分质量0.05g以上），准确至0.000 2g，在电炉上小心炭化，在炭化过程中，应将试料在较低温度状态加热灼烧至无烟，尔后升温灼烧至样品无炭粒，再放入高温炉，于550±20℃下灼烧3h。

取出，在空气中冷却约1min，放入干燥器中冷却至30min，称取质量。

再同样灼烧1h，冷却，称量，直至两次质量之差小于0.001g为恒质。

7 分析结果计算和表述
粗灰分含量（％）按下式计算：
粗灰分（％）=〔（m2－m0）/（m1－m0）〕×100
式中：
m 0──
为恒质空坩埚质量，g；
m
1
──为坩埚加试料的质量，g；
m
2
──为灰化后坩埚加灰分的质量，g。

所得结果应表示至0.01％。

8 允许差
室内每个试样应称两份试料进行测定，以其算术平均值为分析结果。

粗灰分含量在5％以上，允许相对偏差为1％；粗灰分含量在5％以下，允许相对偏差为5％。