分散固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法同时测定植物饮料中的8种磺酰脲类除草剂

分析检测
分散固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法 同时测定植物饮料中的8种磺酰脲类除草剂
杜柏豪，陈超明，谭宇鹏，冯绮华
（康正检测服务股份有限公司，广东广州 510530）
摘 要：目的：建立同时测定植物饮料中8种磺酰脲类除草剂的超高效液相色谱-串联质谱法（Ultra Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry，UPLC-MS/MS）。

方法：样品经乙腈提取，盐析分层，高速离心后，乙腈相使用C18和Al-N固相萃取剂进行联合净化，最后经Poroshell120 EC-C18（150 mm×3.0 mm，2.7 μm）色谱柱洗脱分离，在电喷雾电离源正离子模式下进行离子化，采用多反应监测模式进行测定。

结果：8种磺酰脲类除草剂的基质曲线在10～500 μg·L-1呈现良好线性关系，相关系数r2均大于0.997。

在添加浓度为10 µg·kg-1、20 µg·kg-1、50 µg·kg-1的条件下，8种磺酰脲类除草剂在乌龙茶和凉茶中的平均回收率为73.5%～88.8%，相对标准偏差为2.69%～8.66%。

方法检出限为3.0 µg·kg-1，方法定量限为10.0 µg·kg-1。

结论：该方法回收率高，重现性好，且操作简单，可满足植物饮料中的8种磺酰脲类除草剂残留量的测定。

关键词：超高效液相色谱-串联质谱法；植物饮料；磺酰脲类除草剂；同时测定Simultaneous Determination of Eight Sulfonylurea Herbicides in Plant Beverages by Dispersive Solid Phase Extraction Coupled with Ultra Performance Liquid Chromatography
Tandem Mass Spectrometry
DU Baihao, CHEN Chaoming, TAN Yupeng, FENG Qihua
(Kangzheng Analysis Services Co., Ltd., Guangzhou 510530, China)
Abstract: Object: An ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry method was established for the simultaneous determination of eight sulfonylurea herbicides in plant beverages. Method: Samples were extracted with acetonitrile and then salted out and layered. After high-speed centrifugation, acetonitrile phase was jointly purified with using C18 and Al-N solid-phase extraction agents. Finally, through Poroshell120 EC-C18 (150 mm×3.0 mm, 2.7 μm) chromatographic column elution separation, then ionized in positive ion mode of electric spray ionization source and determined in multiple reaction monitoring mode. Result: The matrix curves of 8 sulfonylurea herbicides ranged from 10～500 μg·L-1 showed good linear relationships with the correlation coefficient r2 were both greater than 0.997. Under the conditions of spiked concentrations of 10 µg·kg-1, 20 µg·kg-1, and 50 µg·kg-1, the average recovery rates of 8 sulfonylurea herbicides in oolong tea and herbal tea were 73.5%～88.8%, while the relative standard deviations were 2.69%～8.66%. Moreover, the limit of detection of the method were both 3.0 µg·kg-1 and the limit of quantification of the method were both 10.0 µg·kg-1. Conclusion: The method had high recovery rate, good reproducibility and simple operation, which could satisfied the determination of 8 sulfonylurea herbicide residues in plant beverages.
Keywords: ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry; plant beverages; sulfonylurea herbicide; simultaneous determination
作者简介：杜柏豪（1989—），男，广东中山人，本科，工程师。

研究方向：食品、化妆品检验检测及检验实验室质量体系建设。

分析检测
磺酰脲类除草剂是一类毒性较低的高效广谱除草剂，对环境影响小，在全世界农药市场上占有重要地位[1-2]。

目前《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》（GB 2763—2021）只对部分磺酰脲类除草剂在小麦中的残留量做出规定[3]，对相关农作物终端产品的具体残留量则没有明确要求。

磺酰脲类除草剂的检测方法主要有色谱法[4]、色谱-质谱法[5]、毛细管电泳法等。

其中高效液相色谱-串联质谱法更适用于磺酰脲类除草剂的测定。

1 材料与方法
1.1 仪器与设备
AB4000Q三重四极杆质谱仪；LC-30AD液相色谱系统；Promax 2020摇床；3-18k高速离心机；Heidolph Multi Reax涡旋振荡器；KQ-800DB超声波清洗仪。

1.2 试剂与材料
标准品：噻吩磺隆、三氟甲磺隆、苄嘧磺隆、甲磺胺磺隆、醚苯磺隆、甲磺隆、甲基碘磺隆及胺苯磺隆（100 mg，纯度大于98%）；甲酸、甲醇、乙腈（HPLC级）；十八烷基键合硅胶C18粉末、中性氧化铝Al-N、氨基键合硅胶NH2粉末、石墨化炭黑粉末；氯化钠、无水硫酸镁、柠檬酸钠、柠檬酸氢二钠（分析纯）。

1.3 标准溶液的配制
分别称取各单标标准品0.010 0 g于10 mL棕色具塞容量瓶中，用适量乙腈超声溶解，并定容至刻度，所得储备液浓度为1 000 mg·L-1。

分别准确移取上述8种磺酰脲类除草剂的单标储备液100 µL于10 mL 棕色具塞容量瓶中，用乙腈定容至刻度，得到浓度为10 mg·L-1的混合标准中间液，摇匀后备用，现配现用。

分别移取一定量的混合标准中间溶液于5 mL 容量瓶中，用空白基质液逐级稀释成浓度为10 µg·L-1、20 µg·L-1、50 µg·L-1、100 µg·L-1、200 µg·L-1和500 µg·L-1。

1.4 样品前处理
称取10 g样品于50 mL聚四氟乙烯离心管中，加入10 mL乙腈，涡旋振荡30 s，加入1 g氯化钠、4 g无水硫酸镁、0.5 g柠檬酸钠及0.25 g柠檬酸氢二钠，混匀后涡旋振荡15 min，以8 000 r·min-1的速度离心5 min。

取上清液1.2 mL于预先装有25 mg C18粉末、25 mg Al-N粉末的2 mL离心管中，涡旋振荡1 min，再以10 000 r·min-1高速离心5 min，0.22 μm 滤膜过滤，滤液作为供试品用超高效液相色谱-串联质谱法测定。

1.5 色谱及质谱条件
1.5.1 色谱条件
色谱柱：Poroshell120 EC-C18（150 mm×3.0 mm，2.7 μm）；进样体积：10 µL；流速0.5 mL·min-1；柱温箱温度：40 ℃；流动相：乙腈（A），5 mmoL·L-1甲酸铵（B）；梯度洗脱程序：0～2 min，30% A；2～7 min，30%→95% A；7～10 min，95% A；10～12 min，30%→95% A；12～15 min，30% A。

1.5.2 质谱条件
离子源：电喷雾电离源；扫描方式：正离子模式；气帘气：206.84 kPa；毛细管电压：5 000 V；离子源温度：500 ℃；雾化气：344.73 kPa；加热辅助气：344.73 kPa；碰撞气：medium；采集模式：多反应监测模式。

具体的质谱扫描参数见表1。

2 结果与分析
2.1 线性关系和灵敏度
使用8种磺酰脲类除草剂呈阴性的乌龙茶样品按照1.4的方法进行处理，使用所得的空白基质液配制基质曲线。

得到拟合曲线方程的相关系数r2均大于0.997，见表2。

以信噪比3倍和10倍结合称样量和稀释倍数确定方法检出限和方法定量限分别为3.0 µg·kg-1和10.0 µg·kg-1。

2.2 精密度、回收率及重复性
对初步筛选8种磺酰脲类除草剂呈阴性的乌龙茶和凉茶饮料进行加标回收率实验。

加标量为定量限的1倍、2倍、5倍，试验结果见表3。

8种磺酰脲类除草剂的平均回收率为73.5%～88.8%，相对标准偏差为2.69%～8.66%，方法准确度较高，适用于批量测定实验。

2.3 样品的测定
随机选取20个实验室的日常来样，用上述方法进行测定。

对样品进行10 µg·kg-1、20 µg·kg-1、50 µg·kg-1混合标准的添加。

测定结果显示，20个样品中，8种磺酰脲类除草剂均未检出，回收率为75.9%～89.5%，RSD为3.05%～6.88%。

因不同添加水平的样品所得的8种除草剂的提取离子流图基本一样，只是响应强度不一样，所以选择展示添加水平50 µg·kg-1下的8种磺酰脲类除草剂的提取离子流色谱图见图1。

3 结论
本文使用分散固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法对植物饮料中的8种磺酰脲类进行测定。

分析检测
表1 8种磺酰脲类除草剂的质谱扫描参数
化合物离子化模式母离子（m/z）子离子（m/z）去簇电压/V碰撞能量/V
噻吩磺隆[M+H]+388.3167.2*60.021.6 388.3141.260.035.4
甲磺胺磺隆[M+H]+504.2182.2*86.030.4 504.2306.286.022.1
醚苯磺隆[M+H]+402.2167.178.026.2 402.2141.1*78.028.8
三氟甲磺隆[M+H]+446.0221.0*100.026.9 446.0195.1100.024.5
苄嘧磺隆[M+H]+411.0149.181.028.1 411.0182.1*81.026.3
胺苯磺隆[M+H]+411.1196.2*66.028.1 411.1170.166.031.6
甲磺隆[M+H]+382.2167.2*84.024.3 382.2141.284.031.1
甲基碘磺隆[M+H]+508.2167.1*91.035.2 508.283.291.042.6
注：“*”表示该离子为定量离子。

表2 8种磺酰脲类除草剂定量曲线方程、检出限及定量限
名称校正曲线r2线性范围/（µg·L-1）检测限/（µg·kg-1）定量限/（µg·kg-1）醚苯磺隆Y=4 399X+2 0250.999 410～500 3.010.0
噻吩磺隆Y=16 205X-6 7330.999 110～500 3.010.0
甲磺隆Y=22 653X-8 7990.999 010～500 3.010.0
胺苯磺隆Y=41 165X+15 4470.999 110～500 3.010.0
甲磺胺磺隆Y=7 555X+1 2710.997 910～500 3.010.0
三氟甲磺隆Y=10 887X-7 2240.999 710～500 3.010.0
甲基碘磺隆Y=12 446X+3 7700.999 510～500 3.010.0
苄嘧磺隆Y=7 054X+2 3440.998 410～500 3.010.0
表38种磺酰脲类除草剂回收率和相对标准偏差（n=6）
化合物添加水平/（µg·kg-1）回收率/%RSD/%回收率/%RSD/%乌龙茶凉茶
噻吩磺隆1078.57.1273.7 6.66 2080.1 5.9876.9 4.55 5083.2 6.4480.7 2.69
三氟甲磺隆1075.18.0880.5 6.66 2078.1 5.9882.2 4.65 5079.3 4.3384.6 4.11
苄嘧磺隆1081.2 6.4476.9 5.65 2082.8 5.3480.1 4.52 5083.1 2.9982.6 3.87
甲磺胺磺隆1080.98.6676.9 5.88 2086.7 6.4578.9 4.92 5088.8 3.7684.6 3.60
醚苯磺隆1074.8 4.7275.3 6.59 2074.3 5.7678.9 4.38 5081.9 4.4183.4 3.49
甲磺隆1075.8 6.6479.6 5.67 2078.7 6.0982.5 6.75 5080.2 4.5881.9 4.38
分析检测
（续表3）
02
4
681012
14
20406080100甲磺隆
m /z 382.2＞167.2
噻吩磺隆
m /z 388.3＞167.2相对丰度/%
相对丰度/%
醚苯磺隆
m /z 402.2＞141.1
2
4
6
810
12
14
20406080100相对丰度/%
2
4
6
8101214
020*********相对丰度/%
02
4
681012
14
020********* 胺苯磺隆
m /z 411.1＞196.2
甲磺胺磺隆
m /z 504.2＞182.2
三氟甲磺隆
m /z 446.0＞221.0
甲基碘磺隆
m /z 508.2＞167.1苄嘧磺隆
m /z 411.0＞182.1
02
4
6
8101214020406080100 0246
810
1214
20406080100 相对丰度/%
相对丰度/%
相对丰度/%
相对丰度/%
2
4
681012
14
0204060801000
2
4
6
8101214
020********* 时间/ mi n
时间/ mi n
时间/ mi n
时间/ mi n
时间/ mi n
时间/ mi n
时间/ mi n
时间/ mi n
图1 8种磺酰脲类除草剂的离子流色谱图（添加水平50 µg ·kg -1）
化合物添加水平/（µg·kg -1）
回收率/%
RSD /%回收率/%
RSD /%乌龙茶
凉茶
甲基碘磺隆
10
74.2
5.7773.5
6.72207
7.7 6.0980.8 5.11507
8.8 3.5483.1 4.37胺苯磺隆
1074.1 5.2876.98.092080.2 5.7779.07.5550
83.7
4.98
82.9
5.69
结果发现8种磺酰脲类除草剂在乌龙茶和凉茶中
的平均回收率为73.5%～88.8%，相对标准偏差为2.69%～8.66%，说明本文建立的方法回收率高，重现性好，适合用于植物饮料中8种磺酰脲类除草剂残留量的日常批量测定。

参考文献
[1]朱荷锄.磺酰脲类除草剂作用特点及其发展前景[J].中国植保导刊,2012,32(8):49-50.
[2]杨森,吴勇,刘洪明.磺酰脲类除草剂的研究进展[J].
现代农药,2022,21(2):14-21.
[3]国家卫生健康委员会,农业农村部,国家市场监督管理总局.食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量:GB 2763—2021[S].北京:中国标准出版社,2021.
[4]刘娇娇,张晨曦,张雪,等.离子液体溶剂浮选高效液相色谱法测定芸豆中5种磺酰脲类除草剂[J].粮食科技与经济,2019,44(10):78-81.
[5]田亚,张淑霞,孙转莲,等.HPLC-MS/MS 测定油菜花蜂蜜中20种磺酰脲类除草剂[J].食品工业,2023,44(2):277-282.。