蒽酮比色法测定可溶性糖

蒽酮比色法测定可溶性糖
一、原理：
糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糖醛，生成的糖醛或羟甲基糖醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糖醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比。

糖类与蒽酮反应生成的有色物质，在可见光区的吸收峰为630nm，可在此波长下进行比色，故可用于糖的定量。

二、材料、仪器设备及试剂
（一）材料
阴干野扁桃果实
（二）仪器设备
分光光度计、水浴锅、具塞刻度试管、移液管、容量瓶、定性滤纸等
（三）试剂
浓硫酸（比重1.84）、分析纯蔗糖、分析纯蒽酮、乙酸乙酯
蒽酮乙酸乙酯试剂：取分析纯蒽酮1g，溶于50ml乙酸乙酯中，贮于棕色瓶中，在黑暗中可保存数周，用时微热溶解结晶。

三、实验步骤
（一）标准曲线
1、1%蔗糖标准液
将分析纯蔗糖在80℃下（2h）烘至恒重，精确称取1.000g，加少量水溶解，转入100ml容量瓶中，加入0.5ml浓硫酸，用蒸馏水定容至刻度。

2、100μg/L蔗糖标准液
精确吸收1%蔗糖标准液1ml转入100ml容量瓶中，加水至刻度。

3、标准曲线
取20ml刻度试管11支，从0-10分别编号，按下表加入溶液和水。

然后按顺序向试管中加入0.5ml蒽酮乙酸乙酯试剂和5ml浓硫酸，充分振荡，立即将试管放入沸水浴中，逐管均准确保温1min，取出后自然冷却至室温，以空白作参比，在630nm波长下测其吸光度，的数据如下：
（二）可溶性糖的提取
1、提取
取野扁桃样品，擦净表面污物，称取果肉、果仁各5份（共10组）（详重见下表）分别放入10支刻度试管中，加5ml蒸馏水，塑料薄膜封口，于沸水中提取30min，提取液滤入25ml容量瓶，反复漂洗试管残渣，定容至刻度。

2、显色测定
吸取样品提取液0.5ml于20ml刻度试管中，加蒸馏水1.5ml。

按顺序向试管中加入0.5ml蒽酮乙酸乙酯试剂和5ml浓硫酸，充分振荡，立即将试管放入沸水浴中，逐管均准确保温1min，取出后自然冷却至室温，以空白作参比，在630nm 波长下测其吸光度，结果见下表：
四、结果计算
从回归方程求得糖量（y ） ×提取液量（5）×稀释倍数（5）
可溶性糖含量＝
吸取样品液的体积（0.5）
×100％
样品干重（0.05）×106
实验结果：
野扁桃果仁可溶性糖含量＝5.74％ 野扁桃果肉可溶性糖含量＝3.54％
新疆野扁桃果实糖酸
含量的测定
——蒽酮比色法测可溶性糖
指导老师：曾斌
实验指导老师：帕提曼
实验学生：苏瑞（063231240）
实验时间：2008年10月。