实验二 食品中氮含量的测定

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酱油中氨基酸态氮含量的测定

酱油中氨基酸态氮含量的测定
空白问题一般的酱油生产企业每天都要进行氨基酸态氮的检测因此也没必要每天都进行空白试验但是当蒸馏水或甲醛溶液换瓶后就一定要对空白重新试验在实践中发现每批的蒸馏水不同瓶的甲醛空白有时相差很大如果一直沿用一成不变的空白数据检测结果肯定会有很大的误差
酱油中氨基酸态氮含量的测定 目录—————————————————————1
PH=7.0 是溶液中游离氢离子与氢氧化钠标准溶液完全反应后的 PH 值,即 有效酸度 PH=8.2 是溶液中除有效酸度以外的物质与氢氧化钠标准溶液完全反应后的 PH 值,即总酸 PH=9.2 是溶液中氨基态氮中的羧基与氢氧化钠标准溶液完全反应后的 PH 值 本实验用的是 PH 为 8.2 和 9.2 数据。由于酱油还含有总酸度,即使不测定 总酸度,也有将总酸中和。用 PH=8.2 时氢氧化钠消耗的体积与 PH=9.2 时氢氧 化钠消耗的体积 的差计算出样品中氨基态氮含量。
5
PH 值
0.4647
4.1-4.4
空白测定 ????
0.20
0.39
【工作任务阶段小结】
实验中哪些地方需要进一步改进,简述你改进实验的思路? 空白问题 一般的酱油生产企业每天都要进行氨基酸态氮的检测,因此也没必要每天 都进行空白试验,但是,当蒸馏水或甲醛溶液换瓶后,就一定要对空白重新试 验,在实践中发现,每批的白数据,检测结果肯定会有很大的误差。
3
【仪器和试剂】
1.仪器 酸度计 PHS-3C 型、 磁力搅拌器 JB-1A、 碱式滴定管 (50ml) 、 容量瓶 (250ml) 2.试剂 0.04515mol/L 氢氧化钠标准溶液、 (1+1)甲醛溶液
【实验步骤】
氢氧化钠溶液的配制: 称取 0.5014g 氢氧化钠试剂溶解, 稀释后定容于 250ml

酱油中氨基酸态氮含量的测定

酱油中氨基酸态氮含量的测定

NaOH/mL 醛后消耗 NaOH/mL 醛后消耗 度/(mol/L)
NaOH/mL
NaOH/mL
3.31
7.82
0.21
1.38
0.05
2.结果计算 (V1 V2) c 0.014 100 V4 (V3 /V )
式中:ρ--样品中氨基酸态氮的含量,g/100mL; V1—测定用的样品稀释液加入甲醛后消耗氢氧化钠标准溶液的体积,mL; V2—试剂空白试验加入甲醛后消耗氢氧化钠标准溶液的体积,mL; V3—样品稀释液取用量,mL; V4—样品的体积,mL; V—样品稀释液的总体积,mL; c—NaOH标准溶液的浓度,mol/L; 0.014—1mL 1.000mol/L氢氧化钠标准溶液相当氮的克数。
(V1 V2 ) c 0.014 100
V4 (V3 /V )
(7.82 3.31) 0.05 0.014 100 5 (20 /100 )
=0.003157 x100 =0.3157 g/100ml
六、实验小结
• 本实验主要是要我们掌握电位滴定法的基本原理和操作要 点及进一步巩固电位滴定法的基本操作技能。在测定之前, 酸度计一定要进行校正,校正溶液的配制要准确。
测定步骤:样品采集与处理→样液制备→测定→ 数据处理。
三、仪Байду номын сангаас与试剂
仪器:酸度计、磁力搅拌器、100mL容量瓶、50mL碱 式滴定管、200mL的烧杯
试剂:36%甲醛溶液、0.050mol/L氢氧化钠标准溶 液、酱油、蒸馏水
四、测定步骤
1. 0.050 mol/L氢氧化钠标准溶液配制 准称2.00gNaoH 溶解 定容 1000mL容量瓶
一、目的与要求
1.了解食品中氨基酸态氮的来源、作用及测定方法 2. 领会和掌握双指示剂甲醛滴定法及电位滴定法 基本原理、操作要点。 3. 进一步巩固滴定分析和电位滴定法的基本操作 技能。

氮含量的测定实验报告

氮含量的测定实验报告

氮含量的测定实验报告氮含量的测定实验报告引言:氮是生命中不可或缺的元素,广泛存在于自然界中的有机物和无机物中。

测定氮含量的方法有很多,其中最常用的是凯氏法和尿素酶法。

本实验旨在通过凯氏法测定一种未知样品中的氮含量,并对实验结果进行分析和讨论。

实验步骤:1. 实验前准备:a. 将凯氏试剂配制好,包括硫酸、硫酸钠、硼酸和铁铵硫酸。

b. 预先称取一定量的未知样品。

c. 准备好所需的实验仪器和设备,包括烧杯、试管、分液漏斗等。

2. 样品预处理:a. 将称取好的未知样品放入烧杯中,加入一定量的硫酸。

b. 在通风橱中,加热烧杯,使样品中的有机物完全氧化。

c. 冷却样品,加入适量的硫酸钠溶液,以去除余下的氧化剂。

3. 氮含量测定:a. 将经过预处理的样品转移至试管中。

b. 依次加入硼酸和铁铵硫酸试剂,使样品中的氮与试剂发生反应生成含铁络合物。

c. 将试管放入水浴中加热,使反应充分进行。

d. 冷却样品,用蒸馏水洗涤试管,使试管内的溶液完全转移至烧杯中。

e. 加入亚硫酸钠溶液,使铁离子还原为亚铁离子。

f. 用甲基红指示剂滴定样品中的亚硝酸钠溶液,直至溶液颜色由红变黄。

g. 记录滴定所需的亚硝酸钠溶液的体积。

结果分析:根据实验测定的亚硝酸钠溶液的体积,可以计算出未知样品中氮的含量。

具体的计算公式如下:氮含量(%)=(滴定所需亚硝酸钠溶液体积× 0.014 × 100)/ 样品质量通过实验测定,我们得到了未知样品中氮的含量为X%。

根据这个结果,我们可以对样品进行进一步分析和判断。

比如,如果测定结果显示氮含量较高,可能说明样品中存在着过量的氮肥残留,对环境造成潜在的污染风险。

而如果氮含量较低,则可能暗示着样品中缺乏足够的氮源,对植物的生长发育产生不利影响。

结论:通过凯氏法测定,我们成功地测定了未知样品中的氮含量,并对实验结果进行了分析和讨论。

实验结果对于了解样品的氮营养状况以及可能存在的环境风险具有重要意义。

凯氏定氮法实验报告

凯氏定氮法实验报告

凯氏定氮法实验总结题目:蛋白质浓度测定(微量凯氏定氮法)姓名:穆拉地力·地力夏提学号:074031141一、【实验目的】1. 掌握凯氏定氮法测定蛋白质含量的原理和方法2. 学会使用凯氏定氮仪并学会用凯氏定氮仪测出小油馕中的蛋白质含量二、【实验原理】凯氏定氮法首先将含氮有机物与浓硫酸共热,经一系列的分解、碳化和氧化还原反应等复杂过程,最后有机氮转变为无机氮硫酸铵,这一过程称为有机物的消化。

为了加速和完全有机物质的分解,缩短消化时间,在消化时通常加入硫酸钾、硫酸铜、过氧化氢等试剂,加入硫酸钾可以提高消化液的沸点而加快有机物分解,硫酸铜起催化剂的作用。

使用时常加入少量过氧化氢作为氧化剂以加速有机物氧化。

消化完成后,将消化液转入凯氏定氮仪反应室,加入过量的浓氢氧化钠,将NH4+转变成NH3,通过蒸馏把NH3驱入过量的硼酸溶液接受瓶内,硼酸接受氨后,形成四硼酸铵,然后用标准盐酸滴定,直到硼酸溶液恢复原来的氢离子浓度。

滴定消耗的标准盐酸摩尔数即为NH3的摩尔数,通过计算即可得出总氮量。

在滴定过程中,滴定终点采用甲基红-次甲基蓝混合指示剂颜色变化来判定。

测定出的含氮量是样品的总氮量,其中包括有机氮和无机氮。

以甘氨酸为例,其反应式如下:NH2CH2COOH+3H2SO4 =2C02+3SO2+4H2O+NH3(1)2NH3 +H2SO4 = (NH4)2SO4 (2)(NH4)2SO4+2NaOH=2H2O+Na2SO4+2NH3 (3)反应(1),(2)在凯氏烧瓶内完成,反应(3)凯氏蒸馏烧瓶中进行(图1)。

蛋白质是一类复杂的含氮化合物,每种蛋白质都有其恒定的含氮量(约在14%~18%,平均为16%)。

凯氏定氮法测定出的含氮量,再乘以系数6.25,即为蛋白质含量。

三、【试验器材】1. 凯氏定氮仪2. 电炉3. 消化架4. 锥形瓶100ml(×5)5. 量筒10ml(×1)6. 滴定管(5ml,可读至0.02ml)7. 凯氏烧瓶(×2)8. 玻璃珠9. 吸耳球10.移液管(2ml,5ml,10ml×1)四、【实验试剂】1. 浓硫酸(A.R.)2. 硫酸钾-硫酸铜混合物:硫酸钾3份与硫酸铜1份混合研磨成粉末。

凯氏定氮法测定食品中氮含量

凯氏定氮法测定食品中氮含量

凯氏定氮法测定食品中氮含量摘要:凯氏定氮法首先将含氮有机物与浓硫酸共热,经一系列的分解、碳化和氧化还原反应等复杂过程,最后有机氮转变为无机氮硫酸铵,这一过程称为有机物的消化。

为了加速和完全有机物质的分解,缩短消化时间,在消化时通常加入硫酸钾、硫酸铜、氧化汞、过氧化氢等试剂,加入硫酸钾可以提高消化液的沸点而加快有机物分解,使用时常加入少量过氧化氢、次氯酸钾等作为氧化剂以加速有机物氧化。

消化完成后,将消化液转入凯氏定氮仪反应室,加入过量的浓氢氧化钠,将NH4+转变成NH3,通过蒸馏把NH3驱入过量的硼酸溶液接受瓶内,硼酸接受氨后,形成四硼酸铵,然后用标准盐酸滴定,直到硼酸溶液恢复原来的氢离子浓度。

滴定消耗的标准盐酸摩尔数即为NH3的摩尔数,通过计算即可得出总氮量。

在滴定过程中,滴定终点采用甲基红-次甲基蓝混合指示剂颜色变化来判定。

测定出的含氮量是样品的总氮量,其中包括有机氮和无机氮。

关键词:1.实验部分:1.1实验仪器及样品1.1.1 材料与试剂浓H2SO4、K2SO4、CuSO4·5H2O、NaOH、HCl、H3PO4、硼酸溶液(20g/L)30%氢氧化钠(分析纯)溶液;甲基红、乙醇、溴甲酚绿、定量滤纸等。

40 %NaOH 溶液:40 g NaOH 溶于100 mL水中;0.05 mol/LHCl标准液:4.2 mL HCl 溶于1000 mL 水中,碳酸钠法标定盐酸;2 % H3BO3溶液:H3BO3 2 mL 溶于100 mL 水中;硫酸钾-硫酸铜混合物:硫酸钾与硫酸铜以3:1 (W/W)配比混合研磨成粉末加速剂:K2SO4 150 g ,CuSO4·5H2O 10 g 仔细混匀研磨。

甲基红—溴甲酚绿混合指示剂:甲基红溶于乙醇配成0.1 % 乙醇溶液,溴甲酚绿溶于乙醇配成0.5 % 乙醇溶液,两种溶液等体积混合,阴凉处保存(保存期三个月以内)。

混合指示剂:0.1%甲烯蓝乙醇溶液50ml与0.1%甲基红乙醇溶液200ml 混合配成(贮于棕色瓶备用,这种指示剂酸性时为紫色,碱性时为绿色,变色范围窄且灵敏)硼酸-指示剂混合液: 2%硼酸溶液100ml,滴加混合指示剂贮备液,摇匀后溶液呈现紫红色即可(约加1ml左右混合指示剂)。

凯氏定氮法 标准

凯氏定氮法 标准

凯氏定氮法标准全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:凯氏定氮法是一种广泛应用于化学分析中的定量测定方法之一,主要用于测定样品中的氮含量。

凯氏定氮法具有精密度高、准确度好、操作简便等优点,因而在各种实验室中被广泛使用,成为化学分析领域中不可或缺的一种技术手段。

凯氏定氮法的原理是将待测样品中的氮转化为氨,然后将氨与一定量的盐酸反应生成氯化铵,最后利用碱液中的氯化钯催化氯化铵生成氨铁离子,并通过比色法测定氧化铁的含量或滴定法测定氢氧化铁的浓度,从而计算出样品中的氮含量。

凯氏定氮法的操作步骤包括样品准备、试剂配制、试验操作、数据处理等环节。

首先是样品的提取和制备,将待测样品研磨成粉末状或将溶液过滤提取。

其次是配制各种试剂,包括氧化剂、还原剂、盐酸、铁试剂等。

然后是按照一定的比例将样品溶液与试剂混合反应,生成氨气和氯化铵。

最后通过比色法或滴定法测定生成的氨铁离子,计算样品中的氮含量。

在实际操作中,为了提高分析的准确性和可靠性,需要注意几个关键环节。

首先是样品的称量和提取要精确,避免因为操作不当而引入误差。

其次是试剂的配制要准确,遵循操作规程,不得随意更改配制浓度或比例。

最后是在试验操作过程中要注意操作流程,避免外界干扰因素的影响,保证实验的结果准确可靠。

凯氏定氮法广泛应用于生物、环境、食品等领域的氮含量测定中。

在生物领域,凯氏定氮法被用于分析肥料中的氮含量,以指导农业生产。

在环境领域,凯氏定氮法被用于测定水体、土壤中的氮含量,以监测环境污染物的变化。

在食品领域,凯氏定氮法被用于检测食品中的蛋白质含量,保证食品质量和安全。

凯氏定氮法是一种可靠的氮含量测定方法,具有精密度高、准确度好、操作简便等优点。

在化学分析中扮演着重要角色,为各个领域的研究提供了有效的技术手段。

希望通过本文的介绍,读者对凯氏定氮法有了更深入的了解,能够在实验操作中更加熟练和自信。

第二篇示例:凯氏定氮法是一种用于测定样品中氮含量的经典方法,也被称为氮元素定量法。

酱油中氨基酸态氮含量的测定

酱油中氨基酸态氮含量的测定

酱油中氨基酸态氮含量的测定1. 引言酱油是中国传统的调味品之一,具有香味浓郁、色泽红亮等特点。

酱油中的氨基酸态氮含量是评价其质量的重要指标之一,因为氨基酸态氮是提供食品中蛋白质含量的主要指标之一。

本文将介绍如何测定酱油中的氨基酸态氮含量。

2. 实验原理酱油中的氨基酸态氮含量可以通过测定总氮含量和非蛋白质态氮含量来间接计算得到。

具体步骤如下:1.样品预处理:将待测样品与适量的硫代硫酸钠混合,加热破乳,并用水稀释至适宜体积。

2.总氮测定:采用Kjeldahl法对样品进行总氮测定。

首先,在蒸馏装置中加入硫化钠和碳酸钠作为催化剂,然后将样品加入消解管中与硫酸混合,进行消解。

接着,将消解液进行蒸馏,收集蒸馏液,并用硫酸钠溶液进行中和。

最后,用硫酸铵标准溶液滴定反应过程中形成的硫酸铵。

3.非蛋白质态氮测定:采用巴比特法对样品进行非蛋白质态氮测定。

首先,将样品与巴比特试剂(含有碱性氧化剂和碱性还原剂)混合,在加热条件下进行消解。

然后,用硫酸钠溶液对反应产物进行中和,并用硝酸钠标准溶液滴定反应过程中生成的亚硝酸盐。

4.氨基酸态氮计算:通过总氮含量和非蛋白质态氮含量的测定结果,可以计算出酱油中的氨基酸态氮含量。

3. 实验步骤1.样品制备:取适量待测样品,加入适量的硫代硫酸钠,并在加热条件下破乳。

然后用水稀释至适宜体积。

2.总氮测定:按照Kjeldahl法的步骤进行总氮测定。

3.非蛋白质态氮测定:按照巴比特法的步骤进行非蛋白质态氮测定。

4.计算结果:根据总氮含量和非蛋白质态氮含量的测定结果,计算出酱油中的氨基酸态氮含量。

4. 结果与讨论通过实验测定,得到了酱油中的总氮含量和非蛋白质态氮含量。

根据这些数据,可以计算出酱油中的氨基酸态氮含量。

通过对多个样品进行测试,并比较其结果,可以评估不同品牌或批次的酱油在氨基酸态氮含量上的差异。

5. 结论本实验介绍了一种测定酱油中氨基酸态氮含量的方法。

通过对样品进行总氮和非蛋白质态氮的测定,并计算出其差值,可以得到酱油中的氨基酸态氮含量。

氮含量测定

氮含量测定

第二章实验部分2.1 实验原料磷酸(85%wt):分析纯;上海晶纯实业有限公司;三聚氰胺:工业级;湖北宜化化工有限公司;七水氯化镧:分析纯;上海晶纯实业有限公司;氯化铝:分析纯;上海晶纯实业有限公司;氯化锌:分析纯;上海晶纯实业有限公司;MPP:自制,广东华南精细化工研究院;LDPE1:1F7B,中国石油化工股份有限公司;LDPE2:608,中国石油化工股份有限公司;Melapur200:DSM;超支化成炭剂:自制,广东华南精细化工研究院磷酸酯胺盐:自制,广东华南精细化工研究院3-羟基苯基磷酰丙酸(CEPPA):工业级,青岛东科化工有限公司;高纯铝粉:分析纯,上海晶纯实业有限公司;37%盐酸:化学纯,上海晶纯实业有限公司;2.2 实验仪器6511 型电动搅拌器:上海标本模具厂;500ml磨口三颈烧瓶;温度计;恒压滴液漏斗;X6精密熔点测定仪:北京第三光学仪器厂;马弗炉:沈阳市节能电炉厂;热重分析仪:TGA-50,日本岛津公司;红外光谱仪:Nicolet 360,美国尼高立公司;酸度计:BUSS单螺杆挤出机:AG. Basle. Switzerland;注塑机:CPC-1,震雄集团;锥形量热仪:ASTM M1354,英国FTT公司;氧指数仪:PDF-60,承德精密试验机有限公司;X射线光电子能谱仪:ESCALAB 250,美国Thermo electron公司电子万能试验机:WDT-D,承德精密试验机有限公司核磁共振仪:Bruker WM 300MHz或Unity 200MHz核磁共振仪2.3 性能测试与表征2.3.1 热重(TG)在氮气气氛下,取大约10mg的样品放置于坩埚中,以10℃/min的速率从室温加热到800℃,研究材料随温度升高的质量变化情况;2.3.2红外光谱(FTIR)采用美国NICOLET-360型红外光谱仪测试对样品进行化学组分分析,将样品与溴化钾混合,压片。

2.3.3水溶性称取1.0g试样于200ml烧杯中,加入100ml蒸馏水,放在磁力加热搅拌器上恒温(25℃)加热,并不断搅拌30min,取下烧杯静置24h。

氮含量测定实验报告

氮含量测定实验报告

一、实验目的1. 掌握氮含量测定的原理和方法;2. 了解实验操作流程及注意事项;3. 提高实验技能,培养严谨的科学态度。

二、实验原理氮含量测定是分析化学中的重要实验,常用的方法有甲醛法、凯氏定氮法等。

本实验采用甲醛法测定样品中的氮含量。

甲醛法是一种间接滴定法,通过测定样品中的铵盐含量来推算氮含量。

三、实验仪器与试剂1. 仪器:酸式滴定管、锥形瓶、移液管、容量瓶、玻璃棒、烧杯、电子天平等;2. 试剂:0.1mol/L NaOH标准溶液、1.0mol/L甲醛溶液、酚酞指示剂、硫酸铵标准溶液等。

四、实验步骤1. 样品处理:准确称取一定量的样品,用少量水溶解,转移至容量瓶中,定容至刻度线;2. 标准溶液的配制:准确移取一定量的硫酸铵标准溶液,加入适量的水,转移至容量瓶中,定容至刻度线;3. 滴定:取一定量的样品溶液,加入酚酞指示剂,用NaOH标准溶液滴定至粉红色出现,记录消耗的NaOH标准溶液体积;4. 计算氮含量:根据滴定消耗的NaOH标准溶液体积,计算样品中的氮含量。

五、实验数据与结果1. 样品处理:称取样品0.5g;2. 标准溶液的配制:移取硫酸铵标准溶液10.00ml;3. 滴定:消耗NaOH标准溶液20.00ml;4. 氮含量计算:样品中氮含量为1.8%。

六、实验结果分析本实验通过甲醛法测定样品中的氮含量,实验结果为1.8%,与理论值相近,说明实验方法可靠,操作步骤正确。

但在实验过程中,应注意以下几点:1. 样品处理过程中,应确保样品完全溶解;2. 标准溶液的配制过程中,应准确移取溶液,避免误差;3. 滴定过程中,应控制滴定速度,避免过快或过慢;4. 计算过程中,应准确记录数据,避免误差。

七、实验总结通过本次实验,我们掌握了氮含量测定的原理和方法,了解了实验操作流程及注意事项。

在实验过程中,我们培养了严谨的科学态度,提高了实验技能。

同时,本实验也提醒我们在实际操作中要注意细节,确保实验结果的准确性。

化合物中氮含量的测定分析

化合物中氮含量的测定分析

化合物中氮含量的测定分析化合物中氮含量的测定分析是一种常见的化学分析方法,用于确定化合物中氮的含量及其百分比。

这种分析方法广泛应用于农业、环境科学、食品科学等领域,以确定样品中的氮化物的浓度,从而了解其对环境和生物体的影响。

测定化合物中氮含量的方法有很多种,其中常用的有几种重要的方法,包括库尔-法尔氏法、氨吸收法、酚硫酸法等。

下面将详细介绍这些方法的原理和应用。

库尔-法尔氏法是一种直接测定样品中氨基氮含量的方法,适用于含有氨基官能团的化合物的测定。

其原理是样品中的氨基氮与库尔-法尔氏试剂反应生成深蓝色化合物,根据其吸收光谱测定氨基氮的含量。

该方法简单、准确,适用于各种类型的样品,因此广泛应用于农业、环境科学和食品科学等领域。

氨吸收法是一种间接测定样品中氮含量的方法,适用于含有氨基官能团以外的氮化物的测定。

其原理是将样品中的氮化物还原为氨,并通过吸收氨气的方式测定氮的含量。

该方法需要一些特殊的试剂和设备,但其灵敏度高、准确性好,适用于各种类型的样品。

酚硫酸法是一种测定有机化合物中总氮含量的方法,适用于各种类型的样品。

其原理是样品中的有机氮经酚硫酸的强酸氧化作用,转化为硝酸铵,然后通过吸收光谱法测定硝酸铵的含量,从而确定样品中的总氮含量。

该方法简单、准确,但对一些特殊的氮化物可能不敏感。

上述三种方法都可以用于测定化合物中氮含量,具体选择方法需要根据样品特点和研究目的来决定。

此外,还有其他一些方法,如高温燃烧法、化学吸附法等,也可以用于测定化合物中氮含量。

总结起来,化合物中氮含量的测定分析是一种重要的化学分析方法,广泛应用于农业、环境科学、食品科学等领域。

准确测定样品中氮的含量,可以了解样品对环境和生物体的影响,为科学研究和实际应用提供有力支持。

各种方法各有优缺点,根据具体情况选择合适的测定方法是很重要的。

(注:文章字数仅为610字,如需1200字以上内容,请继续补充相关内容。

食品中氮化合物含量的测定方法研究

食品中氮化合物含量的测定方法研究

食品中氮化合物含量的测定方法研究导言氮是生命中不可或缺的元素,也是食品中重要的组成部分之一。

氮化合物是食品中常见的一类有机和无机物质,包括蛋白质、氨基酸、硝酸盐和亚硝酸盐等。

准确测定食品中氮化合物的含量对食品质量和安全具有重要意义。

方法一:光谱法光谱法是一种常用的分析方法,通过测量氮化合物在特定波长下吸收或发射的光的强度,来确定其浓度。

这种方法对样品处理要求较低,可快速获得结果。

常用的光谱法包括紫外-可见光谱法和红外光谱法。

- 紫外-可见光谱法适用于蛋白质等有机氮化合物的测定。

它基于氮化合物分子间的电子共振现象而得出。

通过测量特定波长下的吸收光强度,可以计算出样品中氮化合物的浓度。

- 红外光谱法则根据氮化合物的特定谱带进行分析。

红外光谱仪通过测量样品在红外光波长范围内的吸收和散射性质,识别和分析其中的氮化合物。

方法二:色谱法色谱法是一类常用的分离和分析方法,可以对复杂混合物进行定性和定量分析。

常用的色谱法包括气相色谱和液相色谱。

- 气相色谱法适用于无机氮化合物和小分子有机氮化合物的分析。

样品通过气相色谱柱分离,再通过检测器的检测来定量。

这种方法操作简便,分辨率高,但对样品预处理过程要求较高。

- 液相色谱法则适用于高分子有机氮化合物和蛋白质等复杂混合物的测定。

样品在液相色谱柱中以不同的速率吸附和解释,通过检测器的检测来获得分析结果。

这种方法具有高精密度和高重复性,但操作相对复杂。

方法三:电化学法电化学法是利用氮化合物在电极上的氧化还原反应来测定其浓度的一种方法。

具体操作可以采用电化学滴定法、电化学阻抗法等。

- 电化学滴定法适用于蛋白质等具有氧化还原性的有机氮化合物的测定。

通过施加电位并测定滴定液的使用量,进而计算出溶液中的氮化合物浓度。

- 电化学阻抗法则利用氮化合物在电极上呈现特定的阻抗变化进行测定。

通过测量电极电势和电极接触的电导性来计算样品中氮化合物含量。

方法比较与应用不同的测定方法在精度、灵敏度和样品处理等方面各有优缺点。

铵盐中氮含量的测定实验报告(一)

铵盐中氮含量的测定实验报告(一)

铵盐中氮含量的测定实验报告(一)实验报告:铵盐中氮含量的测定实验目的测定不同铵盐中氮的含量,并比较它们的差异。

实验原理将待测样品的铵盐与硫酸钠反应生成硫酸氢铵,并通过蒸发和重量法计算样品中氮的含量。

实验步骤1.化学品准备:硫酸钠、氨水、盐酸、铵盐样品。

2.取一定量的铵盐样品加入反应瓶中,分别加入30ml水和2ml氨水溶液,摇匀后滴加10ml盐酸。

3.加入适量的硫酸钠,瓶口塞上塞子,放入沸水中加热20分钟后取出,放凉。

4.加入30ml蒸馏水,加热沸腾5分钟,去掉蒸发的水分。

5.将瓶子干燥至常温,计算出样品的质量并记录。

6.将瓶子放入105℃的恒温器中干燥至恒重,计算出样品的质量并记录。

7.计算样品中氮的含量,得出每个铵盐样品中的氮含量。

实验结果以下是实验结果的统计表格:铵盐样品样品质量/g 干燥后质量/g 氮含量/%氨基甲酸铵0.543 0.427 28.5氯化铵0.618 0.491 26.7硝酸铵0.562 0.461 24.9硫酸铵0.541 0.428 26.3实验结论在给定条件下,不同铵盐样品中的氮含量略有差异。

通过本次实验,我们可以更好地了解各种铵盐样品的性质和应用场景。

实验分析本实验中采用的是重量法来计算样品中氮的含量,该方法具有简单快捷、误差小等特点,是一种较为常用的氮测量方法。

不过,由于不同的铵盐样品中的氮含量不同,为了保证实验的准确性,我们应根据样品的特性和含量范围来选择适宜的测量方法。

实验感受本次实验需要仔细地测量每个样品的质量差异,要求具有一定的实验技能和耐心。

同时,实验中还需要注意化学品的储存和使用,确保实验过程的安全和健康。

通过本次实验,我对测定方法有了更深入的认识,同时也进一步加强了实验操作的技能。

参考文献1.张琪, 李世明, 罗华仁. 实验指导书[M]. 北京:高等教育出版社, 2016.2.沈承清, 王燕青. 化学实验指导书[M]. 上海:上海科学技术出版社, 2005.结论本次实验成功测定了不同铵盐样品中氮的含量,并比较了它们的差异。

凯氏定氮法测定食品中氮含量

凯氏定氮法测定食品中氮含量

凯氏定氮法测定食品中氮含量摘要:凯氏定氮法首先将含氮有机物与浓硫酸共热,经一系列的分解、碳化和氧化还原反应等复杂过程,最后有机氮转变为无机氮硫酸铵,这一过程称为有机物的消化。

为了加速和完全有机物质的分解,缩短消化时间,在消化时通常加入硫酸钾、硫酸铜、氧化汞、过氧化氢等试剂,加入硫酸钾可以提高消化液的沸点而加快有机物分解,使用时常加入少量过氧化氢、次氯酸钾等作为氧化剂以加速有机物氧化。

消化完成后,将消化液转入凯氏定氮仪反应室,加入过量的浓氢氧化钠,将NH4+转变成NH3,通过蒸馏把NH3驱入过量的硼酸溶液接受瓶内,硼酸接受氨后,形成四硼酸铵,然后用标准盐酸滴定,直到硼酸溶液恢复原来的氢离子浓度。

滴定消耗的标准盐酸摩尔数即为NH3的摩尔数,通过计算即可得出总氮量。

在滴定过程中,滴定终点采用甲基红-次甲基蓝混合指示剂颜色变化来判定。

测定出的含氮量是样品的总氮量,其中包括有机氮和无机氮。

关键词:1.实验部分:1.1实验仪器及样品1.1.1 材料与试剂浓H2SO4、K2SO4、CuSO4·5H2O、NaOH、HCl、H3PO4、硼酸溶液(20g/L)30%氢氧化钠(分析纯)溶液;甲基红、乙醇、溴甲酚绿、定量滤纸等。

40 %NaOH 溶液:40 g NaOH 溶于100 mL水中;0.05 mol/LHCl标准液:4.2 mL HCl 溶于1000 mL 水中,碳酸钠法标定盐酸;2 % H3BO3溶液:H3BO3 2 mL 溶于100 mL 水中;硫酸钾-硫酸铜混合物:硫酸钾与硫酸铜以3:1 (W/W)配比混合研磨成粉末加速剂:K2SO4 150 g ,CuSO4·5H2O 10 g 仔细混匀研磨。

甲基红—溴甲酚绿混合指示剂:甲基红溶于乙醇配成0.1 % 乙醇溶液,溴甲酚绿溶于乙醇配成0.5 % 乙醇溶液,两种溶液等体积混合,阴凉处保存(保存期三个月以内)。

混合指示剂:0.1%甲烯蓝乙醇溶液50ml与0.1%甲基红乙醇溶液200ml 混合配成(贮于棕色瓶备用,这种指示剂酸性时为紫色,碱性时为绿色,变色范围窄且灵敏)硼酸-指示剂混合液: 2%硼酸溶液100ml,滴加混合指示剂贮备液,摇匀后溶液呈现紫红色即可(约加1ml左右混合指示剂)。

食品中总氮的测定(精)

食品中总氮的测定(精)

实验二食品中总氮的测定(微量凯氏定氮法)(-)目的意义食物中蛋白质含量是计算人体蛋白质摄人量的基础资料。

各类食物的蛋白质含量很不均衡,故蛋白质含量测定可作为评价食物营养价值的重要指标。

通过本方法的学习要求掌握方法的原理、步骤和了解蛋白质系数在蛋白质含量计算中的应用。

(二)原理有机物中的氮在强热和浓H2SO4作用下,生成(NH4)2SO4,在凯氏定氮器中与碱作用,通过蒸馏释放出氨,用硼酸将氨吸收后以盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,计算蛋白质含量。

(三)仪器与试剂1. 定氮蒸馏装置(如图3-1),微量滴定管。

2.硫酸铜,硫酸钾,硫酸。

3.2%硼酸溶液称取20g硼酸溶解在少量蒸馏水中,再稀释至1000ml。

4. 混合指示剂1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。

5.40%氢氧化钠溶液40g氢氧化钠溶解于蒸馏水中,再稀释至100ml。

6.0.05mol/L盐酸标准溶液(四)操作步骤1.样品处理精密称取0.2~2.0g固体样品或2~5g半固体样品或吸取10~20ml液体样品(约相当氮30~40mg),移入干燥的100ml或500ml定氮瓶中,加人0.2g硫酸铜、3g硫酸钾及20ml硫酸,稍摇匀后于瓶口放一小漏斗,将瓶以45°角斜支于有小孔的石棉网上。

小心加热,待内容物全部炭化,泡沫完全停止后,加强火力,并保持瓶内液体微沸,至液体呈蓝绿色澄清透明后,再继续加热0.5h。

取下放冷,小心加20ml水。

放冷,移人100ml容量瓶中,并用少量水洗定氮瓶,洗液并入容置瓶中,再加水至刻度,混匀备用。

取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、硫酸按同一方法做试剂空白试验。

2.按图⒊1装好定氮装量,于水蒸气发生瓶内装水至约2/3处,加甲基红指示液数滴及数毫升硫酸,以保持水呈酸性,加入数粒玻璃珠以防暴沸,用调压器控制,加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。

3.向接收瓶内加入10m1 2%硼酸溶液及混合指示液1滴,并使冷凝管的下端插人液面下,吸取10.0ml样品消化稀释液由小玻杯流入反应室,以10ml水洗涤小玻杯并使其流入反应室内,塞紧小玻杯的棒状玻塞。

实验二总氮量的测定——凯氏定氮法

实验二总氮量的测定——凯氏定氮法

实验二总氮量的测定——凯氏定氮法实验目的学习凯氏定氮法的原理和操作技术实验原理常用凯氏定氮法测定天然有机物(如蛋白质、核酸及氨基酸等)的含氮量。

含氮的有机物与浓硫酸共热时,其中的碳、氢二元素被氧化成二氧化碳和水,而氮则转变成氨,并进一步与硫酸作用生成硫酸铵。

此过程通常称为“消化”。

但是,这个反应进行得比较缓慢,通常需要加入硫酸钾或硫酸钠以提高反应液的沸点,并加入硫酸铜作为催化剂,以促进反应的进行。

甘氨酸的消化过程可表示如下:CH2NH2COOH+H2SO4 + 3H2SO4→2CO2 + 3SO2 + 4H2O + NH32NH3 + H2SO4→(NH4)2SO4浓碱可使消化液中的硫酸铵分解,游离出氨,借水蒸气将产生的氨蒸馏到一定量、一定浓度的硼酸溶液中,硼酸吸收氨后使溶液中的氢离子浓度降低,然后用标准无机酸滴定,直至恢复溶液中原来的氢离子浓度为止,最后根据所用标准酸的摩尔数(相当于待测物中氨的摩尔数)计算出待测物中的总氮量。

实验器材1、50ml消化管或100ml凯氏烧瓶2、凯氏定氮蒸馏装置或改进型凯氏定氮仪3、50ml容量瓶4、3ml微量滴定管5、分析天平6、烘箱7、电炉8、1000ml蒸馏烧瓶9、小玻璃珠10、远红外消煮炉实验试剂1、消化液(过氧化氢:浓硫酸:水=3:2:1)200ml2、粉末硫酸钾—硫酸铜混合物16gK2SO4与CuSO4.5H2O以3:1配比研磨混合。

3、30%氢氧化钠溶液1000ml4、2%硼酸溶液500ml5、标准盐酸溶液(约0.01mol/L)600ml6、混合指示剂(田氏指示剂)50ml由50ml 0.1%甲烯蓝乙醇溶液与200 ml0.1%甲基红乙醇溶液混合配成,贮于棕色瓶中备用。

这种指示剂酸性时为紫红色,碱性时为绿色。

变色范围很窄且灵敏。

7、市售标准面粉和富强粉各2g操作方法1、凯氏定氮仪的构造和安装凯氏定氮仪由蒸汽发生器、反应管及冷凝器3部分组成。

图1.2.2 微量凯式蒸馏装置1.热源2. 烧瓶3. 玻璃管4. 橡皮管5.玻璃杯 6. 棒状玻塞 7. 反应室 8. 反应室外壳 9. 夹子 10. 反应室中插管 11. 冷凝管 12. 锥形瓶 13. 石棉网蒸汽发生器包括电炉及一个1—2L(升)容积的烧瓶。

营养学课件 食物中总氮的测定

营养学课件  食物中总氮的测定
缺点:操作比较复杂,含有大量碱性氨基酸的蛋白质 测定结果偏高。普通实验室中的空气中常含有少量的 氨,会影响结果,要尽可能快地对硼酸吸收液进行滴 定
? 那么,如何测定蛋白质含量呢
总氮量法
福林—酚试剂法

双缩脲法

紫外吸收法
凯氏定氮法
经典的凯氏定氮法仍是食品,饲料分析,种子鉴定及营养和 生化研究中最广泛应用且具有足够精度的方法。
一. 实验目的
1、掌握凯氏定氮法测定蛋白质含量的 原理和方法。
2、学会使用凯氏定氮仪(包括蒸馏、 滴定、蛋白质含量计算)。
7、蒸馏时,蒸气要均匀、充足,蒸馏中不得停火断气, 否则,会发生倒吸。操作时,应先将冷凝管下端提高液面 并清洗管口,再蒸1min 后关掉热源。
变为绿色后开始计时3分钟,然后使冷凝口离开液面1cm, 用蒸馏水洗涤冷凝口,继续蒸馏1min
8、对仪器进行洗涤时,要用蒸馏水洗三遍。
滴定时,液体变微红,且30s不褪色即到达滴定终点。
4、蒸馏时,一定要在蒸气发生瓶里加入沸石,防暴 沸。沸石晾干后可循环使用,每次开始蒸馏前一 定要加入新的沸石。
5、蒸馏时,加入的氢氧化钠必须过量,并且动作还要迅 速,以防止氨的流失。
6、蒸气发生瓶内的水装至2/3体积并且保持酸性(在蒸气 发生瓶内的水中加入稀硫酸,使之呈酸性,内加甲基橙指 示剂数滴,水应呈橙红色,如变黄时,应该补加酸),以 防止在碱性条件水中游离氨蒸出,使结果偏大。
2. 微量滴定管 3. 硫酸铜,硫酸钾,硫酸 4. 2%硼酸溶液
1.电炉 2.水蒸气发生器 3.反应室 4.冷凝管 5.蒸馏液接收瓶
5. 混合指示剂 0.1%甲基红乙醇溶液:0.1%溴
甲酚绿乙醇溶液=1:5,用前混合
6. 40%氢氧化钠溶液

氮含量的测定实验报告

氮含量的测定实验报告

一、实验目的1. 熟悉氮含量测定的原理和方法。

2. 掌握微量凯氏定氮法测定蛋白质含量的操作技术。

3. 通过实验,学会使用相关仪器和试剂,提高实验操作能力。

二、实验原理微量凯氏定氮法是一种经典的测定氮含量的方法,主要用于测定蛋白质、核酸等含氮有机物的氮含量。

该方法基于以下原理:1. 将含氮有机物与浓硫酸共热,经一系列分解、碳化和氧化还原反应,将有机氮转变为无机氮,生成硫酸铵。

2. 将消化液转入凯氏定氮蒸馏装置,加入浓氢氧化钠使呈碱性,加热蒸馏,释放出氨气。

3. 用硼酸溶液吸收蒸馏出的氨气,待吸收完全后,用盐酸标准溶液滴定,直至恢复溶液中原来氢离子浓度为止。

4. 根据所用标准酸的当量数计算出待测物中氮含量。

三、实验仪器与试剂1. 仪器:凯氏烧瓶、电炉、凯氏定氮蒸馏装置、锥形瓶、100mL容量瓶、酸式滴定管、移液管、电子天平等。

2. 试剂:浓硫酸、30%氢氧化钠溶液、克氏催化剂、2%硼酸、指示剂、0.1M HCl、食用面粉等。

四、实验步骤1. 准确称取食用面粉样品0.5g(精确到0.0001g)置于凯氏烧瓶中。

2. 加入浓硫酸5mL,摇匀,放置5分钟。

3. 将凯氏烧瓶置于电炉上,缓慢加热至溶液呈蓝色,继续加热至溶液呈透明状。

4. 加入克氏催化剂,继续加热至溶液呈透明状。

5. 将消化液转入凯氏定氮蒸馏装置中,加入30%氢氧化钠溶液10mL,使溶液呈碱性。

6. 将蒸馏装置连接好,加热蒸馏,收集蒸馏液于锥形瓶中。

7. 待蒸馏液冷却后,用0.1M HCl滴定至溶液呈微酸性,加入2%硼酸溶液10mL,继续滴定至溶液呈微红色。

8. 记录所用盐酸标准溶液的体积,计算待测物中氮含量。

五、实验结果与分析1. 实验数据:样品质量:0.5g盐酸标准溶液体积:20.00mL氮含量:X%2. 结果分析:根据实验数据,计算出样品中氮含量为X%。

与食用面粉的标准氮含量进行比较,分析实验结果的准确性和可靠性。

六、实验总结1. 通过本次实验,掌握了微量凯氏定氮法测定蛋白质含量的原理和操作技术。

硫酸铵含氮量的测定实验报告

硫酸铵含氮量的测定实验报告

硫酸铵含氮量的测定(甲醛法)一、实验目的1.了解酸碱滴定法的应用,掌握甲醛法测定铵盐中氮含量的原理和方法。

2.熟悉容量瓶、移液管的使用方法和滴定操作。

二、实验原理+4NH的a K 为81010106.5--<⋅⨯Ka c ,,故不能用NaOH 标准溶液直接滴定。

通常采用甲醛法间接测定铵盐中的氮含量。

甲醛与+4NH作用,定量生成H+和质子化的六亚甲基四胺+HN CH 462)(624624101.763)(64-+++⨯=++=+Ka OH H H N CH HCHO NH 生成H+和 +H N CH 462)( 可用NaOH 标准溶液滴定。

OH N CH OH H H N CH 24624624)(43)(+=++-++计量点时产物462)(N CH ,其水溶液显微碱性。

选用酚酞作指示剂。

颜色变化:淡红色浅黄色红色加甲醛后滴酚酞,滴NaOHNaOH ————)(三、实验仪器与试剂1、仪器:碱式滴定管,250ml 锥形瓶,100 ml 烧杯,100 ml 容量瓶,10.00 ml 移液管2、0.1000mol ·L-1NaOH 溶液, (1+1)甲醛溶液, 甲基红指示剂, 滴酚酞指示剂, 硫酸铵试样四、实验步骤准确称取424)(SO NH 试样0.80—0.90g 于100mL 烧杯中,加约30mL 蒸馏水溶解,定量转入100mL 容量瓶中,用蒸馏水稀至刻度,摇匀。

用移液管移取上述溶液10.00mL 于锥形瓶中,加1滴甲基红指示剂,此时溶液呈红色,用0.1000mol ·L -1NaOH 溶液中和至溶液呈黄色。

加入6mL (1+1)甲醛溶液,再加2滴酚酞指示剂,摇匀,放置1min 后,用0.1000mol ·L -1NaOH 标准溶液滴定至溶液由红色变为黄色,再变为微橙红色,并持续30s 不褪色即为终点。

平行测定三份。

624624101.763)(64-+++⨯=++=+Ka OH H H N CH HCHO NH O H N CH OH H H N CH 24624624)(43)(+=++-++-+++≅+≅≅OH H H N CH NH N 43)(444624Θ五、数据记录及计算 (M N =14.01) C NaOH =计算公式:%1000.10000.1010)(3⨯⨯⋅⋅=∴-s N NaOH N m M CV ω六、思考题1. 为什么不能用碱标准溶液直接滴定法测定铵盐中氮的含量?2. 为什么中和甲醛溶液中的游离酸用酚酞作指示剂;而中和铵盐试样中的游离酸则以甲基红作指示剂?上述操作中加入的NaOH 溶液的量是否需要准确读数和记录?为什么?。

氮含量的测定实验报告

氮含量的测定实验报告

氮含量的测定实验报告《氮含量的测定实验报告》实验目的:通过实验测定不同物质中的氮含量,了解氮元素在化学物质中的分布情况。

实验原理:氮含量的测定可以通过几种方法进行,其中最常用的是几种化学方法。

在本实验中,我们将使用几种不同的化学方法来测定不同物质中的氮含量。

这些方法包括盐酸钠法、硫酸铵法和Kjeldahl法。

实验步骤:1. 准备不同物质样品,包括有机物和无机物。

2. 使用盐酸钠法对无机物样品进行氮含量测定,记录实验结果。

3. 使用硫酸铵法对有机物样品进行氮含量测定,记录实验结果。

4. 使用Kjeldahl法对所有样品进行氮含量测定,记录实验结果。

5. 对实验结果进行分析比较,得出结论。

实验结果:通过实验测定,我们得到了不同物质中的氮含量数据。

在无机物样品中,盐酸钠法测定出氮含量较高,而硫酸铵法测定出的氮含量较低。

在有机物样品中,硫酸铵法测定出的氮含量较高,而Kjeldahl法测定出的氮含量较低。

综合比较得出,在不同物质中,氮含量的测定方法可能会有所不同。

结论:通过本次实验,我们了解了氮含量的测定方法及其在不同物质中的应用。

不同的化学方法可以得出不同的氮含量数据,因此在实际应用中需要选择合适的方法进行测定。

同时,我们也发现了有机物和无机物中氮含量的差异,这对于我们进一步研究氮元素在化学物质中的分布具有重要意义。

总结:本次实验为我们提供了一定的实验数据和经验,对于深入了解氮元素在化学物质中的分布以及氮含量的测定方法具有一定的指导意义。

希望通过本次实验,能够激发我们对氮元素及其化学性质的兴趣,为今后的科学研究奠定基础。

铵盐中氮含量的测定实验报告

铵盐中氮含量的测定实验报告

以下是一个铵盐中氮含量测定的实验报告的一般结构和内容:实验报告标题:铵盐中氮含量的测定实验报告1.引言:•介绍实验目的和意义:说明为什么要进行铵盐中氮含量的测定实验,以及该实验的重要性。

•相关背景知识:简要介绍铵盐的性质和用途,以及氮元素在植物生长和环境保护中的重要性。

2.实验方法:•实验器材和试剂:列举用到的实验器材和试剂,如烧杯、量筒、铵盐样品、硫酸、碱性高氯酸钾等。

•实验步骤:详细描述实验的操作步骤,包括样品的制备、试剂的配制、反应过程等。

3.实验结果:•数据记录:将实验过程中所获得的数据记录下来,包括样品的质量、试剂的用量、反应结果等。

•计算过程:展示氮含量的计算过程,如根据反应方程计算出氮含量的摩尔比例,并转化为质量比例。

•结果表格:将计算得到的氮含量数据整理成表格形式,并标明单位。

4.结果分析:•数据分析:对实验结果进行简要分析,比较不同样品之间的氮含量差异,并解释可能的原因。

•结果的准确性和可靠性:讨论实验的准确性和可靠性,如实验误差的来源和可能的改进方法。

5.结论:•实验结论:总结实验结果,明确铵盐中氮含量的测定结果。

•结论的意义和应用:讨论实验结果的意义和应用价值,如对农业、环境保护等方面的意义。

6.实验总结:•实验心得和体会:分享个人在实验过程中的体会和心得,如实验操作的注意事项、困难和解决方法等。

•实验改进建议:提出实验中可能存在的问题或不足之处,并提出改进的建议。

7.参考文献:•引用实验中所参考的文献和资料,包括实验教材、相关研究论文等。

以上是一个铵盐中氮含量测定实验报告的一般结构和内容,具体的实验报告可以根据实验所采用的方法和结果进行适当调整和补充。

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实验二食品中氮含量的测定
一、实验目的
1. 学习凯氏定氮法测定蛋白质的原理。

2. 掌握凯氏定氮法的操作技术,包括样品的消化处理、蒸馏、滴定及蛋白质含量计算等。

二、实验原理
蛋白质是含氮的化合物,食品与浓硫酸和催化剂共同加热消化,使蛋白质分解,产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵,留在消化液中,然后加碱蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后,再用盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量来乘以蛋白质换算系数,即得蛋白质含量。

因为食品中除蛋白质外,还含有其它含氮物质,所以此蛋白质称为粗蛋白。

三、仪器与试剂
(一)试剂
硫酸铜(CuSO4·5H20)、硫酸钾、硫酸(密度为1.8419g/L)、硼酸溶液(20g/L)、氢氧化钠溶液(400g/L)、0.01mol/L盐酸标准滴定溶液、混合指示试剂(0.1%甲基红乙溶液液1份,与0.1%溴甲酚绿乙醇溶液5份临用时混合)、大米。

(二)仪器微量定氮蒸馏装置:如图3- 所示。

四、实验步骤
1. 样品消化
称取黄豆粉约0.3 g (±0.001 g ),移入干燥的100 mL 凯氏烧瓶中,加入0.2 g 硫酸铜和6 g 硫酸钾,稍摇匀后瓶口放一小漏斗,加入20 mL 浓硫酸,将瓶以450角斜支于有小孔的石棉网上,使用万用电炉,在通风橱中加热消化,开始时用低温加热,待内容物全部炭化,泡沫停止后,再升高温度保持微沸,消化至液体呈蓝绿色澄清透明后,继续加热0.5 h ,取下放冷,小心加20 mL 水,放冷后,无损地转移到100 mL 容量瓶中,加水定容至刻度,混匀备用,即为消化液。

试剂空白实验:取与样品消化相同的硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸,按以上同样方法进行消化,冷却,加水定容至100 mL ,得试剂空白消化液。

2. 碱化蒸馏
量取硼酸试剂20.00 mL 于三角瓶中,使冷凝管的下端插入硼酸液面下,准确吸取10.00 mL 样品消化液进入反应室,并以50 mL 蒸馏水洗涤进样口流入反应室,棒状玻塞塞紧。

使10 mL 氢氧化钠溶液用玻璃漏斗注入反应室。

通入蒸汽蒸腾15 min 后,移动接收瓶,液面离开凝管下端,再蒸馏2min 。

然后用少量水冲洗冷凝管下端外部,取下三角瓶,准备滴定。

同时吸取10.00 mL 试剂空白消化液按上法蒸馏操作。

4. 样品滴定
以0.1 mol/L 盐酸标准溶液用自动电位滴定仪滴定样品和空白试样至pH 为5.0-5.2(国标中使用的甲基红-亚甲基蓝指示液的变色范围)。

5、数据记录
五、结果计算
10010100
0140.0)(21⨯⨯⨯⨯⨯-=F m c V V X
式中 X ——样品蛋白质含量(g/100g );
V 1——样品滴定消耗盐酸标准溶液体积(mL );
V 2——空白滴定消耗盐酸标准溶液体积(mL );
c ——盐酸标准滴定溶液浓度(mol/L );
0.0140 ——1.0mL 盐酸]/000.1)([L mol HCl c 标准滴定溶液相当的氮的质量(g ); m ——样品的质量(g );
F ——氮换算为蛋白质的系数,一般食物为6.25;乳制品为6.38;面粉为5.70;
高梁为6.24;花生为5.46;米为5.95;大豆及其制品为5.71;肉与肉制品为
6.25;大麦、小米、燕麦、裸麦为5.83;芝麻、向日葵5.30。

计算结果保留三位有效数字。

六、注意事项及说明
1. 本法也适用于半固体试样以及液体样品检测。

半固体试样一般取样范围为
2.00 g~5.00 g ;液体样品取样10.0 mL ~ 25.0 mL (约相当氮30 mg ~ 40 mg )。

若检测液体样品,结果以g / 100 mL 表示。

2. 消化时,若样品含糖高或含脂及较多时,注意控制加热温度,以免大量泡沫喷出凯氏烧瓶,造成样品损失。

可加入少量辛醇或液体石蜡,或硅消泡剂减少泡沫产生。

3. 消化时应注意旋转凯氏烧瓶,将附在瓶壁上的碳粒冲下,对样品彻底消化。

若样品不易消化至澄清透明,可将凯氏烧瓶中溶液冷却,加入数滴过氧化氢后,再继续加热消化至完全。

4. 硼酸吸收液的温度不应超过40℃,否则氨吸收减弱,造成检测结果偏低。

可把接收瓶置于冷水浴中。

5. 在重复性条件下获得两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%.
七、思考题
1. 预习凯氏定氮法测定蛋白质的原理及操作。

2. 蒸馏时为什么要加入氢氧化钠溶液?加入量对测定结果有何影响?
3. 在蒸汽发生瓶水中、加甲基红指示剂数滴及数毫升硫酸的作用是什么?若在蒸馏过程中才发现蒸汽发生瓶中的水变为黄色,马上补加硫酸行吗?
4. 实验操作过程中,影响测定准确性的因素有哪些?。

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