第十一章 分枝杆菌属 (Mycobacterium)

粗糙 乳酪色 + + +
光滑或粗糙 黄或橘色 ± + +
防治原则
• 正确用药，对抗结核药物不敏感 • 局限性病变结合外科手术 • 加强对艾滋病患者的预防和治疗
麻风分枝杆菌
－－生物学性状
• 为抗酸杆菌 • 细胞内寄生 • 标本检测可见成团，束状于细胞中 • 细胞呈泡沫状，称为麻风细胞 • 体外人工培养尚未成功 • 犰狳是动物感染模型
麻风分枝杆菌－－临床意义与微检
• 经呼吸道，破损皮肤、粘膜，接触传播 • 引起麻风病 • 微检：标本涂片抗酸染色是诊断麻风的主要依据
细菌主要侵犯
皮肤、神经
根据机体的免疫状态、病理变化、 临床表现分为——二型二类
二 型
瘤型（开放性）：
• 细胞免疫功能低下 • 麻风杆菌在体内大量繁殖 • 传染性强，若不治疗，病 情逐渐恶化 • 抗体与自身组织抗原形成 “麻风结节”—狮面状
炎和肿大的肺门淋巴结 )。 – 90% 以上的原发感染形成纤维化或钙化，不治自愈。少数 病灶扩散，引起肺外结核病。
继发感染——外源性或内源（原发感染遗留）性感染
– 多见成人，有免疫力 – 病灶局限，引起局部TB、开放性TB （反应剧烈，干酪性坏死、空洞）
2. 肺外感染
• 经淋巴、血液循环引起其它部位感染：
溶菌酶、青霉素等作用导致细胞壁肽聚糖的正常结构完整 性或其合成受阻, 导致菌体变成 L 型； 异烟肼则影响结核分枝杆菌细胞壁中分枝菌酸的合成 , 使 本菌出现抗酸染色阴性。
2. 培养特性
馋--营养要求较高，必须在含血清、卵黄、马铃薯、甘油
以及含某些无机盐类的特殊培养基（罗氏）上才能生长良好。
懒--生长缓慢，14-1 8 h分裂1次，在固体培养基上3-4 w才
脑、肾、骨、关节等结核
• 带菌痰液被咽入消化道引起肠结核、腹膜炎 • 免疫力极度低下着可引起全身粟粒状结核
Process of pathogenesis
M. tuberculosis enters the alveoli by airborne transmission
It resists destruction by alveolar macrophages and proliferate
• 细胞壁脂质含量占干重的60%。
（2）齐 -尼 (Ziehl- Neelsen) 抗酸染色法
5％石炭酸复红
初染
脱色 复染
3％盐酸酒精
碱性美蓝
分枝杆菌呈红色，其他 细菌和背景物质为蓝色
结果
（3）Much 颗粒
临床标本中可见有非抗酸性革兰阳性颗粒 , 即 Much 颗粒。
该颗粒在体内或培养中均能转变为抗酸性杆菌。
出现肉眼可见的菌落。
丑--典型菌落为粗糙型，表面干
燥呈颗粒状，不透明，乳白色或淡 黄色，如菜花样。
3．生化反应
• 生化反应不活泼，不发酵糖类 • 与非结核分枝杆菌鉴别： 耐热触酶试验－；（非结核分枝杆菌＋） • 与牛分枝杆菌鉴别
烟酸试验＋；（牛分枝杆菌－）
4.抵抗力
四抗
抗酸碱
怕湿热
抗碱性 染料
四怕
结核样型（闭锁性）：
• 细胞免疫功能正常 • 细胞内少见麻风杆菌 • 传染性小，病变发生于皮 肤和外周神经，可自行消 退，不侵犯内脏
二 类
未定型：
• 病变如一般非特异性炎症， 属麻风的早期病变 • 病变部位少见麻风杆菌 • 大多数病例最后转变为结 核样型
界线类：
• 为一过度阶段，兼有瘤型 和结核样型的特点，但程 度可以不同，可向两型转 化 • 病变部位可找到含细菌的 麻风细胞
4. 快速诊断：PCR等
5. 动物试验：豚鼠等
浓缩集菌
痰液、尿、粪等 4%NaOH、3%HCl或 6%H2SO4处理15 m 离心、沉淀
涂片染色 （>105cfu/ml）
分离培养(接种培养基) （>102-3cfu/ml）
检验程序
临床标本
涂片检查
直接 增菌
分离培养
核酸检测
抗体检测
处理过/无污染标本
– 非结核分枝杆菌（nontuberculos）
第一节、结核分枝杆菌
俗称结核菌，引起人类结核病的病原菌
－1882年德国细菌学家 Koch 发现 －1886年Lenmann与Neumann正式命名。
• 致病菌主要为：
－人型结核杆菌
－牛型结核杆菌
To enter bloodstream and seed other organs
To reseed the lungs
To lead to post-primary tuberculosis
( 三 ) 免疫性
1．结核分枝杆菌是胞内感染菌，机体抵抗结核分枝杆 菌感染主要是细胞免疫。 2．感染率较高 , 但发病率较低。 3．抗结核免疫属感染免疫，又称带菌免疫。 4 ．抗结核免疫与Ⅳ型超敏反应，免疫与超敏反应同行
蛋白质 糖类
引起迟发性超敏反应
细胞壁表面，类似荚膜，抗吞噬作用
(二)所致疾病
传播与扩散
细 菌 通过各种途径，引起各种结核
体 内 血液 淋巴管 消化道 支气管
呼吸道 消化道 破损皮肤粘膜
侵犯多种组织和器官 引起相应的结核病 扩散
1.肺部感染
原发感染——外源性感染
（反应一般，渗出性炎症）
– 多发生于儿童，无免疫力，原发综合征 (原发病灶、淋巴管
100个视野内发现1-9条抗酸菌 10个视野内发现1-9条抗酸菌
3＋
4＋
每个视野内发现1-9条抗酸菌
每个视野内发现9条以上抗酸菌
四、防 治 原 则
治疗
早期发现、早期治疗、 联合用药、彻底治愈
常用药物 异烟肼、利福平、链霉素、 乙胺丁醇、对氨水杨酸钠等
第二节、非结核分枝杆菌
非典型分枝杆菌(atypical mycobacteria)
实际应用
(1)接种对象的选择及接种效果的测定 (2) 婴幼儿结核病诊断的参考
(3) 流行病学调查
(4) 肿瘤病人的细胞免疫功能测定
三、微生物学检查法
确诊的主要依据
根据感染部位不同选择不同的标本
1. 标本处理：浓缩集菌（NaOH处理）
2. 直接镜检：抗酸染色、金胺染色 3. 分离培养：培养基、时间
抗青霉素 怕紫外线
怕抗结 核药物
怕酒精
5. 变异性
形态结构变异
典型形态－→细菌的L型
变 异 性
毒力变异 卡介苗－→牛结核杆菌的减毒株
耐药性变异 耐异烟肼及其它抗结核药物的菌株
二、致病性和免疫性
不产生内、外毒素，无侵袭性的酶。 脂质
(一) 致 病 物 质

索状因子(cord factor): 破坏细胞、引起肉芽肿； 磷脂(phosphatide): 引起结核结节及干酪样坏死； 蜡质(wax D): 引起迟发性超敏反应； 硫酸脑苷脂(sulfatides): 抑制吞噬体与溶酶体的结合
(四) 细胞免疫应答与 迟发型超敏反应
有毒TB菌
皮下
郭霍现象
正常豚鼠 10-14 d
以前感染过或免疫豚鼠 24-48 h 局部红肿、浅溃疡
局部红肿、溃疡
坏死，经久不愈
不扩散，有免 疫有超敏反应
局部反应小， 全身扩散
迟发型超敏反应伴随细胞免疫同时存在 保护性免疫应答是由结核分枝杆菌核糖体
• 是指结核分枝杆菌与麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌。 • 大多为环境中的腐生菌 • 对酸碱比较敏感 • 对常用抗结核药耐受
• 为条件致病菌，艾滋病患者易感染鸟复合分枝杆菌
结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌的区别
性状
结核分枝杆菌
非结核分枝杆菌
菌落 特征
外形 色泽 索状因子 毒力 中性红试验 测定 耐热H2O2酶试验 豚鼠致病
方法
注射于前臂皮内
结
果
48-72 h后观察结果
红肿硬结直径＞ 5mm者为阳性，≥ 15mm 为强阳性，对 临床诊断有意义。
两侧红肿 若 PPD-C 侧大于 BCG-PPD 侧时为感染，反之则为卡介
苗接种所致，＜ 5mm 者为阴性反应。
结 果 分 析
强阳性反应
可能有活动性结核，应进一步做其他检查。
防治 防
无特异方法，隔离
治
抗痨药，砜类药 （胺苯砜、苯丙砜）
To cause primary tuberculosis
Tissue destruction results from cellmediated hypersensitivity.
To spread to lymph nodes
Cell-mediated immune response stops cycle of destruction and spread.
结核病在旧中国流行严重，死亡率高
AIDS、吸毒、应用免疫抑制剂
以及耐药菌的出现，发病率有上 升趋势，成为全球性卫生问题 • 世界防治结核病日 －3月24日
一、生物学性状
1. 形态与染色
（1）形态
• 细长, 稍有弯曲, 两端呈圆形,可见分枝状。 • 人工培养基上呈多形性（球形、串珠形和丝状）。
• 无鞭毛, 无芽胞，有荚膜。
染色检查 抗酸染色 金胺O染色
液体培养基
固体培养基
豚鼠/小白鼠
6-8 w
37 oC， 5-10% CO2 >7 d <7 d
病变脏器 图片镜检 菌种鉴定
鉴定试验
慢生长菌 快速生长菌 抗酸染色
菌落特点 药敏试验
抗酸染色－－报告方式
报告方式 镜检结果 仔细检查300个视野未发现抗酸杆菌
±
＋ 2＋
300个视野内发现1-2条抗酸菌
第十一章
分枝杆菌属
(Mycobacterium)

分枝杆菌属的主要特点：
– 细长弯曲，分枝状生长 – 抗酸杆菌 (acid-fast bacilli)
细胞壁含有大量脂质（分枝菌酸）
– 引起疾病都呈慢性，并伴肉芽肿

分枝杆菌属细菌种类繁多，可分为：
– 结核分枝杆菌复合群(M. tuberculosis complex)
阳性反应（局部红肿硬节）
机体已感染过结核分枝杆菌或卡介苗接种成功，对结 核分枝杆菌有迟发超敏反应，说明有特异性免疫力。
结果分析
阴性反应
1）未感染过结核分枝杆菌 2）感染初期 3）老年人 4）严重结核病患者 5）细胞免疫功能低下 患有其他传染病如麻疹等导致的细胞免疫功能 低下者；艾滋病；肿瘤；用过免疫抑制剂者。
RNA 引起。
迟发型超敏反应主要由菌体的结核菌素蛋白
和蜡质 D 共同引起的。
综述之：
机体抗结核免疫特点：
传染、免疫、超敏反应
共存
( 五 ) 结核菌素试验
概念
应用结核菌素进行皮肤试验,来测定机体对结核杆菌
是否能发生迟发型（IV）超敏反应的一种试验。
材料
旧结核菌素 ( old tuberculin, OT)： 结核杆菌加热处理后提取的粗制品，主要为结核 菌蛋白 纯蛋白质衍化物 (purified protein derivative, PPD)： 三氯醋酸沉淀后的纯化物