环丙沙星单克隆抗体的制备

环丙沙星单克隆抗体的制备
贾杰只;陈晓丹;雷洁;张智英
【期刊名称】《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2011(039)009
【摘要】【目的】制备环丙沙星（Crprofloxacin,CPFX）单克隆抗体（monoclonal antibody,mAb）,并对其免疫学特性进行鉴定,为畜产品CPFX残
留的快速检测提供技术支持。

【方法】采用碳二亚胺法（EDC）,将载体蛋白牛血
清白蛋白（Bovine serum albumin,BSA）和鸡卵白蛋白（ovalbumin,OVA）分
别与CPFX偶联合成免疫抗原CPFX-BSA和包被抗原CPFX-OVA,经紫外（UV）
扫描和聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）鉴定后免疫BALB/c小鼠,应用细胞融
合技术筛选分泌CPFX mAb的杂交瘤细胞株,采用体内诱生腹水法制备CPFX mAb,并对其染色体核型、效价、敏感性和特异性等免疫学特性进行鉴定。

【结果】UV和SDS-PAGE鉴定结果表明,人工抗原偶联成功;免疫的5只小鼠血清抗体效价均达到了1∶105左右,其中4号小鼠血清CPFX抑制效价较高且IC50最低（17.21μg/L）,融合后筛选出1株敏感特异的杂交瘤细胞,命名为3D2。

3D2细胞培养上清效价为1∶（1.28×103）,腹水效价为1∶（1.6×105）。

CPFX mAb对CPFX的IC50为9.95μg/L,对恩诺沙星的交叉反应率为128.39%,与其他同系的喹诺酮类抗生素的交叉反应率很低。

【结论】获得了高效价、敏感、特异的抗CPFX mAb,为CPFX残留的快速检测奠定了技术基础。

【总页数】6页(P35-40)
【作者】贾杰只;陈晓丹;雷洁;张智英
【作者单位】西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌712100;珠海市英平生物科技有限公司,广东珠海519000;西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌712100;西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌712100
【正文语种】中文
【中图分类】S859.84
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