盐析法沉淀蛋白质的原理

盐析法沉淀蛋白质的原理
盐析法沉淀蛋白质原理：
蛋白质在水溶液中的溶解度取决于蛋白质分子表面离子周围的水分子数目，亦即主要是由蛋白质分子外周亲水基团与水形成水化膜的程度以及蛋白质分子带有电荷的情况决定的。

蛋白质溶液中加入中性盐后，由于中性盐与水分子的亲和力大于蛋白质，致使蛋白质分子周围的水化层减弱乃至消失。

同时，中性盐加入蛋白质溶液后由于离子强度发生改变，蛋白质表面的电荷大量被中和，更加导致蛋白质溶解度降低，之蛋白质分子之间聚集而沉淀。

由于各种蛋白质在不同盐浓度中的溶解度不同，不同饱和度的盐溶液沉淀的蛋白质不同，从而使之从其他蛋白中分离出来。

简单的说就是将硫酸铵、硫酸钠或氯化钠等加入蛋白质溶液，使蛋白质表面电荷被中和以及水化膜被破坏，导致蛋白质在水溶液中的稳定性因素去除而沉淀。

①蛋白质变性主要发生在二硫键和非共价键，不涉及一级结构的破坏；
②变性的蛋白质易于沉淀，但沉淀的蛋白质不一定变性；
③变性的蛋白质不一定凝固，但凝固的蛋白质一定变性；
④蛋白质变性最主要的表现是：生物学活性的减弱或者丧失。

蛋白质变性后的特点：溶解度降低（易于沉淀）、黏度增加、结晶能力消失、生物学活性丧失（大家都沉淀在一起，不能各司其职）、易被蛋白酶水解。

另外，造成蛋白质变性的主要因素包括：加热、酒精、强酸强碱、重
金属离子、生物碱试剂。

蛋白质的空间结构：
①一级结构：从N端到C端的氨基酸排列顺序，主要的维系键是肽键；
②二级结构：指某一段肽链的局部空间结构，包括α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规卷曲，主要作用键是氢键；
③三级结构：所有原子在三维空间的排布位置，例子有结构域、分子伴侣，靠疏水键、盐键、氢键、范德华力维持；
④四级结构：蛋白质分子各亚基间的空间排布，靠氢键和离子键维持。