高效液相色谱法测定复方益肝灵胶囊中水飞蓟宾含量的条件探索
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ｍｏｎｅ［Ｊ］．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ，１９８６，９１（２）：２１３－２２４．
［５］饶春 明，王军志 ，高凯 ，等 ．应用 ＥＬＩＳＡ测定 重组细胞 因子 中残余 大肠杆菌菌体蛋 白含量 ［Ｊ］．中 国生物制 品学杂质 ，２０００，１３（１）：
４２－４５．
［６］ＩＣＨ Ｈａｒｍｏｎｉｓｅｄ Ｔｒｉｐａｒｔｉｔｅ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ，Ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｐｒｏｃｅ— ｄｕｒｅｓ：Ｔｅｘｔ ａｎｄ Ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ Ｑ２（Ｒ１）［Ｊ］．２００５，３－１０．
纯水 ，乙醇和乙酸均为分析纯 。 １．２ 测 定 方 法 １．２．１ 色 谱 条 件 的 选 择 ：色 谱 柱 ：ＤｉａｍｏｎｓｉｌＣ１８ ２０Ｄ 号 柱 （２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５ｔＬｍ）；以 甲醇 ．１％ 乙酸 （４８：５２）为流 动 相 ，检测波长 ２８８ｎｍ，流速 １．０ｍＬ·ｍｉｎ～，柱 温 ３０％ ，进 样量
Ｄｅｔｅｒｍ ｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｉｌｙｂｉｎ ｉｎ Ｃｏｍｐｏｕｎｄ ＹｉＧａｎＬｉｎｇ Ｃａｐｓｕｌｅ ｂｙ ＨＰＬＣ
ＬＵＯ Ｙｕ－ｃｈｅｎｇ（ＳａｎＭｉｎｇ ｆｏｏｄ ａｎｄ ｄｒｕｇ ｌａＣｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣ下：ＯＢＪ ＥＣＴＩＶＥ Ａ ｓｉｍｐｌｅ ａｎｄ ｅｆｆｅｃｆｉｖｅ ＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｉｌｙｂｉｎ ｉｎ ｃｏｍｐｏｕｎｄ Ｙｉ．
高效 液相色谱法测定 复方益肝灵胶 囊 中水飞蓟宾含量的条件探索
罗域城 （福 建三 明市 食 品药 品执法 支 队 三 明 ３６５０００）
摘 要 ：目的 建立简单有效的高效液相 色谱法测定复方益肝灵胶 囊中水飞蓟宾 。方 法 色谱柱 为 Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ Ｃ１８ ２０Ｄ号柱 （２５０ｍｍ Ｘ４．６ｍｍ， ５ ｍ）；流动相 为甲醇－０．１％ 乙酸（４８：５２）；流速为 １．０ｍＬ·ｍｉｎ＿。；检测波长 为２８８ｎｍ。结 果 该方 法中水飞蓟宾和其他成 分分 离度 满足要 求； 水飞蓟宾在 ０．０１６６～２．０７４１ｘｇ范围内线性 良好 ，得到 回归方程 ：Ｙ＝２３７１．４Ｘ＋２．２８０２，ｒ＞０．９９９９。结 论 本 文建立测定 复方益肝 灵胶 囊中的 水飞蓟宾含量的样品处理方法有效 ，ＨＰＬＣ法流动相组成简单 ，分 离度好 ，快速准确 ，可为质量标 准的修订提供依据。 关 键 词 ：水飞蓟宾 ；复方益肝灵胶 囊；ＨＰＬＣ 中图分类号 ：Ｒ９６９．４ 文献标识码 ：Ｂ 文章编 号：１００６－３７６５（２０１８）－０５－０３２５１－００８１－０４
ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｂｌｏｔｔｉｎｇ Ｊ］．Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｐｈａｒｍａｃｏ，１９８５，３７（１１）：７８１－７８６． ［４］Ａｎｉｃｅｔｔｉ ＶＲ，Ｆｅｈｓｋｅｎｓ ＥＦ，Ｒｅｅｄ ＢＲ，ｅｔ ａ１．Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃ—
ｔｉｏｎ ｏｆ Ｅ．ｃｏｌｉ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｉｎ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ＤＮＡ ｄｅｒｉｖｅｄ ｈｕｍａｎ ｇｒｏｗｔｈ ｈｏｒ－
复方益肝 灵胶囊 用于肝 肾阴虚 、湿毒未 清引起 的急 性黄 疸 型肝 炎 ，或慢性肝炎转 氨酶增 高者 ，其主要有效成分 为水 飞 蓟宾 。笔者参 照国家食品药品监督管理局 国家药 品标准 采用 ＨＰＬＣ法对水 飞蓟 宾含 量测 定进 行研 究 ，认 为此 方法 简单 有 效 ，重 现 性 好 。 １ 材 料 与 方 法
ＧａｎＬｉｎｇ ｃａｐｓｕｌｅ ｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ．ＭＥＴＨＯＤＳ Ｔｈｅ ｃｏｌｕｍｎ ｉｓ Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ Ｃ１８ ２０Ｄ ｃｏｌｕｍｎ（２５０ｍｍ Ｘ４．６ｍｍ，５ｔｘｍ） ． Ｔｈｅ ｆｌｏｗ ｐｈａｓｅ ｉｓ ｍｅｔｈａｎｏｌ－０．１％ ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ（４８：５２），ｔｈｅ ｆ ｌｏｗ ｒａｔｅ ｉｓ １．ＯｍＬ ·ｍｉｎ～，ａｎｄ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｗａｖｅ－
５ｉＬＬ。
１．１ 仪 器与试剂 Ａｇｉｌｅｎｔ１２００高 效液 相 色谱 仪 ；ＳＫ２５０ＬＨＣ 台式超 声清洗器 ；ＡＢ１３５－Ｓ电子 分析 天平 。水飞 蓟宾 对 照品 （批 号 ：１１０８５６－２０１６０４，购 自中 国食 品药 品检定 研究 院 ，供 含 量 测 定 用 ），复 方 益 肝灵 胶 囊 （批 号 ：２０１７１００１，规 格 ：０．２ｇ），由 广东罗 浮山国药股份有限公 司生 产。 甲醇 （色谱 纯 ），水 为超
Ｓｔｒａｉｔ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ Ｖｏｌ ３０ Ｎｏ．５ ２０１８
［３］Ｇｏｏｄｉｎｇ ＲＰ，Ｂｒｉｓｔｏｗ ＡＦ．Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｈｏｓｔ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｃｏｎｔａｍｉｎａｎｔｓ ｉｎ ｒｅ－
ｃｏｍｂｉｎａｎｔ ＤＮＡ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｉｎ Ｅ．ｃｏｌｉ：ａ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｓｉｌｖｅｒ—ｓｔａｉｎｉｎｇ
ｌｅｎｇｔｈ ｉｓ ２８８ｎｍ．ＲＥＳＵＬＴＳ Ｔｈｅ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｄｅｇｒｅｅ ｏｆ ｓｉｌｙｂｉｎ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ ｉｎ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ＹｉＧａｎＬｉｎｇ Ｃａｐ－ ｓｕｌｅ．Ｓｉｌｙｂｉｎ ｗａｓ ｌｉｎｅａｒ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ ０．０１６６ ｔｏ ２．０７４ ｇ，ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ ｅｑｕａｔｉｏｎ ｗａｓ Ｙ ＝２３７ １．４Ｘ ＋２．２８０２， ｒ＞０．９９９９．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ Ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍ ｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｉｌｙｂｉｎ ｉｎ ｃｏｍｐｏｕｎｄ Ｙｉｇａｎ ｌｉｎｇ ｃａｐｓｕｌｅ ｉｓ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ．Ｔｈｅ ＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｓｉｍｐｌｅ，ｇｏｏｄ ｉｎ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ，ｆａｓｔ ａｎｄ ａｃｃｕｒａｔｅ．Ｉｔ ｃａｎ ｐｒｏｖｉｄｅ ａ ｂａｓｉｓ ｆｏ ｒ ｒｅｖｉ－ ｓｉｏｎ ｏｆ ｑｕａｌｉｔｙ ｓｔａｎｄａｒｄ． ＫＥＹ Ｗ Ｏ ＲＤＳ：ｓｉｌｙｂｉｎ；ｃｏｍｐｏｕｎｄ ＹｉＧａｎＬｉｎｇ Ｃａｐｓｕｌｅ；ＨＰＬＣ
［５］饶春 明，王军志 ，高凯 ，等 ．应用 ＥＬＩＳＡ测定 重组细胞 因子 中残余 大肠杆菌菌体蛋 白含量 ［Ｊ］．中 国生物制 品学杂质 ，２０００，１３（１）：
４２－４５．
［６］ＩＣＨ Ｈａｒｍｏｎｉｓｅｄ Ｔｒｉｐａｒｔｉｔｅ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ，Ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｐｒｏｃｅ— ｄｕｒｅｓ：Ｔｅｘｔ ａｎｄ Ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ Ｑ２（Ｒ１）［Ｊ］．２００５，３－１０．
纯水 ，乙醇和乙酸均为分析纯 。 １．２ 测 定 方 法 １．２．１ 色 谱 条 件 的 选 择 ：色 谱 柱 ：ＤｉａｍｏｎｓｉｌＣ１８ ２０Ｄ 号 柱 （２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５ｔＬｍ）；以 甲醇 ．１％ 乙酸 （４８：５２）为流 动 相 ，检测波长 ２８８ｎｍ，流速 １．０ｍＬ·ｍｉｎ～，柱 温 ３０％ ，进 样量
Ｄｅｔｅｒｍ ｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｉｌｙｂｉｎ ｉｎ Ｃｏｍｐｏｕｎｄ ＹｉＧａｎＬｉｎｇ Ｃａｐｓｕｌｅ ｂｙ ＨＰＬＣ
ＬＵＯ Ｙｕ－ｃｈｅｎｇ（ＳａｎＭｉｎｇ ｆｏｏｄ ａｎｄ ｄｒｕｇ ｌａＣｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣ下：ＯＢＪ ＥＣＴＩＶＥ Ａ ｓｉｍｐｌｅ ａｎｄ ｅｆｆｅｃｆｉｖｅ ＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｉｌｙｂｉｎ ｉｎ ｃｏｍｐｏｕｎｄ Ｙｉ．
高效 液相色谱法测定 复方益肝灵胶 囊 中水飞蓟宾含量的条件探索
罗域城 （福 建三 明市 食 品药 品执法 支 队 三 明 ３６５０００）
摘 要 ：目的 建立简单有效的高效液相 色谱法测定复方益肝灵胶 囊中水飞蓟宾 。方 法 色谱柱 为 Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ Ｃ１８ ２０Ｄ号柱 （２５０ｍｍ Ｘ４．６ｍｍ， ５ ｍ）；流动相 为甲醇－０．１％ 乙酸（４８：５２）；流速为 １．０ｍＬ·ｍｉｎ＿。；检测波长 为２８８ｎｍ。结 果 该方 法中水飞蓟宾和其他成 分分 离度 满足要 求； 水飞蓟宾在 ０．０１６６～２．０７４１ｘｇ范围内线性 良好 ，得到 回归方程 ：Ｙ＝２３７１．４Ｘ＋２．２８０２，ｒ＞０．９９９９。结 论 本 文建立测定 复方益肝 灵胶 囊中的 水飞蓟宾含量的样品处理方法有效 ，ＨＰＬＣ法流动相组成简单 ，分 离度好 ，快速准确 ，可为质量标 准的修订提供依据。 关 键 词 ：水飞蓟宾 ；复方益肝灵胶 囊；ＨＰＬＣ 中图分类号 ：Ｒ９６９．４ 文献标识码 ：Ｂ 文章编 号：１００６－３７６５（２０１８）－０５－０３２５１－００８１－０４
ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｂｌｏｔｔｉｎｇ Ｊ］．Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｐｈａｒｍａｃｏ，１９８５，３７（１１）：７８１－７８６． ［４］Ａｎｉｃｅｔｔｉ ＶＲ，Ｆｅｈｓｋｅｎｓ ＥＦ，Ｒｅｅｄ ＢＲ，ｅｔ ａ１．Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃ—
ｔｉｏｎ ｏｆ Ｅ．ｃｏｌｉ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｉｎ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ＤＮＡ ｄｅｒｉｖｅｄ ｈｕｍａｎ ｇｒｏｗｔｈ ｈｏｒ－
复方益肝 灵胶囊 用于肝 肾阴虚 、湿毒未 清引起 的急 性黄 疸 型肝 炎 ，或慢性肝炎转 氨酶增 高者 ，其主要有效成分 为水 飞 蓟宾 。笔者参 照国家食品药品监督管理局 国家药 品标准 采用 ＨＰＬＣ法对水 飞蓟 宾含 量测 定进 行研 究 ，认 为此 方法 简单 有 效 ，重 现 性 好 。 １ 材 料 与 方 法
ＧａｎＬｉｎｇ ｃａｐｓｕｌｅ ｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ．ＭＥＴＨＯＤＳ Ｔｈｅ ｃｏｌｕｍｎ ｉｓ Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ Ｃ１８ ２０Ｄ ｃｏｌｕｍｎ（２５０ｍｍ Ｘ４．６ｍｍ，５ｔｘｍ） ． Ｔｈｅ ｆｌｏｗ ｐｈａｓｅ ｉｓ ｍｅｔｈａｎｏｌ－０．１％ ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ（４８：５２），ｔｈｅ ｆ ｌｏｗ ｒａｔｅ ｉｓ １．ＯｍＬ ·ｍｉｎ～，ａｎｄ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｗａｖｅ－
５ｉＬＬ。
１．１ 仪 器与试剂 Ａｇｉｌｅｎｔ１２００高 效液 相 色谱 仪 ；ＳＫ２５０ＬＨＣ 台式超 声清洗器 ；ＡＢ１３５－Ｓ电子 分析 天平 。水飞 蓟宾 对 照品 （批 号 ：１１０８５６－２０１６０４，购 自中 国食 品药 品检定 研究 院 ，供 含 量 测 定 用 ），复 方 益 肝灵 胶 囊 （批 号 ：２０１７１００１，规 格 ：０．２ｇ），由 广东罗 浮山国药股份有限公 司生 产。 甲醇 （色谱 纯 ），水 为超
Ｓｔｒａｉｔ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ Ｖｏｌ ３０ Ｎｏ．５ ２０１８
［３］Ｇｏｏｄｉｎｇ ＲＰ，Ｂｒｉｓｔｏｗ ＡＦ．Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｈｏｓｔ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｃｏｎｔａｍｉｎａｎｔｓ ｉｎ ｒｅ－
ｃｏｍｂｉｎａｎｔ ＤＮＡ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｉｎ Ｅ．ｃｏｌｉ：ａ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｓｉｌｖｅｒ—ｓｔａｉｎｉｎｇ
ｌｅｎｇｔｈ ｉｓ ２８８ｎｍ．ＲＥＳＵＬＴＳ Ｔｈｅ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｄｅｇｒｅｅ ｏｆ ｓｉｌｙｂｉｎ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ ｉｎ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ＹｉＧａｎＬｉｎｇ Ｃａｐ－ ｓｕｌｅ．Ｓｉｌｙｂｉｎ ｗａｓ ｌｉｎｅａｒ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ ０．０１６６ ｔｏ ２．０７４ ｇ，ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ ｅｑｕａｔｉｏｎ ｗａｓ Ｙ ＝２３７ １．４Ｘ ＋２．２８０２， ｒ＞０．９９９９．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ Ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍ ｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｉｌｙｂｉｎ ｉｎ ｃｏｍｐｏｕｎｄ Ｙｉｇａｎ ｌｉｎｇ ｃａｐｓｕｌｅ ｉｓ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ．Ｔｈｅ ＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｓｉｍｐｌｅ，ｇｏｏｄ ｉｎ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ，ｆａｓｔ ａｎｄ ａｃｃｕｒａｔｅ．Ｉｔ ｃａｎ ｐｒｏｖｉｄｅ ａ ｂａｓｉｓ ｆｏ ｒ ｒｅｖｉ－ ｓｉｏｎ ｏｆ ｑｕａｌｉｔｙ ｓｔａｎｄａｒｄ． ＫＥＹ Ｗ Ｏ ＲＤＳ：ｓｉｌｙｂｉｎ；ｃｏｍｐｏｕｎｄ ＹｉＧａｎＬｉｎｇ Ｃａｐｓｕｌｅ；ＨＰＬＣ