四种抗癫痫药物的血药浓度测定及药代动力学分析

四种抗癫痫药物的血药浓度测定
及药代动力学分析
综述
癫痫是一种常见神经症状，且反复发作。

故为一种长期性疾病，患者需长期服用抗癫痫药物。

较常用的抗癫痫药有卡马西平、丙戊酸、苯巴比妥、苯妥英钠。

但这些药有效范围较窄，服用后个体差异大。

且存在着动力学模型转化的情况，为了推广合理用药．更有效地控制和治疗癫痫患者的病情。

必须先进行血药浓度监测。

丙戊酸
1 材料与方法
1.1 仪器 KONTR0N322型高效液相色谱仪；KONTRON 332型可变紫外检测器；KONTROND450数据处理系统；80-2离心沉淀器(上海手术器械厂)；H-92微型馄合器(西巴斯生物技术开发公司)；电热恒温水浴锅(上海医疗器械厂)。

1.2 药品和试剂丙戊酸标准品(湖南湘中制药有限公司，纯度99.5 以上)；环己烷羧酸(Flukachemic AG)；a-溴苯乙酮、正己烷、乙腈、硫酸、三乙胺、氨水均为分析纯，甲醇为色谱纯。

1.3 色谱条件Alltech CI8柱(150 mm×4.6 mm，5 pm)，流动相为甲醇：水(80：20)，检测波长248 nm，流速1.0 ml／min，灵敏度0.05 AUFS，进样量2O µl。

内标为环己烷羧酸。

在本实验条件，两种物质的色谱峰分离良好，血浆内源性物质峰无干扰。

内标保留时间为5.13 min，苯甲酰甲基丙戊酸保留时间为7.79min(图1)。

图1、丙戊酸和内标的色谱
1.4 标准溶液的配制精密吸取0.5 ml丙戊酸标准品于50 ml容量瓶中，用0.2 mol／L氨水稀释至刻度，配成9.05 g／L的标准溶液。

精密吸取上述标准液一定量，用氨水稀释配制成2
2.62、45.25、90.50、181.00、258.58、362.00 pg／ml的丙戊酸系列标准液。

1.5 相关溶液的配制
1.5.1 内标液精密吸取50 µl环己烷羧酸至50 ml容量瓶中，用0.2 mol／L氨水稀释至刻度，
再精密吸取该液7.5 ml至50 m1容量瓶中，用0.5 mol／L氨水稀释至刻度，得1545 µg／ml环己烷羧酸内标液。

1.5.2 衍生试剂精密称取1.0 g 溴苯乙酮至100 ml容量瓶中，用乙腈稀释至刻度。

1.6 标准血清预处理精密吸取正常人血清0.1ml 2份，一份加甲醇0.1 m1，另一份加标准液0.1ml(丙戊酸浓度：181.O0 µg／ml)，分别加内标液50 µl和1 mol／l硫酸0.1 m1，混匀，加正己烷2 ml，振荡提取5 min，离心(4000 r／min)5 min，精密吸取上清液1 ml，加α-溴苯乙酮试液和三乙胺各1O µl，于50 ℃水浴中衍生10 min，N2流吹干，用甲醇100 u1溶解残渣，取2O µl 进样。

1.7 标准曲线绘制精密吸取空白血清0.1 ml 6份，加入丙戊酸系列标准液，按1.6项下操作，此时的系列浓度分别为l1.31、2
2.62、45.25、90.50、129.29、181.00 µg／ml。

进样后分析测定，以标准液浓度为X，样品峰与内标峰之比为Y，作回归处理，其回归方程为：Y=4.7434-1.4230X，r=0.9991。

丙戊酸的最低检出浓度为0.5 µg／ml。

在l1.31～181.00 µg／ml范围内呈良好线性相关。

2 结果
2.1 回收率和精密度分别取丙戊酸为22.62、181.00、362.00 µg／ml 3种浓度，每浓度取5份，按1.6项下处理后，即得丙戊酸实际浓度为l1.31、90.50、181.00 µg／ml，测定方法回收率(表1)和精密度，每天测5次，共测3d(表2)。

表1、丙戊酸的回收率（n=5）
表2、丙戊酸的日间和日内精密度（n=5）
2.2 专一性考虑到临床检测及药物动力学研究的干扰情况，选择了几种可能合用的药物进样，结果扑米酮、地西泮、苯巴比妥、苯妥英钠和卡马西平在该色谱条件下均不出峰，可见以上药物对本法测定无干扰。

卡马西平，苯妥英钠和苯巴比妥
1 材料与方法
1.1 仪器 HP-1100高效液相色谱仪；阵列二极管检测器；台式离心机(上海手术器械厂)；旋涡振荡器(上海沪西分析仪器厂)。

1.2 试剂与药品PB、PT、CBZ对照品(均由杭州华东医药公司提供)；甲醇为色谱纯；重蒸馏水；其余试剂均为分析纯。

1.3 标准溶液的配制精密称取PB对照品、PT对照品各25 mg、CBZ对照品1
2.5，用甲醇分别定容为PB 1000 µg／ml、PT 1000 µg／ml、CBZ 500µg／ml储备液，4 ℃保存。

使用时用流动相稀释10倍。

1.4 色谱条件色谱柱ZORBAX XDB—C18(4.6 mm×150 mm，5 µm)(美国安捷伦公司)；柱温：30 ℃；流动相：甲醇：水(57：43)；流速0.8 ml/min；检测波长：254nm。

1．5 样品处理取血清0.20 ml，加内标0.05 ml，加入磷酸盐缓冲液(pH 7.8～8.0)0.25 mL，摇匀，加二氯甲烷2.00 ml，旋涡提取1 min，4000 r/min，离心10min，取二氯甲烷层1.50 ml，在50 ℃水浴中挥干，残渣加流动相0.5 ml溶解，取40 µl进样。

2 结果
2.1 色谱行为见图1。

在所选色谱条件下，PB、Pr、CBZ能较好分离，血清杂质对测定无干扰。

图1、HPLC色谱图
2.2 标准曲线绘制取空白血清加入PB、PT、CBZ标准溶液，配成相当于血中PB、Pr浓度分别为：2.5，5.0，10.0，20.0，40.0 µg／ml，CBZ为1.25，2.50，5.00，10.00，20.00 µg／ml。

按样品处理项下操作，内标法定量，以标准品峰面积与内标峰面积比值(y)对浓度(C)进行线性回归，PB、PT、CBZ的线性方程分别为：Y=0.013 4C+0.0063。

r=0.999 6；Y=0.0299C+0.0064，r=0.9999：Y=0.209 9C-0.0327。

r=0.9995，表明线性关系良好。

以样品信号为噪声3倍作为最小可检测信号，PB、PT、CBZ最低检测限分别为0.25，0.50，0.05 µg／ml。

2.3 方法回收率和精密度准确配制PB、PT浓度分别为40.0，10.0，2.5 µg／ml标准含药血样，CBZ浓度为20.00，5.00，1.25 µg／ml标准含药血样。

按样品处理项下操作，测定血药浓度，计算回收率。

分别1-5 d内测定血药浓度，计算日内和日间差异，见表1。

表1、PB，PD CBZ血样回收率及精密度（n=5）
2.4 提取绝对回收率本法采取一次萃取，根据PB、PT、CBZ的血药浓度有效范围，分别在20，20，10 µg／ml进行提取回收率试验，平均提取绝对回收率分别为82％，78％，75％。

2.5 血样测定取患者血清0.2 ml，标准含药血清0.2 ml(作为质控)，按1.5项下操作，测定血药浓度，色谱图见图1C，图1B，部分患者的测定值见表2。

表2，患者血药浓度测定值mg/ml
小结
我们采用AXSYM快速偏振荧光免疫分析仪监测了l38例服用丙戊酸，85例服用马西平。

52例服用苯妥英，31例服用苯巴比妥患者的血药浓度结果进行分析。

1 丙戊酸
丙戊酸为广谱抗癫痫药物，有效血药浓度为50～100 µg／ml丙戊酸的药动力学参数个体差异大。

所以监测血药浓度十分必要。

138例服用丙戊酸患者的血药浓度监测结果：血药浓度低于50 µg／ml者68例，占49.3％；超过正常血药浓度范围（>100 µg／m1）的8例。

占5.8％；达到有效血药浓度范围（50～100g ／m1）62例，占44.9％。

根据血药浓度合理调整．大多数患者均可达到有效治疗范围。

但为患者提供用药方案时应注意：①初始用药应从小剂量开始；②年龄较小的儿童，同时联用酶诱导药物．为使血药浓度达到有效范用，用药时应注意；③给药间隔应与半衰期相当。

2 卡马西平
卡马西平治疗大发作，复发性小发怍癫痫有较好疗效。

有效血药浓度范围为4～12 µg／ml，
马西平有效浓度范围较窄，治疗量与中毒量较接近，监测血药浓度有着十分重要的作用。

85例服用卡马西平的血药浓度监测结果：血药浓度<4 µg/lm20例，占23．5％；4.12 µg／ml 64例，占73.5％；>12 µg／ml 1例．占1.2％。

可以看出85例中达到有效血药浓度范围的比例为73.5％。

低于有效血药浓度范围比例为23.5％，超过有效血药浓度的比例为1.2％在监测中发现，为患者提供给药方案时应注意：①如果患者未接触卡马西平，开始治疗2-4周的清除率是相对较低的，应逐渐增加剂量，监测血药浓度直至达到维持剂量；②小儿随年龄增长清除率反而降低。

所以单位体重的维持剂量应在血药浓度监测下调整；③如果同时给予其他抗癫痫药物，医生应该考虑调整剂量或给药频率并以血药浓度为依据。

3 苯妥英钠
苯妥英钠的临床用途较为广泛，用于治疗原发性、继发性全身强直一阵挛性发作，单纯复杂部分性混合性发作。

有效血药浓度范围为l0～20 µg／ml，由于患者个体差异大，如年龄、怀孕其他疾病的影响等，故血药浓度为判断疗效的有效指标。

52例服用苯妥英钠患者的血药浓度监测结果为：低于有效血药浓度范围（<10 µg／m1）37例．占71.7％；高于有效血药浓度范围（>20 µg／m1）6例，占l1.5％；在有效血药浓度范围(10-20 g／m1)9例，占17.3％。

在以上血药浓度监测的过程中发现血药浓度偏低的原因有：①一部分患者依从性差及药物相互作用；②怀孕期间苯妥英清除率高，应规律性测血药浓度浓度脚。

4 苯巴比妥
苯巴比妥广范应用于控制多种癫痫发作，对全身强直一阵挛性发作，单纯或复发部分性发作均能有效控制。

有效浓度范围为15～40 µg／m1。

3l例服用苯巴比妥患者的血药浓度监测结果为：15例患者血药浓度<5 µg／m1，占48.4％；2例患者血药浓度>40 µg／m1，占64％；14例患者血药浓度在有效血药浓度范围(15-40 µg／m1)内，占45．6％。

经过调整均可达至有效血药浓度范围。

但在提供用药方案时应注意：①老年人苯巴比妥清除率较青年人，再之同时患有其他疾病，影响苯巴比妥代谢，对苯巴比妥的毒性作用更为敏感，应依据血药浓度值仔细调整剂量。

②苯巴比妥为肝药酶诱导剂，故用药时应加以注意。

进行血药浓度监测，可以在尽可能短的时间内达到药理作用，降低药物毒性，患者可以从治疗效果和经济上获益，对医师在用药方面也有很大的帮助
参考文献：
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