最经典的Bioedit使用说明书-文档资料

在这个例子中，所有来源于Stratagene的限制性内切 酶显示在左边的列表中， KpnI 的亮度增加。 KpnI 的识 别序列显示在顶端，同裂酶显示在它的下方，其他提 供 KpnI 的 公 司 显 示 在 同 裂 酶 的 下 方 。 BioEdit 使 用 ReBase 提供的 gcgenz 表，限制性内切酶数据在万维网 的 地 址 是 ： /rebase/ 。 可 以 从 ReBase 下 载 最 新 的 gcgenz 表 ， 将 其 命 名 为 “ enzyme.tab” ， 并 且 替 代 在 BioEdit 安 装 文 件 夹 中 “tables ”目录下的旧文件。 注意：表必须是gcgenz格式的。你可以从tables文 件夹中打开“enzyme.tab ”文件查看格式，或者查看 “Restriction Maps ”。限制性内切酶表格文件名必须是 “enzyme.tab ”，而且必须在BioEdit的“tables ”文件夹 里。
4.瞬间疏水性轮廓(hydrophobic moment profile)
5.平均瞬间疏水性轮廓
6.在联配中搜寻保守区
有时，即使序列之间 的变化很大时，在几个序 列中搜寻保守区是有用的。 例如，根据一系列同源序 列发现通用的PCR 引物。 BioEdiot 查找的是低平均 “熵”的区域。 首先选择你的序列， 从“Aligment”->“Find Conserved Region”，对话 框中各选项的内容：
序列的常规操作：
序列输入：多种序列输入方式； 序列分类：按标题、位置 、定义、参数、注释等分类； 成对排列：两序列的最佳排列及计算同一性和类似性； 序列屏蔽：仅采用联配中部分区域进行分析而排除其他。 核酸分析：组成、互补、反转、翻译、质粒、限制性内切酶； 蛋白质分析：氨基酸成分、疏水性轮廓 、疏水力矩平均数 翻译或反翻译：把DNA或RNA翻译成蛋白质； 切换翻译：在核酸和编码蛋白质序列中切换核苷酸序列； 点图[成对比较]：相互比较两序列的矩阵，生成一个点图。
2.熵图
在联配文件中有专栏用熵图来衡量可变性。它衡量的 是在联配中每个位置的“信息量”的缺乏。准确地说，是 每个位置的可预测性的缺乏。
3.疏水性轮廓(profile)
平均疏水性轮廓采用Kyte &Doolittle 的方法，平均分值(总 和/窗口大小)作为序列中各个位置的疏水性值，并以窗口中中 间残基的疏水性值作图。
3.Restriction Enzyme Browser (限制性内切酶浏览器 )
从核酸序列中得到内 切酶谱时，显示酶的生产 公司是很有用的。通过在 内切酶图谱中选择制造厂 商和按下按钮，可以手动 浏览内切酶。你也可以通 过选择“Options ”菜单中 的“View Restriction Enzymes by Manufacturer” 选择，在任何时候检查内 切酶。显示如右对话框：
“Font”按钮改变指示的默认字体。特征标记的 字体将可以单独改变，但是位置标记不能单独改变。
二、Restriction Maps(限制性内切酶图)
BioEdit提供两种方法产生核苷酸序列 的限制性内切酶图。一种内在的限制性内 切酶图功能允许产生序列最多为 65,536 个 核苷酸的限制性内切酶图。实际上，只能 检测大约35Kb， 而且在速度慢的计算机上 会要消耗很长的时间。 你也可以通过万维网直接链接到 WebCutter 限制性内切酶图上。
Region 2: Position 1206 to 1222 Consensus: 1206 ACACGCGGGCUACAAUG 1222 Segment Length: 17 Average entropy (Hx): 0.0182 Position 1206 : 0.0000 Position 1207 : 0.0000 Position 1208 : 0.0000 Position 1209 : 0.0000 Position 1210 : 0.0708 Position 1211 : 0.0708 Position 1212 : 0.0000 Position 1213 : 0.1679 Position 1214 : 0.0000 Position 1215 : 0.0000 Position 1216 : 0.0000 Position 1217 : 0.0000 Position 1218 : 0.0000 Position 1219 : 0.0000 Position 1220 : 0.0000 Position 1221 : 0.0000 Position 1222 : 0.0000
— 显示图谱：显示或省略序列的全图谱,互补链显示每个酶的酶切位点.默认值：yes
—按照字母顺序排列名称：显示关于所有内切酶、它们的识别序列、切割频率和所有 位置(5’末端开始是1) 的列表.默认值：yes
—位置数：关于酶切位点的列表.默认值：no —唯一位点列表：在全部序列中只有一个酶切位点的内切酶列表.默认值：no —切割5次或更少的酶 .默认值：yes —频率汇总表：关于所有正确选择的内切酶和它们切割序列的次数。默认值：no —不能切割的内切酶。默认值：yes
三、蛋白质分析
1.氨基酸的组成
从“Sequence” 菜单下进入“Protein”, 再进入 “amina acid composition”, 可对序列的氨基酸组成分 析，结果以摘要和图例的形式给出。 图例中的柱形条表示每种氨基酸在序列中的摩尔 比，如下图：
以RGDV的minor outer capsid protein－AAS66885为例：
1.Restriction sites:(限制性位点)
想 要 增 加 限 制 性 位 点 ， 从 “ Vector ” 菜 单 中 选 择 “Restriction Sites ”选项。将会显示一下对话框：
想要显示图谱中的限制性内切酶，从右边(“Don't Show ”中)选择任何想要的酶，用 按钮将它们移动到 左边。按下“Apply & Close ”时，这个位点就会增加 到图谱中。指定的酶如果只有一个酶切位点,就会在酶 切位点上出现一个“U ”。如果没有“U”， 将会显示 第一个酶切位点。想要移动图谱中酶的位置，在 “Show ”中增加选择的酶的亮度，按下 按钮将它们 移动另一边。
3.Features (特征):
想要增加一个特征，如抗生素抵抗标记，从“Vector” 菜单 选择“Add Feature”。 将显示以下对话框：
选 择 的 类 型 是 “ Normal Arrow ” 、 “ Wide Arrow ” 、 “Normal Box” 和、“Wide Box ”。在上面例子中的所有特征是 “常规”宽度的。如果特征是一个箭头，箭头的方向将是从起点 位置到终点位置。 增加特征或酶时，他们各自的标记增加在外面，中心是可能 的尺寸。标记可以被选择工具选择、移动、编辑和缩放。
–组成分析 –熵图 –疏水性轮廓 –联配中搜寻保守区 –根据密码子的使用翻译核苷酸
• RNA比较分析
–共变 –潜在配对 –互交信息分析
一、绘制质粒图（Plasmind drawing）
使用BioEdit质粒绘图功能，序列可以通过自动的位置标记， 自动修改成环形质粒。特征、多连接位点和限制性位点可以通 过使用对话框增加。当将一个序列进入质粒图时，在背景上出 现一个限制性内切酶图谱，所以可以通过对话框选择可以增加 限制性位点。它们自动增加到当前的位点。质粒功能提供简单 的绘制和标记质，双击目标。 想要从一个DNA序列产生一个质粒，从“Sequence ”菜单 中“Nucleic Acid ”子菜单中选择“Create Plasmid from Sequence ” 选项。选择这个选项时，限制性内切酶图谱将会使用通常商业 化的，储存在存储器中的限制性内切酶。质粒第一次产生时， 它显示成有10个位点标记的圆圈，中央是标题 。
2.Positional marks (位置标记):
点击“Vector ”菜单中的“Positional Marks ”选项，可以出 现以下对话框：
可以通过移动位置标记到“Show” 中，单独增加位置标记， 或者设定应用的分割标记数量。想要没有标记，选择“Divide into: ” 中的下拉菜单顶端的“None”。
4.General Vector properties
载体属性可通过选 “Vector” 菜单中的“Properties ”来更 改：
可以通过指定起点和末端位置，来增加多接头按 钮。多接头显示为“Courier New ”字体。 在这个对话框中，特征可以被编辑、增加或者删 除。想要编辑或删除一个现存的特征，在“Features” 下拉式菜单中选择特征，并点击合适的按钮。点击 “Add New” 按钮，可以增加一个新的特征。 现在只有一个圆形、单链质粒是有效的。在以后 的版本中中将会改进。
综合序列分析软件 BioEdit
2003级 高芳銮
BioEdit简介
• BioEdit是一个性能优良的免费的生物序列编 辑器，可在 Windows 95/98/NT/2000 中运行， 它的基本功能是提供蛋白质、核酸序列的编 辑、排列、处理和分析。 • 与DNAMAN相比，其分析内容相对丰富一些， 而且提供了很多网络程序的分析界面和接口， 与DNAMAN等软件配合使用更好。 • 尤其值得一提是利用BioEdit能够十分方面地 根据指定的核酸序列绘制相应的质粒图谱。
1.WebCutter： 点亮你想要 图谱的序列 标题，从 “World Wide Web” 菜单中选择 “Auto-fed WebCutter Restriction Mapping”
2.BioEdit: 点亮你想要图谱的序列标题，从“Sequence” 菜单选 择“Restriction Map” 。 以下选项将会显示在一个界面窗口：
— 4-碱基内切酶： 想要包括这些酶,必须点击这个选项.默认值：no (不包括本身)
— 5-碱基内切酶：与4-base cutters相同. —非严格识别序列的酶：有时你可排除它们.默认值：yes —大的识别位点：通常用于克隆,只有共同的6-碱基识别酶被使用. —同裂酶：若只显示一个特殊识别位点的一个内切酶,不选(默认值=不选择). —翻 译 ：显示沿着排列中的序列翻译(5’端到3’端的由左到右的翻译) —互补翻译 ：互补链的翻译方向相反. —编号方式 ：是酶切位点的核酸的号码,而不是识别位点的起点.
BioEdit version 5.0.9
Conserved region search
Alignment file: Q:\Ribosomal_RNA\some_methanos.bio 5/10/04 8:57:33 PM
Minimum segment length (actual for each sequence): 15 Maximum average entropy: 0.2 Maximum entropy per position: 0.2 Gaps limited to 2 per segment Contiguous gaps limited to 1 in any segment
•BLAST
本地使用BLAST o创建本地数据库 o本地BLAST 搜寻 BLAST INTERNET 客户端程序 •ClustalW •进化分析
•使用互联网工具
HTML BLAST 网络浏览器 PSI-BLAST
nnPredict …
主要内容
• 绘制质粒图 • 限制性内切酶图 • 蛋白质分析
2 conserved regions found
Region 1: Position 755 to 774 Consensus: 755 AUUAGAUACCCGGGUAGUCC 774
Segment Length: 20 Average entropy (Hx): 0.0155 Position 755 : 0.0000 Position 756 : 0.0000 Position 757 : 0.0000 Position 758 : 0.0708 Position 759 : 0.0000 Position 760 : 0.0000 Position 761 : 0.0000 Position 762 : 0.0000 Position 763 : 0.0000 Position 764 : 0.0708 Position 765 : 0.0000 Position 766 : 0.1679 Position 767 : 0.0000 Position 768 : 0.0000 Position 769 : 0.0000 Position 770 : 0.0000 Position 771 : 0.0000 Position 772 : 0.0000 Position 773 : 0.0000 Position 774 : 0.0000