双甲脒有关物质气相分析方法验证方案

双甲眯有关物质气相分析方法验证方案
方案批准
目录
1. 概述 (3)
1.1 验证目的 (3)
1.2 验证项目 (3)
2. 参考资料 (4)
3. 色谱条件和分析过程 (4)
3.1色谱条件 (4)
3.2 分析过程 (4)
4. 器材和试剂 (5)
4.1器材 (5)
4.2试剂 (6)
5. 验证内容 (6)
5.1系统适用性 (6)
5.2专属性 (7)
5.3检测限、定量限 (8)
5.4线性和范围 (10)
5.5准确度 (13)
5.6精密度 (16)
5.7方法耐用性 (19)
5.8溶液稳定性 (21)
6. 结论 (21)
7. 审核和批准 (22)
8. 文件变更历史 (22)
1.概述
1.1验证目的
通过验证确定该方法适用于双甲脒有关物质的检测。

1.2验证项目
本方法属于杂质定量检测方法，所以需要验证的项目有：系统适用性，专属性，系统精密度，检测限和定量限，线性及范围，准确度（回收率），方法耐用性，溶液稳定性。

具体参数以及标准参考下表：
2. 参考资料
ICH Q2（R1）;
EP <467>;
USP <20424〉.
3. 色谱条件和分析过程
3.1色谱条件
仪器:GC，型号：
检测器:UV，波长：nm
色谱柱:石英毛细管柱（规格10m X 0.53mm），柱壁涂布5^m的聚硅氧烷［95%甲
基，5%苯基］固定相（毛细管柱Chrompack CP-SiL 8 CB可用）
柱温:起始柱温125C，保持在125C 5分钟，然后开始以5C每分钟的速度线性上升到270C，然后保持270C 15分钟,进一步升温至230C。

进样口温度:230°C
检测温度:300°C
载气:N2
流速:12mL/min
:1 ^L
进样量
3.2分析过程
溶液配制
杂质a（2,4-二甲基苯胺）贮备液：精密称取2,4-二甲基苯胺250mg于250ml容量瓶中，加乙酸甲酯定容，浓度为0.1 %（W/V）。

（注意闭光冷藏保存）。

杂质b（2,4-二甲基代苯胺）贮备液：精密称取2,4-二甲基代苯胺200mg于10ml容量瓶中，加乙酸甲酯定容至10ml摇匀即得，浓度为2.0%（W/V）。

（注意闭光冷藏保存）。

杂质d［N,N '-双（2,4-二甲苯基）甲眯］贮备液:精密称取N,N，-双（2,4-二甲苯基）甲脒200mgT 10ml容量瓶中，加乙酸甲酯定容至10ml摇匀即得，为2.0%（W/V）O（注意闭光冷藏保存）。

溶液A的制备：分别精密量取杂质a、杂质b、杂质d贮备液各1ml于同一10ml容
量瓶中，加乙酸甲酯定容，得到含杂质a为0.010%(W/V)、杂质b为0.20%(W/V)、杂质d为
0.20%(W/V)的溶液。

(注：如没有配制杂质b、杂质d贮备液，则溶液A的制备方法为：分别
精密称取20mg的杂质b和20mg的杂质d于同一10ml容量瓶中，并将精密量取1ml杂质a 贮备液加入其中，加乙酸甲酯定容即可)。

溶液B的制备:精密称取30mg的杂质c [N-甲基-N -(2,4-二甲苯基)甲脒]溶解于5ml的乙酸甲酯中，加入32mg的三乙胺，用超声波混合2分钟，过滤，用少量的乙酸甲酯对滤纸进行冲洗，最后加入乙酸甲酯溶剂使过滤液和冲洗液的混合体积定容到25ml 即可得到溶液B(其中杂质c的含量为0.1%左右)。

对照溶液的制备：等体积的溶液A和溶液B的混合溶液。

供试品溶液的制备：精密称取500mg的双甲脒供试样品于10ml容量瓶中，加乙酸甲酯定容至10ml摇匀即可，溶液浓度为5.0%(W/V)。

进样程序
在色谱条件平衡的条件下，分别进1针空白溶液(乙酸甲酯)，6针对照溶液，2针供试品溶液，1针对照溶液记录色谱图。

计算公式
杂质a= A样C标100%=
A标
杂质b= A样C标100%=
A标
杂质c= A样C标100%=
A标
杂质d= A样C标100%=
A标
式中：A样：样品溶液中杂质的峰面积；
C标：对照溶液中对应杂质的浓度，%；
A标：对照溶液中对应杂质的峰面积。

系统适用性要求
连续6针对照各杂质的峰面积的RSD不大于5.0%。

4. 器材和试剂
4.1器材
4.2
5.1系统适用性
5.1.1目的
对由分析设备，试验操作，被分析产品组成的系统进行评估，确定该方法在该系统条件下是可适用的。

5.1.2实际操作:
杂质a（2,4-二甲基苯胺）贮备液:精密称取2,4-二甲基苯胺 _mg 于250ml容量瓶中，加乙酸甲酯定容，浓度为0.1 %（W/V）。

杂质b（2,4-二甲基代苯胺）贮备液：精密称取2,4-二甲基代苯胺—mg 于10ml 容量瓶中，加乙酸甲酯定容至10ml摇匀即得，浓度为2.0%（W/V）o
杂质d[N,N '-双（2,4-二甲苯基）甲脒]贮备液:精密称取N,N'-双（2,4-二甲苯基）甲脒200mgT 10ml容量瓶中，加乙酸甲酯定容至10ml摇匀即得，为2.0%（W/V）o 溶液A的制备：分别精密量取杂质a、杂质b、杂质d贮备液各1ml于同一10ml容量瓶中，加乙酸甲酯定容，得到含杂质a为0.010%（W/V）、杂质b为0.20%（W/V）、杂质d为0.20%（W/V）的溶液。

溶液B的制备：精密称取_mg 的杂质c [N-甲基-N' -（2,4-二甲苯基）甲脒]溶解于5ml的乙酸甲酯中，加入mg的三乙胺，用超声波混合2分钟，过滤，用少量
的乙酸甲酯对滤纸进行冲洗，最后加入乙酸甲酯溶剂使过滤液和冲洗液的混合体积定容到25ml 即可得到溶液B（其中杂质c的含量为0.1%左右）o
对照溶液的制备：等体积的溶液A和溶液B的混合溶液
分别移取空白溶液（乙酸甲酯），供试品空白溶液和对照溶液注入色谱仪中，分别进针1 次, 1次和6次，记录色谱图，计算连续6针对照图谱中双甲脒峰面积的RSD值
5.1.3接受标准：
连续6针对照图谱中各杂质峰面积的RSD值不大于5.0%。

5.1.4验证结果：
表1:系统适用性验证结果
结论：
5.2专属性
5.2.1目的:
对分析方法准确可靠测定被分析物的能力进行测试。

5.2.2实际操作：
杂质a（2,4-二甲基苯胺）贮备液：精密称取2,4-二甲基苯胺mg 于250ml
容量瓶中，加乙酸甲酯定容，浓度为0.1 %（W/V）。

（注意闭光冷藏保存）。

杂质b（2,4-二甲基代苯胺）贮备液：精密称取2,4-二甲基代苯胺—mg 于10ml
容量瓶中，加乙酸甲酯定容至10ml摇匀即得，浓度为2.0%（W/V）O（注意闭光冷藏保存）。

杂质d[N,N '-双（2,4-二甲苯基）甲脒]贮备液:精密称取N,N'-双（2,4-二甲苯基）甲脒mg 于10ml容量瓶中，加乙酸甲酯定容至10ml摇匀即得，为2.0%（W/V）O（注意闭光冷藏保存）。

溶液A的制备:分别精密量取杂质a、杂质b、杂质d贮备液各—ml 于同一10ml 容量瓶中，加乙酸甲酯定容，得到含杂质a为0.010%（W/V）、杂质b为0.20%（W/V）、杂质d 为0.20%（W/V）的溶液。

溶液B的制备（杂质c溶液）:精密称取 _mg 的杂质c [N-甲基-N' -（2,4-二甲苯基）甲脒]溶解于5ml的乙酸甲酯中，加入—mg 的三乙胺，用超声波混合2分钟，过滤，用少量的
乙酸甲酯对滤纸进行冲洗，最后加入乙酸甲酯溶剂使过滤液和冲洗
液的混合体积定容到25ml即可得到溶液B(其中杂质c的含量为0.1%左右)。

供试品溶液的制备：精密称取—mg 的双甲脒供试样品于10ml容量瓶中，加乙
酸甲酯定容至10ml摇匀即可，溶液浓度为5.0%(W/V)。

混合溶液的制备：分别取溶液A和溶液B适量，与同体积的供试品溶液混合。

(V:V:V=1:1:1)
分别取空白溶液，杂质a溶液，杂质b溶液，杂质c溶液，杂质d溶液和混合溶液注入气相色谱中，记录色谱图。

5.2.3接受标准：
溶液乙酸甲酯对双甲脒的检测没有影响；
混合溶液中各峰的分离度不小于1.5 ；
样品溶液中可能存在的降解杂质对双甲脒的检测没有影响。

5.2.4验证结果：
表2-2:专属性验证结果-混合溶液中各杂质分离度
结论:
5.3检测限、定量限
5.3.1目的：
确定该方法在一定的条件下最小能够检测到的被分析物的浓度为多少，以及最小能够定
量的被分析物的浓度为多少。

5.3.2实际操作：
杂质a储备液的配制:精密称取杂质a对照品__________ mg于______ m L的容量瓶中，加
入乙酸甲酯溶解稀释至刻度后，摇匀。

杂质a检测限溶夜:精密移取________ m L杂质a储备液于______ mL的容量瓶中，加入乙
酸甲酯稀释到刻度摇匀。

逐步稀释到溶液进样后双甲脒图谱中，信噪比S/N在3-5之间。

版本号：MV-SJM-RS-14-001
双甲脒有关物质气相分析
方法验证方案 Page: 9 / 22
杂质a 定量限溶液:精密移取 ________ mL 杂质a 储备液于 _______ m L 的容量瓶中，加入乙
酸甲酯稀释到刻度摇匀。

逐步稀释到溶液进样后双甲脒图谱中，信噪比 S/N 在10-15之 间，一般为检测限浓度的3倍。

杂质b 储备液的配制:精密称取杂质b 对照品 __________ 入乙酸甲酯溶解稀释至刻度后，摇匀。

杂质b 检测限溶夜:精密移取 ________ mL 杂质b 储备液于 _______ m L 的容量瓶中，加入乙 酸甲酯稀释到刻度摇匀。

逐步稀释到溶液进样后双甲脒图谱中， 信噪比S/N 在3-5之间。

杂质b 定量限溶液:精密移取 ________ mL 杂质b 储备液于 _______ m L 的容量瓶中，加入乙 酸甲酯稀释到刻度摇匀。

逐步稀释到溶液进样后双甲脒图谱中，信噪比 S/N 在10-15之 间，一般为检测限浓度的3倍。

杂质c 储备液的配制:精密称取杂质c 对照品 __________ 入乙酸甲酯溶解稀释至刻度后，摇匀。

杂质c 检测限溶夜:精密移取 ________ mL 杂质c 储备液于 _______ m L 的容量瓶中，加入乙 酸甲酯稀释到刻度摇匀。

逐步稀释到溶液进样后双甲脒图谱中， 信噪比S/N 在3-5之间。

杂质c 定量限溶液:精密移取 ________ mL 杂质c 储备液于 _______ m L 的容量瓶中，加入乙 酸甲酯稀释到刻度摇匀。

逐步稀释到溶液进样后双甲脒图谱中，信噪比 S/N 在10-15之 间，一般为检测限浓度的3倍。

杂质d 储备液的配制:精密称取杂质d 对照品 __________ 入乙酸甲酯溶解稀释至刻度后，摇匀。

杂质d 检测限溶夜:精密移取 ________ mL 杂质d 储备液于 _______ m L 的容量瓶中，加入乙 酸甲酯稀释到刻度摇匀。

逐步稀释到溶液进样后双甲脒图谱中， 信噪比S/N 在3-5之间。

杂质d 定量限溶液:精密移取 ________ mL 杂质d 储备液于 _______ m L 的容量瓶中，加入乙 酸甲酯稀释到刻度摇匀。

逐步稀释到溶液进样后双甲脒图谱中，信噪比 S/N 在10-15之 间，一般为检测限浓度的3倍。

取空白溶液（甲酸乙酯）注入气相色谱仪连续检测 3次，然后分别取检测限溶液和 定量限溶液注入色谱仪，检测限溶液连续进样 3次，定量限溶液连续进样5次。

5.3.3验证结果:
表3-1 :基线信噪比
常州华夏农药有限公司
mg 于 ____ mL 的容量瓶中，加 mg 于 ____ mL 的容量瓶中，加 mg 于 ____ mL 的容量瓶中，加
表3-3:定量限
541目的：
确定设计的范围内，测试结果与被测物浓度呈正比关系的程度。

542实际操作:
杂质a （2,4-二甲基苯胺）贮备液:精密称取2,4-二甲基苯胺 _mg 于250ml 容量 瓶中，加乙酸甲酯定容， 浓度为0.2 %（W/V ）。

杂质b （2,4-二甲基代苯胺）贮备液：精密称取 2,4-二甲基代苯胺 —mg 于10ml 容量瓶中，加乙酸甲酯定容至10ml 摇匀即得， 浓度为4.0%（W/V ）o 杂质d[N,N '-双（2,4-二甲苯基）甲脒]贮备液:精密称取N,N'-双（2,4-二甲苯基） 甲脒200mgT 10ml 容量瓶中，加乙酸甲酯定容至 10ml 摇匀即得，为4.0%（W/V ）。

溶液A 的制备：分别精密量取杂质a 、杂质b 、杂质d 贮备液各1ml 于同一 10ml 容 量瓶中，加乙酸甲酯定容，得到含杂质 a 为0.010%（W/V ）、杂质b 为0.20%（W/V ）、杂质 d 为0.40%（W/V ）的溶液。

溶液B 的制备：精密称取 _mg 的杂质c [N-甲基-N' -（2,4-二甲苯基）甲脒]溶 解于5ml 的乙酸甲酯中，加入32mg 的三乙胺，用超声波混合2分钟，过滤，用少量的 乙酸甲酯对滤纸进行冲洗，最后加入乙酸甲酯溶剂使过滤液和冲洗液的混合体积定容到 25ml 即可得到溶液B （其中杂质c 的含量为0.2%左右）。

200%寸照溶液制备：精密量取等体积的溶液 A 和溶液B 混合。

对照溶液的制备：精密量取等体积的 200%寸照溶液和乙酸甲酯混合
60%寸照溶液的配制：精密量取 ml200%对照溶液于 mL 容量瓶中，用乙酸甲酯 稀释至刻度。

（备注：例如量取3ml 稀释至10ml ）
80%寸照溶液的配制：精密量取 ml 对照溶液于 mL 容量瓶中, 释至刻度。

（备注：例如量取4ml 稀释至10ml ）
100%寸照溶液的配制:精密量取_ml 对照溶液于 释至刻度。

（备注：例如量取5ml 稀释至10ml ）
120%寸照溶液的配制:精密量取_ml 对照溶液于 释至刻度。

（备注：例如量取6ml 稀释至10ml ）
释至刻度。

（备注：例如量取7ml 稀释至10ml ）
分别取空白溶液（乙酸甲酯）、对照溶液、60%-120%t 照浓度溶液、对照溶液1注 入色谱仪。

空白进样1次，对照溶1进6针，60%-120%t 照溶液分别进样1针，对照溶 液进1针。

记录色谱仪，并计算线性方程和线性相关系数。

5.4.3接受标准：
线性方程的线性相关系数不小于 0.99 5.4.4验证结果:
用乙酸甲酯稀
mL 容量瓶中，用乙酸甲酯稀 mL 容量瓶中，用乙酸甲酯稀 140%寸照溶液的配制：精密量取ml 对照溶液于 mL 容量瓶中，用乙酸甲酯稀
版本号：MV-SJM-RS-14-001 双甲脒有关物质气相分析
方法验证方案 p a ge ：12 / 22
表4-1 :杂质a 线性验证结果
表4-2 :杂质b 线性验证结果
表4-4 :杂质d 线性
常州华夏农药有限公司
加如 ml200% 对照溶液，然后用乙酸甲酯定容至 10ml 摇匀即可。

(备注加上4ml ) 80%-2对照溶液的配制：精密称取 _mg 的双甲脒供试样品于10ml 容量瓶中,
加如 ml200% 对照溶液，然后用乙酸甲酯定容至 10ml 摇匀即可。

(备注加上4ml ) 80%-3对照溶液的配制：精密称取 _mg 的双甲脒供试样品于10ml 容量瓶中, 加如 ml200% 对照溶液，然后用乙酸甲酯定容至 10ml 摇匀即可。

(备注加上4ml )
结论： 5.5准确度 5.5.1目的：
考察分析方法测定结果与真实值或参考值接近的程
度。

杂质a(2,4-二甲基苯胺)贮备液:精密称取2,4-二甲基苯胺 _mg 于250ml 容量 瓶中，加乙酸甲酯定容， 浓度为0.2 %(W/V)。

杂质b(2,4-二甲基代苯胺)贮备液：精密称取 2,4-二甲基代苯胺 _mg 于10ml 容量瓶中，加乙酸甲酯定容至10ml 摇匀即得， 浓度为4.0%(W/V)o
杂质d[N,N '-双(2,4-二甲苯基)甲脒]贮备液:精密称取N,N'-双(2,4-二甲苯基) 甲脒200mgT 10ml 容量瓶中，加乙酸甲酯定容至 10ml 摇匀即得，为4.0%(W/V)。

溶液A 的制备：分别精密量取杂质a 、杂质b 、杂质d 贮备液各1ml 于同一 10ml 容 量瓶中，加乙酸甲酯定容，得到含杂质 a 为0.010%(W/V)、杂质b 为0.20%(W/V)、杂质 d 为0.40%(W/V)的溶液。

溶液B 的制备：精密称取 _mg 的杂质c [N-甲基-N' -(2,4-二甲苯基)甲脒]溶 解于5ml 的乙酸甲酯中，加入32mg 的三乙胺，用超声波混合2分钟，过滤，用少量的 乙酸甲酯对滤纸进行冲洗，最后加入乙酸甲酯溶剂使过滤液和冲洗液的混合体积定容到 25ml 即可得到溶液B(其中杂质c 的含量为0.2%左右)。

200%寸照溶液制备：精密量取等体积的溶液 A 和溶液B 混合。

对照溶液的制备：精密量取等体积的 200%寸照溶液和乙酸甲酯混合。

空白供试溶液1的制备：精密称取 _mg 加乙酸甲酯定容至10ml 摇匀即可，溶液浓度为 的双甲脒供试样品于 5.0%(W/V)o 10ml 容量瓶中,
空白供试溶液2的制备：精密称取 _mg 加乙酸甲酯定容至10ml 摇匀即可，溶液浓度为 的双甲脒供试样品于 5.0%(W/V)o 10ml 容量瓶中,
空白供试溶液3的制备：精密称取 _mg 加乙酸甲酯定容至10ml 摇匀即可，溶液浓度为 的双甲脒供试样品于 5.0%(W/V)o
10ml 容量瓶中,
80%-1加样溶液的配制：精密称取 mg 的双甲脒供试样品于10ml 容量瓶中,
100%-1对照溶液的配制：精密称取 _mg 的双甲脒供试样品于10ml 容量瓶中，
加如
ml200% —
，然后用乙酸甲酯定容至 10ml 摇匀即可。

（备注加上5ml ）
100%-2对照溶液的配制：精密称取_mg 的双甲脒供试样品于 加如 ml200% 对照溶液，然后用乙酸甲酯定容至 10ml 摇匀即可＜ 100%-3对照溶液的配制：精密称取_mg 的双甲脒供试样品于 加如 ml200% 对照溶
液，然后用乙酸甲酯定容至 10ml 摇匀即可＜ 120%-1对照溶液的配制：精密称取 _mg 的双甲脒供试样品于 加如 ml200% 对照溶液，然后用乙酸甲酯定容至 10ml 摇匀即可＜ 120%-2对照溶液的配制：精密称取_mg 的双甲脒供试样品于 加如 ml200% 对照溶液，然后用乙酸甲酯定容至
10ml 摇匀即可＜
120%-3对照溶液的配制：精密称取 _mg 的双甲脒供试样品于10ml
容量瓶中, 加如 ml200% 对照溶液，然后用乙酸甲酯定容至 10ml 摇匀即可。

（备注加上6ml ） 5.5.3接受标
准:
单一回收率应在80%-120沱间；
各浓度水平内的回收率及各浓度水平回收率平均值之间的 RSD 不大于10.0%。

5.5.4验证结果:
表5-1 :杂质a 的加样回收率验证结果
10ml 容量瓶中，
（备注加上10ml 容量瓶中， （备注加上5ml ）
10ml 容量瓶中,
（备注加上6ml ）
10ml 容量瓶中,
（备注加上6ml ）
表5-2 :杂质b的加样回收率验证结果
表5-3 :杂质c的加样回收率
表5-4 :杂质d的加样回收率验证结果
结论：
5.6精密度
561 重复性
5.6.1.1 目的：
在相同的操作条件下，测试在较短时间间隔精密度。

5.6.1.2 实际操作：
杂质a(2,4-二甲基苯胺)贮备液:精密称取2,4-二甲基苯胺—mg 于250ml容量瓶中，加乙酸甲酯定容，浓度为0.1 %(W/V)。

杂质b(2,4-二甲基代苯胺)贮备液：精密称取2,4-二甲基代苯胺—mg 于10ml 容量瓶中，加乙酸甲酯定容至10ml摇匀即得，浓度为2.0%(W/V)o
杂质d[N,N '-双(2,4-二甲苯基)甲脒]贮备液:精密称取N,N'-双(2,4-二甲苯基)甲脒200mgT 10ml 容量瓶中，加乙酸甲酯定容至10ml摇匀即得，为2.0%(W/V)。

溶液A的制备：分别精密量取杂质a、杂质b、杂质d贮备液各1ml于同一10ml容量瓶中，加乙酸甲酯定容，得到含杂质a为0.010%(W/V)、杂质b为0.20%(W/V)、杂质d为0.20%(W/V)的溶液。

溶液B的制备：精密称取_mg 的杂质c [N-甲基-N' -(2,4-二甲苯基)甲脒]溶
解于5ml的乙酸甲酯中，加入mg的三乙胺，用超声波混合2分钟，过滤，用少量的乙酸甲酯对滤纸进行冲洗，最后加入乙酸甲酯溶剂使过滤液和冲洗液的混合体积定容到25ml即可得到溶液B(其中杂质c的含量为0.1%左右)o
对照溶液的制备：等体积的溶液A和溶液B的混合溶液。

分别取空白溶液(乙酸甲酯)、对照溶液注入色谱仪，空白1针，对照溶液连续检测6次，记录色谱图，计算RSD值。

561.3 接受标准：
连续6针对照图谱中，各个杂质的峰面积的RSD值不大于5.0%。

5.6.1.4 验证结果：
表6-1 :重复性验证结果
结论：
5.6.2中间精密度
5.6.2.1 目的：
按照重复性实验的测定程序，在同一实验室，评价在改变实验员、日期条件下所的结果之间的精密度。

5.622 实际操作：
选取一批代表性的产品作为供试品。

实验员A,气相色谱仪I :
杂质a(2,4-二甲基苯胺)贮备液:精密称取2,4-二甲基苯胺—mg 于250ml容量瓶中，加乙酸甲酯定容，浓度为0.1 %(W/V)。

杂质b(2,4-二甲基代苯胺)贮备液：精密称取2,4-二甲基代苯胺—mg 于10ml 容量瓶中，加乙酸甲酯定容至10ml摇匀即得，浓度为2.0%(W/V)。

杂质d[N,N '-双(24 二甲苯基)甲眯]贮备液:精密称取N,N，-双(2,4-二甲苯基)甲脒200mgT 10ml容量瓶中，加乙酸甲酯定容至10ml摇匀即得，为2.0%(W/V)。

溶液A的制备：分别精密量取杂质a、杂质b、杂质d贮备液各1ml于同一10ml容量瓶中，加乙酸甲酯定容，得到含杂质a为0.010%(W/V)、杂质b为0.20%(W/V)、杂质d为0.20%(W/V)的溶液。

双甲脒有关物质气相分析
方法验证方案 | Page: 18 / 22
常州华夏农药有限公司 版本号：MV-SJM-RS-14-001
溶液B 的制备：精密称取 _mg 的杂质c [N-甲基-N' -（2,4-二甲苯基）甲脒]溶
解于5ml 的乙酸甲酯中，加入 mg 的三乙胺，用超声波混合2分钟，过滤，用少量 的乙酸甲酯对滤纸进行冲洗，最后加入乙酸甲酯溶剂使过滤液和冲洗液的混合体积定容 到25ml 即可得到溶液B （其中杂质c 的含量为0.1%左右）。

对照溶液的制备：等体积的溶液 A 和溶液B 的混合溶液。

供试品溶液1的配置：精密称取 —mg 的双甲脒供试样品（批号：） 于10ml 容量瓶中，加乙酸甲酯定容至10ml 摇匀即可，溶液浓度为5.0%（W/V ）。

供试品溶液2的配制：精密称取 —mg 的双甲脒供试样品（批号：） 于10ml 容量瓶中，加乙酸甲酯定容至10ml 摇匀即可，溶液浓度为5.0%（W/V ）。

供试品溶液3的配制：精密称取 —mg 的双甲脒供试样品（批号：） 于10ml 容量瓶中，加乙酸甲酯定容至10ml 摇匀即可，溶液浓度为5.0%（W/V ）。

供试品溶液4的配制：精密称取 _mg 的双甲脒供试样品（批号：） 于10ml 容量瓶中，加乙酸甲酯定容至10ml 摇匀即可，溶液浓度为5.0%（W/V ）。

供试品溶液5的配制：精密称取 —mg 的双甲脒供试样品（批号：） 于10ml 容量瓶中，加乙酸甲酯定容至10ml 摇匀即可，溶液浓度为5.0%（W/V ）。

供试品溶液6的配制：精密称取 —mg 的双甲脒供试样品（批号：） 于10ml 容量瓶中，加乙酸甲酯定容至10ml 摇匀即可，溶液浓度为5.0%（W/V ）。

实验员B,气相色谱仪II : 溶液配置过程参考以上过程。

分别移取空白溶液（乙酸甲酯）、对照溶液，供试品溶液1-供试品溶液6,对照溶 液注入气相色谱仪，空白溶液进1针，对照溶液分别连续检测6针和1针，供试品溶液 进1针。

记录色谱图，计算供试品各个杂质的含量。

5.6.2.3 接受标准：
6份样品溶液中杂质含量之间的 RSD 不超过25.0% （小于0.05%的除外）。

2个不同实验员所测的平均杂质含量均在该范围之内（0.05%w 值W 0.10%）。

2个不同实验员所测的平均杂质含量的差值不超过 0.10% （0.10%＜值w 0.50%） o 2个不同实验员所测的平均杂质含量的差值不超过 0.20% （值〉0.50%） 5.6.2.4 验证结果:
表6-2 :中将精密度验证结果
结论：
5.7方法耐用性
5.7.1目的：
确认在测定条件有微小变动时，测定结果不受影响的承受程度。

5.7.2实际操作：
杂质a(2,4-二甲基苯胺)贮备液:精密称取2,4-二甲基苯胺—mg 于250ml容量瓶中，加乙酸甲酯定容，浓度为0.1 %(W/V)。

杂质b(2,4-二甲基代苯胺)贮备液：精密称取2,4-二甲基代苯胺—mg 于10ml
容量瓶中，加乙酸甲酯定容至10ml摇匀即得，浓度为2.0%(W/V)o
杂质d[N,N '-双(2,4-二甲苯基)甲脒]贮备液:精密称取N,N'-双(2,4-二甲苯基)甲脒200mgT 10ml容量瓶中，加乙酸甲酯定容至10ml摇匀即得，为2.0%(W/V)o
溶液A的制备：分别精密量取杂质a、杂质b、杂质d贮备液各1ml于同一10ml容量瓶中，加乙酸甲酯定容，得到含杂质a为0.010%(W/V)、杂质b为0.20%(W/V)、杂质d为
0.20%(W/V)的溶液。

溶液B的制备：精密称取_mg 的杂质c [N-甲基-N' -(2,4-二甲苯基)甲脒]溶解于5ml的乙酸甲酯中，加入mg的三乙胺，用超声波混合2分钟，过滤，用少量的乙酸甲酯对滤纸进行冲洗，最后加入乙酸甲酯溶剂使过滤液和冲洗液的混合体积定容到25ml即可得到溶液B(其中杂质c的含量为0.1%左右)o
对照溶液的制备：等体积的溶液A和溶液B的混合溶液。

供试品溶液的制备：精密称取_mg 的双甲脒供试样品（批号：）于10ml 容量瓶中，加乙酸甲酯定容至10ml摇匀即可，溶液浓度为5.0%（W/V）。

混合溶液的制备：取等体积的溶液A,溶液B和供试品溶液混合。

在规定的系统条件下，分别移取空白溶液（乙酸甲酯）、空白供试品溶液、供试品溶液和对照溶液分别注入气相色谱仪，空白溶液1针，空白供试品溶液1针、供试品溶
液1针，对照溶液连续6针，记录色谱图。

其他条件不变，以下其中一个条件发生变化时将空白溶液、对照溶液和混合分别注入气相色谱仪，空白溶液1针，对照溶液连续6针，混合溶液1针，记录色谱图。

检测温度：300 2C；载气流速：12 1mL/min;色谱柱批号。

5.7.3接受标准：
色谱条件发生微小变化时，该方法仍然适用于样品的检测。

5.7.4验证结果：
表7-1 :方法耐用性验证结果-分离度
表7-2 :方法耐用性验证结果-连续6针峰面积RSD
结论：
5.8溶液稳定性
5.8.1目的：
测试将供试品溶液放置一定时候后溶液中双甲脒的稳定性。

5.8.2实际操作：
供试品溶液的制备：精密称取—mg 的双甲脒供试样品（批号：）于10ml
容量瓶中，加乙酸甲酯定容至10ml摇匀即可，溶液浓度为5.0%（W/V）。

分别移取空白溶液（乙酸甲酯）、供试品溶液（分别在Oh, 1h, 2h, 3h, 4h, 5h, 6h 时间点各进样1针）记录色谱图。

用面积归一化法计算各个杂质的含量。

5.8.3接受标准：
在一定的外部环境条件下，供试品溶液放置一段时间按后，杂质含量的绝对值在土
0.1 %以内，并不得出现新的大于报告限度的杂质，则证明在该时间段内此环境条件下样品溶液是稳定的。

5.8.4验证结果：
表8-1 :溶液稳定性验证结果
结论：
6.结论。