急性心肌梗死后心力衰竭患者血清循环微小RNA-150的改变

急性心肌梗死（acute myocardial infarction ，AMI ）是冠状动脉疾病（coronary artery disease ，CAD ）中
最严重的疾病，是心血管疾病发病率和病死率的
主要原因之一［1］。

随着医疗卫生的发展，检测技术的更新，AMI 的诊疗已快速发展，大大降低了其发病率。

另一方面，虽然大部分AMI 患者可成功脱离急性期，但随后逐渐发展成慢性缺血性心脏病，后者全球的患病人数逐年攀升，预后不佳，给家庭和社会带来巨大的负担［2］。

因此，寻找一种与
△基金项目：国家自然科学基金（项目编号：No.81601835）；四川省卫生计生委（项目编号：18ZD039）。

作者简介：赵婕（1981-），女，主管检验技师，研究方向为临床免疫。

通信作者：胡琼英，E-mail ：*******************
急性心肌梗死后心力衰竭患者血清循环微小RNA-150
的改变
△
赵婕1，陶蜀杭1，王路长1，胡琼英2（1.成都市第二人民医院检验科，成都610017；2.成都中医药大学附属医院检验科，成都610072）
摘要：目的
筛选并评价血清循环微小RNA （micro RNA ，miR ）预测急性心肌梗死（acute myocardial infarction ，
AMI ）后心力衰竭（heart failure ，HF ）的诊断价值，以期为AMI 的诊疗提供新的生物标志物。

方法收集2017年
1月至2018年12月在成都市第二人民医院40例AMI 后HF 患者和40例AMI 后非HF 患者。

通过实时定量聚
合酶链反应q-PCR 筛选候选miR ，统计分析差异，计算预测价值。

结果
筛选出5个候选miRs ，经单因素方差
分析发现，AMI 后HF 组的血清循环miR-150水平明显低于AMI 后非HF 组（0.38±0.25vs .0.65±0.33，P <0.001）。

使用miR-150预测AMI 后HF 时，受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve ，ROC ）下面积（area under the curve ，AUC ）为0.802（95％CI ：0.708-0.895，P =0.000），预测阈值截断值为0.45，对应的灵敏度和特异度分别为67.5%和77.5%。

结论血清循环miR-150是预测AMI 后HF 的新型生物学标志物，但未来
仍需进一步扩大样本量进临床研究验证其预测价值。

关键词：心肌梗死；心力衰竭；预后价值中图分类号：R542.2+2；R541.6+1
文献标志码：A
文章编号：1007-9688（2021）02-0171-04
Serum circulating micro RNA-150in post-acute myocardial infarction heart failure ZHAO Jie 1，TAO Shu-hang 1，WANG Lu-chang 1，HU Qiong-ying 2
（1.Chengdu Second People′s Hospital Laboratory ，Chengdu 610017，China ；2.Department of Laboratory Medi⁃cine ，Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine ，Chengdu 610072，China ）
Abstract ：Objectives To explore the prognostic value of the serum circulating micro RNA （miR ）-150on predicting
post-acute myocardial infarction （AMI ）heart failure （HF ），in order to provide a new biomarker for screening AMI.Methods
We collected 40patients with post-AMI HF and 40patients with post-AMI non-HF from January 2017to
December 2018in Chengdu Second People′s Hospital.MiR were screened by real-time quantitative polymerase chain reaction （PCR ），then statistical analysis was analyzed ，and predicted values were calculated.Results
Five candi⁃
date miRs were screened.One-way ANOVA showed that serum circulating miR-150levels in post-AMI HF group was
significantly lower than that in post-AMI non-HF group （0.38±0.25vs .0.65±0.33，P <0.001）.Further analysis showed that the area under the receiver operating characteristic curve （ROC ）was 0.802（95%CI ：0.708-0.895，P =0.000）.The threshold cut-off value was 0.45，and the corresponding sensitivity and specificity were 67.5%and 77.5%，respec⁃tively when serum circulating miR-150was used to predict HF after AMI.Conclusions Serum circulating miR-150is
a new biomarker to predict post-AMI HF.Further large sample prospective clinical research is needed to validate its role in the future.
Key words ：acute myocardial infarction ；heart failure ；prognostic value
doi ：10.3969/j.issn.1007-9688.2021.02.11
·论著·
AMI后心力衰竭（heart failure，HF）发生、发展有关的生物标志物，成为AMI患者及时干预的迫切需要。

血清循环微小RNA（microRNA，miR）是各类细胞在血清中释放的稳定产物，被广泛应用于生命科学各个领域［3］。

最近的研究发现血清循环miRs与人类疾病息息相关，成为各种疾病诊断和预后的生物标志［4］。

血清循环miRs也被证实为心血管疾病潜在的生物标志物［5］，Xue等［6］分析了经皮冠状动脉介入治疗前后的AMI患者血浆循环miRs的变化，发现miR-26a-1，miR-146a和miR-199a-1在AMI患者血浆中显著增高，可成为AMI 诊断的标志物。

Yin等［7］分析了老年AMI患者、不稳定型心绞痛（unstable angina，UA）和健康老年人miR表达水平，其中miR-214在老年AMI患者血清中高表达，并可通过抑制miR-214靶基因（包括PU⁃MA、PTEN、Bax和caspase7）的表达抑制心肌细胞凋亡。

Zhang等［8］研究了AMI患者中miR-486和miR-150的表达情况，并评估了两者作为AMI的潜在生物标志物的诊断价值，受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线分析表明，两者对AMI（与健康对照相比）具有重要的诊断价值，ROC曲线下面积（area under the curve，AUC）为0.771，尤其是非ST段抬高型心肌梗死（non-ST-segment elevation myocardial infarction，NSTE⁃MI），AUC为0.845。

以上结果显示，已有少量研究miR-150与AMI 诊断相关，但与AMI预后关系的研究少之又少，基于不同的种族和遗传背景，本研究旨在探索在本地区miR-150与AMI预后的相关性，并评价其预测价值，为AMI的早期干预提供一种新的生物标志物。

1资料和方法
1.1研究对象
回顾性收集和分析80例2017年1月至2018年12月来成都市第二人民医院就诊的新诊断的AMI 患者的临床资料，AMI的确诊依据为AMI的第四个通用定义［9］。

患者的临床资料包括：年龄、性别等基本信息；实验室检查和图像。

本研究通过了本院伦理委员会批准，以书面通知征得所有参与者的同意。

1.2筛选血清循环微小RNAs
检索文献，挖掘筛选出5个候选miR（miR-133a、miR-499、miR-150、miR-192和miR-34a）作
为AMI后HF的潜在预测因子。

小样本临床研究表明这些循环miRs的改变与AMI患者预后不良有关，如短期主要不良心血管事件（major adverse
cardiovascular events，MACE）、左侧心室重构、左心室射血分数（left ventricular ejection fraction，LVEF）等，见图1。

1.3血清循环微小RNAs检测
收集入院时（AMI后第1天）患者外周血，按照试剂盒标准操作从血清中提取总RNA（德国，Qiagen）。

按cDNA试剂盒说明书（德国，Qiagen）获得cDNA。

应用SYBR Green master mix（Biosystems）系统进行实时定量聚合酶链反应检测，小核RNA U6为内参。

每个样本重复检测3次。

1.4统计学分析
将检测的miRs相对表达标准化为U6，计算公式为△Ct=Ct miR平均值—CtRNU6平均值，之后的统计分析用△△Ct法（倍数变化）。

连续变量用（x±s）表示；分类变量用绝对数和百分比数表示。

根据分布情况用t检验或Mann-Whitney U检验组间的显着性差异。

卡方检验或Fisher精确检验用于分类变量检验。

绘制ROC曲线分析miR-150预测AMI后HF的诊断价值并确定诊断截断值。

使用SPSS19.0进行统计分析，以P<0.05具有统计学差异。

2结果
2.1急性心肌梗死患者人口学特征
共80例AMI患者入选本研究，包括40例AMI 后HF患者和40例AMI后非HF患者。

AMI后HF 组和AMI后非HF组患者临床基线资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），详见表1。

图1AMI后HF的潜在预测因子循环miR的筛选（LVEDV）：左心室舒张末期容积；LVEDd：左心室舒张末
期直径）
2.2
两组来者血清循环微小RNAs 水平比较实时定量聚合酶链反应检测发现：与对照组相比，5个候选miRs 中有4个在AMI 患者中明显增高（miR-133a 、miR-499、miR-34a 和miR-192），但在AMI 后HF 和AMI 后非HF 组患者间比较差异无统计学意义（P >0.05）；miR-150的血清水平是AMI 患者中唯一下降的miR ，且AMI 后HF 组明显低于AMI 后非HF 组，差异有统计学意义（P <0.001），见表2。

2.3血清循环微小RNA-RNA-150150预测AMI 后HF 的诊断价值
绘制ROC 曲线确定miR-150预测AMI 后HF 的诊断效能，发现AUC 为0.802（95％CI ：0.708～0.895，P =0.000），通过约登指数计算找出截断值为0.45，此时对应的灵敏度和特异度分别为67.5%和77.5%，此时预测阈值截断值为0.4，见图2。

3
讨
论
本研究通过比较miR-150在AMI 后HF 组和
AMI 后非HF 组患者之间的表达差异，发现AMI 后
HF 组患者的水平明显低于AMI 后非HF 组患者，表明miR-150可能与AMI 后HF 发展密切有关。

miR-150作为AMI 后HF 的预测因子，本研究通过绘制ROC 曲线分析其预测的准确性：AUC 为0.802，灵敏度和特异度分别为67.5%和77.5%，对应的截断值为0.4。

与传统的AMI 后HF 预测经典标志物BNP 相比（有文献报道AUC 为0.616），其预测价值更佳［10］。

另外，本研究发现BNA 在AMI 后HF 组患者的浓度明显高于AMI 非HF 组，故miR-150与BNP 联合鉴别诊断AMI 后HF 和AMI 后非HF 也是后续扩大样本量研究提高诊断价值的重要思路。

MiR-150在淋巴结和脾脏中高表达，在免疫原性、造血和胚胎造血中起着重要的作用，低表达的miR-150可能导致自身免疫性疾病和造血系统恶性肿瘤［11］。

目前有关miR-150的临床研究主要集中在血液系统疾病［11］、肺癌［12］、结肠癌［13］、胃癌等［14］，但对心血管疾病的作用研究较少，目前认为miR-150具有保护心肌损伤的作用，并对心脏肥大，或通过各种机制引起的心肌纤维化亦具有保护作用。

Scrutinio 等［15］研究发现血清循环miR-150水平在急性HF 患者中明显下调（与稳定期HF 患者相比），表明该指标可能成为一种HF 的严重程度的潜在生物标志物。

Zhang 等［8］研究显示AMI 患者血浆中miR-486和miR-150的水平显著高于健康对照，二者对AMI 尤其是NSTEMI 有重要的诊断价值，联合ROC 曲线分析显示，在区分AMI 患者和健康对照时AUC 值为0.771；鉴别NSTEMI 患者和健康对照时AUC 值为0.845。

本研究比较AMI 后HF 组和AMI 后非HF 组之间miR-150的表
表1
两组患者临床基线资料比较指标
年龄（岁）男性
体质量指数kg/m 2吸烟高血压糖尿病
ST 段抬高型心肌梗死肌钙蛋白T （ng/mL ）脑钠肽（ng/μL ）总胆固醇（mmol/L ）
低密度脂蛋白胆固醇（mmol/L ）肌酐（μmol/L ）
AMI 后HF 组62.5±11.8
26（65.8）24.3±3.212（30.2）23（58.9）4（11.3）27（69.2）1.5±1.90
110.8±56.44.7±1.12.7±1.2
89.1±26.3AMI 后非HF 组63.8±10.422（55.7）24.1±3.416（40.9）19（48.2）3（7.6）
24（60.1）1.1±0.888.0±49.64.6±0.92.6±1.183.0±22.7
t 值
0.7161.2331.7022.3941.2012.4171.1341.9812.3921.0711.1711.199P 值0.5820.321
0.0810.0930.2910.1800.3110.0660.0330.2850.2660.253
注：TnT ——肌钙蛋白T ；BNP ——脑钠肽；*
P <0.05
［n=40，
n （%），x±s ］表2
AMI 后HF 水平和AMI 后非HF 组患者
血清循环miRs 水平比较miRs
miR-133a miR-499miR-34a miR-192miR-150
AMI 后HF 组7.3±4.16.1±2.71.4±0.63.0±1.20.4±0.3
AMI 后非HF 组
6.0±3.56.9±3.81.2±0.42.6±1.00.6±0.4
Z 值0.4360.0511.5461.7504.127
P 值0.5630.8680.1010.1610.0008
注：数据表示为倍数变化，健康对照假定为1，两组间的循环miR 水平比较用Mann-Whitney U 检验
［n=40，x±s ］
图2血清循环miR-150预测AMI 后HF 的ROC 曲线图
0.00.20.4
0.60.8 1.0
1-特异性
1.00.80.60.40.20.0
敏感度
达差异，得出miR-150预测AMI后HF的AUC为0.802，与已有文献研究结果一致。

综上所述，miR-150可作为AMI后HF的潜在预测因子，但本文由于患者数较少，结果的可靠性仍有待后续大样本验证；同时，后续实验可通过体内外基础研究进一步明确miR-150调控AMI预后的作用机制，为AMI的诊断、治疗和预后提供新的靶点和思路。

参考文献：
［1］WEIL B R，NEELAMEGHAM S.Selectins and immune cells in acute myocardial infarction and post-infarctionventricular re⁃
modeling：Pathophysiology and novel treatments［J］.Front Im⁃
munol，2019，10：300.
［2］MIHANFAR A，NEJABATI H R，FATTAHI A，et al.The role of sphingosine1phosphate in coronary artery disease and isch⁃
emiareperfusion injury［J］.J Cell Physiol，2019，234（3）：2083-
2094.
［3］KINSER H E，PINCUS Z.MicroRNAs as modulators of longevi⁃ty and the aging process［J］.Hum Genet，2020，139（3）：
291-308.
［4］O′BRIEN K.TaqMan low density array：Microrna profiling for biomarker and oncosuppressor discovery［J］.Methods Mol Bi⁃
ol，2017，1509：71-84.
［5］SUN T，DONG Y H，DU W，et al.The role of microRNAs in myocardial infarction：from molecular mechanism to clinical ap⁃
plication［J］.Int J Mol Sci，2017，18（4）：745.
［6］XUE S，ZHU W，LIU D，et al.Circulating miR-26a-1，miR-146a and miR-199a-1are potential candidate biomarkers for
acute myocardial infarction［J］.Mol Med，2019，25（1）：18：
745.［7］YIN Y，LV L，WANG W.Expression of miRNA-214in the se⁃ra of elderly patients with acute myocardial infarction and its ef⁃
fect on cardiomyocyte apoptosis［J］.Exp Ther Med，2019，17
（6）：4657-4662.
［8］ZHANG R，LAN C，PEI H，et al.Expression of circulating miR-486and miR-150in patients with acute myocardial infarc⁃
tion［J］.BMC Cardiovasc Disord，2015，15（1）：51.
［9］LEE H L，AHMAD M I，LI Y，et al.Impact of the location of ST-T abnormalities accompanying minor Q-Waves on the Defini⁃
tion of Prior Myocardial Infarction［J］.Am J Cardiol，2020，125
（6）：860-865.
［10］LIN X，ZHANG S，HUO Z.Serum circulating miR-150is a predictor of post-acute myocardial infarction heart failure［J］.
Int Heart J，2019，60（2）：280-286.
［11］LIU Q，MA H，SUN X，et al.The regulatory ZFAS1/miR-150/ ST6GAL1crosstalk modulates sialylation of EGFR via PI3K/Akt
pathway in T-cell acute lymphoblastic leukemia［J］.J Exp Clin
Cancer Res，2019，38（1）：199.
［12］MISONO S，SEKI N，MIZUNO K，et al.Molecular pathogene⁃sis of gene regulation by the miR-150duplex：miR-150-3p
regulates TNS4in lung adenocarcinoma［J］.Cancers（Basel），
2019，11（5）：601.
［13］LIU F，DI WANG X.miR-150-5p represses TP53tumor sup⁃pressor gene to promote proliferation of colon adenocarcinoma
［J］.Sci Rep，2019，9（1）：6740.
［14］PEREIRA A L，MAGALH ES L，MOREIRA F C，et al.Epi⁃genetic field cancerization in gastric cancer：microRNAs as
promising biomarkers［J］.J Cancer，2019，10（6）：1560-
1569.
［15］SCRUTINIO D，CONSERVA F，PASSANTINO A，et al.Circu⁃lating microRNA-150-5p as a novel biomarker for advanced
heart failure：A genome-wideprospective study［J］.J Heart
Lung Transplant，2017，36（6）：616-624.。