培养基及配制

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常用培养基及添加剂的配制

1．牛心脑浸汁-辅助琼脂：（BHI-S）BHI 琼脂100mL氯化血红素-维生素K1 1mL脱纤维蛋白血（兔血）5-10mL 2．胰蛋白水解物-大豆琼脂（TS）胰蛋白水解物（或胰蛋白胨） 1.5g大豆胨0.5gNacl 0.5g酵母提取物0.5g盐酸半胱氨酸液0.4mL琼脂 2.0g蒸馏水加至100mL 3．Gifu厌氧培养基：（GAM）胰蛋白胨 1.0g大豆胨0.3g多价蛋白胨 1.0g酵母提取物0.5g肝浸汁10mL VPI盐溶液0.2g牛肉浸膏5mL盐酸半胱氨酸0.4mL 旈基乙醇酸钠0.03g 葡萄糖 1.0g 琼脂 1.8-2.0g 刃天青（0.1%）0.5g 蒸馏水加至100mL 4．Rogosa 乳杆菌选择培养基（LS）胰蛋白水解物（或胰蛋白胨） 2.0g酵母提取物 1.0g琼脂4g葡萄糖 4.0g (储存液)磷酸二氢钾 1.2g 12g枸橼酸三铵0.4g 4g硫酸镁（MgSo4 7H2O） 1.0g 10g硫酸锰（MnSo4 4H2O）0.4g 4g硫酸亚铁（FeSo4 7H2O）0.08g 0.8g醋酸钠（CH3COONa 3H2O）(乙酸钠) 5g 50g冰乙酸（99.5%）0.264mL 2.64mL聚山梨酯-80 0.2g 2gDH2O 200mL 200mL（每100mL培养基加10mL）5．TPY培养基胰蛋白胨 3.0g酵母提取物0.8g葡萄糖 2.0g磷酸二氢钾 1.2gK2HPO4 3H2O 0.4gNaCO30.4gNaCl 0.4gDH2O 200mL琼脂 2.5g /200mL6．普通血琼脂培养基（BA）牛肉浸膏（0.5-1.0）g蛋白胨 1.0gNaCl 0.5gK2HPO4 2.0g酵母提取物0.5g葡萄糖 1.0g琼脂 1.8g蒸馏水加至100mL7．轻唾培养基（MS）胰蛋白胨 1.0g示胨0.5g蔗糖3-5g（可根据需要将蔗糖量增至20g）葡萄糖0.1gK2HPO4 3H2O 0.53g琼脂 2.0g0.1%曲利本蓝7.5mL0.1%结晶紫0.8mL蒸馏水加至100mL8．轻唾-杆菌肽琼脂（MSB）MS琼脂（蔗糖含量为20%）100mL杆菌肽溶液（200U/mL）0.1mL灭菌MS琼脂50℃左右时加入杆菌肽溶液，混匀倒板9．轻唾-磺胺二甲嘧啶琼脂（MS磺胺琼脂）MS琼脂100mL*磺胺二甲嘧啶（5%） 1.0mL*1%的亚碲酸钾溶液0.28mL灭菌MS琼脂冷却至25℃时加入*10．TYCSB琼脂胰蛋白酶水解物 1.0g酵母提取物0.5g盐酸半胱氨酸溶液0.4gK2HPO4 3H2O 0.53g蔗糖20g琼脂2gDH2O 100mL灭菌后冷却至50-55℃时加入杆菌肽溶液（200U/mL）0.1mL,混匀倒板11．Rogosa 乳杆菌选择培养基（LS）胰蛋白水解物（或胰蛋白胨） 1.0g酵母提取物0.5g磷酸二氢钾0.6g枸橼酸三铵0.2g葡萄糖 2.0g硫酸镁（MgSo4 7H2O）0.5g硫酸锰（MnSo4 4H2O）0.2g硫酸亚铁（FeSo4 7H2O）0.04g醋酸钠（CH3COONa 3H2O）(乙酸钠) 2.5g冰乙酸（99.5%）0.132mL聚山梨酯-80 0.1g琼脂 1.8gDH2O 100mLLS盐溶液的组成：MgSo4 7H2O 5.57gMnSo4 2H2O 1.20gFeSo4 7H2O 0.34gDH2O 50 mL混合上述成分并加热使之溶解。

培养基及其配制

蛋白：
☺作用：
☺对细胞和组织的增殖与分化有明显的促进作用，但对器官的分化作用不明显。
☺注意：其成分大多不清楚，所以一般应尽量避免使用。
2.活性炭
☺作用：活性炭结构疏松，孔隙大，吸水力强，有很强的吸附作用它可以吸附非极性物质和色素等大分子物质。 ☺浓度: 0.5—l0g／L。
BL（Brown和 Lawrene,1968）
成分与MS类似
BM(Button,1975)
成分与MS类似，仅将盐酸硫胺素除去，蔗糖为3%
ER(Eriksson,1965)
☺形式：MgSO4·7H20
☺Ca：
☺作用：Ca是构成细胞壁的一种成分，对细胞分裂、保护质膜不受破坏有显著作用 ☺形式：CaCl2·2H2O。
2.微量元素：
☺主要元素：Fe、B、Mn、Cu、Mo、Co等。
☺Fe:
☺作用： ☺是某些酶的组成成分：氧化酶、细胞色素氧化酶、过氧化氢酶
☺是叶绿素形成的必要条件。培养基中的铁对胚的形成、芽的分化和幼苗转绿有促进作用。
生长。
☺ 作用：
☺ 糖作为碳源，为细胞提供合成新化合物的碳骨架 ☺ 为细胞的呼吸代谢提供底物与能源 ☺ 同时维持一定的渗透势，并且能够维持一定的渗透压
（一般在1.5～4.1×10５Pa）。
☺ 浓度：在2%—3%，常用3%。高压灭菌时，一部分糖会发
生分解，制定配方时要给予考虑。 ☺ 在大规模生产时，可用食用的绵白糖代替。
☺形式：FeSO4·7H20和Na2—EDTA ☺思考：为何不用Fe2（SO4）3，和FeCl3？
☺B，Mn，Zn，Cu，Mo，Co等，也是植物组织培养中不可缺少的元素，缺少这些物质会导致生长、发育异常现象。
（二）有机营养成分

培养基配方

一、哺乳动物培养基1、DMEM培养基DMEM培养基低糖(干粉) D2902 10X1L 含L-谷氨酰胺和1000 mg/L的葡萄糖。

不含酚红和和碳酸氢钠。

50L每升培养基含10.0g干粉。

配制时每升加3.7g碳酸氢钠。

DMEM培养基低糖（干粉）D5523 10×1L 含L-谷氨酰胺和1000 mg/L葡萄糖，不含碳酸氢钠。

2×5L每升培养基含10.0g干粉。

配制时每升加3.7g碳酸氢钠。

5L50L DMEM培养基低糖（干粉）D5030 10×1L 不含L-谷氨酰胺，葡萄糖，酚红，丙酮酸钠和碳酸氢钠。

10L每升培养基含8.3g干粉。

配制时每升加1.0g葡萄糖，0.584g 50LL-谷氨酰胺和3.7g碳酸氢钠。

DMEM培养基低糖（干粉）D5280 10×1L 可以高压消毒。

10L含1000 mg/L的葡萄糖。

不含L-谷氨酰胺和碳酸氢钠。

50L每升培养基含9.6g干粉。

配制时每升加0.584g L-谷氨酰胺和3.7g碳酸氢钠。

DMEM培养基低糖（液体）D5546 500ML 含有1000 mg/L葡萄糖和碳酸氢钠，不含L-谷氨酰胺。

用盐6×500ML 酸维生素B6代替盐酸吡哆醛。

使用前每升加入0.584g L-谷氨酰胺。

24×500ML1L6×1L DMEM培养基低糖（液体）D5921 100ML 含有1000 mg/L葡萄糖和碳酸氢钠，不含L-谷氨酰胺和酚红。

500ML用盐酸维生素B6代替盐酸吡哆醛。

使用前每升加入0.584g L-谷氨酰胺。

6×500MLDMEM培养基低糖（液体）D6046 100ML 含有1000 mg/L葡萄糖，L-谷氨酰胺和碳酸氢钠。

用盐酸维500ML 生素B6代替盐酸吡哆醛。

6×500ML1LDMEM培养基低糖（液体）D2429 100ML 1×的培养基含有1000 mg/L的葡萄糖。

常用培养基配方范文

常用培养基配方范文培养基（Culture medium）是一种用于细菌、真菌、植物细胞、动物细胞和其他微生物的繁殖和生长的营养物质。

常用的培养基可分为发酵培养基、微生物培养基和细胞培养基。

下面列举了一些常用的培养基配方。

1. LB培养基（Luria-Bertani medium）成分：-牛肉提取物：10克-酵母提取物：5克-热可溶性淀粉：10克-氯化钠：10克-水：1升2. NB培养基（Nutrient broth）成分：-牛肉提取物或肉蔻精：8克-酵母提取物：4克-葡萄糖：4克-水：1升3. MacConkey培养基成分：-水解动物蛋白：17克-中和胆盐：1.5克-中性红：0.03克-水：1升4. TSB培养基（Tryptic soy broth）成分：-大豆胨：17克-酵母提取物：3克-水：1升5. BHIA培养基（Brain Heart Infusion Agar）成分：-脑心汤固体：37克-水：1升6.R2A培养基成分：-水解酵母提取物：0.5克-蛋白胨：0.5克-葡萄糖：0.5克-脱脂乳粉：0.5克-黄豆粉：0.5克-高氯酸钠：0.3克-多聚体1466：0.05克-水：1000毫升7.比尔斯氏培养基（BHI培养基）成分：-大豆胨：37克-脑心汤固体：2克-水：1升8. 培养基199（Medium 199）成分：-高锰酸钾：0.015克-硫酸：1.55克-磷酸一氢钠：0.184克-高氯酸钠：8.0克-溴酚蓝：0.4克-d-葡萄糖：5.55克-l-谷氨酸：40.525克-苏打粉：0.84克-水：1升9. DMEM培养基（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）成分：-苔藓胶原酸：1克-乳糖：1克- 谷氨酸：584mg- 水：1000ml这只是一小部分常见的培养基配方，实际上有很多种不同的培养基，它们根据不同的生物特性和培养需求来设计。

不同的培养基可以提供细菌、真菌、细胞等微生物生长需要的各种营养物质。

微生物实验室常见20种培养基配方大全

微生物实验室培养基配方大全一、糖发酵管成分：牛肉膏 5g蛋白胨 10g氯化钠 3g磷酸氢二钠2g0.2％滇麝香草酚蓝溶液 12mL蒸馏水 1000mLPH 7.4制法1. 葡萄糖发酵管按上述成分配好后,按0.5％加入葡萄糖,分装于有一个倒置小管的小试管内，121℃高压灭菌15min。

2. 其他各种糖发酵管可按上述成分配好后，分装每瓶1000 mL，121℃高压灭菌15min。

另将各种糖类分别配好10%溶液，同时高压灭菌。

将5mL糖溶液加入于100 mL培养基内，以无菌操作分装小试管。

蔗糖不纯，加热后会自行水解者，应采用过滤法除菌。

从琼脂斜面上挑取小量培养物接种，于36℃±1℃培养，一般观察2～3d。

迟缓反应需观察14~30d。

二、乳糖胆盐发酵管成分：蛋白胨 20g猪胆盐（或牛、羊胆盐）5g乳糖 10g0.04%滇甲酚紫水溶液 25mL蒸馏水 1000mL制法：将蛋白胨，胆盐及乳糖溶于水中，校正pH，加入指示剂，分装每管10 mL，并放入一个小倒管，115℃高压灭菌15min。

双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外，其他成分加倍。

三、5％乳糖发酵管成分：蛋白胨 0.2g氯化钠 0.5g乳糖 5g2%溴麝香草酚蓝水溶液 1.2mL蒸馏水 100mLpH 7.4制法：除乳糖以外的各成分：溶解于50mL蒸馏水内，校正pH。

将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内，分别灭菌121 ℃ 15min，将两液混合，以无菌操作分装于灭菌小试管内。

在此培养基内，大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于ld内发酵。

四、缓冲葡萄糖蛋白胨水（MR和VP试验用）成分：磷酸氢二钾 5g多胨 7g葡萄糖 5g蒸馏水 1000mL制法：溶化后校正pH，分装试管，每管1mL ，121℃高压灭菌15min。

甲基红（MR）试验：自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中，于36±1℃培养2～5d，哈夫尼亚菌则应在22～25℃培养。

滴加甲基红试剂一滴，立即观察结果。

各种培养基的制作方法

配方一萨氏(Sabouraud's)培养基蛋白胨10克琼脂20克麦芽糖40克水1000毫升先把蛋白胨、琼脂加水后,加热,不断搅拌,待琼脂溶解后,加入40克麦芽糖(或葡萄糖),搅拌,使它溶解,然后分装,灭菌,备用。

1、营养肉汤培养基牛肉膏 0.3克蛋白胨 1.0克NaCl 0.5克水 100毫升pH 7、0～7、2在烧杯中加水,称取牛肉膏、蛋白胨与NaCl,加热溶化后,调节pH值至7、0～7、2。

分装,加棉塞,高压蒸汽灭菌即成。

常用于培养细菌。

2、营养琼脂培养基在营养肉汤培养基中增加20克琼脂即成。

常用于培养细菌。

3、肉汁蛋白胨液体培养基牛肉 500克蛋白胨 10克NaCl 5克pH 7、1～7、2取新鲜牛肉500克,去净脂肪、筋腱后,绞碎或剁碎,加水1000毫升浸泡,15℃下放置12小时或50℃下放置半小时。

用纱布将肉汁过滤,补足失水。

向肉汁中加入蛋白胨与食盐。

将肉汁加热,放入苏打(碳酸钠)至红色,调整pH值。

分装,高压蒸汽灭菌。

将上述已灭菌得培养基用棉花滤去凝集得蛋白质,制成液体培养基,如需制成固体培养基,可在每100毫升液体中加入2克琼脂,加热溶化后,分装,再次进行高压蒸汽灭菌。

常用于培养细菌。

4、高氏一号培养基(淀粉琼脂培养基)可溶性淀粉 2克K2HPO4 0.05克MgSO4·7H2O 0.05克KNO3 0.1克NaCl 0.05克FeSO4 0.001克琼脂 2克水 100毫升pH 7、2～7、4在烧杯中加水95毫升,加热至沸腾,取可溶性溶粉2克,用5毫升水调成糊状,倒入沸水中与匀。

再称取其它药品,陆续加入烧杯内(待一种药品溶解后,再加入第二种药品)。

待全部药品溶解后,停止加热,补足失水,调pH值至7、2～7、4。

分装后,高压蒸汽灭菌。

本培养基常用于培养放线菌。

5、马铃薯蔗糖培养基马铃薯 200克蔗糖 10克琼脂 20克水 1000毫升自然pH称取200克马铃薯片,加水1000毫升,煮沸半小时,用纱布过滤,补足失水。

培养基配方及配置

培养基配方及配置
一般来说，培养基的配方包含基础培养基、添加剂和调节剂。

基础培养基是指提供生物体基本生长必需的基本成分，包括能源物质、有机和无机原料、氮源、矿质元素和缓冲物质等。

常用的基础培养基有
LB培养基、MS培养基等。

添加剂是指用于满足特定实验需求的成分，如抗生素、抗菌剂、激素、维生素等。

添加剂的种类和浓度根据实验目的的不同而有所差异。

调节剂是指用于调节培养基pH值、渗透压、表面张力等物理化学性
质的成分，如缓冲液、pH调节剂等。

以下是一个常用的细菌培养基LB的配方及配置：
1.基础培养基成分：
- 水：900ml
-蛋白胨：10g
-酵母提取物：5g
-NaCl：5g
2.添加剂：（可根据实验需求进行必要的添加）
- 抗生素（如氨苄青霉素）：100μg/ml
- 抗菌剂（如氯霉素）：25μg/ml
3.配制方法：
-将蛋白胨、酵母提取物和NaCl加入水中，并搅拌混合均匀。

- 将培养基溶液倒入容量瓶中，加水至1000ml，并混合均匀。

-调节pH值至7.0-7.2（一般使用缓冲液进行调节）。

-用自制滤纸过滤器滤过，将溶液分装至培养皿或试管中。

-如需添加抗生素或抗菌剂，将相应的药物加入培养基中，并充分溶解。

-培养基装瓶后可以高温高压灭菌，或使用滤器过滤进行无菌处理。

以上是一个简单的LB培养基的配方和配置流程，不同实验需要可能
会有所调整和变化。

在设计培养基配方时，需要结合具体实验目的和生物
体的特性来确定合适的成分和浓度，并注意配制和保管过程中的无菌操作，以确保培养基的质量和有效性。

常用25种培养基详细配方

一、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏3g蛋白胨10gNaCl 5g琼脂15—20g水1000mlpH 7．0—7．21．05kg/cm2，121．3℃灭菌20分钟。

二、淀粉琼脂培养基(高氏1号培养基，培养放线菌用)可溶性淀粉20gKNO31gNaCl 0．5gK2HPO40．5gMgSO40．5gFeSO40．01g琼脂20g水1000mlpH 7．2—7．4配制时，先用少量冷水，将淀粉调成糊状，在火上加热，边搅拌边加水及其他成分，溶化后，补足水分至1000ml。

1．05kg/cm2，121．3℃灭菌20分钟。

三、查氏培养基(培养霉菌用，实验16)NaNO32gK2HPO41gKCl 0．5gMgSO40．5gFeSO40．01g蔗糖30g琼脂15—20g水1000mlpH 自然1．05kg/cm2，121．3℃灭菌20分钟。

四、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)葡萄糖10g蛋白胨5gKH2PO41gMgSO4·7H2O 0．5g1/3000孟加拉红(rose bengal，玫瑰红水溶液)100ml琼脂15—20gpH 自然蒸馏水800ml0．56kg/cm2(8磅/英寸2)，112．6℃灭菌30分钟。

临用前加入0．03%链霉素稀释液100ml，使每毫升培养基中含链霉素30μg。

五、马铃薯培养基(实验16)马铃薯200g蔗糖(或葡萄糖) 20g琼脂15—20g水1000mlpH 自然马铃薯去皮，切成块煮沸半小时，然后用纱布过滤，再加糖及琼脂，溶化后补足水至1000ml。

1．05kg/cm2，121．3℃灭菌20分钟。

六、麦芽汁琼脂培养基(实验15)1．取大麦或小麦若干，用水洗净，浸水6—12小时，置15℃阴暗处发芽，上盖纱布一块，每日早、中、晚淋水一次，麦根伸长至麦粒的两倍时，即停止发芽，摊开晒干或烘干，贮存备用。

2．将干麦芽磨碎，一份麦芽加四份水，在65℃水浴锅中糖化3—4小时，糖化程度可用碘滴定之。

各种培养基配方范文

各种培养基配方范文培养基是一种用于微生物培养的基础物质，能够为微生物提供所需的营养和环境条件。

不同的微生物在其生长过程中需要不同的养分和环境条件，因此培养基的配方需要根据微生物的需求来进行调整。

下面是几种常见的培养基配方。

1.大肠杆菌液体培养基配方：-蛋白胨或复合氮源：10g-酵母浸出物：5g-葡萄糖：1g-NaCl：5g-K2HPO4：2g-MgSO4：0.2g-pH调节至7.0后加水至1000mL2.牛心提取物琼脂糖培养基配方：-牛心提取物：3g-高级琼脂糖：15g-葡萄糖：10g-NaCl：5g-pH调节至7.0后加水至1000mL3.玉米浸出物琼脂糖培养基配方：-玉米浸出物：4g-高级琼脂糖：15g-酵母浸出物：1g-NaCl：5g-pH调节至7.0后加水至1000mL4.LB琼脂糖培养基配方：-液体LB培养基：10mL-高级琼脂糖：15g-NaCl：5g-pH调节至7.0后加水至1000mL 5.血寒养基配方：-羊血：50mL-肉浸出物：3g-酵母浸出物：3g-肉汤培养基：1L-红细胞素：5g-高级琼脂糖：3g-pH调节至7.0后加水至1000mL6.厌氧培养基配方：-肉浸出物：5g-酵母浸出物：5g-NaCl：5g-蒸馏水：900mL- 加入0.1%的L-cysteine：10mL-pH调节至7.0后用氮气替换空气注意事项：-培养基中的成分应严格按照配方比例加入，并保持无菌。

-配制好的培养基需要高温高压灭菌以保证无菌。

-不同的微生物可能对一些成分非常敏感，需要根据实际情况进行微调。

-培养基的pH值应根据微生物环境要求进行调整，一般在7.0左右。

-配好的培养基应存放在4℃的冰箱中，避免阳光直射以防止成分分解。

这只是一些常见的培养基配方，不同的微生物有不同的需求，可以根据具体的情况进行配方的调整。

在实际使用中，还需要根据微生物的特性和实验目的来选择合适的培养基。

培养基配方及配制方法

培养基配方及配制方法培养基是一种用于细菌、真菌、酵母等微生物的生长和繁殖的基质。

不同的微生物对培养基的要求不同，因此配方也会有所差异。

下面是一种常用的培养基配方及配制方法。

1.碳源：常见的碳源包括葡萄糖、果糖、麦芽糖等。

碳源的添加能够提供微生物的能量和碳原子。

2.氮源：常见的氮源包括氨基酸、尿素、硝酸盐等。

氮源的添加能够提供微生物生长所需的氮元素。

3.矿物质：常见的矿物质包括钠、钾、氯等。

矿物质的添加能够提供微生物生长所需的微量元素。

4.生长因子：一些微生物对特定的生长因子具有依赖性，例如维生素和氨基酸等。

5.pH缓冲剂：常见的pH缓冲剂有磷酸盐缓冲液、琼脂等，用于调节培养基的pH值。

6. 凝固剂：常见的凝固剂包括琼脂、Agar等，用于使培养基变成固体状。

培养基配制方法：1.按照配方将所需的各种成分加入适量的蒸馏水中。

注意要先将一些难溶的固体成分溶解后再加入。

2.配制的过程中要注意无菌操作，使用无菌的容器和仪器，避免细菌及其他微生物污染。

3.将配制好的培养基混合均匀，使各个成分充分溶解。

可以通过搅拌或加热溶解等方法进行混合。

4.调节培养基的pH值。

使用酸碱试剂（如盐酸和氢氧化钠）进行调节，直到达到适合所需微生物生长的pH值范围。

5.如果需要固体培养基，可以加入适量的凝固剂（如琼脂）。

溶解后加入培养基中，然后将培养基煮沸消毒使凝结。

6.将配制好的培养基装入适量的培养皿或试管中。

7.灭菌处理。

使用高压灭菌器或自动培养箱等设备进行灭菌处理，以杀死培养基中的微生物。

通过以上步骤，就可以得到配制好的培养基。

根据不同的微生物要求和实验需要，可以调整培养基的成分和浓度，以获得最适合微生物生长和繁殖的环境。

培养基配方及配制方法

培养基配方及配制方法培养基是一种用于寄养和培养细胞、微生物、组织等生物体的基质。

其配方的选择和配制方法对于不同的生物体和研究目的有很大的差异。

以下是一般常用的培养基配方及简单的配制方法：1. LB培养基（Luria-Bertani）LB培养基是常见的用于大肠杆菌等细菌的培养基，其配方包括：- 1% 蛋白胨（tryptone）: 添加营养源和能量- 0.5% 酵母粉（yeast extract）: 提供维生素和生长因子-1%NaCl（氯化钠）:调节渗透压-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法：将蛋白胨、酵母粉和NaCl加入蒸馏水中，调整pH至7.0，将混合液体加热至溶解，过滤杂质，如需固化则加入1.5%的琼脂。

2. YPD培养基（Yeast extract-Peptone-Dextrose）YPD培养基常用于酵母菌的培养，其配方包括：- 1% 酵母提取物（yeast extract）: 提供维生素和生长因子- 2% 蛋白胨（peptone）: 为细菌提供碳源和能量- 2% 葡萄糖（dextrose）: 为细菌提供碳源和能量-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法：将酵母提取物、蛋白胨和葡萄糖加入蒸馏水中，调整pH至7.0，将混合液体加热至溶解，过滤杂质，如需固化则加入2%的琼脂。

3. DMEM培养基（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）DMEM培养基是常用的哺乳动物细胞培养基，其配方包括：-10%胎牛血清（FBS）:提供生长因子和营养物质- 1% 青霉素-链霉素溶液（Penicillin-Streptomycin Solution）: 防止细菌污染- 1% L-谷氨酰胺（L-Glutamine）: 提供细胞代谢所需的基础物质-DMEM基础培养液:包括氨基酸、维生素等成分-蒸馏水：使混合液体稀释至所需体积配制方法：将胎牛血清、青霉素-链霉素溶液、L-谷氨酰胺和DMEM基础培养液加入蒸馏水中，调整pH值至7.4，混合均匀即可。

培养基的配制及使用记录

培养基的配制及使用记录一、引言在微生物学实验过程中，培养基的配制及使用记录是非常重要的实验步骤之一、正确的培养基配制可以提供适宜的营养物质和环境条件，促进微生物的生长和繁殖。

本文将详细介绍培养基的配制和使用记录，以及注意事项和实验结果的记录。

二、培养基的配制1.根据实验需要选择合适的培养基配方。

常见的培养基有肉汤培养基、浓缩肉汤培养基、天然培养基、合成培养基等。

2.按照培养基配方准确称取所需的物质，如蛋白胨、葡萄糖、酵母粉等。

3.将物质加入蒸馏水中，并用玻璃棒搅拌均匀，直至溶解完全。

4.调整pH值。

使用pH计将溶液的pH值调整到所需范围内，通常为6.8-7.25.配制完毕的培养基通过高温高压灭菌器进行灭菌，保持高温高压一段时间。

6.灭菌后的培养基应待其冷却到室温后使用或储存，避免细菌的再度污染。

三、培养基的使用记录1.填写培养基使用记录表。

记录培养基的配制日期、配制者、培养基批号等信息。

2.记录每次使用的培养基的用量。

可通过称重器或容量杯进行测量，确保使用的培养基量能满足实验需要。

3.记录每次使用的细菌菌种名称和数量。

用标准测量容器或移液器进行测量和记录。

4.注意培养基的贮存条件。

培养基应存放在阴凉、干燥、无菌的环境中，避免阳光直射或高温暴晒。

四、注意事项1.在培养基的配制和使用过程中，要严格遵守无菌操作规范，防止微生物的污染。

2.注意培养基的保存时间，过期的培养基会导致细菌的生长受阻。

3.培养基使用完后应及时清洗容器并进行消毒处理，以防止细菌的残留和传播。

4.注意培养基的pH值和温度控制，过高或过低的pH值和温度会影响微生物的生长和繁殖。

五、实验结果的记录1.记录每次实验的细菌生长情况，包括菌落形态、菌液浑浊程度以及生长速度等。

2.对于培养基配制不当或实验操作失误导致的异常结果，要仔细记录并分析原因，以便调整实验方法和改进配制过程。

六、结论培养基的配制和使用记录是微生物学实验的重要步骤之一，正确的配制和使用可以提供适宜的环境条件促进微生物的生长和繁殖。

常用培养基的配制

常用培养基的配制常用培养基的配制〔一〕营养琼脂培养基【用途】供细菌总数测定、保存菌种、细菌纯化、一般细菌培养、血琼脂培养基根底之用。

【成分】牛肉膏 3gNaCl 5g 蛋白胨 10g 琼脂 20g±0.2℃ 30min高压灭菌备用。

〔二〕蛋白胨水培养基【用途】供细菌培养、吲哚试验之用。

【成分】蛋白胨 10g氯化钠 5g℃ 20min高压灭菌备用。

〔三〕半固体培养基【用途】供观察细菌动力、菌种保存、H抗原位相变异试验等。

【成分】蛋白胨 10g氯化钠 5g 琼脂 2.5～3g【pH值】7.6℃ 20min高压灭菌备用。

〔四〕营养肉汤培养基【用途】供一般细菌培养、转种、复苏、增菌等，也可用于消毒效果的测定。

【成分】蛋白胨 10g氯化钠 5g牛肉粉〔牛肉浸汁〕 3g±℃ 20min 高压灭菌备用。

〔五〕葡萄糖蛋白胨水培养基【用途】供甲基红试验及V-P试验之用。

【成分】蛋白胨 5g葡萄糖 5g K2HPO4 (K2HPO4·3H2O) 5g (0.65g)【pH值】7.0～7.2【制法】将上述成分溶于1000ml蒸馏水中，过滤，分装试管，每管2～3ml，经112.6 ℃ 20min高压灭菌备用。

〔六〕伊红美蓝培养基〔EMB培养基〕【用途】弱选择性培养基,用于别离肠道致病菌,特别是大肠杆菌。

【成分】蛋白胨 10g乳糖 10g 伊红 0.4g美兰 0.065g 琼脂 14g K2HPO4 2g±0.4℃ 15min高压灭菌，待冷却至60℃左右倾注灭菌平皿备用。

〔七〕S-S琼脂培养基【用途】供沙门氏菌、志贺氏菌的选择性别离培养之用。

【成分】蛋白胨 5g 乳糖 10g 牛肉粉 5g三号胆盐 3.5g 琼脂 17g 柠檬酸钠 8.5g 柠檬酸铁 1g 硫代硫酸钠 8.5g 中性红 0.025g 煌绿 0.00033g±0.1【制法】上述成分称取60g加蒸馏水1000ml，加热煮沸至完全溶解，待冷却至60℃左右倾注灭菌平皿备用。

实验室36种微生物培养基配制方法

实验室36种微生物培养基配制方法实验室养菌基是为微生物的培养和研究提供合适营养和条件的培养基质。

不同微生物对培养基的要求各不相同，因此实验室通常需要配制多种不同的培养基。

下面是36种常用的微生物培养基的配制方法。

一、通用培养基1. 营养琼脂培养基（Nutrient Agar）营养琼脂培养基是一种通用的培养基，适用于大多数微生物的培养。

其配方为：蛋白胨10克、葡萄糖5克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。

将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2，加入琼脂，高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。

2. 营养肉膏培养基（Nutrient Broth）营养肉膏培养基是一种通用的液体培养基，适用于大多数微生物的培养。

其配方为：蛋白胨10克、牛肉提取物5克、葡萄糖5克、蒸馏水1000毫升。

将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2，高压灭菌，分装，即可使用。

3. 大肠杆菌选择性培养基（MacConkey Agar）大肠杆菌选择性培养基是一种常用的培养基，用于选择和鉴定大肠杆菌。

其配方为：蛋白胨17克、葡萄糖1.5克、恶瓜胆汁5克、硼酸紫0.5克、亮矾0.09克、蒸馏水1000毫升。

将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2，加入琼脂，高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。

4. Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基（Sabouraud Dextrose Agar）Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基是用于真菌的培养和鉴定。

其配方为：脱氧胆汁10克、蔗糖40克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。

将以上成分溶解、调节pH至5.6-6.4，高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。

二、选择性培养基1. VC菌属选择性平皿培养基（Vogel-Johnson Agar）VC菌属选择性平皿培养基是用于选择和鉴定Voges-Proskauer菌属（如克雷伯菌）的培养基。

其配方为：葡萄糖1克、琼脂15克、盐酸75克、蒸馏水1000毫升。

将以上成分溶解、加热煮沸，冷却至55-60°C，加入胆盐酯高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。

培养基及配制

不凝原因：①pH<5不凝；②长时间高压灭菌； ③长期存放，易变质；④厂家不同，杂质含量不同 ⑤配制时融解不充分，分装不均匀；
5.2.其它
玻璃纤维滤纸桥海绵、卡拉胶等
6 辅助性物质
6.1 活性炭 6.2 抗氧化物 6.3 抗生素
6.1 活性炭
1)作用：具吸附作用； • 茎尖初代培养可防褐化；促进新梢增殖（浓度0.1 -0.2%）； • 促进生根,根避光生长； • 防止组培苗玻璃化（浓度0.3%）； • 有利于胚胎培养。 2)常用浓度：0.5－10g/L 3)注意：活性炭具副作用。选择吸附性差，导致营养损耗和 pH↓，应适当调高营养物质与激素水平，并加大Agar用量。
2.2 肌
醇
• 促进愈伤组织生长、胚状体和芽的形成 • 对组织细胞繁殖、分化的促进作用 • 浓度100 mg/L
2.1维生素 2.2 肌醇
2 有机物
2.3天然复合物
2.4 氨基酸
2.3 天然复合物
椰乳：
促愈伤组织和细胞培养，用量10～20%。使用注意茎尖大小。
香蕉泥：
对pH值缓冲大，用量 150～ 200ml/L ，应用在兰花组培。
4.3 赤霉素（GAs）
（1）种类：GA3
（2）作用：促茎伸长，促胚发育成植株；打破休眠；一般在器官形成后加入。 • 注意：不耐热；生理活性5－15d，时间太长有抑制作用。 • 较生长素和细胞分裂素少用，可溶于水。
ABA →因物种不同，能促进或抑制愈伤组织生长；
5 琼脂/培养体支持材料
5.1.琼脂 (1)用量 6－10g/L (2)种类琼脂粉琼脂条 (3)作用固化作用注意：琼脂使用有优缺点；新买应试凝固力。

培养基配方及配制方法

培养基配方及配制方法一、培养基配方常用的培养基是复合培养基，包含有机成分和无机成分两部分。

其中，有机成分提供微生物所需的碳源、氮源和能源等，无机成分提供微生物所需的无机盐和微量元素等。

以下是一个典型的复合培养基配方：有机成分：1.蛋白胨：提供氮源和碳源；2.葡萄糖：提供碳源和能源；3.酵母提取物：提供维生素和微量元素。

无机成分：1.磷酸盐缓冲液：提供pH缓冲效果；2.硝酸盐：提供氮源和无机盐；3.氯化钠：提供无机盐；4.磷酸氢二钾：提供缓冲效果和无机盐；5.硫酸镁：提供镁离子。

二、培养基配制方法1.准备容器：使用无菌烧瓶、试管、培养皿等容器，并用高压蒸汽灭菌器进行灭菌处理。

2.称量成分：按照配方中的比例，准确称量有机成分和无机成分。

3.溶解有机成分：将蛋白胨、葡萄糖和酵母提取物分别加入适量的蒸馏水中，通过搅拌或加热溶解均匀。

4.准备无机成分溶液：将磷酸盐缓冲液、硝酸盐、氯化钠、磷酸氢二钾和硫酸镁按照配方中的比例加入适量的蒸馏水中，通过搅拌溶解均匀。

5.校正pH值：使用pH计测定培养基的pH值，如有需要，可以用盐酸或氢氧化钠调节pH值至合适的范围。

6.加入蛋白胨溶液：将溶解好的蛋白胨溶液加入无机成分溶液中，并通过搅拌均匀。

7.加入葡萄糖溶液：将溶解好的葡萄糖溶液加入已配制好的培养基中，并通过搅拌均匀。

8.加入酵母提取物：将酵母提取物溶液加入培养基中，并通过搅拌均匀。

9.调节体积：根据实验需要，可以添加蒸馏水或其他添加剂来调节培养基的体积和浓度。

10.灭菌处理：将配制好的培养基进行高压蒸汽灭菌处理，保证培养基的无菌状态。

以上就是一个典型的培养基配方及配制方法的示例，只是其中的一个例子，不同的微生物可能需要不同的培养基配方和配制方法。

在实验中，根据具体的需求调整培养基的配方，确保能满足微生物的生长需求，并通过灭菌处理保证培养基的无菌状态。

各种培养基的配方

各种培养基的配方在微生物学中，培养基是为微生物提供营养和生长所必需的营养物质的混合物，可以根据微生物的特性和需求来设计不同成分的培养基。

不同种类的微生物需要不同的培养基来生长和繁殖，为了获得最佳的生长效果，需根据微生物的特性制备相应的培养基。

下面介绍几种常用的培养基及其配方。

1. 加尔沙基培养基（Luria-Bertani，LB培养基）LB培养基是一种常用的细菌培养基，适用于大多数细菌的培养。

其成分包括牛肉浸出物、酵母提取物和氯化钠，PH为7.0。

配方：- 水：1000ml-氯化钠：10g-酵母提取物：5g-牛肉浸出物：10gLB培养基的主要特点是富含氨基酸和碳源，适合于细菌的快速生长。

2. PDA培养基（Potato Dextrose Agar）PDA培养基是一种适合真菌和霉菌生长的培养基，成分简单易得。

它主要包括马铃薯提取物、葡萄糖和琼脂。

PDA培养基是一种半固体培养基，适合于真菌的产孢。

配方：-马铃薯提取物：200g-葡萄糖：20g-琼脂：20g-静置180s后，灭菌PDA培养基适合于真菌和霉菌的生长，常用于菌落计数和生长的研究中。

3.营养琼脂培养基营养琼脂培养基是一种通用的培养基，适用于多种微生物的培养。

它主要包括蛋白水解物、酵母提取物、氯化钠和琼脂。

配方：-蛋白水解物：5g-酵母提取物：1g-氯化钠：5g-琼脂：15g- 水：1000ml-蒸馏后灭菌营养琼脂培养基适合于大多数微生物的生长，是最常用的培养基之一4. 马尼特尔-梅尔特培养基（Mannitol-Salt Agar，MSA）MSA培养基是一种选择性培养基，主要用于金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）的分离和鉴定。

它的成分包括马尼托尔、氯化钠、酵母提取物和琼脂。

配方：-马尼托尔：5g-氯化钠：75g-酵母提取物：1g-琼脂：15g- 水：1000ml-蒸馏后灭菌MSA培养基在金黄色葡萄球菌的生长过程中，可以通过红色菌落的形成来进行识别。

培养基配方及配制方法

培养基配方1 斜面菌种保存培养基1.1PDA培养基（马铃薯葡萄糖琼脂培养基）称取200g马铃薯，洗净去皮切碎，加水1000ml煮沸0.5h，纱布过滤，滤液补足1000ml，再加15g葡萄糖和15-20g琼脂，充分溶解后趁热纱布过滤，分装试管，每试管约5-10ml（视试管大小而定），121℃灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面，冷却后贮存备用。

1.2麦芽汁琼脂培养基麦芽汁的制备：干麦芽首先进行粉碎（不能太粗，也不必太细。

太粗影响糖化效率，过细影响过滤速度），按麦芽重量的3~4倍加水，搅拌均匀后，37℃左右浸泡1小时，然后缓缓加温至55~63℃（在升温过程中应不断搅拌使温度均匀），保温4~6小时（用0.02摩尔/升碘液测定为黄色至无色时），糖化结束。

在糖化过程中，应每小时搅拌一次。

取过滤后的清液，加1.8%琼脂，分装试管，每试管约5-10ml （视试管大小而定），121℃灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面，冷却后贮存备用。

2 基菌落总数检测2.1平板计数琼脂培养基将胰蛋白胨5.0g、酵母浸膏2.5g、葡萄糖1.0g、琼脂15.0g 加入蒸馏水1000ml中，煮沸溶解后，调pH，然后在121℃下灭菌15min，取出，稍微冷却后，带热倒入培养皿中。

3志贺氏菌检测3.1 GN增菌液成分：胰蛋白胨：20g，葡萄糖：1g，甘露醇：2g，柠檬酸钠：5g，去氧胆酸钠0.5g，磷酸二氢钾4g，磷酸氢二钾1.5g，氯化钠5g，蒸馏水1000ml。

pH7.0制法：将上述物品加入蒸馏水中，加热溶解煮沸，调pH为7.0，分装，在115℃高压灭菌15min。

3.2 HE琼脂成分：胨：12g，牛肉膏3g，乳糖12g，蔗糖12g，水杨素2g，胆碱20g，氯化钠5g，琼脂18~20g，蒸馏水1000ml0，0.4%溴麝香草酚蓝溶液16ml，Andrade指示剂20ml.，甲液20ml，乙液20ml。

pH7.5 制法：将上述前七种成分加入400ml蒸馏水中作为基础液，将琼脂加入到600ml蒸馏水中加热溶解，加入甲液乙液到基础液中，调pH，再加入指示剂，并与琼脂液合并，待冷却至50~55℃，倾注浇平板。

常用培养基配制方法

常用培养基配制方法：（1）基础盐培养基（MSM）：(NH4)2SO42.0g，MgSO4·7H2O0.2g，CaCl2·2H2O 0.01g，FeSO4·7H2O0.001g，Na2HPO4·12H2O1.5g，KH2PO41.5g，蒸馏水1000 mL。

（2）LB培养基：蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化钠5g，蒸馏水1000 mL，pH7.5。

（3）高氏合成1号培养基：硝酸钾1g，磷酸氢二钾0.5g，硫酸镁0.5g，氯化钠0.5g，硫酸亚铁0.01g，可溶性淀粉20g，蒸馏水1000mL。

（4）查彼氏培养基：硝酸钠2g，氯化钾0.5g，硫酸镁0.5g，磷酸氢二钾1g，硫酸亚铁0.01g，蔗糖30g，蛋白胨0.5g，蒸馏水1000mL。

（5）马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂20 g，蒸馏水1000mL。

将无病马铃薯洗净去皮切碎，加蒸馏水1000mL，煮沸0.5 h，纱布过滤，滤液加蒸馏水补足1000mL，再加入葡萄糖，然后分装三角瓶灭菌备用。

（6）铵察氏琼脂培养基：氯化铵2g，氯化钾0.5g，硫酸镁0.5g，磷酸氢二钾1g，硫酸亚铁0.01g，蔗糖30g，蛋白胨0.5g，琼脂20g，蒸馏水1000 mL。

（7）克氏合成1号琼脂培养基：磷酸氢二钾1g，碳酸镁0.3g，氯化钠0.2 g，硝酸钾1g，硫酸亚铁0.01g，碳酸钙0.5g，葡萄糖20g，琼脂20g，蒸馏水1000mL。

（8）葡萄糖天门冬素琼脂培养基：葡萄糖10g，天门冬素0.5g，磷酸氢二钾0.5g，琼脂20g，蒸馏水1000mL。

（9）葡萄糖酵母膏琼脂培养基：葡萄糖10g，酵母膏10g，琼脂20g，蒸馏水1000mL。

（10）瓦氏肉汁琼脂培养基：蛋白胨5g，葡萄糖10g，牛肉膏10g，氯化钠5g，琼脂20g，蒸馏水1000mL。

（11）淀粉琼脂培养基：可溶性淀粉10g，碳酸镁1g，磷酸氢二钾0.3g，氯化钠0.5g，硝酸钠1g，琼脂20g，蒸馏水1000mL。