病原学诊断与防治

1.
2.
3. 4.
鸡胚培养
羊膜腔
绒毛尿囊 膜接种
尿囊腔 接种
卵黄囊
The Cytopathic Effects of Virus
左：组织培养中正 常的哺乳动物细胞
右：感染腺病毒 18h后的细胞改变
hemadsorption
（三）新分离病毒的
病毒核酸类型的确定 理化性状的检测 形态学观察 血清学鉴定 基因测序和生物对比
三、病毒感染的血清学诊断
1. 2. 3. 4.
中和试验 补体结合试验 血凝抑制试验 凝胶免疫扩散试验
免疫扩散试验（单扩）
四、病毒感染的快速诊断

即从含病毒标本及感染机体的血清中检测 病毒颗粒、蛋白抗原、IgM抗体和核酸等， 数小时内得出结果。
（一）形态学检查
（二）病毒蛋白抗原检查
（三）特异性IgM抗体的检测
第二节 病毒学诊断
一、标本的采取与送检 二、病毒的分离与鉴定
三、病毒感染的血清学诊断
四、病毒感染的快速诊断
一、标本的采取与送检
1.
对本身带有杂菌或易受污染的标本，要进
行病毒分离培养时，应使用抗生素。
2. 3.
标本应低温保存并尽快送检。
血清学诊断标本注意取双份血清，以便对
比血清效价，观察其动态变化。
The agar diffusion test
第一节 细菌学诊断
二、血清学诊断（辅助诊断）
用已知抗原检测病人血清或其他体液中未 知抗体及其量的变化。可作为辅助诊断。 血清学诊断或血清学反应 动态变化 抗体效价低时不要轻易否定 常用的方法：直接凝集反应、补体结合试 验、乳胶凝集试验及ELISA。
临床实验室分离和鉴定微生物的过程
1.
2.
3.
4.
青霉素作用机制(gif)
细菌蛋白质合成中 氨基糖苷类阻断翻译的模式图(gif)
四环素阻断蛋白合成机制(gif)
大环内酯类作用机制(gif)
四、病毒感染的治疗 五、真菌的治疗
化学制剂
干扰素和干扰素诱生 两性霉素、克霉唑、 益康唑等。
剂的应用
新药 如酮康唑、斯皮
仁诺等。
人工被动免疫
一、人工主动免疫

定义：将疫苗及类毒素接种于人体，使机
体主动产生获得性免疫力的一种防治微生
物感染的措施，主要用于预防。

疫苗

类毒素
（一）疫 苗
死疫苗 第一代疫苗
活疫苗 亚单位
第二代疫苗
基因工程
第三代疫苗
DNA疫苗
二、人工被动免疫

定义：输入含有特异性抗体的免疫血清、 纯化免疫球蛋白抗体或细胞因子等免疫制 剂，使机体立即获得特异性免疫力的过程。 用于某些急性传染病的应急预防和治疗。
抗毒素、抗菌血清、胎盘丙种球蛋白、血 清丙种球蛋白、细胞因子等。

三、细菌感染的治疗
主要采用抗菌药物。抗菌药物指天然或人工 合成的化学制剂。 种类 主要作用机制 影响细胞壁的合成 如青霉素 影响细胞膜的功能 如多粘菌素(G-＞G+）、 两性霉素B（真菌） 作用30S 氨基糖苷类 影响蛋白质的合成 作用50S 大环内酯类 影响核酸代谢 如喹诺酮、利福平、磺胺类
二、病毒的分离与鉴定
（一）病毒的分离
（二）病毒的数量与感染性测定
（三）新分离病毒的鉴定
（一）病毒的分离：
动物接种、鸡胚培养、细胞培养（原代细胞、 二倍体细胞、传代细胞系） 病毒增殖的指标 细胞变化：细胞病变效应(CPE)，细胞融合或 形成多核巨细胞，形成包涵体。 红细胞吸附 干扰现象 细胞代谢的改变：培养环境的生化改变。
DNA探针杂交基本步骤
PCR
DNA芯片
这个chip包括 4,200个已知 的E.coli开放 读码框(ORF) 的探针
第四节 特异性预防与治疗
特异性防治：应用获得性免疫的原理，给 机体注射或服用病原微生物抗原（包括类 毒素）或特异性抗体以达到预防和治疗感 染性疾病的目的。
人工主动免疫
人工免疫
（四）检测病毒核酸
（二）病毒蛋白抗原检查
——免疫荧光技术
一些被单纯疱疹病毒 被巨细胞病毒(CMV) (HSV) 感染的细胞核 感染的细胞
（四）检测病毒核酸
1.
核酸杂交技术：原位杂交、DNA印迹杂交 等
核酸扩增技术 聚合酶链反应(PCR) 连接酶链反应
2.
RT-PCR
3.
基因芯片技术(gene chip)
病原学诊断与防治
第一节 细菌学诊断
一、病原菌检测（确诊依据）
标本
细菌的形态 和结构检查
其他 病原菌Ag的 检测
分离和鉴定
细菌形态与结构检查

取标本涂片、染色镜检。根据镜下典型的 形态、排列、染色性作出初步诊断。
显微镜放大法：光镜、电镜(TEM, SEM) 染色法：菌细胞可与带正电荷的碱性染色 剂结合。最常用的是革兰染色法。另有单 染色法、抗酸染色法、特殊染色法（荚膜、 鞭毛、芽胞等）。
① ②
光学显微镜
革兰染色法结果
葡萄球菌 G(+)
E.coli G(-)
特殊染色法（荚膜）结果
特殊染色法（芽胞、鞭毛）结果
分离和鉴定
①wk.baidu.com
培养特征
②
③
形态特性
生化反应
④
⑤
血清学鉴定 （已知Ab检测未知Ag）
动物试验
⑥
药物敏感试验
•试管稀释法 •单片纸碟法
ANTIBIOTIC SUSCEPTIBILITY TESTING