医学微生物学实验医学知识
医学微生物学实验技术
咽拭子、粪便、血液等。
样品保存与运输
03
采集后尽快送检，如需暂存，应选择合适的保存条件和运输方
式，避免样品变质或污染。
分离与纯化方法选择依据
微生物种类与特性
不同微生物具有不同的生长特性和营养需求，需选择适合的分离 与纯化方法。
样品来源与污染程度
样品来源和污染程度不同，需采用不同的分离与纯化策略。
实验目的灭菌
对实验器材、培养基等进行严 格消毒或灭菌处理，防止微生 物污染。
废弃物处理
对实验废弃物进行分类、收集 和处理，避免对环境和人员造
成危害。
03
微生物分离与纯化技 术
微生物样品采集与处理方法
采集工具与容器选择
01
无菌棉签、无菌吸管、无菌容器等，确保采集过程中不污染样
品。
采集部位与方法
02
根据微生物种类和感染类型，选择合适的采集部位和方法，如
利用PCR技术可以特异性地扩 增微生物的某个或某些基因片 段，实现快速、灵敏的微生物 检测和鉴定。
将大量的微生物基因探针固定 在芯片上，通过与待测微生物 样品的杂交反应，可以一次性 检测多种微生物的存在和种类 。
通过直接提取环境样品中的全 部微生物DNA进行测序和分析 ，可以研究微生物群落的组成 、结构和功能，为微生物生态 和进化研究提供新视角。
的利用能力和酶活性。
应用领域
生理生化鉴定技术广泛应用于临 床微生物学、食品微生物学、环 境微生物学等领域，用于检测和 鉴定病原微生物、食品污染菌等
。
分子生物学鉴定技术进展
基因测序技术
聚合酶链式反应（PCR）
生物芯片技术
宏基因组学技术
通过测定微生物的基因组序列 ，可以准确鉴定微生物的种类 和遗传特征，为微生物分类和 进化研究提供有力手段。
《医学微生物学》动物接种实验与病毒培养技术实验
《医学微生物学》动物接种实验与病毒培养技术实验实验动物在病原微生物中的研究上占有重要地位。
利用实验动物可以进行病原菌的分离鉴定、毒力的检测、制备免疫血清等生物制品；进行各种皮肤试验；建立人工感染的动物模型；进行发病机制、疾病防治以及免疫机制的研究等。
一、实验动物的管理1．实验室常用的动物：家兔、豚鼠、小白鼠、大白鼠、地鼠、绵羊、鸡等，根据实验的目的选择最适宜的动物。
2．实验动物必须与正常动物分开饲养，动物室内要经常保持清洁和空气畅通，并应有防蚊、防蝇、防逃跑及保暖设备。
3．实验动物要精心饲养，喂以适当的饲料并给以充足的水，任何动物也不要断水。
4．实验动物要有详细的记录，包括性别、体重、体表特征(如毛色等)、接种材料、接种日期、接种途径、剂量、次数以及接种变化等。
5．实验动物应做好标记，对较大动物如家兔、豚鼠等可用金属号码牌固定于耳朵上，对较小动物如大白鼠、小白鼠等可用复红(或苦味酸等染料)涂于身体的不同部位，以资识别。
盛装动物的笼具等，也应付以标签。
6．接种后的动物应每天观察1～2次，注意动物的精神状态，活动能力、饮食和大小便情况，体温、注射部位的反应以及全身反应，如不安、耸毛、震颤、弓背、麻痹及死亡等，并应详细记录之。
7．感染动物死亡后，应立即剖检或暂时冻存。
动物的排泄物及使用的笼具等必须严格消毒。
任何用过的动物，不宜再做其他试验。
二、实验动物的选择选择实验动物应注意以下几点：1．易感性：是选择实验动物的首要条件。
2．动物健康：体质健康、发育正常、体重适宜；最好使用自己繁殖的动物，由市场购买的动物至少经过一周的隔离观察，证明无隐性感染方可使用；某些特殊实验应需选用专门喂养繁殖的无菌动物；实验动物应容易获得，便于喂养和管理。
3．动物大小：同一实验应选用大小一致的动物，通常以年龄或体重为标准。
4．性别：某些实验最好选用同一性别，特别是免疫的动物和需要观察较长时间的实验动物。
5．动物品系：某些实验要求使用纯系动物，纯系小鼠用于免疫学、杂交瘤及病毒感染等研究。
医学微生物实验
样品采集和接种
2
器具。
采集样本，进行预处理，并将其接种到
合适的培养基上。
3
培养和观察
将接种过的培养基放入培养器中，培养
数据记录和分析
4
并观察微生物的生长情况。
记录微生物生长的时间、形态和数量， 并进行数据分析。
实验所需材料
培养基
如营养琼脂、大肠杆菌产生的发酵产物等。
培养器具
如培养皿、试管、培养瓶等。
3 在实验中如何保证个人安全？
佩戴实验室服装、防护手套和眼镜，遵守实验室安全规定。
3 安全处理
对产生的生物废弃物进行合理的处置，避免对环境和他人造成污染。
结论
通过本实验，我们了解了微生物的特性和功能，并掌握了微生物培养的基本技巧和实验操作。
问题解答
1 什么是无菌操作？
无菌操作是指在无菌环境中进行实验，以避免微生物的污染。
2 为什么要进行微生物培养？
微生物培养能够帮助研究微生物的生物学特性、病原机制和应用价值。
医学微生物实验
本实验旨在研究微生物的特性和功能。
实验目的
1 了解微生物
研究细菌、真菌和病毒的特性和功能。
2 探索微生物在医学领域的应用
了解微生物对生物制药、防治传染病和环境修复的重要作用。
3 培养实验经验
学习合理使用实验仪器和试剂，掌握无菌操验仪器和试剂
检查并准备所需的培养基、试剂和培养
试剂
如酶溶液、抗生素等。
实验仪器
如显微镜、培养箱等。
实验结果分析
分析通过培养和观察获得的微生物生长情况，研究微生物种类、数量和形态， 进一步探究其生物学特性。
实验注意事项
1 无菌操作
在进行微生物实验时，保持实验环境和仪器的无菌。
医学微生物学复习要点、重点总结
医学微生物学复习要点、重点总结.绪论细菌的形态与结构名词解释微生物：是一类肉眼不能直接看见，必须借助光学或电子显微镜放大几百或几万倍才能观察到的微小生物的总称。
医学微生物学：是研究与人类疾病有关的病原微生物的基本生物学特性、致病性、免疫性、微生物学检查及特异性防治原则的一门学科。
中介体：是细菌细胞膜向内凹陷，折叠、卷曲成的囊状结构，扩大膜功能，又称拟线粒体。
多见于革兰阳性菌。
质粒：是染色体外的遗传物质，为双股环状闭合DNA，控制着细菌的某些特定的遗传性状。
异染颗粒：用美兰染色此颗粒着色较深呈紫色，故名。
用于鉴别细菌。
荚膜：某些细菌在其细胞壁外包绕的一层粘液性物质。
鞭毛：细菌菌体上附有细长呈波浪弯曲的丝状物。
鞭毛染色后光镜可见。
菌毛：菌体表面较鞭毛更短、更细、而直硬的丝状物。
电镜可见。
芽胞：某些细菌在一定的环境条件下，胞质脱水浓缩，在菌体内形成一个圆形或椭圆形的小体。
简答题1.简述微生物的种类。
2.简述细菌的大小与形态。
大小：测量单位为微米（μm）1μm = 1/1000mm球菌：直径1μm杆菌：长2~3μm 宽0.3~0.5μm螺形菌：2~3μm 或3~6μm形态：球形、杆形、螺形，分为球菌、杆菌、螺形菌。
3.分析G+菌、G-菌细胞壁结构与组成特点及其医学意义。
细菌细胞壁构造比较医学意义：1、染色性：G染色紫色（G+）红色（G-）2、抗原性：G+：磷壁酸G-：特异性多糖（O抗原/菌体抗原）3、致病性：G+：外毒素、磷壁酸G-：内毒素（脂多糖）4、治疗：G+：青霉素、溶菌酶有效G-：青霉素、溶菌酶无效4.简述L型菌的特性。
1、法国Lister研究院首先发现命名。
2、高度多形性，不易着色，革兰阴性。
3、高渗低琼脂血清培养基2-7天荷包蛋样、颗粒、丝状菌落。
4、具致病性，常在应用某些抗生素（青霉素、头孢）治疗中发生，且易复发。
5、临床症状明显但常规细菌培养（-），予以考虑L型菌感染5.分析溶菌酶、青霉素、链霉素、红霉素的杀菌机制。
医学微生物学重点知识总结
医学微生物学重点总结总结性重点：1.引起食物中毒的细菌有哪些2.引起败血症的细菌有哪些3.革兰氏阳性菌及革兰氏阴性菌总结4.重要的细菌，按照革兰氏染色分类，并列明细菌需要记忆的重点。
6．与口腔相关的厌氧菌：【1】脆弱类【2】放线菌1. 生物的概念：微生物是一类存在于自然界中，体型微小、结构简单、肉眼难见，而需要借助光学乃至电子显微镜放大成千上万倍才能观察到的微小生物。
3.微生物与人类的关系:总结：绝大多数微生物对人类和动物、植物有益，少数引起人类和动物植物病害。
微生物对人类的益处：1.营养作用：产生人类必须的一些营养物质，如VitK2.生物拮抗：人体正常菌群占据人类表皮和黏膜，使得致病菌难以粘附3.免疫作用：正常菌群的存在是维持人类免疫力的基础4.抗衰老作用：乳酸杆菌等在胃肠道的大量存在与长寿有明显对应性。
**科赫法则：1. 特殊病原菌应在同一疾病中查见，而健康人中不存在2. 该特殊致病菌能被分离培养得到纯种3. 该纯培养物接种至易感动物能产生同样疾病4．人工感染的实验动物中能重新分离出该致病菌纯培养。
第一章细菌的形态与结构***细菌的定义：广义：泛指各类原核细胞型微生物，包括细菌、放线菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体。
狭义：专指其中数量最大、种类最多，具有典型代表性的细菌。
***对细菌的形态观察时机：选择：适宜生长条件下的对数生长期原因：细菌在不利不环境或者衰老时产生形状多形性，亦称衰退型。
1.微生物根据其形态结构组成的差异分为几大类？各有何特点？三类，分别是球菌、杆菌、螺形菌。
补充：【1】肽聚糖组成区别4.L型细菌的特点及医学意义。
【1】由来：当某些因素（如溶菌酶、青霉素等）破坏或抑制了肽聚糖的合成使细菌细胞壁发生部分或完全缺损，在高渗环境下仍可存活而成为细胞壁缺陷型细菌。
因首先在Lister研究所发现，故称L型细菌。
【2】分类：原生质体：G+菌细胞壁几乎完全缺失，仅剩一层细胞膜原生质球：G-菌因有外膜保护，且胞内渗透压较低，对低渗环境仍有一定抵抗力【2】特性：1.产生因素：青霉素、溶菌酶、胆汁、抗体、补体等2.形态：大小不一，高度多形性，革兰氏染色为阴性3.培养特性：高渗低琼脂培养基，营养要求高，生长缓慢，荷包蛋样菌落4.致病性：引发慢性感染【3】医学意义：1.L型细菌在体内、外均能形成，尤其在使用于细胞壁的药物治疗过程中反复出现，某些L型细菌仍有致病力，可引起尿路感染、骨髓炎、心内膜炎等疾病；2.在进行常规细菌学检查时，L型细菌往往被漏检而造成病原菌感染的漏诊。
临床医学检验知识速记--(真菌)微生物学
临床医学检验知识速记--（真菌）微生物学真菌(fungus)是一类具有典型细胞核，有核膜和核仁，胞浆内有完整的细胞器，无根、茎、叶，不含叶绿素，无光合色素，细胞壁含几丁质和纤维素的，单细胞或多细胞异养真核细胞型微生物。
细胞壁：不含肽聚糖，含几丁质及纤维素临床分类(按致病部位)：浅部真菌、深部真菌形态学分类：单细胞真菌、多细胞真菌真菌的形态与结构在鉴定上起重要作用（一）形态与结构1、单细胞真菌：圆形或卵圆形，包括酵母型和类酵母型真菌。
酵母型真菌以芽生方式繁殖，芽生孢子成熟后脱落成独立个体，不产生菌丝，其菌落与细菌菌落相似。
类酵母型真菌也以芽生方式繁殖，菌落与酵母型真菌相似，但它产生的芽体不从母细胞上脱落，而是延伸入培养基内形成假菌丝。
对人致病的主要有新生隐球菌和白假丝酵母菌。
2、多细胞真菌：由菌丝和孢子两种基本结构组成（1）菌丝：在环境适宜情况下由孢子萌发长出芽管，逐渐延长呈丝状，称菌丝。
按照功能分为：①营养菌丝：伸入培养基；②气生菌丝：露出培养基向空气中生长；③生殖菌丝按照结构分为：①有隔菌丝：多数致病性真菌；②无隔菌丝。
菌丝的形态大小不一(螺旋状/球拍状/鹿角状)、菌丝间有无分隔、形状特征(绒毛状/絮状/粉末状) → 鉴别真菌（2）孢子：由生殖菌丝产生的一种繁殖体，是真菌的繁殖结构。
有有性孢子和无性孢子两类①有性孢子：同一菌体或不同菌体上的2个细胞融合经减数分裂形成。
包括：卵孢子、接合孢子、子囊孢子、担子孢子，多为非致病性真菌所产生。
②无性孢子：菌丝上的细胞分化或出芽生成，不经两性细胞的配合。
病原性真菌大多形成无性孢子。
可分为三种a. 分生孢子：又可分为大分生孢子（其大小、细胞数和颜色是鉴定的重要依据）、小分生孢子（真菌都能产生，诊断意义不大）b. 孢子囊孢子c. 叶状孢子：又可分为芽生孢子（一般芽生孢子生长到一定大小仍不与母体脱离，则形成假菌丝）、厚膜孢子（是真菌的一种休眠形态）、关节孢子真菌种类不同，孢子形状大小也不同→ 鉴别真菌3、二相性真菌：少数真菌在营养、温度、理化因素等不同环境条件下，可发生单细胞与多细胞两种形态的可逆转化，称为双向性真菌。
医学微生物学
绪论1.微生物（microorganism/microbe）存在于自然界的一群体积微小、结构简单、肉眼看不见的生物。
2.微生物学（microbiology）是生物学的一个分支，是研究微生物在一定条件下的形态、结果、生命活动规律、进化、分类以及与人类、动物、植物、自然界相互关系等问题的一门科学。
3.病原微生物（pathogenic microbe）能引起人类、动物、植物发生疾病的微生物。
4.医学微生物学（medical microbiology）是微生物学的一个分支和医学基础课程，是研究与医学有关的病原微生物的生物学性状、感染与免疫机理、特异性诊断和防治等的一门科学。
医学微生物学的目的是控制和消灭传染性疾病和与之有关的各种（免疫性）疾病以保障和提高人类的健康水平。
5.非病原性微生物：不能引起人类、动物、植物发生疾病的微生物。
6.根据微生物的生物学性状可将微生物分为真菌、细菌、放线菌、衣原体、支原体、立克次体、螺旋体、病毒8类。
7.医学微生物学是微生物学的一个分支，学习的基本要求是了解与医学有关的病原性微生物的生物学性状、感染与免疫的机理、特异性诊断、特异性防治。
目的是控制和消灭传染性疾病以及与之有关的免疫性疾病。
8.根据微生物的结构、组成、分化程度等分为三类：非细胞型微生物：无典型细胞结构，仅有核心和蛋白质衣壳或RNA或蛋白质组成，是最小的一类微生物，必须在活细胞内增殖。
包括病毒以及亚病毒、阮粒。
原核细胞型微生物：仅有原始核质，无核膜和核仁，除核糖体外，无其他细胞器。
包括细菌、放线菌、衣原体、支原体、立克次体、螺旋体。
其中需要活细胞培养的是衣原体、立克次体。
真核细胞型微生物：细胞核分化程度高，有核膜和核仁，细胞质内有内质网，线粒体等细胞器。
包括真菌、藻类。
9.细菌的形态与结构1.细菌（bacterium）是一类形体微小、结构简单的原核单细胞微生物、具有肽聚糖细胞壁、以无性二分裂方式繁殖、除核糖体外无其他细胞器。
《医学微生物学》细菌的分布与外界因素对细菌的影响实验
《医学微生物学》细菌的分布与外界因素对细菌的影响实验[目的]1．掌握皮肤消毒方法。
2．掌握标准纸片扩散法(K-B法)的原理、操作方法、结果的判读与解释及其临床意义。
3．掌握纸片扩散法的质量控制方法。
了解空气、水中细菌的检查方法。
4．熟悉人体皮肤、咽喉部细菌检查方法。
5．熟悉紫外线灭菌方法。
6．了解高压蒸汽灭菌方法一、细菌的分布检查[材料]普通琼脂平板，1％高层琼脂，无菌试管，1毫升无菌吸管，无菌平皿。
[方法]1．空气中的细菌检查取琼脂平板一个，打开皿盖，暴露于空气中10分钟，然后盖好，在平皿底面注明地点、班组，放入37℃温箱内培养24小时后观察结果，计算菌落数，并观察不同的菌落形态。
2．污水和净水中细菌数的检查（1）用无菌试管分别采取自来水和未经净化消毒处理的污水各一管。
取自来水样时，须先将水龙头用酒精灯烧灼灭菌，再将龙头完全开放，放水5分钟，然后用无菌试管以无菌操作采集水样。
（2）用无菌吸管吸取自来水及经适当稀释的污水各1毫升，分别放入两个无菌平皿内。
（3）将已溶化并冷至约45℃（手握琼脂管感觉热而不烫手）的高层琼脂1支，倾注入平皿内，盖好平皿，立即将皿底贴桌面轻轻摇动，使琼脂与水样均匀混合后（但勿溢出于皿外），静置桌面，待琼脂凝固。
（4）标记，皿底向上置于37℃培养24小时，取出观察结果。
比较自来水及污水内生长的菌落数。
3．皮肤及飞沫中的细菌检查材料：普通琼脂平板，血琼脂平板。
方法：（1）皮肤细菌检查取普通琼脂平板一块，用手指轻轻涂抹培养基表面，置37℃温箱中培养24小时，观察结果。
（2）飞沫中的细菌检查取血琼脂平板一个，打开皿盖，将培养基面置于口腔前约10厘米处，用力咳嗽数次，约30秒钟，然后盖上皿盖，置37℃温箱培养24小时，观察结果。
二、外界因素对细菌的影响（一）高压蒸汽灭菌法（示教）[材料] 手提式高压蒸汽灭菌器、电炉等构造：手提式高压蒸汽灭菌器是一双层金属圆桶，外层坚厚，顶端有厚盖，盖边有翅状螺旋，借此紧闭此盖，防止蒸汽外溢。
医学微生物学实验三
• 盖上平板的盖子，做好标记，放置培养箱内孵育16~18h。
• 下次实验课找到自己的药敏结果，量取抑菌环直径，根据 CLSI（clinical and laboratory standards institute ）标准， 报告细菌对该抗生素敏感(susceptible,S)、耐药(resistant,R) 、中介(intermediate,I)。
MIC：在与微生物生长速率有关的特定时间 间隔内，通常是18－24小时，能够抑制被测菌生 长的最低药物浓度。
抑菌环
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ药物效果越好，抑菌环直径越大；效果越差，抑菌环直径越小。
操作方法
• 无菌挑取孵育16～24h的血平板上4个菌落,沿4个方向均匀抹 无菌M-H琼脂表面，使菌液均匀分布，最后再取一个菌落沿 平板内缘环形涂抹均匀。
直接
涂片镜检 （革兰染色）
接种 血琼脂平板
菌落观察
血浆凝固酶试验
革兰染色
药敏试验 诊断报告
一、脓汁标本中化脓性球菌的鉴定
直接涂片镜检
• 取标本直接涂片，均匀涂成菌膜，自然干 燥，固定后革兰染色，油镜观察。
金黄色葡萄球菌
革兰染色镜检
─────────
形态
排列 染色性
乙型溶血性链球菌
细菌分离培养
• 取一号和二号脓标本，分别接种于血琼脂 平板上，划线分离，37℃培养18~24h后， 观察菌落特征，取单个菌落进行再次革兰 染色镜检。
– 保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏 – 抵抗吞噬细胞的吞噬和消化 – 使感染局限化和形成血栓
游离血浆凝固酶
医学微生物学实验报告
医学微生物学实验报告医学微生物学实验报告引言：微生物是一类无法看见的微小生物体，它们存在于我们周围的环境中，包括我们自己的身体内。
微生物在医学领域中起着重要的作用，既可以是疾病的致病因子，也可以是药物的生产者。
本实验旨在通过实验方法和观察结果，探索微生物在医学领域中的应用。
实验一：细菌培养和鉴定在实验室中，我们首先收集了一些样本，包括空气、水、土壤和人体表面的皮肤。
然后，我们将这些样本分别接种在不同的培养基上，培养一段时间后观察结果。
结果显示，空气中存在大量的微生物，其中细菌是最常见的。
而水中的微生物数量相对较少，主要是一些单细胞的微生物。
土壤样本中的微生物种类丰富，包括细菌、真菌和寄生虫。
人体表面的皮肤样本中的微生物主要是细菌，这些细菌通常是人体的正常微生物群落的一部分。
通过鉴定这些细菌，我们发现了一些常见的致病菌，如大肠杆菌和金黄色葡萄球菌。
这些细菌在人体中可能引发感染和疾病。
另一方面，我们也发现了一些有益的细菌，如乳酸菌和酵母菌。
这些细菌被广泛应用于食品加工和制药工业中。
实验二：药敏试验药敏试验是一种常用的方法，用于评估细菌对不同抗生素的敏感性。
在本实验中，我们选择了几种常用的抗生素，并将它们分别加入到含有细菌的培养基中。
然后观察细菌在不同抗生素浓度下的生长情况。
结果显示，不同细菌对抗生素的敏感性有所不同。
有些细菌对某种抗生素高度敏感，而对另一种抗生素则不敏感。
这表明了不同抗生素对不同细菌的杀菌效果不同。
药敏试验的结果可以帮助医生选择合适的抗生素治疗感染病例，以提高治疗效果。
实验三：微生物的环境适应能力微生物具有很强的环境适应能力，可以在各种极端条件下生存和繁殖。
在本实验中，我们将细菌分别暴露在高温、低温、酸性和碱性环境中，观察其生长情况。
结果显示，有些细菌对高温和低温环境具有较高的耐受性，而对酸性和碱性环境则较为敏感。
这可能是因为细菌在不同环境下具有不同的生理和代谢特性。
了解细菌的环境适应能力有助于我们预测和控制细菌在不同环境中的生长和传播。
医学微生物实验二(新)
实验要求
实验前认真预习实验内容， 了解实验目的、原理和方 法。
按照实验步骤进行操作， 认真观察实验现象，记录 实验数据。
严格遵守实验室规章制度， 保持实验室卫生和安全。
实验结束后，整理实验器 材和试剂，撰写实验报告。
02
实验原理
微生物的形态与结构
微生物培养
将采集的样本接种在适宜的培养基 上，控制温度和湿度等培养条件， 观察微生物的生长情况。
显微镜检查
使用显微镜观察微生物的形态、染色 反应等特征，进行初步的微生物鉴定 。
生化实验
进行必要的生化实验，如糖发酵实 验、酶活性测定等，进一步确定微 生物的种类。
结果记录与分析
详细记录实验结果，包括微生物的 形态特征、生化反应等，进行分析 和总结。
微生物的繁殖方式
微生物的繁殖方式有分裂繁殖、孢子 繁殖、出芽繁殖等。了解其繁殖方式 有助于理解微生物种群的增长和变化 规律。
03
实验材料与试剂
实验材料
培养基
用于微生物培养的基质，提供微生物所需的营养物质。
显微镜
观察微生物形态和结构的工具。
实验试剂
01
02
03
04
染色剂
用于给微生物染色，以便更好 地观察其形态和结构。
实验方法
细菌分离培养
采用适当的培养基和培养条件 ，分离纯化样本中的细菌，获
得单一菌落。
染色与镜检
对细菌进行染色处理，通过显 微镜观察其形态、染色反应等 特征，初步鉴定细菌种类。
生化鉴定
利用生化实验方法，对细菌进 行进一步的鉴定和分类。
血清学试验
通过血清学试验方法，检测细 菌的抗原或抗体，以确定细菌
医学微生物学》实验报告
《医学微生物学》实验报告一
1、紫外线杀菌试验：描述实验结果，包括暴露在紫外线灯下的细菌生长情况和
被平皿盖遮盖处细菌生长的情况；分析并解释其原因。
暴露在紫外线灯下的细菌基本不生长，而被平皿盖遮盖处细菌正常生长。
紫外线具有杀菌作用，主要作用于DNA，使一条DNA链上的两个相邻的胸腺嘧啶以共价键结合，形成二聚体，干扰DNA的复制与转录，导致细菌的变异与死亡所以暴露在紫外线灯下的细菌死亡。
但是紫外线的穿透力较弱，可被普通玻璃、纸张、尘埃、水蒸汽等阻挡，且紫外线只能沿直线传播，辐照能量低，穿透力弱，仅能杀灭直接照射到的细菌，因此被平皿盖遮盖处细菌正常生长。
2、药敏试验结果：测试抑菌圈直径的大小，单位是mm。
0mm
对大肠杆菌最敏感的是（卡那霉素）；
对金黄色葡萄球菌最敏感的是（青霉素）。
医学微生物学基础
法国化学家巴斯德
德国医生郭霍（Robert Koch,1843～1910年）他创建了固 体培养基和细菌染色技术。先后发现了炭疽芽胞杆菌、结 核分枝杆菌和霍乱弧菌，并提出了郭霍法则。
德国医生郭霍
1892年俄国学者伊凡诺夫斯基发现了病毒。
（二）免疫学的兴起 英国医生琴纳（Edward Jenner,1749～1823年）于18世纪末 应用研制的牛痘苗预防天花是人类运用人工自动免疫方法 预防疾病的开始。 （三）化学疗剂及抗生素的发明 1929年英国人弗莱明（Alexander Fleming,1881～1955年） 发现了青霉菌产物青霉素能抑制金黄色葡萄球菌的生长， 1940年Florey等提取出青霉素的结晶纯品，并证实了其临 床应用价值，给感染疾病的临床治疗带来了一次大的革命。
革兰阴性菌和革兰阳性菌细胞壁结构 比较
（4）细胞壁的功能：
保护细菌和维持菌体形态 物质交换 与致病性有关 与耐药性有关 与静电性有关 决定细菌的抗原性
（5）细菌细胞壁缺陷型（细菌L型）：细胞壁受 损的细菌在高渗环境下仍可存活者。 G+菌：原生质体；G-菌：圆球体 形态：球形、杆状和丝状，G培养：用20%人或马血清与低琼脂的高渗培 养基，形成“油煎蛋”状细小菌落。用抗生素治 疗后易复发。 可引起尿路感染、骨髓炎、心内膜炎等 溶菌酶能切断M-G之间的β -1，4键的分子连 接，破坏多糖骨架，引起细菌裂解。青霉素能干 扰甘氨酸交联桥与4肽侧链上的D-丙氨酸之间的 联结。
6．细菌L型是指 A.细菌的休眠状态 B.细胞壁缺陷型细胞 C.非致 病菌 D.不可逆性变异的细菌 E.光滑型-粗糙型菌落（S-R）变异 7.溶菌酶杀灭细菌的作用机理是 A.裂解肽聚糖骨架的β -1，4糖苷键 B.竞争肽聚 糖合成中所需的转胺酶 C. 与核蛋白体的小亚基结合 D. 竞争性抑制叶酸 的合成代谢 E.破坏细胞膜 8．细菌的特殊结构主要有 ____， ____，菌毛和芽 胞。 9．革兰阴性（G-）菌细胞壁的脂多糖即内毒素包括 类脂A，____和____3种成分。 10 ．按细菌鞭毛的数目和排列方式，将鞭毛菌分为 单毛菌，____，____和周毛菌4种。
《医学微生物学》重点内容总结
医学微生物学》重点内容总结细菌学总论1、微生物的六大特点：体积微小、结构简单、种类繁多、分布广泛、繁殖迅速、容易变异。
2、微生物的种类与分布：①非细胞型微生物最小，无典型的细胞结构，无产生能量的酶系统，只能在活细胞内生长繁殖，核酸类型为DNA或RNA，两者不同时存在，病毒属之。
②原核细胞型微生物原始核呈dsDNA结构，无核膜、核仁，细胞器很不完善，只有核糖体，DNA和RNA同时存在，细菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体、放线菌属之。
③真核细胞型微生物细胞核分化程度高，有核膜和核仁，细胞器完整，真菌属之。
3、细菌的细胞壁：①G+和G-细菌细胞壁的共有组分为肽聚糖，G+细菌的肽聚糖由聚糖骨架、四肽侧链和五肽交联桥三部分组成，G-细菌的肽聚糖由聚糖骨架和四肽侧链两部分组成。
②G+细菌细胞壁的特殊组分为磷壁酸。
③G-细菌细胞壁的特殊组分为外膜，外膜由脂蛋白、脂质双层和脂多糖三部分组成，脂多糖由脂质A、核心多糖、特异多糖三部分组成，即G-细菌的内毒素。
脂质A是内毒素的毒性和生物学活性的主要组分。
④细菌L型：细胞壁受损的细菌能够生长和分裂者叫细菌L型。
细菌L型的四大特点：高度多形性、高渗、对作用于细胞壁的抗生素不敏感、可恢复到有细胞壁的状态。
4、质粒：18页整个一段5、异染颗粒：胞质颗粒中有一种主要成分是RNA和多偏磷酸盐的颗粒，嗜碱性强，用亚甲蓝染色时着色较深呈紫色，叫异染颗粒或纡回体，常见于白喉棒状杆菌。
6、核质：细菌的遗传物质叫核质或拟核。
7、细菌的特殊结构：（掌握各自的概念及功能，一道10分的论述题）8、微生物学两大经典染色：（一道5分的简答题）①Gram染色：标本固定后，先用碱性染料结晶紫初染，再加碘液媒染，使之生成结晶紫－碘复合物，此时不同细菌均被染成深紫色。
然后用95％乙醇处理，有些细菌被脱色，有些不能。
最后用稀释复红或沙黄复染。
此法可将细菌分为两大类：不被乙醇脱色仍保留紫色者为G+细菌，被乙醇脱色后复染成红色者为G-细菌。
《医学微生物学》分章节重点归纳
《医学微生物学》分章节重点归纳医学微生物学是研究与医学相关的微生物的科学，主要涉及病原微生物、微生物病和微生物学方法等内容。
以下是对医学微生物学的分章节重点归纳。
第一章：概论本章主要介绍医学微生物学的概念、历史背景、研究方法以及与医学微生物学相关的其他学科的关系。
重点内容包括病原微生物与人类疾病的关系，微生物学方法的发展以及医学微生物学在临床实践中的应用。
第二章：原核微生物学本章主要介绍细菌和古菌两类原核微生物的形态结构、生命周期、生理代谢以及病原性。
重点内容包括细菌的分类与鉴定、细菌的培养方法、细菌对人体的感染机制以及细菌引起的典型疾病。
第三章：真菌学本章主要介绍真菌的形态结构、生活方式、生理代谢以及病原性。
重点内容包括真菌感染的分类、真菌的培养方法、真菌引起的典型疾病以及抗真菌药物的应用。
第四章：病毒学本章主要介绍病毒的结构、生命周期以及病原性。
重点内容包括病毒的分类、病毒的培养方法、病毒感染的机制以及病毒引起的典型疾病。
此外，还包括病毒感染的免疫学和病毒疫苗的研制等内容。
第五章：寄生虫学本章主要介绍寄生虫的形态结构、生活方式、生活史以及病原性。
重点内容包括寄生虫的分类、寄生虫的诊断方法、寄生虫引起的典型疾病以及抗寄生虫药物的应用。
第六章：微生物感染的防控本章主要介绍微生物感染的传播途径、预防措施以及监测和控制方法。
重点内容包括医院感染的防控策略、个人防护用品的使用以及医院环境的消毒方法。
此外，还包括医学微生物学在流行病学研究中的应用以及抗生素的合理应用。
第七章：微生物学检验与诊断本章主要介绍微生物学检验与诊断的方法，包括病原微生物的分离与鉴定、感染性疾病的实验室诊断以及微生物耐药性检测。
重点内容包括细菌培养与鉴定的方法、快速诊断方法（如PCR技术和免疫学检测等）以及耐药性检测的方法。
第八章：免疫学与微生物感染本章主要介绍免疫系统的基本原理、免疫学方法以及免疫系统与微生物感染之间的相互作用。
医学微生物学实验三 细菌的人工培养
4. 培养基的制备
调配成分
溶解
灭菌
质量检查 和保存
分装
矫正pH
基
本
知
过滤澄清
识
（一）细菌人工培养的基本知识
5. 细菌培养方法
需氧培养法
基
本
知
二氧化碳培养法
识
厌氧培养法
（一）细菌人工培养的基本知识
5. 细菌培养方法
需氧培养法
基
本
知
二氧化碳培养法
识
厌氧培养法
电热恒温培养箱
二氧化碳培养箱
（一）细菌人工培养的基本知识 5. 细菌培养方法
（二）细菌人工培养操作 2. 材料
实 验 材 料
普通平板培养基 (2-3%琼脂)
斜面培养基 (2-3%琼脂)
半固体培养基 (0.2-0.5%琼脂)
（二）细菌人工培养操作
3. 操作流程
领取菌种及培养基
操
分别进行平板、斜面及半固体培养基接种， 然后贴上标签。
作 流 程
37度恒温箱培养18～24小时后观察结果。
靛 基 质 （ 吲 哚 ） 试 验
阳性 (+）
阴性 （-)
（三）实验操作内容
3. 硫化氢试验
（1）原理
硫
含硫氨基酸
酶
+铁离子
化 氢
或+铅离子
试
培养基中加入含
验
硫氨基酸、铅离
子、铁离子
（三）实验操作内容 3. 硫化氢试验 （2）结果判断
硫 化 氢 试 验
+
分组
两人一组
操作内容
细菌的人工培养
细菌的生化反应
糖 发
酵
（培养基含葡萄糖、
微生物学检验重点知识总结
微生物学检验重点知识总结微生物学检验绪论1.微生物的定义与特点;微生物的分类。
一、微生物的概念与特点1.微生物（microorganism）是一群个体微小，结构简单，肉眼不能直接看见，必须借助于光学显微镜或电子显微镜放大数百倍至数万倍才能观察到的微小生物的总称。
2.微生物的特点个体微小，结构简单比表面积大，吸收多，转化快繁殖快，代谢强适应强，易变异种类多，分布广1.微生物类型根据微生物大小、结构和组成不同分为三类型2.病原微生物的定义病原微生物：是指能引起动物、植物或人类产生疾病的微生物。
3.医学微生物学的发展简史。
.微生物的发现与研究（1）列文虎克发明显微镜，最早观察到微生物；微生物学研究的创始人：XXX、XXX、XXX第一章细菌的基本性状第一节细菌的形态与布局1.细菌细胞壁的结构和功能，肽聚糖结构及其化学组成；革兰阳性与革兰阴性细菌细胞壁的主要区别（一）细胞壁化学组成与布局，革兰染色共有组分：肽聚糖特殊组分：G+菌、G-菌不同革兰阳性菌细胞壁特殊组分：磷壁酸革兰阴性菌细胞壁特殊组分：外膜1微生物学检验革兰阴性菌细胞壁肽聚糖:聚糖骨架、四肽侧链2.细胞壁的功用：（1）维持细菌固有形态和抵抗低渗作用。
（2）物质交换作用。
（3）屏障作用。
（4）免疫作用。
（5）致病作用。
（6）与细菌药物敏感性有关。
G+菌与G-菌细胞壁布局比较•细菌细胞膜的布局与真核细胞基本相同，由磷脂和多种蛋白质组成，但不含胆固醇。
•细菌细胞膜可形成一种特有的结构，称中介体。
2.细菌荚膜、鞭毛和菌毛的功能。
荚膜：功能：有抗吞噬和抵制杀菌物资的杀菌作用，增强细菌的侵袭力，构成细菌致病力的重要因素之一。
②具有免疫原性。
③鉴别细菌和血清学分型鞭毛：功能：细菌的运动器官菌毛通俗菌毛：具有黏附性，与细菌致病性有关。
性菌毛：与细菌的遗传变异相关3.芽胞结构特点、意义、与消毒灭菌的关系；细菌L型的形态特征、检验要点。
芽胞：某些细菌（主要为革兰阳性杆菌）在一定条件下，细胞质浓缩脱水而形成一个折光性很强，具有多层膜状结构、通透性很低的圆形或卵圆形的小体。
医学微生物实验3：细菌的分离与纯化
实验3 微生物的纯种分离培养微生物广泛地分布在自然界的土样、水体、空气、动植物体表及人体、动物体的排泄物中。
它们以单个的菌体、无性孢子和芽孢的形式存在。
由于单一的自然界环境并不能完全满足微生物对水、空气、营养物质、温度、pH的综合要求，它们往往以“散居”的状态出现，而不能形成人们肉眼可直接观察到菌落。
不同的自然环境中，微生物的种类和数量差异很大。
肥沃的土壤，富养化的水体，是许多微生物麇集、孳生的场所，在这里存活着能分解淀粉、蛋白质、脂肪、纤维素、木质素、果胶、农药、含磷有机物（卵磷脂、肌醇、核酸等）、石油以及溶解铜矿的细菌、放线菌、真菌等多种类的微生物，如何根据微生物的生理要求，按照人类的需求，将它们从自然界中分离出来，获得纯种，发挥微生物的特长为人类的生产和生活服务，是微生物研究中最基础的实验技术。
一、实验目的：1．学会将混杂的各种微生物分离成纯种，统计分析样品中微生物的种类和数量的方法。
2．学会从菌落及培养特征区分细菌、酵母菌、放线菌和霉菌。
3．学会好氧微生物平板及斜面培养的方法。
二、实验原理：在自然界中，微生物的种类很多，数量很大，为了获得单个菌体，首先必须把要分离的材料进行适当的释放，按其生长所需要的条件，使其在平板上，由一个菌体繁殖成单个菌落，这样，就能从中挑选出所需要的纯种，由于细菌、放线菌和霉菌所要求的营养条件不同，利用不同的培养基制成平板进行分离，然后从菌落形态上的差异，可以把细菌、放线菌和霉菌三大类群区分并可计算出其数量，分别接种到试管斜面上，然后，在平板上反复进行分离培养，最后可获得纯种。
三、实验材料和用具：1．材料（1）土壤样品（2）培养基：①牛肉膏蛋白胨琼脂培养基牛肉膏蛋白胨培养基（%）牛肉膏0.3-0.5g蛋白胨 1.0gNaCl 0.5g琼脂2.0g蒸馏水100mLpH 7.2-7.4，0.1Mpa 压力，灭菌20-30分钟。
配制液体培养基时不加琼脂；半固体培养基加0.3-0.5%琼脂。
实验室医学知识点
实验室医学知识点实验室医学是现代医疗体系中至关重要的一部分，它通过临床检验和实验室技术，为医生提供了对疾病的诊断、预防和监测的重要工具。
本文将介绍一些实验室医学的关键知识点，包括临床血液学、临床生物化学、临床微生物学和分子诊断技术等。
1. 临床血液学临床血液学是研究与血液相关的疾病的科学，常见的检测项目包括血细胞计数与分类、红细胞沉降率测定、血小板计数、凝血功能检测以及血型和血型抗体筛查等。
这些检测结果对于判断许多疾病的诊断与病情监测起着至关重要的作用。
2. 临床生物化学临床生物化学是研究生命过程中物质的组成、结构、性质以及其变化规律的学科。
在实验室医学中，常见的临床生物化学检测项目有血清生化指标（如血清葡萄糖、血清肌酸激酶、血清丙氨酸转氨酶等）、肝功能、肾功能以及代谢紊乱等。
这些检测结果可以帮助医生评估患者器官功能是否正常，并且对疾病的治疗和预后有重要意义。
3. 临床微生物学临床微生物学是研究与疾病相关的微生物的科学，包括细菌学、真菌学、病毒学等。
临床微生物学的检测项目主要是通过培养、分离和鉴定病原微生物，以便对感染病原体进行准确诊断和药物敏感性测试。
这些结果可以指导医生选择合适的抗生素治疗，提高疗效并减少抗生素的滥用。
4. 分子诊断技术分子诊断技术是通过检测生物分子的变化来诊断和监测疾病的方法，它包括核酸检测、基因检测和蛋白质检测等。
例如，PCR技术可以快速检测出感染性病原体的核酸序列，基因检测可以用于遗传病的筛查，而蛋白质检测可以帮助诊断一些特定的肿瘤。
这些分子诊断技术的应用使得临床医学更加精确和个体化。
总结：实验室医学知识点包括临床血液学、临床生物化学、临床微生物学和分子诊断技术等。
这些知识点为医生提供了丰富的实验室检测手段，促进了疾病的早期诊断、治疗方案的选择以及病情的监测和预后评估。
实验室医学的发展不断推动着医疗领域的进步，为人类健康事业发挥着重要作用。
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（1）取琼脂平板1个，将底面分成两等份，注明A/B。 （2）用无菌棉签蘸生理盐水，在左手食指头上涂擦。用该指
头在平板A处琼脂表面涂抹，作为消毒前的对照。 （3）用棉签蘸络合碘消毒左手食指。待络合碘干后，依上法
在平板B处琼脂表面涂抹。 （4）置平板于37℃培养18～24h。
2．2个平板均置37℃培养18～24h，观察结果。
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
二、理化因素对微生物的影响
（一）消毒灭菌的常用术语:
1、消毒（disinfection）：杀灭物体上或环境中的病原微生 物、并不一定杀死细菌芽胞或非病原微生物的方法。 消毒剂（disinfectant）：用以消毒的药品
第2页：记录、分析紫外线杀菌试验的结果。
5、无菌操作(aseptic technique)： 防止细菌及其他微生物进入人体或其他物品的操作技术。
（二） 消毒灭菌的方法 资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
干热灭菌法
热力灭菌法 湿热灭菌法
物理方法
辐射杀菌法
紫外线 电离辐射 微波
滤过除菌法
干燥和低温抑菌法等
化学方法
常用的化学消毒剂：乙醇、含碘消毒剂、过氧乙酸、过氧化氢、高 锰酸钾、新洁尔灭等。
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【结果】
平板A处琼脂表面有细菌生长，B处不长细菌或出现 极少的菌落。说明一定浓度的络合碘能杀灭细菌。
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3、抗生素敏感试验（示教）
一种抗生素只对一定种类的生物细胞有拮抗作用，这种作用范 围称抗菌谱。
抗生素的抗菌机制 影响细胞壁的合成； 损伤或破坏细胞膜的结构； 干扰细胞碳水化合物的代谢； 抑制核酸或蛋白质的合成，这些作用都有一定的选择性。
注意事项：
紫外线可损伤皮肤、眼睛，使用时应注意防护。
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三、细菌的分解代谢产物和细菌的生化反应
细菌的新陈代谢
合成代谢 合成代谢产物
热原质 毒素与侵袭性酶 色素 抗生素 细菌素 维生素
分解代谢
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细菌的分解代谢产物和生化反应（示教）
细菌对糖、蛋白质的分解能力的不同，因而 代谢产物各异，利用生物化学方法鉴别不同细菌称 为细菌的生化反应。
2、灭菌（sterilization） ：杀灭物体上所有微生物的方 法，包括杀灭细菌芽胞、病毒和霉菌在内的全部病原微 生物和非病原微生物。
3、防腐（antisepsis）
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖的方法。 防腐剂（antiseptic）：用以防腐的药物。
4、无菌（asepsis）： 不存在活菌的意思，多是灭菌的结果。
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
（a）挑取菌落 （b）转种肉汤 （c）比浊 （d）涂布平板上 （e）放置药敏纸片 （f）量取抑菌圈大小
纸片琼脂扩散法试验程序
观察纸片周围有无抑菌圈，并量出抑菌圈直径大小，得 出待测菌对所试抗生素的敏感性。
4、紫外线杀菌实验 资料仅供参考,不当之处，请联系改正。 （1）原理：
糖发酵试验：
乳糖酶 乳糖
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
乳酸
葡萄糖发酵试验：
细菌
葡萄糖
丙酮酸
各种酸类
脱氢酶
甲酸
H2 + CO2
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
吲哚试验（Indole test):
色氨酸酶
色氨酸
氨基苯甲醛
玫瑰吲哚
甲基红试验(Methy red test):
细菌 葡萄糖
脱羧 丙酮酸
紫外线
DNA T - T二聚体
波长240～ 300nm，265～ 266nm最强
干扰DNA复制与转录 变异或死亡
（2）特 点
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① 穿透力较弱； ② 仅能杀死细菌的繁殖体，不能杀死细菌的芽胞。
（3）临床应用
仅用于实验室、传染病房、手术室的空气或不耐热物品的表 面消毒。
深蓝
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IMViC试验 大肠杆菌：++ - 产气杆菌：-- + +
作 业 资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
实验名称：细菌的新陈代谢和消毒灭菌
第1页：实验内容 一、微生物的分布及理化因素对微生物的影响
1、空气中微生物的检查（示教） 2、手指皮肤消毒前后微生物的检查（示教） 3、紫外线杀菌试验（自做，2人/组） 4、抗生素敏感试验（示教） 二、细菌的分解代谢产物和细菌的生化反应（示教）
乙酰甲基甲醇 （中性）
pH≥5.4 pH≤4.5
桔黄色: 阴性 红 色: 阳性 NhomakorabeaVP试验：
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
细菌 葡萄糖
丙酮酸
脱羧
氧化 乙酰甲基甲醇
含胍基化合物
二乙酰
红色的化合物( VP试验阳性)
枸橼酸盐利用试验（Citrate utilizatio)：
枸橼酸盐 铵盐
碳酸盐 氨
溴麝香草酚蓝(淡绿) 碱性
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一、微生物的分布
微生物分布非常广泛。
通过对外界微生物的检查，了解微生物在自然界 中的分布，从而树立“有菌观点”，认识“无菌 操作” 对于微生物学及医学实践的重要性。
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空气中微生物的检查
实验操作步骤： 1．取琼脂平板2个，一个启开皿盖，培养基面向上，放在实验 桌上，30min后盖好皿盖。另1个平板，不启开盖作为对照。
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实验名称：细菌的新陈代谢和消毒灭菌
实验内容：
一、微生物的分布及理化因素对微生物的影响 1、空气中微生物的检查（示教） 2、手指皮肤消毒前后微生物的检查（示教） 3、紫外线杀菌试验（自做，2人/组） 4、抗生素敏感试验（示教）
二、细菌的分解代谢产物和细菌的生化反应（示教）
1、高压蒸汽灭菌法
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103.4kPa（1.05kg/cm2) （121.3℃ ，维持15～20min ）
灭菌效果最好，可杀灭包括细菌芽胞
在内的所用微生物。
常用于一般培养基、生理盐水、手术敷 料等耐高温、耐湿物品的灭菌。
高压蒸汽灭菌器
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