常用缓冲液及培养基配方
常用缓冲液及培养基配方
常用缓冲液及培养基配方缓冲液和培养基是生物学实验中常用的重要试剂，它们的配方的选择对实验结果有着重要的影响。
下面将介绍几种常用的缓冲液和培养基的配方及其用途。
一、缓冲液配方1.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液常被用于细胞培养和生物化学实验中，它的使用范围很广。
常用的磷酸盐缓冲液有PBS（磷酸盐缓冲盐水），配方如下：-NaCl8g-KCl0.2g-Na2HPO41.42g-KH2PO40.24g将以上物质溶解在1L的去离子水中，pH值调到7.4，即可得到1×PBS缓冲液。
2. Tris缓冲液Tris缓冲液在分子生物学实验中常被用作DNA和RNA电泳的产物混合液。
常用的Tris缓冲液有Tris-HCl缓冲液和Tris-acetate缓冲液。
以下是Tris-HCl缓冲液的配方：- Tris 12.1 g-HCl(10M,pH7.6)10mL将Tris和HCl分别溶解在800 mL去离子水中，然后添加水调至1 L，pH值调节到目标值即可。
Tris-acetate缓冲液的配方与Tris-HCl相似，只是在Tris-HCl的基础上添加乙酸。
3. Glycine缓冲液Glycine缓冲液常被用于电泳实验中，用于电泳缓冲液和电泳媒介液的制备。
以下是Glycine缓冲液的配方：- Glycine 3 g- Tris 4.8 g-SDS0.207g-EDTA0.37g将以上物质溶解在1 L的去离子水中，pH值调至8.3，即可得到1×Glycine缓冲液。
1.LB培养基LB培养基是最常用的细菌培养基之一，用于培养大肠杆菌等革兰氏阴性菌。
以下是LB培养基的配方：- Tryptone 10 g- Yeast extract 5 g-NaCl10g将以上物质溶解在1L的去离子水中，加热至溶解，然后进行高压灭菌即可得到LB培养基。
2.M9培养基M9培养基是一种缺乏氮、氨基酸和碳的最小培养基，常被用于重组DNA的传输。
实验室常用试剂缓冲液配制方法一览表
实验室常用试剂缓冲液配制方法一览表实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1MTri-HCl□组份浓度1MTri-HCl（pH7.4，7.6，8.0）□配制量1L□配置方法1.称量121.1gTri置于1L烧杯中。
2.加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3.按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
pH值浓HCl7.4约70mL7.6约60mL8.0约42mL4.将溶解定容至1L。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tri溶液的pH值随温度的变化差很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2、1.5MTri-HCl□组份浓度1.5MTri-HCl（pH8.8）□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTri置于1L烧杯中。
2.加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3.用浓盐酸调pH值至8.8。
4.将溶液定容至1L。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tri溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
3、10某TEBuffer□组份浓度100mMTri-HCl，10mMEDTA（pH7.4，7.6，8.0）□配制量1L□配置方法1.量取下列溶液，置于1L烧杯中。
1MTri-HClBuffer（pH7.4，7.6，8.0）100mL500mMEDTA（pH8.0）20mL2.向烧杯中加入约800mL的去离子水，均匀混合。
3.将溶液定至1L 后，高温高压灭菌。
4.室温保存。
4、3M醋酸钠□组份浓度3M醋酸钠（pH5.2）□配制量100mL□配置方法1.称取40.8gNaOAc3H2O置于100～200mL烧杯中，加入约40mL的去离子水搅拌溶解。
2.加入冰乙酸调节pH值至5.2。
3.加入去离子水将溶液定容至100mL。
4.高温高压灭菌后，室温保存。
5、PBSBuffer□组份浓度137mMNaCl，2.7mMKCl，10mMNa2HPO4，2mMKH2PO4□配制量1L□配置方法1.称量下列试剂，置于1L烧杯中。
实验常用试剂,缓冲液的配制方法
实验常用试剂、缓冲液的配制方法Ampicillin（氨卡青霉素）100mg/ml□组份浓度100mg/ml Ampicillin□配制量50mL□配置方法 1.称量5g Ampicillin置于50mL离心管中。
2.加入40mL灭菌水，充分混合溶解后，定容至50mL。
3.用0.22μm滤膜过滤除菌。
4.小份分装（1mL/份）后，-20℃保存。
Kan（卡那霉素）50mg/ml□组分浓度50mg/ml卡那霉素□配制量50mL□配制方法 1.称取2.5g卡那霉素置于50ml塑料离心管中。
2.加入40ml灭菌水，充分混合溶解之后定容至50mL。
3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。
4.小份分装（1mL/份）后，-20℃保存。
IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷) 24 mg/ml□组份浓度24mg/L IPTG□配制量50mL□配置方法 1.称量1.2gIPTG置于50mL离心管中。
2.加入40mL 灭菌水，充分混合溶解后，定容至50mL。
3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。
4.小份分装（1mL/份）后，-20℃保存。
X- Gal 20mg/m□组份浓度20mg/L X-Gal□配制量50mL□配置方法 1.称取1gX-Gal置于50mL离心管中。
2.加入40mL DMF（二甲基甲酰胺），充分混合溶解，定容至50mL。
3.小份分装（1mL/份）后，-20℃避光保存。
LB培养基□组份浓度1％（W/V）Tryptone，0.5％（W/V）Yeast Extract，1％（W/V）NaCl□配制量1L□配置方法 1.称量下列试剂，置于1L烧杯中Tryptone（胰化蛋白胨）10gYeast Extract（酵母提取物）5gNaCl（氯化钠）10g2.加入约800mL 的去离子水，充分搅拌溶解。
3.滴加5N NaOH（约0.2mL），调节pH值至7.2-7.3。
4.加去离子水定容至1L。
5.高温高压灭菌后，4℃保存。
实验常用试剂、缓冲液的配制方法
实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1M Tris-HCl□组份浓度1 M Tris-HCl（pH7.4，7.6，8.0）□配制量1L□配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl（pH8.8）□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl，10 mM EDTA （pH 7.4，7.6，8.0）□配制量1L□配置方法1. 量取下列溶液，置于1L烧杯中。
1 M Tris-HCl Buffer（pH7.4，7.6，8.0）100mL500 mM EDTA（pH8.0）20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水，均匀混合。
3. 将溶液定至1L后，高温高压灭菌。
4. 室温保存。
4、3 M 醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠（pH5.2）□配制量100mL□配置方法1. 称取40.8gNaOAc•3H2O置于100～200mL烧杯中，加入约40mL的去离子水搅拌溶解。
2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。
3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。
常见缓冲液的配方
一.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。
10mg/ml牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5ml水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。
不要涡旋混合。
加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存于-20℃。
或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
8mol/L乙酸钾（potassium acetate）：溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到100ml。
1mol/L氯化钾（KCl）：溶解7.46g氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml。
3mol/L乙酸钠（sodium acetate）：溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中，用冰乙酸调溶液的pH至5.2，再加水定容到100ml。
0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三钠盐。
或称取186.1g的Na2EDTA•2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。
1mol/L HEPES：将23.8gHEPES溶于约90ml的水中，用NaOH调pH （6.8-8.2），然后用水定容至100ml。
1mol/L HCl：加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。
常用细胞培养基配方及缓冲液
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L-精氨酸盐酸盐
126
126
126
126
126
126
126
126
126
L-天门冬酰胺
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13.2
13.2
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L-天门冬氨酸
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13.2
13.2
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L-胱氨酸盐酸盐
31.29
31.29
31.29
31.29
31.29
31
31
31.29
31.29
L-谷氨酸
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14.7
14.7
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7.35
渗透压（加碳酸氢钠）
299±5%
300±5%
L-脯氨酸
17.25
17.25
以上数据仅为参考，以产品说明书为准。
IMDM细胞培养基
成分（mg/L）
MD400
成分（mg/L）
MD400
氯化钙
165
L-苏氨酸
氯化钾
330
L-色氨酸
16
硝酸钾
0.076
L-酪氨酸
71.5
无水硫酸镁
97.67
L-缬氨酸
维生素B12
0.68
0.68
L-丙氨酸
4.45
4.45
L-天门冬酰胺
7.5
7.5
pH（无碳酸氢钠）
5.8±0.3
5.8±0.3
L-天门冬氨酸
6.65
6.65
pH（加碳酸氢钠）
6.8±0.3
常用细胞培养基配方及缓冲液
常用细胞培养基配方及缓冲液细胞培养基是为了在体外维持细胞生长和增殖所设计的一种营养液。
细胞培养基的配方要求提供细胞所需的基本营养物质，如氨基酸、糖类、维生素和激素，并提供适当的pH和离子平衡。
同时，缓冲液也是细胞培养过程中不可或缺的一部分，用于稳定细胞培养基的pH，维持细胞正常的生长环境。
下面列举几种常用的细胞培养基配方及缓冲液：1. DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium)-细胞培养基配方：-DMEM培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)-缓冲液：无2. RPMI 1640 Medium (Roswell Park Memorial Institute Medium) -细胞培养基配方：-RPMI1640培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)-缓冲液：HEPES(4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙烷磺酸)溶液，浓度为25mM，用于稳定pH。
3. MEM (Minimum Essential Medium)-细胞培养基配方：-MEM培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)- 缓冲液：盐酸/NaOH缓冲体系，通常用NaHCO3/N-2-羟乙基piperazine-N'-2-乙磺酸(HEPES)缓冲。
4. Hank's Balanced Salt Solution (HBSS)-细胞培养基配方：-HBSS培养基粉末-对应体积的无菌水-缓冲液：无5. L-15 Medium (Leibovitz's L-15 Medium)-细胞培养基配方：-L-15培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-缓冲液：HEPES溶液，浓度为25mM。
6. DMEM/F12 Medium (Dulbecco's Modified Eagle Medium and Ham's F-12 Medium)-细胞培养基配方：-DMEM/F12培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)-缓冲液：HEPES溶液，浓度为25mM。
各种缓冲液配方
三、核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法50×TAE Buffer (pH8.5)组份浓度 2 M Tris-醋酸，100 mM EDTA配制量 1 L配制方法 1.称量下列试剂，置于1 L烧杯中。
2.向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3.加入57.1 ml的乙酸，充分搅拌。
4.加去离子水将溶液定容至l L后，室温保存。
10×TBE Buffer (pH8.3)组份浓度890 mM Tris-硼酸，20 mM EDTA配制量 1 L配制方法l.称量下列试剂，置于l L烧杯中。
2.向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3.加去离子水将溶液定容至l L后，室温保存。
10×MOPS(3-吗啉基丙磺酸)Buffer组份浓度200 rnM MOPS，20 mM NaOAc，10 mM EDTA配制量 1 L配制方法 1.称41.8 g MOPS，置于1 L烧杯中。
2.加约700 ml DEPC处理水，搅拌溶解。
3.使用2 N NaOH调节pH值至7.0。
4.再向溶液中加入下列试剂。
5.用DEPC处理水将溶液定容至1 L。
6.用0.45 m滤膜过滤除去杂质。
7.室温避光保存。
注：溶液见光或高温灭菌后会变黄。
变黄时也可使用，但变黑时不要使用。
溴乙锭(10 mg/ml)组份浓度10 mg/ml溴乙锭配制量100 ml配制方法 1.称量1 g溴乙锭，加入到100 ml容器中。
2.加入去离子水100 ml，充分搅拌数h完全溶解溴乙锭。
3.将溶液转移至棕色瓶中，室温避光保存。
4.溴乙锭的工作浓度为0.5 g/ml。
注意：溴乙锭是一种致癌物质，必须小心操作。
Agarose凝胶配制方法 1.配制适量的电泳及制胶用的缓冲液(通常是0.5×TBE或1×TAE)。
2.根椐制胶量及凝胶浓度，准确称量琼脂糖粉，加入适当的锥形瓶中。
3.加入一定量的电泳缓冲液(总液体量不宜超过锥形瓶的50%容量)。
实验室常用试剂和缓冲液配方
实验室常用试剂和缓冲液配方PBS（磷酸盐缓冲液）是一种常用的生物化学缓冲液，用于洗涤和稀释生物化学试样。
配方：-NaCl：8g-KCl：0.2g-Na2HPO4：1.42g-KH2PO4：0.24g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，调节pH值至7.4、用1M（摩尔浓度）盐酸或1M氢氧化钠进行调节。
2. Luria-Bertani (LB) 培养基配方LB培养基是微生物学研究中常用的培养基，适用于大多数细菌和酵母菌的培养。
配方：- 水解酪蛋白（tryptone）：10 g- 酵母粉（yeast extract）：5 g-NaCl：10g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，用1M盐酸或1M氢氧化钠调节pH 至7.0。
可以选择添加洗涤剂Tween-20（0.1%）以提高溶解度。
SSC缓冲液广泛用于核酸杂交实验等生物学研究中。
配方：-NaCl：175.3g- Na3Citrate·2H2O：88.2 g-EDTA：37.2g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，调节pH值至7.0-7.2、可以选择添加DEPC（二硫酰二甲酯）处理，增强其功能。
4.甲醛溶液甲醛溶液常用于生物样品固定以及染色实验。
配方：-甲醛：37%-PBS或水将适量的甲醛加入PBS或水中，制备所需浓度的甲醛溶液。
5. β-羟丁酸钠（β-Hydroxybutyrate）溶液β-羟丁酸钠是一种常用的减少剂，用于生物化学实验中。
配方：-β-羟丁酸钠：1M根据需求将适量的β-羟丁酸钠溶解在合适的溶剂中。
这里只是列举了几个常见的试剂和缓冲液配方，实验室试剂和缓冲液种类丰富多样，具体使用取决于研究目的和实验要求。
在进行实验之前，建议仔细阅读相关文献和制造商提供的说明书，并按照正确的比例和步骤配制试剂和缓冲液。
生物实验常用溶液的配制(整理版)
生物实验常用溶液的配制一、DNA电泳相关：1、DNA电泳缓冲液：（1）Tris-乙酸（TAE）缓冲液：TAE较为常用，且价格低，但其缓冲能力较弱。
所以TAE电泳需要蠕动泵使两极贮液槽进行液体循环，而且TAE需要经常更新；且要加入EDTA，目的在于鳌合二价离子，抑制DNase，以保护DNA。
① TAE使用液：1×：40mmol/L Tris-乙酸1mmol/L EDTA② TAE贮存液（每L）：50×：242g Tris碱57.1ml 冰乙酸100ml 0.5mol/L EDTA（pH8.0）（2）Tris-硼酸（TBE）缓冲液：① TBE使用液：0.5×：0.045mol/L Tris-硼酸1mmol/L EDTA② TBE贮存液（每L）：5×：54g Tris碱27.5ml 硼酸20ml 0.5mol/L EDTA（pH8.0）（3）Tris-磷酸（TPE）缓冲液：① TPE使用液：1×：90mmol/L Tris-磷酸2mmol/L EDTA② TPE贮存液（每L）：10×：108g Tris碱15.5ml 85%磷酸40ml 0.5mol/L EDTA（pH8.0）2、1%（线性DNA分子大小为400-6000）琼脂糖凝胶DNA电泳操作过程：①制胶：按要求取1g琼脂糖加入1×TAE（或0.5×TAE）电泳缓冲液100ml，置于三角瓶中，在沸水浴或微波炉中加热至琼脂糖溶解（一般中低火温，3-5min即可）；②溶液冷却至60℃，加入EB至0.5μg/ml（2-3ml即可）,充分混匀；③迅速倒入备好的胶模中；④凝胶完全凝固后，小心移去梳子和封口胶带，将凝胶放入电泳槽中；⑤加入能没过胶面1mm深的电泳缓冲液（TAE）；⑥DNA样品与加样缓冲液（溴酚蓝）混合后，用微量移液吸头加样；⑦盖上电泳槽并通电，使DNA向正极移动（黑极→红极），1-5V/cm（80V电压左右）进行电泳（30min 左右）；⑧电泳完毕，切断电源，取出凝胶于紫外投射光源下观察并拍照。
常用缓冲液及培养基配方
常用缓冲液及培养基配方LB液体培养基：Bacto-蛋白胨10g酵母抽提物5g氯化钠10g加950ml蒸馏水溶解，用5N氢氧化钠调pH至7.0，定容至1000ml，高压灭菌后保存。
LB固体培养基：每升LB液体培养基中加入12g琼脂粉，高压灭菌后保存。
SOB液体培养基Bacto-蛋白胨20g酵母抽提物5gNaCl 0.5g加950 ml水溶解，加入250mmol/L KCl 溶液10ml，用5 N NaOH调pH至7.0，定容至1000 ml，高压灭菌后保存。
使用前加入5ml经灭菌的2mol/LMgCl2。
SOC液体培养基SOB中加入经灭菌的葡萄糖溶液至终浓度为20mmol/L。
麦康凯固体培养基每1000ml水中加52g培养基粉，煮沸溶解后分装，高压灭菌。
NA固体培养基牛肉浸膏3g酵母浸膏1g蛋白胨蔗糖琼脂粉5g 10g 15g加950ml蒸馏水溶解，调pH至7.0，定容至1000ml，高压灭菌后保存。
TB培养基：将下列组分溶解在0.9L水中：Bacto-蛋白胨12g酵母抽提物24g甘油4ml各组分溶解后高压灭菌。
冷却到60℃，再加100ml灭菌的170mmol/L KH2PO4/ 0.72 mol/L K2HPO4的溶液。
高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌。
溶液Ⅰ葡萄糖2.25 g 50mmol/L1mol/L Tris·Cl(pH8.0) 6.25ml 20mmol/L0.5mol/L EDTA(pH8.0) 5ml 10mmol/L调pH至8.0后，用水定容至250 ml，高压灭菌后保存。
溶液Ⅱ10 mol/L NaOH 2ml10% SDS 10ml用水定容至100 ml，现配现用。
溶液Ⅲ5 mol/L 醋酸钾60ml冰醋酸11.5ml水28.5ml高压灭菌后保存。
高盐TE缓冲液10mmol/L Tris.Cl, pH 8.0*0.1mmol/L EDTA, pH 8.0*1mol/L NaCl于室温保存（可在几年内保持稳定）CTAB抽提液2%（w/v）CTAB(古立烷基三乙基溴化铵)100mmol/L Tris.Cl,pH 8.0 *1.4mol/L NaCl于室温保存（可在几年内保持稳定）CTAB/NaCl 溶液（10% CTAB/0.7mol/L NaCl）在80ml H2O中溶解4.1g NaCl,缓慢加入10一CTAB（十六烷基三乙基溴化铵），同时加热并搅拌。
常用细胞培养基配方及缓冲液
常用细胞培养基配方及缓冲液细胞培养基是一种含有适当营养物质和生长因子的液体或凝胶，用于维持细胞的生长与繁殖。
常用的细胞培养基配方和缓冲液如下：一、常用的细胞培养基配方：1. DMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）-DMEM是最常用的细胞培养基之一，适用于多种种类的细胞培养。
-基本配方：-高糖DMEM：添加25mM葡萄糖-低糖DMEM：添加5.5mM葡萄糖-高氨基酸DMEM：添加高浓度的氨基酸，以促进细胞生长和蛋白质合成。
2.RPMI1640-适用于淋巴细胞和一些肿瘤细胞的培养。
-基本配方：-高糖RPMI1640：添加25mM葡萄糖-低糖RPMI1640：添加5.5mM葡萄糖-高氨基酸RPMI1640：添加高浓度的氨基酸。
3. MEM（Minimum Essential Medium）-MEM是最早用于细胞培养的培养基。
-基本配方：-高糖MEM：添加25mM葡萄糖-低糖MEM：添加5.5mM葡萄糖4. Ham's F-10-适用于肿瘤细胞和一些原代细胞的培养。
-基本配方：- 高糖Ham's F-10：添加25mM葡萄糖- 低糖Ham's F-10：添加5.5mM葡萄糖5.L-15-适用于多种种类的细胞培养。
-基本配方：- L-15培养基：必须在CO2-free环境下使用。
二、常用的缓冲液：1. 磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffered Saline，PBS）-0.1MPBS的配方：-8gNaCl-0.2gKCl-1.44gNa2HPO4-0.24gKH2PO4-1L去离子水-调pH至7.42.HEPES缓冲液-基本配方：-119mMNaCl-5mMKCl-0.8mMMgSO4-0.4mMKH2PO4-2.4mMNaHCO3-20mMHEPES（pH7.4）-0.6mMCaCl23. Tris缓冲液-基本配方：- 25mM Tris- 192mM glycine-10%甘油-0.1%SDS-pH8.34. Hanks平衡盐液 (HBSS)-基本配方：-8gNaCl-0.4gKCl-0.146gKH2PO4-0.2gMgSO4-0.06gMgCl2-0.35gNaHCO3-0.06gNa2HPO4-pH7.45. Tris-EDTA-基本配方：- 1M Tris-HCl，pH 8.0-0.5MEDTA，pH8.0以上是常用的细胞培养基配方和缓冲液的一些例子，不同细胞类型和实验要求可能需要不同的培养基和缓冲液。
实验室常用试剂配制
细胞培养PBS配方PBS即磷酸盐缓冲生理盐水，都是含有H2PO4-、HPO42- 缓冲体系和NaCl，用于调节渗透压，达到与人体相当的水平，分为含钾离子和不含钾离子两种。
1、不含钾离子的PBS配方（由NaCl，Na2HPO4和NaH2PO4三种成分组成，用于其它实验缓冲和稀释用）母液的配制：0.2M Na2HPO4：称取 71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4：称取 31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水各种浓度PB（pH=7.4）的配制：先配 0.2M PB （pH=7.4，100ml）：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4， 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4，即可。
然后只需将0.2M PB （pH=7.4）按相应比例适当稀释即可，如：0.1M PB（PH=7.4）：取 500ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。
0.01M PB （PH=7.4）：取50ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。
0.02M PB （PH=7.4）：取100ml 0.2 M PB，加水稀释至 1000ml 即可。
配好后加入 NaCl 至0.9%（g/100ml）即可。
* 其他各种另 PH值的 0.2M PB（100ml）配方：pH 0.2M NaH2PO4（ml）0.2M Na2HPO4（ml）5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19 817.5 16 847.6 13 877.7 10.5 0.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.7 .2、含钾离子的PBS配方（由NaCl，KCl，Na2HPO4和KH2PO4四种成分组成，一般用于组织培养）0.01M磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法：(免疫组化常用)称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4、0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可，高压灭菌。
实验常用试剂、缓冲液的配制方法
实验常用试剂、缓冲液的配制方法Ampicillin（氨卡青霉素）100mg/ml□组份浓度 100mg/ml Ampicillin□配制量 50mL□配置方法 1.称量5g Ampicillin置于50mL离心管中。
2.加入40mL灭菌水，充分混合溶解后，定容至50mL。
3.用0.22μm滤膜过滤除菌。
4.小份分装（1mL/份）后，-20℃保存。
Kan（卡那霉素）50mg/ml□组分浓度 50mg/ml卡那霉素□配制量 50mL□配制方法 1.称取2.5g卡那霉素置于50ml塑料离心管中。
2.加入40ml灭菌水，充分混合溶解之后定容至50mL。
3.用 0.22μm 滤膜过滤除菌。
4.小份分装（1mL/份）后，-20℃保存。
IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷) 24 mg/ml□组份浓度 24mg/L IPTG□配制量 50mL□配置方法 1.称量1.2gIPTG置于50mL离心管中。
2.加入 40mL 灭菌水，充分混合溶解后，定容至50mL。
3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。
4.小份分装（1mL/份）后，-20℃保存。
X- Gal 20mg/m□组份浓度 20mg/L X-Gal□配制量 50mL□配置方法 1.称取1gX-Gal置于50mL离心管中。
2.加入40mL DMF（二甲基甲酰胺），充分混合溶解，定容至50mL。
3.小份分装（1mL/份）后，-20℃避光保存。
LB培养基□组份浓度1％（W/V）Tryptone，0.5％（W/V）Yeast Extract，1％（W/V）NaCl□配制量 1L□配置方法 1.称量下列试剂，置于1L烧杯中Tryptone（胰化蛋白胨） 10gYeast Extract（酵母提取物） 5gNaCl（氯化钠） 10g2.加入约800mL 的去离子水，充分搅拌溶解。
3.滴加5N NaOH（约0.2mL），调节pH值至7.2-7.3。
4.加去离子水定容至1L。
分子生物学常用缓冲液、试剂和贮存液的配制
分子生物学常用缓冲液、试剂和贮存液的配制1、6*Loading Buffer（DNA电泳用，50ml配方）组分浓度：100mM EDTA, 40%(V/V) 蔗糖, 0.05%（W/V）xylene cyanol FF, 0.05%（W/V）溴酚蓝配制方法：称取25mg溴酚蓝，25mg xylene cyanol FF，5ml 0.5MEDTA，加入约20ml去离子水，加热搅拌，充分溶解，加入20g蔗糖，去离子水定容至50ml。
2、10*PBS（pH7.2～7.4，分子克隆推荐配方）组分浓度：NaCl 137 mmol/L，KCl 27 mmol/L，Na2HPO4 100 mmol/L，KH2PO4 20 mmol/L配置方法：用800ml去离子水溶解80 g NaCl, 2 g KCl，14.4 g Na2HPO4和2.4 g KH2PO4。
用盐酸调节pH 至7.4，加水定容至1 L，高温高压灭菌，室温保存。
3、20*SSC （pH约7.0）组分浓度：300 mmol/L 柠檬酸三钠，3 mol/L 氯化钠配制方法：称取柠檬酸三钠·2H2O 88.23 g，氯化钠175.3 g，加入800 ml去离子水充分溶解，用14 N HCl 调pH为7.0，去离子水定容至1 L，高温高压灭菌后室温保存。
4、10*Tris-甘氨酸转膜液（pH约8.3）1 L组分浓度：0.25 M Tris，1.92 M 甘氨酸配制方法：甘氨酸144.13 g，Tris 30.29 g，去离子水溶解定容至1 L。
使用前，100 ml 10*转膜液，加入200 ml甲醇，700 ml去离子水成为1*转膜液5、10*Tris-甘氨酸-SDS 电泳缓冲液（SDS-PAGE电泳缓冲液，pH约8.6）组分浓度：0.25 M Tris，1.92 M 甘氨酸，1%（W/V）SDS配制方法：称取30.29 g Tris，,144.13 g甘氨酸，5 g SDS，加入800 ml去离子水搅拌溶解，定容至1 L，常温保存。
常用缓冲液及培养基配方
常用缓冲液及培养基配方LB 液体培养基：Bacto-蛋白胨蛋白胨10g酵母抽提物酵母抽提物5g 氯化钠氯化钠10g 加950ml 蒸馏水溶解，用5N 氢氧化钠调pH 至7.0，定容至1000ml ，高压灭菌后保存。
LB 固体培养基：每升LB 液体培养基中加入12g 琼脂粉，高压灭菌后保存。
琼脂粉，高压灭菌后保存。
SOB 液体培养基 Bacto-蛋白胨蛋白胨20g 酵母抽提物酵母抽提物5g NaCl 0.5g加950 ml 水溶解，加入250mmol/L KCl 溶液10ml ，用5 N NaOH 调pH 至7.0，定容至1000 ml ，高压灭菌后保存。
使用前加入5ml 经灭菌的2mol/LMgCl 2。
SOC 液体培养基SOB 中加入经灭菌的葡萄糖溶液至终浓度为20mmol/L 。
麦康凯固体培养基每1000ml 水中加52g 培养基粉，煮沸溶解后分装，高压灭菌。
培养基粉，煮沸溶解后分装，高压灭菌。
NA 固体培养基牛肉浸膏牛肉浸膏 3g酵母浸膏酵母浸膏 1g 蛋白胨蛋白胨 蔗糖蔗糖 琼脂粉琼脂粉5g 10g 15g加950ml 蒸馏水溶解，调pH 至7.0，定容至1000ml ，高压灭菌后保存。
TB 培养基： 将下列组分溶解在0.9L 水中：水中： Bacto-蛋白胨蛋白胨12g 酵母抽提物酵母抽提物24g 甘油甘油4ml 各组分溶解后高压灭菌。
冷却到60℃，再加100ml 灭菌的170mmol/L KH 2PO 4/0.72 mol/L K 2HPO 4的溶液。
高压灭菌或用0.22um 的滤膜过滤除菌。
的滤膜过滤除菌。
溶液Ⅰ葡萄糖葡萄糖2.25 g 50mmol/L 1mol/L Tris ·Cl(pH8.0) 6.25ml20mmol/L 0.5mol/L EDTA(pH8.0) 5ml10mmol/L调pH 至8.0后，用水定容至250 ml ，高压灭菌后保存。
，高压灭菌后保存。
缓冲液的配制方法
核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法50XTAE Buffer (pH 8.5)组份浓度 2 M Tris-醋酸，100 mM EDTA 配制量 1 L配制方法 1.称量下列试剂，置于1 L 烧杯中2•向烧杯中加入约800 ml 的去离子水，充分搅拌溶解 3. 加入57.1 ml 的乙酸，充分搅拌。
4. 加去离子水将溶液定容至I L 后，室温保存。
10XTBE Buffer (pH8.3)组份浓度 890 mM Tris-硼酸，20 mM EDTA 配制量 1 L 配制方法I.称量下列试剂，置于I L 烧杯中。
2. 向烧杯中加入约800 ml 的去离子水，充分搅拌溶解3. 加去离子水将溶液定容至l L 后，室温保存。
10>MOPS(3-吗啉基丙磺酸)Buffer组份浓度 200 rnM MOPS ，20 mM NaOAc , 10 mM EDTA 配制量 1 L 配制方法 1.称41.8 g MOPS ，置于1 L 烧杯中。
2. 加约700 ml DEPC 处理水，搅拌溶解3. 使用2 N NaOH 调节pH 值至7.0。
4. 再向溶液中加入下列试剂。
5. 用DEPC 处理水将溶液定容至1 L6. 用0.45 m 滤膜过滤除去杂质。
7. 室温避光保存。
注：溶液见光或高温灭菌后会变黄。
变黄时也可使用，但变黑时不要使用溴乙锭 (10 mg/ml)组份浓度 配制量配制方法 10 mg/ml 溴乙锭100 ml 1. 称量1 g 溴乙锭，加入到100 ml 容器中。
2. 加入去离子水100 ml ，充分搅拌数h 完全溶解溴乙锭。
3. 将溶液转移至棕色瓶中，室温避光保存。
注意：溴乙锭是一种致癌物质，必须小心操作Agarose 凝胶配制方法 1.配制适量的电泳及制胶用的缓冲液（通常是0.5来BE或1 X TAE）。
2. 根椐制胶量及凝胶浓度，准确称量琼脂糖粉，加入适当的锥形瓶中。
3. 加入一定量的电泳缓冲液（总液体量不宜超过锥形瓶的50%容量）。
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常用缓冲液及培养基配方LB液体培养基：Bacto-蛋白胨10g酵母抽提物5g氯化钠10g加950ml蒸馏水溶解，用5N氢氧化钠调pH至7.0，定容至1000ml，高压灭菌后保存。
LB固体培养基：每升LB液体培养基中加入12g琼脂粉，高压灭菌后保存。
SOB液体培养基Bacto-蛋白胨20g酵母抽提物5gNaCl 0.5g加950 ml水溶解，加入250mmol/L KCl 溶液10ml，用5 N NaOH调pH至7.0，定容至1000 ml，高压灭菌后保存。
使用前加入5ml经灭菌的2mol/LMgCl2。
SOC液体培养基SOB中加入经灭菌的葡萄糖溶液至终浓度为20mmol/L。
麦康凯固体培养基每1000ml水中加52g培养基粉，煮沸溶解后分装，高压灭菌。
NA固体培养基牛肉浸膏3g酵母浸膏1g蛋白胨蔗糖琼脂粉5g 10g 15g加950ml蒸馏水溶解，调pH至7.0，定容至1000ml，高压灭菌后保存。
TB培养基：将下列组分溶解在0.9L水中：Bacto-蛋白胨12g酵母抽提物24g甘油4ml各组分溶解后高压灭菌。
冷却到60℃，再加100ml灭菌的170mmol/L KH2PO4/ 0.72 mol/L K2HPO4的溶液。
高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌。
溶液Ⅰ葡萄糖2.25 g 50mmol/L1mol/L Tris·Cl(pH8.0) 6.25ml 20mmol/L0.5mol/L EDTA(pH8.0) 5ml 10mmol/L调pH至8.0后，用水定容至250 ml，高压灭菌后保存。
溶液Ⅱ10 mol/L NaOH 2ml10% SDS 10ml用水定容至100 ml，现配现用。
溶液Ⅲ5 mol/L 醋酸钾60ml冰醋酸11.5ml水28.5ml高压灭菌后保存。
高盐TE缓冲液10mmol/L Tris.Cl, pH 8.0*0.1mmol/L EDTA, pH 8.0*1mol/L NaCl于室温保存（可在几年内保持稳定）CTAB抽提液2%（w/v）CTAB(古立烷基三乙基溴化铵)100mmol/L Tris.Cl,pH 8.0 *1.4mol/L NaCl于室温保存（可在几年内保持稳定）CTAB/NaCl 溶液（10% CTAB/0.7mol/L NaCl）在80ml H2O中溶解4.1g NaCl,缓慢加入10一CTAB（十六烷基三乙基溴化铵），同时加热并搅拌。
如果需要，可加热至65℃溶解。
定容终体积至100ml.CTAB沉淀液1%（w/v）CTAB50mmol/L Tris.Cl, pH 8.010mmol/L EDTA, pH8.0PBS缓冲液：十二水磷酸氢二钠15g磷酸二氢钾1g氯化钠40g氯化钾1g定容至5000ml, 调pH至7.2。
ELISA包被液：碳酸钠 1.59g碳酸氢钠 2.93g定容至1000ml，调pH至9.6。
ELISA洗涤液(0.01M PBST)：5000ml PBS中加2.5ml吐温-20显色液（底物溶液-邻苯二胺溶液）：pH5.0 磷酸盐-柠檬酸缓冲液：0.1 M 柠檬酸（19.2 g/L）24.3 ml、0.2 M Na2HPO4 (28.4 g/L) 25.7 ml、临用时取上述溶液10 ml, 加邻苯二胺（OPD）4 mg，溶解后加入30％H2O2 15 µl；终止液：2 M H2SO4TE缓冲液(pH8.0)：Tris·HCl(pH8.0) 10mmol/LEDTA(pH8.0) 1mmol/L高压灭菌。
10% SDS：10g十二烷基硫酸钠溶于90ml水中，加热至68℃溶解，加几滴浓盐酸调pH至7.2，定容至100ml，过滤除菌。
50×TAE缓冲液Tris 242 g冰醋酸57.1 ml0.5 mol/L EDTA(pH8.0) 100 ml用水定容至1000 ml，用时稀释50倍。
5×TBE缓冲液：Tris碱* 54g硼酸27.5ml0.5mol/L EDTA(pH8.0) 20ml加水定容至1000ml，0.5×使用。
6×DNA上样缓冲液：0.25%溴酚蓝*0.25%二甲苯青FF*30%甘油甲醛凝胶加样缓冲液(DEPC处理水配制)：50%甘油1mmol/L EDTA(pH8.0)0.25溴酚蓝*0.25二甲苯青FF*适量溴化乙锭*20×SSC：氯化钠175.3g柠檬酸钠88.2g蒸馏水900ml溶解后用5N氢氧化钠调pH至7.0，定容至1000ml，高压灭菌保存。
预杂交液：6×SSC5×Denhardt试剂0.5% SDS100ug/ml经变性并断裂成片段的鲑精DNA5×甲醛凝胶电泳缓冲液：0.1mol/L MOPS(pH7.0)*40mmol/L乙酸钠5mmol/L EDTA(pH8.0)*甲醛变性凝胶配方：加入0.7 g琼脂糖到49.7 ml DEPC-H2O中，用煮沸法溶解琼脂糖，待溶液冷却至55℃同时加入7 ml 10×MOPS（0.2 mol/L MOPS pH7.0, 20 m mol/L 乙酸钠，10 m mol/L EDTA pH8.0）电泳缓冲液和13.3 ml甲醛，摇匀，制板待用。
0.5 mol/L磷酸缓冲液（PH 7.2）134 g Na2HPO4, 4 ml 85% H3PO4,用水定容至1L。
探针标记中的逆转录终止液1×TEN40 m mol/L Tris-Cl (PH 7.5),1 m mol/L EDTA (PH 8.0),150 m mol/L NaCl。
洗膜液Ⅰ2×SSC，0.1％（m/V）SDS洗膜液Ⅱ0.1×SSC，0.1％（m/V）SDSSDS-PAGE 电泳分析所用的试剂：30%丙烯酰胺：29g丙烯酰胺和1g N ，N ’亚甲基双丙烯酰胺，加入60ml ddH2O，完全溶解后定容至100ml，过滤，置棕色瓶中备用。
Tris-甘氨酸电泳缓冲液：Tris 3.00g，甘氨酸14.4g，SDS 1g，调pH至8.3，用水定容至1L。
12%分离胶：ddH2O 3.3ml，30%丙烯酰胺4ml，Tris-HCl（pH8.8）2.5ml，10%SDS 0.1ml，10%过硫酸铵0.1ml，TEMED 0.006ml。
5%浓缩胶：ddH2O 1.4ml，30%丙烯酰胺0.33ml，Tris-HCl（pH6.6）0.25ml，10%SDS0.02ml，10%过硫酸铵0.02ml，TEMED 0.002ml。
考马斯亮蓝染色液：乙醇450ml，冰醋酸100ml，ddH2O 450ml，考马斯亮蓝R-250 2.5g。
脱色液（1L）：乙醇450ml，冰醋酸100ml，ddH2O 450ml。
2×上样缓冲液：100mmol/L Tris-HCl（pH6.8），200mmol/L 二硫苏糖醇（DTT），4% SDS，0.2%溴酚蓝，20%甘油。
蛋白纯化所需的缓冲液：Buffer B(pH 8.0)：8M urea、100 mM NaH2PO4、10mM Tris-ClBuffer C(pH 6.3)：8M urea、100 mM NaH2PO4、10mM Tris-ClBuffer D(pH 5.9)：8M urea、100 mM NaH2PO4、10mM Tris-ClBuffer E(pH 4.5)：8M urea、100 mM NaH2PO4、10mM Tris-Cl电洗脱缓冲液：SDS 0.1-0.5gTris-Base 3g甘氨酸18.8g定容至1000ml蛋白提取缓冲液：Tris-HCl，pH6.8 50mmol/LSDS 4.5%-疏基乙醇尿素7.5% 9mol/L电转移缓冲液：Tris-Base 3.00g，甘氨酸14.4g，SDS 1g，甲醇200ml，调pH至8.3，用水定容至1L。
Western blot所用试剂：1×PBS(pH7.4)：NaCl 8 g，KCl 0.2 g，KH2PO4 0.24 g，Na2HPO4 1.44g，用蒸馏水溶解至1 L1×PBST：5L 1×PBS 中加入2.5ml Tween-20封闭液：100ml PBS缓冲液中加入5克脱脂奶粉植物基本培养基溶液大量元素（1L）七水硫酸镁370mg 磷酸二氢钾170mg 硝酸钾1900mg 硝酸氨1650mg 二水氯化钙440mg 微量元素（1L)硼酸 6.2mg 一水硫酸锰15.6mg 七水硫酸锌8.6mg 二水钼酸钠0.25mg 五水硫酸铜0.025mg 六水氯化钴0.025mg 碘化钾0.83mg 七水硫酸亚铁27.8mg 乙二铵二乙酸二钠37.3mg 有机(1L)盐酸硫胺素0.5mg 盐酸吡哆辛0.5mg 烟酸0.05mg 肌醇100mg MSs培养基10×大量100ml 100×微量10ml 100×铁盐10ml 500×B5有机2ml 6-BA 1mg 蔗糖30g 琼脂0.8% 调PH5.8并加水定容至1LMsr（1L）10×大量元素100ml 100×微量元素10ml 100×Fe盐10ml 500×B5有机2ml 蔗糖3g 葡萄糖7g 琼脂0.8% PH5.8加水定容至1L水稻转化用培养基培养基成分NB(基本培养基) (刘巧泉等,1998) N6大量元素营养液、EDTA-Fe营养液、B5微量元素营养液、B5维生素营养液Nbi(愈伤诱导和继代培养基) NB、0.5g/L谷氨酰胺、0.5g/L脯氨酸、0.3g/L水解酪蛋白、30g/L 蔗糖、2mg/L 2,4-D、2.6g/L植物胶，pH5.8高渗培养基Nbi、47g/L山梨醇、47g/L甘露醇，pH5.8NBs(筛选培养基) NB、0.5g/L谷氨酰胺、0.5g/L脯氨酸、0.3g/L水解酪蛋白、30g/L蔗糖、2mg/L 2,4-D、40mg/L Hyg(第二次筛选用量为50mg/L)、2.6g/L植物胶，pH5.8MS(再生培养基) MS大量元素营养液、EDTA-Fe营养液、MS微量元素营养液、B5维生素营养液、2g/L水解酪蛋白、30g/L 蔗糖、30g/L 山梨醇、2.0mg/L 6-BA、0.5mg/L NAA、30mg/L Hyg、3.0g/L植物胶，pH5.8NBr(再生培养基) NB、2g/L水解酪蛋白、30g/L 蔗糖、30g/L 山梨醇、2.0mg/L 6-BA、0.5mg/L NAA、30mg/L Hyg、3.0g/L植物胶，pH5.81/2MS(生根培养基) 1/2(MS大量元素营养液+EDTA-Fe营养液+ MS微量元素营养液)、B5维生素营养液、3g/L 蔗糖、7g/L 葡萄糖、40mg/L Hyg、2.6g/L植物胶，pH5.8水稻转化用激素和化合物的配制(1) 2,4-D(1mg/ml)：称取100mg 2,4-D置于小烧杯内，加少量无水乙醇使之完全溶解后，将水缓慢加入不停搅拌的2,4-D酒精溶液中，不可出现沉淀，定容至100ml，过滤除菌。