猕猴桃细菌性溃疡病菌gacA基因的克隆及功能分析

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猕猴桃对溃疡病抗性评价指标的研究的开题报告

猕猴桃对溃疡病抗性评价指标的研究的开题报告
1.研究背景
溃疡病是一种常见病，多见于消化道，给患者带来很大的影响。

目前，常用的药物治疗不能完全治愈溃疡病，而且还存在一定的毒副作用，因此有必要寻找新的治疗方式。

猕猴桃是营养成分丰富、富含多种维生
素和矿物质的水果，且含有多种生物活性物质，具有抗氧化、抗炎、抗
老化等多种保健功效。

有研究表明，猕猴桃提取物具有一定的抗溃疡病
作用，因此有必要对猕猴桃对溃疡病的抗性进行评价。

2.研究目的
从生物学角度入手，研究猕猴桃对溃疡病的抗性评价指标，以期为
研发猕猴桃抗溃疡病功能食品提供理论依据。

3.研究内容
（1）收集猕猴桃及其提取物研究文献，了解其化学组成、营养价值和生物活性物质；
（2）以动物模型为研究对象，分别用不同剂量的猕猴桃提取物处理溃疡病动物，观察其抗溃疡病作用；
（3）采用理化分析、生化指标、免疫组织化学和分子生物学等多种研究方法，评价不同指标对猕猴桃提取物的抗溃疡病作用。

4.研究意义
猕猴桃是一种常见的水果，富含营养素和生物活性物质，具有多种
保健功效。

本研究将应用生物学方法从多个方面评价猕猴桃的抗溃疡病
作用，为其进一步应用于溃疡病防治和研发猕猴桃抗溃疡病功能食品提
供理论依据。

同时，本研究提供了一种新的治疗溃疡病的思路，为寻找
新的溃疡病治疗方式提供了新的思路。

猕猴桃溃疡病研究现状及展望

猕猴桃溃疡病研究现状及展望猕猴桃溃疡病是一种由病原菌引起的植物病害。

该病害主要由细菌Erwinia amylovora引起，它是一种革兰氏阴性的杆状细菌，可以引起多种果实和果树的病害，如苹果等。

猕猴桃溃疡病影响了猕猴桃产量和质量，给果农带来了经济损失，也给猕猴桃的商业化种植带来了巨大威胁，因此对该病害的研究成为了近年来极为关注的热点领域。

目前，关于猕猴桃溃疡病的研究主要集中在病原菌的鉴定、防治措施研究及遗传鉴定等几个方面。

首先，对病原菌的鉴定是研究该病害的关键。

现有研究表明，引起猕猴桃溃疡病的主要病原菌是Erwinia amylovora。

特别是在欧洲，这种菌株的研究非常深入。

除此之外，还有其他一些菌株也可引起类似的病害，比如酸枝溃疡病菌等，因此对这些病原菌的鉴定也越来越受到关注。

其次，对于防治措施的研究也是研究猕猴桃溃疡病的重点之一。

目前，主要采用的防治措施包括化学防治和生物防治两种。

化学防治主要是利用杀菌剂喷洒猕猴桃果树表面来杀灭病原菌；生物防治则是通过引入一些天敌来控制病原菌的繁殖，比如利用一些细菌来攻击病原菌。

此外还有其他一些方法，如培育抗病品种、改良种植技术等。

在这方面，还有许多研究需要深入探索，以取得更好的防治效果。

最后，遗传鉴定也是目前比较热门的研究方向。

随着基因芯片技术、转录组测序技术等新技术的发展，越来越多的基因变异引起的猕猴桃耐抗性被发现，并且利用遗传工程技术制造出一些抗病品种。

这些成就本着猕猴桃鲜美的品质，可持续发展并保持猕猴桃生态平衡。

总之，猕猴桃溃疡病的研究成果将对缓解病害带来的经济损失和环境污染等问题产生积极影响。

但是，目前猕猴桃溃疡病的研究还有许多未知和需要探索的领域，希望在不断的研究中，能够找到更好的防治措施，使猕猴桃产业健康可持续发展。

猕猴桃细菌性溃疡病防治-2013

猕猴桃细菌性溃疡病防控技术（安徽农业大学果树种的实验室）猕猴桃细菌性溃疡病（Kiwifruit bacterial canker）是一种寄生性强、极耐低温的细菌性枝干病害，致病菌为丁香假单孢杆菌猕猴桃致病变种（Pseudomonas syringae pv. actinidae，PSA），其侵染、传播不易发觉、具有隐蔽性，发生速度快、具有暴发特征，对猕猴桃植株危害性极大。

由于该病害隐蔽性强，一般在侵染部位未流出菌脓前，很难发现，一旦发现有菌脓流出，危害已经扩展蔓延，严重发生时造成死树毁园。

目前，细菌性溃疡病已经在全世界流行，对猕猴桃产业的威胁巨大。

广大猕猴桃种植户，在注意果园的清洁卫生的同时，应抓住关键时期，及时采取有效措施，进行综合防治。

1、检疫与隔离注意苗木检疫、不从溃疡病流行地区引种接穗、苗木等活体材料；搞好发病果园隔离，进出发病猕猴桃园时，做好消毒、防疫隔离工作。

育苗采集接穗，应选在无感病史果园，嫁接时严格刀具消毒，防止嫁接传染。

2、品种选择根据目前观察，生产上应用的‘徐香’、‘金魁’、‘华优’、‘海沃德’等品种较耐病；‘红阳’、‘Hort16A’等品种易感病，应慎重发展。

新建猕猴桃园，要选用抗病性强的品种、无病菌苗木建园。

3、保持树势根据品种特性、树龄大小、树势强弱、立地条件，合理负载产量；秋季增施有机肥，提高有机质含量，改良土壤；实施平衡施肥、配方施肥，维持健壮的树势。

4、药剂防控抓住关键时期喷药预防：萌芽前，全园喷布5°Be石硫合剂；采果后，可用代森铵1200-1500倍液、20%乙酸铜600-800倍液、或加瑞农800-1000倍液、或噻菌铜600-800倍液，对叶面、枝干等部位进行喷雾。

生长季节，注意对黑尾大叶蝉等刺吸式口器的害虫进行防控。

重病果园，落叶后可用乙酸铜100倍液、加瑞农200倍液、施纳宁100倍液等进行枝干灭菌。

5、清除病原对局部枝条感染、发病较轻的植株，及时剪除已染病的各类枝条，带出果园销毁，防止病原再次传播，修剪刀具每次使用前后都要用75%酒精或10波美度石硫合剂消毒。

猕猴桃细菌性溃疡病的危险性分析

省的苍溪县、都江堰市，陕西省的周至县猕猴桃栽培区域发生，并造成了严重的经济损失。２００１
年全国森林植物检疫对象普查结果，该病分布区进一步扩大到陕西省的长安区、户县、蓝田县、
灞桥区、雁塔区、眉县、武功县、杨凌区，安徽
要：猕猴桃细菌性溃疡病是猕猴桃的重要病害。为了正确认识该病发生的危险性，有效防止其进一步扩散
蔓延，参照国际上有害生物风险分析方法，对猕猴桃细菌性溃疡病在国内的危险性进行了定性和定量分析。做
出了综合评价，并提出检疫和防治管理措施。
省的岳西县，北京市的房山县等］。猕猴桃细菌
性溃疡病在四川省发生面积２８６７ｈ０．ｍ，陕西省
发生３１５ｈ１．ｍ，安徽省发生１ｍ，湖南省发生４ｈ２６ｈ．ｍ，北京发生１３ｍ。１９～０２．３ｈ９２２０年的１０
关键词：猕猴桃；细菌性溃疡病；危险性分析中图分类号：￥３．３．４６６４１文献标识码：Ａ文章编号：１０８１２０）４—０９０００－１Ｘ（０７００１— ４
猕猴桃细菌性溃疡病（ｓｕｏｏａｙｎａＰｅｄｍｎｓＳｆｇｅｉ
对其危险性进行分析与评估。同时，提出相应的风险管理措施，为林业有害生物管理工作提供科
学的依据。
年间，陕西猕猴桃栽培区发生面积从０１ｈ．３ｍ扩
大到３１５ｈ１．ｍ，平均发病株率从３６．％迅速增加到２％以上，周至、户县发病株率高达５％，并０２且有蔓延趋势。

猕猴桃细菌性溃疡病的发病规律及防治对策

猕猴桃细菌性溃疡病的发病规律及防治对策作者：龙晓玲来源：《吉林农业·下半月》2013年第11期摘要：随着社会经济的快速发展，人民生活日新月异，生活水平不断提高。

在膳食方面，对食物的种类与质量的要求也越来越高。

猕猴桃作为一种高营养水果，兼有很好的医疗保健价值，受到越来越多群众的青睐与喜爱。

然而，在种植和生长过程中，猕猴桃却面临着规律性的细菌性溃疡病的威胁，给猕猴桃的产量和品质都带来了极大的影响。

本文就猕猴桃细菌性溃疡病的发病规律这个问题展开论述，并提出相关防治对策。

关键词：猕猴桃；细菌性溃疡病；发病规律；防治对策中图分类号： S663.4 文献标识码： A 文章编号： 1674-0432（2013）-22-33-11 猕猴桃细菌性溃疡病的发病规律综述1.1 猕猴桃细菌性溃疡病简介猕猴桃细菌性溃疡病容易发生在冷凉、湿润的地区，而这类地区同时也是生产优质猕猴桃的理想生态环境。

这种病被列为国家森林植物检疫对象，一旦发病，不仅直接降低猕猴桃产量，还会导致猕猴桃果实变小、果皮变厚、果形不一、果味变酸，品质大大下降，给猕猴桃的生产造成毁灭性危害。

不仅如此，这种病来势非常凶猛，发病严重的年份可导致整个果园濒于毁灭。

1.2 发病规律概述猕猴桃细菌性溃疡病的发生必须在有伤口的地方开始，像是雹伤、冻伤、剪口伤、擦伤、裂皮等，这样的地方才能给溃疡病病菌的入侵提供入口。

此外，从客观环境上讲，多雨年份发病要比少雨年份频繁；迎风带和高寒区病害要比避风带和温暖区严重。

从种植管理方面看，成片种植的地区比隔离种植的地区更严重，而粗放管理地区要比精耕细作地区更为严重。

从果树自身的生长来看，已经长大的果树比幼年树发病频繁，而衰老的树又比成年健壮的树发病严重。

1.3 发病特点猕猴桃细菌性溃疡病有些规律性的特点。

第一，发病较早。

很多地方从元月份开始就有发病现象。

第二，发病率较高。

据调查数据显示，平均发病率在5%～10%之间，严重的果园发病率可达30%～40%，最高纪录有达到60%的。

猕猴桃细菌性病害的发生及抗性研究进展

针对以上问题，未来猕猴桃细菌性抗性研究应以下几个方面：
1.深入开展抗性机制研究：了解猕猴桃抗细菌性病害的机制，有助于针对性地开展抗性品种的选育和改良。通过深入研究植物与病原菌之间的相互作用，
揭示抗性的分子机制，为抗性品种的选育提供理论依据。
2.加强抗性资源的筛选与利用：对抗性资源进行广泛筛选和鉴定，发掘具有优良抗性的猕猴桃品种和种质资源。同时，通过杂交、诱变等育种手段，培育具有多重抗性的新品种，提高抗性水平。
研究方法主要包括文献回顾、专家调查、实验设计和数据分析等。文献回顾主要是对前人研究的总结和评价；专家调查则主要是对当前研究现状和发展趋势的评估；实验设计主要是探索有效的生物防治方法；数据分析则主要是对实验结果的总结和分析。
最近的研究成果揭示了马铃薯细菌性病害的新病因和病理。例如，研究发现一些新的微生物种群可以有效地抑制马铃薯环腐病和青枯病病原菌的生长。此外，生物多样性的研究也取得了重要进展。研究发现，在健康的马铃薯田中，细菌种类丰富且分布
针对这些病害，研究者们提出了多种防治方法。其中，最常用的方法是使用化学农药。然而，长期使用化学农药不仅会对环境造成污染，还会导致病原菌产生抗药性。因此，生物防治方法逐渐受到人们的。生物防治方法主要包括利用有益微生物和生物
农药抑制病原菌的生长，同时提高马铃薯自身的抗病能力。相较于化学农药，生物防治方法具有环保、安全和可持续等优点。
食用菌病害。近年来，随着食用菌产业的快速发展，细菌性病害的发生也日益严重。细菌性病害对食用菌的产量和质量造成极大的影响，给种植户带来了巨大的经济损失。因此，对食用菌细菌性病害的研究具有重要意义。
二、病原菌及病害发生
食用菌细菌性病害的病原菌主要包括假单胞菌、黄单胞菌和欧文氏菌等。这些病原菌在食用菌生长环境中广泛存在，当环境条件适宜时，就会引起食用菌病害。例如，假单胞菌和黄单胞菌可导致食用菌的软腐病和锈斑病，欧文氏菌则可引起根腐病和叶斑病等。

猕猴桃溃疡病研究现状及展望

猕猴桃溃疡病研究现状及展望猕猴桃溃疡病是一种由细菌感染引起的猕猴桃植株疾病。

该病在猕猴桃产业中造成了严重的经济损失，因此对该病的研究变得非常重要。

本文将对猕猴桃溃疡病的研究现状进行综述，并对未来的研究方向进行展望。

目前，关于猕猴桃溃疡病的研究主要集中在以下几个方面：1. 猕猴桃溃疡病的病原菌鉴定及生物学特性研究：已经确定猕猴桃溃疡病的主要病原菌是一种名为Pseudomonas syringae pv. actinidiae（简称Psa）的细菌。

研究人员通过对病原菌的分离培养、形态学观察和生理生化特性分析，深入研究了Psa的生物学特性。

这些研究为进一步探究猕猴桃溃疡病的病因机制奠定了基础。

2. 猕猴桃抗性育种研究：由于猕猴桃溃疡病的侵害，研究人员致力于培育抗病品种。

通过研究猕猴桃的抗病性遗传规律，筛选出抗病性较强的猕猴桃品种。

也通过转基因技术导入抗病基因，使得猕猴桃植株对病原菌更具抵抗力。

3. 病害防控措施研究：为了有效控制猕猴桃溃疡病，研究人员探索了各种防治方法。

开展了猕猴桃植株的消毒处理研究，通过消毒种植材料等措施减少病原菌传播。

也利用化学药剂和生物制剂进行病害防治，减轻病害对猕猴桃产业的危害。

未来，猕猴桃溃疡病的研究仍然面临许多挑战，研究人员需要进一步深入探究以下几个方面：1. 病因机制研究：虽然已经确定了Psa是猕猴桃溃疡病的主要病原菌，但其具体引起病害的机制还不完全清楚。

需要通过研究细菌与猕猴桃之间的相互作用，解析猕猴桃溃疡病的发生和发展机制。

2. 抗病育种研究：目前，虽然已经培育出一些抗病性较强的猕猴桃品种，但是其抗性可能受到个体差异的影响，且对不同的病原菌类型表现不同。

需要进一步研究猕猴桃的抗病遗传规律，提高抗病品种的育种效果。

3. 环境条件对病害传播的影响研究：环境条件对病害的传播起着重要的影响，而猕猴桃溃疡病的发生与环境因素之间的关系还不清楚。

需要研究环境条件对猕猴桃溃疡病传播的影响，为制定相应的防控措施提供科学依据。

猕猴桃细菌性病害的发生及抗性研究进展

菌性叶枯病、根癌病，此４种病害在猕猴桃主要生产的致病菌是Ｐｅｄｍｏａｉｉｉａａ］ｓｕｏｎｓｖｒｆｖ［，但ＹｕｇＳｎｄｌｍｏｎｕ国均属于毁灭性病害。 ’ Ｌｅｅ等研究发现韩国致病菌为Ｐｅｄｍｎｓｙｉａｖｓｕｏｏａｒｇｅ．ｓｎｐ
作者简介：张弛（９６）１８一，男，汉族，安徽涡阳人，在读硕士研究生，主
要从事果树现代生物技术与遗传育种研究。Ｅｍａ－ｌｇｈｓｕ６．ｍ。 — ｉｚｌ￣ｃｉ＠１３ｏｗｃ通讯作者简介：郭启高（９５）１７一，男，汉族，重庆永川人，博士，副研究员，主要从事果树现代生物技术与遗传育种研究，Ｅｍａ：ｉｏｕ＠１６ｏ。－ｉｑａｇｏ２．ｉｌｇｃｎ
１４年，Ｆｏ在研究亚麻锈病时提出了 “ 因对性鉴定。值得一提的是，在所获得的多倍体植株中，９７ｌｒ基
国、新西兰、意大利、智利等国¨。猕猴桃果实具有１
１猕猴桃细菌性病害的发生
猕猴桃细菌性病害主要有溃疡病、花腐病、根癌
很高的营养价值和药用价值，富含氨基酸、矿物质及１病原及为害．１
多种维生素等，其中维生素ｃ含量丰富，被誉为 “ ｃＶ
针对猕猴桃抗病育种的研究较少。仅在猕猴桃细菌
４种病害的分布及病症见表１。
性病害的发生、预报以及抗性机理研究方面有一定１发生及侵染规律．２

猕猴桃溃疡病病原菌及检测方法研究进展

丁香假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｙｒｉｎｇａｅ）属于
假单胞菌科假单胞菌属，根据宿主的不同，可以将
其分为不同的致病型，Ｐｓａ以猕猴桃为宿主，是丁
香假单胞菌５７个致病型之一［】。多种分子标记分析数据表明：Ｐｓａ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｖｅｌｌａｎａｅ和Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｙｒｉｎｇａｅｐｖ．ｔｈｅａｅ的亲缘关系非
旨在加深对丁香假单胞茵猕猴桃致病变种的认识，同时为开展该病原茵的早期检测及防治研究奠定基础。关键词：猕猴桃细菌性溃疡病；丁香假单胞茵猕猴桃致病变种；防治；传播；检测
猕猴桃又名 “ 奇异果” ，风味独特，营养丰富，保健功能在各种水果中名列前茅，特别是维生素Ｃ含量极高，被誉为“ 水果之王” 。然而猕猴桃溃
疡病的流行，特别是２００８年之后在世界范围内的蔓延严重威胁着猕猴桃产业的发展。该病于上世纪８Ｏ年代初首先在日本爆发［】］，之后主要在亚洲
ａｖｅｌｌａｎａｅ，Ｐｓａ与Ｐ．Ｓ．ｐｖ．Ｔｈｅａｅ有更近的亲
或土壤中越冬，并可借助风雨、昆虫、农事操作等传播。Ｐｓａ有较长的潜伏期，一年有２个发病时

猕猴桃细菌性溃疡病生物防治初步研究

Ｙ【２Ｙ２Ｙ５Ｙ７Ｙ６、０、【ｓ ¨ ９ｎ６Ｙ、Ｙｗ１Ｙ、，６Ｙ？、Ｙ
Ｙ
以上放线菌的分离与纯化均由西北农林科技
大学农学院微生物教研室完成。病原菌由采自长安
生规律做了调查和研究。张学武等该病的防治埘做了一定的研究，取得了一些结果。但在该病的生物防治方面未见报道。由于该病具有发展迅速，防治难度大的特点，单一的防治技术往往很难奏效，因此，本文就该病的生物防治做了探索，以便对该病进行无公害的有效防治。
２ＳｈｎＴ￣ｔｆｎ．ａａａ＂ｇａｏＦｏｅｔＰ，ａｎｇｅｎ，Ｘｉｒｓ￣ａｍｅｔ［ ’ Ｓｈａｘｌ７０８ｕｎ１０２，ｆｎ￣ｉａ
Ａｂｔａｔｅｅｎａｏｉｔｃｓｒｉｓｗｅｅｓｌｃｅａｅｎｔｅｒｓｌｏｈｘｅｉｅｔｏｎｉｉｉｇｓｒｃ：Ｓｖｎａｔｇｎｓｉｔａｎｒｅｅｔｄｂｓｄ０ｈｅｕｔｆｔｅｅｐｒｍｎｎｉｈｂｔｎＰｓｕｏｎｓｓｒｎａｖＡｃｉｉａｗｉｈ５ｅｏｙｅｅｓｒｉｓｎｌｓｉｅｙｔｅｒｃｌｕｅａｄｍｏｅｄｍｏａｙｉｇｅｐ．ｔｄｔ６ａｄｎｍｃｔｔａｎ，ａｄｃａｓｆｄｂｈｉｕｔｒｎｒｎｉｐｏｏｙｃａａｔｒ、Ｔｈｒｅ。ｈｂｔｇＰｓｒｎａｖＡｃｉｉａｉ：ｈｔｇｈｒｃｅｓｅｏｄｒｆｉｉｉｎａｉｙｉｇｅｐ．ｔｎｄｓＸ＞Ｄ＂一Ｄ＞Ｘ＞Ｙ｜＞【＞Ｉ１）Ｉ１

猕猴桃溃疡病病原菌的分子鉴定和致病力测定

第３卷第５期１２１０２年ｌＯ月
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中
农
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大
学
学
报
Ｖｏ．１Ｎｏ５１３．Ｏｃ．２１６４６８ｔＯ２。Ｏ～０
ＪｕｎｌｆＨｕｚｏｇＡｇｉｕｔｒｌＵｎｖｒｉｙｏｒａａｈｎｒｃｌｕａｉｅｓｔｏ
猕猴桃溃疡病病原茵的分子鉴定和致病力测定
赵利娜胡家勇叶振风刘普朱立武
安徽农业大学果树学重点实验室，合肥２０３３０６摘要为明确猕猴桃细菌性溃疡病致病菌种类与特征，以从安徽岳西、陕西户县和重庆黔江等猕猴桃主产
接种，分别测定各菌株对猕猴桃不同品种的致病力，
旨在为猕猴桃细菌ｌ生溃疡病的病原菌鉴定和病害防
控提供科学依据。
香假单孢杆菌猕猴桃致病变种（ｅｄｍｏａｙＰｓｕｏｎｓｓ—
１材料与方法
ｒｎａｖｃｉｉａ）起，要为害猕猴桃的主１１供试材料ｉｇｅｐ．ａｔｄｅ引ｎ主．干、干和叶片。在猕猴桃枝干上表现为病部溢出枝２１年ｌ００Ｏ月至２１０１年５月，别于安徽岳分大量初为乳白色，然后变成红褐色的粘液，后上部西、随陕西户县和重庆黔江等猕猴桃主产区，发病初在枝条萎蔫死亡。在植株叶片上则表现为能产生边缘期采集金丰、阳（红中华猕猴桃Ａｃｉｉｉｈｎｎｉｔｄａｃｉｅｓｎｓ有黄色晕圈的近圆形褐色病斑＿。８］Ｐａｃ）ｌｎｈ和秦美、海沃德（味猕猴桃Ａｃｉｉｉｅ美ｔｄａｄ — ｎ目前，关猕猴桃细菌性溃疡病病菌鉴定的研ｌｉｓｌｎｈ等猕猴桃品种的溃疡病感染枝条和有ｉｏａＰａｃ）ｃ究很多，大多集中于病原菌的形态学和生理生化树皮。但

一种猕猴桃细菌性溃疡病菌的检测方法[发明专利]

专利名称：一种猕猴桃细菌性溃疡病菌的检测方法专利类型：发明专利
发明人：高益槐,郑春源,戴金玉,唐文波
申请号：CN201611158447.7
申请日：20161215
公开号：CN106399578A
公开日：
20170215
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种猕猴桃细菌性溃疡病菌的检测方法，包括：将细菌ITS通用引物对所有猕猴桃溃疡病菌菌株扩增测序；对其进行ITS序列进行多重同源性比较分析，设计猕猴桃溃疡病菌特异引物和探针；对猕猴桃溃疡病菌特异引物和探针进行可用性检测、特异性检测、以菌液为模板的灵敏度检测、以DNA为模板的灵敏度检测、以接种猕猴桃枝条为对象的荧光PCR检测和以田间发病样品为对象的荧光PCR检测；直至获得实时荧光PCR引物和实时荧光PCR探针。

本实发明可以有效地防止检测过程中的污染和假阳性结果，得到实时荧光PCR引物和探针，建立猕猴桃溃疡病菌实时定量荧光PCR检测体系，实现猕猴桃溃疡病菌的快速、特异、灵敏、定量检测。

申请人：安发(福建)生物科技有限公司
地址：352100 福建省宁德市东侨经济开发区国宝路36号
国籍：CN
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219527813_猕猴桃溃疡病病原鉴定及防治药剂室内毒力测定

ＰＣＲ) 引物下可以反复产生特异、稳定和清晰的条
带ꎮ 在有ＰｓａＦ１ / ＰｓａＲ２引物下条带在２８０ｂｐ左右ꎬ 在
有ＫＮ－Ｆ / Ｒ－ＡｖｒＤｄｐｘ－Ｆ / Ｒ ( ｄｕｐｌｅｘＰＣＲ) 下ꎬ 条带在
７４０ｂｐ左右ꎮ 将菌株ＷＤ００１序列经Ｂｌａｓｔ处理后并与
ＮＣＢＩ中ＧｅｎＢａｎｋ数据库的已知序列进行同源性比对ꎬ
菌株ＷＤ００１的序列与ＧｅｎＢａｎｋ中丁香假单胞杆菌猕
猴桃致病变种多个菌株对应序列 ( 序列登录号
ＡＹ３４２１６５１、ＪＮ１７２９２０、ＣＰ０２４７１２、ＪＱ３１４４１４等 )
的同源性均为１００％ꎮ 经对病原菌ＰＣＲ特异性检测及
次ꎬ 并记录ꎬ 制作标准曲线ꎬ 计算原液中活菌数
ꎮ 待菌落长出后ꎬ 用接种环
( ｃｆｕ) ꎬ 根据两者数据ꎬ 制１０００ｃｆｕｍＬ左右菌悬液
单孢纯化培养、纯化后于４℃ 冰箱中保存备用ꎮ 标记
液分别涂布于 (１ｍＬ配好药液加５０ｍＬ４５℃ 左右ＬＢ肉
上划线ꎬ ２７℃ 培养４８ｈ

界处５ｍｍ × ５ｍｍ发病枝条ꎬ 对其进行灭菌处理: 将枝
１５杀菌剂对病原菌的抑制作用测定
０１％的酸性升汞溶液的烧杯中浸泡２ｍｉｎꎬ 用灭菌处
定ꎮ 用接种环刮适量已活化的病原菌至于２ｍＬ的无菌
菌液为空白对照ꎬ 每个处理重复３次ꎬ ２８℃ 保湿培
字交叉法测量病原菌的菌落直径ꎬ 取均值ꎬ 计算抑制
浮液ꎬ 对猕猴桃嫩茎蔓进行刺伤接种ꎬ 以刺伤不注射
养ꎬ 观察并记录发病情况ꎮ 根据柯赫氏法则ꎬ 对发病

猕猴桃细菌性溃疡病菌的分离鉴定与致病性分析

猕猴桃细菌性溃疡病菌的分离鉴定与致病性分析吴仲秋;牛向丽;汪雯静;李璇;刘骏菲;邬杰涛【期刊名称】《合肥工业大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2024(47)2【摘要】溃疡病是猕猴桃主要细菌性病害,其病原为丁香假单胞菌猕猴桃致病变种(Pseudomonas syringae pv.actinidiae,Psa)。

文章利用不同猕猴桃种植园的溃疡病发病植株进行Psa菌株分离、鉴定及致病性分析;结果显示,获得了6个具有丁香假单胞菌形态特征的菌株,经聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)鉴定与序列同源比对,所分离菌株为Psa,该菌株在‘红阳’猕猴桃的接种检测中显示不同致病性,其中ScYbH2、ScDjyH2、ScYbH1接种植株出现溃疡病症状,而ScMbJ1、ScDjyH3、ScYaH2未表现显著致病性。

烟草叶片超敏反应也显示它们具有不同的植物免疫系统激活能力。

该研究获得了猕猴桃溃疡病分离菌株,其表型差异为后续的致病基因遗传分析奠定了基础。

【总页数】6页(P257-262)【作者】吴仲秋;牛向丽;汪雯静;李璇;刘骏菲;邬杰涛【作者单位】合肥工业大学食品与生物工程学院【正文语种】中文【中图分类】Q945.8【相关文献】1.猕猴桃细菌性溃疡病菌风险分析2.7个木薯细菌性萎蔫病菌致病性相关突变体的鉴定及插入位点基因的分子分析3.意大利探讨检测和鉴定猕猴桃细菌性溃疡病病菌新方法4.山东省玉米青枯病主要致病菌的分离鉴定及优势致病菌的致病性测定5.陕西省猕猴桃细菌性溃疡病菌(Pseudomonas syringae pv.actinidiae)Rep-PCR 的遗传多样性分析因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

猕猴桃细菌性溃疡病菌检疫技术操作办法

猕猴桃细菌性溃疡病菌检疫技术操作办法字体：大中小 2009—9—1 来源：省林检局阅读：160 次［关闭］1主题内容及应检范围1。

1本办法规定了猕猴桃细菌性溃疡病菌P s e u d o m o n a s s y r i n g a e p v。

a c t i n i d i a e T a k i k a w a e t a l。

的检疫检验及检疫处理操作办法。

1。

2本办法适用于林业植物检疫机构对猕猴桃属A c t i n i d i a s p p。

植物活体、残体的检疫检验和检疫处理。

2产地检疫2.1种苗繁育基地的建立2。

1。

1培育的猕猴桃,应从无病区采集接穗，或用无病虫的当年生半木质枝条作插条。

2。

1。

2加强晚秋水、肥管理，避免在强风和冬季低温的高海拔区，即易发生霜冻的地方建园.2。

2踏查2.2.1在种苗繁育基地、猕猴桃栽植地的果园、林场,以自然界线、道路等为单位进行线路(目测）踏查。

2.2。

2调查寄主的主干及分枝上部是否有淡黄色或黄褐色病斑;病斑处是否有小孔，从中向外流出白色或铁锈色液体，病部下方形成深褐色污斑。

2。

3调查枝条上是否有暗绿色或暗褐色水渍状纵向、线形龟裂；新梢是否呈暗褐色萎蔫枯死，病部浸出白色水渍状液体。

2.2。

4调查叶片上是否有红色小点，或大小为2–3m m的褐色多角形病斑，周围有明显黄色水渍状晕圈,叶片向里或向外翻卷。

2。

5确认有疫情需进一步掌握危害情况的，需设标准地（或样方）做详细调查。

2.3标准地(或样方）调查2。

3。

1种苗繁育基地样方设置与调查2。

3.1.1样方的累积面积应不少于调查总面积的5%。

2.3.1.2每块样方面积为0.1h m2,采取棋盘式取样法，抽取样树5–10株，进行病害分级调查。

2.3。

2。

果园标准地设置与调查2。

3.2.1按果园面积设置,10h m2以下(含10h m2）设1块,每增加5h m2增设1块。

2.3。

2.2每块标准地面积为0.1h m2，采取棋盘式取样法,抽取样树10株，进行病害分级调查。

猕猴桃溃疡病研究现状及展望

猕猴桃溃疡病研究现状及展望近年来，猕猴桃溃疡病越来越受到人们的关注，因其对猕猴桃产量和质量的影响，已经成为猕猴桃种植业的主要病害之一。

目前，针对猕猴桃溃疡病的研究已取得了一定的成果，但仍存在许多问题需要进一步研究和解决。

病原体方面，已经初步确认了猕猴桃溃疡病的病原物是一种革兰氏阴性菌——Pseudomonas syringae pv. actinidiae (Psa)。

研究表明，Psa具有很强的侵染性和适应性，能够在多种培养基上繁殖，同时也具有多样性和可塑性。

目前，已经有许多研究者对该菌株的防治方法进行了研究，包括利用外源代谢物等化合物、生物制剂、化学药剂等对该菌进行防治。

在防治方法方面，目前研究中普遍认为综合应用多种防治方法才能达到良好的防治效果。

其中，非化学防治方法被广泛应用，如生物治疗、非生物治疗、控制温度和湿度等。

此外，化学药剂也被用于农村地区的防治，但需注意药物对环境和人体的影响，同时需要加强应用药剂的管理和监控。

在猕猴桃品种选择方面，研究人员发现一些品种对Psa的抵抗力较强，如金丝、阳光黑等，而一些品种对Psa的感染较为敏感，如猕猴桃黄、京丰等。

因此，在猕猴桃的品种选择上，应注意选用抗病强、品质好、产量高、适应性强的品种，以提高猕猴桃的产量和质量。

在研究模型方面，通过研究Psa的基因组学、转录组学、蛋白质组学等，有助于对Psa的生物学特性、致病机理、适应性等方面进行深入研究。

此外，模拟Psa的环境因素、生长状态和宿主作物等对其生长和繁殖的影响，也有助于对Psa的生态学和致病机理进行研究。

这些研究模型的建立和应用，有助于深入了解Psa的致病机理和寻找更为有效的防治措施。

总之，猕猴桃溃疡病的防治是一个复杂的系统工程，需要各方面的力量共同合作，综合运用各种防治手段，建立完善的防治体系，不断提高防治技术的水平。

通过良好的科学研究，将有力地推动猕猴桃产业的可持续发展。

猕猴桃AcWRKY70基因序列克隆及其对溃疡病病原菌和激素处理表达模式分析

猕猴桃AcWRKY70基因序列克隆及其对溃疡病病原菌和激素处理表达模式分析曲东;燕飞;刘欣瑞;康雪;曾海涛;张羽【期刊名称】《华北农学报》【年(卷),期】2022(37)5【摘要】为探究猕猴桃AcWRKY70转录因子在不同抗病性品种中响应猕猴桃溃疡病胁迫的作用机制,以抗性病品种徐香和高感病品种红阳猕猴桃叶片cDNA为模板克隆AcWRKY70基因,并对红阳AcWRKY70基因序列特征进行分析,对编码蛋白进行系统进化分析及亚细胞定位预测。

通过RT-qPCR分析AcWRKY70基因的组织特异性,不同抗性猕猴桃品种对丁香假单胞杆菌猕猴桃致病变种(Psa)和水杨酸(SA)、茉莉酸甲酯(MeJA)处理下表达模式的差异。

结果显示,红阳AcWRKY70基因序列总长906 bp(GenBank登录号:MW881147),开放阅读框885 bp,编码294个氨基酸;含有典型的WRKYGQK保守结构域,锌指结构为C2-HC,属于WRKY家族第Ⅲ类组,亚细胞定位预测表明,其定位于细胞核,系统进化树分析表明,其与茶树亲缘关系最近。

红阳和徐香AcWRKY70基因均在叶片中表达量最高。

在Psa处理下,12 h徐香品种AcWRKY70基因相对表达量迅速上升至对照的80.58倍;而在红阳中48 h该基因相对表达水平上升至最高。

在SA与Psa(SA+Psa)和MeJA与Psa(MeJA+Psa)共同处理下,12 h徐香AcWRKY70基因相对表达量达到最高;而红阳AcWRKY70基因分别在72,24 h表达量达到最大。

AcWRKY70基因在猕猴桃抗病胁迫方面具有一定作用,不同抗性的猕猴桃品种中响应病原菌的抗性机制可能存在较大差异。

【总页数】8页(P166-173)【作者】曲东;燕飞;刘欣瑞;康雪;曾海涛;张羽【作者单位】陕西理工大学生物科学与工程学院;陕西省资源生物重点实验室;陕南秦巴山区生物资源综合开发协同创新中心;秦巴生物资源与生态环境省部共建国家重点实验室【正文语种】中文【中图分类】Q78;S663.4【相关文献】1.中华鲟促性腺激素释放激素受体基因cDNA序列的克隆及表达分析2.黄瓜生长素受体同源基因的克隆、序列特征及表达模式分析3.猕猴桃溃疡病菌抗铜基因CopB克隆及序列分析4.猪ADAR2基因全长cDNA克隆、序列特征及表达模式分析5.毛花猕猴桃LEAFY基因克隆及表达模式分析因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

猕猴桃细菌溃疡病（Actinidia bacterial canker...

猕猴桃细菌溃疡病（Actinidia bacterial canker...
王忠肃;唐显富
【期刊名称】《西南农业大学学报》
【年(卷),期】1992(014)006
【摘要】对四川省苍溪县猕猴桃的细菌病害进行系统鉴定表明,该病属细菌溃疡病,其病原细菌为 Pseudomonas syringae Pv.actinidea。

病原细菌的鉴定属国内首次报导.
【总页数】4页(P500-503)
【作者】王忠肃;唐显富
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】S436.634.1
【相关文献】
1.猕猴桃细菌性溃疡病绿色防控的研究进展 [J], 刘湘林; 方毅; 毕勇; 李小春; 胡艳波
2.猕猴桃细菌性溃疡病防控关键技术示范及效果评价 [J], 秦虎强; 黄丽丽; 刘巍; 赵英杰; 朱穗层; 郭成; 李建民; 刘宁娟; 车晓娟; 金平涛
3.猕猴桃细菌性溃疡病防治药剂筛选与施药方法研究 [J], 赵菊琴
4.猕猴桃细菌性溃疡病综合防治技术研究 [J], 方毅;杨正容;毕勇;李小春;胡艳波;刘湘林
5.猕猴桃细菌性溃疡病可视化LAMP检测方法的建立与应用 [J], 王一波;祝山;郭文通;秦虎强;刘巍;徐亮胜;黄丽丽
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