TET1蛋白对乳腺癌细胞株MDA-MB-453增殖的影响

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TET1蛋白去甲基化作用及其对肿瘤影响的研究进展

TET1蛋白去甲基化作用及其对肿瘤影响的研究进展刘玉莹;张芳林【期刊名称】《南昌大学学报（医学版）》【年(卷),期】2018(058)004【摘要】TET (ten eleven translocation)家族蛋白是DNA甲基化过程中的重要调节因子,包括TET1、TET2和TET3,属于a-酮戊二酸(α-KG)和Fe2+依赖的双加氧酶.TET蛋白能将5-甲基胞嘧啶(5mC)氧化生成5-羟甲基胞嘧啶(5hmC),是TET 蛋白发挥去甲基化作用的基础.TET蛋白对胚胎发育、生殖细胞形成及骨髓造血等具有重要作用.TET1蛋白在癌细胞和癌组织中的含量明显低于癌旁组织,提示TET1蛋白的DNA去甲基化作用对肿瘤的发生、发展具有一定影响.文章综述TET1蛋白发挥去甲基化作用的机制及其在肝癌、胃癌和结肠癌等中的最新研究进展,为肿瘤的预后和治疗作参考.【总页数】5页(P95-98,102)【作者】刘玉莹;张芳林【作者单位】南昌大学药学院药理教研室,南昌330006;南昌大学药学院药理教研室,南昌330006【正文语种】中文【中图分类】R73;R363【相关文献】1.组蛋白H3K27去甲基化酶UTX在肿瘤研究中的作用 [J], 杨贇;黄艳2.组蛋白去甲基化酶家族中组蛋白去甲基化酶4作用机制及其应用的研究进展 [J], 叶覃;Andreana HOLOWATYJ;Roselyne BBE;刘辉;Zengquan YANG3.组蛋白赖氨酸去甲基化酶在肿瘤中的作用 [J], 李浒;张中国;周震;张红胜4.TET1蛋白去甲基化作用及其对肿瘤影响的研究进展 [J], 刘玉莹; 张芳林5.组蛋白去乙酰化酶及去甲基化酶抑制剂在胃肠道肿瘤的研究进展 [J], 陈俊豪;丁杰;李显;岑祥莹;张林;吴明;樊斐;曾家兴因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

雷帕霉素调控TRAP1_抑制三阴型乳腺癌细胞增殖

研究论著雷帕霉素调控TRAP1抑制三阴型乳腺癌细胞增殖黄思源石雅倩李鑫卢敏郭文礼刘勇成欧叶涛【摘要】目的分析雷帕霉素通过调控肿瘤坏死因子相关蛋白1（TRAP1）影响三阴型乳腺癌细胞MDA -MB -231增殖的药理过程，探讨雷帕霉素抗乳腺癌的作用机制。

方法将MDA -MB -231随机分为对照组和不同剂量的雷帕霉素组，随后分别在24 h 和48 h 采用四氮唑蓝比色实验检测雷帕霉素对细胞增殖的影响。

同时以半抑制浓度（IC50）为研究条件，采用流式细胞术检测雷帕霉素对MDA -MB -231细胞周期的影响；采用蛋白免疫印迹法检测雷帕霉素靶蛋白（mTOR ）、p -mTOR 、TRAP1的蛋白表达；采用定量PCR 检测mTOR 、TRAP1的mRNA ；采用ATP 试剂盒检测ATP 含量；采用乳酸试剂盒检测乳酸的含量。

结果雷帕霉素能抑制MDA -MB -231的增殖，在24 h 时，细胞增殖率开始下降，48 h 时，细胞增殖率下降更明显，并在10 μmol/L 、48 h 的条件下达到IC50，且呈剂量及时间依赖性（P < 0.01）。

雷帕霉素可以造成细胞周期G1期阻滞（P < 0.01）。

与对照组相比，加药48 h 雷帕霉素组TRAP1的mRNA 表达下降（P < 0.05），p -mTOR 和TRAP1蛋白表达也下降（P < 0.001），而mTOR 的mRNA 和总mTOR 蛋白变化比较差异均无统计学意义（P 均> 0.05），ATP 含量上升（P < 0.001），乳酸含量下降（P < 0.001）。

结论雷帕霉素可调控三阴型乳腺癌细胞MDA -MB -231的代谢进程而抑制细胞增殖，该过程与TRAP1的下降有关。

【关键词】雷帕霉素；三阴型乳腺癌；肿瘤坏死因子相关蛋白1Rapamycin affects the proliferation of triple -negative breast cancer cells by regulating TRAP1 Huang Siyuan △， Shi Yaqian ， Li Xin ， Lu Min ， Guo Wenli ， Liu Yongcheng ， Ou Yetao. △Guilin Medical University ， Guilin 541004， China Corresponding author ， Ou Yetao ， E -mail:*******************【Abstract 】Objective To investigate the pharmacological process of the eﬀect of rapamycin upon the proliferation of triple -negative breast cancer MDA -MB -231 cells by regulating tumor necrosis factor receptor -associated protein 1 （TRAP1）， and to unravel the anti -breast cancer mechanism of rapamycin. Methods MDA -MB -231 cells were randomly divided into the control group and diﬀerent -dose rapamycin groups ， and then the eﬀect of rapamycin on cell proliferation was detected by MTT assay at 24 h and 48 h ，respectively. Meantime ， the half -maximal inhibitory concentration （IC50） of rapamycin was considered as the research condition. The eﬀect of rapamycin on MDA -MB -231 cell cycle was detected by ﬂow cytometry. The expression levels of mammalian target of rapamycin （mTOR ）， p -mTOR and TRAP1 proteins were detected by Western blot. The expression levels of mTOR and TRAP1 mRNA were measured by qPCR. ATP content was detected by ATP kit. The amount of lactic acid was determined by lactate assay kit. Results Rapamycin inhibited the proliferation of MDA -MB -231 cells in a dose - and time -dependent manner （P < 0.01）. The proliferationof MDA -MB -231 cells was decreased at 24 h and significantly decreased at 48 h after rapamycin treatment. IC50 was obtained at 10 μmol/L after 48 h. Rapamycin induced cell cycle arrest at G1 phase （P < 0.01）. Compared with the control group ， the expression level of TRAP1 mRNA was signiﬁcantly down -regulated （P < 0.05）， and the expression levels of p -mTOR and TRAP1 proteins were significantly down -regulated （both P < 0.001）， whereas the expression levels of mTOR mRNA and total mTOR protein were notsigniﬁcantly changed （both P > 0.05）， the content of ATP was signiﬁcantly increased （P < 0.001）， and the content of lactic acidwas signiﬁcantly decreased （P < 0.001） in the 48-h rapamycin group. Conclusion Rapamycin can inhibit the proliferation of MDA -MB -231 cells by regulating the metabolic process ， which is related to the decrease of TRAP1.【Key words 】 Rapamycin ； Triple negative -breast cancer ； Tumor necrosis factor receptor -associated protein 1基金项目：国家自然科学基金（81960481）乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，在我国乳腺癌的发病率增长迅速，在女性原发肿瘤中所占比例高达15%，且呈明显年轻化趋势［1］。

HER-2基因特异性核酶在MDA-MB-453细胞内的瞬时效应

HER-2基因特异性核酶在MDA-MB-453细胞内的瞬时效应姜锐;罗速;樊丽【摘要】目的确定人表皮生长因子受体-2(HER-2)特异性锤头状核酶(hammerhead ribozyme,RZ)对雌激素受体阴性乳腺癌细胞MDA-MB-453的影响.方法应用RT-PCR、免疫细胞化学检测RZ对MDA-MB-453细胞HER-2表达的影响;MTT法检测RZ对细胞增殖的影响.结果 RZ转染入MDA-MB-453细胞中,RT-PCR检测出转染RZ的MDA-MB-453细胞中HER-2 mRNA表达量明显下降;免疫细胞化学方法检测细胞内的HER-2蛋白表达下降;MTT法检测细胞增殖活性明显受抑.结论 RZ在MDA-MB-453细胞内有效抑制靶基因HER-2mRNA和蛋白的表达,同时可抑制细胞增殖,有助于进一步研究雌激素受体阴性乳腺癌细胞HER-2信号转导通路.【期刊名称】《北华大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2008(009)006【总页数】3页(P510-512)【关键词】人表皮生长因子受体2(HER-2);锤头状核酶;雌激素受体阴性乳腺癌;基因治疗【作者】姜锐;罗速;樊丽【作者单位】北华大学,生命科学研究中心,吉林,吉林,132013;北华大学,生命科学研究中心,吉林,吉林,132013;北华大学,生命科学研究中心,吉林,吉林,132013;齐齐哈尔医学院,药物研究所,黑龙江,齐齐哈尔,161042【正文语种】中文【中图分类】R737.9乳腺癌是妇女中最常见的恶性肿瘤之一，在女性癌症中的发病率占30%，近20年来，我国乳腺癌发病率和死亡率均呈上升趋势[1].在雌激素受体阴性乳腺癌中，人表皮生长因子受体-2(HER-2)[2-4]常常呈现高表达状态，表明HER-2及其相关因子信号转导通路可能在雌激素受体阴性乳腺癌细胞生长、增殖及乳腺癌从激素依赖型转变为非激素依赖型起重要作用.进行雌激素受体阴性乳腺癌HER-2及其相关因子的研究，有助于确定HER-2在雌激素受体阴性乳腺癌细胞生长、增殖及乳腺癌从激素依赖型转变为非激素依赖型中的作用，寻找可能的治疗靶点，使提高雌激素受体阴性乳腺癌治疗有效率和生存率成为可能.本实验将已经构建好的HER-2基因特异性RZ真核表达载体转染入雌激素受体阴性乳腺癌细胞MDA-MB-453中，应用RT-PCR、免疫细胞化学检测RZ对MDA-MB-453细胞HER-2表达的影响，为HER-2作为肿瘤基因治疗的靶点提供实验依据.1 材料与方法1.1 材料限制性内切酶、DNA连接试剂盒、质粒小提试剂盒、DNA凝胶回收试剂盒、RT-PCR试剂盒，均购自Takara公司；MDA-MB-453细胞购自中国科学院上海生命科学研究院细胞库；RPMI-1640培养基、脂质体2000、DEPC、Trizol总RNA 提取剂、MTT为invitrogen公司产品；细胞免疫化学试剂盒为武汉博士德生物工程有限公司产品.1.2 方法1.2.1 MDA-MB-453细胞培养MDA-MB-453细胞悬浮生长于10%小牛血清的RPMI-1640培养基中(100U/mL青霉素，100 U/mL链霉素)，37 ℃，在体积分数为5%的CO2中培养. 1.2.2 pcDNA3.1(+)-RZ瞬时转染MDA-MB-453细胞实验分组：正常对照细胞组，阴性细胞组(转染空质粒)，阳性细胞组(转染核酶重组子).转染后孵育24 h后，去除转染试剂，继续培养.1.2.3 RT-PCR法检测阳性转染细胞组HER-2基因的扩增应用Trizol试剂提取转染48 h后细胞总RNA，Trizol试剂提取细胞总RNA.应用Primer Premier 5软件设计引物：上游引物：5’-GAATTCCGGCAC AGTCTACAAGGGCATC-3’，下游引物：5’-GGGG TACCCCAGGCGTCCGCGGTTT-3’.RT-PCR扩增靶基因HER-2 cDNA片段，以β-action作为内参，序列为：上游引物：5’CTGGGAACGACATGGAG AAAA 3’，下游引物：5’AAGGAAGGCTGGAAGAG TGC 3’.1.2.4 MTT法检测瞬时核酶转染MDA-MB-453细胞对核酶的敏感性设正常对照细胞组，阴性细胞组(转染空质粒)，阳性细胞组(转染核酶重组子)，另设一空白组仅加含体积分数为10%新生牛血清的RPMI1640培养液，不加细胞，共4组，每组6个复孔.放置37 ℃ CO2孵育箱孵育.取出各处理组分别培养8 d 的细胞，每孔加入MTT溶液(5 g/L)10 μL，混匀37 ℃继续孵育4 h.离心弃去旧的培养液，每孔加入150 μL DMSO，轻微震荡10 min.在酶标仪上选择570 nm 波长测量样品吸光度值，以空白组为空白对照.以时间为横轴，吸光度值为纵轴作生长曲线，观察3组细胞生长情况.1.2.5 免疫细胞化学设立空白对照组(用PBS代替一抗)、正常细胞组、空质粒转染细胞阴性组和核酶转染细胞的阳性组，作HER-2抗体组染色.2 结果2.1 核酶转染MDA-MB-453细胞HER-2基因表达的检测利用RT-PCR方法检测核酶转染细胞中HER-2基因的表达.HER-2进行逆转录和30个PCR循环，其产物为269bp，内参对照β-action在同样条件下，其产物为545bp.RT-PCR产物电泳结果如图1所示.阳性细胞组HER-2mRNA的表达量低于正常对照细胞组和阴性细胞组，正常对照细胞组和阴性细胞组无显著差异，3组间内参对照β-action的表达基本相同.图1 核酶转染RT-PCR结果Fig.1 Result of transfection of ribozyme by RT-PCR2.2 瞬时转染MDA-MB-453细胞对核酶的敏感性检测MTT法检测转染MDA-MB-453细胞对核酶的敏感性，结果如图2所示，核酶转染的阳性细胞组的增殖能力低于正常组和阴性组的增殖能力.图2 MTT测定细胞生长情况比较Fig.2 Comparison of cell growth detected by MTT2.3 核酶转染MDA-MB-453细胞HER-2蛋白表达的检测免疫细胞化学空白对照组以PBS代替一抗，可见细胞内无明显颜色变化.HER-2蛋白染色：正常细胞组细胞胞浆有明显棕红色物质，表明细胞内富含HER-2蛋白；而阴性细胞组与正常细胞组内细胞棕红色物质基本相同，表明HER-2蛋白表达基本无明显变化；阳性细胞组细胞棕红色染色变浅，表明HER-2蛋白表达下降，如图3所示.图3 HER-2蛋白表达结果Fig.3 Results of HER-2 protein expression3 讨论核酶是一类具有催化活性的RNA分子，其具有很多独特的特点.核酶的作用底物为RNA，不仅能与特异性的靶基因结合，而且能切割靶基因，因此具有很强的抑制效率，能够调控靶基因的表达水平，可被应用于特定的细胞类型或细胞的不同发育阶段.其分子小，易操作，并可重复使用.其中由于锤头状核酶分子较小，结构简单，其催化活性中心只含13个保守序列，加上两端与靶基因结合的结合臂，即组成了与靶基因GUC序列结合的具有催化活性的核酶，故广泛应用于基因治疗领域[5-8]. 本实验设计构建了HER-2特异性锤头状核酶载体中的特异性核酶，可与HER-2mRNA的酪氨酸激酶功能区相结合，将其转染入MDA-MB-453细胞中观察该核酶对于HER-2mRNA和HER-2蛋白的作用及其对细胞增殖的影响.研究结果表明，转染HER-2特异性核酶的细胞中HER-2mRNA和HER-2蛋白的表达量较空白对照组和空载体转染组明显降低，增殖能力较其余两组弱.由此可见，本实验设计的锤头状核酶具有较强切割HER-2的能力，不仅使HER-2表达降低，且降低HER-2蛋白功能活性，进而抑制靶细胞增殖作用.实验表明，具有较强的抑制作用的核酶可作为有效的基因治疗手段，通过抑制雌激素受体阴性乳腺癌中HER-2的表达，有效抑制雌激素受体阴性乳腺癌细胞的增殖，为HER-2作为雌激素受体阴性乳腺癌基因治疗的靶点提供实验依据.【相关文献】[1] 李少林，陈晓品，吴凯南.乳腺癌的生物学特性和临床对策[M].北京：科学出版社，2004：65-67.[2] 田秀娟.乳腺癌C-erbB-3、C-erbB-4和C-erbB-2癌基因蛋白的表达及临床意义[J].肿瘤研究与临床，2005，17(1)：16-17.[3] 杨金巧，陈琳，幸天勇，等.乳腺癌中C-erbB2癌基因与雌、孕激素受体和PS2的关系及其预后意义[J].四川大学学报：医学版，2004，35(3)：334-336.[4] Suzuki T，Anderegg B.Adenovirus-mediated Ribozyme Targeting of HER-2/neu Inhibits in Vivo Growth of Breast Cancer Cells[J].Gene Ther，2000，7(3)：241-248.[5] 石建林，章为，周雪.核酶技术简介[J].四川解剖学杂志，2002，10(1)：25-29.[6] 程晋，张学庸，胡家露，等.核酶技术研究进展[J].国外医学肿瘤学分册，1997，24(1)：32-34.[7] Tuschl T，Eckstein F.Hammerhead Ribozymes：Importance of Stemloop Ⅱ for Activity[J].Proc Natl Acad Sci USA，1993，90：6991.[8] McCall MJ.Minimal Sequence Requirements for Ribozyme Activity[J].Proc Natl Acad Sci USA，1992，89：5710-5714.。

Tet调控的乳腺癌耐受蛋白表达细胞系的建立及功能研究

Tet调控的乳腺癌耐受蛋白表达细胞系的建立及功能研究袁建辉;贺智敏;余艳辉;陈主初【期刊名称】《癌症（英文版）》【年(卷),期】2004(023)010【摘要】背景与目的:乳腺癌耐受蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)是1998年发现的新的ATP结合盒式(ATP binding cassette,ABC)跨膜转运蛋白超家族成员.本研究拟建立Tet调控的具有功能的BCRP表达细胞系,为研究BCRP 介导的药物耐受机制和探寻耐受逆转方法提供理想的实验平台.方法:利用Tet-on 基因表达调控系统,先后将调控质粒pTet-on和反应质粒pTRE-BCRP转染人PA317细胞,并用G418和潮霉素分别进行二轮筛选,挑取6个单细胞克隆并扩增培养;不同浓度的强力霉素(doxycycline,Dox)诱导后,用RT-PCR和Western blot检测并选取BCRP表达量与Dox剂量具有较好量-效关系的PA317/Tet-on/TREBCRP细胞克隆;采用MTT方法检测米托蒽醌(mitoxantrone)对不同浓度Dox诱导下的PA317/Tet-on/TRE-BCRP克隆细胞的杀伤作用;采用BCRP特异性抑制剂Ko143的干扰试验来检测PA317/Tet-on/TRE-BCRP细胞对米托蒽醌的药物敏感性;米托蒽醌处理不同BCRP表达量的细胞后,利用流式细胞仪检测细胞内存留米托蒽醌所释放出来的荧光强度.结果:发现5号PA317/Tet-on/TRE-BCRP克隆细胞BCRP表达量与Dox诱导剂量具有较好的量-效关系;其药物耐受性与BCRP 表达量呈正相关(r=0.995,P=0.002);Ko143能显著增强PA317/Tet-on/TRE-BCRP细胞对米托蒽醌的药物敏感性(P＜0.05);流式细胞术进一步证实在A317/Tet-on/TRE-BCRP细胞内不同浓度Dox诱导的BCRP不同表达能引起细胞内米托蒽醌存留量的变化.结论:成功地建立了Tet调控的具有功能的乳腺癌耐受蛋白(BCRP)表达细胞系,为进一步研究BCRP提供了理想的实验平台.【总页数】7页(P1127-1133)【作者】袁建辉;贺智敏;余艳辉;陈主初【作者单位】中南大学湘雅医学院肿瘤研究所,湖南,长沙,410078;中南大学湘雅医学院肿瘤研究所,湖南,长沙,410078;中南大学湘雅医学院肿瘤研究所,湖南,长沙,410078;中南大学湘雅医学院肿瘤研究所,湖南,长沙,410078【正文语种】中文【中图分类】R73-3因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

比卡鲁胺对乳腺癌细胞株MDA-MB-453的作用机制及与依维莫司联用的效果评估

doi:10.3971/j.issn.1000-8578.2021.20.0819比卡鲁胺对乳腺癌细胞株MDA-MB-453的作用机制及与依维莫司联用的效果评估张玉琴1，陆云飞2，张海添1Mechanism of Bicalutamide to Breast Cancer Cell Lines MDA-MB-453 and Inhibitory Effects of Its Combination with Everolimus ZHANG Yuqin 1, LU Yunfei 2, ZHANG Haitian 11. Department of Breast Disease, Guangxi International Zhuang Medical Hospital, Nanning 530201, China;2. Gastrointestinal and Gland Surgery, The First Affiliated Hospital of Guangxi Medical University, Nanning 530021, ChinaCorrespondingAuthor:ZHANGHaitian,E-mail:********************Abstract: Objective To investigate the effect of bicalutamide on migration and invasion of androgen receptor(AR) positive breast cancer cells and related mechanism, and the effect of mTOR inhibitor everolimus combined with bicalutamide on the proliferation of MDA-MB-453 cells. Methods Western blot was used to detect the expression change of mTOR, p-mTOR and p-S6 in breast cancer cell lines before and after bicalutamide treatment. Transwell assay was used to detect the cell viability. MTT assay was used to detect the proliferation of MDA-MB-453 cells treated by the combination of bicalutamide and everolimus. The combined effect of the two drugs was calculated by Jin Zhengjun’s method. Results After six days of bicalutamide treatment, the expression of mTOR, p-mTOR and p-S6 were decreased in MDA-MB-453 cells (Ρ=0.034, 0.05, 0.03). The invasion and migration were inhibited in MDA-MB-453 cells (migration: t =4.88, P =0.001, invasion: t =2.684, P =0.028). The proliferation of MDA-MB-453 cells was inhibited after the treatment of bicalutamide combined with everolimus, and the Q value were all greater than 1.15. Conclusion Bicalutamide could inhibit the invasion and migration of MDA-MB-453, and the inhibition effect is affected by the expression level of AR. The combination of bicalutamide and everolimus could synergistically inhibit the proliferation of AR positive breast cancer cells. Key words: Bicalutamide; Everolimus; Breast cancer; Drug combination Competing interests: The authors declare that they have no competing interests.摘要：目的探讨比卡鲁胺对雄激素受体（AR ）阳性乳腺癌细胞侵袭迁移能力的影响及相关作用机制，以及mTOR 抑制剂依维莫司联合比卡鲁胺对MDA-MB-453细胞株增殖作用的影响。

端粒结合蛋白CTC1提高人乳腺癌细胞放射抗性的潜在作用机制

武汉市临床医学科研项目（编号：ＷＺ１７Ｚ０３）
能失调，细胞的放射敏感性增加。因此，端粒是衡量肿瘤细胞放射敏感性的一个重要指标。我们推测端粒结合蛋白ＣＴＣ１可能参与人乳腺癌细胞放射敏感性的调节作用。基于以上考虑，２０１６年ｌ－＿４月，本研究首先构建了人乳腺癌放射敏感／放射抗拒细胞模型（ＭＤＡ —ＭＢ一４３５／ＭＤＡ —ＭＢ一４３５Ｒ），并探讨端粒结合蛋白ＣＴＣ１与人乳腺癌细胞放射敏感性的关系及其潜在的作用机制。
华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院肿瘤科（湖北武汉４３００பைடு நூலகம்２）；武汉生物工程学院药学院（湖北武汉４３０４１５）
【摘要】目的探讨端粒结合蛋白ＣＴＣ１提高人乳腺癌细胞放射抗性的潜在作用机制。方法以单纯转染试剂的细胞作为空白对照（Ｍｏｃｋ组），ｓｉＮＣ转染细胞作为阴性对照（ｓｉＮＣ组），ｓｉＣＴＣＩ＃３转染细胞作为实验组（ｓｉＣＴＣ１档组）。ＭＤＡ—ＭＢ一４３５／ＭＤＡ—ＭＢ一４３５Ｒ细胞分别以３×１０个细胞浓度接种于铺有细胞爬片的６孔细胞培养皿中，待６ｈ左右细胞贴壁后，将细胞分为未处理组（ｕｎｔｒｅａｔｅｄ组）、单纯射线照射组（ＩＲ组）、ｓｉＣＴＣ１＃３干扰组和射线照射联合ｓｉＣＴＣ１＃３干扰组（ＩＲ＋ｓｉＣＴＣ１＃３组）。将ｓｉＲＮＡ（ｓｉＣＴＣ１＃３和ｓｉＮＣ）利用脂质体转染至ＭＤＡ—ＭＢ一４３５／ＭＤＡ—ＭＢ一４３５Ｒ细胞４８ｈ后ＣＣＫ８试剂盒检测细胞增殖及细胞毒性；台盼蓝染色测定细胞增殖动力学；ＲｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ检测细胞相对端粒长度；免疫荧光检测细胞的ＤＮＡ损伤修复能力及ＣＴＣ１蛋白与ｙＨ２ＡＸ的共定位情况；流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况；检测细胞Ｃａｓｐａｓｅ一３的活性以明确细胞早期凋亡事件的触发情况。结果ｓｉＣＴＣＩ＃３组与ｓｉＮＣ组、Ｍｏｃｋ组增殖能力、相对端粒长度相比，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；ｓｉＣＴＣ１＃３组并没有明显引起细胞周期时相的改变（Ｐ＞０．０５）；ＭＤＡ— ＭＢ一４３５Ｒ细胞与ＭＤＡ—ＭＢ一４３５细胞相比，对数生长期的增殖速度、相对端粒长度、￣／Ｈ２ＡＸ焦点的数量差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；ＩＲ＋ｓｉＣＴＣ１＃３组与ＩＲ组相比，７Ｈ２ＡＸ的数量、细胞凋亡率、坏死率差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；在转染后２４ｈ，ＭＤＡ—ＭＢ一４３５和ＭＤＡ—ＭＢ一４３５Ｒ细胞中ｓｉＣＴＣＩ＃３组Ｃａｓｐａｓｅ一３的活性分别为相应Ｍｏｃｋ组的（４．３６±０．５３）倍和（３．２１±０．２４）倍（Ｐ＜０．Ｏ１）。结论端粒结合蛋白ＣＴＣ１提高人乳腺癌细胞放射抗性的机制与该蛋白促进肿瘤细胞增殖、促进ＤＮＡ损伤修复、抑制端粒缩短和抗细胞凋亡有关。而与调节细胞周期进程无关。

常见几个乳腺癌细胞的表达的基因及培养

常见几个乳腺癌细胞的表达的基因及培养展开全文三连一下，了解更多精彩内容乳腺癌(mammary carcinoma)是女性最常见的恶性肿瘤之一。

因地理环境、生活习惯的不同...40%～50%的乳腺癌含有孕激素受体（PR），这类乳腺癌称为PR阳性乳腺癌。

实验常用的乳腺癌细胞有:MCF-7，MCF-10A，MDA-MB-231，MDA-MB-435，MDA-MB-435S，MDA-MB-436，MDA-MB-453，MDA-MB-468，MDA-MB-157，MDA-MB-361，SK-BR-3，SUM159PT，T-47D，ZR-75-30，ZR-75-1，Hs 578T，HCC1937，HCC 38，HBL100，BT-549，BT-474，BT-20，Bcap-37，DU4475等等。

不同的细胞株所表达的基因都会不同，以下，是我们整理的这些常见的细胞所表达的基因，也是我们公司可以提供的乳腺癌的细胞种类，乳腺癌研究方面的老师记得收藏哦：部分细胞形态细胞名称来源/形态培养基细胞表达BT-20腺癌细胞浸润性导管癌乳腺/上皮细胞样培养基：90%MEM 10%FBSG/A完全培养基：MEM完全培养基（货号：MD0301）气相：37℃, 5% CO2ER(-); PR(-);TP53 WT贴壁生长；该细胞表达WNT3和WNT78。

TNFalpha抑制该细胞生长。

该细胞雌激素受体阴性，但表达5＇外显子缺失的雌激素mRNA。

BT-474导管癌细胞乳腺;乳房/导管；上皮细胞样培养基：90%1640 10% FBSG/A完全培养基：1640完全培养ER( ); PR( );HER2( )；TP53浸润性导管癌基（货号：MD0201）气相：空气95% ; 37℃, 5%CO2BT-549 导管癌细胞乳腺；乳房/上皮细胞培养基：90%1640 10% FBS G/A 完全培养基：1640完全培养基（货号：MD0201）气相：空气95% ; 37℃, 5%CO2ER(-); PR(-);TP53 WTHBL100胸腔积液培养基：DMEM 基础培养基 , 90%；胎牛血清，10%。

泌乳素诱导蛋白表达下调对乳腺癌MDA-MB-453细胞迁移、粘附和侵袭的影响

照组（未转染）荧光显微镜观察转染效率，转录ＰＲ和免疫细胞化学技术检测转染４ｈ各组的ＰＰ表达。通过细胞实验分，逆Ｃ８Ｉ
别检测转染ＰＰｓＮ８Ｉ—ＲＡ４ｈ乳腺癌细胞的迁移、附和侵袭能力。结果ｉ粘
ｇａｉｎ，ａｈｓｏｎｎａｉｎｏｕｎｂｅｓａｃｒＭＤＡ— ｒｔｏｄｅｉｎａｄｉｖｓｏｆｈｍａｒａｔｃｎｅＭＢ４５ｅｌ．ＭｅｈｄＰＰｓＲＮＡ，ｃｎｒｌｓＲｎｌｎ —ｉ３ｃｌｓｔｏｓＩ —ｉｏｔ —ｉＮＡａｄｂａｋｓＲＮＡｏｗｅｅｔｎｆｃｅｎｏｈｍａｒａｔｃｎｅｒｒｓｅｔｄｉｔｕｎｂｅｓａｃｒＭＤＡ— ４５ｅｌｈｏｇｉｏｏｓｅｐｒｎｒｕａＭＢ３ｃｌｔｒｕｈｌｐｓｍｅａｘｅｉｓｍｅｔｏｐ，ｎｇｔｅｃｎｒｌｒｕｎｌｎｇｅａｉｏｔｏｏｐａｄｂａｋｖｇ
【ｂｔａｔＯｂｅｔｅｏｉｅｔａｅｉａｔｏｒｌｔ — ｄｃｂｒｔｎ（Ｉ）ｄｗｒｕａｉｎｃｌａｉｔｓｆｉＡｓｃ】ｒｊｃｖＴｖｓｇｔｔｃｆｏｃｉｉｕｉｌｐｏｉＰＰｏｎｅｌｏｏｅｂｌｉ — ｉｎｉｅｈｍｐｓｐａｎｎｅｅｇｔｎｌｉｅｏｍ
ｎａｇＭｉｔｒｍｍａｎｙｎｌａｙＣｏｉｄ，Ｓｅｙｎ０８ｈｎａｇ１４０，Ｃｈｎ１ｉａＣｏｒｓｎｉｇｕｈｒｒｅｐｏｄｎａｔｏ：ＸＩＸｉ一，，Ｅ— ｉ：ｘｅｉｏｏｇ＠ＣＣ．ｏｇ．ｎＥａｏｍａｌｉｘａｄｎＳＯｒｃ

SETDB1在乳腺癌中的表达及对癌细胞株增殖和迁移能力的影响

SETDB1在乳腺癌中的表达及对癌细胞株增殖和迁移能力的影响王小利;许德英;刘刚;常永超【摘要】目的研究组蛋白甲基化酶SETDB1在乳腺癌中的表达情况及对其癌细胞株增殖和迁移能力的影响.方法采用RT-PCR、Western blot和IHC方法检测38例乳腺癌与癌旁组织及癌细胞株中SETDB1的表达水平;采用稳定转染方法筛选出沉默SETDB1基因的克隆细胞株,采用CCK-8、软琼脂克隆形成及流式细胞术检测沉默SETDB1后对肿瘤细胞增殖能力的影响;采用Transwell方法检测沉默后对肿瘤细胞迁移能力的影响.结果 38例乳腺癌与癌旁组织中23例癌组织、13例癌旁组织阳性表达(P＜0.05),SETDB1的mRNA水平相对表达量分别为(1.20 ±0.08)、(0.96±0.05)(=2.44,P＜0.05);沉默T47D中SETDB1基因后,GFP、sh2、sh4株形成克隆个数分别是(70.00±2.00)、(42.67±1.53)和(13.33±1.53)个(F=834.00,P＜0.001);细胞周期中sh2株出现了G0/G1期阻滞,而sh4株出现了G2/M期阻滞(P ＜ 0.01);48 h穿膜个数分别是(54.25±1.71)、(16.50±1.29)、(9.00 ±0.82)个(F=1344.00,P＜0.001).结论 SETDB1在乳腺癌中高表达,沉默该基因可影响癌细胞株的增殖和迁移能力,有望作为乳腺癌诊断及治疗的新靶点.【期刊名称】《安徽医科大学学报》【年(卷),期】2016(051)008【总页数】7页(P1081-1087)【关键词】乳腺癌;SETDB1;基因沉默;细胞增殖;细胞迁移【作者】王小利;许德英;刘刚;常永超【作者单位】河南科技大学临床医学院、河南科技大学第一附属医院检验科,洛阳471003;河南科技大学临床医学院、河南科技大学第一附属医院检验科,洛阳471003;河南科技大学临床医学院、河南科技大学第一附属医院肿瘤表观遗传实验室,洛阳471003;河南科技大学临床医学院、河南科技大学第一附属医院检验科,洛阳471003【正文语种】中文【中图分类】R73-37世界卫生组织最新统计数据显示，乳腺癌在全世界女性中成最高发的癌症，而中国乳腺癌亦位于女性发病率第一位，故探讨乳腺癌的发生发展机制，寻找新的治疗靶点与药物，对其诊断和预后评估具有重大意义。

雷公藤红素促进人类乳腺癌MDA-MB-453细胞HER2蛋白降解及诱导凋亡的机制

雷公藤红素促进人类乳腺癌MDA-MB-453细胞HER2蛋白降解及诱导凋亡的机制闫燕艳;符立梧【摘要】[Objective] To investigate the mechanism of celastrol degradating HER2 protein and inducing cell apoptosis in MDA-MB-453 cells. [Methods] The cytotoxicity of celastrol to MDA-MB-453 cells was measured by MTT assay. Apoptotic morphology was observed after Hoechst 33258 staining. Sub-C1 DNA peak was analyzed by flow cytometry to quantify the degree of apoptosis. Changes of apoptotic related proteins were analyzed by Western blot. Subcellular distribution of HER2 was observed under fluorescence microscopy by immunoQuorescence assay. [Results] Celastrol exhibited potent cytotoxicity in HER2-overexpressing MDA-MB-453 cells, and IC50 was (5.22 ± 0.29) u.mol/L. After MDA-MB-453 tells were treated with different concentrations of celastrol for 24 h, typical apoptotic bodies, increasing sub-Cl DNA peak and activation of Caspase-3 and Parp were detected in a dose-dependent manner. It was noteworthy that immunofluorescence study with anti-HER2 antibody showed that celastrol disturbed the subcellular distribution of HER2, with decreased location in the plasma membrane. [Conclusion] Celastrol induced MDA-MB-453 cancer cells apoptosis in a dose-dependent manner. Subcellular redistribution of HER2 maybe involved in HER2 protein degradation by celastrol.%[目的]研究雷公藤红素促进人类乳腺癌MDA-MB-453细胞HER2蛋白降解及诱导凋亡的机制.[方法]MTT法检测雷公藤红素对MDA-MB-453的细胞毒作用；Hoechst 33258染色荧光显微镜观察细胞凋亡形态学改变；PI单染流式细胞术检测细胞凋亡率；Western Blot检测细胞凋亡相关蛋白变化；免疫荧光检测HER2蛋白在细胞中的定位变化.[结果]雷公藤红素对MDA-MB-453有强大的细胞毒作用,IC50为(5.22±0.29)μmol/L;该化合物可浓度依赖性地诱导MDA-MB-453细胞发生凋亡,出现典型的凋亡小体、sub-G1改变及细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、Parp的裂解活化.值得一提的是,雷公藤红素作用后,Western Blot检测到HER2蛋白明显降低,并且原先主要表达在细胞膜上的HER2蛋白发生了异位.[结论]雷公藤红素浓度依赖性地诱导MDA-MB-453细胞发生凋亡,并且促进HER2蛋白降解,这可能与改变了HER2蛋白在细胞中的定位有关系.【期刊名称】《中山大学学报（医学科学版）》【年(卷),期】2012(033)004【总页数】5页(P471-475)【关键词】雷公藤红素;HER2;细胞凋亡;蛋白异位【作者】闫燕艳;符立梧【作者单位】山西大同大学医学院药理教研室,山西大同037009;华南肿瘤学国家重点实验室//中山大学肿瘤防治中心,广东广州510060【正文语种】中文【中图分类】R73-36+1HER2受体是EGFR受体家族成员中的第2号，在许多上皮肿瘤，尤其是乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌和鼻咽癌中过度表达［1］。

雷公藤红素促进人类乳腺癌MDA-MB-453细胞HER2蛋白降解及诱导凋亡的机制

术检测细胞凋亡率；ｓｒＢｏ检测细胞凋亡相关蛋白变化；荧光检测ＨＲ蛋白在细胞中的定位变化。【Ｗｅｔｎｌｅｔ免疫Ｅ２结果】雷公
藤红素对ＭＤ．一５ＡＭＢ４３有强大的细胞毒作用，５Ｉ０为（．２±０２）ｍｌＬ该化合物可浓度依赖性地诱导ＭＡ— ．５Ｃ５２．Ｉｏ／；９ｘＤＭＢ４３细胞发生凋亡，出现典型的凋亡小体、ｕ．改变及细胞凋亡相关蛋白Ｃｓａｅ３ＰｒｓｂＧ１ａｐｓ一、ａｐ的裂解活化。值得一提的是，雷公藤红
ｍｃｓｐｍｎｆｏｓｎｅｓｙ【ｅｕｓＣｌｔｌｘｉｔｏｎｃｔｏｉｔｉＨＲ－ｅｘｒｓｇＤ－Ｂ４３ｉｏｏｙｙｍｕｏｕｒｃｃａｓ．Ｒｓｌ】ｅｓｏｅｈｉｄｔｔｙｔｃｙｎＥ２ｖｅｅｉＡＭ一５ｒｃｂｉｌｅｅａｔａｒｂｅｐｅｏｘｉｏｒｐｓｎＭ
ｏｓｒｅｆｒＨｏｃｓ３２８ｓｉｉｇＳｂＧ１ＤＮＡｐａａｎｌｚｄｂｏｙｏｔｏｑａｔｙｔｅｄｇｅｆｐｐｏｉ．ｈｎｅｂｅｖｄａｅｅｈｔ３５ｔｎｎ．ｕ — ｔａｅｋｗｓａａｙｅｙｆｗｃｔｍｅｒｔｕｎｉｈｅｒｅｏｏｔｓＣａｇｓｌｙｆａｓ
雷公藤红素促进人类乳腺癌ＭＤ — 一５细胞ＨＲＡＭＢ４３Ｅ２蛋白降解及诱导凋亡的机制
闫燕艳．符立梧

核糖体调控因子1对人乳腺癌MDA-MB-468细胞增殖和转移能力的影响

是乳腺癌的主要治疗方法,但治疗后复发率仍然较
散能力强等特点。在肿瘤发生发展过程中,肿瘤细
高,且化疗的副作用较大,因此寻找新的治疗方法就
胞有着更为活跃的核糖体生物合成功能。核糖体合
[收稿日期]2023
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23; [修订日期]2023
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17
[基金项目] 国家自然科学基金资助项目(
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来发病率一直持续增高
亡与其转移有关
,约 90% 的乳腺癌相关死
[
1]
。目前,手术治疗并辅以放化疗
[
2]
显得尤为重要。近年来,随着对乳腺癌认识的不断

肥大细胞类胰蛋白酶促进人乳腺癌细胞系MDA-MB-435的跨膜侵袭

Ｔｒｐａｅ（ｎ０ｍｏ／）ｐｏｔｄｔｅｉｖｓｖｃｉｉｆｙｔｓ１０ａｄ５０ｐｌＬｒｍｏｅｈａｉｅａｔｔｏ５ｎｖｙＭＤＡ－－３ｅｌ，ｎｐｅｕａ— ＭＢ４５ｃｌａｄｕｒｇｌｔｓ
ｅｈｄｔｅｍＲＮＡｘｒｓｉｎｏＭＰ２ａｄＴＩＰ２Ｐ＜００）ａｄｐｏｅｎ】ｖ】ｆＭＭＰ２Ｐ００）ｅｐｅｓｆｏＭ－ｎＭ＿（．１ｎｒｔｉｅｅｏ＿（＜．５．
该作用可能、ＭＰ２的ｍＲＴＩ－ＮＡ表达相关。
【关键词】类胰蛋白酶；乳腺癌；肥大细胞；基质金属蛋白酶
【图分类号】Ｒ７０２中３．３【文献标识码】Ａ
ｃｒｉｏｅｌｌｅＭＤＡ一ａｃｎｍａｃｌｉｎ～Ｂ４５３．ＭｅｈｄＷｅｓｕｅｈｆｅｔｆｔｙｔｓｉｔｎａｉｎｏｔｏｓｔｄｉｄｔｅｅｆｃｓｏｒｐａｅＯｌｈｅｉｖｓｏｆＭＤＡ— Ｅ４５ｃｌｓｉｉｆｒｎｏｅｔａｉｎｎｔｄｆｅｅｔｔｓＴｈｆｅｔｆｔｙｔｓｎｔＭｌ３ｅｌｎｄｆｅｅｔｃｎｃｎｒｔｏｓａｄａｉｆｒｎｉ广ｍｅ．ｅｅｆｃｓｏｒｐａｅｏｈｅ
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KCNQ1OT1基因敲除联合鸦胆子素D对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移及侵袭的影响

doi:10.3971/j.issn.1000-8578.2023.23.0456KCNQ1OT1基因敲除联合鸦胆子素D 对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移及侵袭的影响龙凤1,2,3，赵玉1﹡，黄勇1，刘晓燕1，周旋1，李雪1，叶海琳1Effects of KCNQ1OT1 Gene Knockout Combined with Bruceine D on Proliferation, Migration, and Invasion of Breast Cancer MDA-MB-231 CellsLONG Feng 1,2,3, ZHAO Yu 1*, HUANG Yong 1, LIU Xiaoyan 1, ZHOU Xuan 1, LI Xue 1, YE Hailin 1 (*: Contributed Equally as the First Author)1. School of Basic Medicine, Gansu University of Chinese Medicine, Lanzhou 730000, China;2. Key Laboratory of Traditional Chinese Medicine Prevention and Treatment of Chronic Diseases in Gansu Provincial (Cultivation Base), Lanzhou 730000, China;3. Provincial Key Laboratory of Molecular Medicine and Chinese Medicine Prevention and Control of Major Diseases in Universities of Gansu Province, Lanzhou 730000, ChinaAbstract: Objective To explore the effect of KCNQ1OT1 gene knockout combined with bruceine D on the proliferation, migration, and invasion of breast cancer MDA-MB-231 cells. Methods Cell Counting Kit-8, wound healing, and Transwell invasion assay were used to detect the effects of bruceine D and siKCNQ1OT1 on the viability, migration, and invasion of MDA-MB-231 cells. Effect of bruceine D and siKCNQ1OT1 on the expression of KCNQ1OT1 in MDA-MB-231 cells was detected by qRT-PCR. Western blot was used to detect the effect of bruceine D and siKCNQ1OT1 on the expression of EMT-related proteins and CDC42, p-MKK7, MKK7 proteins in MDA-MB-231 cells. Results Bruceine D and siKCNQ1OT1 could significantly inhibit the viability, migration, and invasion of MDA-MB-231 cells, and the inhibitory effect was enhanced when they were combined (all P <0.05); bruceine D downregulated the expression of KCNQ1OT1 in MDA-MB-231 cells (all P <0.05); bruceine D combined with siKCNQ1OT1 significantly decreased CDC42, p-MKK7, N-cadherin, and Vimentin expression in MDA-MB-231 cells and increased the expression of E-cadherin (all P <0.05). Conclusion Bruceine D combined with siKCNQ1OT1 significantly inhibit the proliferation, migration, invasion, and EMT of human breast cancer MDA-MB-231 cells, and its molecular mechanism may be related to the blocking of CDC42/MKK7 signaling pathway.Key words: Breast cancer; Bruceine D; KCNQ1OT1; Migration; InvasionFunding: Gansu Province’s “Double First Class” Scientific Research Key Project (No. GSSYLXM-01); Gansu Province Higher Education Innovation Fund (No. 2021A-078); Education Unveiling and Leadership Project (No. 2021jyjbgs-03)Competing interests: The authors declare that they have no competing interests.摘要：目的探讨KCNQ1OT1基因敲除联合鸦胆子素D 对乳腺癌MDA-MB-231细胞生物学行为的影响及其机制。

TET1介导的基因结构域的转录调控网络及分子机制

TET1介导的基因结构域的转录调控网络及分子机制摘要：十一转录酶TET1是一种非常重要的基因调控因子，可以通过多种方式调控基因表达，包括DNA甲基化、染色质组装等。

TET1被广泛地研究，其活性和调控方式越来越被深入了解。

本文旨在综述TET1介导的基因结构域的转录调控网络及分子机制。

首先介绍TET1在基因转录控制中的作用及其生物学功能，然后详细描述TET1介导的基因结构域调控网络。

随后，我们阐述了TET1介导的转录调控机制的分子细节，如epigenomics修饰、转录因子的调控、RNA的介导等。

最后，我们总结了当前对TET1介导的基因结构域调控网络及分子机制的了解，指出了未来需要解决的问题。

关键词：TET1、转录调控、epigenomics、转录因子、RNA正文：引言转录因子是一种重要的基因调控因子，其在基因表达中扮演着连锁反应的关键角色。

十一转录酶TET1是一种与DNA甲基化和基因转录控制密切相关的转录因子，其通过立体嵌合和DNA靶向特异性结合来调控基因表达。

TET1是一种非常重要的基因调控因子，其活性和调控方式在生命科学领域中投放越来越高的期望，值得深入探究。

本文旨在综述TET1介导的基因结构域的转录调控网络及分子机制，提供对TET1基因调控机制的深入了解，促进对其在医学工程领域的应用。

TET1的基本特征TET1是TET家族的成员之一，TET家族包含TET1、TET2和TET3三种十一转录酶。

TET1基因长度为4632bp，位于人类染色体10q21.3。

TET1基因编码一个直径约为214kDa的蛋白质，分为N端和C端两个区域。

N端为基因结构域，包括具有转录调控功能的CXXC结构域和具有DNA催化活性的TDG结构域；C端为催化域，主要由7个Cys-His-Asp 盒组成，能够保持整个蛋白的稳定性和酶催化活性。

TET1在基因转录控制中的作用及其生物学功能TET1在基因转录控制中扮演着重要的角色。

它可以通过DNA甲基化、染色质组装等多种方式调控基因表达。

TET1蛋白去甲基化作用及其对肿瘤影响的研究进展

收稿日期 !!"#&%#!%;" 作者简介 !刘玉莹 "#**# #&女 &硕士研究生 &主要从事肝癌的基因治疗 ' 通信作者 !张芳林 &副教授 &,%-./0!cQ.FKM0;!.0/NOF456-'
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南昌大学学报 "医学版 #!"#$ 年 $ 月 &第 +$ 卷第 @ 期
:=C 甲基化对染色体结构稳定(基因沉默(基因组印记等均有重要影响 ' +;, 研究证实 7,7"J1F 101H1FJL.FI065.J/6F#蛋白具有+-T 羟化酶活性&能氧化+-T 生成+Q-T&发挥 :=C 去甲基化作用 ' +@, 在肿瘤发生时&:=C 甲基化与去甲基化的动态平衡被打破&导致抑癌基因高甲基化(致癌基因低甲基
5IG!,5J!!7#M.-/0N3L6J1/FI"7,7#&7,7!.FA7,7;#R106FKJ6 /I%%G1J6K0OJ.L.J1"%%d^#.FAV1!f%A131FA1FJA/62NK1F.I14CIJQ1/-36LJ.FJL1KO0.J6LNM.5J6LI/F :=C -1JQN0.J/6F&7,73L6J1/FI.L1/-30/5.J1A/FA1-1JQN0.J/6F3L651IIJQL6OKQ62/A/c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

《2024年鬼臼苦素对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用及其作用机制的研究》范文

《鬼臼苦素对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用及其作用机制的研究》篇一一、引言三阴性乳腺癌（TNBC）是一种恶性程度高、预后较差的乳腺癌亚型，因其缺乏有效的治疗靶点而成为乳腺癌治疗的难题。

近年来，天然药物在抗癌治疗中的潜力逐渐受到关注，其中鬼臼苦素作为一种具有抗肿瘤活性的化合物，其对三阴性乳腺癌的治疗效果尤其引人关注。

本研究旨在探讨鬼臼苦素对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用及其作用机制。

二、材料与方法1. 材料鬼臼苦素、MDA-MB-231细胞株、DMEM培养基、胎牛血清、MTT试剂等。

2. 方法（1）细胞培养与处理：将MDA-MB-231细胞在DMEM培养基中培养，并分别用不同浓度的鬼臼苦素处理细胞。

（2）细胞增殖实验：采用MTT法检测鬼臼苦素对MDA-MB-231细胞增殖的影响。

（3）流式细胞术：检测细胞周期、凋亡等相关指标。

（4） Western blot：检测相关蛋白的表达情况。

三、实验结果1. 鬼臼苦素对MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用实验结果显示，鬼臼苦素能显著抑制MDA-MB-231细胞的增殖，且随着药物浓度的增加，抑制作用逐渐增强。

2. 鬼臼苦素对MDA-MB-231细胞周期的影响流式细胞术结果显示，鬼臼苦素能将MDA-MB-231细胞阻滞在S期，并降低S期细胞比例，同时增加G0/G1期细胞比例。

3. 鬼臼苦素诱导MDA-MB-231细胞凋亡的作用流式细胞术检测显示，鬼臼苦素能显著诱导MDA-MB-231细胞凋亡，并呈剂量依赖性。

4. 鬼臼苦素作用机制的相关蛋白表达情况Western blot结果显示，鬼臼苦素能上调p53、p21等抑癌基因的表达，同时下调Bcl-2等抗凋亡蛋白的表达，从而发挥其抗肿瘤作用。

四、讨论本研究表明，鬼臼苦素能显著抑制三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖，其作用机制可能与以下几个方面有关：一是通过阻滞细胞周期于S期，降低S期细胞比例；二是通过诱导细胞凋亡，增加凋亡细胞比例；三是通过上调抑癌基因的表达和下调抗凋亡蛋白的表达，从而发挥抗肿瘤作用。

RACK1对人乳腺癌增殖、迁移和侵袭转移的影响及相关机制的研究的开题报告

RACK1对人乳腺癌增殖、迁移和侵袭转移的影响及相关机制的研究的开题报告
1. 研究背景和意义
人乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，对女性的健康和生命造成严重威胁。

目前，乳腺癌的研究中发现了许多潜在信号通路和靶点，其中RACK1作为一个细胞信号传导蛋白，在癌症中发挥着重要作用，因此了解RACK1在人乳腺癌中的作用和机制具有重要的学术和临床意义。

2. 研究目的
本研究旨在探究RACK1在人乳腺癌中的作用及相关机制，包括其对癌细胞的增殖、迁移和侵袭转移的影响，并深入分析其参与的信号通路和调控机制，为进一步深入研究乳腺癌的发病机制提供帮助。

3. 研究内容和方法
本研究将应用细胞生物学、分子生物学、免疫学等技术手段，包括Western blot、实时荧光定量PCR、细胞增殖、迁移和侵袭转移实验等，探究RACK1在人乳腺癌中的作用及相关机制。

具体研究内容包括：
（1）利用人乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-231进行细胞增殖、迁移和侵袭转移实验，探究RACK1对癌细胞的影响以及其与乳腺癌的关系。

（2）应用Western blot和实时荧光定量PCR技术，分析RACK1与与其相关的信号通路因子（如AKT、ERK、NF-κB等）的表达水平，揭示其调控机制。

4. 研究意义和预期结果
通过本研究的探究，可深入研究RACK1在人乳腺癌中的作用及相关机制，为更好地了解乳腺癌的发病机制提供理论基础和实验数据支持。

同时，该研究可为寻找乳腺癌的新靶点和治疗途径提供参考，对改善乳腺癌患者的治疗效果具有重要的临床应用前景。