培养基模拟灌装方法
培养基模拟灌装试验(07.7.7)教材
培养基模拟灌装试验（MFT） 二、培养基灌装试验的要求
模拟试验应尽可能模拟常规的无菌生产工艺。 每次灌装数量应大于 5000 瓶。 对于小批量产品，培养基灌装数量至少应等于产品 数量。 5000 瓶的染菌数应为0。 再验证周期 单一规格品种：2次/年。 多规格品种：每一规格品种 1次/年。 生产工艺、生产环境、主要设备变更时，连续试验3 批。 每位无菌操作者每年至少参加1 次成功的MFT 。
培养基模拟灌装试验（MFT）
（7）人员 A. 更衣?
B. 消毒?
C. 操作过程? D. 操作人员?
E. QC人员?
F. 管理人员? G. 其它人员?(如外来参观人员等)
培养基模拟灌装试验（MFT）
（8）细菌种类鉴别及污染源
A. 链菌、球菌
B. 杆菌 C. 其它细菌
人员
水系统 其它
四、MFT的前期工作
模拟灌装试验人员的培训 （1）模拟灌装试验人员无菌操作知识培训 （2）模拟灌装试验人员无菌检验知识培训 （3）模拟灌装装备检修人员的无菌设备维修 知识培训 （4）模拟灌装试验SOP培训（含生产、QC、 计量、装备） （5）模拟灌装试验SOR培训（含生产、 QC、计量、装备）
生产环境变更 生产工艺变更 主要设备变更 主要关键岗位生产人员变更 阳性试验变更 阳性试验变更
培养基模拟灌装试验（MFT）
无菌原料药和无菌制剂（非最终灭菌制剂） 生产出现如下情况
长期停产后复产 新生产线投产前 染菌事故复产
培养基模拟灌装试验（MFT）
Hale Waihona Puke 六. 培养基灌装试验（MFT）样品的培养 和结果分析 样品的培养
培养基模拟灌装试验
关键因素三: 培养基及培养条件 (3/3)
• 培养温度 全部样品应在20-35℃(±2.5℃)下培养14天。通常 在 20-25℃下 培养 7 天，然后在30-35℃下培养 7 天；或者在30-35℃培养 7 天后，再转移到 2025℃培养 7 天。 • 原则：选择的温度适宜那些从环境中分离的微生 物或生物负荷中的微生物的培养。 • 关于培养条件的选择，补充一个没有形成共识的 建议，在培养过程的前半个周期，将所有产品进 行倒置后培养；然后在剩余时间内，将产品恢复 直立位置后进行培养。
关键因素八:灌装的持续时间
• 通常情况，培养基灌装的时间应该足够长，能够 包括所有的必需的干扰、生产中断，包括正常的 无菌操作如开始前的安装、重量或体积的调整、 改变设备或手动维修等，还包括更衣、暂停、换 班等，持续时间还应能反映出潜在的人员疲劳。 • 对于非常大的批量或较长的生产过程，通常使用 一些空白样品（空的或者灌水）以维持模拟试验 的动态环境。这些技术可以应用于持续多个工作 日的工艺验证，用于验证可以批准的最长的生产 周期。
关键因素二: 试验的次数和频率
• 培养基模拟试验的初始验证，至少需要成功的连 续进行 3 次独立的模拟试验（建议在不同的工作 日进行试验）。 • 首次验证后，培养基模拟试验通常每年进行2次， 每次进行1批即可。 • 当生产线发生变更，并且经过评估可能对无菌生 产工艺有潜在危险时，应当进行额外的培养基灌 装试验。
培养基灌装方案
• 需要考虑的关键因素 : • 起始步骤 • 试验的次数和频率 • 培养基及培养条件 • 灌装数量 • 容器体积 • 灌装体积 • 灌装速度
培养基灌装方案
• • • • • • • • 灌装过程的持续时间 人员和工作班次 环境监测措施 干预措施 容器的检查 培养方法 可接受标准 污染调查
培养基模拟灌装方案
培养基模拟灌装方案一、背景简介培养基是微生物学实验中的重要基础，常常需要进行大批量的灌装。
传统的培养基灌装方式费时费力，而且操作不方便，难以达到高效的生产要求。
为了提高灌装效率和质量，需要开发一种模拟灌装方案。
二、目标1.提高培养基灌装效率。
2.提高培养基灌装的一致性。
3.减少人工操作。
4.提高灌装的质量控制能力。
三、实施步骤1.设计灌装装置根据培养基灌装的要求和目标，设计一种自动化的灌装装置。
该装置应能够准确地控制培养基的体积，并能自动进行灌装和封口的操作。
合理的设计可以提高灌装的效率和一致性。
2.开发控制系统开发一套完整的控制系统，能够对灌装装置进行精确的控制。
控制系统应包括灌装装置的控制软件和硬件，能够进行体积控制、灌装速度控制和封口力度控制等操作。
通过控制系统，可以实现灌装的自动化和质量的控制。
3.优化工作流程将培养基灌装的各个步骤进行优化，包括培养基的准备、灌装操作、封口操作等。
通过合理安排工作流程，可以提高灌装的效率和一致性。
可以考虑使用自动化设备对培养基进行混合、过滤、存储等处理，进一步减少人工操作。
4.培训操作人员对操作人员进行培训，使其掌握操作流程和操作技巧。
培训内容包括培养基的准备、灌装装置的操作、控制系统的使用等。
操作人员应严格按照操作规程进行操作，以确保灌装的质量和一致性。
5.质量控制建立一套完整的质量控制机制，包括对培养基的物理性质和化学性质进行检测和监控。
可以使用专业的仪器对培养基进行pH值、溶解度、浓度等参数的检测，以确保灌装的质量和一致性。
6.不断改进根据实际操作中的问题和需求，及时对模拟灌装方案进行改进。
可以通过收集用户反馈、开展技术研究等方式，不断改进模拟灌装方案，提高其效率和质量控制能力。
四、预期效果通过上述方案的实施，预期能够实现以下效果：1.提高培养基灌装效率，节省人力和时间成本。
2.提高培养基灌装的一致性，减少灌装误差。
3.减少人工操作，提高工作效率和质量控制能力。
培养基模拟灌装方案设计
培养基模拟灌装方案设计一、概述二、步骤1.准备灌装设备和材料确定所需的培养基配方和容量后，准备灌装设备和材料。
主要包括：培养基配方、培养基粉末、试剂和培养基组分、反应试剂（如pH调节剂）、称量器具、容器（如烧杯、烧瓶等）、搅拌器、灌装管和灌装器等。
2.精确称量和混合培养基组分根据培养基配方，用准确的称量器具称量所需的培养基粉末和试剂，并混合均匀。
在混合过程中可以使用搅拌器进行充分搅拌，以确保培养基组分的均匀分布。
3.调节pH值如果培养基需要调节pH值，可以在混合培养基组分的过程中添加相应的pH调节剂。
添加后，需要使用pH计进行测量，并进行适当的调整，直到达到所需的pH值。
4.灌装培养基将混合好的培养基转移到灌装器中。
根据所需的体积，选择合适的容器，并将灌装器的尖端放入容器中。
然后，开始慢慢地灌装培养基，直到达到预定的体积或液面位置。
5.测量和调整灌装量灌装完成后，使用准确的容量单位进行体积测量，并与预定的体积进行比较。
如果有差异，需要进行适当的调整，以确保灌装出的培养基的体积与预期相符。
三、操作要点1.精确的称量和混合是保证培养基质量的关键。
在称量过程中要采用准确的称量器具，并仔细记录每个组分的质量。
混合过程中要充分搅拌，以确保培养基组分均匀分布。
2.pH调节是根据配方需要进行的操作。
选择合适的pH调节剂，并使用pH计进行准确测量和调整。
3.灌装过程中要注意操作的轻柔和缓慢。
避免产生气泡和剧烈的液体运动，以免影响培养基的质量。
4.灌装完成后，要使用准确的容量单位进行测量，以确保灌装的培养基体积准确无误。
四、注意事项1.在操作过程中要遵循无菌操作的原则，确保培养基的无菌性和纯净度。
2.灌装管和容器要提前进行消毒和清洁处理，以防止细菌和其他污染物的污染。
3.及时检查和更换灌装设备的零部件，确保其正常运行和灌装的准确性。
4.每次使用灌装器前，要进行漏气测试，确保其正常工作和密封性能。
5.彻底清理和消毒工作区域和设备，以避免污染和交叉感染。
培养基模拟灌装试验-TSB验证详解
培养基模拟灌装试验-TSB验证详解培养基模拟灌装试验-TSB 验证详解针对TSB培养基，适用玻璃安瓿小容量注射剂产品一、关键点 1、培养基选择:基础培养基和选择性培养基。
本次讲解TSB培养基。
一般为250g一瓶，每30g+1L注射用水配制。
配制注意:注射用水不能热配，培养基不能通入氮气、二氧化碳等。
目的是去除抑菌因素2、生产线选择:3、生产批次选择:详见无菌附录4、容器选择:易观察。
应模拟全部规格，或计划中安排。
容器应选择无色透明5、装量选择:足够微生物生长所需，能充分接触到内壁，采用倒瓶等容器大小和装量应足够微生物生长和便于观察。
一般装量为25~40% 如:5ml安瓿瓶，灌装2ml。
并不一定要模拟某个品种的装量。
6、灌装速度选择:工艺范围内，快速和低速都有不同的模拟意义一般涉及洗灌封联动的问题。
比如安瓿瓶烘干灭菌的时间影响。
7、生产线人员选择:人员参与验证，或计划中安排详见无菌附录8、灌装数量选择:批量及置信区间选择等详见无菌附录 2003验证指南9、培养基试生长试验及培养后阳性对照试验:试生长可参考:分别在30?,35?(金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌)和23?,28?(白色念珠菌、黑曲霉)培养 7 天。
应有对照组。
阳性对照:接种浓度均小于100cfu/ml10、菌种选择:中国药典11、培养室选择及热分布:培养环境监控措施证明对于很多企业来说，不可能会建设一个培养室。
一般情况下，都是需要找个房间作培养室。
这就需要培养室检查:23?,28? 与30?,35? 是否能稳定。
这也与培养季节有关。
首先:空间是否合适、是否受认为干扰。
必要时加锁接着:制冷模式，测试最低控温;制热模式，测试最低控温。
最后:选取不同测温点进行检测，以说明热分布均一。
当放入培养瓶开始，应该已经是一个合格环境，并开始登记温湿度。
期间应多次检查，并适当调节。
12、灌装环境监测项目及监测点选择:分二关键部分:1:灌装区域 2:灌装设备所处环境项目:悬浮粒子、浮游菌、沉降菌等，详见无菌附录注意:设备自带的检测项目不能取代验证需要的检测项目。
无菌工艺验证-培养基模拟灌装试验
13 | Nanjing, the People’s Republic of China, 16-20 November 2009
培养基灌装方案
关键因素: 培养基(3/3)
如果培养基中含有动物源性成分，可能导致朊蛋白污染。那么很重要 的是，培养基供应商能够提供证明，确认相关物质来源于没有牛海绵 状脑病（BSE-free）的国家 。
培养基灌装的原则
在无菌生产工艺中，最大的风险来源于洁净室中人员的操 作，所以操作人员必须参加培养基灌装试验。 操作人员需要什么样的资质？以及什么时候可以确认操作 人员的合格性？
在无菌灌装操作中，应进行环境监测。 是否需要额外的监测措施？
SFDA GMP 检查员高级研讨会－无菌药品生产
6 | Nanjing, the People’s Republic of China, 16-20 November 2009
SFDA GMP 检查员高级研讨会－无菌药品生产
19 | Nanjing, the People’s Republic of China, 16-20 November 2009
培养基灌装方案
关键因素: 灌装的持续时间
即使使用最精确的模型模拟实际生产运行，其他的因素也需要考虑，以确保 其合理性。 通常情况，培养基灌装的时间应该足够长，能够包括所有的必需的干扰、生 产中断，以及反应出潜在的人员疲劳，一个典型的培养基灌装可以至少是3-4 小时。 一次理想的培养基灌装应该灌装比实际产品生产时更多的数量（所有的批次 均应大于5000个单位）。对于非常大的批量或较长的生产过程，通常使用一 些空白样品（空的或者灌水）以维持模拟试验的动态环境。这些技术可以应 用于持续多个工作日的工艺验证，用于验证可以批准的最长的生产周期。
无菌生产工艺验证—培养基模拟灌装试验浅析
2.2 多产品简化试验思路
一条灌装线生产多个产品时，根据下列因素可被划分为不同的类型组：
⑴ 灌装工艺。⑵ 不同的容器、密封方式。由此选出两个或更多个下列方面能 涵盖所有其他的相关产品：⑴ 容器的大小、开放或密封的设计。⑵ 灌装线的 速度和干预；⑶ 涉及的操作人员数量。⑷ 储存容器的形式、转移的方式等。 自包装容器代表性选择方面，对于多规格、容器形状不同的灌装生产线，
6. 培养基配制
一般将大豆胰蛋白胨培养基（TSB）配制成3%的溶液，并用湿热蒸 汽灭菌（121℃、15分钟），冷却后的培养基用已清洁灭菌的园筒过滤
器（装入已灭菌的0.22um滤芯）过滤于已清洁灭菌的储罐中（过滤过
程应遵守无菌操作）。 培养基在灌装前保存在储罐中的时间也应挑战至少最长工艺允许 时间。所有在这一段可能进行的操作，如取样、过滤器的完整性试验 等也按实际模拟。 配制用于验证分装生产线的培养基溶液体积应满足灌装所设定的 灌装瓶数需要的量。
应对不同大小、形状的容器进行评估；多数可选用最大敞口直径的容器和最 低生产线速度；有时也应选择容易倒落的小型容器用来代表最差情况，因可 能需要更多的人工干预；当不能兼顾时，应考虑选取有代表性的几种容器进 行培养基模拟灌装试验。
2.3 最差条件设计
2.3.1储存时间的设计
灌装设备、部件、储罐、无菌物料、药液在实际灌装前能够放置
9.15
10.51 11.84 13.15 14.43
15.7
16.96
10.培养基灌装试验的合格标准
10.培养基灌装试验的合格标准
10.3 合格标准
目前，国际上认可的培养基灌装试验合格标准（允许最大污染率）如下表：
批灌装数量 允许阳性数量 2996～4742 0 4743～6294 1 6295～7751 2 7752～9151 3
培养基模拟灌装方案
引言培养基的灌装是实验室中非常常见且重要的工作环节，对于细胞培养、微生物培养及其他生物实验具有关键性影响。
良好的培养基灌装方案能够确保培养基的质量和稳定性，并确保实验的可重复性。
本文将介绍一种基于模拟灌装的培养基灌装方案，以提高灌装的准确性和效率。
背景培养基的灌装是将固体培养基或培养基粉末与适量的水混合并灌装到容器中的过程。
传统的灌装方法常常依赖于人工操作，存在操作误差和时间消耗较大的问题。
为了解决这些问题，模拟灌装方案应运而生。
模拟灌装方案的优势模拟灌装方案采用自动化设备来控制培养基的灌装过程，相较于传统的手动灌装方式，具有以下优势：1.准确性：模拟灌装方案可以通过自动称量和控制流速等功能，确保每个容器中的培养基量一致，避免了人为操作误差的影响。
2.效率：模拟灌装方案可以实现批量生产，大大提高了灌装的效率。
操作员只需设置好参数，然后等待自动完成，节省了大量的人力和时间成本。
3.重复性：模拟灌装方案中的设备可以精确记录每次灌装的参数，如时间、容器编号等，确保实验的可重复性和数据的准确性。
模拟灌装设备的选择选择适合的模拟灌装设备对于实现高质量的培养基灌装至关重要。
以下是一些选择设备的要点：•设备品牌和质量：选择可靠品牌的设备，确保设备的质量和性能稳定。
•精度和准确性：设备应具备高精度的称量功能和流速控制功能，以确保培养基量的准确性。
•操作简便性：设备的操作界面应简单明了，方便操作员进行设置和监控。
•安全性：设备应具备安全保护措施，如气压过载保护、漏液报警等，以确保操作人员和实验室的安全。
模拟灌装方案的具体步骤下面将介绍基于模拟灌装的培养基灌装方案的具体步骤：1.准备工作–清洁：确保工作区域和设备的清洁。
–检查：检查设备是否正常运行，如有故障应及时修复。
–验证：检测设备的准确性和精确度。
2.样品准备–固体培养基：根据实验需求，称取适量的固体培养基到容器中。
–培养基粉末：按照比例配备所需的培养基粉末。
培养基模拟灌装探讨
培养基模拟灌装探讨培养基灌装是微生物学和生物技术生产中必不可少的操作。
在制备培养基时，需要进行分装或灌装操作，以便存储和使用。
如果培养基灌装存在问题，可能会对实验结果产生负面影响。
培养基灌装的目的培养基灌装的主要目的是制备标准化、无菌的培养基，以便进行微生物生长和研究。
培养基通常使用液态、固态和半固态三种形式，其中液态培养基最常用。
在灌装培养基时，需要注意以下几个方面：1.充分计量：灌装培养基需要精确计量，以便制备标准化的培养基。
一般来说，采用电子秤或者容量瓶等计量工具。
2.选择适当容器：液态培养基需要使用密封性好的容器，避免外部细菌的污染。
同时采用无菌技术进行操作，使培养基不被污染。
具体容器样式包括考培氏烧瓶和培养皿等。
3.选择恰当灌装技术：常见培养基灌装技术包括倒入法、注射法和离心灌装法等。
倒入法适用于液态和半固态的培养基；注射法适用于液态和固态培养基；离心灌装法用于高度浓缩的培养基。
常见的问题与解决方法在培养基灌装的过程中，可能会出现一些常见问题。
下面我们来一一介绍这些问题及解决方法。
1. 灌装容器不够无菌导致污染在灌装液态培养基时，如果容器本身不够无菌，或者在灌装过程中净化技术不够，可能会导致灌装出的培养基污染。
这种情况下，可以在洁净室或者至少在有洁净工作环境的实验室操作，并采用适当的净化技术，如火焰消毒法和紫外线杀菌法。
2. 灌装过程中出现泡沫在灌装培养基的过程中，可能会出现空气泡沫。
空气泡沫不仅浪费培养基，而且可能也会影响培养基中微生物的生长情况。
解决方案包括在灌装前预先加热培养基、使用离心法或者去泡沫的添加剂，以消除泡沫。
3. 培养基灌装不充分培养基灌装不充分会导致不同培养基质量差异和生物学数据的不准确性。
可以通过修改培养基灌装技术、适当使用压力和检查实验室设备，确保灌装完全。
4. 培养基灌装过程中出现水珠水珠会在培养基灌装过程中出现，可能是因为容器表面有油或其他物质残留引起的。
可以使用纯水洗刷容器，并且可使用适当的洁净剂消除残余物质。
培养基模拟灌装试验(0777).
培养基模拟灌装试验（MFT）
无菌原料药和无菌制剂（非最终灭菌制剂） 生产出现如下情况
长期停产后复产 新生产线投产前 染菌事故复产
培养基模拟灌装试验（MFT）
六. 培养基灌装试验（MFT）样品的培养 和结果分析
样品的培养
置于30～35℃的温度下至少培养7天，然后 转入20～25℃至少培养7天。 在第三天和第七天至少观察培养基样品微 生物的生长情况一次，并且在检测期间的 最后一天至少再观察一次。
培养基模拟试验是无菌生产工艺的验证手段，是任何 非最终无菌药品生产必须进行的一项验证。
培养基模拟灌装试验（MFT）
二、培养基灌装试验的要求
模拟试验应尽可能模拟常规的无菌生产工艺。 每次灌装数量应大于 5000 瓶。
对于小批量产品，培养基灌装数量至少应等于产品 数量。 5000 瓶的染菌数应为0。 再验证周期 单一规格品种：2次/年。 多规格品种：每一规格品种 1次/年。 生产工艺、生产环境、主要设备变更时，连续试验3 批。 每位无菌操作者每年至少参加1 次成功的MFT 。
培养基模拟灌装试验（MFT）
环境验证
（1）HVAC系统的微生物、尘粒验证 （2）洁净区压差验证 （3）洁净区风速验证 （4）B级背景下A级单向层流验证
培养基模拟灌装试验（MFT）
无菌生产设备的灭菌验证
（注意：模拟分装设备应在无菌效期内进行） （1）灭菌设备如隧道烘箱、干热灭菌柜、湿
热灭菌柜灭菌效果验证 （2）直接接触无菌药品的设备、容器、管道
灭菌效果验证 （3）除菌过滤器除菌效果验证
培养基模拟灌装试验（MFT）
物料、用品及用具的灭菌
（1）无菌培养基的准备 （2）分装模拟替代物的灭菌 （3）中间体无菌验证。（如果需要的话） （4）直接接触无菌药品的内包材灭菌
培养基模拟灌装
培养基模拟灌装【基本概念】无菌工艺模拟试验就是指采用微生物培养基替代产品(无菌粉末分装的培养基灌装试验实际是将产品替代品溶入培养基中，不是直接替代产品)对无菌工艺进行评估的验证技术。
无菌工艺模拟试验也被称为培养基灌装或培养基灌装试验。
通常需要将培养基暴露于设备、容器密封系统的表面和关键环境条件中，并模拟实际生产完成工艺操作。
然后，将装有培养基的密闭容器进行培养以检查微生物的生长，并对结果进行评价，借以确定实际生产中产品被污染的概率。
【法规】[1]中国GMP 无菌附录第四十七条无菌生产工艺的验证应当包括培养基模拟灌装试验。
应当根据产品的剂型、培养基的选择性、澄清度、浓度和灭菌的适用性选择培养基。
应当尽可能模拟常规的无菌生产工艺，包括所有对无菌结果有影响的关键操作，及生产中可能出现的各种干预和最差条件。
培养基模拟灌装试验的首次验证，每班次应当连续进行3次合格试验。
空气净化系统、设备、生产工艺及人员重大变更后，应当重复进行培养基模拟灌装试验。
培养基模拟灌装试验通常应当按照生产工艺每班次半年进行1次，每次至少一批。
培养基灌装容器的数量应当足以保证评价的有效性。
批量较小的产品，培养基灌装的数量应当至少等于产品的批量。
培养基模拟灌装试验的目标是零污染，应当遵循以下要求:(一)灌装数量少于5000支时，不得检出污染品。
(二)灌装数量在5000至10000支时:1.有1支污染，需调查，可考虑重复试验;2.有2支污染，需调查后，进行再验证。
(三)灌装数量超过10000支时:1.有1支污染，需调查;2.有2支污染，需调查后，进行再验证。
(四)发生任何微生物污染时，均应当进行调查。
[2]EU GMP Annex 1 Manufacture of Sterile Medicinal Products66. Validation of aseptic processing should include a process simulation test using a nutrient medium (media fill).Selection of the nutrient medium should be made based on dosage form of the product and selectivity, clarity, concentration and suitability for sterilisation of the nutrient medium.67. The process simulation test should imitate as closely aspossible the routine aseptic manufacturing process and include all the critical subsequent manufacturing steps. It should also take intoaccount various interventions known to occur during normal production as well as worst-case situations.68. Process simulation tests should be performed as initialvalidation with three consecutive satisfactory simulation tests pershift and repeated at defined intervals and after any significant modification to the HVAC-system, equipment, process and number of shifts. Normally process simulation tests should be repeated twice a year per shift and process.69. The number of containers used for media fills should besufficient to enable a valid evaluation.For small batches, the number of containers for media fills shouldat least equal the size of theproduct batch. The target should be zero growth and the following should apply:When filling fewer than 5000 units, no contaminated units should be detected.When filling 5,000 to 10,000 units:a) One (1) contaminated unit should result in an investigation, including consideration of a repeatmedia fill;b) Two (2) contaminated units are considered cause for revalidation, following investigation.When filling more than 10,000 units:a) One (1) contaminated unit should result in an investigation;b) Two (2) contaminated units are considered cause for revalidation, following investigation.【实施指导】培养基模拟灌装的试验方法无菌工艺模拟试验必须尽可能模拟整个工艺过程，不同类型的无菌产品工艺流程有差别，这就要求无菌工艺模拟试验必须根据无菌产品的类型特点来设计试验方法。
培养基模拟无菌灌装试验(衣鸣)
Partner of Pharmaceutical
13
培养基模拟灌装试验的基本条件——人员
无菌服是人与产品或环境之间的屏障，必须保持无菌服的完整性。
当我们戴着面罩谈话、打喷嚏 或咳嗽时，会发生什么？
当戴着口罩时，呼吸是向上 运动的。
Partner of Pharmaceutical
14
培养基模拟灌装试验的基本条件——人员
Partner of Pharmaceutical
24
培养基模拟灌装试验的基本条件——方法
灌装体积
每只容器的灌装体积不少于总容积的1/3 同样，灌装体积也不宜过大 既要考虑到瓶倒转或旋转时，培养基能充分接触到容器和密封件的内表面，又要保
证容器内有足够的氧气支持微生物生长。
灌装数量
Partner of Pharmaceutical
22
培养基模拟灌装试验的基本条件——方法
与正常工艺一致的生产流程
冻干制剂的典型生产流程
配制
灌装
加塞
冻干
工艺一致性要素
从灭菌/除菌开始到完全灌装结束的全过程； 处方混合阶段采用了无菌过程也必须作为验证的一部分； 配制除菌后原液的保存，如取样、保存时间、物料的循环等操作； 容器、设备的CIP和SIP； 灌装操作； 冻干工艺过程模拟。
培养基模拟灌装试验的首次验证，每班次应连续进行3次合 格的试验。空气净化系统、设备、生产工艺及人员重大变更后， 应重复进行培养基模拟灌装试验。培养基模拟灌装试验通常应按 生产工艺每班次半年进行1次，每次至少一批。
Partner of Pharmaceutical
4
来自生产工艺的要求……
工艺特点
培养基模拟灌装试验验证方案
培养基模拟灌装试验验证方案一、研究目的和意义培养基的生产过程中，灌装是一个重要环节。
灌装的准确与否直接关系到培养基的质量和效果。
为了验证培养基灌装的准确性以及提高生产效率，进行培养基模拟灌装试验是必要的。
本文从试验方案的制定、具体步骤和结果分析等方面进行探讨。
二、试验方案的制定1.确定试验目标：验证培养基模拟灌装的准确性和可操作性。
2.选择适当的试验设备：选择一台能够准确模拟真实灌装流程的设备，例如自动灌装机。
3.确定试验参数：确定试验中需要测量和记录的参数，例如灌装速度、灌装量、灌装时间等。
4.制定操作流程：制定灌装试验的具体操作流程，包括设备准备、样品准备、灌装过程、数据采集等。
5.确定试验样品：选择一种常用的培养基作为试验样品，根据生产需求确定灌装量。
三、具体步骤1.设备准备：检查试验设备的工作状态，确保设备正常运行。
2.样品准备：准备试验样品，确保培养基的质量符合规定要求。
3.灌装过程：根据试验方案确定灌装参数，将培养基灌装到目标容器中。
4.数据采集：在灌装过程中记录和采集重要数据，例如灌装速度、灌装量、灌装时间等。
5.重复试验：进行多次试验，以获取可靠的数据并验证试验结果的可重复性。
四、结果分析1.数据处理：整理试验数据，计算平均值、标准差等统计数据。
2.数据分析：对试验结果进行分析，比较不同试验之间的差异和变异程度。
3.结果评估：评估培养基模拟灌装试验的准确性和可操作性，根据试验结果确定是否需要调整灌装参数。
4.结论和建议：根据试验结果提出相应的结论和建议，为实际生产中的培养基灌装提供参考依据。
五、实施方案1.确定试验计划：按照前述步骤制定实施方案，并明确各个步骤的操作要求和注意事项。
2.实施试验：按照试验方案进行试验，并确保每个步骤的操作准确无误。
3.数据分析和结果评估：对试验结果进行数据处理、分析和评估。
4.撰写报告：根据试验结果撰写试验报告，包括试验目的、试验方案、试验结果等内容。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
精心整理*ml灌装线培养基模拟灌装验证方案审批目录1.介绍……………………………………………………………………………………………............. ..错误!未指定书签。
2.目的……………………………………………………………………………………………..错误!未指定书签。
3.范围……………………………………………………………………………………………..错误!未指定书签。
4.职责……………………………………………………………………………………………..错误!未指定书签。
4.1.生产部职责 ....................................................................................... 错误!未指定书签。
4.2.质量保证部职责 (4)4.3质量控制部职责 (4)4.4.设备部、物资管理部门各职责 ............................................................. 错误!未指定书签。
5. 法规和指南…………………………………………………………………………………… ..错误!未指定书签。
5.1.法规................................................................................................. 错误!未指定书签。
5.2.指南................................................................................................. 错误!未指定书签。
6.参考文件………………………………………………………………………………………..错误!未指定书签。
7.生产工艺描述…………………………………………………………………………………..错误!未指定书签。
7.12.风险评估 .................................................................................................7.13.工艺风险分析 .......................................................................................... 错误!未指定书签。
7.14.模拟项目 ................................................................................................. 错误!未指定书签。
7.14.1模拟灌装过程 .......................................................................................... 错误!未指定书签。
7.14.2灌装机各分装器具经灭菌后的无菌组装 .................................................. 错误!未指定书签。
7.14.3模拟最多进入灌装间的人数..................................................................... 错误!未指定书签。
7.14.4人员干预.................................................................................................. 错误!未指定书签。
7.14.5模拟人员活动 .......................................................................................... 错误!未指定书签。
7.14.6模拟最差条件 .......................................................................................... 错误!未指定书签。
7.15.灌装体积 ....................................................................................... 错误!未指定书签。
7.16.模拟培养基灌装样品的培养和检查 .................................................. 错误!未指定书签。
7.17.人员 ............................................................................................ 错误!未指定书签。
7.18.工艺模拟 ...................................................................................... 错误!未指定书签。
7.19.取样计划 ....................................................................................... 错误!未指定书签。
7.20.培养基灌装产品的处理 ................................................................... 错误!未指定书签。
7.21.培养基模拟灌装清洁确认........................................................................ 错误!未指定书签。
✓本验证的目的是使用培养基模拟灌装试验来证明7ml灌装线的生产工艺、生产设备、工艺操作等过程、方法和各种程序能够防止微生物污染，本次培养基模拟灌装验证是每条生产线每班次每半年进行一次的确认活动无菌保证能力达到可接受的合格标准。
3. 范围本方案适用于7ml灌装线无菌灌装生产工艺过程的模拟，包含：✓模拟灌装过程中涉及到的生产工艺包括：产品的配制、存储和除菌过滤，西林瓶的清洗灭菌、免洗胶塞灭菌、分装器具组装、除菌过滤、无菌灌装、压塞、轧盖的全过程。
✓生产所用物料的转移，包括半成品的转移及灭菌后包材、器具等的转移。
4.职责4.1.4.2.4.3.4.4.✓对方案中的相关项目进行协助确认4.5.质量管理负责人职责✓批准方案✓批准报告5. 法规和指南为编写本方案，参考了以下法规和指南：5.1.法规✓国家食品药品监督管理总局（CFDA），中国，药品生产质量管理规范（2010年修订），2011年03月5.2.指南✓EudraLex第四卷欧盟药品生产质量管理规范指南医药产品人用及兽用，2008年11月✓美国食品药品监督管理局，美国，美国FDA行业指南—无菌工艺所生产的无菌药品—现行药品生产质量管理规范，2004年9月29日7.2. 模拟灌装验证流程图7.3.2生产制度灌装工艺每批次由1个班次执行。
具体的工艺操作过程如下。
7.3.3生产前检查在生产前检查环境卫生、设备、公共系统、上批次文件及物料和分装用具。
7.3.4操作前检查包括分装指令的接收和半成品交接确认，生产状态标识的检查。
7.3.5生产操作包括灌装间1操作人员的进入、分装器具组装前环境监测、分装器具的组装、制品除菌过滤、灌装和加塞操作。
7.3.6轧盖制品灌装加塞后经水平传送带传至轧盖间1轧盖输瓶网带，然后开始进行制品轧盖，将刚开始轧盖的制品抽样进行检查，检查合格后正式开始制品轧盖。
7.4.7.5.✓轧盖7.6.人员：所有参与无菌工艺过程的人员：✓生产线各个岗位上的操作人员，包括西林瓶清洗灭菌、胶塞及铝盖清洗灭菌、无菌过滤、灌装、轧盖等；✓质保人员；✓维修人员。
7.7.设备和器具：✓与物料直接接触的工艺设备，如灌装机；✓其他工艺设备：包括洗瓶机、灭菌隧道、轧盖机、湿热灭菌柜等；✓环境控制设备，包括RABS、层流罩、传递窗；✓监测系统与仪器，包括尘埃粒子测试仪、浮游菌取样仪等；7.8.7.9.本次模拟灌装批量约为20000瓶/次，灌装量3ml/瓶进行模拟，旨在使培养基充分的与生产用的器具、设备充分接触，从而全面检查生产工艺的无菌保证水平。
7.10.模拟物料和培养基7ml灌装线是将产品在无菌保证的条件下进行灌装的过程，主要工艺步骤包括西林瓶的清洗灭菌、免洗胶塞灭菌、无菌过滤、无菌灌装加塞、轧盖等。
根据PIC/SPI007-5《无菌工艺验证》的建议，无菌工艺模拟所需的培养基需要能支持大范围的微生物生长，也就是能支持诸如枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、黑曲霉和芽孢梭菌等大范围的微生物生长；胰蛋白胨大豆肉汤培养基（TSB）不仅适合于需氧菌的生长，而且适合真菌生长。
因此，本次模拟灌装采用TSB培养基作为模拟物料，并进行培养。
用TSB培养基模拟物料在灌装机中的灌装过程，然后进行压塞，轧盖等。
在工艺模拟过程中，需要对配制好的培养基和灭菌后的培养基进行无菌和促生长能力测试，以确认工艺模拟使用的培养基适合微生物的生长。
7.11.密闭和开放系统本工艺中包含在“密闭”和“开放”系统下的两种操作。
有无菌物料暴露的“开放”环节采用A级送可能性（P）发生的可能性是列出可能发生的原因及产生所描述的失效模式的可能性。
在现有或类似的设计/过程历史数据可用来评估可能性。
了解失效发生的可能性，帮助选择适宜的控制方法对所确定的风险进行控制。
描述失效发生的可能性（依据失效来源的描述）。
下表列出对于每种确认原因的可能性分级。
自动检测，或是通过手动方法进行检测。
描述失效的可检测性。
下表列出对于每种可检测性的分级。
在生产工艺过程中的很多步骤中会有一些操作对非最终灭菌产品的无菌水平存在关键的影响，通过以下的分析，确定在培养基模拟灌装过程中所需采取的模拟手段和工艺。
基于《人免疫球蛋白工艺风险评估报告》需要进行无菌工艺模拟验证，工艺的工序或关键控制点在下7.14.2灌装机各分装器具经灭菌后的无菌组装如设备部件组装、灌装针头的连接等；7.14.3模拟最多进入灌装间的人数包括现场操作人员（4人）、维修人员（1人）、现场QA人员（1人）等，但是同时在灌装间的总人数不超过5人；7.14.4人员干预（1）胶塞、灌装机部件、器具灭菌后放至相应SOP规定的最长时间前（48h）使用。