色谱柱常见问题(活动za)
液相色谱柱故障判断
漂移问题主要包括基线漂移和保留时间漂移
（1)基线漂移 一般说来，机器刚起动时，基线容易漂移，大概要半个小时的平衡时间，如
果，你用了缓冲溶液或缓冲盐，还有就是在低波长下（220nm）平衡时间相对会 比较长，但是，如果你在实验过程中发现基线漂移，则你要考虑下面的原因： ①紫外灯能量不足。
3
高效液相色谱柱常见的几种故障判断及排除方法
色谱柱或保护柱被污染或柱效降低； 温度变化造成的影响。 ②所出峰比预想的小。 解决方法： 样品黏度过大；进样品故障或进样体积误差；检测器设置不正确，定量环体 积不正确；检测池污染；检测器灯出现问题。 ③色谱图中未出峰。 解决方法： 系统未进样或样品分解； 泵未输液或流动相使用不正确； 检测器设置不正确； 针对以上情况成因作相应调整即可。 ④一个峰或几个峰是负峰。 解决方法： 流动相吸收本底高；进样过程中进入空气；样品组分的吸收低于流动相。 ⑤所有峰均为负峰。 解决方法： 信号电缆接反或检测器输出极性设置颠倒； 光学装置尚未达到平衡。 ⑥出现双峰或肩峰。 解决方法： 进样量过大；样品浓度过高； 保护柱或色谱柱柱头堵塞； 保护拄或色谱柱污染或失效； 柱塌陷或形成短通道。 ⑦前伸峰。 解决方法： 进样量或样品浓度高； 溶解样品的溶剂较流动。
气相色谱仪常见故障分析及解决方案小结
气相色谱仪常见故障分析及解决方案小结
1.分析结果异常
如果分析结果异常，可能是由于样品准备不当、柱子损坏、进样器堵塞、检测器故障等原因导致的。
解决方案：
-检查样品处理过程，确保样品准备正确。
-更换柱子，确保柱子没有损坏。
-清洗进样器，以确保进样器畅通。
-如果检测器失效，需要修复或更换检测器。
2.峰形异常
当峰形异常时，可能是由于进样量不准确、柱子温度不稳定、流速设置不正确等原因导致的。
解决方案：
-重新校准进样量，确保进样量准确。
-检查柱子温度控制系统，确保柱子温度稳定。
-根据分析要求调整流速，确保流速设置正确。
3.噪声干扰
当出现噪声干扰时，可能是由于仪器地线干扰、进样器漏气、柱子老化等原因导致的。
解决方案：
-检查仪器地线连接状态，确保地线连接正确。
-检查进样器密封性，排除漏气情况。
-更换柱子，柱子老化可能会导致噪声干扰。
4.气源问题
当气相色谱仪的气源出现问题时，可能是由于气源压力不稳定、气源流量不足等原因导致的。
解决方案：
-检查气源压力调节装置，确保气源压力稳定。
-调整气源流量，确保气源流量满足实验要求。
5.进样器问题
当进样器出现问题时，可能是由于进样器堵塞、进样器灵敏度不足等原因导致的。
解决方案：
-清洗进样器，确保进样器畅通。
-调整进样器灵敏度，以适应不同的样品。
综上所述，气相色谱仪常见故障的分析及解决方案包括：分析结果异常、峰形异常、噪声干扰、气源问题、进样器问题等。及时排除这些故障可以提高仪器的分析准确性和稳定性，保证实验结果的可靠性。在使用气相色谱仪时，操作人员需要注意仪器的维护保养，以减少故障的发生。通
高压液相色谱HPLC常见故障及排除方法[重点]
![高压液相色谱HPLC常见故障及排除方法[重点]](https://img.taocdn.com/s3/m/6e2358a11b37f111f18583d049649b6648d70936.png)
高压液相色谱HPLC常见故障及排除方法
诊状
(一)保留时间变化
可能的原因: 解决方法
1.柱温变化:柱恒温
2.等度与梯度间未能充分平衡:至少用10倍柱体积的流动相平衡柱
3.缓冲液容量不够:用>25mmol/L的缓冲液
4.柱污染:每天冲洗柱
5.柱内条件变化:稳定进样条件,调节流动相
6.柱快达到寿命:采用保护柱
(二)保留时间缩短
可能的原因: 解决方法
1.流速增加:检查泵,重新设定流速
2.样品超载:降低样品量
3.键合相流失:流动相PH值保持在3~7.5检查柱的方向
4.流动相组成变化:防止流动相蒸发或沉淀
5.温度增加:柱恒温
(三)保留时间延长
可能的原因: 解决方法
1.流速下降:管路泄漏,更换泵密封圈,排除泵内气泡
2.硅胶柱上活性点变化:用流动相改性剂,如加三乙胺,或采用碱至钝化柱
3.键合相流失:同前(二)3
4.流动相组成变化:同前(二)4
5.温度降低:同前(二)5
(四)出现肩峰或分叉
可能的原因: 解决方法
1.样品体积过大:用流动相配样,总的样品体积小于第一峰的15%
2.样品溶剂过强:采用较弱的样品溶剂
3.柱塌陷或形成短路通道:更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件
4.柱内烧结不锈钢失效:更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品
5.进样器损坏:更换进样器转子
(五)鬼峰
可能的原因: 解决方法
1.进样阀残余峰:每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗
2.样品中未知物:处理样品
3.柱未平衡:重新平衡柱,用流动相作样品溶剂(尤其是离子对色谱)
4.三氟乙酸(TFA)氧化(肽谱) : 每天新配,用抗氧化剂
5.水污染(反相) : 通过变化平衡时间检查水质量，用HPLC级的水
甲苯的气相色谱分析(活动za)
甲苯的气相色谱分析——内标法定量
一、追求要求
. 学会使用内标法定量测定。
. 学会熟练使用。
. 学会测定峰高校正因子。
二、方法原理
柱是中等极性的色谱，在一定的色谱操作条件下可对一些简单的苯系化合物进行完全的分离。
三、仪器与试剂
.仪器：成都科捷分析仪器公司生产的气相色谱仪、气体发生器、实验三制备的色谱柱、、微量注射器、支通用注射器、容量瓶
.试剂：苯、甲苯（以上均为分析纯）。丙酮洗针液
四、实验步骤
．配制标准溶液称一干燥洁净的容量瓶质量，（称准至），用医用注射器吸取甲苯注入容量瓶内，称重，计算出甲苯质量，再用另一支注射器取苯注入容量瓶，再称重，求出瓶中苯的质量（称准至），摇匀备用。
. 配制甲苯试样溶液另取一干燥洁净的试剂瓶，先称出瓶的质量，然后用注射器吸取甲苯试样，注入瓶中，称出（瓶和甲苯）质量，再求出甲苯试样质量。再用另一支注射器取苯（内标物）注入容量瓶，再称重，求出瓶中苯的质量（称准至），摇匀备用。
. 色谱仪的开机和调试
（）打开气体发生器，流速为，十分钟后排水。
（）将载气通入主机气路，检漏，调节载气流速为，通载气半个小时将气路中的空气等赶走。
（）打开色谱主机电源，在控制面板上对气化室、柱箱进行控温，将温度分别调节为℃，℃℃。
（）打开色谱数据处理机，输入测量参数。
（）的点火
打开空气开关，调节流量为～，设置检测器温度为℃。待检测器温度恒定至℃，打开氢气开关，将流量调节至左右，点火，点燃后将氢气流量降至－。
.标准溶液和未知试样的分析测定
（）观察仪器谱图基线是否平直，待仪器电路和气路系统达到平衡，基线平直后，用微升清洗过的微量注射器吸取标准试样－微升进样，分析测定，色谱图走完后记录样品名对应的文件名，打印出色谱图及分析测试结果。重复操作三次。记录分析结果。
色谱柱管理规程(活动za)
色谱柱管理规程
.追求
本文件要求了色谱柱的采购、接收、使用、保养和保存，以确保色谱柱达到合理应用和规范应用的管理规范。
.适用范围
本文件适用于本公司色谱分析用色谱柱的管理。
.责任
.本文件由质量部负责起草，质量部部长审核，生产技术副总经理批准。
.质量部负责实施。
主管负责监督检查。
.内容
.色谱柱的采购
根据检验需要提出购买申请，注明柱子固定性类型、购买数量、规格、用途等，主管审核批准。由供应部从定点供应商处购买。
.接收
.编号、登记
对于新购进的色谱柱必须造册编号登记，贴上标签,注明编号。编号用阿拉伯数字表示，以此类推不重复使用。
填写色谱柱登记表，内容包括:生产公司、品名、型号规格、编号、购进进度、启用进度、固定相类型、单价等。
.存放
色谱柱分类存放。不同的色谱柱按柱子当时柱效不同放入不同的盒中，并标注不同状态以便区分避免混淆。色谱柱按照不同的柱效分为三类，使用良好。需要保养。停止使用。
保养前放入“需要保养”的盒中。
保养后并能提高柱效达到检验要求的放入“使用良好”的盒中。
保养后不能提高柱效并影响检验结果的放入“停止使用”的盒子中。
.使用与保养
每启用一根色谱柱,在色谱柱标签上填写启用日期，放入“使用良好”的色谱柱盒中。
对于不同的样品可使用不同的色谱柱，也可使用同一根色谱柱，但必须确保色谱柱类型、柱效符合要求。
对于一些使用频率少的柱子,因为放置进度长,容易干柱影响柱效, 每根柱子每三个月保养一次,每一次做好保养记录。
频繁使用的柱子，因为使用进度长，造成柱效降低或柱压增高等不利于检验结果的现象时，也要对柱子
色谱柱塌陷
色谱柱塌陷
色谱柱塌陷通常是由以下原因造成的：
1. 色谱柱老化：色谱柱在使用过程中会出现老化现象，使得柱效下降，从而引发塌陷问题。
2. 柱内压力过高：当色谱柱内部压力过大时，可能会导致固定相流失，从而引发塌陷问题。
3. 柱内溶液过浓或过稠：如果色谱柱内的溶液过于浓稠，可能会导致固定相无法正常分离，从而引发塌陷问题。
4. 柱温过高：过高的柱温可能会导致固定相和流动相发生反应，从而引发塌陷问题。
5. 柱床填充不均匀：如果在填充色谱柱床时操作不当，导致填充不均匀，可能会引发塌陷问题。
为防止色谱柱塌陷，可以使用以下方法：
1. 定期对色谱柱进行维护和保养，包括清洁和更换固定相。
2. 调整色谱柱内的压力，使其保持在适当的范围内。
3. 选用适当的溶剂，避免使用过于浓稠的溶液作为流动相。
4. 控制柱温在合理的范围内，避免过高的柱温导致固定相和流动相发生反应。
5. 在填充色谱柱床时，确保填充均匀，避免出现填充不均匀的情况。
综上所述，为防止色谱柱塌陷，我们需要定期对色谱柱进行
维护和保养，控制好柱内压力、温度、流动相浓度以及填充均匀度等方面的问题。
经典液相色谱法习题(活动za)
第章经典液相色谱法习题
（一）选择题
单选题
．组分在固定相中的质量为()，在流动相中的质量为()，而该组分在固定相中的浓度为(／)，在流动相中的浓度为(／)，则此组分的分配系数是( )。
／／／() ／
．在柱色谱法中，可以用分配系数为零的物质来测定色谱柱中的( )。
流动相的体积(相当于死体积) 填料的体积
填料孔隙的体积总体积
．在以硅胶为固定相的吸附柱色谱中，正确的说法是( )。
组分的极性越强．被固定相吸附的作用越强
物质的相对分子质量越大，越有利于吸附
流动相的极性越强，组分越容易被固定相所吸附
吸附剂的活度级数越小，对组分的吸附力越大
．纸色谱法与薄层色谱法常用正丁醇乙酸水(，体积比)作为展开剂，正确的操作方法是( )。
三种溶剂混合后直接用作展开剂三种溶剂混合、静置分层后，取上层作展开剂
三种溶剂混合，静置分层后，取下层作展开剂依次用三种溶剂作展开剂．离子交换色谱法中，对选择性无影响的因素是( )．
树脂的交联度树脂的再生过程
样品离子的电荷样品离子的水合半径
．下列说法不对的是( )。
用纸色谱分离时，样品中极性小的组分值大
用反相分配薄层时，样品中极性小的组分值小
用凝胶色谱法分离，样品中相对分子质量小的组分先被洗脱下来
用离子交换色谱时，样品中高价离子后被洗脱下来
．在一硅胶薄板上用不同的溶剂系统分离咖啡碱和氯原酸，结果如下，从中选出最好的溶剂系统是( )。
氯仿丙酮()：咖啡碱的为，氯原酸的为
氯仿丙酮甲醇乙酸()：咖啡碱的为，氯原酸的为
正丁醇乙酸水()：咖啡碱的为，氯原酸的为
正丁醇乙酸甲醇()：咖啡碱的为，氯原酸的为
色谱柱峰形后拖尾原因造成的 色谱柱常见问题解决方法
色谱柱峰形后拖尾原因造成的色谱柱常见问
题解决方法
1.柱物理损坏
色谱柱有物理损坏是造成峰形拖尾的根源。的解决方法就是更换新柱。
2.柱内填料污染
流动相和样品中的杂质是色谱柱紧要污染源。
流动相所用的各种溶剂至少是分析纯，尽量使用色谱纯试剂。流动相所用的水要是超纯水或全玻璃器皿双蒸水。用前先用0.45um 溶剂微孔过滤（器）过滤，除去可能存在的微粒。流动相建议现用现配，对于含盐的溶液尤其注意长置会产生细菌或显现沉淀。此外还得保证储存流动相的容器清洁。
多而杂样品可选用0.45um溶剂微孔过滤（器）或样品预处理柱对样品进行预处理，确保样品中不含微粒杂质。若样品不便处理，要使用保护柱。柱内填料污染时，可将柱头螺丝卸下，用专用工具挖出柱内前段被污染填料，再以相同的填料重新填入，修复。或以能溶解污染物的流动相按色谱柱使用的相反方向，冲洗色谱柱（约20至30倍柱体积，或视实在情况而定；另外，此时不能接检测器），将污染物冲杰出谱柱，再按色谱柱标明的使用方向使用。
3.柱进口处有异物
当断定是柱进口处有异物时，可将柱头螺丝卸下，取出滤帽并将其置于20%硝酸溶液中，用超声波清洗约20分钟，再置于超纯水中，并用超声波清洗约10分钟，重新装入色谱柱内即可。
4.样品浓度过高致使柱超载
样品在柱上超载能引起峰展宽，拖尾（或伸舌）。
适当减小进样量或样品浓度（需要时，可提高检测器灵敏度）直至峰形和保留时间不再更改，便可除去这种不良影响。减小进样量还能改善其分别度。正常情况下，样品中每种化合物在1504.6mm 柱中进样量保持在3～50ug范围内，不会引起明显超载。
8种常见液相色谱峰解析常见原因及解决办法
8种常见液相色谱峰解析，常见原因及解决办法！
对于每一个身经百柱的实验人员来说，液相色谱图是他们打开未知物质世界的大门，科研中的很多问题都能从色谱图中得到很好的反映，有些问题可以通过改变设备参数得到解决，而有些问题则必须通过修改操作程序来解决，毕竟，正确选择色谱柱和流动相才是得到好的色谱图的关键。
小编在此根据大家实践中可能会经常遇到的一些图谱问题进行了整理汇总，大家一起来看一下吧。
1、拖尾峰
1、筛板阻塞：柱子两头的过滤筛板如果堵塞，样品就会在筛板部分受阻而形成时间延迟，使得样品在柱后流出时峰型形成拖尾。需要通过反冲色谱柱，或者更换筛板。
2、色谱柱塌陷：是指色谱柱由于其它原因引起了柱效率丧失，不能对物质形成保留，使得物质不在固定相上保留而随流动相流出，但是又还有一点柱效，因此形成拖尾。需要重新填充色谱柱或者更换色谱柱。
3、有污染：即样品不在同一起跑线起跑，从后面开始跑得到达终点稍晚，表现出拖尾。更换色谱柱或者采用有机溶剂梯度洗脱1h以上，以冲洗柱子。
4、流动相PH值选择错误：如某PH下有的样品存在分子型和离子型的动态平衡，离子型的陆续向分子型转化就会表现出拖尾。调节PH值可抑制分子解离，改善拖尾，对于碱性化合物，相对较低的PH值更有利于得到对称峰。
2、前沿峰
1、样品过载：被保留的样品在正常出峰时间前陆续出来，形成前沿峰。降低样品含量。
2、样品溶剂选择不恰当：当样品溶剂的洗脱能力大大强于流动相时会出现前沿峰，例如，在反相色谱中用已腈做样品溶剂，而流动相的洗脱力较弱时会出现前沿峰。选择流动相或者接近流动相的比例作为样品溶剂。
气相色谱常见问题及解决方法
气相色谱常见问题及解决方法
气相色谱常见问题及解决方法包括：
1. 色谱峰形状畸变问题：可能原因包括柱温不稳定、进样量过大、进样器污染、柱老化等。解决方法可以是调节柱温稳定性、减少进样量、清洁进样器、更换柱子等。
2. 色谱峰分离不良问题：可能原因包括柱子选择不合适、进样器选择不合适、流速不合适等。解决方法可以是选择合适的柱子、进样器、调整流速等。
3. 柱子寿命较短问题：可能原因包括进样量过大、进样器污染、样品中存在较多杂质等。解决方法可以是减小进样量、清洁进样器、预处理样品等。
4. 色谱峰尾扩散问题：可能原因包括柱温过高、流速过快、柱老化等。解决方法可以是降低柱温、调整流速、更换柱子等。
5. 色谱峰漂移问题：可能原因包括进样器温度过高、进样器污染、柱子老化等。解决方法可以是降低进样器温度、清洁进样器、更换柱子等。
6. 噪声问题：可能原因包括进样器污染、柱子老化、仪器问题等。解决方法可以是清洁进样器、更换柱子、维护仪器等。
7. 保留时间不稳定问题：可能原因包括进样量不稳定、柱温不稳定、流速不稳定、进样器问题等。解决方法可以是调整进样
量、提高柱温稳定性、稳定流速、检查并维护进样器等。
8. 色谱柱效不稳定问题：可能原因包括柱子老化、进样器问题、进样量过大等。解决方法可以是更换柱子、检查并维护进样器、减小进样量等。
这些是气相色谱常见问题及解决方法的一些例子，具体问题和解决方法还需根据实际情况来确定。
离子色谱柱的常见故障及排出方法 色谱柱如何操作
离子色谱柱的常见故障及排出方法色谱柱如
何操作
离子色谱柱紧要由确定内径的柱管加上不同类型的填料所构成，针对离子色谱流动相比较多的接受酸、碱、盐的特点。
离子色谱柱的常见故障及排出方法：
1、柱压上升可能的原因有：
（1）色谱柱过滤网板被玷污，需要更换。
（2）柱接头拧得过紧，使输液管端口变形。
（3）PEEK材料的管子切口不齐。
2、分别度降低可能的原因有：
系统有泄漏时分别度会降低；
分别柱被玷污后柱容量因子k值变小；
淋洗液类型和浓度不合适等。
3、死体积增大
分别柱入口树脂损失造成死体积增大或树脂床进入空气使树脂床产生沟流会使分别度下降。若分别柱入口处显现空隙，可填充一些惰性树脂球以减小死体积的影响。
4、保留时间缩短或延长
色谱峰保留时间的更改会影响待测组分的定性和容量，由于在色谱分析中稳定的保留时间对获得精准、牢靠的结果是特别紧要的。离子色谱中影响保留时间稳定的因素有以下几个原因：
（1）仪器的某部分可能有漏液。（如：接头处没拧紧等）
（2）系统内有气泡使得泵不能按设定的流速传送淋洗液。
（3）分别柱交换容量下降，使保留时间缩短。
（4）由于抑制器的问题引起保留时间的变化。
（5）使用NaOH淋洗液时空气中CO2对保留时间的影响。
色谱柱的使用寿命，除了与所分析的样品和流动相及使用频率有关系外，最紧要的是与日常的委会紧密相关。为延长色谱柱的使用寿命，维护您的利益，请认真阅读此部分。色谱柱的使用寿命紧
要是分局柱效和柱压两个指标来衡
色谱柱的使用寿命，除了与所分析的样品和流动相及使用频率有关系外，最紧要的是与日常的委会紧密相关。为延长色谱柱的使用寿命，维护您的利益，请认真阅读此部分。
色谱柱柱压一直慢慢升高
色谱柱柱压一直慢慢升高
最近我们在实验室使用的一根色谱柱的柱压一直慢慢升高，导致实验结果受到一定影响。我们观察了一下，发现这种情况可能是由以下几个原因导致的：
1. 色谱柱本身老化或损坏。如果色谱柱使用时间较长或者经常被不当使用，可能会导致柱内压力升高。
2. 流动相流量过大。如果流量过大，会导致色谱柱内相互作用力增大，从而使柱压升高。
3. 色谱柱颗粒度过细或过粗。如果颗粒度过细或过粗，也会导致柱内相互作用力增大，从而使柱压升高。
4. 流动相的组成不良。如果流动相的组成不良，也会导致色谱柱内相互作用力增大，从而使柱压升高。
为了解决这个问题，我们可以采取以下几种措施：
1. 更换一根新的色谱柱，确保色谱柱的质量。
2. 调整流动相的流量，使其在正常范围内。
3. 确认色谱柱的颗粒度是否符合要求，如需更换，及时更换。
4. 检查流动相的组成是否正确，进行必要的调整。
总之，色谱柱柱压的升高可能是由多种原因导致的，需要我们仔细分析产生原因，并采取相应的措施来解决问题。
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色谱柱常见问题
高效液相色谱常见问题与解答
1 何谓反相柱、正相柱？
答：“反相”和“正相”的概念是液相色谱法早期提出的概念，当时键合相色谱柱尚未出现，固定相被涂覆在载体表面，极易流失，为此科学家对流动相使用给出了合理的建议：流动相极性与固定液极性应具有较大差别，以减少固定液流失。固定相极性弱于流动相时的液相色谱法被称为反相色谱法，固定相极性强于流动相时的液相色谱法被称为正相色谱法。尽管目前键合相色谱柱已成为主流，但这一概念在色谱方法开发、预测出峰顺序等方面具有重要意义。
由上面的介绍可知具体的色谱方法、色谱柱属于正相还是反相不仅取决于固定相极性，同时还取决于流动相极性。C18(硅胶键合十八烷基硅烷)、C8(硅胶键合辛基硅烷)、PH(硅胶键合苯基硅烷)等色谱柱，由于固定相极性极低，比目前已知的任何流动相的极性都要低，因而是标准的反相柱；Silica(硅胶)、NH2(硅胶键合氨丙基硅烷)具有较高的极性，主要用于分离带有极性基团的化合物，所用流动相的极性通常低于这些固定相，因而是标准的正相柱。CN(硅胶键合腈丙基)的极性适中，当流动相极性超过CN时，它属于反相柱，反之则是正相柱。
2 色谱柱规格对分析结果会产生何种影响？
答：色谱柱内径决定载样量，载样量与内径的平方成正比；色谱柱长度与塔板数成正比，与柱压成正比；粒径影响涡流扩散相，粒径越小涡流扩散相越小，柱效越高，粒径与柱效近似成反比；粒径越小，压力也越大，压力与粒径的平方成反比。填料孔径对分析对象的分子量有限制，当孔径为分析物尺寸的5倍以上时，分析物才能顺利通过孔隙，孔径处于60~120 Å的色谱柱适用于相对分子量小于10000的分析物，孔径为300 Å的色谱柱可以满足分子量处于10000以上的大分子化合物分析。
液相色谱柱坏了的表现
液相色谱柱坏了的表现
液相色谱柱损坏的表现有以下几种：
1. 峰形不对称或分离效果不理想：柱损坏可能导致峰形不对称或分离不完全，这是因为柱内填料受损或填料颗粒失去均一性导致的。
2. 背景噪音增加：柱损坏可能导致背景噪音增加，这是因为损坏的柱可能会释放出杂质或污染物。
3. 峰形畸变：柱损坏可能导致峰形畸变，如尖峰或尾峰的出现，这是因为柱内填料不均匀或柱壁破裂导致的。
4. 分离能力变差：柱损坏可能导致分离能力下降，峰与峰之间的距离变短或重叠，分析结果不准确。
5. 压力升高或波动：柱损坏可能会导致系统压力升高或波动，这是因为柱内填料破碎或堵塞导致的。
需要注意的是，以上表现也可能是其他因素引起的问题，因此在确定柱损坏之前，应仔细检查仪器设备的其他部分，排除其他问题的可能性。
气相色谱常见问题及解决方法
气相色谱常见问题及解决方法
气相色谱（Gas Chromatography，简称GC）是一种分离和鉴
定化合物的常用分析技术，它通过样品中化合物在气相和固定相之间的分配行为来实现分离效果。GC在很多领域中都有广
泛的应用，包括环境监测、食品安全、药物研究等。然而，在进行GC分析的过程中，常常会遇到一些问题，比如峰形异常、背景噪声、峰分离不良等。本文将介绍一些常见的气相色谱问题，并提供相应的解决方法。
问题一：峰形异常
峰形异常是指在气相色谱图上出现的不正常的峰形，比如峰宽过宽、峰高不对称、肩峰等。峰形异常可能由多种因素引起，包括进样量不当、进样器温度不稳定、柱温度梯度不合适、柱老化等。
解决方法：
1. 检查进样量：确保样品进样量适当，避免过大或过小的进样量对分析结果造成影响。可以通过逐渐增加或减小进样量来优化峰形。
2. 检查进样器温度：确保进样器温度稳定，尽量避免温度的波动。可以使用稳定性良好的热解吸器来缓解温度波动的问题。
3. 优化柱温度梯度：柱温度梯度是控制分离效果的重要参数。可以通过调整柱温度梯度来改善峰形。通常情况下，初始温度
设置为较低的温度，然后逐渐升温。
4. 更换老化的柱：如果柱老化严重，也会导致峰形异常。在出现峰形异常时，可以考虑更换新的柱。
问题二：背景噪声
背景噪声是指在气相色谱图上出现的不相关的信号，它会干扰到目标化合物信号的检测。背景噪声可能由多种因素引起，包括进样器的污染、仪器的电源干扰、环境的干扰等。
解决方法：
1. 清洁进样器：定期清洁进样器，避免进样器表面的污染物带入样品。可以使用溶剂或有机溶剂进行清洗。
安捷伦液相色谱仪常见故障及相应解决方法 液相色谱常见问题解决方法
安捷伦液相色谱仪常见故障及相应解决方法液相色谱常见问题解决方法
一、液相色谱仪峰分叉怎么回事？
造成这种情况的原因一般是色谱柱被污染，或柱头填料塌陷导致的。
对于*种情况，先用纯水反向冲洗柱子，然后换成甲醇冲洗，接着用甲醇+异丙醇（4+6）冲洗柱子（冲洗时间的长短由样品污染的情况而定），再换成甲醇冲洗，然后用纯水冲洗，zui后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。如冲洗后仍旧出峰不佳，则考虑第二种情况。
对于第二种情况，拧开柱头，检查柱填料是否硬结或塌陷。去除硬结部分（污染的填料），装入新填料，滴一滴甲醇，填料下陷，再填，用与柱内径相同的顶端平滑的不锈钢杆压紧，再填平，滴甲醇，再压紧反复几次，直至装满填平。柱头用甲醇冲洗干净，擦净柱外壁的填料，拧紧柱头，用纯甲醇冲洗30分钟以上。
二、如何排出液相色谱仪气泡溢出的故障？
流动相内产生都无法清除不断产生的气泡，紧要是由于过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内，过滤器内部由于霉菌的生长繁殖，形成菌团，堵塞了过滤器，缓冲液难以流畅地通过过滤器，空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。
过滤器浸泡于5%硝酸溶液中，超声清洗几分钟即可；亦可将过
滤器浸泡于5%硝酸溶液中12～36小时，轻轻震荡几次，再将过滤器用纯水清洗几次，打开泄压阀，打开purge键清洗脱气，如仍有气泡不断从过滤器冒出，连续将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中，如没有气泡不断从过滤器中冒出，说明过滤器内部的霉菌菌团已被硝酸破坏，流动相可以流畅地通过过滤器。打开泄压阀，打开泵，流速调至1.0～3.0ml/min，纯水冲洗过滤器1小时左右。即可将过滤器清洗干净。关闭泄压阀，纯甲醇冲洗半小时即可。
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高效液相色谱常见问题与解答
何谓反相柱、正相柱？
答：;反相;和;正相;的概念是液相色谱法早期提出的概念，当时键合相色谱柱尚未出现，固定相被涂覆在载体表面，极易流失，为此科学家对流动相使用给出了合理的建议：流动相极性与固定液极性应具有较大差别，以减少固定液流失。固定相极性弱于流动相时的液相色谱法被称为反相色谱法，固定相极性强于流动相时的液相色谱法被称为正相色谱法。尽管目前键合相色谱柱已成为主流，但这一概念在色谱方法开发、预测出峰顺序等方面具有重要意义。
由上面的介绍可知具体的色谱方法、色谱柱属于正相还是反相不仅取决于固定相极性，同时还取决于流动相极性。(硅胶键合十八烷基硅烷)、(硅胶键合辛基硅烷)、(硅胶键合苯基硅烷)等色谱柱，由于固定相极性极低，比目前已知的任何流动相的极性都要低，因而是标准的反相柱。(硅胶)、(硅胶键合氨丙基硅烷)具有较高的极性，主要用于分离带有极性基团的化合物，所用流动相的极性通常低于这些固定相，因而是标准的正相柱。(硅胶键合腈丙基)的极性适中，当流动相极性超过时，它属于反相柱，反之则是正相柱。
色谱柱规格对分析结果会产生何种影响？
答：色谱柱内径决定载样量，载样量与内径的平方成正比。色谱柱长度与塔板数成正比，与柱压成正比。粒径影响涡流扩散相，粒径越小涡流扩散相越小，柱效越高，粒径与柱效近似成反比。粒径越小，压力也越大，压力与粒径的平方成反比。填料孔径对分析对象的分子量有限制，当孔径为分析物尺寸的倍以上时，分析物才能顺利通过孔隙，孔径处于;的色谱柱适用于相对分子量小于的分析物，孔径为;的色谱柱可以满足分子量处于以上的大分子化合物分析。
液相色谱分析中如何才能提高分离度？
答：下式为分离度计算公式
：柱效()反映色谱柱性能，柱效越高，分离度越好。在其他条件恒定的情况下，塔板数增加一倍，分离度仅提高。操作中，可通过下面两种方式增加塔板数进而提高分离度：其一，使用长柱或双柱串联，但也会使分离进度大大延长。其二，使用细粒径填料的色谱柱，但这需要耐更高压力的液相色谱系统。相比之下后者更为可取。
;：选择性()是指色谱柱流动相体系分离两个化合物的能力。选择性主要与固定相、流动相组成以及柱温等因素有关，与保留值也密切相关，其中固定相和流动相组成影响较大。以最常见的反相模式为例，反相柱(包括、、等)是以分配作用对化合物进行保留的，不同化合物的分离是基于它们在键合相与流动相中分配系数的差异，如果两种化合物的水溶性、在烷烃水体系的分配系数等方面存在明显差异，那么这些化合物通常是能够利用反相柱达到分离。柱对具有苯环的化合物具有特殊保留。正相模式下，硅胶柱、胺基柱、氰基柱与带有极性基团的化合物之间存在极性相互作用，对化合物的基团具有选择性，常常用于结构类似物、异构体化合物的分离。流动相方面，降低流动相的洗脱强度通常可以增大分离度。而有机溶剂类型也会影响分离，比如反相条件下，乙腈和甲醇的选择性就存在很大差异，这种差异需要在实践中摸索，但无论如何，多种溶剂类型带给我们更多的实现分离的可能。
：随着容量因子的增大，分离度也随之增加，这种影响在值较低时非常明显，当值大于时，值增加对分离度的影响就不再显著，这就告诫无原则地提高值以增大分离度是没有意义的。增加键合相密度能够提高值。另外改变键合基团类型也能改变值，比如在反相色谱中，随着键合相碳链长度的增加，值逐渐增大。
色谱峰的峰形是怎样衡量的？有何要求？
理论上讲，色谱峰应符合高斯曲线分布，然而实际上任何色谱峰都对高斯曲线分布存在一定的偏离，亦即不对称。峰拖尾可以用不对称因子()或拖尾因子()来衡量，显然不对称因子的说法更准确，因为色谱峰存在前延、完美对称、拖尾三种形态。一般来说，制药行业以拖尾因子作为评测标准，而其他行业则多采用来测定峰形。
对于药物分析，通常有明确的要求，应处于某一范围之间，比如我国药典要求某些药物的拖尾因子应处于之间。其他行业尚无较为明确的要求。
什么是梯度洗脱？什么情况下使用梯度洗脱？
答：为了改善分析结果，某些操作需要连续改变流动相中各溶剂组分的比例以连续改变流动相的极性，使每个分析组分都有合适的容量因子，并使样品种的所有组分可在最短进度内实现最佳分离，这种洗脱方式称为梯度洗脱。
梯度洗脱可在下列情形中发挥重要作用：
在等度下具有较宽值的多种样品分析。
大分子样品分析。
样品含有强保留的干扰物，在目标化合物出峰后设置梯度洗脱，将干扰物洗脱出来，以免其影响下一次数据采集。
分析方法建立时，不知道其洗脱情况，使用梯度洗脱，找出其较优的洗脱条件。
何谓封端？封端的意义是什么？
硅胶表面的硅羟基()密度为，由于空间位阻的存在，硅烷化键合反应最多只能覆盖的硅羟基，超过一半的硅羟基是活性硅羟基。这些硅羟基与化合物的极性基团存在极性相互作用和离子交换作用，为化合物的保留增加了不被期望的作用力，往往会影响峰形。用短链氯硅烷（如三甲基氯硅烷）键合活性的硅羟基，可以减小甚至消除这种影响，这种操作被称为封端()。
封端处理的意义：
抑制了特异性吸附，提高了色谱峰的对称性，并改善了分离效果。
在一定程度上掩蔽了硅胶表面，使其对碱性环境的耐受性增强。
通过空间位阻掩盖了键合反应形成的键，使其对酸性环境的耐受性增强。
可能会影响对极性样品的选择性。
柱床塌陷和键合相塌陷
柱床塌陷是指色谱柱使用一段进度后色谱柱入口处的柱床产生可见的空隙。该空隙的存在增大了死体积，会导致色谱柱柱效下降。造成柱床塌陷的原因如下：其一，色谱柱填装时的压力过低，填装不紧密，在高压下使用一段进度，开始出现空隙。其二，操作压力超出色谱柱填料的耐压值，导致填料颗粒破碎产生空隙。其三，流动相溶解填料导致空隙出现。键合相塌陷是指由于
流动相极性与键合相极性相差太大，键合相无法在流动相中十足伸展而倒伏、缠结在一起，比如普通在纯水相
条件下。相塌陷会导致色谱柱对化合物的保留不足。
系统压力升高的原因及排除
使用者通过观察仪器的系统监测掌握系统的压力，如果发现压力偏高，不要立即认为;柱压高了;，因为系统压力通常由柱前压力、色谱柱压力和流通池压力加合而成。此时正确的做法是：在操作条件下，测定系统压力，得到总。卸下色谱柱，在相同条件下，测定柱前压力，得到前。用两通将泵流出管路与流通池连接，在操作条件下，测定压力，得到(前后)。通过计算找出压力高是来自柱前、色谱柱还是柱后。
以上情形假设没有安装保护柱，如果安装了保护柱，压力升高时应先测试保护柱的压力，以便确认问题是否来自保护柱。
系统压力不稳定
通常情况下，泵压的变动值超过了，系统压力就属于不稳定的范畴。导致系统压力不稳定的最直接原因为流动相流量和组成输出的不稳定，而导致流动相输出不稳定的原因通常包括溶剂互容性较差、系统漏液、系统存在气泡以及输液系统部件工作失效等等。下面将介绍排除;系统压力不稳;的方法。