激素对血糖浓度的影响实验培训课件
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胰岛素肾上腺素血糖ppt课件
酒精棉球消毒，用注射器从心脏取血2-3ml。搜集于干净试管中，静置或离心， 3000转/分钟离心8分钟，至血清析出。取血终了，用干棉球压迫血管止血。
3．注射激素： 一只兔子注射胰岛素；皮下注射，剂量为 0.75U/kg 体重。做上标志，记录注
射时间。 另一只兔子注射肾上腺素：皮下注射，剂量为 0.4mg/kg 体重。记录注射时间。
➢ 血糖程度坚持恒定是糖、脂肪、氨基酸代谢 协调的结果，也是肝、肌、脂肪组织等各器 官组织代谢协调的结果。
➢ 机体的各种代谢以及各器官之间能这样准确 协调，以顺应能量、燃料供求的变化，主要 依托激素的调理。
➢ 酶程度的调理是最根本的调理方式和根底。
;
主要调 理激素
降低血糖：胰岛素(insulin)
① 促进肌、脂肪组织等的细胞膜葡萄糖载体将葡萄糖转运 入细胞。
② 经过加强磷酸二酯酶活性，降低cAMP程度，从而使糖原 合酶活性加强、磷酸化酶活性降低，加速糖原合成、抑 制糖原分解。
③ 经过激活丙酮酸脱氢酶磷酸酶而使丙酮酸脱氢酶激活， 加速丙酮酸氧化为乙酰CoA，从而加快糖的有氧氧化。
④ 抑制肝内糖异生。这是经过抑制磷酸烯醇式丙酮酸羧激 酶的合成以及促进氨基酸进入肌组织并合成蛋白质，减 少肝糖异生的原料。
定〞。
;
葡萄糖氧化酶法测定血糖的含量
原理：
葡萄糖氧化酶
葡萄糖 + O2 + H2O
3．注射激素： 一只兔子注射胰岛素；皮下注射，剂量为 0.75U/kg 体重。做上标志，记录注
射时间。 另一只兔子注射肾上腺素：皮下注射，剂量为 0.4mg/kg 体重。记录注射时间。
➢ 血糖程度坚持恒定是糖、脂肪、氨基酸代谢 协调的结果，也是肝、肌、脂肪组织等各器 官组织代谢协调的结果。
➢ 机体的各种代谢以及各器官之间能这样准确 协调，以顺应能量、燃料供求的变化，主要 依托激素的调理。
➢ 酶程度的调理是最根本的调理方式和根底。
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主要调 理激素
降低血糖：胰岛素(insulin)
① 促进肌、脂肪组织等的细胞膜葡萄糖载体将葡萄糖转运 入细胞。
② 经过加强磷酸二酯酶活性，降低cAMP程度，从而使糖原 合酶活性加强、磷酸化酶活性降低，加速糖原合成、抑 制糖原分解。
③ 经过激活丙酮酸脱氢酶磷酸酶而使丙酮酸脱氢酶激活， 加速丙酮酸氧化为乙酰CoA，从而加快糖的有氧氧化。
④ 抑制肝内糖异生。这是经过抑制磷酸烯醇式丙酮酸羧激 酶的合成以及促进氨基酸进入肌组织并合成蛋白质，减 少肝糖异生的原料。
定〞。
;
葡萄糖氧化酶法测定血糖的含量
原理：
葡萄糖氧化酶
葡萄糖 + O2 + H2O
实验七-激素对家兔血糖浓度的影响
作用机制：
• 肾上腺素：通过cAMP激活肝中糖原磷酸化酶使糖原分解，诱导肝中磷酸烯 醇式丙酮酸激酶及果糖二磷酸酶的合成促进糖异生作用，使氨基酸转化为 葡萄糖，从而是血糖浓度上升。
葡萄糖氧化酶法
• 葡萄糖由葡萄糖氧化酶氧化成葡萄糖酸并产生过氧化氢，后者在过氧化物 酶作用下与苯酚及4-氨基安体比林作用产生红色醌化合物。醌的产量与葡 萄糖量成正比，即红色深浅与葡萄糖含量成正比，在500nm处测定吸光度， 对照标准计算出葡萄糖含量。
【实验目的】
• 掌握激素对动物血糖浓度影响的作用机制 • 熟悉葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度 • 熟悉酶标仪的操作与使用
【实验原理】
• 人和动物的血糖浓度受神经、激素的调节而维持相对稳定。 • 胰岛素和肾上腺素是调节血糖浓度的两种重要激素。 • 胰岛素通过促进肝脏和肌肉组织中糖原的合成，加强糖的氧化作用，抑制
血糖测定空白管1标准管2酶酚混合液l200200200200200200混匀后置于37生化培养箱保温20min用空白空调零在波长492nm的酶标仪中进行比色测定取酶板条标号16按下表加入试剂实验结果血糖浓度测定管a标准管a55注射胰岛素前血糖浓度mmoll注射胰岛素后血糖浓度mmoll注射肾上腺素前血糖浓度mmoll注射肾上腺素后血糖浓度mmoll
【实验试剂与器材】
• 材料：家兔 • 试剂：胰岛素、肾上腺素、酒精、草酸钠、葡萄糖校准液、酶酚混合液 • 器材：剪刀、刀片、电子天平、生化培养箱、移液管、移液枪、酶标仪、
实验五激素对血糖浓度的影响ppt课件
过氧化物酶
（POD）
H2O ＋红色醌类化合物
505nm
相对血糖浓度
光吸收法测定
7
7.朗伯-比尔定律
当一束平行的单色光通过均匀、无散射的溶液时， 在光强度、温度等条件不变的情况下，溶液吸光度 与溶液的浓度及液层厚度的乘积成正比。
Ａ=ＫＣＬ
8
标准管法测定未知样品含量
A标=KC标L A测=KC测L
C测=
降低血糖：胰岛素 升高血糖：肾上腺素、胰高血糖素、糖皮质激素和生长素等。
胰岛素是唯一降低血糖的激素。 胰岛素促进肝脏和肌肉将葡萄糖氧化合成糖原，
又加强糖的氧化作用，故可以降低血糖。 升高血糖的激素以肾上腺素作用迅速而明显。
肾上腺素通过促进肝糖原分解而升高血糖。
4
4.血糖测定的意义
临床：血糖检测是目前诊断糖代谢异常相关疾病的 主要依据。
2.制备抗凝管：在洁净、干燥的试管中放入一小勺抗凝剂（草 酸钠）。
3.注射前取血：一般以耳缘静脉取血，拔毛，用乙醇擦洗，使 血管充血（弹动几下），在耳缘静脉外侧远心端用三棱针扎 破放血，将血液滴入抗凝管中，约取1~2ml，边收集边混匀， 以防血液凝固。取血后用干棉球压迫血管止血。
12
4.注射激素：取血后，一只注射胰岛素，0.75U/kg，60min。 另一只注射肾上腺素，0.5mg/kg，30min。
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（POD）
H2O ＋红色醌类化合物
505nm
相对血糖浓度
光吸收法测定
7
7.朗伯-比尔定律
当一束平行的单色光通过均匀、无散射的溶液时， 在光强度、温度等条件不变的情况下，溶液吸光度 与溶液的浓度及液层厚度的乘积成正比。
Ａ=ＫＣＬ
8
标准管法测定未知样品含量
A标=KC标L A测=KC测L
C测=
降低血糖：胰岛素 升高血糖：肾上腺素、胰高血糖素、糖皮质激素和生长素等。
胰岛素是唯一降低血糖的激素。 胰岛素促进肝脏和肌肉将葡萄糖氧化合成糖原，
又加强糖的氧化作用，故可以降低血糖。 升高血糖的激素以肾上腺素作用迅速而明显。
肾上腺素通过促进肝糖原分解而升高血糖。
4
4.血糖测定的意义
临床：血糖检测是目前诊断糖代谢异常相关疾病的 主要依据。
2.制备抗凝管：在洁净、干燥的试管中放入一小勺抗凝剂（草 酸钠）。
3.注射前取血：一般以耳缘静脉取血，拔毛，用乙醇擦洗，使 血管充血（弹动几下），在耳缘静脉外侧远心端用三棱针扎 破放血，将血液滴入抗凝管中，约取1~2ml，边收集边混匀， 以防血液凝固。取血后用干棉球压迫血管止血。
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4.注射激素：取血后，一只注射胰岛素，0.75U/kg，60min。 另一只注射肾上腺素，0.5mg/kg，30min。
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胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响
胰岛素和肾上腺素 对血糖浓度的影响
实验目的
1、掌握胰岛素和肾上腺素对血糖水平的调节 作用
2、熟悉分光光度计的使用。
二、实验原理
❖ 人和动物体内，血糖浓度受各种激素调节 而维持恒定。胰岛素能降低血糖；其他很 多激素则具有升高血糖的作用，其中以肾 上腺素作用较为迅速而明显。胰岛素促进 肝和肌将葡萄糖合成糖原，又加强糖的氧 化利用，故可降低血糖；肾上腺素促进糖 原分解而增高血糖。
❖ 混匀后离心五分钟，三档（1500转/分）， 将上清液用胶头滴管转移至干燥的试管中。 即为无蛋白血滤液
血糖管
试剂ml
无蛋白血滤液
空白管 标准管 测定管1 测定管2
一
一
1ml
1ml
标准葡萄糖应用液 一 1ml
一一
蒸馏水
2ml
1ml
1ml
1ml
碱性铜试剂
2ml
2ml
2ml
2ml
混匀，置沸水浴中煮8min。取出用自来水冷却（切勿摇动）
三、实验材料
❖ 1、 家兔。 ❖ 2、722N型分光光度计。 ❖ 3、试剂。 ❖ （1）草酸钠。 ❖ （2）葡萄糖。 ❖ （3）肾上腺素l mg/ml。 ❖ （4）胰岛素。
四、实验方法
❖ 1．动物准备：取正常家兔一只，实验前预先 饥饿16 h，称体重(一般为2～3 kg)。
❖ 2．取血：心脏采血，放入含抗凝剂的试管 中，约需5ml，混匀。（抗凝血1）
实验目的
1、掌握胰岛素和肾上腺素对血糖水平的调节 作用
2、熟悉分光光度计的使用。
二、实验原理
❖ 人和动物体内，血糖浓度受各种激素调节 而维持恒定。胰岛素能降低血糖；其他很 多激素则具有升高血糖的作用，其中以肾 上腺素作用较为迅速而明显。胰岛素促进 肝和肌将葡萄糖合成糖原，又加强糖的氧 化利用，故可降低血糖；肾上腺素促进糖 原分解而增高血糖。
❖ 混匀后离心五分钟，三档（1500转/分）， 将上清液用胶头滴管转移至干燥的试管中。 即为无蛋白血滤液
血糖管
试剂ml
无蛋白血滤液
空白管 标准管 测定管1 测定管2
一
一
1ml
1ml
标准葡萄糖应用液 一 1ml
一一
蒸馏水
2ml
1ml
1ml
1ml
碱性铜试剂
2ml
2ml
2ml
2ml
混匀，置沸水浴中煮8min。取出用自来水冷却（切勿摇动）
三、实验材料
❖ 1、 家兔。 ❖ 2、722N型分光光度计。 ❖ 3、试剂。 ❖ （1）草酸钠。 ❖ （2）葡萄糖。 ❖ （3）肾上腺素l mg/ml。 ❖ （4）胰岛素。
四、实验方法
❖ 1．动物准备：取正常家兔一只，实验前预先 饥饿16 h，称体重(一般为2～3 kg)。
❖ 2．取血：心脏采血，放入含抗凝剂的试管 中，约需5ml，混匀。（抗凝血1）
实验五 胰岛素、肾上腺素对血糖浓
胰岛素
❖ 使肌肉和脂肪组织细胞膜对葡萄糖的通透性增加， 利于血糖进入这些组织进行代谢。
❖ 诱导葡萄糖激酶、磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶的 合成，加速细胞内葡萄糖的分解利用。
❖ 通过使细胞内cAMP含量减少，激活糖原合成酶 和丙酮酸脱氢酶系，抑制磷酸化酶和糖异生关键 酶等，使糖原合成增加，糖的氧化利用、糖转变 为脂肪的反应增加，血糖去路增快；使糖原分解 和糖异生减少或受抑制，使血糖来源减少，最终 使血糖浓度降低。
×100
注意事项
1.离心机的使用
⑴.离心前一定要配平（位置配平和重量配平）。 ⑵.使用时离心机的盖子一定要盖紧，以免发生意外。 ⑶.要等离心机完全静止后才能打开盖子。
2.微量移液器的使用
3.取血时的注意事项
⑴.注射器、刀片的使用。 ⑵.注射器在取血前要肝素化。 ⑶.心脏取血时要注意进针的位置和深度。 ⑷.注意不要将空气注入动物体内。 ⑸血液放入试管中时要先将注射器的针头取下，以防溶血。
血糖浓度的调节
❖ 血糖浓度能维持相对恒定是由于机体内存在 一整套高效率的调节机制，精细地控制着血 糖的来源与去路，使之达到动态平衡。
神经系统的调节作用
神经系统对血糖浓度的调节作用主要通过下 丘脑和自主神经系统对所控制激素的分泌，后 者再通过影响血糖来源与去路关键酶的活性来 实现。神经系统的调节最终通过细胞水平的调 节来达到目的。
激素对血糖浓度的影响
实验四激素对血糖浓度的影响
[目的]学习对家兔进行采血和注射方法，了解血糖浓度测定方法，验证激素对血糖浓度的调节作用。
[原理]激素是调节血糖浓度恒定的重要因素，其中胰岛素起降低血糖的作用，肾上腺素起升高血糖的作用。将实验动物——家兔进行空腹采血后，分别注射胰岛素和肾上腺素，作用一段时间后再分别采血，同时观察注射激素前后的家兔血糖浓度变化，以验证激素的调节作用。本实验测定血糖的方法采用：葡萄糖氧化酶法
葡萄糖氧化酶（GOD）将葡萄糖氧化为葡萄糖酸和过氧化氢，后者在过氧化物酶（POD）和色素原性氧受体存在下，将过氧化氢分解为水和氧，同时使色素原性氧受体5-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物，即Trinder反应。其色泽深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比。其反应式如下：
[试剂]
1．胰岛素注射液(41单位／ml)。
2．肾上腺素注射液(1：1001)。
3．251g／L葡萄糖溶液。
4．二甲苯及凡士林。
5．肝素抗凝剂(配成2500单位／m2)。
6．葡萄糖氧化酶试剂。
7．葡萄糖标准应用液(6.6mmol／L)。
[器材]1ml及10ml注射器，台式磅秤，兔固定箱，刀片，酒精棉球及干棉球，试管及试管架，0.5ml及6ml 吸管，滴管，沸水浴。
[操作]1．动物准备及空腹采血取试管4支，编号(1)、(9)、(3)、(4)，分别加入肝素抗凝剂0.0lml。取空腹家兔两只，分别编号1和2，过磅称重，记录体重。可用耳静脉采血法：先剪去耳静脉处毛，再用二甲苯擦拭兔耳部静脉，使其充血，在其周围抹上凡士林以防止溶血，用刀片纵行割破边缘耳静脉，放血入抗凝管（1）和（2），约需2ml，边滴边摇，以防凝固。或者用兔心脏采血法：将10ml注射器用肝素抗凝剂淋洗后，置家兔于兔固定箱中，固定四肢，在心尖搏动处插入，采血4ml左右，抗凝。
生化实验--血糖的测定ppt课件
精选ppt课件
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血糖测定方法特点
葡萄糖氧化酶法：该法特异性高，反应条件温和，能反映血中葡萄 糖的真实含量，且已推广出试剂盒，广泛应用与临床。
Folin-Wu法：该法对葡萄糖无特异性，一切还原物质均可产生同样 的反应。虽血液中葡萄糖为主要还原物质，但仍存在其他非糖还原
物质，故该法其参考值较其他方法略高。 邻-甲苯胺法：该法涉及强酸、加热等反应条件，不便于大规模检测 ，且邻甲苯胺须蒸馏后使用，有毒性，临床和科研上已很少采用。
• IFG 和IGT可以说是一种正常人向糖尿
病的过渡状态，这部分人虽然现在还不是
糖尿病， 但是将来发生2型糖尿病的危险
性非常高，可以说是糖尿病的后备军。据
有关研究报道，每年5-8%的IGT者将发展
成为2型糖尿病。
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15
OGTT的适应症
• 无糖尿病史，空腹或者随机血糖异常
• 无糖尿病史，有一过性或持续性糖尿
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14
IFG 与 IGT
• 空腹血糖损伤(Impaired Fasting Glucose, IFG) ：空腹血糖≥6.1mmol/L,但＜7.0mmol/L
• 糖耐量受损(Impaired Glucose Tolerance, IGT) ：餐后2h血糖＞7.8mmol/L,但＜11.1mmol/L
法不受血液中其他还原物质的干扰，测定时也无需去除血浆或血清
实验五激素对血糖浓度的影响
实验五激素对血糖浓度的影响
激素对血糖浓度的影响
一、实验目的1.掌握GOD-POD法测定血糖的原理及方法。
2.观察胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响。
3.了解家兔耳缘静脉取血的方法。
二、实验原理1.血糖是指血液中的葡萄糖。人体生理血糖水平维持在3.89~6.11mol/l。
2.血糖的来源与去路
3.血糖的激素调节降低血糖：胰岛素升高血糖：肾上腺素、胰高血糖素、糖皮质激素和生长素等。胰岛素是唯一降低血糖的激素。胰岛素促进肝脏和肌肉将葡萄糖氧化合成糖原，又加强糖的氧化作用，故可以降低血糖。升高血糖的激素以肾上腺素作用迅速而明显。肾上腺素通过促进肝糖原分解而升高血糖。
4.血糖测定的意义
临床：血糖检测是目前诊断糖代谢异常相关疾病的主要依据。
科研：在代谢疾病的研究中，常测定血糖。在某些药物的研究中，也涉及血糖的测定。
5.血糖测定的常用方法无机化学法：Folin-Wu法测定方法有机化学法：邻甲苯胺法酶法：葡萄糖氧化酶法
6.GOD-POD法原理(1)葡萄糖+O2+H2O葡萄糖氧化酶(GOD)
葡萄糖酸+H2O2
(2)4-氨基安替吡啉+苯酚+H2O2过氧化物酶(POD)
H2O +红色醌类化合物505nm
相对血糖浓度
光吸收法测定
7.朗伯-比尔定律当一束平行的单色光通过均匀、无散射的溶液时，在光强度、温度等条件不变的情况下，溶液吸光度与溶液的浓度及液层厚度的乘积成正比。
A=KCL
标准管法测定未知样品含量A标=KC标L A测=KC测L
A测C 测= ×C 标A标
722G型分光光度计的使用1. 接通电源，打开开关，调整波长。
激素对血糖浓度的影响 实验设计PPT
胰岛素： 使肌肉和脂肪组织细胞膜对葡萄糖的通透性 增加，利于血糖进入这些组织进行代谢。 诱导葡萄糖激 酶、磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶的合成，加速细胞内葡萄 糖的分解利用。 通过使细胞内cAMP含量减少，激活糖原合成酶和丙 酮酸脱氢酶系，抑制磷酸化酶和糖异生关键酶等，使糖原 合成增加，糖的氧化利用、糖转变为脂肪的反应增加，血 糖去路增快；使糖原分解和糖异生减少或受抑制，使血糖 来源减少，最终使血糖浓度降低
实验设计
激素对血糖浓度的影响
第二组
实验目的： 学习对家兔采血和注射方法，了解血糖浓度测定方法， 验证激素对血糖浓度的调节。 实验原理： 对血糖产生影响的激素有很多，其中使血糖浓度降低 的激素为胰岛素; 使血糖浓度升高的激素有胰高血糖素、 肾上腺素、肾上腺皮质激素、生长素、甲状腺素。它们对 血糖的调节主要是通过对糖代谢各主要途径的影响来实现 的。 本实验将家兔作为实验对象，对其进行空腹采血后分 别注射各激素，作用一段时间后再分别采血，同时观察注 射激素前后的家兔血糖浓度的变化，以验证激素的调节作 用。
2．注射激素并再采血
注射液 生理盐水 胰岛素 —— 4单位/kg 单位 —— —— 胰高血糖素 —— —— 0.4mg/kg —— 肾上腺素 —— —— —— 0.4mg/kg 取血时间
a b
0.4mg/kg —— —— ——
30min 1h
c
实验五激素对血糖浓度的影响
六、注意事项
1.采血时用耳缘静脉取血，注意安全，防止动物抓伤 。采集时要边采集边混匀。
2.准确吸取0.2ml的全血。 3.采血后要立即制备去蛋白血滤液。 4.测定管分胰岛素组和肾上腺素组，应同时测定，比
较血糖的变化时才有可比性。比色测定应同时进行 。
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肾上腺素通过促进肝糖原分解而升高血糖。
4.血糖测定的意义
➢ 临床：血糖检测是目前诊断糖代谢异常相关疾病的 主要依据。
➢ 科研：在代谢疾病的研究中，常测定血糖。在某些 药物的研究中，也涉及血糖的测定。
5.血糖测定的常用方法
无机化学法： Folin-Wu法
测定 方法
有机化学法：邻甲苯胺法
酶法：葡萄糖氧化酶法
2.制备抗凝管：在洁净、干燥的试管中放入一小勺抗凝剂（草 酸钠）。
3.注射前取血：一般以耳缘静脉取血，拔毛，用乙醇擦洗，使 血管充血（弹动几下），在耳缘静脉外侧远心端用三棱针扎 破放血，将血液滴入抗凝管中，约取1~2ml，边收集边混匀 ，以防血液凝固。取血后用干棉球压迫血管止血。
4.注射激素：取血后，一只注射胰岛素，0.75U/kg，60min 。
另一只注射肾上腺素，0.5mg/kg，3ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱmin。
注射方法：皮下注射。肚皮朝上，掂起皮肤，刺入皮下有落空感，回抽无 血，缓慢注入激素。
5.制去蛋白血滤液：这是注射前的血液。
实验五激素对血糖浓度的影响
四、实验操作
1.准备：正常家兔两只，实验前预先饥饿16h，称体重,并记录 （kg）。兔子抓取方法：一手抓取颈背部皮肤，另一只手托臀部。 2.制备抗凝管：在洁净、干燥的试管中放入一小勺抗凝剂（草 酸钠）。 3.注射前取血：一般以耳缘静脉取血，拔毛，用乙醇擦洗，使 血管充血（弹动几下），在耳缘静脉外侧远心端用三棱针扎 破放血，将血液滴入抗凝管中，约取1~2ml，边收集边混匀， 以防血液凝固。取血后用干棉球压迫血管止血。
4.注射激素：取血后，一只注射胰岛素，0.75U/kg，60min。 另一只注射肾上腺素，0.5mg/kg，30min。
注射方法：皮下注射。肚皮朝上，掂起皮肤，刺入皮下有落空感，回抽 无血，缓慢注入激素。
5.制去蛋白血滤液：这是注射前的血液。 制备方法：蛋白沉淀剂4ml＋全血0.2ml，混匀，室温放置7 分钟后，在漏斗上过滤，取滤液，标记为注射前的去蛋白血 滤液。 6.注射后取血并制备血滤液：方法同前，选择另一只耳朵，注 意做好标记。注射胰岛素的家兔，取血后立即腹腔或皮下注 射25%葡萄糖注射液10ml，以免家兔发生胰岛素性休克。
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2.准确吸取0.2ml的全血。
3.采血后要立即制备去蛋白血滤液。
4.测定管分胰岛素组和肾上腺素组，应同时测定，比 较血糖的变化时才有可比性。比色测定应同时进行。
影响血糖水平激素的作用机制课件
11
升糖激素作用机制
锐普PPT图表——扩散关系
脑垂 体前叶
生长 激素
促进肝脏中的糖异生作用及 对糖元进行分解
抑制外周组织对G的利用， 使能量来源由糖代谢转向脂 肪代谢
影响血糖水平激素的作用机制
12
升糖激素作用机制
锐普PPT图表——扩散关系
睾丸、 肾上腺 皮质、 卵巢
雄激素
生理水平： 维持胰岛素敏感性
胰岛B、Dcell
减轻体重
直接或间接抑制胰 高血糖素的分泌及 释放
抑制食欲及胃液分 泌,延缓胃排空,作 用于CNS使人产生 饱胀感和食欲下降
血糖降低
影响血糖水平激素的作用机制
20
内容
1
血糖的来路与去路
2
影响血糖水平的激素
3
升糖激素及其作用机制
4
降糖激素及其作用机制
5
补充与小结
影响血糖水平激素的作用机制
一般多在应激、内脏神经刺 激和低血糖等情况下发生 因E兼具α、β作用，故其 升糖作用较NE显著
影响血糖水平激素的作用机制
10
升糖激素作用机制
锐普PPT图表——扩散关系
促进小肠粘膜对糖的吸收
甲状腺
甲状腺 激素
促进糖原分解，抑制糖原合成
加强其他升糖激素（胰高血 糖素、皮质醇等）的作用
影响血糖水平激素的作用机制
生物化学实验5.血糖浓度测定及激素对血糖浓度的影响.本科
止血
3.注射激素
计时
腹腔 注射
胰岛素
1h
Fra Baidu bibliotek
取血
制备去蛋白血滤液
肾上腺素 0.5h
取血
制备去蛋白血滤液
抓住兔子，腹部朝上，提起
腹部皮肤，刺入皮下时有落空感， 然后缓慢注入激素
4.制备去蛋白血滤液
制备去蛋白血滤液 蛋白沉淀剂4ml+全血0.2ml→
混匀→室温放置7min→过滤→取 滤液
滤纸不 要润湿
（2）H2O2＋4-氨基安替比林＋苯酚
过氧化物酶 （POD）
H2O ＋红色醌类物质
相对血糖浓度
分光光度法测定
505nm
红色的醌类化合物颜色深浅在一定范围内与葡 萄糖浓度成正比，在505nm处测定吸光度，与 标准管比较可计算出血糖的浓度
标准管法
A标=C标KL
A测=C测KL
C测=
A测 ×C标 A标
准备激素
胰岛素（1U/mL）
0.75U/Kg
0.75mL/Kg
1kg兔子准备胰岛素0.75mL
肾上腺素（1mg/mL） 0. 5mg/Kg 0.5mL/Kg 1kg兔子准备肾上腺素0. 5mL
1、实验准备
兔子称重、固定 制备抗凝管 准备激素 蛋白沉淀剂
准备蛋白沉淀剂
每组取2支试管，每管中取蛋白沉淀剂 4mL
实验胰岛素和肾上腺素对家兔血糖浓度的影响PPT课件
G胰-1 ＞ G胰-2 4、离心机使用前必须配平：质量配平&位置配平
5、电磁炉使用前10min打开； 4、换到A模式，拉至2、3、4档，读取各个样品的吸光度
2、分光光度计的使用方法
G肾-1 ＜ G肾-2
注意事项
1、邻甲苯胺试剂中含冰乙酸，谨防腐蚀分光光度计 2、分光光度计的使用方法 3、微量移液器的使用 4、离心机使用前必须配平：质量配平&位置配平 5、电磁炉使用前10min打开；绝对不可干煮；
比色杯 1、分清光面、毛面。手应接触毛面，光线从光面通过
2、用溶液润洗2-3次，装至2/3至4/5体积
3、粗纸吸水、柔纸擦亮光面
血糖测定的临床意义
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激素对血糖浓度的影响实 验
二、实验原理
1.血糖是指血液中的葡萄糖。 人体生理血糖水平维持在3.89~6.11mol/l。
2.血糖的来源与去路
激素对血糖浓度的影响实 3
3.血糖的激素调节
降低血糖：胰岛素 升高血糖：肾上腺素、胰高血糖素、糖皮质激素和生长素等。
❖胰岛素是唯一降低血糖的激素。 胰岛素促进肝脏和肌肉将葡萄糖氧化合成糖原，又
2.制备抗凝管：在洁净、干燥的试管中放入一小勺抗凝剂（草 酸钠）。
3.注射前取血：一般以耳缘静脉取血，拔毛，用乙醇擦洗，使 血管充血（弹动几下），在耳缘静脉外侧远心端用三棱针扎 破放血，将血液滴入抗凝管中，约取1~2ml，边收集边混匀 ，以防血液凝固。取血后用干棉球压迫血管止血。
激素对血糖浓度的影响实 12
按下式分别计算注射胰岛素或肾上腺素前、后血糖浓度：
A测 C测＝ ×C标（5 mmol／L ）
A标 5 mmol／L为葡萄糖标准应用液的浓度值。 通过计算比较一下家兔注射前后血糖浓度的变化情况 。 正常人空腹血糖值：3.89～6.11 mmol／L
激素对血糖浓度的影响实 15
六、注意事项
1.采血时用耳缘静脉取血，注意安全，防止动物抓伤 。采集时要边采集边混匀。
度值。
激素对血糖浓度的影响实 10
三、主要仪器与试剂
❖ 试剂：胰岛素，肾上腺素 酒精，草酸钠，蛋白沉淀剂 酶酚混合试剂，苯甲酸溶液 葡萄糖标准贮存液（100mmol/L） 葡萄糖标准应用液（5mmol/L）
激素对血糖浓度的影响实 11
四、实验操作
1.准备：正常家兔两只，实验前预先饥饿16h，称体重,并记录 （kg）。兔子抓取方法：一手抓取颈背部皮肤，另一只手托臀部。
4.注射激素：取血后，一只注射胰岛素，0.75U/kg，60min 。 另一只注射肾上腺素，0.5mg/kg，30min。
注射方法：皮下注射。肚皮朝上，掂起皮肤，刺入皮下有落空感，回抽无 血，缓慢注入激素。
5.制去蛋白血滤液：这是注射前的血液。 制备方法：蛋白沉淀剂4ml＋全血0.2ml，混匀，室温放置7 分钟后，在漏斗上过滤，取滤液，标记为注射前的去蛋白血 滤液。
（POD）
H2O ＋红色醌类化合物
505nm
相对血糖浓度
光吸收法测定
激素对血糖浓度的影响实 7
7.朗伯-比尔定律
当一束平行的单色光通过均匀、无散射的溶液时， 在光强度、温度等条件不变的情况下，溶液吸光度 与溶液的浓度及液层厚度的乘积成正比。
Ａ=ＫＣＬ
激素对血糖浓度的影响实 8
标准管法测定未知样品含量
6.注射后取血并制备血滤液：方法同前，选择另一只耳朵，注 意做好标记。注射胰岛素的家兔，取血后立即腹腔或皮下注 射25%葡萄糖注射液10ml，以免家兔发生胰岛素性休克。
激素对血糖浓度的影响实 13
7.GOD-POD法测血糖：按下表操作
加入物(ml) 去蛋白血滤液
测定管 (注射前)
0.5
测定管 (注射后)
加强糖的氧化作用，故可以降低血糖。 ❖升高血糖的激素以肾上腺素作用迅速而明显。
肾上腺素通过促进肝糖原分解而升高血糖。
激素对血糖浓度的影响实 4
4.血糖测定的意义
➢ 临床：血糖检测是目前诊断糖代谢异常相关疾病的 主要依据。
➢ 科研：在代谢疾病的研究中，常测定血糖。在某些 药物的研究中，也涉及血糖的测定。
2.准确吸取0.2ml的全血。 3.采血后要立即制备去蛋白血滤液。 4.测定管分胰岛素组和肾上腺素组，应同时测定，比
较血糖的变化时才有可比性。比色测定应同时进行 。
激素对血糖浓度的影响实 16
A标=KC标L A测=KC测L
C测=
A测 A标
×C标
激素对血糖浓度的影响实 9
722G型分光光度计的使用
1. 接通电源，打开开关，调整波长。 2. 比色杯中加入空白及待测样品，并放入分光光度计
中，注意：加入样品量不超过比色杯体积的3/4。 3. 调模式为“T（透射比）”，对空白对照进行调
“0”（开盖）和调“100”（闭盖）。 4. 调模式为“A（吸光度）”，测定待测样品的吸光
激素对血糖浓度的影响实 5
5.血糖测定的常用方法
无机化学法： Folin-Wu法
测定 方法
有机化学法：邻甲苯胺法
酶法：葡萄糖氧化酶法
激ห้องสมุดไป่ตู้对血糖浓度的影响实 6
6.GOD-POD法原理
葡萄糖氧化酶
（1）葡萄糖＋O2＋H2O （GOD） 葡萄糖酸＋H2O2
（2）4-氨基安替吡啉＋苯酚＋H2O2
过氧化物酶
0.5
标准管 –
空白管 –
葡萄糖标准应用液
–
–
0.5
–
蛋白沉淀剂
–
–
–
0.5
酶酚混合试剂
3.0
3.0
3.0
3.0
混匀，置37℃水浴15min，调节波长505nm，以空白管调零，分别读取 A测、A标。
读取6个A值并记录：A肾前、A肾后、A标 A胰前、A胰后、A标
激素对血糖浓度的影响实 14
五、结果与分析
二、实验原理
1.血糖是指血液中的葡萄糖。 人体生理血糖水平维持在3.89~6.11mol/l。
2.血糖的来源与去路
激素对血糖浓度的影响实 3
3.血糖的激素调节
降低血糖：胰岛素 升高血糖：肾上腺素、胰高血糖素、糖皮质激素和生长素等。
❖胰岛素是唯一降低血糖的激素。 胰岛素促进肝脏和肌肉将葡萄糖氧化合成糖原，又
2.制备抗凝管：在洁净、干燥的试管中放入一小勺抗凝剂（草 酸钠）。
3.注射前取血：一般以耳缘静脉取血，拔毛，用乙醇擦洗，使 血管充血（弹动几下），在耳缘静脉外侧远心端用三棱针扎 破放血，将血液滴入抗凝管中，约取1~2ml，边收集边混匀 ，以防血液凝固。取血后用干棉球压迫血管止血。
激素对血糖浓度的影响实 12
按下式分别计算注射胰岛素或肾上腺素前、后血糖浓度：
A测 C测＝ ×C标（5 mmol／L ）
A标 5 mmol／L为葡萄糖标准应用液的浓度值。 通过计算比较一下家兔注射前后血糖浓度的变化情况 。 正常人空腹血糖值：3.89～6.11 mmol／L
激素对血糖浓度的影响实 15
六、注意事项
1.采血时用耳缘静脉取血，注意安全，防止动物抓伤 。采集时要边采集边混匀。
度值。
激素对血糖浓度的影响实 10
三、主要仪器与试剂
❖ 试剂：胰岛素，肾上腺素 酒精，草酸钠，蛋白沉淀剂 酶酚混合试剂，苯甲酸溶液 葡萄糖标准贮存液（100mmol/L） 葡萄糖标准应用液（5mmol/L）
激素对血糖浓度的影响实 11
四、实验操作
1.准备：正常家兔两只，实验前预先饥饿16h，称体重,并记录 （kg）。兔子抓取方法：一手抓取颈背部皮肤，另一只手托臀部。
4.注射激素：取血后，一只注射胰岛素，0.75U/kg，60min 。 另一只注射肾上腺素，0.5mg/kg，30min。
注射方法：皮下注射。肚皮朝上，掂起皮肤，刺入皮下有落空感，回抽无 血，缓慢注入激素。
5.制去蛋白血滤液：这是注射前的血液。 制备方法：蛋白沉淀剂4ml＋全血0.2ml，混匀，室温放置7 分钟后，在漏斗上过滤，取滤液，标记为注射前的去蛋白血 滤液。
（POD）
H2O ＋红色醌类化合物
505nm
相对血糖浓度
光吸收法测定
激素对血糖浓度的影响实 7
7.朗伯-比尔定律
当一束平行的单色光通过均匀、无散射的溶液时， 在光强度、温度等条件不变的情况下，溶液吸光度 与溶液的浓度及液层厚度的乘积成正比。
Ａ=ＫＣＬ
激素对血糖浓度的影响实 8
标准管法测定未知样品含量
6.注射后取血并制备血滤液：方法同前，选择另一只耳朵，注 意做好标记。注射胰岛素的家兔，取血后立即腹腔或皮下注 射25%葡萄糖注射液10ml，以免家兔发生胰岛素性休克。
激素对血糖浓度的影响实 13
7.GOD-POD法测血糖：按下表操作
加入物(ml) 去蛋白血滤液
测定管 (注射前)
0.5
测定管 (注射后)
加强糖的氧化作用，故可以降低血糖。 ❖升高血糖的激素以肾上腺素作用迅速而明显。
肾上腺素通过促进肝糖原分解而升高血糖。
激素对血糖浓度的影响实 4
4.血糖测定的意义
➢ 临床：血糖检测是目前诊断糖代谢异常相关疾病的 主要依据。
➢ 科研：在代谢疾病的研究中，常测定血糖。在某些 药物的研究中，也涉及血糖的测定。
2.准确吸取0.2ml的全血。 3.采血后要立即制备去蛋白血滤液。 4.测定管分胰岛素组和肾上腺素组，应同时测定，比
较血糖的变化时才有可比性。比色测定应同时进行 。
激素对血糖浓度的影响实 16
A标=KC标L A测=KC测L
C测=
A测 A标
×C标
激素对血糖浓度的影响实 9
722G型分光光度计的使用
1. 接通电源，打开开关，调整波长。 2. 比色杯中加入空白及待测样品，并放入分光光度计
中，注意：加入样品量不超过比色杯体积的3/4。 3. 调模式为“T（透射比）”，对空白对照进行调
“0”（开盖）和调“100”（闭盖）。 4. 调模式为“A（吸光度）”，测定待测样品的吸光
激素对血糖浓度的影响实 5
5.血糖测定的常用方法
无机化学法： Folin-Wu法
测定 方法
有机化学法：邻甲苯胺法
酶法：葡萄糖氧化酶法
激ห้องสมุดไป่ตู้对血糖浓度的影响实 6
6.GOD-POD法原理
葡萄糖氧化酶
（1）葡萄糖＋O2＋H2O （GOD） 葡萄糖酸＋H2O2
（2）4-氨基安替吡啉＋苯酚＋H2O2
过氧化物酶
0.5
标准管 –
空白管 –
葡萄糖标准应用液
–
–
0.5
–
蛋白沉淀剂
–
–
–
0.5
酶酚混合试剂
3.0
3.0
3.0
3.0
混匀，置37℃水浴15min，调节波长505nm，以空白管调零，分别读取 A测、A标。
读取6个A值并记录：A肾前、A肾后、A标 A胰前、A胰后、A标
激素对血糖浓度的影响实 14
五、结果与分析