激素对血糖浓度的影响实验培训课件
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实验五激素对血糖浓度的影响ppt课件
A测 A标
×C标
9
722G型分光光度计的使用
1. 接通电源，打开开关，调整波长。 2. 比色杯中加入空白及待测样品，并放入分光光度
计中，注意：加入样品量不超过比色杯体积的3/4。 3. 调模式为“T（透射比）”，对空白对照进行调
“0”（开盖）和调“100”（闭盖）。 4. 调模式为“A（吸光度）”，测定待测样品的吸光
实验五 激素对血糖浓度的影响
1
一、实验目的
1.掌握GOD-POD法测定血糖的原理及方法。 2.观察胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响。 3.了解家兔耳缘静脉取血的方法。
2
二、实验原理
1.血糖是指血液中的葡萄糖。 人体生理血糖水平维持在3.89~6.11mol/l。
2.血糖的来源与去路
3
3.血糖的激素调节
降低血糖：胰岛素 升高血糖：肾上腺素、胰高血糖素、糖皮质激素和生长素等。
胰岛素是唯一降低血糖的激素。 胰岛素促进肝脏和肌肉将葡萄糖氧化合成糖原，
又加强糖的氧化作用，故可以降低血糖。 升高血糖的激素以肾上腺素作用迅速而明显。
肾上腺素通过促进肝糖原分解而升高血糖。
4
4.血糖测定的意义
临床：血糖检测是目前诊断糖代谢异常相关疾病的 主要依据。
13
7.GOD-POD法测血糖：按下表操作
加入物(ml) 去蛋白血滤液
测定管 (注射前)
0.5
测定管 (注射后)
0.5
标准管 –
空白管 –
葡萄糖标准应用液
–
–
0.5
–
蛋白沉淀剂
–
–
–
0.5
酶酚混合试剂
3.0
3.0
3.0
3.0
实验十一 激素对血糖浓度的影响
实验十一激素对血糖浓度的影响【目的】1.掌握血糖的测定原理及方法。
2.掌握血糖的正常范围及意义。
3.熟记胰岛素及肾上腺素对血糖浓度的影响并解释其作用机制。
【原理】人和动物体内的血糖浓度均维持在一定范围内。
这是由于体内存在多种激素及调节物质，在它们的共同作用下，使糖酵解、糖氧化、糖原合成与分解、糖异生、脂肪合成与分解等代谢途径协同进行。
胰岛素可通过以下几种途径降低血糖：①促进肌肉、脂肪细胞的载体转运葡萄糖人内；②抑制蛋白激酶A，继而使糖原磷酸化酶活性降低：激活糖原合酶脱磷酸酶，从而使糖原合酶活性升高，加速肌肉、肝脏的糖原合成；③通过第二信使间接激活丙酮酸脱氢酶，加速丙酮酸氧化脱羧生成乙酰CoA；④抑制磷酸烯醇式丙酮酸激酶活性，促进氨基酸进入肌肉合成蛋白质，从而降低糖异生；⑤抑制脂肪动员，促进糖有氧氧化。
肾上腺素的作用与胰岛素相反，起升高血糖的作用。
肾上腺素升高血糖的作用迅速而明显，它通过与肝和肌肉细胞膜受体结合而激活磷酸化酶，产生级联放大效应，从而加快糖原的分解、肝释放葡萄糖、肌肉输出乳糖供肝糖异生等，最终导致血糖升高。
本实验观察家兔在注射胰岛素和肾上腺素前后空腹血糖浓度的变化。
血糖含量的测定采用葡萄糖氧化酶法。
首先用钨酸钠及盐酸沉淀血清中的蛋白质，制备血滤液。
在葡萄糖氧化酶的催化作用下，血滤液中的葡萄糖被氧化成葡萄糖酸，并产生1分子过氧化氢；过氧化氢被偶联的过氧化物酶催化放出氧，氧将试剂中的4-氨基安替吡啉偶联酚(还原性氧受体)的酚氧化，生成红色的醌类化合物，其颜色深浅与葡萄糖的含量成正比，此溶液与经同样处理的标准葡萄糖溶液进行比色测定，即可求出血糖含量。
葡萄糖氧化酶葡萄糖——————>葡萄糖酸+H202过氧化物酶H20——————>H20+02O2+4-氨基安替吡啉偶联酚——————>醌类化合物（红色）葡萄糖氧化酶法测定血糖的特异性较高，能干扰测定结果的物质较少，如溶血样本血红蛋白浓度达lOg／L、黄疸样本胆红素浓度达342Um以及样本中所含的少量尿素、肌酐、甘油三脂等均不影响测定结果。
实验五激对血糖浓度的影响-PPT精品文档
5.注射前取血
拔毛
耳缘静脉取血法：
三棱针刺破 静脉放血
制备去蛋 白血滤液
酒精擦拭 (用手弹动）
收集于抗凝管中（约1-2mL) 边取血边摇动抗凝管
6.注射激素
胰岛素
1h
腹腔 注射
0.75U/Kg 肾上腺素
0.5h
取血（2mL） 制备去蛋白血滤液 取血（2mL） 制备去蛋白血滤液
0.5mg/Kg
抓住兔子，腹部朝上，提起腹 部皮肤，刺入皮下时有落空感，然 后缓慢注入激素
胰岛素（1U/mL）
0.75U/Kg 0.75mL/Kg 1kg兔子准备胰岛素0.75mL
肾上腺素（1mg/mL） 0.5mL/Kg 0. 5mg/Kg
1kg兔子准备胰岛素0. 5mL
4、去蛋白质血滤液制备
取2支试管，每管中取蛋白沉淀剂4mL,其中1管标
注实验前，另外1管标注实验后。 去蛋白质血滤液制备（待第5和6步结束，取全血 制备）：取全血0.2mL，加入上述管混匀，室温 放置7分钟过滤。
测定血糖的意义
临床：血糖检测是目前诊断糖代谢异常相关疾病 的主要依据。 科研：在代谢疾病的研究中，常测定血糖。在某 些药物的研究中，也涉及血糖的测定。
注意事项
抓取兔子时小心被兔子抓伤
试管一定要标记清楚
用漏斗过滤时，不要水润湿
用加样枪加取量要准确
无机化学法： Folin-Wu法 有机化学法：邻甲苯胺法
测定方法
酶法：葡萄糖氧化酶法
二、实验原理
葡萄糖氧化酶法
标准管法
红色的醌类化合物颜色深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比，在 505nm处测定吸光度，与标准管比较可计算出血糖的浓度。
A标=C标KL
影响血糖水平激素的作用机制ppt课件
升糖激素作用机制
锐普PPT图表——扩散关系
脑垂 体前叶
生长 激素
促进肝脏中的糖异生作用及 对糖元进行分解
抑制外周组织对G的利用， 使能量来源由糖代谢转向脂 肪代谢
SUCCESS
THANK YOU
2019/5/10
升糖激素作用机制
锐普PPT图表——扩散关系
睾丸、 肾上腺 皮质、 卵巢
雄激素
生理水平： 维持胰岛素敏感性
内容
1
血糖的来路与去路
2影响血糖水平的激素3 Nhomakorabea升糖激素及其作用机制
4
降糖激素及其作用机制
5
补充与小结
锐普PPT图表——层级关系
常见降糖激素
1 胰岛素
2
胰高血糖素样肽-1（GLP-1）
胰岛素
锐普PPT图表——综合关系
增加血糖去路
减少血糖来路
通过激发或抑制糖代谢过程中的各种酶， 来促进全身组织对葡萄糖的摄取和利用， 并抑制糖原的分解和糖原异生以降低血糖
锐普PPT图表——扩散关系
肾上 腺髓质
E&NE
促进肝糖原分解
降低外周组织对葡萄糖摄取
一般多在应激、内脏神经刺 激和低血糖等情况下发生 因E兼具α、β作用，故其 升糖作用较NE显著
升糖激素作用机制
锐普PPT图表——扩散关系
甲状腺
甲状腺 激素
促进小肠粘膜对糖的吸收
促进糖原分解，抑制糖原合 成
加强其他升糖激素（胰高血 糖素、皮质醇等）的作用
GLP-1
锐普PPT图表——包含关系
胰岛Bcell
胰岛B、Dcell
减轻体重
以G浓度依赖性方 式促进Ins分泌， 促进胰岛Bcell再 生和修复，增加 Bcell数量
血糖的测定及激素对血糖浓度的影响ppt课件
SUCCESS
THANK YOU
2019/5/5
葡萄糖越多，生成的醌类物质就越多， 颜色就越深，通过所讲过的比色法，求出它的 葡萄糖含量，即血糖浓度。（标准管法）
三 操作
1．准备抗凝试管：首先放入试管一小勺抗凝剂 （草酸钠）。
2．分组。称重：Kg，共有四只兔子，两只注射 胰岛素，两只注射肾上腺素。兔子抓取方法： 一手抓取颈部皮肤，另一只手托臀部，把它放 在天平上称重。
按表操作：
加入物（ml） 测定管（注射前） 测定管（注射后） 标准管 管
空白
去蛋白血滤液
0.5
0.5
处理后的葡萄糖
0.5
标准应用液
蛋白沉淀剂
0.5 混匀，置37℃水浴15分钟调波长为505nm， 酶以酚空混合白试管剂调零，分别读3 取A测A标,根据标准管3法求 测3定管血糖浓度3 。
四 结果与计算
5．制备无蛋白血虑液:这是注射前的血液，在胰岛素等待 一个小时，肾上腺素等待半个小时期间制备注射前无蛋 白血虑液。方法：蛋白沉淀剂4ml＋全血0.2ml混匀，室 温放置7分钟后，在漏斗上过滤，这时标记为注射前无 蛋白血滤液。
操作
6．注射后再次取血 7．再制备无蛋白血虑液:标记为注射后 8．比色：最后我们用标准管法来测定血糖浓度，
C测（mmol/l）= （A测/A标）×5 mmol/L (5为葡萄糖标准应用液浓度值)
通过计算比较一下家兔注射前后血糖浓度的变 化情况。
五 分析
(1) 对家兔而言血糖正常值：2.8－5.2 mmol/L，验证是否在此范围。
(2) 从实验结果来验证胰岛素降低血糖以及肾 上腺素升高血糖的作用。
实验四
血糖的测定及激素对血糖浓度的影响
实验五激素对血糖浓度的影响
一、实验目的
1.掌握GOD-POD法测定血糖的原理及方法。
2.观察胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响。
3.了解家兔耳缘静脉取血的方法。
二、实验原理
1.血糖是指血液中的葡萄糖。
人体生理血糖水平维持在3.89~6.11mol/l。
2.血糖的来源与去路
3.血糖的激素调节
降低血糖：胰岛素 升高血糖：肾上腺素、胰高血糖素、糖皮质激素和生长素等。
2.准确吸取0.2ml的全血。
3.采血后要立即制备去蛋白血滤液。
4.测定管分胰岛素组和肾上腺素组，应同时测定，比 较血糖的变化时才有可比性。比色测定应同时进行。
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2. 比色杯中加入空白及待测样品，并放入分光光度 计中，注意：加入样品量不超过比色杯体积的3/4。
3. 调模式为“T（透射比）”，对空白对照进行调 “0”（开盖）和调“100”（闭盖）。 4. 调模式为“A（吸光度）”，测定待测样品的吸光 度值。
三、主要仪器与试剂
试剂：胰岛素，肾上腺素
酒精，草酸钠，蛋白沉淀剂 酶酚混合试剂，苯甲酸溶液 葡萄糖标准贮存液（100mmol/L） 葡萄糖标准应用液（5mmol/L）
相对血糖浓度
光吸收法测定
7.朗伯-比尔定律
当一束平行的单色光通过均匀、无散射的溶液时， 在光强度、温度等条件不变的情况下，溶液吸光度 与溶液的浓度及液层厚度的乘积成正比。
Ａ=Ｋ A测=KC测L
A测 C 测= × C 标 A标
722G型分光光度计的使用
1. 接通电源，打开开关，调整波长。
激素对血糖的影响PPT教案
3、B组在和A组小鼠做手术的部位做同样的切口，然后缝合伤口，测 量每只小鼠血糖浓度（血糖仪），记录实验数据；
4、药物处理 在小白鼠安静后，分别给两组1号小鼠腹腔注射生理盐 水0.5ml；2号小鼠腹腔注射胰高血糖素0.5ml，3号小鼠腹腔注射肾上腺 素0.5ml ；4号小鼠腹腔注射胰岛素10U/10g；5号小鼠腹腔注射糖皮质 激素0.5ml；6号小鼠腹腔注射甲状腺素0.5ml；7号小鼠腹腔注射生长激 素0.5ml。将小白鼠放在加盖的箱子里，每5分钟用血糖仪测血糖一次， 记录实验数据；
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实验目的
通过对血糖浓度的测定掌握胰岛素，胰高 血糖素及肾上腺素、糖皮质激素、甲状腺 素、生长素对血糖浓度的影响。
了解血糖测定的方法
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材料与方法
实验动物：小白鼠 器材与药品：哺乳类动物手术器械一套、
注射器（5ml）5支、加盖的箱子8只、2%戊 巴比妥钠溶液、生理盐水、胰岛素溶液、 胰高血糖素溶液、1:10000肾上腺素溶液、 糖皮质激素针剂，甲状腺素针剂，生长激 素针剂
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数据处理
血糖浓 度
1
2
3
4
5
6
7
a组
b组
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实验预期结果
用药前小鼠的血糖浓度作为参照； A组4号小鼠血糖浓度明显降低至低于参照
浓度，2、3、5、6、7号小鼠血糖浓度明显 升高至高于参照浓度，1号小鼠血糖浓度略 微下降； B组4号小鼠血糖浓度逐渐降然后恢复至参 照浓度，2、3、5、6、7号小鼠血糖浓度逐 渐升高然后恢复至参照浓度，1号小鼠血糖 浓度没有明显变化；
激素对血糖的影响
会计学
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1
4、药物处理 在小白鼠安静后，分别给两组1号小鼠腹腔注射生理盐 水0.5ml；2号小鼠腹腔注射胰高血糖素0.5ml，3号小鼠腹腔注射肾上腺 素0.5ml ；4号小鼠腹腔注射胰岛素10U/10g；5号小鼠腹腔注射糖皮质 激素0.5ml；6号小鼠腹腔注射甲状腺素0.5ml；7号小鼠腹腔注射生长激 素0.5ml。将小白鼠放在加盖的箱子里，每5分钟用血糖仪测血糖一次， 记录实验数据；
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实验目的
通过对血糖浓度的测定掌握胰岛素，胰高 血糖素及肾上腺素、糖皮质激素、甲状腺 素、生长素对血糖浓度的影响。
了解血糖测定的方法
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材料与方法
实验动物：小白鼠 器材与药品：哺乳类动物手术器械一套、
注射器（5ml）5支、加盖的箱子8只、2%戊 巴比妥钠溶液、生理盐水、胰岛素溶液、 胰高血糖素溶液、1:10000肾上腺素溶液、 糖皮质激素针剂，甲状腺素针剂，生长激 素针剂
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数据处理
血糖浓 度
1
2
3
4
5
6
7
a组
b组
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实验预期结果
用药前小鼠的血糖浓度作为参照； A组4号小鼠血糖浓度明显降低至低于参照
浓度，2、3、5、6、7号小鼠血糖浓度明显 升高至高于参照浓度，1号小鼠血糖浓度略 微下降； B组4号小鼠血糖浓度逐渐降然后恢复至参 照浓度，2、3、5、6、7号小鼠血糖浓度逐 渐升高然后恢复至参照浓度，1号小鼠血糖 浓度没有明显变化；
激素对血糖的影响
会计学
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1
【正式版】血糖影响因素及血糖测定PPT
【实验试剂与器材】
速效胰岛素、盐酸肾上腺素、抗凝剂 （草酸钠或草酸钾、肝素钠、柠檬酸三 钠）
禁食四小时以上兔子两只 葡萄糖试剂盒（Ｒ１、Ｒ２、标准液） 酶标板、板条、微量进样器、注射器、
烧杯 酶标仪、生化培养箱
【实验步骤】
一． 注射激素前后血浆样品制备
（1）动物准备: 正常家兔两只,实验前禁食4小时以上,称体重.记录并标 号。
计算 血糖含量=A样/A标×标准溶液浓度 4．病理性低血糖：（1）胰岛B细胞增生和胰岛B细胞瘤等，胰岛素分泌过多。
葡萄糖可由葡萄糖氧化酶氧化成葡萄糖酸，并产 与正葡常萄 家糖兔标两准只溶,实液验比前较禁，食可4小计时算以得上到,血称浆体葡重萄. 糖浓度。 生过氧化氢，后者在过氧化物酶的作用下，能与 计算 血糖含量=A样/A标×标准溶液浓度
⑵取血： 在耳缘静脉处进行，用酒精棉擦拭兔耳，使血管扩张， 用棉花擦干，用针筒采血或于取血处涂薄层凡士林， 然后用刀片割破耳缘静脉，将血液收集于草酸钠抗凝 管（每ml约需2mg草酸钠）内,边接边摇,以防凝固，取 约5ml，用普通离心机2000rpm离心10分钟，取上清分 装备用，编号为兔血清①、②；
1．碳水化合物的消化和单糖的吸收：机体进食后，食物淀粉在唾液淀粉酶、胰酶、小肠黏膜分泌的二糖酶作用下水解成单糖。
（3．1） 生糖理尿性病低血糖种：见重于饥要饿和激剧烈运素动 ，前者使血糖浓度降低，后者使血糖
1．生理性高血糖：摄入高糖食物后，或情绪紧张肾上腺分泌增加时
浓度升高。 人和动物血糖浓度受神经、激素的调节，维持相对稳定。
计算 血糖含量=A样/A标×标准溶液浓度
液 在耳缘静脉处进行，用酒精棉擦拭兔耳，使血管扩张，用棉花擦干，用针筒采血或于取血处涂薄层凡士林，然后用刀片割破耳缘静脉
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加强糖的氧化作用，故可以降低血糖。 ❖升高血糖的激素以肾上腺素作用迅速而明显。
肾上腺素通过促进肝糖原分解而升高血糖。
激素对血糖浓度的影响实 4
4.血糖测定的意义
➢ 临床：血糖检测是目前诊断糖代谢异常相关疾病的 主要依据。
➢ 科研：在代谢疾病的研究中，常测定血糖。在某些 药物的研究中，也涉及血糖的测定。
6.注射后取血并制备血滤液：方法同前，选择另一只耳朵，注 意做好标记。注射胰岛素的家兔，取血后立即腹腔或皮下注 射25%葡萄糖注射液10ml，以免家兔发生胰岛素性休克。
激素对血糖浓度的影响实 13
7.GOD-POD法测血糖：按下表操作
加入物(ml) 去蛋白血滤液
测定管 (注射前)
0.5
测定管 (注射后)
4.注射激素：取血后，一只注射胰岛素，0.75U/kg，60min 。 另一只注射肾上腺素，0.5mg/kg，30min。
注射方法：皮下注射。肚皮朝上，掂起皮肤，刺入皮下有落空感，回抽无 血，缓慢注入激素。
5.制去蛋白血滤液：这是注射前的血液。 制备方法：蛋白沉淀剂4ml＋全血0.2ml，混匀，室温放置7 分钟后，在漏斗上过滤，取滤液，标记为注射前的去蛋白血 滤液。
0.5
标准管 –
空白管 –
葡萄糖标准应用液
–
–
0.5
–
蛋白沉淀剂
–
–
–
0.5
酶酚混合试剂
3.0
3.0
3.0
3.0
混匀，置37℃水浴15min，调节波长505nm，以空白管调零，分别读取 A测、A标。
读取6个A值并记录：A肾前、A肾后、A标 A胰前、A胰后、A标
激素对血糖浓度的影响实 14
五、结果与分析
按下式分别计算注射胰岛素或肾上腺素前、后血糖浓度：
A测 C测＝ ×C标（5 mmol／L ）
A标 5 mmol／L为葡萄糖标准应用液的浓度值。 通过计算比较一下家兔注射前后血糖浓度的变化情况 。 正常人空腹血糖值：3.89～6.11 mmol／L
激素对血糖浓度的影响实 15
六、注意事项
1.采血时用耳缘静脉取血，注意安全，防止动物抓伤 。采集时要边采集边混匀。
A标=KC标L A测=KC测L
响实 9
722G型分光光度计的使用
1. 接通电源，打开开关，调整波长。 2. 比色杯中加入空白及待测样品，并放入分光光度计
中，注意：加入样品量不超过比色杯体积的3/4。 3. 调模式为“T（透射比）”，对空白对照进行调
“0”（开盖）和调“100”（闭盖）。 4. 调模式为“A（吸光度）”，测定待测样品的吸光
度值。
激素对血糖浓度的影响实 10
三、主要仪器与试剂
❖ 试剂：胰岛素，肾上腺素 酒精，草酸钠，蛋白沉淀剂 酶酚混合试剂，苯甲酸溶液 葡萄糖标准贮存液（100mmol/L） 葡萄糖标准应用液（5mmol/L）
激素对血糖浓度的影响实 11
四、实验操作
1.准备：正常家兔两只，实验前预先饥饿16h，称体重,并记录 （kg）。兔子抓取方法：一手抓取颈背部皮肤，另一只手托臀部。
激素对血糖浓度的影响实 验
二、实验原理
1.血糖是指血液中的葡萄糖。 人体生理血糖水平维持在3.89~6.11mol/l。
2.血糖的来源与去路
激素对血糖浓度的影响实 3
3.血糖的激素调节
降低血糖：胰岛素 升高血糖：肾上腺素、胰高血糖素、糖皮质激素和生长素等。
❖胰岛素是唯一降低血糖的激素。 胰岛素促进肝脏和肌肉将葡萄糖氧化合成糖原，又
2.制备抗凝管：在洁净、干燥的试管中放入一小勺抗凝剂（草 酸钠）。
3.注射前取血：一般以耳缘静脉取血，拔毛，用乙醇擦洗，使 血管充血（弹动几下），在耳缘静脉外侧远心端用三棱针扎 破放血，将血液滴入抗凝管中，约取1~2ml，边收集边混匀 ，以防血液凝固。取血后用干棉球压迫血管止血。
激素对血糖浓度的影响实 12
2.准确吸取0.2ml的全血。 3.采血后要立即制备去蛋白血滤液。 4.测定管分胰岛素组和肾上腺素组，应同时测定，比
较血糖的变化时才有可比性。比色测定应同时进行 。
激素对血糖浓度的影响实 16
（POD）
H2O ＋红色醌类化合物
505nm
相对血糖浓度
光吸收法测定
激素对血糖浓度的影响实 7
7.朗伯-比尔定律
当一束平行的单色光通过均匀、无散射的溶液时， 在光强度、温度等条件不变的情况下，溶液吸光度 与溶液的浓度及液层厚度的乘积成正比。
Ａ=ＫＣＬ
激素对血糖浓度的影响实 8
标准管法测定未知样品含量
激素对血糖浓度的影响实 5
5.血糖测定的常用方法
无机化学法： Folin-Wu法
测定 方法
有机化学法：邻甲苯胺法
酶法：葡萄糖氧化酶法
激素对血糖浓度的影响实 6
6.GOD-POD法原理
葡萄糖氧化酶
（1）葡萄糖＋O2＋H2O （GOD） 葡萄糖酸＋H2O2
（2）4-氨基安替吡啉＋苯酚＋H2O2
过氧化物酶
肾上腺素通过促进肝糖原分解而升高血糖。
激素对血糖浓度的影响实 4
4.血糖测定的意义
➢ 临床：血糖检测是目前诊断糖代谢异常相关疾病的 主要依据。
➢ 科研：在代谢疾病的研究中，常测定血糖。在某些 药物的研究中，也涉及血糖的测定。
6.注射后取血并制备血滤液：方法同前，选择另一只耳朵，注 意做好标记。注射胰岛素的家兔，取血后立即腹腔或皮下注 射25%葡萄糖注射液10ml，以免家兔发生胰岛素性休克。
激素对血糖浓度的影响实 13
7.GOD-POD法测血糖：按下表操作
加入物(ml) 去蛋白血滤液
测定管 (注射前)
0.5
测定管 (注射后)
4.注射激素：取血后，一只注射胰岛素，0.75U/kg，60min 。 另一只注射肾上腺素，0.5mg/kg，30min。
注射方法：皮下注射。肚皮朝上，掂起皮肤，刺入皮下有落空感，回抽无 血，缓慢注入激素。
5.制去蛋白血滤液：这是注射前的血液。 制备方法：蛋白沉淀剂4ml＋全血0.2ml，混匀，室温放置7 分钟后，在漏斗上过滤，取滤液，标记为注射前的去蛋白血 滤液。
0.5
标准管 –
空白管 –
葡萄糖标准应用液
–
–
0.5
–
蛋白沉淀剂
–
–
–
0.5
酶酚混合试剂
3.0
3.0
3.0
3.0
混匀，置37℃水浴15min，调节波长505nm，以空白管调零，分别读取 A测、A标。
读取6个A值并记录：A肾前、A肾后、A标 A胰前、A胰后、A标
激素对血糖浓度的影响实 14
五、结果与分析
按下式分别计算注射胰岛素或肾上腺素前、后血糖浓度：
A测 C测＝ ×C标（5 mmol／L ）
A标 5 mmol／L为葡萄糖标准应用液的浓度值。 通过计算比较一下家兔注射前后血糖浓度的变化情况 。 正常人空腹血糖值：3.89～6.11 mmol／L
激素对血糖浓度的影响实 15
六、注意事项
1.采血时用耳缘静脉取血，注意安全，防止动物抓伤 。采集时要边采集边混匀。
A标=KC标L A测=KC测L
响实 9
722G型分光光度计的使用
1. 接通电源，打开开关，调整波长。 2. 比色杯中加入空白及待测样品，并放入分光光度计
中，注意：加入样品量不超过比色杯体积的3/4。 3. 调模式为“T（透射比）”，对空白对照进行调
“0”（开盖）和调“100”（闭盖）。 4. 调模式为“A（吸光度）”，测定待测样品的吸光
度值。
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三、主要仪器与试剂
❖ 试剂：胰岛素，肾上腺素 酒精，草酸钠，蛋白沉淀剂 酶酚混合试剂，苯甲酸溶液 葡萄糖标准贮存液（100mmol/L） 葡萄糖标准应用液（5mmol/L）
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四、实验操作
1.准备：正常家兔两只，实验前预先饥饿16h，称体重,并记录 （kg）。兔子抓取方法：一手抓取颈背部皮肤，另一只手托臀部。
激素对血糖浓度的影响实 验
二、实验原理
1.血糖是指血液中的葡萄糖。 人体生理血糖水平维持在3.89~6.11mol/l。
2.血糖的来源与去路
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3.血糖的激素调节
降低血糖：胰岛素 升高血糖：肾上腺素、胰高血糖素、糖皮质激素和生长素等。
❖胰岛素是唯一降低血糖的激素。 胰岛素促进肝脏和肌肉将葡萄糖氧化合成糖原，又
2.制备抗凝管：在洁净、干燥的试管中放入一小勺抗凝剂（草 酸钠）。
3.注射前取血：一般以耳缘静脉取血，拔毛，用乙醇擦洗，使 血管充血（弹动几下），在耳缘静脉外侧远心端用三棱针扎 破放血，将血液滴入抗凝管中，约取1~2ml，边收集边混匀 ，以防血液凝固。取血后用干棉球压迫血管止血。
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2.准确吸取0.2ml的全血。 3.采血后要立即制备去蛋白血滤液。 4.测定管分胰岛素组和肾上腺素组，应同时测定，比
较血糖的变化时才有可比性。比色测定应同时进行 。
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（POD）
H2O ＋红色醌类化合物
505nm
相对血糖浓度
光吸收法测定
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7.朗伯-比尔定律
当一束平行的单色光通过均匀、无散射的溶液时， 在光强度、温度等条件不变的情况下，溶液吸光度 与溶液的浓度及液层厚度的乘积成正比。
Ａ=ＫＣＬ
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标准管法测定未知样品含量
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5.血糖测定的常用方法
无机化学法： Folin-Wu法
测定 方法
有机化学法：邻甲苯胺法
酶法：葡萄糖氧化酶法
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6.GOD-POD法原理
葡萄糖氧化酶
（1）葡萄糖＋O2＋H2O （GOD） 葡萄糖酸＋H2O2
（2）4-氨基安替吡啉＋苯酚＋H2O2
过氧化物酶