生物化学基本知识

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生物化学重点知识

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生物化学重点知识生物化学是生物学与化学的交叉领域,研究生物体内的化学反应和生物分子之间的相互作用。

在生物化学的学习过程中,有一些重点知识是必须要掌握的,下面将对一些重点知识进行详细介绍。

一、生物大分子生物大分子是构成生物体的主要分子,包括蛋白质、核酸、多糖和脂质。

其中,蛋白质是生物体内最为重要的大分子之一,具有结构和功能的双重性。

蛋白质的结构由氨基酸组成,氨基酸通过肽键连接而成。

蛋白质的功能多种多样,包括参与代谢反应、传递信号、构建细胞结构等。

另外,核酸是生物体内贮存和传递遗传信息的分子,包括DNA和RNA两类。

DNA是遗传信息的载体,其双螺旋结构能够稳定保存大量的遗传信息。

而RNA主要参与蛋白质的合成过程,包括转录和翻译。

多糖是生物体内的能量储备和结构支持物质,如淀粉、糖原和纤维素等。

多糖的结构复杂多样,具有不同的功能和生物活性。

脂质是生物体内最不溶于水的大分子,包括脂肪酸、甘油和磷脂等。

脂质在细胞膜的构建和代谢调节中起着重要作用。

二、酶和酶促反应酶是生物体内催化化学反应的蛋白质,具有高度的特异性和效率。

酶可以加速生物体内代谢反应的进行,并且在反应结束后不被消耗。

酶的催化活性受到温度、pH值等环境因素的影响。

酶促反应是在酶的催化下进行的生物体内化学反应。

酶促反应遵循米氏动力学,包括亲和力、酶底物复合物和酶活性等步骤。

酶促反应在维持生物体内稳态和平衡中起着不可替代的作用。

三、代谢途径代谢是生物体内所有化学反应的总称,包括合成代谢和分解代谢两个方面。

在代谢中,有一些重要的途径是需要重点掌握的。

糖代谢途径是生物体内最主要的能量来源,包括糖原异生途径和糖酵解途径。

细胞通过这些途径产生ATP能量,供给细胞代谢和功能活动。

脂肪酸代谢途径是细胞内脂质代谢的关键过程,包括脂质合成和脂质分解。

脂肪酸代谢可以提供额外的能量供应,同时也参与胆固醇合成等生物学过程。

氨基酸代谢途径是蛋白质合成和代谢的基础,主要包括氨基酸转氨、氨基酸降解和尿素循环等步骤。

生物化学的基本知识

生物化学的基本知识

生物化学的基本知识生物化学(Biochemistry)是研究生物体内各种物质的化学成分及其化学变化规律的学科,是现代生命科学的一个分支。

它研究的是生物体内发生的化学反应,是生命活动得以进行的基础。

生物化学是一个综合性较强的学科,它涉及到有机化学、生物学、物理化学等多个学科。

下面我们来一起了解一下生物化学的基本知识。

1. 生命基础化学生命的原子组成主要是碳、氢、氮、氧、磷和硫六种元素,其中碳是生物分子最常见的元素。

生物分子主要是由碳、氢、氧、氮这四种元素构成的,它们通过共价键形成生物大分子如蛋白质、核酸、多糖等。

生物大分子可分为四类:蛋白质、核酸、多糖和脂类。

蛋白质和核酸是生命体内最重要的两种大分子,多糖则是在膳食中进行质量丰富的提供。

2. 蛋白质蛋白质是构成细胞的主要结构基质之一,在生物体中发挥着复杂多样的生物功能。

蛋白质由一条或多条链构成,每条链是由氨基酸经肽键连接而成的。

氨基酸是由氨基、羧基和侧链组成的,侧链决定了氨基酸的特点和生物活性。

现有的氨基酸约有20种,它们的侧链结构不同,决定了它们的性质和作用。

蛋白质的结构有四级,分别是原生结构、二级结构、三级结构和四级结构。

3. 核酸核酸是构成细胞核的主要成分,在遗传信息传递中具有重要作用。

核酸分为DNA和RNA两种,DNA是遗传信息的贮存库,通过复制保障遗传信息的保持,而RNA则是遗传信息的中介分子。

DNA分子由若干个核苷酸经磷酸二酯键连接而成,每个核苷酸由一个糖分子、一个碱基和一个磷酸分子组成。

碱基分为腺嘌呤(A)、鸟嘌呤(G)、胸腺嘧啶(T)和胞嘧啶(C)四种,它们通过氢键互相配对形成DNA的双螺旋结构。

4. 多糖多糖是由许多单糖分子连接而成的长链分子,是生物体内最为普遍的高分子化合物之一。

多糖的种类很多,包括淀粉、糖原、纤维素、果胶等等。

多糖的结构单一,是由单糖分子通过糖苷键连接而成,每一分子中单糖的数量也不等。

多糖在生命活动中扮演着极其重要的角色,它们不仅是植物细胞壁的构成要素,在身体内还有为机体提供能量的重要功能。

生物化学基础知识点

生物化学基础知识点

生物化学基础知识点生物化学是研究生物体内化学过程及其分子基础的学科,它涉及广泛的知识点,从分子结构到代谢途径,都是生物化学的研究范畴。

以下是一些重要的生物化学基础知识点。

1. 氨基酸和蛋白质氨基酸是构成蛋白质的基本单元,共有20种主要氨基酸。

氨基酸通过肽键连接形成多肽链,进而折叠成特定的三维结构形成蛋白质。

蛋白质在细胞中担任许多重要功能,如酶催化、结构支持和信号传导等。

2. 核酸和遗传信息核酸是构成遗传信息的分子,包括DNA和RNA。

DNA是遗传物质的主要组成部分,通过遗传密码储存了生物体的遗传信息。

RNA在遗传信息的转录和翻译过程中起着重要的作用。

3. 酶和催化酶是生物体内的催化剂,可以加速化学反应的速率。

酶与底物结合形成酶底物复合物,通过调节反应过渡态的能量,降低反应的活化能。

酶的活性受到许多因素的调控,如温度、pH值和底物浓度等。

4. 代谢途径代谢途径是生物体内分子合成和降解的途径,包括糖酵解、脂肪酸合成、三羧酸循环等。

这些代谢途径是维持生物体生命活动的重要过程,通过产生能量和合成细胞组分等方式维持生物体正常功能。

5. 能量转化与ATPATP是细胞内能量的主要储存和传递形式,通过其磷酸键的水解释放化学能,供细胞进行各种生物化学反应。

细胞内能量转化主要通过糖酵解、三羧酸循环和氧化磷酸化等过程进行。

6. 细胞膜与传递细胞膜是细胞内外分隔的界面,它具有选择性通透性,能够调控物质的进出。

细胞膜上的受体和信号分子相互作用,通过信号传导途径传递信息,影响细胞的生理功能。

7. 免疫与抗体免疫是生物体对抗外来病原体的防御系统,包括先天免疫和获得性免疫两个部分。

抗体是获得性免疫的主要效应分子,能够抑制病原体的生长和中和外来毒素。

8. 细胞信号传导细胞内外的信号分子通过受体与细胞表面结合,触发一系列的信号传导路径,改变细胞内的生物化学反应。

常见的信号传导路径包括细胞膜受体介导的信号传导和细胞核内的转录信号传导。

生物化学知识点

生物化学知识点

生物化学知识点生物化学是关于生物体内各种化学反应和物质组成的研究领域。

本文将探讨生物化学的几个重要知识点,包括生物大分子、酶的功能和调控、代谢途径及其调节以及核酸的结构和功能。

一、生物大分子生物大分子是生物体内重要的有机分子,包括蛋白质、核酸、多糖和脂类。

这些分子是组成细胞和生命活动的基本单位。

1. 蛋白质蛋白质是生物体内功能最为多样和复杂的生物大分子之一。

它们由氨基酸组成,通过肽键连接成长链。

蛋白质扮演着酶、结构蛋白、激素和抗体等重要角色。

2. 核酸核酸是生物体内负责储存和传递遗传信息的分子。

DNA和RNA是两种常见的核酸。

DNA以双螺旋结构存储遗传信息,RNA则参与蛋白质的合成过程。

3. 多糖多糖是由单糖分子通过糖苷键连接而成的聚合物。

多糖包括淀粉、糖原和纤维素等,它们在生物体内具有能量储存和结构支持的功能。

4. 脂类脂类是由甘油和脂肪酸组成的生物大分子。

它们在细胞膜的构建、能量储存和信号传导中起到重要作用。

二、酶的功能和调控酶是生物体内调节化学反应速率的生物催化剂。

酶可以加速反应速率、选择性催化和在温和条件下进行反应。

1. 酶的催化机制酶通过降低反应的活化能,使反应更容易发生。

酶与底物结合形成酶底物复合物,进而发生化学反应。

最终生成产物和释放酶。

2. 酶的调控酶的活性可以通过多种机制进行调控。

常见的调控方式包括底物浓度、温度、酸碱度以及激活剂和抑制剂的作用。

三、代谢途径及其调节代谢是生物体内物质和能量的转化过程。

生物体通过代谢途径来满足对营养物质的需求,并产生能量和代谢产物。

1. 糖代谢糖代谢是生物体内获得能量的重要途径。

它包括糖原的分解和糖酵解产生乳酸或乙醇,以及细胞呼吸中糖的氧化生成ATP。

2. 脂肪代谢脂肪代谢是能量储存的主要方式。

脂肪通过脂肪酸的β氧化产生ATP,而合成脂肪酸需要NADPH和ATP的供应。

3. 蛋白质代谢蛋白质代谢包括蛋白质的降解和合成。

降解过程中,蛋白质被降解为氨基酸,供给细胞合成新的蛋白质。

生物化学重点知识点

生物化学重点知识点

生物化学重点知识点生物化学是研究生物大分子的结构、组成、功能和相互作用的科学。

下面是一些生物化学的重点知识点:1.生物大分子:生物大分子包括蛋白质、核酸、多糖和脂质。

它们是生物体内最重要的分子,发挥着各种生命活动的功能。

2.氨基酸:氨基酸是蛋白质的基本组成部分。

有20种氨基酸,它们通过肽键连接形成多肽链。

氨基酸的顺序和空间结构决定了蛋白质的功能。

3.蛋白质结构:蛋白质的结构可分为四个层次:一级结构是氨基酸的顺序;二级结构是氢键的形成,如α-螺旋和β-折叠;三级结构是各个二级结构的空间排列;四级结构是多个蛋白质链的组装。

4.酶:酶是生物催化剂,能够加速化学反应的速率。

酶通过与底物形成亲和性复合物,降低活化能,使反应在生物条件下发生。

5.代谢途径:生物体的代谢途径包括糖酵解、有氧呼吸、脂肪酸合成、脂肪酸氧化和蛋白质合成等。

这些途径产生能量和所需的中间代谢产物。

6.核酸:核酸是遗传信息的携带者,包括DNA和RNA。

DNA是双链结构,RNA是单链结构。

DNA通过转录生成mRNA,再通过翻译生成蛋白质。

7.遗传密码:遗传密码是DNA碱基序列与蛋白质氨基酸序列之间的对应关系。

这种对应关系由密码子决定,每个密码子对应一种氨基酸。

8.代谢调控:生物体能够根据环境的变化来调控代谢途径。

这种调控发生在基因、酶活性和底物浓度等方面,以维持体内的稳态。

9.脂质:脂质是生物体内的重要功能分子,包括脂肪、磷脂和类固醇。

脂质在细胞膜结构和信号传导中起重要作用。

10.蛋白质折叠和疾病:蛋白质的错误折叠会导致一系列疾病,包括神经退行性疾病和癌症。

了解蛋白质折叠的机制有助于理解疾病的发生并开发新的治疗方法。

以上是生物化学的一些重点知识点。

了解这些知识可以帮助我们更好地理解生命的本质和生物体内各种生物化学过程的发生。

生物化学重点知识

生物化学重点知识

生物化学是研究生物体内生物分子的结构、功能和代谢过程的学科。

以下是一些生物化学中的重点知识:
1. 生物大分子:生物化学研究的主要对象包括碳水化合物、脂类、蛋白质和核酸等生物大分子。

它们在生物体内发挥着重要的结构和功能作用。

2. 酶:酶是生物体内催化反应的蛋白质,可以降低活化能,加速生物化学反应的进行。

酶在生物体内参与代谢、信号传导、免疫等多个生理过程。

3. 代谢途径:生物体内的代谢途径包括糖酵解、三羧酸循环、氧化磷酸化、脂肪酸代谢等。

这些途径将营养物质转化为能量和生物体内所需的物质。

4. DNA和RNA:DNA是遗传信息的载体,RNA参与基因表达调控。

DNA复制、转录和翻译是细胞内重要的生物化学过程。

5. 蛋白质结构与功能:蛋白质的结构决定了其功能。

蛋白质通过折叠成特定的空间结构来实现其生物学功能,如酶活性、结构支持等。

6. 细胞膜结构与运输:细胞膜是细胞的重要组成部分,具有选择性
通透性。

细胞膜上的载体蛋白质参与物质的跨膜运输。

7. 信号转导:细胞内外的信号转导是生物体内重要的调控机制,包括激素信号、神经递质信号等的传递与响应。

以上是生物化学中的一些重点知识,深入了解这些知识可以帮助理解生物体内生命活动的分子基础和机制。

生物化学在解释疾病发生机制、药物作用以及生物技术等领域有着重要的应用。

生物化学必看知识点总结优秀

生物化学必看知识点总结优秀

引言概述:生物化学是研究生物体内化学成分的组成、结构、功能以及各种生物化学过程的机理的学科。

掌握生物化学的基本知识是理解生物体内各种生命现象的基础,也是进一步研究生物医学、生物工程等领域的必备知识。

本文将从分子生物学、酶学、代谢、蛋白质和核酸等五个方面,总结生物化学中必看的知识点。

正文内容:1.分子生物学1.1DNA的结构和功能1.1.1DNA的碱基组成1.1.2DNA的双螺旋结构1.1.3DNA的复制和转录过程1.2RNA的结构和功能1.2.1RNA的种类和功能区别1.2.2RNA的结构和特点1.2.3RNA的转录和翻译过程1.3蛋白质的结构和功能1.3.1氨基酸的结构和分类1.3.2蛋白质的三级结构和四级结构1.3.3蛋白质的功能和种类1.4基因调控1.4.1转录调控和翻译调控1.4.2基因的启动子和转录因子1.4.3RNA的剪接和编辑1.5遗传密码1.5.1遗传密码的组成和特点1.5.2密码子的解读和起始密码子1.5.3用户密码监测2.酶学2.1酶的分类和特点2.1.1酶的命名规则和酶的活性2.1.2酶的结构和功能2.1.3酶的催化机制2.2酶促反应动力学2.2.1酶反应速率和反应速率常数2.2.2酶的最适温度和最适pH值2.2.3酶的抑制和激活调节2.3酶的应用2.3.1酶工程和酶的改造2.3.2酶在医学和工业上的应用2.3.3酶和药物相互作用3.代谢3.1糖代谢3.1.1糖的分类和代谢路径3.1.2糖酵解和糖异生3.1.3糖的调节和糖尿病3.2脂代谢3.2.1脂的分类和代谢途径3.2.2脂肪酸的合成和分解3.2.3脂的调节和脂代谢疾病3.3氮代谢3.3.1氨基酸的合成和降解3.3.2尿素循环和氨的排出3.3.3蛋白质的降解和合成3.4核酸代谢3.4.1核酸的合成和降解途径3.4.2核酸的功能和结构特点3.4.3DNA修复和基因突变3.5能量代谢调节3.5.1ATP的合成和利用3.5.2代谢途径的调节和平衡3.5.3能量代谢和细胞呼吸4.蛋白质4.1蛋白质的结构和维持4.1.1蛋白质结构的层次和稳定性4.1.2蛋白质质量控制和折叠4.2蛋白质表达和合成4.2.1蛋白质的翻译和翻译后修饰4.2.2蛋白质的定位和运输4.2.3蛋白质合成的调节和失调4.3蛋白质与疾病4.3.1蛋白质异常与疾病的关系4.3.2蛋白质药物和治疗策略4.3.3蛋白质组学在疾病研究中的应用5.核酸5.1DNA的复制和修复5.1.1DNA复制的机制和控制5.1.2DNA损伤修复和维持稳定性5.1.3DNA重组和基因转座5.2RNA的合成和调控5.2.1RNA转录的调节和翻译5.2.2RNA剪接和编辑5.2.3RNA和疾病的关系5.3RNA干扰和基因沉默5.3.1RNA干扰机制和调控5.3.2RNA干扰在基因治疗中的应用5.3.3RNA沉默和抗病毒防御总结:生物化学是研究生物体内化学成分和生物化学过程的重要学科,掌握其中的关键知识点对于理解生命的本质和生物体的正常功能至关重要。

生物化学知识点总整理

生物化学知识点总整理

生物化学知识点总整理一、蛋白质1.蛋白质的概念:由许多氨基酸通过肽键相连形成的高分子含氮化合物,由C、H、O、N、S元素组成,N的含量为16%。

2.氨基酸共有20种,分类:非极性疏水R基氨基酸、极性不带电荷R基氨基酸、带正电荷R基氨基酸(碱性氨基酸)、带负电荷R基氨基酸(酸性氨基酸)、芳香族氨基酸。

3.氨基酸的紫外线吸收特征:色氨酸和酪氨酸在280纳米波长附近存在吸收峰。

4.氨基酸的等电点:在某一PH值条件下,氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相同,溶液中氨基酸的净电荷为零,此时溶液的PH值称为该氨基酸的等电点;蛋白质等电点:在某一PH值下,蛋白质的净电荷为零,则该PH值称为蛋白质的等电点。

5.氨基酸残基:氨基酸缩合成肽之后氨基酸本身不完整,称为氨基酸残基。

6.半胱氨酸连接用二硫键(—S—S—)7.肽键:一个氨基酸的α-羧基与另一个氨基酸α-氨基脱水缩合形成的化学键。

8.N末端和C末端:主链的一端含有游离的α氨基称为氨基端或N端;另一端含有游离的α羧基,称为羧基端或C端。

9.蛋白质的分子结构:(1)一级结构:蛋白质分子内氨基酸的排列顺序,化学键为肽键和二硫键;(2)二级结构:多肽链主链的局部构象,不涉及侧链的空间排布,化学键为氢键,其主要形式为α螺旋、β折叠、β转角和无规则卷曲;(3)三级结构:整条肽链中,全部氨基酸残基的相对空间位置,即肽链中所有原子在三维空间的排布位置,化学键为疏水键、离子键、氢键及范德华力;(4)四级结构:蛋白质分子中各亚基的空间排布及亚基接触部位的布局和相互作用。

10.α螺旋:(1)肽平面围绕Cα旋转盘绕形成右手螺旋结构,称为α螺旋;(2).螺旋上升一圈,大约需要 3.6个氨基酸,螺距为0.54纳米,螺旋的直径为0.5纳米;(3).氨基酸的R基分布在螺旋的外侧;(4).在α螺旋中,每一个肽键的羰基氧与从该羰基所属氨基酸开始向后数第五个氨基酸的氨基氢形成氢键,从而使α螺旋非常稳定。

(完整版)生物化学知识点重点整理

(完整版)生物化学知识点重点整理

(完整版)生物化学知识点重点整理1.生物化学的概述生物化学是研究生物体内化学组成、结构、功能和变化的学科,是生物学和化学的交叉学科。

它研究的内容包括生物大分子(蛋白质、核酸、多糖和脂质)、酶、代谢、信号传导等生物体内的化学过程和物质的转化。

生物化学的研究对于理解生命的机理和病理过程具有重要意义。

2.蛋白质结构与功能蛋白质是生物体中最重要的生化分子之一,它们具有结构多样性和功能多样性。

蛋白质的结构包括四级结构:一级结构是氨基酸的线性序列;二级结构是氨基酸间的氢键形成的α螺旋和β折叠;三级结构是螺旋和折叠的空间结构;四级结构是多个多肽链的组合形成的复合体。

蛋白质的功能包括催化酶活性、调节信号传导、结构支架等。

3.核酸结构与功能核酸是生物体中的遗传物质,包括脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。

DNA是双螺旋结构,由磷酸二酯键连接的脱氧核苷酸组成。

RNA是单链结构,由磷酸二酯键连接的核苷酸组成。

核酸的功能包括存储遗传信息、传递遗传信息和调控基因表达。

4.代谢与能量转化代谢是生物体内的化学反应过程,包括合成反应和分解反应。

合成反应是通过合成物质来维持生物体的正常生理功能;分解反应是通过分解物质来提供能量。

能量转化是代谢过程中最重要的一环,包括能量的捕获、传递和释放。

生物体通过代谢和能量转化来获取能量、转化能量和维持生命活动。

5.酶的催化机制酶是生物体内催化反应的生物分子,能够加速化学反应的速率,降低反应的活化能。

酶的催化机制包括底物识别、底物结合、酶底物复合物的形成、催化反应和生成产物。

酶的催化过程中涉及到酶活性位点的氨基酸残基和底物之间的相互作用。

6.信号传导与细胞通讯细胞内和细胞间的信号传导是维持生物体内稳态和调节机体功能的重要手段。

信号传导包括外部信号的接受、内部信号的传递和效应的产生。

细胞间的信号传导有兴奋性传导和化学信号传导两种方式。

7.糖的分类与代谢糖是生物体内最重要的能量源,也是合成生物大分子的前体。

生物化学的基础知识

生物化学的基础知识
生产中
生物化学的应用
药物研发与生物医学
药物研发:生物化学在药物研发中的应用,如药物靶点的发现、药物分子的设计等
生物医学:生物化学在生物医学中的应用,如基因编辑、细胞治疗等
疾病诊断:生物化学在疾病诊断中的应用,如生物标志物的发现、诊断试剂的开发等
治疗方法:生物化学在治疗方法中的应用,如靶向治疗、免疫治疗等
生物化学基础知识
汇报人:XX
生物学基础知识 化学基础知识 生物化学的应用
生物学基础知识
细胞结构与功能
细胞膜:控制物质进出细胞 细胞核:储存遗传信息,控制细胞活动 细胞质:进行各种生化反应 细胞器:完成特定功能,如线粒体、内质网、高尔基体等
生物大分子
蛋白质:生命的基 础,由氨基酸组成
核酸:遗传信息的 载体,包括DNA 和RNA
变异结果:有利变异、不利 变异、中性变异
变异类型:基因突变、基因 重组、染色体变异
生物进化
达尔文进化论:自然选择、适者生 存
进化历程:从单细胞生物到多细胞 生物,从简单到复杂
添加标题
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生物多样性:物种丰富度、遗传多 样性、生态系统多样性
进化证据:化石记录、分子生物学、 比较解剖学
热力学第二定律:熵增原理,能 量转化过程中,熵总是增加的, 表示能量转化的效率和反应,生成
盐和水
离子平衡:溶 液中离子浓度 的平衡状态, 受到温度、压 力等因素影响
酸碱指示剂: 用于指示溶液 酸碱性的化学 物质,如酚酞、
甲基橙等
酸碱滴定:通 过滴定法测定 溶液的酸碱度, 广泛应用于化 学实验和工业
环境保护与治理
生物化学在环境 保护中的应用: 如污水处理、废 气处理等

生化知识点

生化知识点

绪论一、什么是生物化学?生命的化学是研究生物体内化学分子与化学反应的基础生命科学,生物化学从分子水平探讨生命现象的本质。

二、生物化学研究的主要内容1. 生物分子的结构与功能2. 物质的代谢及其调节3. 基因信息传递及其调控第1章蛋白质的结构与功能一.蛋白质的分子组成1. 蛋白质的元素组成:主要元素:碳、氢、氧、氮其他元素:磷、铁、铜、锌、锰、钴、钼、碘,等等2. 蛋白质元素组成的特点各种蛋白质的含氮量很接近,平均值为16%。

3. 氨基酸的分类非极性脂肪族氨基酸极性中性氨基酸芳香族氨基酸酸性氨基酸碱性氨基酸4. 等电点在某一pH的溶液中,氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等,成为兼性离子,呈电中性。

此时溶液的pH值称为该氨基酸的等电点。

5. 测定蛋白质溶液280nm的光吸收值是分析溶液中蛋白质含量的快速简便的方法6. 肽键是由一个氨基酸的α-羧基与另一个氨基酸的α-氨基脱水缩合而形成的化学键。

肽键化学本质是一个酰胺键。

7. 氨基酸通过肽键缩合而形成的化合物称为肽8. 肽链中的氨基酸分子因为脱水缩合而基团不全,被称为氨基酸残基二、蛋白质的分子结构1. 蛋白质的一级结构指在蛋白质分子从N-端至C-端的氨基酸排列顺序。

(稳定力:肽键)蛋白质一级结构是高级结构与功能的基础2. 蛋白质的二级结构:蛋白质分子中某一段肽链的局部空间结构,即该段肽链主链骨架原子的相对空间位置,并不涉及氨基酸残基侧链的构象。

蛋白质二级结构的主要有a-螺旋、b-折叠、b-转角、无规卷曲等四种类型。

(稳定力:氢键)a-螺旋的结构特点多肽链的主链围绕中心轴形成右手螺旋每3.6个氨基酸残基螺旋上升一圈,螺距为0.54nm 稳定力:氢键氨基酸残基的侧链在螺旋的外侧,并影响到a-螺旋的稳定性b-折叠的结构特点呈折纸状,即以每个肽单元的Ca为旋转点,依次折叠成锯齿状两条以上的肽链或一条肽链内的若干肽段的锯齿状结构可平行排列,走向可以相同,也可相反稳定力:氢键氨基酸残基的侧链基团交替地位于锯齿状结构的上下方,并影响到折叠的稳定性β-转角一般由四个氨基酸残基组成,并使肽链局部形成一个1800的回折。

生物化学必看知识点总结

生物化学必看知识点总结

生物化学必看知识点总结(一)生物大分子的结构和功能1、组成蛋白质的20种氨基酸的化学结构和分类。

2、氨基酸的理化性质。

3、肽键和肽。

4、蛋白质的一级结构及高级结构。

5、蛋白质结构和功能的关系。

6、蛋白质的理化性质(两性解离、沉淀、变性、凝固及呈色反应等)。

7、分离、纯化蛋白质的一般原理和方法。

8、核酸分子的组成,5种主要嘌呤、嘧啶碱的化学结构,核苷酸。

9、核酸的一级结构。

核酸的空间结构与功能。

10、核酸的变性、复性、杂交及应用。

11、酶的基本概念,全酶、辅酶和辅基,参与组成辅酶的维生素,酶的活性中心。

12、酶的作用机制,酶反应动力学,酶抑制的类型和特点。

13、酶的调节。

14、酶在医学上的应用。

(二)物质代谢及其调节1、糖酵解过程、意义及调节。

2、糖有氧氧化过程、意义及调节,能量的产生。

3、磷酸戊糖旁路的意义。

4、糖原合成和分解过程及其调节机制。

5、糖异生过程、意义及调节。

乳酸循环。

6、血糖的来源和去路,维持血糖恒定的机制。

7、脂肪酸分解代谢过程及能量的生成。

8、酮体的生成、利用和意义。

9、脂肪酸的合成过程,不饱和脂肪酸的生成。

10、多不饱和脂肪酸的意义。

11、磷脂的合成和分解。

12、胆固醇的主要合成途径及调控。

胆固醇的转化。

胆固醇酯的生成。

13、血浆脂蛋白的分类、组成、生理功用及代谢。

高脂血症的类型和特点。

14、生物氧化的特点。

15、呼吸链的组成,氧化磷酸化及影响氧化磷酸化的因素,底物水平磷酸化,高能磷酸化合物的储存和利用。

16、胞浆中NADH的氧化。

17、过氧化物酶体和微粒体中的酶类。

18、蛋白质的营养作用。

19、氨基酸的一般代谢(体内蛋白质的降解,氧化脱氨基,转氨基及联合脱氨基)。

20、氨基酸的脱羧基作用。

21、体内氨的来源和转运。

22、尿素的生成--鸟氨酸循环。

23、一碳单位的定义、来源、载体和功能。

24、甲硫氨酸、苯丙氨酸与酪氨酸的代谢。

25、嘌呤、嘧啶核苷酸的合成原料和分解产物,脱氧核苷酸的生成。

生物化学知识点总结

生物化学知识点总结

生物化学知识点总结一、生物大分子1. 蛋白质蛋白质是生物体内功能最为多样的大分子化合物,其分子量从几千到上百万不等。

蛋白质是由氨基酸通过肽键连接而成的,其结构包括一级结构、二级结构、三级结构和四级结构。

蛋白质的功能包括酶、结构蛋白、免疫蛋白等。

在生物体内,蛋白质不断地受到合成和降解的调控。

2.核酸核酸也是生物体内非常重要的大分子,主要包括DNA和RNA。

DNA是生物遗传信息的分子载体,其双螺旋结构具有很高的稳定性,基因组里的信息以DNA的形式存在,RNA则是DNA的复制和表达过程中的关键参与者。

核酸的功能包括遗传信息的传递、蛋白质的合成控制等。

3.多糖多糖是由多个单糖分子经由糖苷键链接而成的高分子化合物。

生物体内包括多种多糖类物质,如纤维素、淀粉、糖原、聚合葡萄糖和壳多糖等。

在生物体中,多糖具有贮存能量、提供结构支持以及信号识别等生理功能。

4.脂质脂质是一类疏水性的生物大分子,其结构包括脂类、脂肪酸、甘油和磷脂等。

脂质在细胞膜的形成和维护、能量的储存和释放以及信号转导等生理过程中扮演着重要的角色。

二、酶和酶动力学1. 酶的结构和功能酶是生物体内催化生物化学反应的分子,在酶的作用下,生物体内的化学反应可以以更快的速度进行。

酶的结构包括活性位、辅基和蛋白质结构。

酶的功能包括催化特定的反应、特异性和高效性等。

2. 酶动力学酶动力学研究的是酶催化反应的速率和反应机理。

酶动力学参数包括最大反应速率(Vmax)、米氏常数(Km)、酶的抑制和激活等。

酶动力学研究为理解生物化学反应提供了重要的信息。

三、生物体内代谢途径糖代谢包括糖异生途径、糖酵解途径、糖原代谢和半乳糖代谢等,主要在细胞内进行,产生能量和代谢产物。

2. 脂质代谢脂质代谢包括脂质合成、脂质分解、脂蛋白代谢和胆固醇代谢等,涉及到脂肪酸、三酰甘油、磷脂和胆固醇等的合成和降解过程。

3. 氨基酸代谢氨基酸代谢包括氨基酸合成、氨基酸降解、氨基酸转运等,对于蛋白质的降解和合成具有重要的作用,同时参与许多代谢途径。

生物化学知识点

生物化学知识点

生物化学知识点生化知识点概述1. 生物大分子的结构与功能- 蛋白质:氨基酸序列、一级、二级、三级和四级结构、蛋白质折叠、功能域。

- 核酸:DNA和RNA的结构、碱基配对、双螺旋、RNA的多样性(mRNA, tRNA, rRNA等)。

- 糖类:单糖、多糖、糖蛋白、糖脂。

- 脂质:甘油三酯、磷脂、甾体化合物。

2. 酶学- 酶的定义、特性、命名。

- 酶促反应动力学:米氏方程、酶抑制、酶激活。

- 酶的结构与机制:活性位点、催化机制、酶的调控。

3. 代谢途径- 糖酵解:步骤、调节、能量产出。

- 柠檬酸循环(TCA循环):反应、关键酶、调节。

- 电子传递链与氧化磷酸化:电子载体、质子梯度、ATP合成。

- 脂肪酸代谢:β-氧化、脂肪酸合成、脂肪酸氧化。

- 氨基酸代谢:脱氨基作用、转氨作用、氨基酸的降解和合成。

- 核苷酸代谢:碱基合成、核苷酸合成与降解。

4. 信号传导- 受体类型:G蛋白偶联受体、酪氨酸激酶受体、离子通道受体。

- 第二信使:cAMP、IP3、DAG、Ca2+。

- 信号传导途径:MAPK通路、PI3K/Akt通路、Wnt/β-catenin通路。

5. 基因表达与调控- DNA复制:复制机制、DNA聚合酶、复制起始点。

- 转录:RNA聚合酶、启动子、增强子、沉默子。

- 翻译:核糖体结构、tRNA作用、蛋白质合成过程。

- 基因调控:表观遗传学、非编码RNA、转录因子。

6. 分子生物学技术- 克隆技术:限制性内切酶、连接酶、载体、转化。

- PCR技术:原理、引物设计、扩增程序。

- 基因编辑:CRISPR-Cas9、TALENs、ZFNs。

- 蛋白质组学:质谱分析、蛋白质芯片、蛋白质互作。

7. 细胞结构与功能- 细胞膜:脂质双层、膜蛋白、膜流动性。

- 细胞器:线粒体、内质网、高尔基体、溶酶体。

- 细胞骨架:微丝、中间丝、微管。

- 细胞周期:G1、S、G2、M期、细胞凋亡。

8. 生物化学疾病- 代谢疾病:苯丙酮尿症、糖原贮积病。

生物化学的基础知识

生物化学的基础知识

生物化学的基础知识生物化学的基础知识一、生物化学的的概念:生物化学(biochemistry)是利用化学的原理与方法去探讨生命的一门科学,它是介于化学、生物学及物理学之间的一门边缘学科。

二、生物化学的发展:1.叙述生物化学阶段:是生物化学发展的萌芽阶段,其主要的工作是分析和研究生物体的组成成分以及生物体的分泌物和排泄物。

2.动态生物化学阶段:是生物化学蓬勃发展的时期。

就在这一时期,人们基本上弄清了生物体内各种主要化学物质的代谢途径。

3.分子生物学阶段:这一阶段的主要研究工作就是探讨各种生物大分子的结构与其功能之间的关系。

三、生物化学研究的主要方面:1.生物体的物质组成:高等生物体主要由蛋白质、核酸、糖类、脂类以及水、无机盐等组成,此外还含有一些低分子物质。

2.物质代谢:物质代谢的基本过程主要包括三大步骤:消化、吸收→中间代谢→排泄。

其中,中间代谢过程是在细胞内进行的,最为复杂的化学变化过程,它包括合成代谢,分解代谢,物质互变,代谢调控,能量代谢几方面的内容。

3.细胞信号转导:细胞内存在多条信号转导途径,而这些途径之间通过一定的方式方式相互交织在一起,从而构成了非常复杂的信号转导网络,调控细胞的代谢、生理活动及生长分化。

4.生物分子的结构与功能:通过对生物大分子结构的理解,揭示结构与功能之间的关系。

5.遗传与繁殖:对生物体遗传与繁殖的分子机制的研究,也是现代生物化学与分子生物学研究的一个重要内容。

第二章蛋白质的结构与功能一、氨基酸1.结构特点:氨基酸(aminoacid)是蛋白质分子的基本组成单位。

构成天然蛋白质分子的氨基酸约有20种,除脯氨酸为α-亚氨基酸、甘氨酸不含手性碳原子外,其余氨基酸均为L-α-氨基酸。

2.分类:根据氨基酸的R基团的极性大小可将氨基酸分为四类:①非极性中性氨基酸(8种);②极性中性氨基酸(7种);③酸性氨基酸(Glu和Asp);④碱性氨基酸(Lys、Arg和His)。

二、肽键与肽链:肽键(peptidebond)是指由一分子氨基酸的α-羧基与另一分子氨基酸的α-氨基经脱水而形成的共价键(-CO-NH-)。

生化知识点总结

生化知识点总结

生化知识点总结生物化学(Biochemistry)是研究生命体内的各种化学物质和化学反应的科学。

它主要研究生命体内分子之间的相互作用、分子结构和功能、代谢途径、遗传信息的传递等。

1. 生物大分子:生物化学主要研究四种生物大分子,分别是蛋白质、核酸、多糖和脂质。

蛋白质是构成生物体的主要结构组分,也是生物体内许多生物化学反应的催化剂。

核酸是存储和传递遗传信息的分子。

多糖主要包括多糖、寡糖和单糖,是生物体内能量和结构材料的重要来源。

脂质是生物体内重要的能量储备和细胞膜的主要组成物质。

2. 酶:酶是生物体内催化化学反应的蛋白质,它能够加速生物体内各种化学反应的速率。

酶可通过调整反应底物的空间构型、降低反应的活化能和提供催化媒介等方式来促进反应。

生物体内有数千种不同的酶,它们通常都高度选择性地催化某一类反应。

3. 代谢途径:代谢是指生物体内各种化学反应的总称。

代谢途径包括有氧呼吸、无氧呼吸、光合作用等。

有氧呼吸是指在氧气存在下,有机物进一步氧化产生二氧化碳和能量。

无氧呼吸是指在缺氧的条件下,有机物的分解产生能量。

光合作用是指将光能转化为化学能,通过合成有机物来储存能量。

4. DNA和RNA:DNA(脱氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)是两种重要的核酸。

DNA是存储和传递遗传信息的分子,它由四种不同的碱基(腺嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶和鳟嘌呤)组成,通过它们的不同排列形成基因序列。

RNA参与了蛋白质的合成过程,通过与DNA相互配对来复制并传递遗传信息。

5. 蛋白质结构:蛋白质的结构可以分为四个层次:一级结构、二级结构、三级结构和四级结构。

一级结构是指蛋白质的氨基酸序列。

二级结构是指通过氢键和静电作用形成的局部折叠,常见的二级结构有α-螺旋和β-折叠。

三级结构是指蛋白质的全局折叠形态。

四级结构是多个蛋白质亚基的组合形成的复合物。

6. 遗传密码:遗传密码是DNA上的碱基序列与蛋白质合成之间的翻译体系。

DNA上的三个碱基(核苷酸)形成一个密码子,每个密码子对应一个特定的氨基酸。

检验师生物化学知识点

检验师生物化学知识点

检验师生物化学知识点
1. 蛋白质化学:包括蛋白质的结构、性质、分类和功能。

了解氨基酸的结构和性质,以及蛋白质的一级、二级、三级和四级结构。

熟悉蛋白质的理化性质,如溶解性、电泳行为和沉淀反应。

2. 酶学:酶的定义、分类和催化机制。

了解酶的命名法和国际系统分类法。

掌握酶促反应动力学,包括米-曼氏方程和酶活性的调节。

3. 糖代谢:了解碳水化合物的分类和结构。

掌握糖酵解、糖有氧氧化、糖原合成和分解的过程及关键酶。

熟悉糖异生和血糖调节的机制。

4. 脂质代谢:包括脂质的分类、结构和功能。

了解脂肪酸的β-氧化、脂肪酸合成和磷脂的合成与降解过程。

5. 核苷酸代谢:了解核苷酸的结构和功能。

掌握嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸的合成与分解途径。

6. 肝功能检查:包括肝功能试验的目的和意义。

熟悉血清酶学指标(如谷丙转氨酶、谷草转氨酶等)、胆红素、蛋白质和脂质代谢指标在肝功能评估中的应用。

7. 肾功能检查:了解肾功能试验的目的和意义。

掌握血清肌酐、尿素氮、尿酸等指标在肾功能评估中的应用。

8. 分子生物学技术:包括聚合酶链式反应(PCR)、实时荧光定量 PCR、基因测序等技术的原理和应用。

以上是检验师生物化学的一些重要知识点,涵盖了蛋白质、酶、糖、脂质、核苷酸等方面的内容。

这些知识点对于理解生物体的代谢过程、疾病的发生机制以及实验室检测的原理和结果解释都非常重要。

生物化学专业知识点汇总

生物化学专业知识点汇总

生物化学专业知识点汇总生物化学是一门研究生物体内化学反应和分子结构的学科,涉及到许多重要的知识点。

本文将对生物化学专业的一些核心知识进行汇总,帮助读者更好地理解和掌握这些知识。

一、生物分子的组成1. 蛋白质:蛋白质是生物体内最重要的大分子,由氨基酸组成。

氨基酸通过肽键连接成多肽链,进一步折叠形成功能性的蛋白质结构。

蛋白质在生物体内具有多种功能,包括酶催化、结构支持、传递信号等。

2. 核酸:核酸是生物体内储存和传递遗传信息的分子。

DNA是双螺旋结构,由四种碱基(腺嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶和鸟嘌呤)组成,通过碱基配对形成DNA链。

RNA也由四种碱基组成,但是含有尿嘧啶代替胸腺嘧啶。

核酸在细胞中起着重要的遗传和蛋白质合成的作用。

3. 碳水化合物:碳水化合物是生物体内主要的能量来源。

单糖是最简单的碳水化合物,如葡萄糖、果糖等。

多糖由多个单糖分子连接而成,如淀粉、纤维素等。

4. 脂质:脂质是生物体内重要的结构和能量储存分子。

脂质包括甘油三酯、磷脂和固醇等。

磷脂是细胞膜的主要组成部分,固醇则在细胞膜的流动性和稳定性中起着重要作用。

二、酶的功能和调节1. 酶的功能:酶是生物体内催化化学反应的蛋白质。

酶可以加速化学反应的速率,而不被反应消耗。

酶的活性受到许多因素的影响,包括温度、pH值和底物浓度等。

2. 酶的调节:酶的活性可以通过多种方式进行调节。

其中一种常见的调节方式是酶的磷酸化和去磷酸化。

磷酸化可以激活或抑制酶的活性,而去磷酸化则具有相反的效果。

另外,酶的活性还可以通过底物浓度的调节和反馈机制来实现。

三、代谢途径1. 糖酵解:糖酵解是一种将葡萄糖分解为乳酸或乙醇的代谢途径。

这是一种无氧代谢途径,产生少量的ATP能量。

2. 三羧酸循环:三羧酸循环是将葡萄糖和脂肪酸分解为二氧化碳和水的过程。

这是一种有氧代谢途径,产生大量的ATP能量。

3. 呼吸链:呼吸链是将三羧酸循环和糖酵解产生的高能电子转化为ATP能量的过程。

生物化学的知识知识点梳理

生物化学的知识知识点梳理

生物化学的知识知识点梳理生物化学是研究生物体内化学成分、化学反应和化学过程的科学。

它涉及了生命现象中许多重要的基本成分和过程,包括蛋白质、核酸、糖类、脂类、酶、代谢途径等。

以下是生物化学的一些重要知识点的梳理。

1.生物分子:生物分子是指生命体中的化学组分,包括蛋白质、核酸、糖类和脂类。

蛋白质是生命体中最重要的一种生物分子,它们是由氨基酸组成的,具有结构和功能多样性。

核酸包括DNA和RNA,是遗传信息的存储和传递分子。

糖类是能提供能量的生物分子,常见的有单糖、双糖和多糖。

脂类包括甘油三酯、磷脂和类固醇等,它们在细胞膜组成、能量储存和信号传导等方面起着重要作用。

2.酶和酶反应:酶是生物体内催化化学反应的蛋白质分子,可以加速化学反应速率。

酶反应包括酶催化的氧化还原反应、酸碱反应和加成反应等。

酶反应符合酶学的基本原理,包括酶与底物之间的亲和力、酶活性的调节和抑制等。

3.代谢途径:代谢途径是生物体内分子转化的过程,是生物体生命活动的基础。

代谢途径包括葡萄糖代谢、脂肪酸代谢、氨基酸代谢、核酸代谢等。

这些代谢途径通过一系列的酶催化反应组成,产生能量和产物。

4.蛋白质结构和功能:蛋白质的结构包括一级结构、二级结构、三级结构和四级结构。

一级结构是指蛋白质的氨基酸序列,二级结构是指由氢键形成的α螺旋和β折叠,三级结构是指蛋白质在立体空间上的折叠形式,四级结构是由多个蛋白质亚单位组装而成的复合物。

蛋白质的功能包括结构支持、酶催化、运输、传导和免疫等多种生物学过程。

5.DNA结构和遗传信息的传递:DNA是双螺旋结构,由核苷酸组成,包括脱氧核糖和碱基对。

DNA的遗传信息通过碱基对的配对方式来传递,A与T之间形成两个氢键,G与C之间形成三个氢键。

DNA的复制、转录和翻译是生命体遗传信息传递的重要过程。

6.信号转导:信号转导是细胞内外信息的传递过程,涉及到激活和抑制信号通路的多个分子。

信号转导通常发生在细胞膜上的受体和细胞内的信号分子之间,通过级联反应将信号传递到细胞核,从而调控基因转录和细胞功能。

生物化学知识点

生物化学知识点

生物化学知识点第一章糖2、构型(configuration):在立体异构体中的原子或取代基团的空间排列关系叫构型,分为D-型和L-型。

当某一物质由一种构型转变为另一种构型时,要求共价键的断裂和重新生成。

构象(conformation):在分子中由于共价键的旋转所表现出来的原子或基团的不同空间排布叫构象。

一种构象改变为另一种构象时,不要求共价键的断裂和重新生成。

构象形式有无数种。

6、糠醛和羟甲基糠醛能与某些酚类作用生成有色的缩合物。

α-萘酚与糠醛和羟甲基糠醛生成紫色,应用这一反应来鉴定糖的存在称为Molisch试验。

间二苯酚与盐酸遇酮糖呈红色,遇醛糖显很浅的颜色,根据这一特性可以区分酮糖和醛糖,这一反应称为Seliwanoff。

第二章 脂 类1、 脂类的生物功能:①构成生物膜 ②是机体代谢所需燃料的贮存形式和运输形式 ③动物机体提供溶解于其中的必需脂肪酸和脂溶性维生素 ④某些萜类和固醇类物质具有营养代谢及调节作用 ⑤防止机械损伤与防止热量散发等保护作用 ⑥与细胞识别,种特异性和组织免疫等有密切关系 ⑦具有生物活性的某些维生素和激素也是脂类物质。

11、根据不同脂蛋白所含脂类多少,密度大小上的差别,可将血浆脂蛋白分为五个密度范围不同的组成部分:①乳糜微粒:由小肠上皮细胞合成,主要成分来自食物脂肪。

主要生理功能是转运外源性脂肪,最终被组织中脂蛋白酶、脂酶水解 ②极低密度脂蛋白(VLDL):由肝细胞合成,主要成分也是脂肪。

主要生理功能是转运内源性脂肪,最终被组织中脂蛋白酶水解③低密度脂蛋白(LDL):来自肝脏,富含胆固醇,是血浆中胆固醇的主要携带者,主要生理功能是转运内源性胆固醇经细胞膜上受体介导转递至肝细胞内水解 ④高密度脂蛋白(HDL):来自肝脏,颗粒最小,主要脂类组分是磷脂和胆固醇。

主要生理功能是转运磷脂及胆固醇酯至肝组织内水解,有清除血中胆固醇的作用 ⑤极高密度脂蛋白(VHDL):属清蛋白-游离脂肪酸性质。

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第六章生物化学实验基本知识主编:齐锦生编委:孔德娟齐锦生许丽辉杨崇辉周秀霞罗湘衡君智炜张晓玲王芳实验室要求一、实验课的目的1、加深理解:加深对生物化学基本理论的理解。

2、掌握技术:掌握生物化学的基本实验方法和实验技术(四大基本技术:离心、电泳、层析、比色)及分子生物学的一些基本技术和方法。

3、培养能力:培养学生的思维能力、动手能力和表达能力。

4、掌握精髓:科学的精髓是实事求是、敢于探索、善于创新的精神,要对实验中出现的一切反常现象进行讨论,并大胆提出自己的看法。

二、生化实验室规则和要求1、预习:课前要预习实验教材,了解实验目的、原理,熟悉操作规程。

2、秩序:自觉遵守纪律,维护教学秩序,不准迟到、早退,保持安静,严禁谈笑打闹,听从教师指导,未经教师同意,不得随意离开实验室。

3、整洁:搞好实验环境和仪器的卫生整洁,实验台面必须保持整洁,仪器药品要井然有序,公用试剂用毕,应立即盖严放回原处,勿使药品试剂撒在实验台面和地面。

实验完毕,需将药品试剂排列整齐,仪器要洗净倒置放好。

固体废物,如滤纸、棉花、血块不得倒入水池中,以免堵塞下水道;一般性废液可倒入水池中冲走,但强酸强碱或有毒有害溶液必须用水高度稀释后,方可倒入水池中,同时放水冲走,以免腐蚀水管。

全体同学由班长安排轮流值日,负责当天实验室卫生、安全和一些服务性工作,经教师验收合格后,方可离开实验室。

4、节约:使用仪器、药品、试剂及各种物品必须厉行节约,并节约水电。

应特别注意保持药品和试剂的纯净,严防混杂、乱用和污染。

使用和洗涤仪器应小心仔细,防止损坏,贵重仪器使用前应熟悉使用方法,严格遵守操作规程,严禁随意开动,发现故障后应立即报告指导教师,不要自己动手检修,如有损坏按学校规定赔偿。

5、安全:注意人身和国家财产安全是至关重要的,要时刻注意防火、防水、防电、防危险品、防事故,以免发生意外。

实验室内严禁吸烟。

使用乙醚、苯、乙醇、丙酮等易燃品时,不允许在电炉、酒精灯上直接加热。

实验中须远离火源,如有危险发生,应首先关掉电源;有机溶剂着火时,勿用水泼,以免扩大燃烧面积,可用沙土、灭火器具灭之。

用火时必须严格做到:火着人在,人走火灭。

用毕电器后及时切断电源。

加热试剂、液体时,管口不要对人,要十分小心操作,避免灼伤人。

实验室内一切物品未经本室负责教师批准,严禁携带出室外,有毒物品尤其如此。

借物必须办理登记手续。

生物化学实验技术概述一、层析法层析是利用混合物各组分物理化学性质(如:溶解度、吸附能力、电荷和分子量等)的差别,使各组分在支持物上集中分布在不同区域,借此将各组分分离。

层析系统分为两个相:固定相和流动相。

由于各组分受固定相的阻力和受流动相的推力影响不同,各组分移动速度也各异,从而使各组分得以分离。

此法首先用于有色物质的分离,故又称色层析法。

层析法是近代生物化学最常用的分析法之一,此法可以分离性质极为相似、而用一般化学方法难以分离的各种化合物,如各种氨基酸、核苷酸、糖、蛋白质等。

层析法有多种类型,根据所用两组分不同分为以下几类:吸附层析、分配层析、离子交换层析、凝胶层析和亲和层析等;根据操作方式不同分为:柱层析、薄层层析和纸层析等。

(一)吸附层析法:吸附层析法(absorption chromatography)是混合物随流动相通过吸附剂时,由于吸附剂对不同物质有不同的吸附力而使混合物分离的方法。

吸附层析根据操作方式的不同,分为柱层析与薄层层析两种。

1、柱层析法:柱层析法是用一根玻璃管柱,下端铺垫棉花或玻璃棉,管内加吸附剂粉末,用一种溶剂润湿后,即成为吸附柱,如图1中的(1)。

然后在柱顶部加入要分离的样品溶液,如图1中的(2)。

假如样品内含两种成分A和B,则二者被吸附在柱上端,形成色圈,如图1中的(3)。

样品溶液全部溶入吸附柱中之后,接着就加入合适的溶剂洗脱,如图6-0-1中的(4)。

A与B就随着溶剂的向下流动而移动。

最后分离情况如图1中的(5)所示。

图6-0-1 二元混合物的柱层析示意图在洗脱过程中,管内连续发生溶解、吸附、再溶解、再吸附的现象。

例如,被吸附后的A粒子被溶解(解吸作用)随溶剂下移,但遇到新的吸附剂,又将A粒子吸附,随后,新溶剂又使A粒子溶解下移。

由于溶剂与吸附剂对A与B的溶解力与吸附力不完全相同,A与B移动的速率也不同,经一定时间,如此反复地溶解与吸附,而形成两个环带,每一环带是一种纯物质。

如A 与B有颜色可看到色层;如样品无色,可用其它方法使之显色,为进一步鉴定,可将吸附柱从管中顶出来,用刀将各色层切开,然后分别洗脱,现在多采用溶剂洗脱法,即连续加入溶剂,连续分段收集洗脱剂,直到各成分顺序全部从柱中洗出为止。

最常用的吸附剂是硅胶和氧化铝。

硅胶的吸附能力和含水量关系极大,硅胶吸水后,吸附能力下降,常用于分离非极性的和极性不强的有机物,如甘油脂、磷脂、胆固醇等。

2、薄层层析法:薄层层析法是吸附剂在玻璃板上均匀地铺成薄层,把要分析的样品点加到薄层上,然后用适当的溶剂展开,而达到分离、鉴定的目的。

其优点是:设备简单,操作容易;层析展开时间短,分离时几乎不受温度的影响;可采用腐蚀性的显色剂,且可以在高温下显色;分离效率高。

薄板的制备:所用玻璃板表面必须光滑、清洁。

根据制薄板的方法不同薄板可以分为软板和硬板两种。

软板即不加粘合剂,将吸附剂干粉直接均匀铺在玻板上;制作简单方便,但是易被吹散。

硬板即用粘合剂如水或其他液体,将吸附剂调成糊状再铺板,经干燥后才能使用;制备虽然较繁琐,但易于保存。

具体制备方法如下:(1)软板:选用一根直径约为1~1.2cm的玻璃管,根据薄层的厚度在玻璃管两端缠几圈胶布,胶布的厚度按需要的薄层厚度而定。

常用的厚度约为0.4~1mm左右。

把干的吸附剂倒到玻璃板上,玻板的一端固定,防止推玻璃管时玻板移动,然后将玻璃管压在玻板上,把吸附剂由一端推向另一端,即成薄板。

要求:光滑、平整、厚度均匀。

(2)硬板:将适当调好的吸附剂倒在两块3mm玻板中间所夹的一块2mm厚度的玻板上,然后用一块边缘光滑的玻片把吸附剂刮向一边,即成厚度一定的薄板。

下面介绍氧化铝和硅胶硬板的制备方法。

氧化铝硬板:称取氧化铝G25g(G表示石膏,这种氧化铝中含5%锻石膏),加水25ml,在烧杯中调成糊状,铺层,先在空气中干燥,后置于200~220℃烘箱中烤4小时即可使用。

硅胶硬板:称取硅胶G30g,加水60~90ml,在烧杯中调成均匀糊状,立即铺层,室温内干燥后置烘箱中烘干。

此外,也可用淀粉或羧甲基纤维素钠(CMC)作粘合剂制板。

薄层层析的操作步骤是:点样、展开、显色。

(二)分配层析:分配层析是利用混合物在二种或二种以上的不同溶剂中的分配系数不同而使物质分离的方法。

如用带水的材料(载体)作为液相(固定相),加入与水不相混合或仅部分混合的溶剂(流动相),则混合物各组分在两相间发生不同的分配现象而逐渐分开,形成色层。

载体在分配层析中只起负担固定相的作用,它们是一些吸附力小、反应性弱的惰性物质,如淀粉、纤维素粉、滤纸等。

固定相除水外,还有稀硫酸、甲醇、仲酰胺等强极性溶液。

流动相则采用比固定相极性小或非极性的有机溶剂。

纸层析是最广泛应用的一种分配层析。

纸层析法以滤纸为载体,滤纸上吸附着水(约含20%—22%)是经常用的固定相,此类有机溶剂如醇、酚等为常用的流动相。

把欲分离的物质加在纸的一端,使流动溶剂经此移动,这样就在两相间发生分配现象。

由于物质分配系数的不同,就逐渐在纸上集中于不同的部位。

在固定相中分配趋势较大的成份,随流动相移动的速度就慢;反之,在流动相分配趋势较小的成分,移动速度就快。

物质在纸上移动的速度可以用R f表示:色斑中心至原点中心的距离R f = ──────────────溶剂前缘至原点中心的距离物质在一定溶剂中的分配系数是一定的,故移动速率(R f值)也恒定,因此,可以根据R f 值来鉴定被分离的物质。

纸层析法按操作方法分成两类,即:垂直型和水平型。

垂直型是将滤纸条悬起,使流动相向上或向下扩散;水平型是将圆形滤纸置于水平位,溶剂由中心向四周扩散。

垂直型使用较广,按分配物质的多寡,将滤纸截成长条,在某一端距边缘2~4cm处点样,待干后,将点样端边缘与溶液接触,在密盖的玻璃缸内进行展开见图6-0-1图6-0-2垂直纸层析上述方法只用一种溶剂系统进行一次展开,称为单向层析。

如果样品成分较多,而且彼此的R f值相近,单向层析分离效果不佳,可用双向层析法,即在长方形或方形滤纸的一角点样,卷成圆筒形,先用第一种溶剂系统展开,展开完毕吹干后转90º,再放于另一种溶剂系统中,向另一方向进行第二次展开,如此各成分分离较为清晰。

见图6-0-3图6-0-3(三)离子交换层析:离子交换层析法(ion exchange chromatography IEC)是利用离子交换剂对需要分离的各种离子有不同的亲和力而达到分离的目的,这种柱层析称为离子交换层析。

离子交换剂是通过化学反应将带电荷基团引入惰性支持物上而形成。

离子交换作用是指一溶剂中某一种离子与一固体中的另一种具有相同电荷的离子进行相互位置的调换。

由于各种离子所带电荷的多少不同,它们对交换剂的亲和力就有所差别。

因此,在洗脱过程中,各种离子由固体柱上先、后下来的顺序不同,从而可达到分离的目的。

这种离子交换是定量完成的,因此测定溶液中由固体上交换下来的离子量,可知样品中原有离子的含量,也可将吸附在交换剂上的样品的成分用另一洗脱液洗脱下来,进行定量测定。

离子交换层析主要用于蛋白质、多肽的分离。

核酸也是强极性分子,用离子交换层析也能得到很好的分离效果。

离子交换剂种类很多,根据交换剂上吸附的离子交换基团不同,可分为阳离子交换剂和阴离子交换剂;根据惰性支持物不同,又有树脂、纤维素、葡聚糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶及琼脂糖凝胶等种类。

目前大多采用的离子交换剂是合成离子交换剂,即离子交换树脂,其分为两大类:分子中具有酸性基团,能交换阳离子的称为阳离子交换树脂;分子中具有碱性基团,能交换阴离子的称为阴离子交换树脂。

按其解离性的大小,又可分为强弱两种:磺酸基(-SO3H)强酸性阳离子交换树脂酚羟基(-OH)弱酸性羧基(-COOH)强碱性季胺基(-NR4)阴离子交换树脂伯胺基(-NH2)弱碱性仲胺基(-NHR)叔胺基(-NR2)交换反应举例如下:R-SO3-H+ + M+X-R-SO3-M++ X-H+R4≡N+OH-+ H+X-R4≡N+X- + H+OH-离子交换树脂的交换容量与其结构有关,这直接关系到合成过程。

离子交换树脂主要是根据有机化学反应(如硝化、磺化、氯甲基化和胺化等)及高分子合成反应(如聚合及缩合)的基本原理进行合成的。

离子交换剂的母体聚合物有苯乙烯、酚醛及丙烯酸等。

常见的聚苯乙烯树脂由苯乙烯聚合,再加入二乙稀交联:(方程式1)插入附件1在这个母体上引进功能基就得到各种离子交换树脂,如制备强酸性阳离子树脂时,即将母体加以磺化:(方程式2)插入附件2制备强碱性阴离子交换树脂时,先将母体甲基化后,再加以胺化,即得:(方程式3)插入附件3这里,树脂中二乙烯苯的含量决定了树脂的交联度大小,应尽量选用交联度高些,而且有较高的交换容量的树脂。

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