实验九 红细胞比容的测定
动物生理学血液学实验
实验报告
课程名称：动物生理学指导老师：实验名称：血液学实验
一、实验目的和要求
1.掌握实验用兔颈动脉采血的方法
2.了解红细胞比容及其测定方法
3.血液凝固的基本过程及影响血凝的一些因素
装
二、实验内容和原理
订
将抗凝血放在特制有刻度的玻璃管(温氏分血管)中，经过离心沉淀，使血细胞线
与血浆分离。红细胞下沉，彼此压紧而又不改变每个血细胞的正常形态。根据玻璃管刻度的读数，可以计算出红细胞在全血中所占的容积百分比——即红细胞比容。
血液凝固可分为三个主要步骤:
第Ⅰ阶段是凝血因子FX激活成FXa并形成凝血酶原复合物（凝血酶原激活物）第Ⅱ阶段是凝血酶原（Prothrombin，FⅡ）激活成为凝血酶（thrombin，FⅡa）第Ⅲ阶段是纤维蛋白原（FI）转变成纤维蛋白（filbrin，FIa）
在这三个主要步骤中都需要Ca离子的参与
三、主要仪器设备
大兔一只，兔手术保定台，
烧杯（500ml，50ml），常用手术器械（手术刀、毛剪、手术剪、止血钳），线动脉套管，动脉夹
温氏分血管，长颈滴管，5毫升试管，离心机，天平，5ml 注射器
试管，试管架，吸管
2％戊巴比妥钠，3.8％柠檬酸钠，肝素，1％氯化钙，5％草酸钾，液体石蜡，带有开叉橡皮管的玻棒等。
四、操作方法和实验步骤
手术操作
2％戊巴比妥钠按1ml/kg的剂量从耳缘静脉注入实验用兔
麻醉后仰卧固定于手术台上（同时准备实验用试管等）
剪去颈部术野的被毛，切开皮肤，找出两侧颈动脉
将颈动脉剥离2厘米左右，然后在颈动脉下面穿两条线。将一侧颈动脉在远心端用线结扎，再于近心端用动脉夹夹住。结扎处与动脉夹之间最好不少于 1.5厘米
血细胞比容测定讲稿ppt课件
4、 计算红细胞平均直径 红细胞平均直径=被测细胞总格数/被测 细胞数*目镜测微器每格相当微米数 如：被测细胞总格数为980；被测细胞数 为200；目镜测微器每格的微米数为1.5 um ， 则 红 细 胞 平 均 直 径 =980/200*1.5 um=7.4 um
精选ppt
5、绘制红细胞直径曲线。以红细胞 直径微米数为横坐标，红细胞百分 率为纵坐标将各种不同直径的红细 胞百分率连接起来，即成红细胞直 径曲线。它可以清楚地反应红细胞 的大小和其分布情况。
精选ppt
（二）、正常参考值 红细胞直径6.7-7.7 um
精选ppt
（三）、临床意义 1、正常人红细胞直径大小差别不大， 直径曲线基底窄，呈突出的尖峰状， 其顶点位于7--8 um之间，红细胞 直径曲线基底愈宽、顶点愈低，表 示红细胞大小不均，差异愈大。
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2、主要用于贫血的鉴别诊断。 （1）小红细胞贫血时，平均红细胞
直径小于正常参考范围，平均直径 6.2—6.7 um，曲线基底略宽，顶 峰左移，如有红细胞大小不均时， 使曲线的基底部增宽。
精选ppt
（2）大细胞性贫血时，红细胞平均 直径大于正常参考范围，红细胞平 均直径7.5—9.6 um，红细胞直径 曲线的顶峰偏右，底部明显变宽， 曲线平坦。
精选ppt
（3）如果在正常细胞性贫血时，其 红细胞平均直径及其曲线图形与正 常相同。如急性失血性贫血。
血细胞比容测定讲稿-文档资料
三、检测方法及方法学评价
（一）、检测方法
1、温氏法:压积容量管长11cm，内 经 2.5cm ，管上刻有 0—100mm 刻 度的平底管，其读数一侧由下而上 供测红细胞容积用，另一侧由上而 下供红细胞沉降率测定用）
2、微量法:按常法消毒、穿刺手指， 将血液经自然毛细现象进入特制的 毛细玻管中（肝素），用套塞或橡 皮泥堵塞一端，放入专用离心机中， 以11000—12000r/min高速离心 5min。测量红细胞层和全层的长度， 计算比值，即为红细胞比积。
3、红细胞平均血红蛋白浓度（mean corpuscular hemoglobin concentration ， MCHC ） ， 指 平 均每升红细胞中所含血红蛋白浓度 （g/L）。
二、检测原理
对同一抗凝血标本同时计数红细胞、 测定血红蛋白和血细胞比容，由此 可进一步计算出红细胞3个平均指数。
（二）、方法学评价 1 、温氏法：中速离心 3000r/min ，离心 30min ；离心沉淀过程中不能完全排除 红细胞间残留的血浆，使结果偏高；所 用时间长、标本多，已属淘汰之列。
2、微量离心法：高速离心1100012000 r/min，离心5min；离心 力较大，红细胞间残留的血浆量平 均较温氏法低2%（约含1%-3% 残留血浆）；标本用量小，操作简 便，现被WHO定为首选常规方法。
血细胞比容测定
一、概念
红细胞比容测定的参考方法
红细胞比容测定的参考方法
红细胞比容测定是一种常用的临床检验方法，用于评估血液中红细胞的数量和体积，是血液学常规检查的重要指标之一。红细胞比容是指单位体积内红细胞所占的体积比例，通常以百分比表示。红细胞比容测定可以帮助医生判断贫血、多血症等疾病的存在与程度，并指导相应的治疗方案。
红细胞比容的测定方法有多种，根据实验原理和仪器设备的不同，可以分为以下几种常用的方法：
1. 高速离心法：这是最常用的一种测定红细胞比容的方法。首先，将采集到的全血样本放入一支离心管中，再将其以高速离心的方式进行离心。离心过程中，红细胞会沉降到离心管的底部，而白细胞和血小板则会留在上层血浆中。离心结束后，测定红细胞层和总血液层的高度比值，即为红细胞比容。
2. 微量法：这种方法适用于血样量较少的情况，例如新生儿或低体重儿。首先，用一支微量毛细管吸取适量的全血样本，再将其封闭在微量毛细管两端的玻璃球中。接下来，将玻璃球两端的血液位置作为参照点，测量红细胞层和总血液层的距离比值，即可得到红细胞比容。
3. 血常规自动分析仪法：这是目前最为常用的红细胞比容测定方法之一。通过血常规自动分析仪，可以直接测定出血样中红细胞比容的数值。这种方法操作简单、快速，并且可以同时测定多个血液指标，提高了工作效率。
无论使用哪种测定方法，都需要注意以下几个要点：
1. 标本采集：红细胞比容的测定需要采集新鲜的全血标本。在采集过程中，应避免出现空气污染或凝血现象，以免干扰后续的红细胞比容测定。
2. 仪器校准：在进行红细胞比容测定之前，需要确保使用的离心机、微量毛细管或血常规自动分析仪已经进行了正确的校准。校准过程应按照设备说明书的要求进行，以保证测定结果的准确性。
红细胞检测流程
红细胞检测流程
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血液生理实验实验一血液的组成和红细胞比容的测定
血液生理实验实验一血液的组成和红
细胞比容的测定
实验一：血液的组成和红细胞比容的测定
一、实验目的：
1.了解血液的组成和各组成部分的功能。
2.掌握红细胞比容的测定方法及其临床意义。
二、实验原理：
血液是由血浆和血细胞组成的混合物，其中血细胞包括红细胞、白细胞和血小板。红细胞在血液中占有较大比例，其主要功能是运输氧气和二氧化碳。红细胞比容是指红细胞在血液中所占的容积百分比，是反映血液中红细胞数量及血液浓度的指标之一。
三、实验步骤：
1.准备实验材料：5ml移液管、10ml离心管、离心机、电子天平、称量纸、记
号笔、标签纸、移液器、生理盐水、抗凝剂。
2.取5ml全血样本，用移液管准确加入10ml生理盐水中，摇匀制成混合液。
3.用电子天平称量混合液的总重量，并记录。
4.将混合液转移至离心管中，加入抗凝剂，标记好标签，放入离心机中，以
3000r/min的速度离心5分钟。
5.离心结束后，将离心管取出，用移液器将上层血浆移出，称量剩余的血细胞
及血浆重量，并记录。
6.根据公式计算红细胞比容：红细胞比容=血细胞重量/（血细胞重量+血浆重
量）×100%。
四、实验结果：
1.混合液的总重量为（）g。
2.离心后的血细胞及血浆重量为（）g。
3.根据公式计算得到红细胞比容为（）%。
五、实验总结：
通过本实验，我们了解了血液的组成和各组成部分的功能，掌握了红细胞比容的测定方法及其临床意义。通过观察和测量全血样本中的红细胞比容，可以反映血液中红细胞的相对数量及血液的浓度，对于了解患者的血液循环状态、指导临床治疗具有一定的参考价值。此外，实验过程中需要注意操作的规范性和准确性，以保证实验结果的可靠性。例如，在称量血细胞及血浆重量时，需确保样品已经完全转移至称量纸上，避免误差的产生。同时，在计算红细胞比容时，还需注意单位的换算和公式的正确使用。
血液的组成和红细胞比容的测定
血液的组成和红细胞比容的测定[实验目的]：
1、了解血液的组成，区别血浆、血清、血细胞及纤维蛋白。
2、测定红细胞比容。
[实验对象]：
家兔
[实验用品]：
兔手术器械、动脉插管、试管、小烧杯、离心机、抗凝剂（肝素钠等）。
[方法与步骤]：
1.兔颈动脉采血，徐徐注入试管A、B、C、D （肝素处理），F（未经肝素处理），封口膜封闭试管口,3000r/min离心30min。取出，读取前4支试管血细胞柱刻度及全血刻度；再次离心5min,若血细胞柱刻度不变，取前4支试管血细胞压积的平均值，即为此家兔的血细胞压积值。
血细胞压积=血细胞柱刻度/全血刻度
2.观察A、B、C、D、F试管中血液，分析其不同。
[实验结果]：
1． A、B、C、D试管上层为
血浆，下层为红细胞，中间一
白色薄层为白细胞和血小板；
而试管F中，上层为血清。
2．家兔血细胞比容测定：
编号血细胞柱长度(cm) 全血柱长度(cm) 红细胞比容(%)
A
B
C
D
此家兔红细胞比容为
[分析讨论]:
血液、血浆、血细胞比容
血清、血浆
[结论]：
1、2
[思考题]：
1.测定红细胞比容的实际意义是什么？
血液凝固及其影响因素
[实验目的]：
1、了解血液凝固的基本过程及加速或延缓血液凝固的因素。
2、学会兔颈部手术的基本操作。
[实验对象]：
家兔
[实验器材]：
哺乳动物手术器械、兔手术台、动脉插管、动脉夹、气管插管、注射器、小试管8支、小烧杯2个、竹签、恒温水浴槽、冰块、棉花。
[药品]：
25%乌拉坦溶液、石蜡油、肝素、草酸钾、肺组织浸液。
[实验步骤]：
1．麻醉与固定
仰卧位固定在兔台上，用１%普鲁卡因溶液局部麻醉。
红细胞比容测定参考方法
红细胞比容测定参考方法
引言：
红细胞比容是指血液中红细胞体积占血液总体积的百分比。它是评估血液中红细胞数量和体积的重要指标，对于了解人体的氧气运输能力和判断贫血等疾病具有重要的临床意义。本文将介绍一种常用的红细胞比容测定方法，包括原理、操作步骤、注意事项等，以供参考。
一、原理：
红细胞比容测定通常采用血液分析仪进行。血液分析仪可以通过测量血液中红细胞的数量和体积，然后计算出红细胞比容。常见的测定方法包括光学法、电容法和电阻法等。这些方法都是通过测量血液样本中红细胞的特定物理特性，如光散射、电容或电阻等，来计算红细胞比容。
二、操作步骤：
以下是使用血液分析仪进行红细胞比容测定的基本操作步骤：
1. 样本采集：首先，采集患者的血液样本，通常采用静脉穿刺取血。确保采血过程中严格无菌操作，以避免样本污染。
2. 样本处理：将采集的血液样本放置在适当的试管中，并按照血液分析仪的使用说明书进行预处理。通常需要将血液样本与适量的抗凝剂混合，以防止血液凝固。
3. 上机测定：将处理好的血液样本放置在血液分析仪上，根据仪器的操作规程进行测定。确保样本放置在正确的位置，并根据仪器的提示进行操作。
4. 数据读取：血液分析仪将自动测量红细胞数量和体积，并计算出红细胞比容。测定结果将在仪器的显示屏上显示。
5. 结果分析：根据测定结果，医生可以评估患者的红细胞比容是否正常，并进一步判断是否存在贫血等疾病。
三、注意事项：
在进行红细胞比容测定时，需要注意以下事项：
1. 采血过程中的无菌操作：确保采血过程中严格无菌操作，避免样本污染。
红细胞比容测定实验报告
红细胞比容测定实验报告
实验目的：
1.了解红细胞比容的概念和意义；
2.掌握红细胞比容测定的方法和技巧；
3.分析不同因素对红细胞比容的影响。
实验原理：
1.取一定量的血液样本，加入抗凝剂进行抗凝处理；
2.用离心机进行离心，使血液离心沉积，红细胞沉积到底部形成红细胞柱；
3.读取红细胞柱的体积，即为红细胞比容。
实验仪器和试剂：
1.离心机；
2.采血器；
3.抗凝剂（例如EDTA）；
4.离心管；
5.读数尺。
实验步骤：
1.用采血器采集一定量的患者血液样本；
2.加入适量的抗凝剂进行抗凝处理；
3.将抗凝后的血液样本转移到离心管中；
4.将离心管放入离心机中，进行高速离心；
5.离心结束后，取出离心管，观察离心后血液的形态变化；
6.用读数尺读取红细胞柱的高度，即为红细胞比容。
实验结果和数据处理：
通过实验测得的红细胞比容数值可以用来判断机体的贫血程度。正常
人的红细胞比容数值一般在37%~54%之间，如果低于37%，则表明机体存
在贫血。
实验探究：
在实验中，还可以通过改变不同因素来观察对红细胞比容的影响。例如，可以观察不同抗凝剂对红细胞比容的影响，不同离心速度对红细胞比
容的影响等。通过这些观察和比较，可以得出一些关于红细胞比容的规律。实验总结：
红细胞比容测定是一种简单而常用的实验方法，可以用来评估机体的
贫血程度。通过实验，我们不仅了解了红细胞比容的概念和意义，还掌握
了测定红细胞比容的方法和技巧。同时，通过观察和比较不同因素对红细
胞比容的影响，我们也对红细胞比容这一指标有了更深入的了解。
血细胞比容参考方法
血细胞比容参考方法
血细胞比容（hematocrit，Hct）是指血液中红细胞所占的比例，是临床上常用的一个指标，对于评估贫血、血液黏稠度、输血指征
等具有重要意义。血细胞比容的测定方法有许多种，包括离心法、
毛细管法、自动化测定法等。本文将介绍几种常见的血细胞比容参
考方法。
一、离心法。
离心法是一种最常用的血细胞比容测定方法。操作步骤如下，
首先，取一定量的抗凝血液标本，通常是EDTA抗凝血液；然后，将
血液标本置于离心管内，进行离心分离；最后，根据分离后的血液
成分高度，通过目测或专用离心机测定红细胞所占比例。离心法简
单易行，是临床上常用的血细胞比容测定方法之一。
二、毛细管法。
毛细管法是通过毛细管离心法测定血细胞比容的方法。操作步
骤如下，首先，取一定量的抗凝血液标本，用毛细管吸取血液标本，并用蜡封口；然后，将毛细管置于离心机内进行离心分离；最后，
根据分离后的血液成分高度，通过目测或专用毛细管离心仪测定红
细胞所占比例。毛细管法测定的结果准确可靠，是一种常用的血细
胞比容测定方法。
三、自动化测定法。
自动化测定法是利用自动化血液分析仪器测定血细胞比容的方法。操作步骤如下，首先，将血液标本加入自动化血液分析仪器中；然后，仪器自动进行血细胞比容的测定；最后，通过仪器显示或打
印结果。自动化测定法操作简便、结果准确，适用于大批量的血液
比容测定。
四、其他方法。
除了上述介绍的方法外，还有一些其他的血细胞比容测定方法，如微量法、压积法等。这些方法各有特点，适用于不同的临床情况。
总结。
血细胞比容是临床上重要的血液指标之一，对于评估贫血、血
血液生理之红细胞
格中红细胞数目。
测定管放入比色箱中。 因此血量与血液成份的相对稳定，是生命活动正常进行的基本条件。
肾脏病（肾盂积水、多囊肾、肾动脉狭窄）；
③比色：用蒸馏水逐滴加入测定管中，每次加入用玻 ④离取体出 后并血读液数自，然读凝数固时，以分红离细的胞淡所黄占色的透容明积液为体准称不为包血括清白。细胞和血小板沉积所形成的灰白色沉淀。 如果在做红细胞压璃积指棒标低将于正拌常，或而做摇红细匀胞计，数指再标正插常时入，那比么动色物可箱能患中有小进分子行性贫比血。色。这样测 红异细常胞 血计红数素（高铁定血红‘管蛋R白B中C血’症的、硫颜化血色红蛋逐白血渐症等变）；淡，直至与比色箱的颜色一致。 ④读数：读出其中液体凹面的刻度。 皮质醇增多症及脾结核等。
（3）在产重贫血、白血病、某些恶性肿瘤、甲亢、肾炎以及铅、砷、酒精中毒时亦常增高。 还可用于临床决定病人是否需要补液的实验检查依据。 血细胞比容测定的临床意义基本同红细胞计数或血红蛋白测定，常用作贫血诊断和分类的指标。 但对任何一种血沉增速的疾病，在病程内定期观察血沉的动态变化，可以帮助推断病变的发展情况。 在作血液学检测过程中，往往有互补过程、例如； ④读数：读出其中液体凹面的刻度。 了解红细胞比容及其测定，红细胞计数原理并掌握计数方法，学会用比色法测定血红蛋白含量的方法并掌握其原理。 ②推片及充液：在推片和充液前，先在显微镜下检查计数板和盖玻片是否清洁，若不干净则清洁后使用。 红细胞比容减少，见于正常孕妇、各种贫血病人，以及应用干扰素、青霉素、吲跺美辛（消炎痛）、维生素A等药物。 如果在做红细胞压积指标低于正常，而做红细胞计数指标正常时，那么动物可能患有小分子性贫血。
血细胞比容参考方法
血细胞比容参考方法
血细胞比容是指单位体积内的血液细胞所占的比例，通常用于评估红细胞的数量和质量。血细胞比容值的测定对于临床诊断和治疗具有重要意义，因此需要采用准确可靠的方法进行测定。本文将介绍几种常用的血细胞比容参考方法，帮助临床工作者和科研人员准确测定血细胞比容值。
一、毛细管法。
毛细管法是一种常用的血细胞比容测定方法，其原理是利用毛细管法将血液置于一根细长的毛细管内，然后通过离心或者静置的方法，使得血细胞沉积在毛细管底部形成红细胞柱，通过测量红细胞柱的长度和总血液柱的长度来计算血细胞比容值。毛细管法操作简单，结果准确可靠，是一种常用的参考方法。
二、离心法。
离心法是通过将一定量的血液置于离心管内，然后进行高速离心，使得红细胞和血浆分层，通过测量红细胞层和全血液层的比例来计算血细胞比容值。离心法操作简单，结果准确可靠，是一种常用的参考方法。
三、自动血细胞分析仪法。
随着科技的发展，现代医疗设备中普遍使用的自动血细胞分析仪也可以用来测定血细胞比容值。自动血细胞分析仪法操作简便，无需人工干预，结果准确可靠，是一种现代化的血细胞比容测定方法。
四、微量法。
微量法是一种通过微量血液样本来测定血细胞比容值的方法，其原理是利用微量血液样本和专用的测定仪器，通过特定的技术来测定血细胞比容值。微量法操作简便，结果准确可靠，是一种适用于特定场合的血细胞比容测定方法。
总结。
以上介绍了几种常用的血细胞比容参考方法，包括毛细管法、离心法、自动血细胞分析仪法和微量法。每种方法都有其适用的场合和特点，临床工作者和科研人员可以根据实际情况选择合适的方法进行血细胞比容测定。在进行测定时，需要严格按照操作规程进行，保证结果的准确性和可靠性，为临床诊断和治疗提供可靠的参考依据。希望本文的介绍对大家有所帮助。
人体解剖生理学：血液生理特性实验
凝血时间的测定法( 试管法)
取内径8 mm 的试管2 支。用消毒干燥的 注射器自兔心脏采血2 ml, 去针头, 将血液 沿管壁缓慢注入试管中, 每管1ml, 凝血时 间记录自血液进入注射器时开始计时, 每隔 30s 将试管倾斜一次, 角度约30 度, 观察 血液是否流动。直至试管倾斜到90 度血液 不再流动而完全凝固为止, 停止计时, 此即 为凝血时间
下层混浊红色，上层透明红色。 （部分溶 血）
完全为透明红色。 （完全溶血）
下层混浊红色，上层无色或极淡红 色。（不溶血）
下层混浊红色，上层透明红色。 （ 部分溶血）
完全为透明红色。 （完全溶血）
1、红细胞比容测定(hematocrit)
血细胞（40-50%）： 红细胞 白细胞 血小板
血浆/清（55%） 兔约33-50%
最小脆性（完全溶血）：0.28%～0.32%氯化 钠溶液
兔：
最大脆性（开始溶血）：0.42%～0.46%氯化 钠溶液
最小脆性（完全溶血）：0.34%～0.32%氯化 钠溶液
实验步骤
1、制备梯度低渗（注射器抽取NaCl溶液）
试剂 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1% 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 2.2 2.6 3.6 4.0 NaCl
抗凝
血 液 凝 固 途 径
纤溶
可以用自身血液或家兔血液
红细胞比容测定(示教)红细胞渗透脆性(示教)红细胞沉降率(精)
结果：
男：40～50％ 女：37～48％
红细胞渗透脆性（示教）
目的：学习测定红细胞渗透脆性 步骤：
1）配置各种低渗盐溶液（0.7％～0.25％ NaCl） 2）每试管内加抗凝血1滴，与盐溶液充分混合 3）室温下放置1h，观察试管内液体分层
1）液体透明红色，不分层：
实验报告： 目的，结果，讨论，结论
完全溶血（最大渗透抵抗力或最小渗透脆性）
2）上层透明红色，下层浑浊红色： 部分溶血（最小渗透抵抗力或最大渗透脆性） 3）上层无色，下层浑浊红色： 无红细胞溶解
结果：
0.42～0.46 ％ NaCl 溶液：部分溶血 0.32％～0.34％ NaCl 溶液：完全溶血
红细胞沉降率测定 （示教）
目的： 用惠氏法测定红细胞沉降率 步骤：
2） 颈总动脉插管（近心端用动脉夹夹住）
3） 试管或烧杯内放血 2 ml 左右, 每30秒观察一次，
记录血凝时间
观察项目
（1）正常 （2）少许棉花放入试管底部 （3）用石蜡油润滑整个试管内表面 （4）放在水浴槽中 （5）竹签搅拌血液（烧杯） （6）加肝素8单位 （7）放草酸钾 1～2ml (8) 放组织液 0.1ml
红细胞比容测定 （示教） 红细胞渗透脆性 （示教） 红细胞沉降率测定（示教）
红细胞比容、血红蛋白测定
离心后血液分层
layer after blood centrifugated
方法与步骤 改进的温氏分血管比容法
• 采血（加入抗凝剂肝素钠，抗凝血）
• 用移液器取1 ml抗凝血，放入EP管中。
• 离心：将分血管以3000 r/min离心30 min， 取出分血管，读取红细胞柱的高度。
[注意事项]
红细胞比容测定 血红蛋白测定
一、红细胞比容测定 目的 掌握红细胞比容的测定方法。
原理 将定量的抗凝血灌注于带刻度玻璃管中，定时、定速 离心后,有形成分和血浆分离，上层呈淡黄色的液体是血 浆，中间很薄一层为灰白色，即白细胞和血小板（或栓细 胞），下层为暗红色的红细胞，彼此压紧而不改变细胞的 正常形态。根据红细胞柱及全血高度，可计算出红细胞在 全血中的容积比值，即为红细胞比容（压积） 。
• 选择抗凝剂必须考虑到不能使红细胞变形、 溶解。本实验采用肝素钠抗凝。 • 血液与抗凝剂混合、注血时应避免动作剧 烈引起红细胞破裂。 • 温氏分血管内壁要充分干燥。血液进入毛 细管内的刻度读数要精确，血柱中不得有 气泡。
二、血红蛋白的测定
• 目的 掌握用比色法测定动物的血红蛋白的含量。
• 原理 血红蛋白的颜色常与氧的结合量多少有关。 但当用一定的氧化剂将其氧化时，可使其转变为 稳定、棕色的高铁血红蛋白，而且颜色与血红蛋 白（或高铁血红蛋白）的浓度成正比。可与标准 色进行对比，求出血红蛋白的浓度，即每升血液 中含血红蛋白克数（g·L-1）。
【生理学实验】血液学实验
实验报告
实验名称
血液学实验
实验目的
1、掌握实验用兔颈动脉采血的方法
2、了解红细胞比容及其测定方法
3、血液凝固的基本过程及影响血凝的一些因素
实验原理
1、红细胞比容测定原理
将抗凝血放在特制有刻度的玻璃管(温氏分血管)中，经过离心沉淀，使血细胞与血浆分离。红细胞下沉，彼此压紧而又不改变每个血细胞的正常形态。根据玻璃管刻度的读数，可以计算出红细胞在全血中所占的容积百分比——即红细胞比容。 2、血液凝固原理
血液凝固可分为三个主要步骤。第Ⅰ阶段是凝血因子FX 激活成FXa 并形成凝血酶原复合物（凝血酶原激活物）第Ⅱ阶段是凝血酶原（Prothrombin ，F Ⅱ）激活成为凝血酶（thrombin ，F Ⅱa ）第Ⅲ阶段是纤维蛋白原（FI ）转变成纤维蛋白（filbrin ，FIa ）。在这三个主要步骤中都需要Ca 离子的参与。
实验材料及设备
材料：大兔一只，兔手术保定台， 设备：烧杯（500ml ，50ml ），常用手术器械（手术刀、毛剪、手术剪、止血钳），线动脉套管，动脉夹 温氏分血管，长颈滴管，5毫升试管，离心机，天平，5ml 注射器试管，试管架，吸管，2％戊巴比妥钠，3.8％柠檬酸钠，肝素，1％氯化钙，5％草酸钾，液体石蜡，带有开叉橡皮管的玻棒等。
试验方法及步骤
(一)手术操作
1、2％戊巴比妥钠按1ml/kg 的剂量从耳缘静脉注入实验用兔
2、麻醉后仰卧固定于手术台上（同时准备实验用试管等）
3、剪去颈部术野的被毛，切开皮肤，找出两侧颈动脉
4、将颈动脉剥离2厘米左右，然后在颈动脉下面穿两条线。将一侧颈动脉在远心端用线结扎，再于近心端用动脉夹夹住。结扎处与动脉夹之间最好不少于1.5厘米
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指导老师: 韩晓华
实验九 红细胞比容测定（示教）
目的： 学习测定红细胞比容的方法 步骤：
1）家兔以乌拉坦（1g/kg，i.v.）麻醉、背位固定 2）颈总动脉插管（用0.1％肝素溶液湿润），
目的： 用惠氏法测定红细胞沉降率 步骤：
1）取抗凝血至惠氏沉降管0刻度，擦拭外面血迹 2） 将沉降管固定在固定架上 3） 1h 末读取红细胞下沉的毫米数
结果：男性 0~15 mm/h; 女性 0～20 mm/h
实验十五 血液凝固
目的：了解血液凝固的基本过程及
加速或延缓血凝的因素
步骤：
1） 家兔以乌拉坦（1g/kg，i.v.）麻醉、背位固定 2） 颈总动脉插管（近心端用动脉夹夹住） 3） 试管或烧杯内放血 2 ml 左右, 每30秒观察一次，
放血入肝素抗凝烧杯内 3）吸取10ml抗凝血入离心管，以3000rmp离心
30min 4）读数，计算红细胞比容（％）
结果：
男：40～50％ 女：37～48％
实验十 红细胞渗透脆性（示教）
目的：学习测定红细胞渗透脆性 步骤：
1）配置各种低渗盐溶液（0.7％～0.25％ NaCl） 2）每试管内加抗凝血1滴，与盐溶液充分混合 3）室温下放置1h，观察试管内液体分层
记录血凝时间
观察项目
（1）正常 （2）少许棉花放入试管底部 （3）用石蜡油润滑整个试管内表面 （4）放在水浴槽中 （5）竹签Baidu Nhomakorabea拌血液（烧杯） （6）加肝素8单位 （7）放草酸钾 1～2ml
(8) 放组织液 0.1ml
实验报告： 目的，结果，讨论，结论
1）液体透明红色，不分层： 完全溶血（最大渗透抵抗力或最小渗透脆性）
2）上层透明红色，下层浑浊红色： 部分溶血（最小渗透抵抗力或最大渗透脆性）
3）上层无色，下层浑浊红色： 无红细胞溶解
结果：
0.42～0.46 ％ NaCl 溶液：部分溶血 0.32％～0.34％ NaCl 溶液：完全溶血
实验十一 红细胞沉降率测定 （示教）