细胞培养室设计

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在一定温度下,一定体积的空气中含有的水气越少,则空 气越干燥;水气越多,则空气越潮湿。
在此意义下,常用绝对湿度、相对湿度、比较湿度、混合 比、饱和差以及露点等物理量来表示;若表示在湿蒸气中 水蒸汽的质量占蒸气总质量(体积)的百分比,则称之为蒸 气的湿度。湿度不够或过高都不利于细胞生长。
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动物细胞培养是一种无菌技术,要求工作环境和条件必须保证 无微生物和不受其他有害因素的影响。为防止微生物污染和有 害因素的影响,动物细胞培养室要求环境清洁,空气清新、干 燥、无尘。动物细胞培养实验室由准备区、清洗区、消毒灭菌 区、无菌操作区、培养区和储存区6部分组成,这些区域的共同 特点是房间要宽敞、明亮,地面要便于清洁、防滑,墙壁的质 地光滑坚硬,仪器设备布局合理,方便操作,避免交叉干扰, 陈设简洁,便于清扫。
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无菌室主要用于实验材料的接种操作, 所以也称接种室。
理想的无菌室应有内、外两间,内间是 无菌操作间,外间是缓冲间。
房间容积不宜过大,以便于空气灭菌。
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缓冲间用于准备工作,还有防止污 染的作用,以保证操作间的无菌环 境,同时可放置恒温培养箱以及必 需的小型仪器。
体外培养的细胞和体内细胞一样, 需要在恒定的温度下生存,一般最 适宜生长温度为37℃,温度变ຫໍສະໝຸດ Baidu不 应超过±0.5℃,这主要是由酶和 蛋白质所需的最适温度决定的。温 度过低时细胞生长缓慢甚至不生长, 温度过高导致细细胞胞培养室死设计亡,温度升高
湿度是表示大气干燥程度的物理量。空气的干湿程度称为 “湿度”。
动物细胞培养室的各种工作区域 具有不同的特性和用途,在进行相 应的操作时,要严格遵守各区域的 操作要求和规章制度。本项目主要 介绍动物细胞培养室的规划和布局 设置、各操作区域的功能、基本设 施、设置要求、操作要求和注意事
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细胞培养室
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第一节 动物细胞培养室的设计
一、动物细胞培养室的规划
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无菌室内间当设拉门,以减少空气的波动,拉门应设在离工 作台最远的位置上;外间的门最好也用拉门,且应与内间的 门错开,要设在距内间最远的位置上,两个门也不要同时开 启,以保证无菌室不因开门和人的进出带进杂菌;
缓冲间内应该设有水槽、鞋帽架、柜子和紫外灯,备有消毒 服装、鞋、帽、口罩、盆、手持喷雾器等。内间应配有工作 台、紫外灯、解剖镜、各种接种器械等,工作人员进入操作 间要穿上消过毒的工作服和拖鞋。
细胞培养室的设计
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教学目标
了解动物细胞培养室的区域划分原 则
熟悉动物细胞培养室各区域的主要 功能
掌握动物细胞分离培养的工作要求 掌握动物细胞培养室的规章制度
细胞培养室设计
本次课主要内容
一、细胞培养室的设计 二、细胞培养室的功能分区 三、动物细胞培养室的规章制度
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动物细胞培养室的实验对象是离体的组织和细胞,对致病 微生物及病毒无抵抗力,有被污染的危险,因此,细胞培 养室不同于其他实验室之处就是要保持无菌。
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1、洁净度和粉尘
洁净度是指洁净空气中空气含尘(包括微生物)量多少的程度。 粉尘是指悬浮在空气中的固体微粒,习惯上称尘、灰尘、尘埃、 烟尘、粉末等。国际标准化组织规定,粒径小于75μm的固体悬浮 物定义为粉尘。 空气洁净度等级是洁净空间单位体积空气中,以大于或等于被考 虑粒径的粒子最大浓度限值进行划分的等级标准,国家药品监督管 理局发布的“中国标准”明确规定了洁净度的4个等级(表2.1)。洁 净度等级应在空态、静态和动态方法进行测试,使用尘埃粒子测试 仪来测定。
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无菌操作间则专用于无菌操作、细 胞培养,其大小要适当,且其顶部 不宜过高以保证紫外线的灭菌效果; 内壁应当用塑钢板或瓷砖装修,墙 壁光滑无死角以便清洗和消毒。
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无菌操作间容积小且为密闭式,一 般无菌操作间的空气消毒用紫外线 灯,有的实验室使用无臭氧紫外线 消毒器或电子消毒灭菌器。
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在条件比较简单的实验室,要进行组 织细胞培养实验,可以采用自制的单 人或双人无菌操作箱。箱内可安装紫 外线灯供消毒灭菌和日光灯供照明, 操作时仅双手伸入箱内,也可达到一 定的无菌条件。由于箱内空气不流动, 温度较高,因此操作时间不宜太长,
般来说,无菌条件并不是要花很多钱去创造一个很大的无 菌区域,重要的是动物细胞培养室能够防尘和不设立通道。 使用超净工作台是创造无菌条件的简便方法,能为局部提 供无菌条件,很大程度上方便了组织细胞培养工作,并使 一些常规实验室有可能用于进行细胞培养。
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动物细胞培养实验室应具备进行无 菌操作、培养、准备、清洗、消毒 灭菌和储存等六方面的功能。各个 操作区域最好分别设置于相连的各 个房间,特别是无菌操作室最好能 单独设置;如果各部门都安置在一 个大实验室内,无菌操作区与清洗、 消毒灭菌区应分细胞别培养室位设计于两端,而准
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1、无菌操作区
无菌操作区是只限于细胞培养及其他无菌操作的区域,最好 能与外界隔离,不能穿行或受其他干扰。在一般环境的空气 中,由于存在许多尘埃和杂菌,较易造成污染。因此,接种 工作要在空气经过灭菌的环境里进行,小规模的无菌环境可 利用超净工作台创造,大规模的需建无菌室。
细胞培养室设计
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细胞培养室设计
无菌无毒的操作环境和培养环境是保 证细胞在体外培养成功的首要条件。 细胞培养对无菌环境要求很高,在细 胞操作时,一般需要在100级空气质 量条件下进行。在体外培养的细胞由 于缺乏对微生物和有毒物的防御能力, 一旦被微生物或细有胞培养毒室设计物质污染,或者
2、温度和湿度
二、动物细胞培养室的功能分区
动物细胞培养实验室应具备进行无菌操作、培养、准备、 清洗、消毒灭菌和储存6个方面的功能。动物细胞培养实 验室的6个区域最好都单独设置,分别置于相连的各个房 间,特别是无菌操作室最好能单独设置;如果没有条件, 可以将这些区域都安置在一个大实验室内,设计原则一般 是无菌操作区与清洗、消毒灭菌区分别位于两端,无菌操 作区设在室内较少走动的内侧,而准备、储存和培养区位 于此两区之间,仪器设备安装排列合理,便于清洁。
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