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海水小球藻培养基配方

海水小球藻培养基配方
海水小球藻（Dunaliellasalina）是一种广泛存在于海水中的单细胞绿藻，具有高度耐盐性和抗氧化性。

因其在海盐业和生物技术领域的重要应用而备受关注。

为了有效地利用这种微藻的特性，需要制备适合其生长的培养基。

下面是海水小球藻培养基的配方：主要成分：
1. 无菌海水：1000 mL
2. KNO3：0.8 g/L
3. MgSO4·7H2O：0.2 g/L
4. CaCl2·2H2O：0.04 g/L
5. NaCl：20 g/L
6. NaHCO3：0.02 g/L
7. FeSO4·7H2O：0.01 g/L
8. H3BO3：0.002 g/L
9. MnCl2·4H2O：0.001 g/L
10. ZnSO4·7H2O：0.0006 g/L
11. Na2MoO4·2H2O：0.0002 g/L
12. CuSO4·5H2O：0.0001 g/L
13. CoSO4·7H2O：0.0001 g/L
以上配方可根据需要进行调整，比如增加葡萄糖或其他营养物质以促进海水小球藻的生长。

同时，在培养过程中，需要控制温度、光照和搅拌等因素以确保培养条件的稳定性和良好性。

小球藻的培养方法

小球藻的培养方法
小球藻的培养方法如下：
1.准备培养基：小球藻可以在液体培养基或固体培养基中生长，其中常用的液体培养基有BG11、BG11_0、BG11_1等。

固体培养基可采用琼脂或agar等凝胶。

2.接种：将小球藻接种到培养基中，一般采用无菌技术进行，可以选择胶体主要培养的种类，浓度建议经实验考察后选择。

3.光照和温度控制：小球藻是一种光合作用的蓝藻，需要光照进行生长。

一般采用连续或间歇白天亮度4000~5000 lx，晚上黑暗或亮度不超过200 lx，温度一般控制在20~25。

4.培养后期处理：小球藻的生长过程中要保持培养基中的营养物质适宜，可以选择定期更换培养基。

另外，为避免细菌，真菌等细胞污染，必须采取严格的无菌操作。

5.采集：小球藻的生长周期较短，一般在2-3周内就可以采集得到。

采集时要注意无菌操作，对于液态的小球藻培养基，可以采用离心等处理方式将小球藻和培养基分离，加工自己需要的样品。

藻类培养基

一．编号
铜绿微囊藻（FACHB-912）、水华微囊藻（FACHB-1028）、螺旋藻（FACHB-901）
小球藻（FACHB-1028）
二．培养基及培养条件
（1）螺旋藻采用Zarrouk培养基，
藻种纯化：在Zarrouk 培养基中加入 1.5%琼脂粉，制成固体培养基平板，再将待分离纯化的藻液通过划线方法接种在平板上，置于培养箱中，29℃、光照强度2000 Lux下培养7 d。

从平板上挑取单藻落接入250 mL三角瓶中(含100 mL Z氏培养基)，于光照培养箱中静置培养，每天摇3 次，7 d 后作为实验备用藻种.
培养条件：温度30℃，光照4000 Lux，光暗比12:12。

（2）铜绿微囊藻、水华微囊藻、小球藻(绿藻)培养采用BG11培养基
培养条件：温度25℃，光照2000 Lux，光暗比12:12。

小球藻培养基配方

distilLeabharlann ed water 958(ml/l)
此为中科院配方使用较广。
Soil Extract(土壤提取液)的配置方法：
未施过肥和没有喷洒过农药的花园土0.5kg置于大烧杯中，加入1000ml的蒸馏水，瓶口处使用保鲜膜覆盖，电炉上煮沸加热30分钟，冷却后过滤上清液，向所得液体中加入蒸馏水至总体积为1000ml，灭菌后，4℃保存备用。保存备用。（煮沸一会即可，配置1L只需40ml看，故可根据需要量配置）
A5溶液配制方法：
H3BO3 286 mg
ZnSO4 . 7H2O 22 mg
MnCl2. 4H2O 181 mg
CuSO4. 5 H2O 7.9 mg
(NH4) 6Mo7O24 . 4H2O 3.9 mg
NaCl 0.025 (g/l)
Soilextract 40 (ml/l)
FeCl3·6H2O 0.005 (g/l)
Fe-EDTA 1(ml/l)
A5 solution 1(ml/l)
分别配置A,B液，充分搅拌溶解后，将A,B液混合搅拌均匀即可。
按按上述称量药品，溶于100ml水即可。
EDTA-Fe的配置方法：
A液： Na2EDTA 1g
distilled water 50ml
B液 FeCl3·6H2O 81 mg
HCl（0.1N） 50ml
小球藻培养基配方：
NaNO3 0.25 (g/l)
K2HPO4.3H2O 0.075 (g/l)
MgSO4.7H2O 0.075 (g/l)
CaCl2.2H2O 0.025 (g/l)
KH2PO4 0.175 (g/l)

小球藻培养基

小球藻培养基Newly compiled on November 23, 2020
（一）淡水培养基
1． BG—11 培养基
另取(NO3)，溶解在200ml纯水中，每次同A5一起，加入 1L的培养基中。

灭菌后PH 调至
2. Zarrouk 培养基
注意：NH4VO3很难溶解，注意充分搅拌，B6液使用前要充分的摇动。

A5和B6要单独配制，要低温或冷冻保存。

新培养基的PH值为—
3．紫球藻培养基
（二）海水培养基
4． f / 2 培养基
使用时，每1L海水中需加入1ml 上述母液；三种维生素不能高温灭菌处理。

5． f / 2 + Si 培养基
所有的试剂与配制剂使用的方法同上述的f / 2，只不过要额外添加Si源。

单独取1.5g Na2SiO3 9H2O溶于50ml 纯水中（所以母液浓度为30Mg/L）。

每1L海水中需加入1ml母液。

海水小球藻培养基配方

海水小球藻培养基配方
海水小球藻是一种单细胞绿藻，广泛分布于海洋与淡水中。

它们被广泛应用于生态学、生物地球化学和生物技术等领域的研究。

这里，我们提供一种海水小球藻培养基的配方，以供研究者使用。

配方：
1. 海水：1000mL
2. Tris-HCl缓冲液：10mM，pH 8.0，50mL
3. 乙酸钾：0.4g
4. 硝酸钾：0.075g
5. 磷酸二氢钾：0.01g
6. 氨水：2mL
7. 硫酸镁：0.1g
8. 硫酸钾：0.01g
9. 硫酸锌：0.00025g
10. 硼酸：0.0005g
11. 锰酸钾：0.0005g
12. 钴氯化物：0.0001g
13. 钒酸铵：0.000025g
14. 钼酸钠：0.000025g
15. 铜酸盐：0.000025g
方法：
1. 将1L海水加热至80℃，然后冷却到室温。

2. 在1L海水中加入Tris-HCl缓冲液、乙酸钾、硝酸钾、磷酸二氢钾、氨水、硫酸镁、硫酸钾、硫酸锌、硼酸、锰酸钾、钴氯化物、钒酸铵、钼酸钠和铜酸盐，并充分混合。

3. 调节pH值至8.0。

4. 将培养基通过0.22μm的过滤器过滤，保存在4℃的冰箱中。

注意：这个配方仅供参考。

在实际使用时，研究者可以根据实验需要进行微调。

此外，为了保证培养基的质量，建议使用高品质的试剂，并注意无菌和严格控制污染。

光合细菌、硝化细菌、小球藻、螺旋藻的培养基配方

光合细菌、硝化细菌、小球藻、螺旋藻的培养基的配方,培养条件及其用途海洋本141 谢滨桂光合细菌光合细菌培养基配方培养基成分：醋酸钠1.145g/L、蛋白陈0.055g/L、碳酸氢钠0.6g/L、硫代硫酸钠0.4g/L、氯化钠0.3g/L、硫酸镁0.1g/L、磷酸二氢钾0.05g/L。

光合细菌生长所需的环境条件1培养介质，含杂菌比较少的清洁淡水2酸碱度PH值在8-8.5为最好，光合细菌的适应PH范围在6-10之间3温度以28-36℃为最好生长温度，其适应的生长温度范围为15-41℃4光照强度以3000-4000勒克斯为最佳，即每25kg菌液需要相当于60W左右的白炽灯作光源，而太阳光照为最好且不要成本。

光合细菌的应用1养殖业①净化水质②维持生态平衡③培养浮游动物作饵料④间接增氧⑤饲料添加剂2种植业3环保业消化细菌硝化细菌培养基配方培养基成分：硫酸铵0.5g、氯化钠0.3g、硫酸亚铁0.03g、磷酸二氢纳1g、硫酸镁0.03g、氯化钙7.5g、蒸馏水1000ml、PH7.5、固体培养基加5%琼脂。

硝酸钠1g、硫酸镁0.03g、硫酸锰0.01g、硫酸二氢钾0.75g、无水碳酸钠1g、磷酸二氢钠0.25g、蒸馏水1000ml、PH7.5硝化细菌生长所需环境条件消化细菌培养的最优化条件为PH范围在7.0-9.0之间，温度30℃左右，溶解氧的量70%消化细菌的应用1亚硝酸属“氨的氧化者”因其所维持生物的食物来源是氨，氨和氨化合成的化学能足以使其生存。

2硝酸菌属，使亚硝酸分子氧化再转化为硝酸分子的细菌类，其所维持生物的食物来源是亚硝酸。

它和氨化合产生硝酸，所生成的化学能足以使其生存。

3利用这样可以净化水质。

螺旋藻螺旋藻培养基配方培养基成分：碳酸氢钠16.8g/L、碳酸钠2.5g/L、氯化钠1.00g/L、硫酸钾1.00g/L、磷酸氢二钾0.50g/L、氯化钙0.08g/L、MgSO4.7H2O 0.20g/L、FeSO4.7H2O 0.01g/L、Na2-EDTA 0.08g/L 微量元素A5溶液2ml/L微量元素溶液成分：H3BO3 2.86g/L、（NH4）6Mo17O24 0.02g/L、MnCl12.4H2O 1.80g/L、CaSO4.5H2O0.08g/L、ZnSO4.7H2O 0.22g/L螺旋藻生长所需环境条件养殖螺旋藻最重要的条件是光照、温度、培养液和通风等，培养液的PH值深度、流动、排氧及营养元素的合理供给都是影响产量的重要因素，因此，培养地应建在水质好，、光照条件适宜场地宽阔的地方PH值范围为7-11，最好是8-9，水深在0.2-0.3米之间，水温18-38℃，最好在26-32℃。

小球藻培养基产品技术标准2022

小球藻培养基1范围本标准规定了小球藻培养基的要求、试验方法、检验规则、标志、使用说明书及包装、运输和贮存。

本标准适用于氮磷钾、为主要原料，制造而成的小球藻培养基。

2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。

凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T 6678 化工产品采样总则GB/T 8170-2008 数值修约规则与极限数值的表示和判定GB 8569 固体化学肥料包装GB/T 9969 工业产品使用说明书总则GB/T15063-2020 复合肥料GB/T14540-2003 复混肥料中铜、铁、锰、锌、硼、钼含量的测定HG/T 5334-2018 黄腐酸钾GB/T 19203-2003 复混肥料中钙、镁、硫含量的测定GB 18382 肥料标识内容和要求GB/T 19524.1 肥料中粪大肠菌群的测定GB/T 19524.2 肥料中蛔虫卵死亡率的测定GB 18877-2009 有机-无机复混肥料NY 525-2012 有机肥料NY/T 798-2004 复合微生物肥料NY/T 1978-2010 肥料汞、砷、镉、铅、铬含量的测定《定量包装商品计量监督管理办法》（中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局令第75号）3 要求3.1外观：固体,无可见机械杂质。

3.2理化指标应符合表1的要求表1 理化指标项目指标a氮磷钾b（N+P O +K O)总量的质量分数，≥2 5 2 10.0水分，≤ 6.0PH指 5.5～9.0a氮磷钾指总N、P O 、K O含量之和，产品至少包含一种元素，单一元素的含量不得低于1.52 5 23.3无害化指标应符合表2的规定指标名称指标值汞（Hg）含量，mg/kg ≤ 5砷（As）含量，mg/kg ≤75镉(Cd) 含量，mg/kg ≤10铅(Pb) 含量，mg/kg ≤100铬(Cr) 含量，mg/kg ≤1503.4净含量应符合国家质量监督检验检疫总局第75号令《定量包装商品计量监督管理办法》的规定。

小球藻常用培养基 SE培养基

SE (Brostol’s solution)Component Amount Stock Solution(1) NaNO3 1 mL/L 25 g/100mldH2O(2) K2HPO4 1 mL/L 7.5 g/100 mL dH2O(3) MgSO4·7H2O 1 mL/L 7.5 g/100 mL dH2O(4 ) CaCl2·2H2O 1 mL/L 2.5 g/100 mL dH2O(5 ) KH2PO4 1 mL/L 17.5 g/100 mL dH2O(6 ) NaCl 1mL/L 2.5g/100ml dH2O(7) FeCl3. 6H2O 1mL/L 0.05g/100ml dH2O(8) EDTA-Fe 1mL/L1N HCl: 取4.1ml浓盐酸用蒸馏水稀释至50ml1N EDTA-Na 2称取0.9306g 溶解至50ml 蒸馏水中称取FeCl3. 6H2O 0.901g 溶于10ml以上步骤已经配制完成的1N HCl 中,然后与10ml已经配制完成的0.1N EDTA-Na 2混合，加入蒸馏水稀释至1000ml。

(9) Trace mental solution 1ml/LH3BO3 2.86g/L dH2OMnCl2·4H2O 1.86g/L dH2OZnSO4·7H2O 0.22g/L dH2ONa2MoO4.2H2O 0.39g/L dH2OCuSO4. 5 H2O 0.08g/L dH2OCo(NO3)2.6 H2O 0.05g/L dH2O（10）土壤提取液40 mL/L土壤提取液配制方法:取花园土未施过肥200g置于烧杯或三角瓶中，加入蒸馏水1000毫升，瓶口用透气塞封口，在水浴中沸水加热3小时，冷却，沉淀24小时，此过程连续进行3次，然后过滤，取上清液，于高压灭菌锅中灭菌后于4℃冰箱中保存备用。

[指南]小球藻培养基配方

[指南]小球藻培养基配方2(Guillard.1962)改良配方(海水)工作液(mg/L) 母液(g/L) NaNO3 75mg 75gNaH2Po4.H2O 5mg 5gNa2SiO3.9H2O 20mg 20gNa2EDTA 4.36mg 4.36gFeCl3.6H2O 3.16mg 3.16g CuSO4.5H2O 0.01mg 0.01g ZnSO4.7H2O 0.023mg 0.023g CoCL2.6H2O 0.012mg 0.012g MnCL.4H2O 0.18mg 0.18g Na2MoO4 2H2O 0.07mg 0.07g 维生素B1 0.1mg 0.1mg 维生素B12 0.5mg 0.5mg 生物素 0.5mg 0.5mg 自然海水(0.4 m孔径滤膜过滤)1升自己养的可以用蒸馏水来配在121oC下灭菌20分钟。

f / 2中(Guillard和Ryther 1962,Guillard 1975)这是一个常见的和广泛使用的通用丰富了海水介质专为日益增长的沿海海洋藻类,尤其是硅藻。

最初形成的浓度,称为“f介质”(Guillard和Ryther 1962) 已经减少了一半。

准备,开始与950毫升的过滤天然海水并添加以下组件。

摘要微量元素和维生素的解决方案下有提供。

把最后一卷到1升天然海水与过滤。

如果藻类生长不需要硅,那么建议硅是省略了,因为它增强了降水高压。

成分浓度数量NaNO 75 g/L dHO 1mL 32NaHPOHO 5 g/L dHO 1mL 2422NaSiO9HO 30 g/L dH2O 1mL 23 2微金属溶液 1mL维生素溶液 0.5mLf / 2维生素的解决方案首先,准备主要股票的解决方案。

准备最后的维生素的解决方案,开始与950毫升的dH2O,解散这个硫胺素加1毫升的主要股票和带来最终卷,1升与dH2o .过滤消毒。

存储在冷藏或冷冻。

成分浓度数量维生素B1 200mg维生素H 1.0 g/L dHO 1mL 2维生素B12 1.0 g/L dHO 1mL 2f / 2微量金属解决方案准备,开始与950毫升的dH2O,添加组件和带来最终卷,1升与dH2O高压。

小球藻培养基

（一）淡水培养基1．BG—11 培养基BG—11 培养基试剂名称g / L NaNO3 1.5000K2HPO40.0400 MgSO4 · 7H2O0.0750 CaCl2 · 2H2O0.0360 Citric acid ( 柠檬酸 )0.0060 Ammonium ferric citrategreen0.006 / 0.004 ( 柠檬酸铁铵 ) / 柠檬酸铁EDTANa20.0010 Na2CO30.0200A5 1.0ml另取0.10gCo(NO3)2.6H2O，溶解在200ml纯水中，每次同A5一起，加1.0ml入 1L的培养基中。

灭菌后PH调至7.1A5试剂名称g / L ZnSO4 · 7H2O0.222 CuSO4 · 5H2O0.0790.015 ( 0.21 或 0.39 ) MoO3（Na2MoO4或Na2MoO ·2H2O ）H3BO3 2.86MnCl2 · 4H2O 1.812. Zarrouk 培养基Zarrouk 培养基试剂名称g / L NaCl 1.00 CaCl20.04 NaNO3 2.50 FeSO4 · 7H2O0.010.08 / 0.08857 EDTA（Na）/ EDTA（Na）·2H2OK2SO4 1.00 MgSO4 · 7H2O0.20 NaHCO316.80 K2HPO4 / K2HPO4 · 3H2O0.50 / 0.655 A5（微量元素）1ml B6（微量元素）1mlB6试剂名称g / L NH4VO3229.6 x 10 ¯4K2Cr2 （SO4）4 · 24H2O960.0 x 10 ¯4 Ni2SO4 · 7H2O478.5 x 10 ¯4 Na2WO4 · 2H2O179.4 x 10 ¯4 Co（NO3）2· 6H2O439.8 x 10 ¯4 Ti2（SO4）3400.0 x 10 ¯4注意：NH4VO3很难溶解，注意充分搅拌，B6液使用前要充分的摇动。

小球藻的培养

小球藻营养液尿素0.3G/L，硝酸钾0.3G/L，磷酸二氢钠0.2G/L最大细胞数量：葡萄糖2G/L，硝酸钾0.8G/L，磷酸二氢钠0.2G/L 最大蛋白质数量：葡萄糖6G/L，硝酸钾1.6G/L，磷酸二氢钠0.2G/L 人尿按2～3%的比例直接掺入水中。

海水小球藻适宜盐度为4～36%。

，适宜温度10～36℃，最适温度25～30℃，适宜光照度8000~15000勒，适宜pH7.5～8.5。

藻种培养：1．藻种培养设施：藻种的培养要在保种室中进行，保种室要求通风条件好，光线条件好，温度可控性好，保种室要配有空调、冰箱、具有人工光源的培养架等。

培养中常用培养仪器有显微镜、解剖镜等，容器有三角烧瓶、广口玻璃瓶等。

保种室要严格消毒，防止病菌的侵入。

2．容器、工具的消毒：进行单细胞藻类的纯培养，容器、工具、培养基都要进行严格灭菌，但一般生产性的单种培养，则只须达到消毒目的就可以了。

常用的消毒方法有高温消毒法和化学药品消毒法。

高温消毒法是利用高温杀死微生物的方法。

不耐高温的容器如塑料和橡胶制品等不能利用高温法消毒。

a、直接灼烧消毒接种环、镊子等金属小工具，试管口、瓶口等可以直接在酒精灯火焰上短暂灼烧消毒。

载玻片、小刀等则最好先蘸酒精，然后在酒精灯火焰上点燃，等器具上的酒精烧完，也就完成了灭菌操作。

b、煮沸消毒把容器、工具放入锅中，加水煮沸消毒，一般煮沸10-20分钟。

大型锥形瓶消毒，可在瓶口上放一普通的玻璃漏斗，再在漏斗上放一称量瓶盖，在锥形瓶内加少量淡水，置电炉上加热煮沸5-10分钟，可使整个瓶壁消毒。

消毒完毕即用消毒的纸或消毒的纱布包扎瓶口。

此法适合消毒小型的容器工具。

c、烘箱干燥消毒将玻璃容器、金属工具用清水洗干净后，放入烘箱。

关闭烘箱门，打开通气孔，接通电源加热。

当温度上升到120℃时，关闭通气孔，停止加热。

如果进行纯培养，容器必须灭菌，当温度上升到105℃时，关闭通气孔，继续加热至160℃，保持温度，恒温2小时，然后停止加热。

小球藻培养基配方

小球藻培养基配方
我们为您提供了若干小球藻培养基配方：
1.Sulau藻细胞培养基：把1杯的蔗糖、3克的褐藻粉末、5克的
泡藻粉末、2克的卵磷脂、0.1克的胱氨酸溶液、及3克的酵母抽提物
混合放入2升的缸内；然后加入水至体积达6升，把pH值调节至7.2，并用50ml的盐酸拌和混合，再加入适量的谷氨酸把密度调节到
1.035g/L 左右，然后把汤体加热至90℃，保持2分钟，再稍凉后过
0.45um滤膜过滤，即可得到小球藻培养基。

2.CZW-6透明质酸培养基：这种培养基的组分包括：蔗糖2克，
K2HPO4 1克，KI 0.1克，MgSO4 0.2克，NaHCO3 1克，FeCl3 0.02克，Na2SiO3 0.5克，藻类维生素0.05克（或细菌维生素），CaCl2·2H2O 0.1克，pH调节到6.4～7.2（可适当有所调节），盐酸拌和、空气混
合等。

用温水稀释，然后加入谷氨酸把密度调节到1.035g/L左右，经
过热处理后即可得到小球藻培养基。

海水小球藻培养基配方

海水小球藻培养基配方
海水小球藻（Dunaliella salina）是一种绿藻，常见于高盐度环境中，具有很大的潜力用于生物燃料、食品添加剂和抗氧化剂等领域。

为了
成功培养海水小球藻，必须提供适合其生长和繁殖的培养基。

以下是一种
常用的海水小球藻培养基配方：
1.水溶液
培养海水小球藻时，需要使用含有适当盐度的水溶液。

一般来说，盐
度应保持在25-35ppt（盐份浓度为2.5-3.5％）之间。

可以通过配制高盐
浓度溶液然后稀释来达到所需的盐度。

2.硝酸盐源
在海水小球藻培养基中，硝酸盐是提供氮源的关键成分。

通常，硝酸
盐以硝酸钠的形式添加。

硝酸钠的用量通常为1-3g/L。

3.物质C源
4.磷酸盐源
磷酸盐是海水小球藻培养基的重要组成部分，提供磷为藻类细胞生长
和分裂提供必要的能量。

磷酸盐可以使用磷酸钠或磷酸二氢钠的形式添加。

通常，磷酸盐的浓度为100-200mg/L。

5.钾盐源
6.硫酸盐源
7.镁盐源
以上是一种常用的海水小球藻培养基配方，提供了必要的营养成分以满足其生长和繁殖的需求。

当然，具体的培养基配方还可根据实际需求进行调整和优化，以进一步提高海水小球藻的生长效率和产量。