中山大学分子复习提纲
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1. 原核基因组与真核基因组(prokaryotic genomes and eukaryotic genomes)
大小(size)
基因结构(gene structure: continuous coding sequences, split genes)
非编码序列(non-coding sequences: repeated sequences, introns)
细胞器基因组(organelle genomes: mitochondrial genomes, chloroplast genomes)
(部分基础概念见手写版笔记:
基因组,染色体组,分类及各类英文名称,C值佯谬,大小单位)
Size:
原核生物的genome size一般都比较小,且变化范围也不大(最大/最小约为20)。由于原核生物基因组中的非基因DNA(non-genic DNA)的含量较少,因此它们的基因组大小与其所。、含的基因数目是相对应的;
真核生物的genome size一般要比原核生物的大很多,且变化范围也很大
Structure:
类核基因组:环状,较小;通常由单拷贝或低拷贝(low-copy)的DNA序列组成;基因排列紧密,较少非编码序列——“streamlined”
核基因组:多线状;大小一般要比类核基因组大好几个数量级,且变化范围很大;有大量的非编码序列(重复序列、内含子等)
Non-coding sequences:
非编码序列(non-coding sequences)
⑴非编码的重复序列(核基因组)
局部分布的重复序列(localized repeated sequences):
串联式(tandem)的高度重复序列(highly repeated sequences):重复单位的长度从几bp到几百bp,可重复几十万次或更多,常见于着丝粒、端粒和异染色质区域;
散布的重复序列(dispersed repeated sequences):
短的散布式重复序列(short interspersed elements, SINEs):500 bp以下,可重复105次或更多,很多SINEs都是反转录转座子(retroposon)
长的散布式重复序列(long interspersed elements, LINEs):5 kb以上,可重复104次或更多,很多LINEs也是与反转录转座子相关的序列
⑵内含子(intron):I 类(group I intron);II 类(group II intron);III 类(group III intron);核mRNA内含子(nuclear mRNA intron),即剪接体内含子(spliceosomal intron);核tRNA 内含子(nuclear tRNA intron);古细菌内含子(archaebacterial intron)
organelle genomes:
线粒体基因组:在不同类型的生物(多细胞动物、高等植物、原生动物、藻类、真菌)中变化很大。多细胞动物:细小、致密,没有或很少非编码序列;高等植物:复杂、不均一,比动物的大得多;原生动物、藻类、真菌:或偏向于动物型,或偏向于植物型,但又有其各自的独特之处
叶绿体基因组:比较均一,85 ~ 292 kb(大部分都在120 ~ 160 kb之内)
2. 转录(transcription)
(1)RNA聚合酶(RNA polymerase)
原核生物:1种,全酶(holoenzyme)由核心酶与 亚基组成, 亚基的作用
真核生物:3种,由多个亚基组成
Polymerase I: large rRNA precursor
Polymerase II: mRNA precursors, snRNAs
Polymerase III: tRNA precursors, 5S rRNA precursor, U6, etc.
1. 转录机器(装置)(transcription apparatus)
(1)RNA聚合酶(RNA polymerase)
细菌RNA聚合酶
α(40 kD)
β(155 kD),β…(160 kD)
σ(32 ~ 90 kD)
E. coli RNA聚合酶
核心酶(core enzyme):β,β…,2 α
全酶(holoenzyme):β,β…,2 α,σ
σ:specificity factor
真核生物的RNA聚合酶
⑴RNA聚合酶I(polymerase I):位于核仁
RNA聚合酶II (polymerase II):位于核质
RNA聚合酶III (polymerase III):位于核质
三种RNA聚合酶对转录抑制剂的反应
α-鹅膏蕈碱(α-amanitin):抑制polymerase II(低浓度);抑制polymerase II 和polymerase III(高浓度)
放线菌素D(actinomycin D):抑制polymerase I
(2)真核RNA聚合酶的亚基组成
Polymerase I、II、III都由多个亚基组成
均有两个较大的亚基(> 100 kD)
另有多个较小的亚基(大部分< 50 kD)
三种聚合酶都有一些共有亚基(common subunit)
以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) 的Pol II为参照:Rpb5、Rpb6、Rpb8、Rpb10、Rpb12 RNA聚合酶II的结构
有12个亚基(Saccharomyces cerevisiae中)
Rpb1、Rpb2、Rpb3、Rpb4、Rpb5、Rpb6、Rpb7、Rpb8、Rpb9、Rpb10、Rpb11、Rpb12(Rpb: RNA polymerase B (II))
①核心亚基(core subunits)
Rpb1, Rpb2, Rpb3,对聚合酶的活性必不可少
分别与原核RNA聚合酶的β‟, β和α亚基同源,且功能也基本相同(Rpb3在聚合酶中也是有2个拷贝)
②共有亚基(common subunits)
与Rpb5, Rpb6, Rpb8, Rpb10, Rpb12相应的亚基,在3种RNA聚合酶中都存在
在3种聚合酶中都存在,说明它们是起着十分重要的作用,但具体的功能不很清楚
③非必需亚基(nonessential subunits)
Rpb4, Rpb9,其基因的突变体在正常温度下仍有活力,但在较高或较低温度下则失去活力Rpb4和Rpb7(必需的亚基)与启动子的识别有关(有点像σ因子)
Rpb9的功能不甚清楚
④Rpb7和Rpb11:另类亚基(不属于上述3类)
RNA聚合酶的活性所需(Rpb7与启动子的识别有关)
核心亚基Rpb1的特殊之处: