硫化氢通过抑制iNOS-NO通路对抗化学性缺氧引起的PC12细胞损伤

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中药单体及有效部位的神经保护作用机制研究进展

中药单体及有效部位的神经保护作用机制研究进展摘要:从清除自由基、对抗谷氨酸毒性、抑制胞内Ca^2＋超载和NO生成、干预细胞凋亡、拟雌激素作用等诸方面，综述中药单体和有效部位的神经保护作用机制研究进展.关键词:中药单体有效部位神经保护作用机制Advances in the Mechanistic Study on Neuroprotective Actions of the Monomers and Active Components from Chinese Traditional MedicinesAbstract:Advances in the mechanistic study on neuroprotective actions of monomers and active components from Chinese traditional medicines were reviewed, which included free radical scavenging, resistance against glutamate-induced excitotoxicity, inhibition of cellular Ca^2＋ overload and NO production, intervention in cell apoptosis and estrogen-like activity.Key words:Chinese traditional medicine; Monomer; Active component; Neuroprotective; Mechanism of action在缺血、缺氧条件下，大脑神经组织会发生一系列的缺血瀑布级联反应，如自由基的大量释放、细胞内钙超载、兴奋性氨基酸损伤、炎性过程及凋亡等，它们发生在不同的时段，彼此交叉，相互联系。

缺血性脑卒中的神经保护则是对级联反应的各个环节加以影响和控制，对受到损伤的神经组织予以积极保护或修复，避免相邻正常的神经组织进一步受到损伤，挽救损伤的神经组织，并使之恢复或部分恢复原有功能。

硫化氢对细胞细胞凋亡的影响

硫化氢对细胞细胞凋亡的影响细胞凋亡一词源于希腊文，愿意指像秋天的落叶一样落下。

其为一个用于区分细胞坏死的形态学术语，是机体内细胞受到基因调控作用后发生的细胞的程序性死亡过程，是一个可以发生在正常细胞群体中的细胞皱缩，细胞核染色体固缩，细胞浆嗜酸性增加系列反应的过程，凋亡小体的形成标志着凋亡的完成，其对多细胞生物的生长发育及细胞数量的调控中发挥着重要作用[1],表现在其不仅对生物体的各个生理阶段的调控而且对许多疾病的发生发展过程起到至关重要的作用，随着对细胞凋亡机制的研究的深入，发现BCL-2蛋白质家族对细胞凋亡起着至关重要的调控作用[2]。

气体信号分子的发现为生命医学的研究拓展了方向，开辟了一个新的领域，硫化氢气体信号分子是继一氧化碳与一氧化氮之后被发现的第三种气体信号分子，硫化氢是一种有臭鸡蛋气味，无色，能溶于水，易溶于醇类，易燃烧，有毒的工业气体，吸入人体后少量可以引起中毒，较多可致死，其在体内以两种形式存在，三分之一表现为离子形式，三分之二表现为未解离状态，其主要三条去路：一部分被线粒体氧化，另一部分被巯基-S-甲基转移酶甲醇化为甲硫醇和二甲基硫，另外一部分与氧化血红素结合成高铁血红蛋白，经体内代谢，由尿液排出体外。

H2S在体内主要由胱硫醚-β-合成酶（CBS），胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）及3-硫基丙酮酸硫基转移酶（3-MST）生成，CBS主要分布于中枢神经系统，CSE主要分布于心血管系统中，H2S对神经系统及循环系统诸多疾病的相应细胞均有保护作用[3-4]，其主要是通过抑制机体细胞线粒体内的细胞色素C氧化酶发挥其毒性作用，其毒性作用强于氰化物[1],其对于人体各器官相应细胞的凋亡的影响已经随着研究的深入逐渐被人们发现,例如孟金兰等人通过研究证实NaHS能对抗CoCL2引起的细胞毒性及致细胞凋亡的作用[5] 。

张友恩[6] 2014.等人通过对比大量的基础研究发现，H2S水平在心肌细胞损伤后明显减少，给予外源性H2S增加机体的H2S含量，可表现显著地心脏保护作用，其研究发现H2S可通过抑制心肌细胞的凋亡，增强左心室的功能，进而提高动物的生存率。

硫化氢题库

硫化氢题库1固定式硫化氢检测仪的探头一般每（）月校正一次。

A .一个B .两个C .三个D .四个正确答案：C2硫化氢安全临界浓度为（）。

A .15mg/m3 (10ppm)B .22mg/m3 (15ppm)C .30mg/m3 (20ppm)D .150mg/m3 (100ppm)正确答案：C3工作人员8小时长期暴露都不会产生不利影响的某种有毒物质在空气中的最大浓度称为阈限值，硫化氢阈限值为（）。

A .10mg/m3 (6.7ppm)B .22mg/m3 (15ppm)C .30mg/m3 (20ppm)D .150mg/m3 (100ppm)正确答案：A4使用空气呼吸器，正常情况下其空气瓶压力应不低于（）。

A .28MPaB .12MPaC .16MPaD .24Mpa正确答案：A5便携式硫化氢检测仪电池应该能够至少运行（）小时。

A .5B .8C .6D .10正确答案：D6三大死亡特征不包括（）。

A .呼吸停止B .心跳停止C .瞳孔散大D .眼睛紧闭正确答案：D7当硫化氢气体以适当的比例（）与空气或氧气混合，就会爆炸。

A .5.5％～50％B .4.3％～46％C .2.2％～36％D .8.7％～58％正确答案：B8硫化氢中毒已成为职业中毒杀手，在我国硫化氢中毒死亡仅次于（），占到第二位。

A .一氧化碳B .二氧化碳C .甲烷D .氰化氢正确答案：A9硫化氢气体分子是由（）组成。

A .两个氢原子和两个硫原子B .两个氢原子和一个硫原子C .一个氢原子和两个硫原子D .一个氢原子和一个硫原子正确答案：B10当空气呼吸器发出报警声响，使用者（）。

A .及时撤离现场B .根据工作情况决定是否撤离现场C .5分钟后撤离D .10分钟后撤离正确答案：A11当硫化氢警报器报警后，总监发出撤离信号后（）人员立即离开现场。

A .全部B .非必要C .必要D .被指定正确答案：B12在含硫化氢气体的地层钻井时，井队现有条件下不能实施压井作业。

硫化氢中毒的救治与预防

硫化氢中毒的救治与预防基本知识第一节硫化氢及其中毒救治的基本知识一、硫化氢Hydrogen sulfide;CAS：7783-06-41、硫化氢的理化性质硫化氢为无色气体，具强烈的臭蛋气味。

分子式H2S，分子量34.08，相对密度1.19，熔点-82.9℃，沸点-61.8℃。

易溶于水（2.9L/L），水中生成氢硫酸，亦溶于醇类、石油溶剂和原油中。

硫化氢可燃上限为45.5％,下限为4.3％。

燃点292℃。

在空气中爆炸上限为(%by volume)：44.0%，爆炸下限为(%by volume)：4.0%2、硫化氢毒理学简介硫化氢是一种神经毒剂。

亦为窒息性和刺激性气体。

其毒作用的主要靶器是中枢神经系统和呼吸系统，亦可伴有心脏等多器官损害，对毒作用最敏感的组织是脑和粘膜接触部位。

硫化氢在体内大部分经氧化代谢形成硫代硫酸盐和硫酸盐而解毒，在代谢过程中谷胱甘肽可能起激发作用；少部分可经甲基化代谢而形成毒性较低的甲硫醇和甲硫醚，但高浓度甲硫醇对中枢神经系统有麻醉作用。

体内代谢产物可在24小时内随尿排出，部分随粪排出，少部分以原形经肺呼出。

在体内无蓄积。

硫化氢的急性毒作用靶器官和中毒机制可因其不同的浓度和接触时间而异。

浓度越高则中枢神经抑制作用越明显，浓度相对较低时粘膜刺激作用明显。

人吸入70～150mg/m3/1～2小时，出现呼吸道及眼刺激症状，吸2～5分钟后嗅觉疲劳,不再闻到臭气。

吸入300mg/m3/1小时，6～8分钟出现眼急性刺激症状，稍长时间接触引起肺水肿。

吸入760mg/m3/15～60分钟，发生肺水肿、支气管炎及肺炎,头痛、头昏、步态不稳、恶心、呕吐。

吸入1000mg/m3/数秒钟，很快出现急性中毒，呼吸加快后呼吸麻痹而死亡。

允许暴露限制(PELs):Ceiling(C)20ppm50ppm[10分钟]立即致人健康危害浓度IDLH：100ppm立即致死浓度：1000mg/m3嗅阈：0.012~0.03mg/m3；车间空气卫生标准：中国MAC10mg/m33、硫化氢的来源石油中的硫主要以有机硫化物的形式存在，部分高含硫原油还以元素硫形式出现。

毒理学基础第七版思考题答案

毒理学基础第七版思考题答案1.毒理学、现代毒理学、外源化学物的概念。

2.毒理学的研究领域及相互关系。

3.常用的毒理学研究方法及各自优缺点。

1.毒理学基本概念:毒物;毒性;毒作用;各种毒性参数;生物学标志;剂量-效应关系;剂量-反应关系;毒物兴奋效应。

2.简述毒效应谱和毒作用类型。

3．研究剂量-反应关系的前提和意义。

4．选择毒性的原因和意义1生物膜的基本构造?2化学物通过生物膜的方式及特点?3吸收、分布、排泄的概念，途径，影响因素?4首过效应、肠肝循环、贮存库及毒理学意义?1什么是终毒物，包括哪些类型;终毒物与靶分子结合形式有哪些?2什么原因可致解毒失效，解毒失效对靶分子有哪些影响?3参与o2”·解毒的酶和小分子物质有哪些?4修复失效可引发哪些毒性?1.谈谈定量构效关系（QSAR）研究在毒理学中的意义，现在QSAR研究有哪些方法?2.影响毒作用的因素有哪些?3.化合物联合作用有哪些类型?1急性毒性试验定义及实验设计要素。

2LD50的毒理学意义，以及局限性。

3局部刺激试验包括哪些及选用动物情况。

4局部刺激试验方法及评价。

蓄积毒性、物质蓄积和功能蓄积的定义、研究方法亚慢性毒性和慢性毒性试验的目的、设计要点及评价1外源化学物对免疫系统毒性作用类型有哪些?2常见的免疫毒物有哪些?3外源化学物的免疫毒性作用的特点?第一章毒理学基础The Basic Principles and Methods of Toxicology1．毒理学、现代毒理学、外源化学物的概念。

毒理学Toxicology:传统定义是研究外源化学物(xenobiotics)对生物体(living organisms)损害作用(adverse effects)的学科。

[Toxicology has been defined as the study of the adverse effects of chemicals (or xenobiotics) on living organisms.]外源化学物(Xenobiotics):是存在于人类生活的外界环境中,可能与机体接触并进入机体,呈现一定生物学活性的一些化学物质。

硫化氢题库答案.docx

硫化氢复习资料一、填空题1、中石油集团公司安全警示日是（12月23日）o2、硫化氢的颜色是（无色）；气味（臭鸡蛋）o3、石油天然气行业硫化氢的来源是（原生硫化氢）,（次生硫化氢）。

4、硫化氢的安全临界浓度值，OSHA的标准是（lOppm ）。

5、硫化氢的安全临界浓度值，中国的标准是（20ppm ）o6、硫化氢的危险临界为（100 ）o7、硫化氢的致死浓度为（500 ）o8、当硫化氢达到（2000 ）时，只吸一口就可死亡。

9、硫化氢进入人体的途径有（皮肤）（呼吸道粘膜组织）（消化道）。

10、中毒分为（急性中毒）（慢性中毒）o11、中毒人员的搬运方式有（托两臂法）（托衣法）（抬四肢法）。

12、心肺复苏包括（人工呼吸）（胸外心脏按压）。

13、人工呼吸的方式有（口对口）（口对鼻）（口对口鼻）。

14、发现患者一停止心跳和呼吸，可在（4 ）分钟内进行人工呼吸和胸外按压，病人才有获救的可能。

如果有条件时，最好的办法是（吸氧）治疗15、现场心肺复苏主要有（打开气道）、（人口呼吸）、（胸外按压）三个步骤。

16、胸外心脏按压成人每分钟（100）下，按压深度（4-5 ）厘米。

17、硫化氢对金属的腐蚀形式有（电化学腐蚀）（氢脆破坏）（硫化物应力腐蚀开裂）018、硫化氢易溶于（水）（醇类）（油类）o19、硫化氢的检测有两种方法即（化学方法）和（电子探测仪）20、、可携式硫化氢电子探测报警器具有（体积小）、（重量轻）、（反应速度快）和（灵敏度高）的优点。

21、便携式硫化氢检测仪电池应该能够至少运行（10）小时。

22、带氧式防毒面具，当气瓶中压力降至4—6Mpa时，报警器发出汽笛声，此时气瓶内还能供气（6-8 ）分。

23、防硫化氢气体主要使用（过滤式）（隔离式）防护器材。

24、呼吸道防毒用品一般分为（过滤式）和（隔离式）两种。

25、劳动保护就是指保护劳动者在生产过程中的（安全）（健康）。

二、判断题1、硫化氢广泛存在于各行各业中，约有50 （70）种行业接触硫化氢（X）2、细菌作用不会产生硫化氢。

硫化氢对化学性缺氧诱导PC12细胞凋亡的影响

，
３Ｄｅａｍｅｔｏａｄｏａｏｏｙ．ｐｒｎｆＣｒｉｖｓｌｇ，ＴｅＦｒｔＡｆｌｔｄＨｏｐｔｌｕｔｓｎＵｎｖｒｉ，Ｇｕｎｚｏ００Ｃｉａｔｈｉｓｆｉｅｓｉ，ＳｎＹａ— ｅｉｅｓｙｉａａｔａｇｈｕ５１８０ｈｎ）
（．ｅａｔｅｔｆｈｓｌｙＧａｇｏｇＰａｃｕｉａＵｉｒｔ，Ｇａｇｈｕ５００，ｈｎ；１Ｄｐｒｎｏｙｉｏ，ｕｎｄｎｈｒｅｔｌｎｖｓｙｕｎｚｏ０６ＣｉａｍＰｏｇｍａｃｅｉ１
２。ＤｅａｔｅｆＰｈｓｏｏｙ，ＺｈｏｇｈｎＭｅｃｌＣｏｌｇｐｒｍｎｔｏｙｉｌｇｎｓａｄｉａｌｅｅ，ＳｕｔｓｎＵｎｖｒｉｙＧｕｎｚｏ０８ｎＹａ —ｅｉｅｓｔａｇｈｕ５１００，Ｃｉａ；ｈｎ
摘
要：【目的】探讨硫化氢（２）ＨＳ对抗二氯化钴（ｏ１诱导Ｐ１ＣＣ）Ｃ２细胞凋亡的作用及其初步机制。【方法】应用化学
性缺氧模拟剂ＣＣＰ１ｏ１在Ｃ２细胞建立化学性缺氧损伤模型；以硫氢化钠（ａ）ＮＨＳ作为ＨＳ的供体；用ＣＫ８比色法检测细２应Ｃ一胞存活率；碘化丙啶（ｉ染色流式细胞技术（Ｃ检测细胞凋亡率；Ｈｏｃｓ３５Ｐ）ＦＭ）ｅｈｔ２８染色检测细胞凋亡的形态学变化；罗丹３
降低６０￣ｏＬＣＣ引起Ｐ１细胞的凋亡率增加并阻断ＣＣ引起的ＭＰ降低及ＲＳ０ｍｌｏ１／：Ｃ２ｏ１ＭＯ升高。【结论】ＨＳ２具有神经细

右美托咪定抑制化学性低氧引起的PC12细胞炎症反应

收稿日期：２０１３— ０８— ０８，修回日期：２０１３—１０—１６基金项目：广东省科技计划项目（Ｎｏ２０１２Ｂ０３１８００２８９）
作者简介：华潇潇（１９８６一），女，硕士，研究方向：麻醉学及细胞保护
中国药理学通报
网络出版时间：２０１３—１２—２００６：１９
ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ２０１４Ｊａｎ；３０（１）：８５－９
化学性低氧可通过活性氧（ｒｅａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｓｐｅｃｉｅｓ，
钴（ＣｏＣ１：）处理ＰＣ１２细胞，建立化学性低氧诱导的细胞损伤实验模型；ＥＬＩＳＡ法检测细胞培养液中白介素６（ＩＬ．６）、白介素１Ｂ（ＩＬ一１Ｂ）和肿瘤坏死因子仅（ＴＮＦ — Ｑ）的水平；以ＣＣＫ一８法检测细胞存活率。结果ＣｏＣ１处理ＰＣ１２细胞能产生明显的炎症反应，导致ＩＬ－６、ＩＬ一１Ｂ和ＴＮＦ — Ｏ释放增多；ＩＬ一６、ＩＬ一１ｐ和ＴＮＦ — ｏ的中和抗体能抑制ＣｏＣＩ导致的细胞存活率下降。ＤＥＸ和活性氧（ＲＯＳ）抑制剂Ｎ一乙酰半胱胺酸（ＮＡＣ）不但能抑制ＣｏＣｌ：引起的上述炎症因子的释放，而且使ＰＣ１２细胞存活率升高。结论ＤＥＸ可通过抑制炎症反应和抗氧化作用对抗化学性缺氧引起的ＰＣ１２细胞毒性。关键词：右美托咪定；ＰＣ１２细胞；白介素６；白介素１Ｂ；肿瘤坏死因子ｄ；氯化钴

硫化氢试题答案(全)

硫化氢试题库一、填空题（每空1分)1、API标准中H2S的8小时允许暴露极限为(A10ppm）。

2、API标准中H2S的短期暴露极限为（B15ppm）。

3、H2S是一种无色、（ A 剧毒)、（ B酸性）气体，低浓度的H2S气体有一股(Ｃ臭鸡蛋味)。

4、H2S对健康和生命有立即危险的浓度是（A100ppm）。

5、API标准推荐SO2门限值为8小时加权平均值（A2ppm),超15分钟短期暴露量平均植(B5ppm).6、中华人民共和国石油天然气行业标准(SY/T5087-——2003)规定，露天8小时允许浓度的最高限量为（ A 15mg/m3)。

7、检查呼吸是否停止的判断方法是(A看)、(B试）、（C听）。

8、单人法人工呼吸与心脏按压的比例为(A 2:15)。

9、硫化氢进入人体的途径有( A 呼吸道吸入）、( B皮肤吸收)、(C消化道吸收）.10、H2S溶于水形成弱酸,对金属引起氢损伤的腐蚀类型有（ A氢鼓泡 )、（ B氢致开裂）和( C硫化物应力腐蚀开裂 )、（D氢脆）.11、在含H2S地层钻井时，进入气层前应将二层台、钻台周围设置的（ A 防风护套）和其它类的围布拆除。

12、打开气道的三种方法为（A仰头抬颈法）、（B仰头举颏法）、（C推颌法）。

13、被抢救病人的体位一般采取（A仰卧式）.14、在钻进含H2S地层时,要求钻井液的PH值始终控制在（ A 9．5)以上。

15、在含H2S井施工时，钢材的拉应力应尽量控制在钢材屈服极限的( A ６0%)以下。

16、在进入怀疑有H2S存在的地区前,应先( A 检测)，以确定其是否存在及其浓度。

17、疏松的硫化铁与钢铁接触形成了（ A 原电池)，硫化铁是正极,钢铁是负极,因而加速了电化学失重腐蚀。

18、有H2S中毒时，应迅速将中毒者从毒气区抬到( A空气清醒的安全区域 )，并送医院抢救。

19、硫化氢是仅次于（A氰化物）的剧毒物，是极易致人死亡的有毒气体。

20、H2S高含量时（A无气味),难被发觉，因为此时人的（B嗅觉)神经已经很快地被麻痹而失去了知觉。

硫化氢试题答案全

硫化氢试题库一、填空题（每空1分）1、API标准中H2S的8小时允许暴露极限为（AlOppn）。

2、API标准中H2S的短期暴露极限为（B15ppm。

3、 H2S是一种无色、（A剧毒）、（B酸性）气体，低浓度的H2S气体有一股（C臭鸡蛋味）。

4、H2S对健康和生命有立即危险的浓度是（AlOOppn）。

5、 API标准推荐SO门限值为8小时加权平均值（A2ppn），超15分钟短期暴露量平均植（B5ppn）。

6、中华人民共和国石油天然气行业标准（SY/T5087---2003）规定，露天8小时允许浓度的最高限量为（A 15mg/m 3）。

7、检查呼吸是否停止的判断方法是（A看）、（B试）、（C听）。

&单人法人工呼吸与心脏按压的比例为（ A 2 : 15）。

9、硫化氢进入人体的途径有（A呼吸道吸入）、（B皮肤吸收）、（C消化道吸收）。

10、 H2S溶于水形成弱酸，对金属引起氢损伤的腐蚀类型有（A氢鼓泡）、（B氢致开裂）和（C硫化物应力腐蚀开裂）、（D氢脆）。

11、在含H2S地层钻井时，进入气层前应将二层台、钻台周围设置的（A防风护套）和其它类的围布拆除。

12、打开气道的三种方法为（A仰头抬颈法）、（B仰头举颏法）、（C推颌法）。

13、被抢救病人的体位一般采取（A仰卧式）。

14、在钻进含H2S地层时，要求钻井液的 PH值始终控制在（A 9 . 5）以上。

15、在含H2S井施工时，钢材的拉应力应尽量控制在钢材屈服极限的（A 6 0% ）以下。

16、在进入怀疑有H2S存在的地区前，应先（A检测），以确定其是否存在及其浓度。

17、疏松的硫化铁与钢铁接触形成了（ A原电池），硫化铁是正极，钢铁是负极，因而加速了电化学失重腐蚀。

18、有H2S中毒时，应迅速将中毒者从毒气区抬到（A空气清醒的安全区域），并送医院抢救。

19、硫化氢是仅次于（A氰化物）的剧毒物，是极易致人死亡的有毒气体。

20、 H2S高含量时（A无气味），难被发觉，因为此时人的（B嗅觉）神经已经很快地被麻痹而失去了知觉。

中药芍药苷神经保护作用机制

中药芍药昔神经保护作用机制芍药普(PaeOnifIOrin,PF)来源于毛葭科植物芍药根、牡丹根、紫牡丹根，是中药白芍的单裕类成分中含量最高的。

既往研究证实，PF有抗自由基损伤、抑制细胞内钙超载和抗神经毒性等活性，体内实验证明其有降低血液黏度、抗血小板聚集、扩张血管、改善微循环、抗炎、抗氧化、抗惊厥等作用。

PF的神经保护作用在近几年研究较广泛。

目前有关PF对中枢系统的作用及机制主要来自对神经细胞(如原代皮层及海马神经元细胞、PC12细胞、小胶质细胞)的体内和体外实验。

研究证实，PF可以通过血脑屏障，具有明确的神经保护作用。

且进一步发现，PF的作用机制与抗神经细胞氧化、抑制神经细胞凋亡、促进神经生长等有关。

本文就PF神经元保护作用的研究进展作一综述，以期为进一步研究其神经保护作用机制提供依据。

Ol抗神经细胞氧化作用1.1降低氧自由基水平超氧化物歧化酶(SoD)在组织中的活性常作为清除氧自由基能力的主要指标。

丙二醛(malonaldehyde,MDA)水平反映体内氧自由基的生成水平。

大量的MDA可使脑组织生物膜结构与功能受到损伤，蛋白质变性失活。

谷胱甘肽(glutathione,GSH)是一种小分子抗氧化物质，它在还原态硫的储存和转运、蛋白质和核酸的合成、酶活性的调节、组织抗氧化特性的维持以及对氧化还原敏感的信号传导的调节中起着重要作用。

过氧化氢酶(CatalaSe,CAT)是一类广泛存在于动物、植物和微生物体内的氧化酶，其功能是催化细胞内过氧化氢分解，防止氧化。

近年来研究发现，在皮质酮诱导的PC12细胞损伤模型中，SOD表达降低而MDA增高，PF干预可显著降低损伤细胞中MDA含量，增力口S0D、GSH.CAT 活性，且呈剂量依赖方式。

体内实验表明，经ABI-42处理的大鼠脑胆碱能神经损伤模型中，PF长期治疗可增强其在MorriS水迷宫试验的认知性能，恢复SoD和CAT水平，降低MDA水平，改善空间学习和记忆障碍。

化学低氧诱导剂二氯化钴对PC12细胞自噬的影响

㊀第４２卷第１０期㊀２０１９年１０月合肥工业大学学报(自然科学版)J O U R N A LO F H E F E IU N I V E R S I T Y O FT E C H N O L O G Y (N A T U R A LS C I E N C E )V o l ．４２N o ．１０㊀O c t ．２０１９㊀㊀㊀收稿日期:２０１８Ｇ０２Ｇ０１;修回日期:２０１８Ｇ０３Ｇ１４基金项目:国家自然科学基金面上资助项目(８１７７３４７５)作者简介:韩苗苗(１９９４－),女,安徽马鞍山人,合肥工业大学硕士生;汪惠丽(１９７４－),女,安徽桐城人,博士,合肥工业大学教授,博士生导师．D O I :１０．３９６９/j．i s s n ．１００３Ｇ５０６０．２０１９．１０．０１９化学低氧诱导剂二氯化钴对P C １２细胞自噬的影响韩苗苗,㊀叶丹蕾,㊀吴玉兰,㊀汪惠丽(合肥工业大学食品与生物工程学院,安徽合肥㊀２３０００９)摘㊀要:文章研究化学性低氧诱导剂二氯化钴(C o C l ２)对P C １２细胞自噬的影响.体外培养P C １２细胞,用不同浓度C o C l ２处理P C １２细胞２４h .首先通过M T T 实验选取后续的C o C l ２处理浓度,用荧光定量聚合酶链式反应(q u a n t i t a t i v e p o l y m e r a s e c h a i n r e a c t i o n ,q ＧP C R )实验检测不同浓度C o C l ２处理P C １２细胞２４h 后细胞内H I F Ｇ１α基因表达水平.用W e s t e r nB l o t 方法检测C o C l ２处理后自噬相关蛋白B e c l i n １㊁L C ３ＧⅡ蛋白表达水平.结果表明,４００㊁８００μm o l /LC o C l ２处理PC １２细胞２４h 不仅能显著降低细胞存活率,并且能显著提高H I F Ｇ１α基因表达,即表明用C o C l ２造模确实可以模拟细胞体外缺氧.此外,８００μm o l /LC o C l ２处理组的B e c Ｇl i n １㊁L C ３ＧⅡ蛋白表达量出现显著降低,表明C o C l ２处理抑制了细胞自噬,并且该种抑制是呈时间依赖的.研究结果表明,C o C l ２引起的化学性缺氧会损伤P C １２细胞,并且会抑制细胞正常的自噬,该异常的自噬可能参与了C o C l ２致PC １２细胞的损伤.关键词:二氯化钴;缺氧;P C １２细胞;自噬;抑制中图分类号:Q ５６㊀㊀㊀文献标识码:A㊀㊀㊀文章编号:１００３Ｇ５０６０(２０１９)１０Ｇ１４１１Ｇ０４E f f e c t s o f c o b a l t c h l o r i d e o na u t o p h a g yi nP C １２c e l l s HA N M i a o m i a o ,㊀Y ED a n l e i ,㊀WU Y u l a n ,㊀WA N G H u i l i(S c h o o l o f F o o da n dB i o l o g i c a l E n g i n e e r i n g ,H e f e iU n i v e r s i t y o fT e c h n o l o g y,H e f e i ２３０００９,C h i n a )A b s t r a c t :E f f e c t s o f c o b a l t c h l o r i d e (C o C l ２)o na u t o p h a g y i nP C １２c e l l sw e r e s t u d i e d ．P C １２c e l l sw e r e c u l t u r e dw i t hd i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s o f C o C l ２fo r ２４h ．F i r s t l y ,MT T m e t h o dw a s u s e d t o s e l e c t t h e a p p r o p r i a t ed o s a g e o f C o C l ２fo r t h e f o l l o w i n g i n v e s t i g a t i o n s ．N e x t ,f l u o r e s c e n c e q u a n t i t a t i v e p o l y m e r Ｇa s e c h a i n r e a c t i o n (q ＧP C R )w a su s e dt om e a s u r e t h em R N Al e v e l o f H I F Ｇ１αi nC o C l ２Ｇe x p o s e dP C １２c e l l s ．T h e n ,W e s t e r nB l o tw a s u s e d t o i n v e s t i g a t e t h e p r o t e i n l e v e l s o f a u t o p h a g yＧr e l a t e d p r o t e i nB e c Ｇl i n １a n dL C ３ＧⅡi nC o C l ２Ｇe x p o s e dP C １２c e l l s ．T h e r e s u l t s s h o w e dt h a t t h ec e l l v i a b i l i t y w a s s i g n i f i Ｇc a n t l y r e d u c e d i nP C １２c e l l sw i t hC o C l ２o f ４００μm o l /La n d ８００μm o l /L ,a n d t h em R N Al e v e l o f H I F Ｇ１αm a r k e d l y i n c r e a s e d ．I t d e m o n s t r a t e d t h a t t h e h y p o x i am o d e l c o u l db e e s t a b l i s h e db y C o C l ２wi t h t h e c o n c e n t r a t i o n s o f ４００μm o l /La n d８００μm o l /L ．M o r e o v e r ,t h e p r o t e i n l e v e l so fB e c l i n １a n dL C ３ＧⅡs i g n i f i c a n t l y d e c r e a s e d i nC o C l ２Ｇe x p o s e dP C １２c e l l sw i t hC o C l ２of ８００μm o l /L ．I t r e p r e s e n t e d t h a t t h e a u t o p h ag y w a s i nhi b i t e db y C o C l ２ex p o s u r e a n d t h e i n h i b i t i o nw a s i na t i m e Ｇd e p e n d e n tm a n n e r ．T h i s s t u d y i n d i c a t e d t h a t P C １２c e l l sw e r e i m p a i r e d a n d t h e a u t o p h a g y w a s i n h i b i t e d b y C o C l ２Ｇi n d u c e d c h e m Ｇi c a l h y p o x i a ,s u g g e s t i n g t h a t t h e d y s f u n c t i o n a l a u t o p h a g y m a y i n v o l v e i n t h e i m pa i r m e n t o f P C １２c e l l s i n d u c e db y C o C l ２ex p o s u r e ．K e y w o r d s :c o b a l t c h l o r i d e (C o C l ２);h y p o x i a ;P C １２c e l l s ;a u t o p h a g y ;i n h i b i t i o n ㊀㊀随着社会老龄化问题的日益加重,各种疾病的发病率逐年上升[１].其中脑㊁心脏等人体重要器官缺氧是导致发病后高致残率和高死亡率的关键[２Ｇ３].因此,对于脑㊁心脏等人体重要器官缺氧的研究是目前探究各种疾病发病后引起一系列损伤机理的重点.目前,体外缺氧研究的造模方法主要有物理缺氧法和化学缺氧法.二氯化钴(C o C l２)是常用的模拟细胞体外缺氧的化学性造模试剂[４].其作用机理是利用C o C l２的二价钴离子诱导细胞内缺氧诱导因子(H y p o x i a,H I F)及其调控基因的表达,从而模拟细胞缺氧损伤[５].自噬是一种进化上保守的代谢机制/降解途径,在此过程中,细胞内错误折叠的蛋白质㊁衰老或者损伤的细胞器以及一些大分子积聚体被自噬体包裹后,最终传递到溶酶体进行降解[６].在哺乳动物细胞中,自噬有巨自噬㊁微自噬以及分子伴侣介导的自噬(C h a p e r o n eＧm e d i a t e da u t o p h a g y,C M A)３种类型,其中巨自噬即为研究较为广泛的自噬.自噬是机体的一种自我保护机制,生物体内基础水平的自噬对于细胞的基本功能和生命活动至关重要[７].有文献表明,异常的自噬不仅会对细胞的生命活动产生影响,甚至会促进细胞的死亡[８Ｇ１０]. P C１２细胞是广泛用于神经系统疾病体外研究的一种细胞系,本文选用P C１２细胞来研究常用的化学性缺氧诱导剂C o C l２对自噬的影响.１㊀材料与方法１．１㊀材料大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(P C１２)细胞,由中国科学技术大学实验室赠予.不完全D M E M高糖培养基(含双抗)和胰蛋白酶ＧE D T A消化液(K e y g e n);F B S胎牛血清(四季青);二氯化钴(S i g m a);MT T(A l a d d i n);A x yＧg e n总R N A小量制备试剂盒(A x y g e n S i l i c o n V a l l e y);二甲基亚砜D M S O(国药);P C RS u p e rＧM i x(全式金);L C３B抗体(N O V U S);B e c l i n１抗体(P r o t e i n t e c h);βＧa c t i n抗体(A b c a m).１．２㊀仪器和设备C O２恒温培养箱(T h e r m o);高压蒸汽灭菌锅(LD Z XＧ５０K B);生物安全柜(T h e r m o);酶联免疫检测仪(T h e r m o);高温冷冻离心机(C T１４R D); N a n o D r o p２０００超微量分光光度计(T h e r m o);荧光定量P C R仪(R o c h e);T h e r m a lC y c l e r(B I OＧR A D).１．３㊀方法１．３．１㊀P C１２细胞的培养P C１２细胞从液氮中取出后,放入３７ħ水浴锅中水浴几分钟,待快融合后均匀滴加在已经加好８m L培养基(９０％D M E M＋１０％F B S)培养皿中,然后放入３７ħ㊁５％C O２细胞培养箱继续培养使其贴壁,１２h后换液,待细胞长至８０％~９０％时按１ʒ３的比例进行传代.１．３．２㊀实验分组(１)探讨不同浓度的C o C l２对P C１２的细胞的损伤情况,即用５０㊁１００㊁２００㊁４００㊁８００μm o l/L 的C o C l２分别处理P C１２细胞２４h,通过细胞存活率实验来判断C o C l２对P C１２的细胞的损伤情况,并用荧光定量聚合酶链式反应(q u a n t i t a t i v e p o l y m e r a s e c h a i n r e a c t i o n,qＧP C R)检测H I FＧ１α(低氧诱导因子Ｇ１α)的表达水平来判断２００㊁４００㊁８００μm o l/L的C o C l２处理P C１２细胞２４h能否引起细胞产生缺氧状态.(２)研究２００㊁４００㊁８００μm o l/L的C o C l２处理P C１２细胞２４h对细胞自噬的影响,通过检测自噬相关蛋白B e c l i n１和L C３蛋白的表达量,来判断不同浓度C o C l２引起的P C１２细胞的损伤是否与自噬相关.１．３．３㊀细胞存活率检测(MT T法)将处于对数生长期的P C１２细胞按照一定的浓度接种于９６孔中,每组设置６个平行孔,每孔加入１００μL细胞悬浮液,培养至细胞个数接近１ˑ１０４个/孔时,按照实验需要加入药物处理一段时间.然后每孔加入１０μL质量浓度为５m g/ m L的MT T溶液,放入细胞培养箱中继续培养４h后弃去培养基,每孔加入１５０μLD M S O,放在摇床上低速摇晃１０m i n,最后用酶联免疫检测仪测定每孔在４９０n m处的吸光值.１．３．４㊀qＧP C R实验使用A x y g e n总R N A小量制备试剂盒提取不同样品中细胞的总R N A,测定浓度后通过反转录制成相应的c D N A.按照qＧP C R的２０μL的体系加样后用R o c h e公司的R o c h e L i g h t c y c l e r９６进行qＧP C R实验.１．３．５㊀W e s t e r nB l o t实验将加药处理好的P C１２细胞用１ˑS D Ss a mＧp l eb u f f e r充分裂解后,用１．５m L的离心管收集起来,封口膜封口后在沸水中煮１０m i n.采用１２％S D SＧP A G E分离胶进行电泳,２８０m A恒流转膜２h后,用５％脱脂奶粉封闭１h,随后４ħ孵育一抗βＧa c t i n(１ʒ１０００)㊁B e c l i n１(１ʒ１５００)㊁L C３B(１ʒ１０００)过夜;次日,T B S T洗膜５次后,室温孵育二抗(１ʒ２０００)１h,再次用T B S T洗膜,最后将E C L化学发光液均匀滴加在膜表面,用B i oＧR a dC h e m i D o cX R S＋成像系统显影.显２１４１㊀㊀㊀合肥工业大学学报(自然科学版)第４２卷㊀影得到的图片,用I m a g e J 软件分析得到数据.１．４㊀统计学分析本实验数据采用S P S S１６．０软件进行处理,组间统计差异使用O n e Ｇw a y A N O V A 方差检验.显著性水平取∗P ＜０．０５㊁∗∗P ＜０．０１㊁∗∗∗P ＜０．００１均为显著差异.２㊀实验结果２．１㊀C o C l ２浓度对PC １２细胞存活率的影响用M T T 方法检测不同浓度C o C l ２对P C １２细胞存活率的影响,结果如图１所示,其中C o C l ２浓度为０即为对照组,下同.从图１可看出,５０㊁１００μm o l /L 的C o C l ２处理２４h 对P C １２细胞存活率没有影响,而在浓度为２００~８００μm o l /L 时,C o C l ２浓度对PC １２细胞存活率的影响显著降低.因此,本文选择２００㊁４００㊁８００μm o l /LC o C l ２处理P C １２细胞２４h 进行后续研究.图１㊀不同浓度C o C l ２对PC １２细胞存活率的影响２．２㊀C o C l ２对HI F Ｇ１α基因表达水平的影响由于C o C l ２缺氧造模的机理与低氧诱导因子(H y p o x i a ,H I F )有关,因此用q ＧP C R 来检测不同浓度C o C l ２处理P C １２细胞２４h 后H I F Ｇ１α的表达水平的变化,以此来判断不同浓度C o C l ２处理P C １２细胞２４h 后是否产生缺氧模型,结果如图２所示.图２㊀不同浓度C o C l ２对HI F Ｇ１α基因表达水平的影响由图２可知,与正常对照组比,２００μm o l /LC o C l ２处理组的HI F Ｇ１α基因表达水平并没有显著性差异,而４００㊁８００μm o l /L C o C l ２处理组的H I F Ｇ１α基因表达水平显著增加(∗∗∗P ＜０．００１),表明用４００μm o l /L 和８００μm o l /L C o C l ２处理PC １２细胞２４h 进行缺氧造模成功.２．３㊀C o C l ２对Be c l i n １、L C ３ＧⅡ蛋白的影响B e c l i n １是自噬的起始关键蛋白,它与P I ３K ＧⅢ形成复合体共同调控着自噬体的形成.L C ３蛋白是自噬体形成过程中所必须的一种蛋白,自噬激活后,胞浆内的L C ３ＧI 经修饰后转化为L C ３ＧⅡ,L C ３ＧⅡ蛋白的含量表明自噬的状态[１１].不同浓度C o C l ２对Be c l i n １㊁L C ３ＧⅡ蛋白表达量的影响如图３㊁图４所示.图３㊀不同浓度C o C l ２对Be c l i １蛋白表达量影响图４㊀不同浓度C o C l ２对LC ３ＧⅡ蛋白表达量的影响３１４１㊀第１０期韩苗苗,等:基于组合文本分类策略的学术报告精准推送由图３㊁图４可知,与正常对照组比,２００㊁４００μm o l /LC o C l ２处理组的Be c l i n １㊁L C ３ＧⅡ蛋白表达量没有明显变化,而８００μm o l /LC o C l ２处理组的B e c l i n １㊁L C ３ＧⅡ蛋白表达量出现显著降低(∗P ＜０．０５),这表明８００μm o l /L C o C l ２处理P C １２细胞２４h 明显抑制了细胞的自噬,这种异常的自噬可能与C o C l ２导致的细胞死亡相关.２．４㊀不同处理时间对P C １２细胞自噬影响在上述研究的基础上,本文研究了８００μm o l /LC o C l ２处理不同时间对PC １２细胞自噬影响,结果如图５所示.图５㊀不同处理时间对P C １２细胞自噬的影响由图５可知,与正常对照组比,８００μm o l /LC o C l ２处理PC １２细胞１２h 后,其L C ３ＧⅡ蛋白表达量并没有明显变化,只有处理２４h 才有明显变化,这表明８００μm o l /LC o C l ２对P C １２细胞自噬的抑制具有时间依赖性.３㊀结㊀㊀论本实验用不同浓度的C o C l ２处理PC １２细胞来研究C o C l ２与自噬的关系.实验结果表明,４００㊁８００μm o l /L C o C l ２处理P C １２细胞２４h 不仅对细胞存活率有显著影响,并且能显著提高H I F Ｇ１α基因表达水平,说明了用C o C l ２造模确实可以模拟细胞体外缺氧.B e c l i n １与L C ３ＧⅡ是标记自噬过程的重要蛋白,通过检测其蛋白水平,发现８００μm o l /L C o C l ２处理组的Be c l i n １㊁L C ３ＧⅡ蛋白表达量出现显著降低,表明C o C l ２处理抑制了细胞自噬,并且这种抑制是呈时间依赖的.综上所述,C o C l ２致化学性缺氧会损伤PC １２细胞,并且会抑制细胞正常的自噬,这种异常的自噬可能参与了C o C l ２致PC １２细胞的损伤.[参㊀考㊀文㊀献][１]㊀郭梦,班悦,孙千惠,等．中国人口老龄化与疾病的经济负担[J ]．医学与哲学,２０１５,３６(４A ):３２Ｇ３４．[２]㊀K A N GP M ,HA U N S T E T T E RA ,A O K IH ,e t a l ．M o r ph o Ｇl o g i c a l a n d m o l e c u l a rc h a r a c t e r i z a t i o no fa d u l tc a r d i o m y o Ｇc y t e a p o p t o s i s d u r i n g h y p o x i a a n d r e o x y g e n a t i o n [J ]．C i r c u Ｇl a t i o nR e s e a r c h ,２０００,８７(２):１１８Ｇ１２５．[３]㊀廖杰芳．缺血性脑血管病的症状与体征[J ]．中华现代内科学杂志,２００７,１１(１６):１１１Ｇ１２３．[４]㊀权晶晶,凌均棨．二氯化钴在体外细胞缺氧研究中的应用[J ]．国际口腔医学杂志,２００９,３６(４):４５５Ｇ４５８．[５]㊀J I N QI ,Y A N GLN ,L I NR ,e t a l ．P r o t e c t i v e e f f e c t s o f pa e Ｇo n i f l o r i na g a i n s t c ob a l tc h l o r ide Ｇi n d u c e da p o p t o s i sof e n d o Ｇt h e l i a l c e l l sv i a H I F Ｇ１αp a t h w a y [J ]．T o x i c o lI n V i t r o ,２０１２,２６(３):４５５Ｇ４６１．[６]㊀K L I O N S K Y D J ,A B D E L M O H S E N K ,A B E A ,e t a l ．G u i d e l i n e s f o r t h e u s e a n d i n t e r p r e t a t i o n o f a s s a y s f o rm o n i Ｇt o r i n g a u t o p h a g y [J ]．A u t o p h a g y ,２０１６,１２(１):１Ｇ２２２．[７]㊀M I Z U S H I MA N ,L E V I N EB ,C U E R V O A M ,e t a l ．A u t o Ｇp h a g y f i g h t s d i s e a s e t h r o u g hc e l l u l a r s e l f Ｇd i ge s t i o n [J ]．N a Ｇt u r e ,２００８,４５１(７１８２):１０６９Ｇ１０７５．[８]㊀M E N Z I E SF M ,F L E M I N G A ,R U B I N S Z T E I N D C ．C o m Ｇp r o m i s e d a u t o p h a g y a n d n e u r o d e ge n e r a t i v e d i s e a s e s [J ]．N a Ｇt u r eR e v i e w sN e u r o s c i e n c e ,２０１５,１６(６):３４５Ｇ３５７．[９]㊀M I Z U S H I MA N．A u t o p h a g y :p r o c e s s a n df u n c t i o n [J ]．G e n e s&D e v e l o pm e n t ,２００７,２１(２２):２８６１Ｇ２１７３．[１０]㊀Z HA N GS ,C H E N X ,Y A N G Y ,e t a l ．N e u r o pr o t e c t i o na Ｇg a i n s tc o b a l tc h l o r i d e Ｇi n d u c e d c e l la p o p t o s i so f p r i m a r yc u l t u r ed c o r t i c a lne u r o n sb y s a l i d r o s i d e [J ]．M o l e c u l a r &C e l l u l a rB i o c h e m i s t r y,２０１１,３５４(１/２):１６１Ｇ１７０．[１１]㊀WA N G L ,L IJ ,B A O J ．M i c r o a u t o p h a g y:l e s s e r Ｇk n o w n s e l f Ｇe a t i n g[J ]．C e l l u l a r &M o l e c u l a rL i f eS c i e n c e s ,２０１２,６９(７):１１２５Ｇ１１３６．(责任编辑㊀闫杏丽)４１４１㊀㊀㊀合肥工业大学学报(自然科学版)第４２卷㊀。

(新版)硫化氢防护知识培训题库及答案

(新版)硫化氢防护知识培训题库及答案一、单选题1.在缺氧受限空间作业时，除强制通风置换使氧含量尽可能满足安全要求外，需佩戴自给式空气呼吸器、供给空气呼吸长管或者()A、送风式空气呼吸器B、防尘口罩C、滤毒口罩D、医用外科口罩答案：A2.辽河油田对硫化氢中毒事故处理,严格按照()原则,严肃追究事故责任者的责任。

A、三不放过B、四不放过C、亡羊补牢D、预防为主答案：B3.《辽河油田公司硫化氢气体泄漏突发事件专项应急预案》，将硫化氢泄漏事件分为()级。

A、1B、2D、4答案：D4.现场需要24小时连续监测硫化氢浓度时,应选用()监测仪A、比长式B、便携式C、袖珍式D、固定式答案：D5.胸外心脏按压的频率0。

A、平稳规律B、忽快忽慢C、越快越好D、越慢越好答案：A6.在受限空间内作业,下列说法错误的是()。

A、受限空间外应设置安全警示标志，备有空气呼吸器(氧气呼吸器)、消防器材和清水等相应的应急用品B、受限空间出入口应保持畅通C、作业人员应将手机带入受限空间，以便对外联系D、有噪声产生的受限空间，应配戴耳塞或耳罩等防噪声护具答案：C7.下列不属于受限空间危险特征的是()。

Ax存在或可能产生有毒有害气体B、存在或可能产生掩埋作业人员的物料C、内部结构可能将作业人员困在其中(如内有固定设备或四壁向内倾斜收拢)D、异常情况可以自行撤离现场答案：D8.硫化氢危险临界浓度()，允许人直接接触10分钟。

Ax 300ppmB∖ 500ppmC∖ 100ppmD x 50ppm答案：C9,进入受限空间作业前需对受限空间进行隔绝,以下做法错误的是()A、与受限空间连通的管道插入盲板B、拆除一段管道C、与受限空间连通的可能危及安全作业的孔、洞应进行严密地封堵D、关闭与受限空间连通的管道上的阀门答案：D10.对容积较大的受限空间的取样分析,下列做法正确的是()。

A、在上部取样分析B、在中部取样分析C、在下郡取样分析D、在上、中、下各部位分别取样分析11.硫化氢对金属的腐蚀属于0oA、化学腐蚀B、电化学腐蚀C、物理腐蚀D、生物腐蚀答案：B12.天然气主要成分甲烷的爆炸极限()。

硫化氢防护考试试卷

硫化氢防护培训考试试卷姓名：身份证号：考试时间：成绩：一、单项选择题共10题;每题2分1. 硫化氢15分钟短期暴露范围平均值为 ..A.4.6ppmB. 10ppmC.15ppmD.20ppm2. 硫化氢进入人体的主要途径是 ..A. 皮肤B. 呼吸道C. 消化道D. 其他3. 对病员实施心肺复苏术时正确的安放位置为 ..A.柔软舒适的表面B.在硬表面上垫以缓冲物C.平整的硬表面D.床上S可能积聚的地区..4. 没有戴上合适的呼吸装备的人; 进入H2A.可以B.领导批准可以C.不要D.视情况5. 在含硫化氢气体的地层钻井时;井队现有条件下不能实施压井作业..放喷点火时;点火人员应在方向..A.上风B.下风C.侧风D.地势高的6. 氢分子所占空间比氢原子所占空间约大倍..A.10B.15C.20D.307. 氢脆和硫化物应力腐蚀破裂是呈脆性破坏;这种破坏多发生在设备、工具使用不久后;发生破裂..A. 低应力B. 高应力C. 中应力8. 当硫化氢气体以适当的比例与空气或氧气混合;就会发生爆炸..A.5.5%~50%B. 4.3%~45.5%B.C. 2.2%~36% D. 8.7%~58%9. 使用正压式空气呼吸器前;检查气瓶压力表的读数值应在 ..A.18~20MPaB. 28~30MPaC.30~35MPaD. 10~30MPa10. H2S的毒性几乎与气相同..A.一氧化碳B. 氢化氰C.甲烷D.二氧化硫二、判断题共25题;每题2分1. 因为正常人的呼吸是自主的;因此实施心肺复苏术时病员的呼吸道也是自主打开的..2. 硫化氢比空气重3. 热作用于油层时;石油中的有机硫化物分解;产生硫化氢..4. 接触高浓度硫化氢后可发生闪电性死亡..5. 硫化氢失重腐蚀是一个化学反应过程;其反应速度;一般是随温度升高而变慢;反之;要加快..6. 我国已开发的油田不同程度地含有硫化氢气体;甚至有的油田含量极高..7. 硫化氢气体只是严重威胁着人们的生命安全;不会造成严重的环境污染..8. 某些钻井液处理剂在高温热分解作用下;会产生硫化氢..9. 硫化氢可以以气态的形式存在;不会存在于井内的钻井液中..10. 一个人对硫化氢的敏感性随其与硫化氢接触次数的增加而增加..11. 硬度越大的钢;对硫化氢腐蚀应力开裂越敏感..12. 硫化氢应力腐蚀开裂的事故往往是突然的、灾难性的;发生之前无明显的先兆..13. 在可能遭受硫化氢侵蚀条件下作业时;钻柱应选用抗硫化氢材料..14. 海上钻机和平台设置的报警信号灯光不用有别于平台外的其它光源..15. 正压空气呼吸器面罩上的呼气阀和口鼻罩上的单向阀门都为单方向开启..16. 正压空气呼吸器的气瓶可以充满纯净的氧气..17. 便携式硫化氢检测仪具有声光报警;浓度显示和远距离探测的功能..18. 在钻井设计中只需有钻井、完井设计;不需要有弃井设计..19. 海洋上;钻井船的首尾部都要设立防护室..20. 没有戴上合适的防毒器具的人;切记不要进入硫化氢可能积聚的封闭地区..21. 钢材表面的受损伤处在硫化氢环境下容易造成应力集中;它往往是断裂的裂源..22. 缓蚀剂具有在钢材表面形成薄膜;减缓抑止钢材的电化学腐蚀作用;延长管柱的使用寿命..23. 接触极高浓度硫化氢后可先出现呼吸浅而慢;随之呼吸聚停..24. 正压式空气呼吸器应由上向下戴面罩..25. 部分演练是针对性地完成应急任务中的某个单项科目而进行的基本操作..三、简答题共3题;每题10分1. 简述硫化氢的理化性质有哪些2. 硫化氢的腐蚀有哪两种类型影响硫化氢腐蚀的因素有哪些3. 请简述遇硫化氢中毒事故时;对中毒者实施CPR的操作步骤..。

硫化氢中毒机理及现场救护

必要时应到医务部门检查或诊治。
洗去
消。
污染
离开
衣染
物，
毒
及区
时域
进
后，
行脱
硫化氢中毒机理及现场救护
小知识——误食化学品的急救法
一旦误食化学物品，应立即设法催吐。若误食的化学物品为酸性，则可服用大量牛奶和水，促使其呕吐。
硫化氢中毒机理及现场救护
硫化氢中毒发病机理
（5）心肌损害，急性中毒出现心肌梗死样表现，可能是由于硫化氢的直接作用使冠状动脉痉挛、心肌缺血、水肿、炎性浸润及心肌细胞内氧化障碍所致。
急性硫化氢中毒致死病例的尸体解剖结果与病程长短无关，常见脑水肿、肺水肿，其次为心肌病变。一般可见尸体明显发绀，解剖时发出硫化氢气味，血液成流动状，内脏略呈绿色。脑水肿最常见，脑组织有点斑状出血、坏
硫化氢中毒机理及现场救护
三、暴露环境下对工作人员的医疗监视
1、临床表现急性硫化氢中毒一般发病迅速，出现以
脑和（或）呼吸系统损坏为主的临床表现，亦可伴有心脏等器官功能障碍。
临床表现可因接触硫化氢的浓度等因素而有明显差异。主要表现为：
硫化氢中毒机理及现场救护
（1）接触较高浓度硫化氢后可出现头疼、头晕、乏力、供给失调，可发生轻度意识障碍。常出现眼和呼吸道刺激症状。
硫化氢中毒机理及现场救护
2、监视过程中诊断人员是否发生急性硫化氢中毒的主要依据
（1）有明确的硫化氢接触史患者的衣着和呼气有臭鸡蛋气味可作为接触指标。事故现场可产生或测得硫化氢。患者在发病前闻到臭鸡蛋气味可作参考。
（2）临床特点：出现上述脑和（或）呼吸系统损害为主的临床表现。

硫化氢通过抑制iNOS-NO通路对抗化学性缺氧引起的PC12细胞损伤

硫化氢通过抑制iNOS-NO通路对抗化学性缺氧引起的PC12细胞损伤郑东诞;兰爱平;莫利求;杨战利;杨春涛;王秀玉;郭润民;陈培熹;冯鉴强【期刊名称】《中山大学学报（医学科学版）》【年(卷),期】2011(032)006【摘要】[目的]探讨硫化氢(H2S)是否通过抑制iNOS-NO通路对抗化学性缺氧诱导的PC12细胞损伤.[方法]应用化学性低氧模拟剂氯化钴(CoCl2)处理PC12细胞建立化学性缺氧损伤模型.应用CCK-8比色法检测细胞存活率;Hoechst33258染色法观察细胞凋亡的形态学改变；PI染色流式细胞仪检测细胞凋亡率；Griess试剂盒检测细胞培养液中的亚硝酸盐(NO的代谢物)的浓度；Western blot法检测iNOS蛋白的表达水平.[结果]应用600 μmol/L CoCl2处理PC12细胞24 h可使诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达明显增多；在应用600 μmol/L CoCl2处理PC12细胞前30 min,应用400 μmol/L NaHS(H2S的供体)预处理细胞不仅可明显地抑制CoCl2诱导的iNOS表达及NO生成的增多,还能保护PC12细胞对抗600μmol/L CoCl2引起的损伤,使细胞存活率升高,凋亡细胞数目减少；在CoCl2损伤PC12细胞前60 min应用iNOS抑制剂L-Canavanine( 10 μmol/L)预处理也能产生类似NaHS的作用.SB203580(p38MAPK特异性抑制剂)预处理60 min也可以下调CoCl2引起的iNOS高表达.[结论]iNOS-NO通路介导CoCl2引起PC12细胞的损伤作用；H2S通过抑制iNOS-NO通路对抗化学性缺氧诱导的PC12细胞损伤.%[Objective] To investigate whether hydrogen sulfide (H2S) protected PC 12 cells against chemical hypoxia-induced injury by inhibiting iNOS-NO pathway.[Method] PC12 cells were treated with cobalt chloride(CoCl2) to set up a chemical hypoxia-induced cellular injury model. Cell viability was tested by Cell Counter Kit (CCK-8); morphological changes of apoptotic cells were detected by Hoechst33258 staining; Apoptotic rate was evaluated by propidium iodide staining and flow cytometry (FCM) ; Nitrite accumulation, an indicator of nitrogen monoxidum (NO) production, was measured in cell culture supernatants using the Griess reagent; the expression of the inducible enzyme of NO (iNOS) was determined by Western blot assay. [Results]Exposure of PC 12 cells to 600 u.mol/L CoCl2 for 24 h significantly enhanced iNOS expression. Pretreatment with 400|xmol/LNaHS (a donor of H2S) for 30 min prior to exposure of PC 12 cells to 600 (jumol/L CoCl2 not only inhibited CoCl2-induced increase in expression of iNOS and NO production, but also protected PC 12 cells against injuries induced by 600 Jjimol/L CoCl2, enhancing cell viability and decreasing amount of apoptotic cells. Similarly, pretreatment with L-Canavanine (10 u,mol/L) , an inhibitor of iNOS for 60 min prior to exposureof PC 12 cells to CoCl2 also conferred the same cytoprotective effect of H2S. In addition, pretreatment with SB203580, an inhibitor ofp38MAPK, for 60 min prior exposure of PC 12 cells to 600 (Jimol/L C0CI2 could also down-regulate the expression of iNOS induced by CoCl2. [Conclussions] The iNOS-NO pathway mediates CoCl2-induced injury and H^S can protect PC 12 cells against chemical hypoxia-induced injury by inhibiting iNOS-NO pathway.【总页数】6页(P741-746)【作者】郑东诞;兰爱平;莫利求;杨战利;杨春涛;王秀玉;郭润民;陈培熹;冯鉴强【作者单位】中山大学附属第一医院黄埔院区心血管科;中山大学中山医学院生理学教研室;附属第一医院黄埔院区麻醉科,广东广州510080;中山大学中山医学院生理学教研室;中山大学中山医学院生理学教研室;中山大学中山医学院生理学教研室;中山大学中山医学院生理学教研室;中山大学中山医学院生理学教研室;中山大学中山医学院生理学教研室【正文语种】中文【中图分类】Q28【相关文献】1.PI3K/Akt信号通路在硫化氢保护PC12细胞对抗化学性缺氧损伤的作用 [J], 孟金兰;陈雅嘉;陈红;董艳芬;邢德刚;梁燕玲;兰爱平;冯鉴强2.热休克蛋白90在硫化氢保护PC12细胞对抗化学性缺氧损伤中的作用 [J], 孟金兰;兰爱平;杨春涛;杨战利;王立伟;陈丽新;朱琳燕;陈培熹;冯鉴强3.硫化氢通过抑制p38 MAPK保护PC12细胞对抗化学性缺氧损伤 [J], 兰爱平;梅卫义;孟金兰;胡芬;杨春涛;杨战利;陈培熹;冯鉴强4.硫化氢对抗化学性缺氧引起的心肌细胞损伤及其机制 [J], 廖新学;杨春涛;杨战利;李建平;王礼春;黄雪;郭瑞鲜;陈培熹;冯鉴强5.热休克蛋白90在硫化氢对抗化学性缺氧引起的心肌细胞损伤中的作用 [J], 李建平;杨战利;杨春涛;廖新学;黄雪;王礼春;陈培熹;冯鉴强因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

硫化氢习题库

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A、无色、无毒、无味 B、无色、剧毒、有臭味C、呈淡黄色、有毒、无味D、2、硫化氢气体的比重（A）空气的比重。

A、略大于B、小于C、略小于D、-3、在气体温度较高时，硫化氢气体会（A），在气体温度较低时，硫化氢气体会沉降在低洼处。

A、上升B、静止不动C、沉降在低洼处D、-4、石油作业现场的硫化氢主要来源是（C）。

A、地层中的硫化氢随B、施工中的化学反应C、两者都有可能D、-5、溶解于作业流体中的硫化氢气体，在（B）情况下容易逸出。

A、加压、加温、静止B、减压、加温、搅动C、减压、降温、静止D、-6、在硫化氢气体浓度（A）时，可以闻到臭鸡蛋气味。

A、极低B、极高C、任何浓度D、-7、天然气管道投产试运时，对天然气天然气置换过程中操作应平稳，天然气进气速度不应超过（B）。

A、3m/s B、5m/s C、8m/s D、-8、在集气站内管线置换时，压力应控制在（B）Mpa。

A、0.05B、0.1C、0.2D、-9、硫化氢在空气中的浓度为(B)时，遇到明火时即可发生爆炸。

A、10—15% B、4.3—46%C、50—80%D、-10、10PPM的阈限值意味着（B）。

A、不用理睬，不会造成任何影响B、不会造成任何影响，但是应引起注意，派人加强监测C、发警报，准备启动应急预案D、-11、当硫化氢浓度达到20PPM时，应（D）。

A、戴上呼吸器B、向上级报告C、实施关井程序D、以上都要做12、便携式气体检测仪开机后，发现蜂鸣器发出连续叫声，同时液晶屏显示“LO BAT”字样，说明（B）。

急性严重硫化氢中毒心肌损害1例

急性严重硫化氢中毒心肌损害1例
于鑫;蔡湘龙;张引;刘亮亮;李国强
【期刊名称】《中国急救复苏与灾害医学杂志》
【年(卷),期】2022(17)7
【摘要】目的硫化氢中毒多由作业环境中的硫化氢经口鼻吸入所致,而引起严重的心肌、大脑、肺等脏器损伤,其发病突然,临床进展迅速,部分病人在救治过程中死亡,目前对于其心肌损伤的临床经过、治疗手段等方面还缺乏了解,本文对于1例诊断为急性硫化氢中毒、急性心肌损害病人的临床资料进行回顾分析,尤其结合文献探讨对于心肌酶学、心电图、心肌灌注显像等的动态变化,旨在提高急救与重症医务人员对于硫化氢中毒导致急性心肌损伤的认识。

【总页数】4页(P977-980)
【作者】于鑫;蔡湘龙;张引;刘亮亮;李国强
【作者单位】中国人民武装警察特色医学中心综合重症医学科
【正文语种】中文
【中图分类】R135.14
【相关文献】
1.重度低钾致严重心肌损害酷似急性心肌梗塞一例报告
2.急性硫化氢中毒伴广泛性心肌损害的护理
3.急性硫化氢中毒致心肌损害2例报告
4.急性硫化氢中毒致严重心肌损害一例
5.急性硫化氢中毒致心肌损害3例报告
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执业药师药学专业知识二模拟试题及答案（4）执业药师考试试题答案【7】

执业药师药学专业知识二模拟试题及答案（4）执业药师考试试题答案【7】三、匹配题(B型题(配伍选择题)共28题，40小题，每小题0.5分。

备选答案在前，试题在后。

每组若干题。

每组题均对应同一组备选答案，每题只有一个正确答案。

每个备选答案可重复选用，也可不选用。

)61、A.±15%B.±10%C.±8%D.±7%E.±5%1.平均装置1.Og及1.Og以下颗粒剂的装量差异限度是2.平均装量6.Og以上颗粒剂的装量差异限度是标准答案： B,E解析：本组题考查颗粒剂的质量检查项目62、1.单室模型静脉注射给药血药浓度时间关系式是2.单室模型静脉滴注给药，达稳态前停止滴注给药的血药浓度时间关系式是3.单室模型血管外给药血药浓度时间关系式是4.单室模型静脉滴注给药血药浓度时间关系式是标准答案： A,D,E,C本题分数： 2.00 分，你答题的情况为错误所以你的得分为 0 分解析：本组题考查药物动力学公式。

03~07年均只考查单室模型计算公式，且完全重复考查，牢记上述公式即可。

63、A.头孢曲松B.头孢噻吩钠C.头孢克肟D.头孢克洛E.头孢羟氨苄1.水溶液在pH8以上室温条件下，水解生成的药物是2 结构中7位侧链为一片断的药物是标准答案： B,A解析：本组题考查头孢菌素类药物的结构。

头孢噻吩钠(Cefalotinsodium)[典]是对头孢菌素C结构修饰得到的第一个半合成抗生素，X-*t"点是可用于耐青霉素细茵引起的昏种感染，如败血症、呼吸道感染、尿道感染、心内膜炎等，但由于口服吸收差，故须注射给药。

本品在干燥固态下比较稳定，水溶液在25"C~24小时会失活8%，溶液的酸碱性对其有较大的影响，在pH3~7之间较稳定，但在pH8.0以上室温条件下，会迅速分解。

其主要原因为头孢噻吩钠3位的乙酰氧基经水解生成脱乙酰基头孢噻吩钠，后者再经环合生成内酯环。