2014年高考生物(第04期)名校试题解析分项汇编 专题14 生物技术实践(含解析)

2014年高考生物（第04期）名校试题解析分项汇编专题14 生
物技术实践（含解析）
1．（2014届河南焦作高三第一次模拟考试理综生物卷）（1）传统发酵技术中，利用微生物发酵生产特定的产物，很多都是中华民族的传统食品。

请将下列微生物与对应的发酵产物联系起来：
①乳酸菌②根瘤菌③蓝藻④醋酸菌⑤毛霉⑥酵母菌⑦大肠杆菌⑧曲霉
制作果酒、果醋、腐乳、泡菜对应的微生物依次是______________。

（填相应序号）；在腐乳制作过程中，抑制微生物的物质有盐、___________、______________等。

（2）在培养基的配制过程中，具有如下步骤：①溶化②调pH ③加棉塞④包扎⑤分装⑥称量，正确的顺序为___________；倒平板操作中，平板冷凝后，要将平板倒置，其主要原因是___________。

纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法是平板划线法和___________法。

（3）柠檬油是某些化妆品的优质配料，提取柠檬油常用的方法是____________。

为了使柠檬油易与水分离，需加入_____________，并调节pH到7～8。

（4）在愈伤组织形成过程中常用的培养基是MS培养基，并且需要添加___________；愈伤组织分化成根和芽，再由芽发育成叶和茎，这一过程称为___________，此过程
___________（填“需要”或“不需要”）光照。

2．（2014届山东潍坊高三上期期末考试生物卷）（10分）
能源甘蔗是生产燃料酒精的优质原料，可通过下图过程快速繁殖；为了提高酒精产量，还需要耐高糖和耐酸性的酵母菌菌种。

请回答下面的问题：
(1)对甘蔗外植体常用_______和_________进行消毒；对培养用的器皿常用_________方法进行灭菌。

(2)在组织培养过程中发现培养基上感染了几种细菌。

若在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_______________指示剂培养几种菌后，指示剂变红就可以鉴定其中含有能分解尿素的细菌；若在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入______________染料培养几种菌，培养基中出现________________，就可以鉴定其中含有能分解纤维素的细菌。

(3)为了获得理想的酵母菌菌种，所用的培养基要额外添加____________，凋低
______________。

从功能上说，此培养基属于____________________。

【答案】（1）酒精氢化汞干热灭菌（2）酚红刚果红透明圈（3）高浓度蔗糖 PH 选
3．（2014届四川成都外国语学院高三下期2月月考生物卷）（9分）I、苯胺是致癌物质，土壤中有分解苯胺的异养型细菌，下表是筛选分解苯胺的异养型细菌的培养基配方。

（1）此培养基中的成分X除了为目的菌提供能源外，还能提供和，该培养基从作用看属于。

（2）下图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图。

则获得图A效果的接种方法是，图B效果的接种方法是。

II、根据植物组织培养和生物有效成分的提取的知识回答下列问题：
（1）菊花的组织培养常用的培养基是，原理是。

（2）工业上提取胡萝卜素一般采用法，鉴定该色素的方法是法。

4．（2014届安徽安庆六校高三第三次联考生物卷）（8分）据报道，从部分企业生产的速冻食品中检出葡萄球菌超标，“细菌门”事件引起公众普遍关注。

葡萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂，在含卵黄的固体培养基上形成的菌落周围会出现特有的乳白色的乳浊环。

请回答下列问题。

（1）某兴趣小组欲检测某果汁类食品中含有葡萄球菌，请帮他们完善下列步骤。

①配制培养基：称取适量的牛肉膏、蛋白胨。

NaCl、琼脂等，加入蒸馏水，搅拌加热至完全溶解后调节PH,分装到锥形瓶后进行，在无菌状态下加入卵黄液
（100ml10%灭菌NaCl溶液中加一个鸡蛋黄，振荡均匀）摇匀后立即倒平板。

②接种：取待检测果汁2.5ml加入22.5ml灭菌生理盐水中，制成接种样液。

实验组：将接种样液用法接种在含卵黄的固体培养基上。

对照组：将用划线法接种在含卵黄的固体培养基上或不接种作为对照。

将上述接种后的培养皿同时放在36℃的恒温箱中培养48h。

③观察：观察培养基表面
（2）培养基中的牛肉膏和蛋白胨为葡萄球菌生长和繁殖提供。

葡萄球菌能耐受高浓度的NaCl溶液，所以在配制培养基时加入高浓度的NaCl溶液可以将它分离出来，此培养基属于培养基。

（3）若要统计某土壤样品中该活菌数目，宜采用法。

【答案】（1）①灭菌②平板划线无菌生理水空白③是否出现周围有乳浊环的菌落（2）碳源和
5．（2014届江西赣州六校高三上期期末联考生物卷）（15分）回答下列问题：
(1)在果酒制作中，其中温度是重要的控制条件，在左右的温度是最适合酵母菌繁殖。

在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮上的酵母菌；从其酵母菌群中分离纯化酵母菌，常使用的接种方法是_____和____两种。

酵母菌适合生活在偏酸性环境，而放线菌则适合生活在偏碱性环境中，分离二者所用的培养基称为______。

(2)葡萄皮、籽中含有原花青素、葡萄皮红素和大量葡萄风味物质等，这些物质易溶于
乙醇、乙酸乙酯中，因此常采用______法来分离提取。

还有和等提取植物芳香油的方法
(3)通过花粉培养产生花粉植株的途径一般有两种：一是花粉通过阶段发育为植株，另外一种是花粉在诱导基上先形成，再将其诱导分化成植株；这两种途径之间没有绝对界限，主要取决于培养基中。

6．（2014届河北邯郸高三上期第二次模拟考试生物卷）请根据下图回答有关制作果酒和果醋的问题：
（1）在向甲装置中加入菌种前要对装置进行；在甲装置中加入适量的酵母菌后，开始的一段时间里要打开阀，目的是使酵母菌在有氧条件下繁殖,然后关闭阀，偶尔打开阀几分钟，目的是无氧条件下产生酒精；若要进行醋酸发酵，则需要对甲装置进行的操作是。

酒精发酵时一般将温度控制在度，醋酸
菌最适生长的温度为。

（2）乙图中的过程①和③分别发生在酵母菌的和中。

（3）①②过程产生乙醇，④过程产生醋酸的反应式分别是：
和。

（4）在家庭中用鲜葡萄制作果酒时，正确的操作是。

A.应先除去葡萄枝梗，然后反复冲洗，直至彻底干净
B.应控制发酵温度维持在20℃左右，变化不能太大
C.发酵过程中应该不断从充气孔进行通气，以维持发酵的需氧环境
D.酵母菌存在广泛、生命力强，因此果酒制作时不需对所用器具消毒灭菌
7．（2014届甘肃民乐一中高三12月诊断考试生物卷）人和哺乳动物的尿中含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染。

土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源。

现对土壤中的这类细菌进行分离实验，请回答下列问题：
（1）分离培养细菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，常
用的灭菌方法有_____________、______________和_______________。

（2）将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养。

在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在______________旁进行操作。

接种后的培养皿_______于37℃的____________中培养。

（3）用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌，从功能上划分该培养基属于_______培养基。

若培养基中存在有分解尿素的细菌，其菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生的________使pH升高，酚红指示剂产生的颜色变化，从而证明这一菌株可以尿素为氮源。

变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力________。

（4）与全营养培养基中的菌落相比，以尿素为氮源的培养基中菌落数( )。

A．多 B．少 C．相等 D．几乎为零
8．（2014届陕西长安五校高三第一次模拟考试生物卷）（15分）纤维素酶对于能否实现乙醇工业化生产、处理服装面料等具有重要的意义，研究者初步筛选到能合成纤维素酶的菌株MC-1，以下是该菌株的鉴定过程。

（1）为了获得能合成纤维素酶的单菌落，可采用法将初筛菌液接种在固体培养基上，这种培养基属于培养基。

（2）关于制备固体培养基的叙述，错误的是
A．制作固体培养基时可以加入琼脂。

B．操作的顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌。

C．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板。

D．待平板冷却凝固约5-10min后将平板倒过来放置。

（3）实验过程中如何防止其他微生物的污染？。

（4）下表的培养液pH均为4.8，若对MC-1中纤维素酶的活力进行测定，则不能选择
表中的的培养液。

（多选）
培养液纤维素纤维素酶NaNO3牛肉膏K2HP04KCl MgSO4·7H2O FeS04
A 25g/L ———1g/L 0.5g/L 1g/L 0.01g/L
B——3g/L—1g/L0.5g/L1g/L0.01g/L C25g/L1μg/L—3g/L1g/L0.5g/L1g/L0.01g/L D25g/L—3g/L—1g/L0.5g/L1g/L0.01g/L
表5
5）分离获得了具有较高纤维素酶活性的菌株MC-1，为了在此基础上获得纤维素酶活性
更高的菌株，最可行的做法是。

（6）某同学在培养过程中发现培养基上感染了几种细菌。

若在以尿素为唯一氮源的培
养基中加入________指示剂培养几种菌后，指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的菌；若在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入________染料，培养后，培养基中出现透明圈，就可以鉴定其中含有纤维素分解菌。

9．（2014届江西重点中学协作体高三第一次联考生物卷）（15分）现代人吃什么都讲究天然，所以目前市场上果汁饮料、果酒、果醋越来越受到人们的青睐。

请回答：
(1)在果汁加工过程中可添加____________________酶来提高出汁率和澄清度。

(2)苹果醋是最受欢迎的饮料之一，其生产过程中利用了______________的发酵作用，该过程需将温度控制在______________。

(3)喝剩的葡萄酒放置一段时间后变酸的原因是______________________________。

(4)在果酒酿造过程中，如果果汁灭菌不严格，含有醋酸菌，在酒精发酵旺盛时，醋酸菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸？________（1分）(填“能”或“不能”)。

请说明理由：____________________________。

(5)若要提高果醋的产量，发酵过程中关键要提供______________、____________等条件。

10．（2014届宁夏银川一中高三上期第六次月考生物卷）（15分）研究发现柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白质）均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示。

（1）柚皮易焦糊，宜采用法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过除去其中的固体杂质。

（2）筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或接种。

采用平板划线法接种时需先灼烧接种环,其目的是。

对新配制的培养基灭菌时常用的
是。

实验前需对超净工作台进行___________处理。

（3）培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供______________。

（4）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。

可通过测定透明圈的______________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

11．（2014届吉林实验中学高三第一次模拟考试生物卷）（15分）某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混合在一起，得到混合菌。

请你完成分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌的实验步骤，并回答有关问题：
（1）主要步骤：
①制备两种培养基：一种是____________培养基，另一种加__________的培养基。

分别分成两份，依次标上A，A’和B，B’，备用。

②分别向A、B培养基中接种____________。

③接种后，放在恒温箱中培养3～4天。

④分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌种，接种到A’、B’培养基中。

⑤接种后，把A’、B’培养基放入恒温箱中培养3～4天。

（2）回答问题：
在步骤①中，为保证无杂菌污染，实验中应采用的主要措施有对培养基进行
_______________、将____________在酒精灯火焰上灭菌、接种过程在__________________附近进行。

第④⑤两个步骤的目的是获得
_______________________________________________。

【答案】⑴无氮（2分）青霉素（2分泌）混合菌（2分）⑵高压蒸气灭
菌（2分）接
12．（2014届河北冀州中学高三上期期末考试生物卷）腐乳、腌白菜等以其色泽诱人、味道鲜美时常出现在人们的餐桌，这几种食品都是经过腌制加工而成的，请回答下列问题：
（1）腐乳制作过程中，多种微生物参与发酵作用，其中起主要作用的微生物是一种
______状真菌。

图中A表示，制作腐乳坯时用沸水处理豆腐的目的
是。

（2）腐乳制作过程中加盐的作用是___ ____ ___。

（3）制作腐乳的卤汤中通常要加入料酒、黄酒等，含量一般控制在12％左右，其目的是。

（4）据图可知腌白菜在腌制_________天后食用最佳。

13．（2014届北京四中高三第二学期开学模拟生物卷）（16分）农作物秸秆在生产实践中具有多种用途。

在特定微生物产生的纤维素酶的催化下，秸秆中的纤维素可被分解为葡萄糖，经发酵后形成乙醇，再加工即可制成燃料乙醇，减少了人类生活对石油资源的依赖。

请分析回答：
（1）欲从土壤中分离获取上述特定微生物，可采用稀释涂布法或法进行接种，所用培养基以纤维素为唯一碳源，目的是只允许能产生的微生物生长，而其他微生物均不能生长。

在培养基中加入适量的刚果红染料，若观察到即可初步筛选到目的菌。

（2）某研究人员经上述培养获得了三种微生物（甲、乙、丙），现通过如下实验比较三种微生物所产生纤维素酶的活性大小。

①将甲、乙、丙三种微生物经离心等方法处理后，制成酶浓度相同的纤维素酶提取液，取等体积的三种提取液分别与等量的纤维素悬浮液混合，在相同且适宜的pH和温度条件下放置一段时间。

②利用试剂检测产物中的葡萄糖，并通过比较颜色深浅程度判断酶活性的大小。

③实验结果如下：
由表分析，三种微生物产生的纤维素酶活性不同，最可能的原因是。

其中产生酶活性最强的微生物是。

（3）农作物秸秆除用于生产燃料乙醇外，还可用于培育蘑菇和生产沼气等。

下图为某生态农场的部分结构模式图。

水稻、杂草在此生态系统的组成成分中属于。

输入到鸭体内的能量除通过呼吸作用以热能形式散失外，还用于鸭自身的等生命活动。

在农业生产上，将蘑菇房与蔬菜大棚连通可提高蔬菜产量，增产的原因最可能是。

（4）对农作物秸秆的充分利用可促进生态系统中物质在之间不断地循环往返，同时合理调整了生态系统中的能量流动关系，有效缓解了燃烧秸秆造成的污染和浪费。

14．（2014届湖北荆门高三元月调考理科综合生物卷）从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。

富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。

（1）接种前要对培养基进行____________处理。

在整个微生物的分离和培养过程中，一定要注意在____________条件下进行。

（2）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。

如培养纤维素分解菌的菌样应从___________环境中采集。

（3）从土壤中筛选纤维素分解菌需要配制培养基，该培养基中需要加入纤维素粉作为唯一的。

（4）经过梯度稀释后，要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是，当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生_____________来筛选纤维素分解菌。

某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是__________________________________。

生物接种、e．恒温箱中培养、f．菌种的保存；在培养的过程中一定要注意无菌操作。

选择培养基：选择
15．（2014届湖北省部分重点中学高三二月联考生物卷）根据生物相关知识，回答胡萝卜素提取和酶应用方面的问题：
（1）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，通常在萃取前将胡萝卜粉碎和，以提高萃取效率；水蒸气蒸馏法（填“适合”或“不适合”）胡萝卜素的提取，原因是；鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素时，通常可采用法，并以样品作为对照。

（2）若要提高衣物上血渍的去除效果，可在洗衣粉中加入酶，因为该酶能将血红蛋白水解成可溶性的或；若要提高衣物上油渍的去除效果，洗衣粉中可添加酶；使用加酶洗衣粉时，水温过低或过高时洗涤效果不好的原因分别是。

【答案】（1）干燥（1分）不适合（1分）水蒸气蒸馏法适用于蒸馏挥发性物质，而胡萝卜素为非挥
16．（2014届湖北孝感高级中学高三上期期末测试生物卷）在生物技术实践过程中，往往需要注意某些实验步骤的操作，请将下列实验中的注意事项填写完整：（1）在腐乳的制作时，用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用消毒。

（2）在“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”课题中，往往需要稀释土壤溶液，为了避免杂菌污染，此过程每一步都要在旁操作。

（3）在提取植物细胞的DNA时，需要先用洗涤剂溶解。

（4）在花药离体培养中剥离花药时，要彻底去除，因为与其相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。

（5）为避免外源DNA等因素的污染，PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液和蒸馏水等在使用前必须进行。

（6）在固定化酵母细胞中加热溶解海藻酸钠时，最好采用的方法。

（7）在血红蛋白的提取和分离中，若红细胞的洗涤次数过少，将无法除去。

（8）胡萝卜素提取的萃取过程应采用加热，因为有机溶剂都是易燃物。

17．（2014届湖北部分重点中学高三第一次联考生物卷）（8分）胡萝卜素通常是橘黄色结晶，化学性质比较稳定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机褡剂，其中β一胡萝卜素具有非常重要的功用，因此胡萝卜素的提取及鉴定引起人们很大的兴趣。

胡萝卜素的萃取实验流程为：
（1）工业提取天然β—胡萝卜素除了可以从植物中提取天然胡萝卜素外，还可以从养殖的岩藻中获得或者利用生产。

（2）干燥注意控制温度和时间，这是因为。

（3）萃取的效率主要取决于。

（4）萃取过程用到的有机溶剂应该具有很高的，能够充分溶解萝卜素，并且不与水混溶。

（5）左图为胡萝卜素粗品鉴定装置示意图，右图为鉴定结果示意图，请据图回答下列问题。

①胡萝卜素粗品鉴定的方法名称是。

②a的作用是 .
③A、B、C、D四点中，属于标样的样点是 .
④乙代表的物质是。

18．（2014届湖北武汉武昌区高三上期期末学业质量生物卷）高温淀粉酶在大规模工业生产中是极为重要的酶制剂。

研究者从热泉中筛选出了能高效产生高温淀粉酶的嗜热菌。

其筛选过程如下图所示。

据图中信息并结合课本知识回答：
（1）进行①过程的目的是__ ；②过程所使用的接种方法是。

（2）从用途上来说，I号培养基应属于培养基；从物理状态上来说，II号培养基属于固体培养基，配制时应加入作为凝固剂。

（3）I、II号培养基配制和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是；一般对配制的培养基应采用进行灭菌。

（4）部分嗜热菌在I号培养基上生长时可释放分解培养基中的淀粉，在不同菌落周围形成大小不同的透明圈，应挑出的菌落，接种到II号培养基。

19．（2014届四川自贡高三第一次诊断性考试生物卷）（12分）根据生物技术实践的有关知识，回答下列问题：
（1）下图表示利用生产果酒装置继续生产果醋过程中培养液PH变化情况。

由图可知，接种醋酸菌是在时刻，此时还需进行的操作
是。

（2）为了分离纯化果酒发酵中的酵母菌，若用平板划线法接种，则此过程中通过接种环在固体培养基表面进行操作。

将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面，可以得到由单个细胞形成的菌落；若用稀释涂布平板法接种，则必须将菌液进行一系列的，然后分别涂布到固体培养基表面进行培养。

（3）菊花的组织培养一般选择作为材料。

（4）用凝胶色谱法分离——淀粉酶时，在色谱柱中移动速度较快的蛋白质相对分子量较。

20．（2014届上海市杨浦区高考一模生物卷）（9分）回答下列关于微生物的问题。

营养缺陷型是指野生型菌株由于基因突变，致使细胞合成途径出现某些缺陷，丧失合成某些物质的能力，如氨基酸、维生素、碱基等的合成能力出现缺陷，必须在基本培养基（野生型菌株最低营养要求）中添加缺陷的营养物质（补充培养基）才能正常生长的一类突变株。

基本培养基中加入一些营养物质，可以满足该微生物的各种营养缺陷型生长的培养基称为完全培养基。

营养缺陷型在基础理论研究和生产应用中有广泛作用。

青霉素能抑制细菌细胞壁的生物合成，可用于淘汰野生型菌株。

筛选营养缺陷型菌株一般通过四个环节，即诱变、淘汰野生型、检出和鉴定营养缺陷型。

1.取新活化枯草芽孢杆菌制备菌悬液，再用紫外线照射处理。

下列关于将诱变后存活的个体培养，淘汰野生型菌株的做法和原理，正确的是（多选）
培养在含有青霉素的基本培养基中，淘汰野生型菌株，保留缺陷型菌株
培养在含有青霉素的补充培养基中，淘汰野生型菌株，保留缺陷型菌株
完全培养基中青霉素可以杀死野生型菌株，缺陷型菌株得以生存
补充培养基中缺陷型菌株可以生存，野生型菌株不能生存
基本培养基中野生型可以生长繁殖，青霉素将其杀死
基本培养基中缺陷型不可以生长繁殖，青霉素不能将其杀死
2.在培养皿倒上一层不含菌的基本培养基，待冷凝后加上一层含菌的基本培养基，其后再浇上一层不含菌的基本培养基。

经培养后出现菌落，在皿底将菌落标记为A1、A2…，然后在其上再倒一薄层完全培养基，再培养，出现新的菌落，在皿底标记为B1、B2…，则A 菌落与B菌落分别较可能是_______________、_______________（均选填野生型/突变型）。

3.将待测菌落处理后涂布于某培养基平板上培养，用灭菌牙签逐个挑取待测菌，先后点接于A培养基和B培养基平板上。

前后位置及号码相对应。

培养后观察。

见图一。

为检出营养缺陷型，A、B培养基应分别为__________培养基、__________培养基。

菌落（）为营养缺陷型。

4.为鉴定上步检出的营养缺陷型是哪种营养缺陷型，将待测菌种悬液涂于图二含有基本培养基的培养皿中，培养皿背面划线标注C、D、E三区。

C、D、E为三滤纸片，分别浸有氨基酸混合液、维生素混合液和碱基混合液。

培养后观察。

当观察到________________________现象，说明是该营养缺陷型。

图二培养基也可称为_________培养基。

5.如检测菌为碱基类营养缺陷型，要进一步鉴定是哪种碱基营养缺陷型，可同图二方法加浸该营养物质的滤纸片，如加浸________________的滤纸片。

【答案】1、A E F
21．（2014届上海市吴淞中学高三上期第二次月考生物卷）（12分）微生物的抗性突变是自发产生的？还是与相应的环境因素有关？有人设计下列实验，以研究探讨该问题。

实验选用对链霉素敏感的大肠杆菌K12。

培养基3、7、11中含有链霉素，其它培养基中不含链霉素。

请据实验回答：
（1）将原始对链霉素敏感大肠杆菌K12菌种涂布在培养皿1的表面培养，接着通过右图“印章”将培养皿1中的菌群“印”在培养皿2、3上培养。

“印章”位置保持不变。

培养皿2、3根据其功能，分别称为培养基、培养基。

“印章”使用前需作
处理。

（2）培养基2中的菌落是，培养基3中的菌落是。