一种新的大鼠脊髓半离断损伤模型
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一种新的大鼠脊髓半离断损伤模型
【摘要】目的:探讨一种对机体影响较小、复制性良好的大鼠脊髓损伤模型,为后期药物及干细胞干预脊髓损伤后修复提供条件。方法:采用改良注射针头连接注射器作为损伤工具,在不打开脊髓腔的前提下沿脊椎棘突左侧垂直插入脊髓,造成大鼠腰髓一侧离断性损伤。除观察动物的一半行为学改变外,并对脊髓损伤后对大鼠的感觉功能(热痛反应)、运动功能(抓力测试)变化进行定时观测,以确定模型复制成功。结果:大鼠麻醉苏醒后即刻出现一侧后肢瘫痪、拖地行走,但无排尿及排便失禁,动物一般状态良好,后期未见合并感染,表明动物模型复制成功。结论:用自制的注射器针头造成的脊髓损伤模型操作简便、损伤较小、重复好,并且因与其折射相连,可在造模同时局部给予药物或试剂进行干预,为探索脊髓损伤再生困难的分子机制提供了实验基础。
【关键词】SD大鼠;脊髓损伤;脊髓半离断术
【Abstract】Objective:To investigate a lateral spinal cord injury model with less trauma and better replication.The model would be usefull for the study of various new medicines or stem cell therapy on spinal cord injury.Method:A modified
self-made needle was used to insert into lumbar spinal cord of SD rats without opening the cavum medullare,the lateral spinal cord injury was established.The grasping ability (movement function)and sensory function by temprature of hind-limbs were measured and compared with contralateral side at different time points after injury for insure the model was successfully.Result:It showed that lateral spinal cord injury model of rats appeared obvious lateral paralysis ,but without incontinence of urine and defecation. Also none of them had infection locally or systemically. The model was successfully.Conclusion:The spinal injure model made by
self-made modified needle insertion into SD rats lumbar spinal cord is easy to handle ,repeat,and induce obvious lateral paralysis without severe complications.Due to its advantage of connecting,some medicines or stem cells could be injected conveniently at the same time while surgery processed,then provides an experimental basis to explore the molecular mechanism of spinal cord injury regeneration difficulty.
【Key words】Sprague Dawley rat;Spinal cord injury;Spinal lateral amputation
First-author’s address:Shanxi Medical University,Taiyuan 030001,China
doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2015.07.005
脊髓损伤(Spinal Cord Injury,SCI)是指由于各种严重创伤直接或间接导致的脊髓损伤[1]。根据损伤的部位及受累神经不同,其临床表现不完全相同,多数患者出现脊髓损伤相应节段以下的各种运动、感觉和括约肌难以恢复的功能障碍。通常脊髓损伤的程度和临床表现取决于原发性损伤的部位和性质,大多数患者伴有程度不等的肢体瘫痪,因此SCI 是一种致残率很高的临床病症。由于其本身的解剖结构特征,脊髓损伤后很难再生修复,因此,寻找能够刺激损伤脊髓神经组织再生修复的新药制剂及其探索脊髓损伤难以再
生的分子机制是临床及科研领域的重要任务之一。随着社会各行业的快速发展,脊髓损伤的发病率也随之增加。因此,对脊髓损伤的研究与关注仍是目前的热点课题[2]。
脊髓损伤的动物模型是进行脊髓损伤与修复研究的必
要基础,根据相关文献报道,脊髓损伤的模型有很多种,譬如:(1)挫伤性SCI(重力堕落性);(2)切割或吸除型SCI;(3)脊髓压迫性SCI模型;(4)光化学诱导性SCI模型;(5)牵拉性SCI模型等。然而,目前大多数SCI模型均存在有很多弊端。因此本实验旨在设计一种新型的大鼠脊髓损伤的模型,使其具有较高的稳定性和可复制性,成为今后探讨某些制剂对脊髓损伤的长期影响的动物模型[3]。
1 资料与方法
1.1 一般资料选取健康SD大鼠6只,体重180~200 g,正常饲料饲养,动物使用及操作按照本校相关规则执行。1.2 实验器械手术刀片、持针钳、蚊氏钳、血管钳、手术镊、组织剪、缝针。
1.3 方法
1.3.1 SCI模型自制改良1 mL注射器针头制备方法模型制作过程需要两个注射器针头,首先将其中一个注射器的针头在石板上磨平并消毒,见图1a;将另一个注射器针头用持针器向着针头斜面背侧弯曲90°,被弯曲的针头长度为0.3 cm,见图1b。
1.3.2 SCI模型制备(1)麻醉:采用无菌1%戊巴比妥钠注射液腹腔注射,0.4 mL/100 g BW。(2)大鼠采用俯卧位放置手术平台上,剃去背部毛发,并用碘酊消毒皮肤。(3)确定T10~T12位置:SD大鼠腰段脊椎棘突突出且斜向尾端,而胸段棘突则略呈直角状向背侧突出,因此,L1与T13棘突间有一个较大的裂隙,以此来判断T9~T12的位置[4]。确定好位置后沿脊柱正中线、T9~T12部位切开背部皮肤,约2~3 cm,分离脊柱表面的肌肉和筋膜,暴露T9~T12棘突和椎板。随后,用组织剪和蚊氏钳将T9~T10棘突左侧的肌肉和韧带剥离彻底暴露T9~T10的棘突和横突,确定T9~T10间隙。(4)将磨平的1 mL注射器针头(图1a)从T10和T9间隙、紧靠棘突左侧垂直插入脊髓腔并进入脊髓,同