调查研究鸡胆汁有效成分Tau和CA的解热镇痛作用研究

调查研究
鸡胆汁有效成分T au和CA的解热镇痛作用研究李培锋1,关　红1,白音吉日嘎拉1,斯　琴2,赵　珍13
(1.内蒙古农业大学动物科学与医学学院,内蒙古呼和浩特　010018;2.内蒙古兽药监察所)
摘　要:　采用内毒素致热法和异性蛋白致热法研究了鸡胆汁有效成分牛磺酸(T au)和胆酸(CA)的解热镇痛作用。

结果显示,低剂量T au解热作用不显著;高剂量T au分别对内毒素和蛋白胨所致体温升高1h和3h有显著解热作用。

CA对内毒素所致发热体温无显著影响;高剂量CA对蛋白胨所致发热1～3h有显著解热作用。

采用热板法和扭体法证实T au和CA对热刺激和化学刺激引起的小鼠疼痛均无显著影响。

关键词:　鸡胆汁有效成分;牛磺酸;胆酸;解热作用;镇痛作用
中图分类号:S853.74 文献标识码:A 文章编号:1000-6354(2003)02-0003-03
牛磺酸(T au rine,T au)和胆酸(Cho lic acid,CA)是多种动物胆汁和牛黄等中药的组成成分之一。

牛磺酸与胆甾酸结合形成胆汁酸存在于胆汁中,以游离形式存在于脑、心脏、肝脏、肾脏、血液、肾上腺、垂体等组织中,且浓度较高,是一种结构简单的含硫氨基酸,其半衰期较短,约为15m in,无毒1。

并且具有广泛而特殊的药理作用,如抗炎、镇痛、解热、抗惊、解毒等作用2,3。

据报道胆酸盐和胆酸具有抗炎、解热、抗菌、抗病毒等作用4。

本课题组在牛黄和鸡胆汁药理作用研究的基础上5进行本实验,旨在探明鸡胆汁的药理作用与有效成分间是否存在相关性,T au和CA是否为鸡胆汁解热、镇痛作用的物质基础。

1　实验材料
1.1　动物
清洁级纯昆明种小白鼠,体重为(1810±210)g,雌性;清洁级W istar大白鼠,体重(20010±2010)g,雌雄各半,均由内蒙古大学实验动物研究中心提供。

1.2　药品与试剂
牛磺酸(T au)和胆酸(CA)均由本实验室从鸡胆汁中提取和纯化,纯度分别为9918%和9810%。

盐酸吗啡注射液,沈阳第一制药厂,批号:930508;醋酸,呼和浩特化学试剂厂,批号:881001;安痛定注射液,呼和浩特制药厂,批号:840831;细菌内毒素,中国药品生物制品检定所,批号:9801;蛋白胨,DXO I D L I M IT ED EN GLAND,批号:15099。

1.3　仪器与设备
YSD—4型药理生理实验多用仪,蚌埠医学院、蚌埠无线电二厂生产;1712型电子天平,西德sarto riu s。

1.4　数据处理
实验结果用X±SD来表示,两样本比较用t检验。

2　实验方法及结果
2.1　T au和CA的解热作用
2.1.1　对内毒素所致大鼠发热的影响　采用内毒素致热法6。

取大鼠36只,随机分成6组(n=6),在室温(19±115)℃的条件下,测定各大鼠直肠温度两次,取其平均值作为给药前大鼠的基础体温值。

第1组为对照组,按1010m l kg 蒸馏水灌胃。

第2组为低剂量T au组,按015g kg灌胃,第3组为高剂量T au组,按110g kg灌胃,第4组为低剂量CA组,按01125g kg灌胃,第5组为高剂量CA组,按0125g kg灌胃,第6组为阳性对照组,按110m l kg肌肉注射安痛定一次。

1～5组连续给药3d,1次 d,各组动物末次给药后1h按75Λg kg腹腔注射细菌内毒素致热,于致热后1h、5h、7h、24h分别测体温1次。

结果见表1及图1。

表1　T au和CA对内毒素所致大鼠发热的影响
组别　致热前体温
致热后不同时间的体温变化
1h　3h　5h　7h 24h　
138.03±0.16338.45±0.2663338.55±0.1763338.65±0.1513338.6±0.2363338.35±0.372 238.30±0.22838.07±0.53138.683±0.24838.683±0.19438.37±0.38837.83±0.45 338.02±0.27138.02±0.365△38.55±0.36138.367±0.30138.42±0.14738.07±0.528 438.10±0.32838.30±0.25238.467±0.36638.50±0.34638.50±0.28238.0±0.228 538.25±0.13738.67±0.08138.633±0.0838.483±0.19438.667±0.08138.0±0.126 638.20±0.32237.43±0.413△△37.98±0.325△△38.03±0.242△△38.10±0.236△△38.83±0.103△
注:33表示与给药前相比,P<0.01,差异极显著;△表示与对照组相比,P<0.05,差异显著;△△表示与对照组相比P<0.01,差异极显著。

收稿日期:2002-10-14
项目来源:国家自然科学基金资助项目(39660084)
作者简介:李培锋(1955-),男,硕士,教授,主要从事兽医药理学与毒理学研究
结果表明,高剂量T au对内毒素致发热l h内有显著的解热作用;而低剂量的T au和CA对细菌内毒素所致发热无显著影响。

2.1.2　对蛋白胨所致大鼠发热的影响　采用异性蛋白致热
3
2003年第2期
法6。

动物分组及给药剂量、给药途径同21111,末次给药后l h 各组大鼠均肌肉注射10%蛋白胨(10g kg )致热,其结
果见表2及图2。

2.2　T au 和CA 的镇痛作用
表2　T au 和CA 对蛋白胨所致大鼠发热的影响 ℃
组别
致热前体温
致热后不同时间的体温变化
1h
3h 5h 7h 24h 138.28±0.54138.41±0.26938.98±0.296339.03±0.354338.73±0.43338.05±0.311238.11±0.32838.70±0.31638.70±0.31638.77±0.41638.32±0.34438.23±0.565338.42±0.28238.23±0.36938.64±0.250△38.64±0.25038.49±0.31337.97±0.228438.25±0.18737.76±0.150△△38.98±0.31838.92±0.27138.63±0.32038.17±0.206538.18±0.24037.77±0.150△△38.55±0.228△38.77±0.21838.65±0.25838.10±0.2616
38.25±0.184
37.43±0.273△△
38.07±0.206△△
38.50±0.365△
38.45±0.408
38.37±0.242
注:3表示与给药前比,P <0.05,差异显著;△表示与对照组比,P <0.05,差异显著;△△表示与对照组比,P <0.01,差异极显著。

　图1　T au 和CA 对内毒素所致大鼠发热体温影响曲线 图2　T au 和CA 对蛋白胨所致大鼠发热体温影响曲线
结果表明,高剂量T au 对蛋白胨所致大鼠发热3h 有显著的解热作用,而胆酸对蛋白胨所致大鼠发热1～3h 有显著的解热作用。

2.2.1　对热刺激引起小鼠疼痛的影响　采用热板法6。

取
小鼠72只,随机分成6组(n =12)。

第1～5组分组、给药剂量、给药途径同21111,第6组为阳性对照组,按0101g kg 肌肉注射盐酸吗啡。

在室温(19±015)℃的条件下,于55℃热板上测定小鼠正常痛阈值两次(以小鼠舔后足为指标),取平均值作为给药前小鼠痛阈值(S )。

1～5组连续给药3d ,
1次 d ,第6组第3天给药一次,各组动物末次给药后1h 以
给药前同样刺激方式和强度再测一次,所测痛阈值为给药后痛阈值,并按下式计算痛阈提高百分率(%),结果见表3。

痛阈提高百分率(%)=
给药后痛阈值-给药前痛阈值
给药前痛阈值
×100%
表3　T au 和CA 对热刺激引起小鼠疼痛的影响
组别
动物数 只
剂量 g ・kg -1
痛阈值 S 给药前
给药后
痛阈提高
率 %
11210.0016.52±3.326
16.41±3.238
-0.692120.5014.78±3.13018.97±4.96328.403121.0016.26±3.19019.21±4.57018.104120.12515.90±2.95017.34±3.1909.005120.2517.53±2.74020.74±8.01018.206
12
0.01
19.82±3.121
>60.00
202.64
注:3表示与给药前比,P <0.05,差异显著。

结果表明,低剂量T au 可使小鼠痛阈显著提高,而高剂量T au 和CA 对热刺激引起的小鼠疼痛影响不显著。

4
中兽医医药杂志　J T CVM
2.2.2　对化学刺激引起小鼠疼痛的影响　采用扭体法6。

分组、给药剂量、给药途径同21211。

末次给药后l h ,各鼠腹腔注射0165%醋酸012m l 致痛,记录10m in 内各鼠的扭体次数,结果见表4。

表4　T au 和CA 对化学刺激引起小鼠疼痛的影响
组别
动物数 只
剂量 g ・kg -1
扭体次数 10m in
11010.014.56±4.4472100.514.22±8.9413101.014.78±5.6964100.12516.67±5.005100.2515.80±6.125
6
10
0.01
结果表明,T au 和CA 对化学刺激引起的小鼠的疼痛无显著影响。

3　小结与讨论
3.1　T au 和CA 为鸡胆汁中的主要有效成分,在鸡胆汁中
含量较高,按本实验室的提取分离方法测得其含量分别为:
10.011g l 和4.987g l ,纯度分别为9918%和9810%。

解热实验结果显示,鸡胆汁有效成分T au 对细菌内毒素和蛋白胨所致的大鼠发热在高剂量时有显著的解热作用,但由于其T 1 2较短,因此解热作用持续时间也较短,维持解热作用在1～3h 。

同时本实验证明T au 在低剂量时其解热作用不显著。

胆酸对内毒素所致大鼠发热无显著影响,而对蛋白胨所致大鼠发热1～3h 均有显著的抑制作用。

据报道4
,胆酸钙对大白鼠正常体温无影响,但对2,4—二硝基苯酚所致大白鼠发热体温有降低作用。

解热实验结果提示,T au 对感染和非感染性发热的初期均有显著的解热作用,而胆酸仅对非感染性发热具有显著的抑制作用。

3.2　镇痛实验结果显示,鸡胆汁有效成分T au 对热刺激所
致小鼠疼痛有显著的抑制作用,与有关报道相一致3。

T au 对醋酸所致小鼠疼痛无显著影响,因此表明T au 不适合用于持续性钝痛。

热板法适合评价中枢性镇痛药,而T au 在脑细胞内含量较高,并对中枢神经元有普遍强烈的抑制作用。

因此提示T au 所呈现的镇痛作用为中枢性的,对锐性一过性疼痛有效。

胆酸无论对热刺激还是化学刺激所致的小鼠疼痛均无显著影响。

3.3　在今后有关鸡胆汁有效成分的药效学研究中,应进一
步探明T au 和CA 的解热、镇痛作用机理,以揭示鸡胆汁的药理作用与有效成分之间的关系及有效成分的作用特点及其之间的相关性。

参考文献
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研究〔C 〕1内蒙古农业大学硕士学位论文,2001〔2〕　岳旺,张士善1牛磺酸的药理研究进展〔J 〕
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1中兽医医药杂志,2001,2(20):3～6
3　内蒙古农业大学2002届动物医学专业本科毕业生
Stud ies on an tipyretic and ana lgesic effects of taur i ne and chol ic ac id i n m ice and ra ts
L i Peifeng ,Guan Hong ,Baiyin jirigala
(Co llege of A n i m al Science and M edicine ,Inner M ongo lia A gricu ltu ral U n iversity ,H uhho t ,Inner M ongo lia ,010018,Ch ina )
Abstract :A n ti pyretic and analgesic effects of tau rine (T au )and cho lic acid (CA )as effective componen ts of ch icken b ile w ere studied .Endo tox in pyretogen ic and heterogeneou s p ro tein pyretogen ic m ethods w ere developed fo r determ inati on of an 2ti pyretic effects of tau rine and cho lic acid .Ho t p late and chem ical sti m u lating m ethods w ere u sed fo r studying on analgesic ef 2fects of tau rine and cho lic acid .T he resu lts show ed that low do sage of T au can’t sign ifican tly affect the fevered temperatu re ,and h igh do sage of T au can sign ifican tly decrease the fevered temperatu re induced by endo tox in and heterogeneou s p ro tein fo r 3h .CA had no t effect on the fevered temperatu re induced by endo tox in .A lso it w as p roved that h igh do sage of CA can sig 2n ifican tly decrease the fevered temperatu re cau sed by p ro tein fo r 3h .T au and CA can’t inh ib it the pain cau sed by ho t and chem ical sti m u lati on .
Key words :tau rine ;cho lic acid ;an ti pyretic and an lagesic effects
5
2003年第2期。