动物组织和细胞培养技术
第2节 动物细胞培养技术
Ⅳ、大规模培养技术 悬液培养,使用微球载体 在液体培养体系中加入一定量的微球载 体,让培养细胞贴壁在载体上。待细胞培养
到一定量时再将细胞消化下来转入转代培养。
3)无血清培养基 加入适宜的促细胞生长因子,保证细胞的 良好生长. 此外,动物细胞培养还必需一些溶液.如 ①平衡盐水:维持渗透压;调控酸/碱平衡 ②PH调整液:3.7%/5.6%/7.4%NaCO3、HEPES ③0.02%EDTA溶液:对细胞进行非酶性解离 ④抗生素:防止微生物污染 如青-链霉素、卡那霉素等
传代培养技术过程 注意加Hanks液冲洗细胞时,动作要轻, 以免把已松动的细胞冲掉流失,如用胰蛋白 酶液单独消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用 Hanks液冲洗,直接加入培养液。 5. 制备细胞悬液:用吸管吸取营养液轻轻反 复吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离。 6. 计数后,分瓶置温箱中培养。
原 代 培 养 传 代 培 养
(四)体外细胞生长增殖过程
原代培养期 细胞活跃,分裂但不旺盛 传代培养期 细胞增殖旺盛,可10-50次增殖 衰退期 细胞基本不增殖,并开始衰退凋亡
(五)培养方法
1)悬滴培养法:1907年哈里森创立。 2)旋转管培养法:1933-1934盖尔和刘易斯建立 3) 灌注小室培养法:1912年伯罗设计 4) 培养瓶培养法 5) 培养板培养法
需要多种氨基酸,维生素,辅酶,核酸, 嘌呤,嘧啶,激素和生长因子,其中多种成分 可以由血清提供。
动物细胞与组织培养技术
2、原代培养(Primary Culture):亦称初代培养,指直接从
机体取出的细胞或组织进行培养的过程。 3.继代培养( Secondary Culture ):亦称传代培 养,从原代培养的细胞继续转接培养称继代培养. 4、细胞系(cell line):由原代细胞培养后经初步纯 化,获得的以一种细胞为主、能在体外长期生存的 不均一的细胞群体,一般为有限细胞系。 5、细胞株(cell strain):细胞系经过克隆或其他方 法而得的单一类型的细胞群体。
3、 气体
气体:需要O2、CO2 (95%空气、5% CO2) 气体是哺乳动物细胞培养生存必需条件之一,所需气体主要
有氧气和二氧化碳.氧气参与三羧酸循环,产生供给细胞生长
增殖的能量和合成细胞生长所需用的各种成分.开放培养时 一般把细胞置于95%空气加5%二氧化碳混合气体环境中.
二氧化碳既是细胞代谢产物,也是细胞生长繁殖所需成分,它
培养物中发现有自发的融合细胞。
1962年,冈田善雄又发现了已灭活的仙台病毒可
以诱发体内艾氏腹水瘤细胞和非恶性细胞融合。 且融合细胞染色体丢失,恶性特征受到抑制。
四、动物细胞的体外培养一般条件
1、恒定的温度:37 ℃
维持培养细胞旺盛生长,必须有恒定适宜的温度。人体细胞培养的标 准温度为36.5℃±0.5℃,偏离这一温度范围,细胞的正常代谢会受到影 响,甚至死亡。 培养细胞对低温的耐受力较对高温强,温度上升不超过39℃时,细 胞代谢与温度成正比; 人体细胞在39-40℃1小时,即能受到一定损伤,但仍有可能恢复; 在40-41℃1小时,细胞会普遍受到损伤,仅小半数有可能恢复; 41-42℃1小时,细胞受到严重损伤,大部分细胞死亡,个别细胞仍有恢 复可能; 当温度在43℃以上1小时,细胞全部死亡。低温下会使细胞代谢速率降 低
组织和细胞培养技术
组织和细胞培养技术
引言:
组织和细胞培养技术是生物科学领域中的一项重要技术,它可以在体外条件下培养和繁殖各种组织和细胞。这项技术的出现,不仅为生物学研究提供了便利,也在医学、农业等领域起到了重要作用。本文将从组织培养和细胞培养两个方面介绍这项技术的原理、应用以及未来发展方向。
一、组织培养技术
组织培养技术是指将植物或动物的组织切割并在适当的培养基上进行培养,使其继续生长和繁殖的过程。其基本原理是通过提供适宜的培养基和条件,提供细胞分裂所需的养分和环境,使组织细胞在体外不断生长和分化。
在组织培养技术中,培养基的配方是关键。培养基通常由无机盐、有机物、植物激素和维生素等组成。无机盐提供细胞所需的微量元素和离子,有机物为细胞提供能量和碳源,植物激素调节细胞的生长和分化,维生素则是细胞代谢所必需的。通过调整这些成分的比例和浓度,可以促进组织细胞的生长和分化。
组织培养技术在植物学研究中有着广泛的应用。例如,通过组织培养技术,可以实现无性繁殖,即通过分离植物体的一部分组织并在培养基上进行培养,最终得到与母体完全相同的新植株。此外,还
可以通过组织培养技术研究植物的生长发育过程、细胞分化和基因表达等。
二、细胞培养技术
细胞培养技术是指将动植物的细胞分离并在培养基中进行培养,使其在体外条件下继续生长和分裂的过程。与组织培养技术相比,细胞培养技术更为广泛,可以培养各种类型的细胞,包括动物细胞、植物细胞和微生物细胞等。
细胞培养技术的基本原理是提供适宜的培养基和条件,使细胞在体外环境下获得生长和分裂所需的养分和环境。培养基的配方与组织培养技术类似,但通常会根据不同类型的细胞进行调整。细胞培养技术还需要控制培养条件,如温度、湿度和气体含量等,以提供最适宜的生长环境。
组织培养技术在动物细胞培养中的应用
组织培养技术在动物细胞培养中的应用
动物细胞培养作为生物技术和医疗领域中的一种重要手段,已经被广泛应用。
但是,动物细胞培养过程中,细胞需要营养物质、生长因子和适当的生长环境,同时还需要对细胞进行传代和扩增。因此,在动物细胞培养中,组织培养技术的应用至关重要。
组织培养技术是指从动物或植物组织中分离单一细胞或细胞某种类型,通过体
外培养,使其不断增殖,重建起细胞或组织。组织培养技术最初是为了研究组织和发育而发展起来的。随着时间的推移,组织培养技术已经广泛应用于生命科学中的各个方面。
在动物细胞培养中,组织培养技术的应用是多方面的。首先,组织培养技术可
用于单一细胞分离和纯化。在动物细胞的培养中,不同类型的细胞相互混合,难以选择特定类型的细胞。通过组织培养技术,可以从细胞混合物中分离出单一类型的细胞,用于后续的研究。其次,组织培养技术可用于传代和扩增细胞。通过组织培养技术,可以使一组细胞不断增殖,从而保证所需细胞数量的充足性。而且,组织培养技术也可以用于细胞冻存,以备以后使用。
在组织培养技术的应用中,细胞培养基也是至关重要的。细胞培养基是一种含
有营养物质和生长因子的液体或半固体培养介质。细胞培养基的配制是根据不同类型的细胞所需的营养物质和生长因子来确定的。细胞培养基的分类主要包括有血清培养基和无血清培养基两种。血清培养基中含有胎牛血清,可以提供细胞所需的营养物质和生长因子,但同时也有可能引入病毒和细菌等微生物,会对培养的细胞造成影响。无血清培养基中不含血清,使用风险更小,但是其营养成分比较简单,价格昂贵。
动物细胞培养技术
动物细胞培养技术
动物细胞培养技术是生物学领域中的一项重要技术,它可以帮助科
学家们研究动物细胞的结构、功能和生理过程。通过培养动物细胞,
科学家可以模拟生物体内的生理环境,从而更好地理解细胞的生物学
特性。本文将介绍动物细胞培养的基本原理和常用的培养技术。
一、动物细胞培养的基本原理
动物细胞培养是指将动物体内的细胞取出并在体外特定的培养基中
进行培养的过程。培养基是一种模拟生物体内环境的营养液,它提供
了细胞所需的必要营养物质和生长因子。在培养基中,细胞可以获得
适当的营养和生长条件,从而保持其生物学特性并进行增殖。
动物细胞培养的基本原理包括以下几点:
1. 细胞来源:细胞可以来源于动物组织、器官或体液中,常用的细
胞来源包括胎儿组织、胚胎组织、肿瘤组织等。
2. 细胞分离:细胞从组织中分离的方法通常包括机械分离、化学分
离和酶解分离。分离后的细胞可通过离心等方式得到单个的细胞悬液。
3. 培养基选择:根据细胞的特性和要求,选择合适的培养基。培养
基可以分为无血清培养基和含血清培养基,无血清培养基常用于细胞
实验室中。
4. 细胞培养条件:通过调整培养温度、湿度、pH值、氧气含量等
条件,提供合适的环境促进细胞的生长和增殖。
5. 细胞传代:当细胞达到一定密度时,需要进行细胞传代以保持其活力。传代的方法通常是将细胞分散至新的培养容器中,以维持细胞的适宜密度。
二、常用的1. 无血清培养技术:无血清培养基是一种不含胎牛血清的培养基,通过添加人工合成的生长因子和营养物质来满足细胞的生长需求。无血清培养技术避免了胎牛血清中含有的未知因子对实验结果的干扰,提高了实验的可重复性。
动物细胞培养
动物细胞培养
动物细胞培养是一种重要的生物技术手段,广泛应用于医药、生物学研究、食
品工业等领域。通过细胞培养,可以获取大量同质的细胞群体,为疾病治疗、新药研发提供重要的支持。
动物细胞培养的原理
动物细胞培养是将动物组织或细胞在人工培养基中进行维持、增殖、传代等过程。培养基通常包括营养物质、生长因子、激素等成分,提供细胞生长所需的营养和环境。
动物细胞培养的步骤
1.细胞来源:从动物体内收集组织样本,获得原代细胞。
2.细胞分离:通过消化酶等手段将组织分离成单个细胞。
3.传代培养:将分离的细胞在培养基中培养,定期传代以增殖细胞数
量。
4.检测与分析:对培养的细胞进行检测、分析,确保其健康状态。
动物细胞培养的应用
1.生物医学研究:细胞培养在癌症、遗传疾病等方面的研究中发挥重
要作用。
2.药物研发:通过细胞培养可以进行药物筛选、毒性测试等工作。
3.食品工业:利用细胞培养技术可以生产细胞培养肉等食品。
动物细胞培养的发展
随着生物技术的不断发展,动物细胞培养技术也在不断创新和提升。新的培养
基配方、生长因子的发现以及工程技术的应用,使得动物细胞培养在医学和生物学领域有着广阔的应用前景。
动物细胞培养作为一种重要的生物技术手段,将继续在各个领域发挥重要作用,为人类健康和科学研究进步做出贡献。
动物细胞培养技术的进展及应用
动物细胞培养技术的进展及应用动物细胞培养技术是一种生物医学研究中极为重要的技术,主要用于生产药品、细胞学、分子生物学和免疫学等领域的研究。自从细胞培养技术的出现,它的应用范围越来越广泛,也越来越深入,本文将为您介绍动物细胞培养技术的进展及应用。
一、动物细胞培养技术的研究进展
1. 细胞培养的基本原理
细胞培养的基本原理是利用体外条件来模拟体内环境,为细胞提供适宜的营养物和生理调节因子,使细胞在体外生长、分化、增殖。
2. 培养基的制备
培养基的制备是动物细胞培养技术中的关键步骤,它能够为细胞提供必需的营养物和生长因子,如氨基酸、维生素、激素等。目前,常用培养基包括麦克尼五十五培养基、迈格林五十三号培养基等。
3. 细胞培养的技术方法
细胞培养的技术方法主要有悬浮培养和附着培养两种方式。其中,悬浮培养常用于细胞生长阶段的初步生长,主要是用于细胞的扩增;附着培养主要用于细胞的育种。
4. 细胞分离技术
细胞分离技术将组织或器官中的细胞分离出来并对其进行分级培养。常用的细胞分离技术主要包括胰酶、碎草酸和牛血清等。
5. 细胞传代技术
细胞传代技术是指将已经生长到一定程度的细胞离心,将细胞培养上清液丢弃并重悬细胞,再一次培养出与上一代相同的数量和质量的细胞。其目的是为了维持细胞的正常生理状态和扩大培养规模。
二、动物细胞培养技术的应用方向
1. 生产药品
细胞培养技术的重要应用之一就是生产药品。细胞培养可以生产多种药品,如激素、抗体、血液制品等,与传统药品相比,细胞培养药品具有高纯度、低污染的优点。
2. 动物学研究
兽医病理学诊断技术
兽医病理学诊断技术
兽医病理学诊断技术是兽医学中非常重要的一环,它涉及到对动物疾病病因、发病机制、病理变化和疾病发展过程的研究。以下是一些常见的兽医病理学诊断技术:
1. 尸体剖检技术:这是兽医病理学中最基本的诊断技术之一,通过对动物尸体的剖解,观察其内部器官的形态、颜色、质地以及病理变化,以确定疾病的类型和严重程度。
2. 组织切片制作技术:组织切片是将病变组织或器官进行固定、包埋、切片和染色的过程,以便在显微镜下观察其结构和病理变化。
3. 显微镜检查技术:显微镜检查是通过显微镜观察组织切片或其他样本的方法,可以观察到细胞的形态、结构和病理变化,是诊断疾病的重要手段。
4. 生化检测技术:生化检测是对动物体内的生化物质进行检测,以了解其生理和病理状态。例如检测血液中的血糖、血脂、肝功、肾功等指标,以评估动物的健康状况。
5. 免疫学诊断技术:免疫学诊断是通过检测动物体内免疫系统的反应来诊断疾病的方法。例如检测抗体、抗原等,以确定疾病的类型和严重程度。
6. 分子生物学诊断技术:分子生物学诊断是通过检测动物体内的基因和蛋白质的表达情况,以了解疾病的病因和发病机制。例如检测基
因突变、表达谱分析等。
7. 细胞培养技术:细胞培养是将动物组织或细胞在体外进行培养的技术,可以用于研究疾病的发病机制和药物筛选等。
8. 动物实验技术:动物实验是通过实验动物来模拟人类或动物疾病的发病过程,以研究疾病的病因、发病机制和治疗方法。例如复制某种传染病的动物模型、药物疗效观察等。
这些诊断技术在兽医病理学中发挥着重要的作用,可以帮助兽医正确地诊断和治疗动物疾病,提高动物的健康水平和生产效益。
动物细胞与组织培养
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保证细胞顺利的 生长增殖
4、充足的氧气和适宜的酸碱度 O2和CO2(95%空气和5% CO2 )
动物细胞培养的原理
动物细胞培养的原理
动物细胞培养是一种在实验室中以适宜的条件下进行的,用来培养和繁殖动物细胞的技术。其原理主要基于以下几个方面:
1. 细胞来源:动物细胞培养通常使用胚胎组织或成体组织中的活细胞。这些细胞可以从动物体内获取,并经过适当的处理步骤,如组织切割或分离、消化酶处理等,来获得单个细胞。
2. 细胞培养基:培养基是提供细胞生长和繁殖所需的营养物质和环境的培养液。细胞培养基包含了多种有机和无机成分,如氨基酸、维生素、矿物质、葡萄糖、胎牛血清等。培养基的配方根据不同的细胞类型和应用目的进行调整。
3. 氧气和二氧化碳供应:在细胞培养过程中,细胞需要充足的氧气供应以进行呼吸作用。培养器内通常提供了一定的通气或气体交换系统,以保证细胞获得足够的氧气和排出二氧化碳等废气。
4. 温度和湿度控制:动物细胞生长需要适宜的温度和湿度条件。通常,细胞培养器内设有温度控制装置,可以保持恒定的温度(通常为37摄氏度)和湿度,以提供最适合细胞生长的环境。
5. 细胞传代和检测:一旦动物细胞开始生长并形成细胞集落,可以通过将细胞分离并转移到新的培养皿中来进行细胞传代。细胞生长状况可以通过显微镜观察和细胞计数等方法进行检测和评估。
通过以上原理,动物细胞培养可以提供在体外进行生物学、生化学和药理学研究的强有力工具,用于研究细胞的结构、功能、生物学特性和药物反应等方面。此外,动物细胞培养还可用于生产生物制剂、疫苗、抗体等生物药品的大规模生产。
动物细胞与组织培养技术
1952年.Gey建立了第一个人体细胞系,人体宫 颈癌Hela细胞系。
1960年,Barski等人在两种不同类型的细胞混合 培养物中发现有自发的融合细胞。
1962年,冈田善雄又发现了已灭活的仙台病毒可 以诱发体内艾氏腹水瘤细胞和非恶性细胞融合。 且融合细胞染色体丢失,恶性特征受到抑制。
含义:一是细胞之间相互接触,二是细胞与细胞外 基质结合。
单层附壁培养:指动物细胞培养中,大多细胞必 须附着在固体表面生长,当细胞布满表面后即停止 生长。
在体外按照培养细胞的形态不同,主要可分为以下几类:成纤 维细胞型、上皮型细胞、游走型细胞、多形型细胞
(1)成纤维细胞型: 本型细胞的形态似在体内生长的成纤维细胞;
成纤维细胞型
大鼠血管平滑肌细胞
成纤维型细胞
在培养中的细胞凡形态与成纤维细胞类似时, 皆可称之为成纤维细胞。本型细胞由形态与体内成 纤维细胞的形态相似而得名. 除真正的成纤维细胞 外,凡由中胚层间质起源的组织细胞常呈本类形态 生长。
人胚肺细胞在显微镜下呈现为典型的成纤维细胞型。
(2)上皮型细胞
体外培养的游走型细胞具有类似巨噬细胞 样的特征。主要是:单核巨噬细胞系统的 细胞,淋巴细胞,肿瘤细胞。
单核巨噬细胞
1、游走型细胞在支持物上分散生长,一般不连接成 片、形成群落; 2、细胞胞质常伸出伪足和突起。 3、生长位置不固定,呈游走和变形运动,速度快、 方向不规则。 4、细胞内易出现色暗的吞噬性颗粒。
动物细胞与组织培养
细胞融合一般是指用人工的方法,即利用电流或各种融合剂,把两个邻接的细胞界膜溶解掉, 使二个或二个以上的细胞合并成一个细胞
融合细胞的特征 (一)它具有接近双亲细胞的全套染色体组,含有四倍体或多倍体,但这种杂交细胞的染色体 组是不稳定的,尤其是种间杂交细胞更不稳定 (二)融合细胞的表现形式多种多样,一方面固然是由于制备融合细胞时可以按照人们的意志 组合使产生多样性,另一方面确实也是由于这种杂交细胞的遗传不稳定性引起的 (三)融合细胞中两个亲本具有遗传互补作用
为什么要对鼠源性单克隆抗体进行改造使之人源化,改造方法 原因:血清半衰期短,20h 抗原抗体结合力、亲和力不够 募集效应细胞产生副作用 HAMA 反应:8-10 天出现,20-30 天高峰, 加速单抗清除。 过敏休克 人源性单克隆抗体的制备 细胞工程单克隆抗体技术 1 人-鼠杂交瘤单克隆抗体----人脾细胞+鼠骨髓瘤细胞 2 人-人杂交瘤单克隆抗体----人脾细胞+人骨髓瘤细胞 3 EB 病毒转化-融合技术------利用 EB 病毒转化 B 淋巴细胞为永生细胞
失去原有组织结构和细胞形态 分化减弱或不显 细胞趋向单一化
培养细胞的分化 1.不适应 2.脱分化或去分化
动物细胞培养的技术
动物细胞培养的技术
动物细胞培养的技术
动物细胞培养是一种重要的生物技术,它可以用于研究细胞生物学、药物筛选、疾病模型构建等领域。本文将介绍动物细胞培养的基本原理、培养条件和常用技术。
一、动物细胞培养的基本原理
动物细胞培养是将动物体内的细胞分离出来,通过提供适当的培养
基和培养条件,使细胞在体外继续生长和繁殖的过程。培养基是一种
含有营养物质、生长因子和调节因子的液体或凝胶,能够提供细胞所
需的营养物质和环境。
二、动物细胞培养的培养条件
1. 培养基的选择:根据不同的细胞类型和研究目的,选择适合的培
养基。常用的培养基有DMEM、RPMI-1640等。
2. 温度和湿度:一般情况下,动物细胞培养的温度为37摄氏度,
湿度保持在95%以上。
3. CO2浓度:大多数动物细胞需要在含有5% CO2的培养箱中培养,以维持细胞内酸碱平衡。
4. 培养器具的消毒:培养器具必须经过高温高压灭菌处理,以防止
细菌和真菌的污染。
三、动物细胞培养的常用技术
1. 细胞的分离:将动物组织切碎,加入胰酶等消化酶,使细胞从组
织中分离出来。
2. 细胞的传代:当细胞达到一定密度时,需要将细胞进行传代,以
保持细胞的生长状态。传代时,将细胞从原来的培养瓶中取出,经过
消化和离心,将细胞重新分散到新的培养瓶中。
3. 细胞的冻存:为了长期保存细胞,可以将细胞冻存。冻存细胞前,需要添加冻存液,将细胞缓慢冷却至低温,然后存放在液氮中。
4. 细胞的检测:通过显微镜观察细胞的形态和数量,使用细胞计数
板进行细胞计数,以评估细胞的生长状态和纯度。
动物细胞培养技术的应用非常广泛。在药物研发中,可以通过培养
动物细胞培养技术介绍
培养试剂
培养基 血清 胰酶 磷酸盐缓冲液
细胞培养的设备和耗材
生物安全柜
生物安全柜:细胞培养的主要操作平台,中央区域是严格的无菌区域。 生物安全柜内有风道和循环空气高效过滤网,可以清洁空气保证无菌。
离心机
离心机:细胞培养时,通常使用离心机制备细胞悬液、调整细胞密度、洗涤和收集细胞。 一般常规配置4000rpm台式离心机;细胞离心常规选用80-100G离心力,因为离心力过大会损伤细胞。
此外Ca2+ 、 Mg2+ 和血清、蛋白质可降低胰酶的作用。
终止消化时,可用含有血清培养基。
磷酸缓冲盐溶液
PBS缓冲液( Phosphate Buffered Saline )在传代、冻存细胞的时候对 细胞进行冲洗,洗去培养基,便于胰酶消化。 PH值在7.2-7.4之间,是细胞最适合的PH值范围。 PBS可以维持最佳条件保证生物活性物质保持其最完整的特性。
细胞传代过程
试剂和生物安全柜的准 备
显微镜观察细胞密度 覆盖培养瓶底部的80%
细胞传代过程
移除培养基
用PBS清洗细胞
用PBS清洗细胞
细胞传代过程
移除PBS
加入0.25%的胰酶,消化细 胞
细胞传代过程
消化细胞时,让胰酶覆盖细 胞,放在培养箱中消化35min
显微镜观察是否消化完成
细胞传代过程
组织和细胞培养技术
第一章细胞培养的基本原理与技术
现代生物技术一般认为包括基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术和发酵工程技术,而这些技术的发展几乎都与细胞培养有密切关系,特别是在医药领域的发展,细胞培养更具有特殊的作用和价值。比如基因工程药物或疫苗在研究生产过程中很多是通过细胞培养来实现的。基因工程乙肝疫苗很多是以CHO细胞作为载体;细胞工程中更是离不细胞培养,杂交瘤单克隆抗体,完全是通过细胞培养来实现的,既使是现在飞速发展的基因工程抗体也离不开细胞培养。正在倍受重视的基因治疗、体细胞治疗也要经过细胞培养过程才能实现,发酵工程和酶工程有的也与细胞培养密切相关。总之,细胞培养在整个生物技术产业的发展中起到了很关键的核心作用。
第一节体外培养的概念
一、基本概念体外培养(in vitro culture),就是将活体结构成分或活的个体从体内或其寄生体内取出,放在类似于体内生存环境的体外环境中,让其生长和发育的方法。
组织培养:是指从生物体内取出活的组织(多指组织块)在体外进行培养的方法。
细胞培养:是指将活细胞(尤其是分散的细胞)在体外进行培养的方法。
器官培养:是指从生物体内取出的器官(一般是胚胎器官)、器官的一部分或器官原基在体外进行培养的方法。
二、体内、外细胞的差异和分化
1、差异:细胞离体后,失去了神经体液的调节和细胞间的相互影响,生活在缺乏动态平衡相对稳定环境中,日久天长,易发生如下变化:分化现象减弱;形态功能趋于单一化或生存一定时间后衰退死亡;或发生转化获得不死性,变成可无限生长的连续细胞系或恶性细胞系。因此,培养中的细胞可视为一种在特定的条件下的细胞群体,它们既保持着与体内细胞相同的基本结构和功能,也有一些不同于体内细胞的性状。实际上从细胞一旦被置于体外培养后,这种差异就开始发生了。
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享学课堂
动物细胞工程作为细胞 工程的重要组成部分,主 要依据细胞生物学和分子 生物学,根据人类的需要 ,一方面深入探索并改造 生物的遗传特性,另一方 面应用工程技术手段,大 量培养细胞。 用培养的人细胞构建的人 造皮肤
学习目标
简述动物细胞培养的过程、条件及应用。
情境设计
问题1:如何把动物组织分散成单个细胞进行培养? 问题2: 培养过程中保证无菌环境的措施是什么? 问题3:细胞为什么需要在CO2培养箱中培养? 问题4:什么是原代培养?
7.2~7.4
O2、CO2
葡萄糖、无机盐、氨 营养 基酸、维生素、核糖、 物质 嘌呤、嘧啶、激素和 生长因子等
【例3】下列有关动物细胞培养条件的叙述中, 正确的是( B ) A. 动物细胞培养时的培养基的定期更换,实现 了无菌条件 B. 动物细胞培养时的培养基是液体培养基,并 要加入血清 C. 动物细胞培养时温度和pH要适宜,保证细胞 全能性的表达 D. 动物细胞培养时要保证氧气供应,不能通二 氧化碳
一、进行动物细胞培养的必要性
1.什么是动物细胞与组织培养?
2. 动物细胞与组织培养的材料是什么?为什么 选取这些材料进行动物细胞与组织培养? 3.动物细胞与组织培养的原理是什么? 细胞增殖
二、动物细胞与组织培养
是指在体外模拟动物体内环境,将动物细胞或组 织在无菌、温度适宜和营养充足的条件下培养, 使其继续生长、增殖并维持原有结构和功能的技 术过程。
四、动物细胞培养技术的应用
动物细胞培养能够生产哪些生 物制品? 为疫苗生产、药物研制、肿瘤 防治提供全新手段。
【例4】下列有关动物细胞培养技术应用的 叙述,不正确的是( C ) A.通过动物细胞培养技术可以生产许多蛋 白质生物制品 B.培养动物细胞可以检测有毒物质 C.动物细胞培养可以获得动物的组织或器 官 D.培养正常或病变的细胞可用于生理、病 理、药理等方面研究
三、动物细胞培养的条件
1.动物细胞培养的环境条ห้องสมุดไป่ตู้是什么?
环境条件是无菌、无毒 的环境。
2.动物细胞培养的物质条件有哪些?
充足的营养供给、适宜的温度、 适宜的pH和气体环境。
天然培养基
培养基
合成培养基
动物血清、动物 组织提取液、鸡 胚汁等 人工合成成分+ 动物血清
温度
37℃
培 养 条 件
PH
气体
原代培养是指动物组 织消化后的初次培养。
过 原代培 程 养
传代培 养
形成细 胞系
传代培养是指贴满 瓶壁的细胞用胰蛋 白酶处理后分瓶继 续培养的过程。
细胞贴壁和接触抑制
细胞培养
胰蛋白酶 等处理
组织培养
【例2】下列有关动物细胞培养的过程的叙述 中,不正确的是( B) A. 在传代培养时,必须用胰蛋白酶处理附壁 生长的细胞,使之成为单细胞 B. 动物细胞培养的材料一般选择幼年动物的 细胞,因为幼年动物的细胞没有分化 C. 癌细胞不受“接触抑制”,这可能与它的 细胞表面发生变化有关 D. 传代培养的原因是培养瓶中的细胞密度过 大或代谢消耗引起营养枯竭
取材
动物胚胎或出生不久的 幼龄动物 细胞的增殖能力与供体 的年龄有关,幼龄动物 细胞增殖能力强,有丝 分裂旺盛,老龄动物则 相反。
【例1】下列对于动物细胞与组织培养的理解正确的 是( D ) A.培养液相当于人体的组织液只为细胞或组织提供 营养 B.培养的细胞与组织抵抗力强,不需要无菌条件 C.培养的细胞与组织能够进行细胞分裂和分化 D.动物细胞与组织能够维持原有的结构和功能
二、动物细胞培养的过程
1.进行动物细胞培养时为什么要把组织分散 成单个细胞?如何分散? 2.胰蛋白酶的作用是什么? 3.胰蛋白酶处理组织成为单个细胞的时间有 没有要求? 4.为什么不用胃蛋白酶处理? 5.动物组织培养与动物细胞培养的主要区别 是什么? 6.分散细胞在培养瓶中培养的特点是什么?
动物细胞培养的过程