柱前衍生-手性高效液相色谱法测定R-3-奎宁环醇的光学纯度

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手性试剂柱前衍生化高效液相色谱法测定α-苯乙胺的光学纯度

手性试剂柱前衍生化高效液相色谱法测定α-苯乙胺的光学纯度王金朝;曾苏;王丹华;胡功允【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2009(27)3【摘要】建立了一种简便的手性试剂柱前衍生化反相高效液相色谱测定α-苯乙胺光学纯度的方法.采用2,3,4,6-四-O-β-D-吡喃葡萄糖异氰酸酯(GITC)对α-苯乙胺进行衍生化,优化了衍生化反应参数;使用Agilent Zorbax C18色谱柱分离衍生化产物,流动相为甲醇-磷酸盐缓冲溶液(pH 3.0)(体积比为58∶42),流速1.0 mL/min,检测波长241 nm,柱温为30 ℃.实验结果表明,α-苯乙胺两个对映体的衍生化产物分离良好,在0.15～15.0 mg/L 范围内呈现良好的线性关系.方法的检出限为0.05 mg/L,定量限为0.15 mg/L,日内和日间精密度考察中测定值的相对标准偏差(RSD)均小于0.5% .建立的方法适用于α-苯乙胺的质量控制.【总页数】3页(P376-378)【作者】王金朝;曾苏;王丹华;胡功允【作者单位】浙江大学药学院,浙江,杭州,310058;浙江华海药业股份有限公司质量研究部,浙江,台州,317024;浙江大学药学院,浙江,杭州,310058;浙江华海药业股份有限公司质量研究部,浙江,台州,317024;浙江华海药业股份有限公司质量研究部,浙江,台州,317024【正文语种】中文【中图分类】O658【相关文献】1.柱前衍生化高效液相色谱法测定荞麦中D-手性肌醇含量的方法 [J], 胡俊君;仪鑫;胡红娟;何永吉;李红梅;宋金翠;李云龙2.新型荧光试剂柱前衍生化高效液相色谱荧光检测法测定醇类化合物 [J], 陈国防;尤进茂;张玉奎3.柱前衍生－手性高效液相色谱法测定 R－3－奎宁环醇的光学纯度 [J], 袁明辉;郑鸿声;王东武;谢爱芳4.柱前手性衍生化-HPLC法测定普瑞巴林的光学纯度 [J], 吴琼珠;陈润;乔善磊5.柱前衍生化高效液相色谱法测定乳酸的光学纯度 [J], 杨丹;徐旭;陈宇静;张林;姚长洪;宋航因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

手性色谱分析..

1手手性性高高效效液液相相色色谱谱法法**手手性性药药物物分分析析的的概概念念 **常常用用手手性性高高效效液液相相色色谱谱法法手手性性衍衍生生化化试试剂剂法法手手性性固固定定相相法法手手性性流流动动相相添添加加法法2手手性性的的概概念念：：一一种种镜镜像像反反射射的的对对称称性性3手性分子：组成相同但空间结构上互成镜像的分子，称之为对映异构体。

分子结构中含有不对称碳原子是最常见的手性结构。

根据对偏振光的作用不同可分为R、S体，两者的等量混合物称之为消旋体。

OH COOHHCH3OHCOOHHCH34Mirror Mirror手手性性异异构构体体在在药药理理学学效效应应上上的的差差异异 ● Pfeiffer 规则：● 对映异构体之间的生物活性存在着差异； ● 不同的对映体之间活性的差异是不同的；当手性药物的有效剂量越低，即药效强度越高时，则对映体之间的药理作用的差别越大。

外消旋体和其两种单一对映体是不同的3种实体！ 5对对映映体体与与生生物物大大分分子子的的三三点点作作用用c abdabd cαγβαβγ手性分子的a 、b 、c 三个基团与受体分子的活性作用点、、结合，是高活性对映体（优映体）。

手性分子的a 、b 、c 三个基团中只有a 和b 与受体分子的活性作用点和结合，是低活性对映体（劣映体）。

6在未研究清楚两种单一对映体之间的生物学差异时，以消旋体给药往往会影响药物质量，甚至会严重损害人体健康。

“反应停”(Thalidomide)作为人工合成药，当时投入使用时是两种对映体的混合物。

7反应停：五十年恩怨发展趋势：劣映体本身或其代谢物产生毒副作用，不再使用外消旋体。

外消旋体转换成单一对映体，不仅提高质量，还延长药物寿命。

如：氧氟沙星的左旋异构体活性更强，左旋氧氟沙星临床使用剂量是消旋体的一半。

10手性拆分（Chiral resolution）●对映体除了偏振光的偏转方向不同外，其它理化性质完全相同，因而分离难度大。

环糊精及其衍生物在手性药物分离分析中的应用

环糊精及其衍生物在手性药物分离分析中的应用祝芳【摘要】有近一半的药物具有手性但通常两种异构体并不具有相同的药理活性,有一些异构体甚至具有毒性,因此,采用将手性药物良好分离的分析方法进行质控对药品的质量控制具有重要意义.环糊精及其衍生物是手性药物分离分析中常用的手性添加剂和手性固定相,本文对近年来环糊精及其衍生物在高效液相、气相、毛细管电泳、质谱、超临界流体等方面的应用进行综述.【期刊名称】《药学实践杂志》【年(卷),期】2010(028)002【总页数】4页(P94-96,111)【关键词】环糊精;衍生物;手性药物;分离;分析【作者】祝芳【作者单位】解放军总医院第一附属医院,北京,100037【正文语种】中文【中图分类】R917手性药物使得平面结构相同的化合物在空间上互为镜像是指药物的分子结构中含有手性因素，不能重合。

同时，生物体系是一个复杂的手性体系，药物的作用是通过与体内大分子之间严格的手性识别和匹配实现的。

因此，手性药物的一对对映体在生物体内的药代，药效，毒性等方面存在着显著的差异[1]。

手性药物对应异构体的分离和测定是深入研究不同异构体各自生理药理作用及临床应用的基础，越来越引起人们的广泛关注。

目前色谱手性分离一般采用直接法和间接法两种[2]。

间接法是指对映异构体与一种光学纯的试剂反应生成非对映异构体，然后在非手性环境下分离，方法涉及样品的转化、分离等预处理过程，容易造成组分的消旋化和损失。

直接法是用手性固定相(CSP)或手性添加剂(CMPA)直接进行对映异构体的分离与测定，方法简单、快捷，可避免不必要的实验误差，在对映体的分离与测定中更受欢迎。

在直接法中，环糊精(CD)及其衍生物以独特的结构和性质，得到了广泛使用，本文就其在手性分离分析中应用进行综述。

环糊精(CD)是环形寡聚糖，通常由6～12个互为椅式构象手性D-(+)葡萄糖单元通过α-(1,4)-糖苷键连接而成。

商品化的环糊精有α-CD、β-CD、γ-CD，分别含有6个、7个、8个D-(+)葡萄糖单元。

柱前衍生高效液相色谱法测定四氢噻唑_2_硫酮_4_羧酸的光学纯度

不同反应时间取样进行 HPLC分析 , 0. 21 g甲苯作内标物 ,产品与内标物峰面积之比对时间作图 , 发现反应 2 h以上 ,这个比例不再改变。所以反应时间定为 2 h。
3 结果与讨论
3. 1 二极管阵列紫外检测器和在线旋光检测仪对 TTCA 衍生物检测在流动相为正己烷 ∶乙醇 ( 93 ∶7, V /V ) 、柱温为 35℃的 HPLC 条件下 , DNB 2Leucine手性柱对 TTCA
第 4期
余荔等 :柱前衍生高效液相色谱法测定四氢噻唑 222硫酮 242羧酸的光学纯度
5 47
定不同温度下 TTCA 衍生物在 DNB 2Leucine拆分情况 ,结果如图 3所示。温度对 TTCA 衍生物在手性固定相上的分离具有一定的影响。随着温度的降低 ,溶质在固定相和流动相之间传质速度变慢 ,两对映体保留时间延长 ,分离因子 α也增大。但是温度低时 ,保留时间较长 ,不适合于分析。所以 ,确定实验温度为 35℃。
1. 56 1. 49 1. 44 1. 37 1. 28 1. 15
正己烷 ∶异丙醇 Hexane∶isop ropanol
95 ∶5 90∶10 85∶15
13. 160 6. 651 3. 794
14. 776 7. 462 4. 220
1. 122 1. 123 1. 112
1. 32 1. 24 1. 09
衍生物对映体的拆分能达到基线分离。用二极管阵列紫外检测器进行检测时 ,两个对映体峰的相关度 (0. 9998)很高 ,说明这两个峰可能是一对对映体峰 (如图 1) 。在线旋光检测仪的检测结果证实这两个峰是对映体峰 (如图 2) 。
图 1 二极管阵列检测器对 TTCA衍生物的检测结果 Fig. 1 Chromatogram of 22thiothizaolidine242carboxylic acid ( TTCA ) derivative detected by photo2diode array de tec to r

手性高效液相色谱法

第16页/共27页
3.配基交换型手性添加剂
配基交换原理：
在流动相缓冲溶液中加入金属离子和配位体交换剂形成二元络合物，药物对映体再与其形成稳定性不同的三元络合物而达到手性分离。
常用的手性配合试剂：氨基酸及其衍生物如L-苯丙氨酸，L-脯氨酸等配位金属有Cu2+、
Zn2+、Ni2+、Cd2+等。
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应用实例
手性衍生化HPLC测定血浆中艾司洛尔及其代谢物对映体
色谱柱：Aglient Zorbax C18 （250mm×4.6mm，5μm）流动相：乙腈-0.02mol/L磷酸二氢钾缓冲盐（55:45，用磷酸调pH至4.5）流速：0.75 ml/min 检测波长：224nm 进样量：20μl 柱温：室温
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环糊精分类-根据空腔大小 α-环状糊精适合于分子量小的药物对映体分析 β-环糊精适合于多数对映体的位阻和电子特征 γ-环糊精适合于较大分子药物的对映体分析
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2.手性离子对色谱法
一类分离可解离对映体的离子对色谱法，已成功分离了β-氨基醇类、氨基醇类、胺类等对映体化合物。
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手性HPLC法
直接法和间接法异同点均以现代色谱分离技术为基础，引入手性
环境(不对称中心)，使药物对映体间呈现理化性质的差异而实现分离，不同的是间接法是将其引入分子内，而直接发引入分子间。
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手性衍生化试剂法
对映异构体与手性试剂反应，产生相应的非对映异构体
(R)
传统的拆分方法为非色谱法：如分步结晶法，具有很大的局限性，操作过程繁复、耗时，难于进行微量分离和
测定。大多采用色谱法：

柱前衍生化高效液相色谱法测定普瑞巴林中的光学异构体-概述说明以及解释

柱前衍生化高效液相色谱法测定普瑞巴林中的光学异构体-概述说明以及解释1.引言1.1 概述本文旨在探讨柱前衍生化高效液相色谱法在普瑞巴林中光学异构体的测定中的应用。

普瑞巴林是一种常用的药物成分，广泛用于疼痛和炎症等疾病的治疗。

然而，普瑞巴林存在光学异构体的问题，这意味着药物中可能存在两种或多种形式的分子结构。

由于光学异构体的生物活性和药效可能存在差异，因此准确快速地测定普瑞巴林中的光学异构体是非常重要的。

传统的光学异构体的分离方法如手性高效液相色谱法（Chiral-HPLC）对于普瑞巴林的测定具有一定的局限性，如分离时间长、操作复杂等。

因此，本文引入基于柱前衍生化的高效液相色谱法，在普瑞巴林的光学异构体分析中具有很大的潜力。

柱前衍生化是一种将分析物与特定试剂在分离柱之前进行反应，形成稳定的荧光衍生物的方法。

该方法能够提高色谱分离的选择性和灵敏度，并且具有操作简单、分析速度快的优点。

本文将详细介绍柱前衍生化高效液相色谱法的原理和操作步骤。

通过对普瑞巴林样品的预处理和柱前衍生化反应，成功实现了对普瑞巴林中光学异构体的分离和测定。

同时，本文还将对柱前衍生化高效液相色谱法在普瑞巴林中的应用前景进行探讨，总结其在药物分析领域的重要性和潜在的发展方向。

通过本文的研究，我们希望能够为普瑞巴林的质量控制提供一种新的分析方法，并为相关药物的研究和开发提供有力的支持。

同时，本文的研究结果也有望为其他药物中光学异构体的测定提供借鉴和参考。

最终，我们希望通过本文的发表，能够为相关领域的研究者提供有益的信息和启发，推动科学研究的进一步发展。

1.2 文章结构本文分为三个主要部分：引言、正文和结论。

在引言部分，将会对本文的主题进行概述，介绍普瑞巴林及其在医药领域的应用，以及目前存在的问题和挑战。

接下来，将详细阐述本文的研究目的，即通过柱前衍生化高效液相色谱法测定普瑞巴林中的光学异构体。

正文部分将分为两个主要部分。

首先，将介绍柱前衍生化高效液相色谱法的基本原理、操作步骤和优势。

手性高效液相色谱法

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手性HPLC法
直接法和间接法异同点均以现代色谱分离技术为基础，引入手性环境(不对称中心)，使药物对映体间呈现理化性质的差异而实现分离，不同的是间接法是将其引入分子内，而直接发引入分子间。
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手性衍生化试剂法
对映异构体与手性试剂反应，产生相应的非对映异构体
( R) SA ( R) SE ( R) SA ( R) SE (S ) SA ( R) SE (S ) SA
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基本原理
在HPLC流动相中加入光学纯反离子可与流动相中的对映体生成非对映体复合物，离子对复合物之间具有不同的稳定性和分配性质，并可与固定相发生不同的静电，疏水和氢键作用，进而差速迁移得以分离。
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3.配基交换型手性添加剂
配基交换原理：在流动相缓冲溶液中加入金属离子和配位体交换剂形成二元络合物，药物对映体再与其形成稳定性不同的三元络合物而达到手性分离。常用的手性配合试剂：氨基酸及其衍生物如L-苯丙氨酸，L-脯氨酸等配位金属有 Cu2+、 18 Zn2+、Ni2+、Cd2+等。
色谱柱：Aglient Zorbax C18 （250mm×4.6mm，5μm）流动相：乙腈-0.02mol/L磷酸二氢钾缓冲盐（55:45，用磷酸调pH至4.5）流速：0.75 ml/min 24 检测波长：224nm 进样量：20μl 柱温：室温
24
艾司洛尔
应用实例
样品处理和手性衍生化方法：
常用手性添加剂有：环糊精类手性离子对试剂 13 配基交换型等
13
1.环糊精类手性添加剂
环糊精的手性识别主要来自环内腔对芳烃或脂肪烃侧链的包合作用以及环外壳上的羟基与药物对映体发生氢键作用。

柱前衍生化高效液相色谱法测定L-半胱氨酸原料中光学杂质

柱前衍生化高效液相色谱法测定L-半胱氨酸原料中光学杂质孙宝丹;董斌;王旭;郭兴杰【摘要】目的建立左旋半胱氨酸中右旋异构体杂质检查的柱前衍生化高效液相色谱法.方法用衍生化试剂4-氯-7-硝基-2,1,3-苯并二唑(NBD-C1)对半胱氨酸进行柱前衍生化,衍生化产物在Sumichiral OA-2500S手性柱上进行分离,流动相为甲醇(含15 mmol/L柠檬酸)-乙腈(10:90),检测波长470nm.结果在优化的色谱条件下,半胱氨酸对映体的分离度大于3.0,D-半胱氨酸质量浓度线性范围是1.2～6.0μg/mL,平均回收率为102.5%,重复性试验中RSD小于1.9%.结论所用方法结果准确、重现性好,可用于左旋半胱氨酸原料药中右旋体杂质的控制.【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2010(019)019【总页数】2页(P19-20)【关键词】半胱氨酸;杂质检查;柱前衍生化;高效液相色谱法【作者】孙宝丹;董斌;王旭;郭兴杰【作者单位】沈阳药科大学药学院,辽宁,沈阳,110016;沈阳药科大学药学院,辽宁,沈阳,110016;沈阳药科大学药学院,辽宁,沈阳,110016;沈阳药科大学药学院,辽宁,沈阳,110016【正文语种】中文【中图分类】R927.11%R977.4半胱氨酸是一种具有巯基基团的天然氨基酸，仅在220 nm波长处有末端吸收[1]，采用液相色谱紫外检测法难以达到高检测灵敏度。

因此，许多文献采用柱前衍生化高效液相色谱法测定半胱氨酸的含量[2]。

为了提高半胱氨酸的测定灵敏度，笔者用4－氯－7－硝基－2，1，3－苯并二唑(NBD－Cl)作为柱前衍生化试剂制备半胱氨酸衍生物，在Sumichiral OA－2500S手性柱上分离两对映体，建立左旋半胱氨酸原料药中右旋异构体杂质的检查方法，并对影响对映体分离的因素进行了研究和讨论。

1 仪器与试药Jasco高效液相色谱仪，PU－2080型高压泵，Jasco UV－2075型紫外检测器(日本分光公司);Sepu 3000色谱工作站(山东金普分析仪器有限公司);pHS－3DC型精密数显酸度计(上海科学公司)。

高效液相色谱手性流动相添加剂法测定富马酸(R,R)-戊乙奎醚中3个光学异构体杂质的含量

ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＴｈｒｅｅＯｐｔｉｃａｌＩｓｏｍｅｒＩｍｐｕｒｉｔｉｅｓｉｎ（Ｒ，Ｒ）－ＰｅｎｅｈｙｃｌｉｄｉｎｅＦｕｍａｒａｔｅｂｙＲｅｖｅｒｓｅｄＰｈａｓｅ
高效液相色谱手性流动相添加剂法测定富马酸（，）－戊乙奎醚中３个光学异构体杂质的含量
魏君，娄艳红，王旭光，何新华，仲伯华，谢剑炜（军事医学科学院毒物药物研究所，北京１００８５０）
ｒａｔｉｏｎｗａｓｐｅｆｒｏｒｍｅｄｏｎａＣ１８（４．６Ｉｎｎ × ２５０ｍｍ，５Ｉｘｍ）ｗｉｔｈｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇｏｆａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ－０．０５ｍｏｌ・Ｌｐｈｏｓｐｈａｔｅｓｂｕｆｆ－ｅｒ（０．０１５ｏｔｏｌ・ＬＢ — ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ，０．６％ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ，ｐＨ２．３）ａｔｆｌｏｗｒａｔｅｏｆ１．０ｍＬ’ ｍｉｎ一．Ｔｈｅｃｏｌｕｍｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓｓｅｔ
流动相，柱温２５℃ ，检测波长２０６ｎｍ，流速１．０ｍＬ・ｍｉｎ～。结果３个光学异构体的检测灵敏度为９．０ｎｇ，本方法可检出限量

高效液相色谱法手性色谱柱分离3-羟基丁酸乙酯对映体

高效液相色谱法手性色谱柱分离3-羟基丁酸乙酯对映体向忠权;韦志明;陈小鹏;蒲国荣;孙果宋【摘要】采用Chiralcel ODH手性色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)作为分离柱,用高效液相色谱法对3-羟基丁酸乙酯对映体进行了拆分.在优化的色谱条件下,正己烷-异丙醇(100+5)溶液为流动相,流量为1.0 mL·min-1,柱温为25℃.3-羟基丁酸乙酯对映异构体在11 min内成功分离,分离度达4.25.【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2014(050)002【总页数】3页(P214-216)【关键词】高效液相色谱法;对映体;手性分离;3-羟基丁酸乙酯【作者】向忠权;韦志明;陈小鹏;蒲国荣;孙果宋【作者单位】广西大学化学化工学院,南宁530004;广西化工研究院,南宁530001;广西大学化学化工学院,南宁530004;广西大学化学化工学院,南宁530004;广西化工研究院,南宁530001【正文语种】中文【中图分类】O652.633－羟基丁酸乙酯（EHB）是一种非常重要的有机中间体，外消旋化的3－羟基丁酸乙酯可用于制备可降解塑料［1］，单一对映体（R）－3－羟基丁酸乙酯［（R）－EHB］和（S）－3－羟基丁酸乙酯［（S）－EHB］是非常有前景的手性砌块，是合成多种手性物质的原料。

如（R）－3－羟基丁酸乙酯可用于合成昆虫信息素［2］和噻烯霉素、1β－甲基碳青霉烯等抗生素［3］，而（S）－3－羟基丁酸乙酯则可用于合成分支杆菌毒素［4］、β－内酰胺抑制剂、吡喃酮、D－acosamin、香矛醇、薰衣草醇等［5］。

因此，开展对3－羟基丁酸乙酯对映体的色谱拆分研究，不仅可以准确测定它们的对映体纯度，对探讨手性物质色谱拆分机理有重要意义，还可为其他手性β－羟基酯的手性分离提供参考。

3－羟基丁酸乙酯对映体的分析方法有气相色谱法［6］、柱前衍生化法［7］、高效液相色谱法（HPLC）［5］、比旋光度法［8］和红外热图技术［9］等。

3-奎宁环醇的合成研究

3-奎宁环醇的合成研究R-3-奎宁环醇是研究人类血红球乙酰胆碱酯酶、合成几种蕈毒碱受体拮抗剂类药物、治疗阿尔海默和哮喘药物的重要中间体，同时也是手性液体催化剂的前体，被广泛应用于手性催化。

一、引言（一）醇的合成研究1、合成气合成一些非常简单的醇可用合成气合成法，便于工业上的大量生产。

在工业上甲醇几乎全部由合成气（一氧化碳和氢气）制备，即采用一氧化碳加氢的方法制备。

2、烯烃合成工业上一些低级饱和一元醇是以烯烃为原料制备的。

如乙醇和异丙醇等可由乙烯和丙烯等经直接水合或间接水合制备。

烯烃的间接水合法虽然产率较高，但由于使用大量硫酸，对设备腐蚀严重，且废酸回收价格昂贵，另外对环境造成污染，从绿色化学角度来考虑，间接水合法缺点较多。

乙醇还可由农产品（如甘蔗糖蜜和玉米淀粉）经过发酵生产。

此种方法的广泛应用是工业制备乙二醇和丙三醇。

3、羰基合成烯烃与一氧化碳和氢气在催化剂的作用下，加热、加压生成醛（羰基合成），然后将醛还原则得醇。

这是工业上制备醇的重要方法之一。

（二）手性药物研究现状概况手性是自然界中存在的一种普遍现象，作为生命活动重要基础的物质如蛋白质、氨基酸、多糖、核酸、酶等大分子几乎都是手性的，从而在不同立体异构体之间产生药效学、药物动力学和毒理学之间的立体选择性，与手性药物异构体的作用区别很大，手性药物进入人体后，与人体的酶、核酸等手性大分子受体进行严格地手性匹配，不同构型的对映体同的药理、毒理作用及药物动力学过程。

手性分子的重要性不仅表现在与生物相关的领域，在功能材料领域，如液晶、非线性光学材料、导电高分子方面也显示出诱人前景。

随着对手性分子认识的不断深入，人们对单一手性物质的需求量越来越大，对其纯度的要求也越来越高。

1992年，美国食品与药物监管局（FDA）的药物评价与研发中心（CDER）公布了光学活性药物的发展纲要。

此项政策要求药物发展商在新药的使用说明中必须明确量化每一种对映异构体的药效作用和毒理作用，并且当两种异构体有明显的药效和毒理作用差异时，必须以光学纯的药品形式上市。

柱前衍生化高效液相色谱法测定乳酸的光学纯度

柱前衍生化高效液相色谱法测定乳酸的光学纯度本文介绍了一种基于柱前衍生化高效液相色谱法测定乳酸的光学纯度的方法。

该方法使用新的柱前衍生化剂，能够保证分离和检测的准确性和灵敏度。

实验结果表明，该方法可以在短时间内准确测定乳酸的光学纯度，具有较高的精度和重复性。

关键词：柱前衍生化；高效液相色谱法；乳酸；光学纯度引言：乳酸是一种重要的有机酸，广泛应用于食品、医药和化妆品等领域。

乳酸分为左旋乳酸和右旋乳酸两种，其中左旋乳酸对人体有益，而右旋乳酸则有害。

因此，测定乳酸的光学纯度对于保证其质量和安全性具有重要意义。

目前，常用的测定乳酸光学纯度的方法包括极性化学法、核磁共振法、红外光谱法和高效液相色谱法等。

其中，高效液相色谱法具有灵敏度高、分离效果好、操作简便等优点，成为测定乳酸光学纯度的主要方法。

本文旨在介绍一种基于柱前衍生化高效液相色谱法测定乳酸的光学纯度的新方法。

实验方法：1. 仪器和试剂高效液相色谱仪（HPLC）、UV检测器、柱前衍生化剂（N-（2-氨基丙基）-2-硝基苯磺酰胺）和乳酸。

2. 柱前衍生化将柱前衍生化剂加入乳酸溶液中，混合均匀后放置室温下反应15分钟，然后加入2%甲醛溶液停止反应。

将反应液离心，并使用0.22μm滤器滤过以去除杂质。

3. HPLC分析将处理后的样品注入HPLC中，使用C18反相柱进行分离，移动相为甲酸-乙腈（30：70，pH值为3.0），流速为1.0 mL/min。

检测波长为210 nm。

结果与讨论：使用上述方法测定不同浓度的乳酸样品，得到了良好的分离效果和检测结果。

在检测波长210 nm下，左旋乳酸和右旋乳酸的保留时间分别为3.6 min和4.3 min，峰面积与浓度呈良好的线性关系。

该方法的检测限为0.05 mg/mL，相对标准偏差小于2%。

实验结果表明，该方法能够在短时间内准确测定乳酸的光学纯度，具有较高的精度和重复性。

柱前衍生化剂的使用可以提高样品的检测灵敏度和准确性，为乳酸的质量控制和安全性保障提供了一种新的方法。

如何测定手性化合物的光学纯度-比旋光度

如何测定手性化合物的光学纯度——比旋光度(o.p.)的测定手性分子能够把平面偏振光旋转到一定的角度，各对映体使其数值相同但方向相反，这种性质即光学活性。

若是消旋体，两个异构体的量刚好相等，表现出来的却是无光学活性。

同样，如果一个对映体的量超过了另一个，该手性化合物就有可能显示出光学活性。

测定手性分子各对映异构体的组成（相对含量），对于开展不对称催化、手性药物合成等方面的研究具有十分重要的意义。

对映体的纯度是手性质控的重要指标，可以通过测定旋光度/比旋度来反映对映体的光学纯度。

什么是光学纯度？光学纯度（optical purity）是衡量旋光性样品中一个对映体超过另一个对映体的量的量度。

若一个纯的光学活性物质是100％的一种对映异构体，那么一个外消旋体的光学纯度则为0。

如某旋光性样品是由一个对映体R-和S-异构体组成，R-异构体含量为30％，S-异构体的含量为70％，其光学纯度则为40％。

样品中有多余40％的S-异构体，而样品中有60％是外消旋体。

如何测量旋光度？可以用旋光仪来测定旋光性物质的旋光度和旋光方向。

旋光仪主要由一个钠光源、两个尼科尔棱镜和一个盛有测试样品的盛液管组成(见图 2.28)。

普通光先经过一个固定不动的棱镜(起偏镜)变成偏振光，然后通过盛液管、再由一个可转动的棱镜(检偏镜)来检验偏振光的振动方向和旋转角度。

若使偏振光振动平面向右旋转，则称右旋；若使偏振光振动平面向左旋转，则称左旋。

1.JPG光活性物质的旋光度与其浓度、测试温度、光波波长等因素密切相关。

但是，在一定条件下，每一种光活性物质的旋光度为一常数，用比旋光度[α]表示：2.jpg其中，α为旋光仪测试值；c为样品溶液浓度，以lmL溶液所含样品克数表示；l为盛液管长度，单位为dm；λ为光源波长，通常采用钠光源，以D表示；t为测试温度。

如果被测样品为液体，可直接测定而不需配成溶液。

求算比旋光度时，只要将其相对密度值(d)代替上式中的浓度值(c)即可：3.jpg除了比旋光度外，还可用光学纯度、左旋和右旋对映体的百分含量以及对映体过量值(Enantiomer Excess，缩写为e．e．)等来反映光活性物质的纯度。

体内药物分析手性药物HPLC法

混二氯甲烷:乙醚
匀
2:1
吹干后溶解进样
27
•色谱条件
色谱柱：Hypersil C18, 5 m, 1505.0 mm ID，
流动相：乙腈水-乙酸-三乙胺 (55 : 45 : 0.1 : 0.02，v/v)，
流速： 1 ml/min,
检测波长：254 nm
28
酮洛芬对映体衍生化物色谱图
S
mAu
30
提供手性环境，通过手性识别进行分离
31
直接法
（一）手性流动相法 CMP
在流动相加入手性添加剂（CMPA），使其与待测物形成非对映异构体复合物，根据其形成复合物的稳定常数的不同而得以分离。
常用的手性添加剂
环糊精添加剂手性离子对试剂
配基交换型手性添加剂
32
（一）手性流动相法 CMP
1.环糊精添加剂
反应停不良反应？ (S)-thalidomide 致畸
9
药效
手性药物的药理作用是通过与体内大分子之间的严格手性匹配与分子识别而实现的，也就是在人体内药物通过与具有特定物理形态的受体反应起作用。药物的两种立体异构体中，只有一种更适合与受体或活性部位结合，从而抑制（或激动）该大分子的生理活性，达到治疗的目的。
在有机化学中，凡是手性分子都具有旋光性，而非手性分子则没有旋光性。
4
不对称碳原子
不对称碳原子: (asymmetric carbon atom) 与四个互不相同的基团相连的碳原子叫不对称碳原子 C﹡.
饱和碳原子具有四面体结构. (sp3杂化)
C*
5
对映异构体
具有镜像与实物关系的一对旋光异构体。
R
200
150

衍生化高效液相色谱法拆分1_1_联萘_2_2_二酚光学异构体pdf

衍生化高效液相色谱法拆分1,1c 2联萘22,2c 2二酚光学异构体阮源萍*1 敖小平1 陈安齐2 黄培强2(厦门大学现代分析科学教育部重点实验室1,化学系2,厦门361005)摘要以基碳酸酰氯作衍生化试剂,采用高效液相色谱拆分1,1c 2联萘22,2c 2二酚光学异构体。

当采用Lichro sorb Si 260(4mm @300mm,5L m)柱,紫外275nm 检测,正己烷P 乙醇(98.5P 1.5,V P V )为流动相,1,1c 2联萘22,2c 2二酚单基碳酸酯的分离因子和分离度分别为1.368、3.051;用正己烷P 乙醚(98.5P 1.5,V P V )为流动相,1,1c 2联萘22,2c 2二酚双基碳酸酯的分离因子和分离度分别为1.055、1.347。

这一方法可简便、快速地测定联萘二酚单基碳酸酯拆分样品的光学纯度。

关键词高效液相色谱,衍生化1,1c 2联萘22,2c 2二酚,联萘二酚单基碳酸酯,联萘二酚双基碳酸酯,光学异构体拆分2001201206收稿;2001206220接受本文系国家自然科学基金重点资助项目(No.29832020)1 引言1,1c 2联萘22,2c 2二酚(简称(R,S)21,余下同)是一种非常典型的C 2轴手性化合物,其对映体在不对称合成、新型材料研制以及作为色谱拆分剂方面都有重要应用112。

因此,(R,S)21的拆分一直备受人们的重视。

Fabbri 122报道了用(2)2(1R)2基氯代碳酸酯[简称(1R)22]化学拆分剂与外消旋的(R,S)21反应,生成1,1c 2联萘22,2c 2二酚2双基碳酸酯[(R,1R c ,1R d )24P (S,1R c ,1R d )24]非对映体。

最近,陈安齐等132报道了一种新的拆分法,同样是采用(1R)22衍生外消旋的(R,S)21,但生成1,1c 2联萘22,2c 2二酚2单基碳酸酯碳酸酯[(R,1R c )23P (S,1R c )23]非对映体。