苏丹红类药物残留检测技术研究进展
苏丹红Ⅰ和对位红残留检测ELISA试剂盒的研制
１ ４ ３ ２ 测 定 步骤 ． ．． 包 被 液 ： ． ５ ｍ Ｌ Ｌ碳 酸 盐 ０ ０ ｏ／
用 苏 丹 红 一Ｏ Ａ包 被 Ｅ ＩＡ Ｖ ＬＳ
反 应 板 ，２ Ｌ 孔 ， Ｃ过 夜 ； ０ ２ ％ Ｏ Ａ 封 闭 １０ ／ ４ ｏ 用 ． Ｖ
Ｅ ＩＡ反 应 板 ，０ Ｉ ， Ｃ过夜 或 ３ Ｃ２ ｈ 封 ＬＳ ２ Ｏ ／孔 ４ ｏ ７ｏ ；
［ 作者简介 ］ 何 方洋 （ ９ ９ ） 男 ， １６ 一 ， 博士 ， 主要从事 药物残 留方
面 的 研究 。 Ｅｍ ｉ：ａ ｎｎ９ １ ６ ．Ｏ ［ 通讯作者 ］ 万 字 平 ， －ａｌｎ ｎａ２ ４ ＠ １３ ＣＢ。
畜牧 兽 医杂 志
０Ｈ
第３ ０卷
第 ３期
２ １ 年 ０１
ｔｏ ｉ ｔｗａ ｇ Ｌ． Ｔｈｅｒ ｃ ｖ ｒｅ ｆＳ ａ ｐｉ ｄ ｉ ｐ ｅ ｓ７ ９％ ａ ｄ ７ ２％ ． Ｔｈ ｔｉ ｄ ｎ ｆｅ ｔｏ ｈｅｒ ｓ ｔ ｆ ｉｎ ｌｍｉ ｓ８ ／ ｅ ｏ ｅ ｉｓｏ ｕｄ ｎ Ｉｓ ｋｅ ｎ Ｐｅ ｐ ｒｗａ ９． ｎ ８． ｅ ｍａｒｘ ｈａ ｏ ｅｆ ｃ ｎ ｔ ｅ ｕｌｓｏ
１ １ １ Ｅ ＩＡ 用 液 ． ． ＬＳ
缓 冲液 ； ． １ｍ Ｌ Ｌ磷 酸 盐 缓 冲 液 ； 涤 液 ： ． ５ ０ ０ ｏ ／ 洗 ０ ０ ％ Ｐ Ｓ— 抗 体 稀 释 液 ： ０ １％ Ｂ Ａ ； 物 缓 冲 Ｂ Ｔ； 含 ． Ｓ 底
液： 磷酸 一柠 檬 酸缓 冲液 ； 物 溶液 ：０ ｍｇＴ 底 １ ＭＢ加
ｌ￣ｅ ；ｈ ｏ ｅ ｔ ｎ ｏｆｃｅｔ ２ｗ ｓ ９ ５ ％ ，ｈ ｗ ｓ ｄｔ ｔ ｎｌ ｉｗ ｓ ． ／ ，ｈ ５ ａ ．９９ ｇＬａｄｔｅ ｅ ｃ ｏ ｓ ｔｅｃｒ ｌ ｉ ｅ ｉ ａ ．６ ｒ ａｏ ｃ ｆ ｎ Ｒ ｉ ９ ｔｅｌ ｅｔ ｅ ｃｉ ｍｔ ａ １ Ｌ ｔｅ Ｃ ０ｗ ｓ ５ ９ ／ ｎ ｔ — ｏ ｅ ｏ ｉ ０ ｇ Ｉ ０ ｈｄ ｅ
食品中苏丹红检测方法探讨
食品中苏丹红检测方法探讨中国质量新闻网 2008-11-26 15:17:25摘要本文介绍了食品中苏丹红检测方法的研究进展，主要包括高效液相色谱(HPLC)、液相色谱-质谱(LC-MS)、气相色谱-质谱联用法(GC-MS)、薄层层析法等。
关键词苏丹红高效液相色谱液相色谱-质谱气相色谱-质谱联用薄层层析近年来，一些国家和地区不断发生食品污染等恶性事件。
特别是随着科技的发展，一些原来认为无害的食品添加剂，发现存在慢性或致癌作用,原来检测不出的有害物质被查出等。
苏丹红是偶氮苯类人工色素，属于工业染料，主要用于油、蜡、鞋等的增光着色。
由于苏丹红I、II、III、IV及其代谢产物具有致癌性，国家禁止作为色素添加剂在食品中使用。
苏丹红I、II、III、IV的检测方法有高效液相色谱法[1]、液相色谱-质谱法[2]、气相色谱-质谱联用法[3]、薄层层析法[4]等。
1. 高效液相色谱法对食品中苏丹红的检测高效液相色谱法是一种以液体为流动相的现代色谱柱分离分析方法，它是在经典液相色谱的基础上，引入气相色谱的理论和技术发展起来的[5]。
原则上讲，只要能溶解在流动相中的物质都可以用高效液相色谱法分析。
在目前已知的有机化合物中，有80%的有机化合物能用高效液相色谱法分析[6]。
高效液相色谱法主要有以下几种：1.1 欧洲委员会推荐的液相色谱法[7]该方法是将样品经匀浆化或粉碎后，加入乙睛(苏丹红III、IV加入氯仿)提取，过滤，滤液用反相高效液相色谱仪进行色谱分析。
苏丹红I、苏丹红II的检测波长为478nm，苏丹红III、苏丹红IV则为520nm。
苏丹I的检测限是0.013μg/ml、最低浓度为0.106μg/ml、在辣椒粉样品中的添加回收率高于90%。
1.2 国家质量监督检验检疫总局、国家标准化管理委员会发布的高效液相色谱法该方法在欧洲委员会公布的检验方法的基础上作了改进。
苏丹红检测方法国家标准采用了简单的正相吸附固相萃取原理，一次性去除了样品中红辣椒和番茄中的干扰成分，使用目前国内已广泛应用的高效液相色谱仪就可准确完成4种苏丹红染料的检测。
食品中苏丹红残留检测研究进展
3 高效液相色谱法
高效液相色谱法具有 分析 检 测速 度快、 分 离效 果好 、 操作 简便等多种优点， 是目前分离及分析化学物的有效方法。 高效 液相色谱法已应用于如辣椒制品、 调味品、 香肠等肉 制 品中 苏 丹 红 的残留检 测 ， 且该方法 已 于 2005 年列入 国 家标 准。目 前 食品中检测苏丹红的高效液相色谱法主要有欧 洲委 员会 推荐 方法和我国的国标法。 在欧洲委员会推 荐的检测方法中， 先对 样品进行匀浆， 在 苏 丹 红 I 和 II 中 加 入 乙 腈 ， 在 苏 丹 红 III 和 苏 丹红 IV 中加 入 氯 仿 ， 进 行 提 取和 过 滤 ， 再 用高 效 液 相 色 谱 仪反相方法对滤液进行色谱分 析。其 中苏 丹 红 I 和 II 的检 测 波 长 为 478nm， 苏 丹 红 III 和 IV 的 检 测 波 长 为 520nm， 欧洲这 种方法检测的样品加标 回 收率 能够 达 到 90%。欧洲委 员 会推 荐方 法 具有 快 速 、 简 便等 优 点 ， 但也具有一定缺点， 主要是检 测前不能对样品进行有效净化处理，进 行仪 器检 测时容 易受 干扰， 同时有害于样品分析柱。 我国国标法则是采用了正相吸 附的固相萃取原理， 首先去除检测样品中的干扰物质 ， 提取 液
4 液相色谱与质谱联用法
液相 色谱定性 检 测中 其有 力 的确证 是质 谱的 应用，液 质 联用法能 够排除仪器检测中的假阳性 结果。由 于液质联 用 法 能够在一 定程度上排除样品基质干扰， 对于需较高灵敏 度、 基 质复杂、适用范围宽的样品 检测 而言，已 成为最好 的 分析 方 式。 质 谱中串联四极杆的多反 应监测扫描 （MRM） 能够更加有 效地提高液质谱仪器分析的选择性 和灵 敏度，已成为 目前 液 质联用定性和定量检测的主要手段。液 相 色谱 串联质 谱检 测 方 法 特异 性好 、 灵 敏度 高 ， 是 一 种 回 收率 高 、 快捷、 灵敏、 稳定 的定性、 定量检测方法。 该方法目前已经应用于国内外多种食 品以及进出口肉蛋奶的检测， 对于促进食 品行业发 展 ， 对维 护 经济秩序具有积极的意义。 随着 国内外对 食 品安 全问 题 越来越 重视，仪器 检测中 针 对食品中 苏丹红的残留目前已经建立多种简便、 快速、 灵敏的 检测方法 对其进行监控。 用分光光度法进行检测， 不需要昂贵 的试剂与仪器， 而且样品前处理方法较 简单， 但测定 的 结果 准 确 性 也较 低 ； 薄 层 色 谱 法重 现 性好 ， 结果 准 确 ， 但 操 作 步 骤较 复杂 ， 检 测时间较 长 ， 目前 该方 法 的检 测限 只 能达到 ug/g 级 ； 酶联免疫法是食品安全较为广泛使 用的检 测方 法，其方 法操 作较 为 简 便 、 费用 投 入 较 为 低 廉 、 检测灵敏度高， 目前主要用 作现场监 控或大样本的筛选检测； 高效液相色谱法、 气相 色谱 - 质谱联用法、高效液相色 谱 - 串联 质谱法 等试验仪 器 价格 昂贵， 检测样品前处理复杂， 但这些方法的检测限目前 都 能够 达到 ng/g 浓 度水 平， 因 此 这些 多作 为 确证 方法 。仪 器 分 析 中 随着检测方法研究的不断深入，禽蛋 中各 种 药物的残 留 危害 及非法添加将逐渐得到控制。 作者简介 ： 韩爱云， 博士， 石家庄学院， 讲师 ， 研 究方 向： 食 品安全与检测。 通讯 作 者 ： 左晓磊， 硕士， 石家庄市畜牧水产局， 研究员， 研究方向： 畜产品安全检测。
高效液相色谱仪对食品中苏丹红的测定研究
2
doi:10.16736/41-1434/ts.2020.15.059
Analysis and Testing 分析检测
高效液相色谱仪对食品中苏丹红的测定研究
Determination of Sudan in Food by HPLC
◎ 聂春丽，杨淑宏 （民勤县食品药品检验检测中心，甘肃 民勤 733399）
Key words：HPLC; Food; Sudan red; Content determination
中图分类号：TS207.5
高效液相色谱仪具有广泛的用途和显著的优点， 测定食品中的苏丹红含量，有助于合理控制食品中苏 丹红的含量，满足食品安全加工要求满足。本文通过 实验分析了高效液相色谱仪在食品苏丹红含量测定中 的应用，实验证明该方法简便、环境污染低，且准确度、 精密度较高，应用价值显著。
关键词：高效液相色谱仪；食品；苏丹红；含量测定
Abstract：Determine the content of Sudan in food by HPLC, the detection limit of Sudan red in food was 0.04 μg·kg-1. The correlation coefficients of Sudan Ⅰ , Ⅱ , Ⅲ and Ⅳ were 0.988 77, 0.988 50, 0.988 40 and 0.988 34, respectively. There was a monotone positive proportion function between the concentration of Sudan red standard solution and the corresponding peak area. Conclusion in this experiment, high performance liquid chromatograph is used to determine Sudan red in food. The sample amount is small and the environmental pollution is low. It supports Sudan red quantitative determination at the same time. The precision and accuracy are high and the application value is significant.
超高效液相-串联质谱法筛查食品中的苏丹红
超高效液相-串联质谱法筛查食品中的苏丹红陈 英（周至县食品药品检验检测中心，陕西西安 710400）摘 要：运用超高效液相-串联质谱法（UPLC-MS/MS）同时测定辣椒面、火锅料、辣条、鸭蛋、鸭血中的苏丹红Ⅰ～Ⅳ。
通过优化萃取试剂、样品基质效应的消除、色谱及质谱条件等参数，检测方法的灵敏度和适用性。
在电喷雾离子源正离子模式下，多反应监测（MRM）方式检测，外标法定量。
苏丹红Ⅰ～Ⅳ线性关系良好，相关系数（r2）均大于0.999，苏丹红Ⅰ～Ⅳ在3个添加水平下，回收率范围为85.1%～104.9%，标准偏差（RSD）均小于6.2%，检出限和定量限为1.0～6.0μg/kg。
本方法处理过程简单、分析时间短、准确度高，适用于辣椒面、火锅料、辣条、鸭蛋和鸭血中的苏丹红Ⅰ～Ⅳ检测，可用于食品中非法添加苏丹红Ⅰ～Ⅳ的筛查。
关键词：超高效液相-串联质谱法；苏丹红；非法添加苏丹红共有4个组分，为苏丹红Ⅰ～Ⅳ，是一种红色颗粒或粉末状的红色染料常用于工业上色如鞋、地板等的增光，因为有致癌作用危害人体健康，我国和欧盟都禁止其用于食品生产[1]。
市面上有一些不法分子为了产品成色漂亮好出售，依然违法添加工业染料。
目前，苏丹红Ⅰ～Ⅳ检测方法主要有薄层色谱法[2]、紫外可见分光光度法[3]、近红外显微成像光谱法[4]、液相色谱法[5-6]、液相色谱-质谱联用法[7-8]和化学发光分析法[9]，这些方法前处理复杂、试剂用量大、检测周期长、准确度不高，不适应实际工作中遇到的多种复杂基质中苏丹红的筛查测定。
本试验通过对色谱条件和质谱参数的研究、优化，建立了高效液相色谱-串联质谱同时分析苏丹红Ⅰ～Ⅳ的方法。
本方法前处理简单，7 min即可同时测出苏丹红Ⅰ～Ⅳ的含量，方法快速简单，结果准确，可以用于食品中非法添加苏丹红Ⅰ～Ⅳ的筛查。
1 材料与方法1.1 仪器与试药液相色谱-串联质谱联用仪：Qtrap 5500三重四极杆串联质谱仪（美国AB SCIEX公司）；配有电喷雾离子源（ESI）；LC20A超高效液相色谱仪（日本Shimadzu公司）；MS1003S电子天平（瑞士Mettler Toledo公司）；Milli-Q超纯水仪（美国Millipore公司）；MFV-24智能氮吹仪（广州德泰仪器科技有限公司）。
超高效液相色谱法测定番茄酱中4种苏丹红染料残留效果研究
１ ． ２ ． ３ 色谱 条 件 。 色谱 柱 ： Ａ Ｃ Ｑ Ｕ Ｉ Ｔ Ｙ Ｕ Ｐ Ｌ Ｃ Ｍ Ｔ Ｂ Ｅ Ｈ Ｃ １ ８ 柱（ ２ ． １ ｍｍ￣ ５ ０ ． ０ｍｍ， １ ． ７ ｍ） ； 流动相 ： 乙 腈： 水（ ｖ ／ ｖ ） ＝ ８ ８ ： １ ２ ， 等 度 洗 脱； 流速 ０ Ｉ ３ ｍＬ ／ ｍ ｉ ｎ ； 柱温 ３ ０℃ ； 进样量 １ Ｏ Ｌ； 检 测波 长 为
烷（ ｖ ／ ｖ ） ＝ ５ ： ９ ５洗脱 ， 收集。 ５ ０℃氮 吹 至近 干 ， 用 １ ｍＬ流 动 相
溶 解定 容 ， 过 ０ ． ２ ２ Ｉ ｘ ｍ滤 膜 ， 上机 。
鲜、 郁 香 的调味 佳 品 。 被大 量 用于 意大 利粉 中 ， 也 可 蘸炸 鸡 、 炸 鱼和 薯 条 。 国 内对 辣椒 酱 中 苏 丹红 染 料 的检 测 有 较 多 报 道 。 但番 茄酱 较 少 。 而 国内 已有 文献 报道 检 测苏 丹红 染 料 残 留方 法 均 为 高 效 液相 色 谱 法 （ ＨＰ Ｌ Ｃ） ［ １ － ２ ， ４ １ ， 但 是 方 法普 遍 存在 样 品分 析 时 间长 、 检 出 限高 等 缺点 。 而Ｕ Ｐ Ｌ Ｃ由于 采 用 了１ ． ７ ｍ 的小粒 子 填充 柱 ， 柱效提高， 有 更 好 的分 离效 率 ，
际癌 症研 究机 构 （ Ｉ Ａ ＲＣ ） １ ９ ９ ５年 确定 。 苏 丹红 属 第 三类 致癌
柱、 铁架 台 。
１ ． ２ 试 验 方 法
１ ． ２ ． １ 样 品的提取 。 称取 １ ０ ｇ （ 精确 到 ０ ． ０ １ ｇ ） 番茄酱于 １ ０ ０ｍＬ
苏丹红Ⅰ号残留检测方法研究进展
点及研 究进展 状 况 ， 对从 事相 关研 究的人 员具有 参考 作用 。
关键 词 ： 苏丹红 ； 留； 测方 法 ； 究进展 残 检 研
中图分类号 ：Ｓ２ １６ 文献标 识码 ： 文 章编 号 ：０ ７ ５ １２ ０ ）６ ０ ７— ３ Ｔ ０ ． Ｂ １０ —７ ６ （０ ８ ０ —０４ ０
品中苏丹 红染 料 ， 结果 令 人 满意 ＿ 。杨林 飞 等运 用 ３ ｊ Ｔ Ｃ法 建立 了灵 敏度 高 、 确 性好 的测 定 食 品 中苏 Ｌ 准 丹红 染料 的分析 方法 ， 为基 层 机构 提 供 了便 捷 的检 测食 品 中苏 丹 红 染 料 的 方 法 ＿ 。王 鲜 俊 等 则 运 用 ４ Ｊ Ｔ Ｃ一分光 光 度 计 建 立 了准 确 、 敏 的 测 定海 椒 面 Ｌ 灵 中苏 丹 红 Ｉ ～Ⅳ 的 分 析 方 法 。该 方 法 回 收 率 为 ８ ． ％ ～ ５ ５ ， 密度 Ｒ Ｄ为 ４ ５ ～５７ 检 出 １９ ９ ．％ 精 Ｓ ．％ ． ％， 限分 别 为 ０ １ ０ ５ ｇ ｇ ．９～ ．８ｔ ／ Ｅ ｔ 。洪 祥 奇 等 利用 该 方 法 检 测 食 品 中 苏 丹 红 １号 ， 最 低 检 出 限 为 其 ０ ６ｍ ／ ｇ标 准偏差 （ Ｓ ） ２ ７ 平 均 回收 率为 ． ｇ ｋ ， Ｒ Ｄ 为 ． ％， ８％ 。该方 法 简 便 、 敏 度 高 、 密 度 高 ， 果 可 ８ 灵 精 结 靠［ 。 １ ３ 高效 液相 色谱法 （ Ｐ Ｃ ． ＨＬ）
ｈ ｒ ｕｌｔ ｕ ｎ ｅ ｔ ａｍｆ ｏ ｈ ｍａ ｈ ａ ｈ．Ｉ ｈ ｒ ｃ ｐ ｏ ｅｔｅ ｌ ｔ ｐ ａｍｉ ｒｐ ｒ ｓ，ｅ ｅ ｔ ｄ ｈ ｒ ｓ ｉ ｆ ｃｓ ａ ａｍｓ，ａ ｌ ａ ｈ ｅｅ ｍｉｉ ｇ ｍｅｈ ｄｓｆｒ ｎ ｓ ｗｅｌ ｓ ｔｅ ｄ ｔｒ ｎ ｎ ｔｏ ｏ Ｓ ｄ ｎ Ｉａ ｅ ｉｔｏ ｕ ｅ ｎ ｔｅ ｐ ｐ ｒ ｕ ａ ｒ ｎ ｒｄ ｃ ｉ ｈ ａ ｅ ． ｄ
高效液相色谱法检测食品中的苏丹红
m 安全与检测2 壬 =SAFETY AND TESTING高效j 夜相色谱法检测食品中的苏丹红郑佳玉:尤继明范明红宝应』摘 要：试验目的是用高效液相色谱法检测食品中的苏丹红。
试验釆用凝胶柱净化-高效液相色谱法同步测定食品内苏丹红I 、II 、III 与IV,用乙醇提取试验样品，Bio-Beads SX3凝胶柱净化处理提取液，经洗脱处理后，Symmetry ShieldRP18柱进行分离，二极管阵列检测器检测苏丹红。
结果表明，苏丹红I 、II 、III 与IV 质量浓度为0.1~10mg/L 时呈现出较好的线性相关性,加标回收率均值为80.6 -96.2%,相对标准偏差是2.4 ~ 5.8%。
关键词：食品；苏丹红检测；凝胶柱_高效液相色谱I. 检测试验仪器和试剂Agilent 1100高效液相色谱仪自带二极管阵列检测器（HPLC-DAD ） o甲醇（色的）、乙酸乙酯、环己烷、无水硫酸钠（分析纯）,苏丹红 1（ 97.51%）、H （90.0%）、皿（97.0%）、IV （91.0% ）标 准品。
层析柱 1.6 cm X 50 cm,填充 Bio-Beads S-X3 凝胶。
配制标准液：准确量取苏丹红I 、II 、III 与IV 标准品，均 为10 mg 。
仅用甲醇溶解苏丹红I, ImL 乙酸乙酯溶解苏丹红II 、 III 与IV 后，再用甲醇将其定容到10 mL,均被配制成l.OOg/ L 标准储备液。
分别量取2.5ml 储备液并将其放置在50mL 容量瓶内，甲醇做定容处理，以上获得的溶液实质上便是4种苏丹 红制备的50mg/L 混合储备液。
而后再使用甲醇配备质量浓度为 0.10、0.5、1.0、5.0、10mg/L 的标准液叫辣酱、香肠样品均采购于农贸市场。
1.2提取与净化样品精确称量4g 均质化的试验样品，兑入8g 无水硫酸钠，充 分震荡摇匀，待观察到样品成疏松样后，加入30 mL 无水乙醇，置于75P 水浴内加热8min,取样后用超声波清洗，静置lOmin,取用上层清液并放置于烧杯内，用35mL 乙醇提取残渣，与提取液混合。
食品非法添加剂苏丹红及其检测方法研究进展
食品非法添加剂苏丹红及其检测方法研究进展作者：马密霞胡文祥来源：《科技视界》2016年第27期【摘要】本文介绍了食品非添加剂苏丹红的结构及危害，综述了苏丹红的检测方法，包括：液相色谱法、薄层色谱- 紫外可见分光光度测定方法、液相色谱-质谱法、气相色谱-质谱法等方法。
旨在引导人们正确理解食品添加剂与非添加剂与食品安全的关系，合理合法使用食品添加剂，维护食品安全。
【关键词】苏丹红；检测方法；食品添加剂Advances in the Examination Methods of Food Illegal Additives and its EffectMA Mi-xia1 HU Wen-xiang2（1.Special Education College of Beijing Union University， Beijing 100075， Beijing China；2.Capital Normal University，Beijing 100048， Beijing China）【Abstract】This paper introduces the Structure of Sudan of food illegal additives and its potential danger to human body. Summarizes the detection method of Sudan. Including： liquid chromatography， the thin layer chromatography and the ultraviolet visible spectrophotometry，liquid chromatography-mass spectrometry， gas chromatography-mass spectrometry method. To guide people to the correct understanding of food additives and illegal additives and food safety，reasonable and legitimate use food additives， Maintain food safety.【Key words】Sudan； Food additives； Detection methods0 引言苏丹红是一种人工合成的亲脂性偶氮化合物，属于化工染料，被广泛应用于各种产品中做着色剂，比如用于纺织品、纸张、皮革、汽油、食品、化妆品的增色或增光等。
食品基质中苏丹红检测方法的研究进展
粮"与"品工业CerealandF o dIndustry 标准与检测Vol.26,2019,No.5食品基质中苏丹红检测方法的研究进展徐于栋无锡市食5安全检验检测中心（无锡214000）摘要：本文阐述了国内苏丹红染料在食5中的检测技术的现状以及未来的发展方向，并分析了液相色谱法（HPLC）,高效液相-质谱联用法（LC/MS）、气相色谱-质谱联用技术（GC/MS）优化方法，以找到更为高效、准确、快速的检测技术。
关键词：苏丹红；检测；液相色谱；液相色谱-质谱；气相色谱-质谱中图分类号:TS207文献标识码:B文章编号:16^2-5026（2019）05-065-04Research progress of Sudan red detection method in food substrateXu YudongWuxi food safety inspection and testing center(Wuxi214000)Abstract:In this paper,the status quo and future development of Sudan red dye detection technology in food were described,and the optimized methods of liquid chromatography(HPLC)、high performance liquid chromatography-mass spectrometry(LC/MS)、gas chromatography-mass spectrometry(GC/MS)were analyzed to find more efficient,accurate and rapid detection technology0Key words:Sudan red detection；liquid chromatography；liquid chromatography-mass spectrometry；gas chromatography-mass spectrometry苏丹红系列染料，是一类化学合成的染料，是以苯基偶氮荼酚为主要基团的亲脂性偶氮化合物［1\在食品工业中，根据国家相关标准的规定，允许使用的合成食用色素均为水溶性，而苏丹红一般不溶于水，而易溶于各类有机溶剂，因此在工业产品的染色方面应用广泛，例如作为汽车蜡或者鞋油等产品增色剂的组成成分之一，或者应用在地板表面的涂层中起到增光的效果。
食品中苏丹红Ⅰ Ⅳ及对位红的 GC-MSSIM 法研究
中国食品学报
Journal of Chinese Institute of Food Science and Technology
Vol． 9 No． 2 Apr． 2 0 0 9
食品中苏丹红Ⅰ～Ⅳ及对位红的 GC-MS/SIM 法研究
张胜帮 1 韩 超 2 刘继东 2 方 超 1 （1 温州大学生命与环境科学学院 浙江温州 325027
收稿日期： 2008-04-28 作者简介： 张胜帮，男，1964 年出生，副教授
1 材料与方法
1.1 试剂与仪器 1.1.1 试剂 苏丹红Ⅰ标准品（97.5%）、苏丹红 II 标准品（90.0%）、苏丹红 III 标准品（97.0%）、苏丹 红Ⅳ标准品（91.0%）、对位红标准品（95.5%）、乙腈 菲-氘 10 标 准 品 ，德 国 Augsburg 公 司 ；色 谱 纯 ，美 国 sigma 公司；甲醇、丙酮（一级色谱纯），天津四 友生物医学技术有限公司； 丙酮、 正己烷 （分析 纯），上海试剂总厂；层析用氧化铝，宜兴市法兰特 工贸有限公司；辣椒粉，购于温州蒲鞋市菜市场。 1.1.2 试剂溶液的配制
在色谱-质谱条件下苏丹红Ⅰ～Ⅳ及对位红标 准品用 GC-MS/Scan 模式扫描测定， 得到目标化 合物完全分离的总离子流色谱图。 根据色谱图上 各组分的保留时间和分子离子峰初步确定检测对 象。 将获得的苏丹红Ⅰ～Ⅳ及对位红标准物质质谱 图与 NIST02 标准谱库的标准质谱图进行对比。 1.4 定量分析
选 择 J＆W DB -5HT （30.0 m ×250 μm ×0.10 μm）石英毛细管柱作为试验用色谱柱。 苏丹红为 偶氮化合物，沸点高，难气化。 对位红、苏丹红Ⅲ、 苏丹红Ⅳ，沸点更高，故选择弱极性耐高温的高效 毛细管色谱柱。 石英毛细管柱具有耐高温、低流失 的优点， 其上限温度可达 400 ℃， 使用温度范围 -60～400 ℃， 对高沸点化合物有极好的峰形和较 短的保留时间。 柱径小，柱较长的石英毛细管柱的 柱效高，可使柱内被测组分得以反复分配，最终完 全分离。 2.3 程序升温条件选择
苏丹红的毒性研究进展
苏丹红的毒性研究进展魏明;侯进【摘要】苏丹红是人工合成的偶氮化合物,属工业染料,不能用作食品添加剂.苏丹红在体内能够代谢成相应的胺类物质,主要包括苯胺、萘酚等,均为有毒的有机化合物.食品中的苏丹红给人类健康构成了潜在的严重威胁.大量毒理学研究证实,苏丹红有致癌性,遗传毒性,代谢产物毒性,致敏性等毒性作用.苏丹红与食品安全及人类健康息息相关,只有加强对苏丹红的认识研究及卫生监督,才能更好地保障食品卫生安全和人类健康.%Sudan is synthetic azo compound and a kind of industrial dye, which is not allowed to be used as food additives. Sudan can be metabolized in vivo into corresponding amines such as aniline and naphthol, which are all toxic organic compounds. Current study shows sudan in food poses a potential serious threat to human health. A large number of toxicological studies confirmed that sudan has carcinogenicity, genotoxicity, metabolite toxicity and allergenicity. In order to protect the safety of food hygiene and human health, the government should strengthen the knowledge, study and health supervision of sudan.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2012(018)021【总页数】3页(P3619-3621)【关键词】苏丹红;致癌性;遗传毒性;代谢产物毒性【作者】魏明;侯进【作者单位】西安医学院药理学毒理学教研室,西安,710021;西安医学院药理学毒理学教研室,西安,710021【正文语种】中文【中图分类】R992苏丹红(Sudan)是一种人工合成偶氮染料，1896年科学家达迪将其命名为“Sudan”并沿用至今［1］。
苏丹红的检测 论文
食品中苏丹红的检测摘要：苏丹红是偶氮苯类人工色素,由于苏丹红具有潜在的致癌性, 中国和欧盟等多数国家都禁止其作为色素添加剂在食品中使用。
然而,仍有不少食品生产企业为了改善食品色泽、降低成本将其作为食用色素。
我国质量监督部门检出了包括几家知名企业生产的众多含有苏丹红的食品, 引起了整个社会的关注。
因此，建立快速可靠的检测方法至关重要。
本文比较了各种检测方法的优缺点及研究进展状况。
关键词:苏丹红;检测方法;研究进展一. 苏丹红的简介“苏丹红”是一种化学染色剂，并非食品添加剂。
它的化学成份中含有一种叫萘的化合物，该物质具有偶氮结构，由于这种化学结构的性质决定了它具有致癌性，对人体的肝肾器官具有明显的毒性作用。
苏丹红属于化工染色剂，主要是用于石油、机油和其他的一些工业溶剂中，目的是使其增色，也用于鞋、地板等的增光。
苏丹红不溶于水，微溶于乙醇，易溶于油脂、矿物油、丙酮和苯。
乙醇溶液呈紫红色，在浓硫酸中呈品红色，稀释后成橙色沉淀。
由于用苏丹红染色后的食品颜色非常鲜艳且不易褪色，能引起人们强烈的食欲，一些不法食品企业把苏丹红添加到食品中。
常见的添加苏丹红的食品有辣椒粉、辣椒油、红豆腐，红心禽蛋等。
苏丹红学名苏丹(Sudan)，共分为苏丹红I、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ和苏丹红Ⅳ四种。
a.苏丹红I ：1-苯基偶氮-2-萘酚，分子结构式为C6H5N=NC10H6OHb.苏丹红II化学名称为1-[(2,4-二甲基苯)偶氮]-2-萘酚c.苏丹红III化学名称为1-[4-(苯基偶氮)苯基]偶氮-2-萘酚d.苏丹红IV化学名称1-2-甲基-4-[(2-甲基苯)偶氮]苯基偶氮-2-萘酚由于苏丹红是一种人工合成的一种工业染料，1995年欧盟(EU)等国家已禁止其作为色素在食品中进行添加。
但由于其染色鲜艳，印度等一些国家在加工辣椒粉的过程中还容许添加苏丹红I。
我国已在《中华人民共和国食品添加剂使用卫生标准》及《中华人民共和国食品卫生法》中明确规定禁止苏丹红作为食品添加剂在食品中使用。
超高效液相色谱法测定番茄酱中4种苏丹红染料残留效果研究
超高效液相色谱法测定番茄酱中4种苏丹红染料残留效果研究摘要建立了超高效液相色谱（UPLC）对番茄酱中4种苏丹红染料残留的分析方法。
方法以乙腈∶丙酮（v/v）=9∶1为提取溶剂，提取液过中性氧化铝层析柱净化，外标法定量。
结果表明，4种苏丹红染料在4 min全部分离，添加0.02～0.08 mg/kg浓度水平时，4种苏丹红染料加标回收率为83.1%～90.1%，相对标准偏差（RSD）为5.6%～7.2%。
方法检出限（S/N=3）为6.3～10.3 μg/kg，定量限（S/N=10）为18.6～30.4 μg/kg。
该方法简单快速，准确可靠，可用于番茄酱中4种苏丹红日常抽样快速检测。
关键词超高效液相色谱；番茄酱；苏丹红染料；检测苏丹红染料是非生物合成的亲脂性偶氮化合物，一般不溶于水，易溶于有机溶剂，常用于汽油、机油、鞋油和汽车蜡等工业产品的着色[1]。
近年来苏丹红染料被部分违法商家添加到食品表面着色以改善感官度[2]。
据世界卫生组织的国际癌症研究机构（IARC）1995年确定，苏丹红属第三类致癌物质，它能够使老鼠和兔子患癌症。
如果长期大剂量摄入会增加人体致癌的危险性。
欧盟国家已在1995年禁止其作为食用色素，我国在《食品添加剂使用卫生标准》中也禁止将苏丹红作为食品添加剂使用[3]。
在全国范围对食品中苏丹红染料进行了大规模的检测，并将其纳入了相关产品的必检指标[2]。
番茄酱是西餐中的一种重要调味品，是增色、添酸、助鲜、郁香的调味佳品。
被大量用于意大利粉中，也可蘸炸鸡、炸鱼和薯条。
国内对辣椒酱中苏丹红染料的检测有较多报道[2-4]，但番茄酱较少。
而国内已有文献报道检测苏丹红染料残留方法均为高效液相色谱法（HPLC）[1-2，4]，但是方法普遍存在样品分析时间长、检出限高等缺点。
而UPLC由于采用了1.7 μm的小粒子填充柱，柱效提高，有更好的分离效率，缩短了检测时间。
超高效液相色谱快速检测苏丹红染料的方法具有简单、灵敏度高和稳定性好等特点，能够满足批量样品检测的工作要求。
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苏丹红类药物残留检测技术研究进展
王海，单文宠2，董军2，高宝龙2
（1.华北制药集团动物保健品有限责任公司，河北石家庄050041；2.河北农业大学动物医学院，河北保定071000）
摘要：食品中苏丹红药物残留对人体有致癌性，因此探索对苏丹红类药物残留的检测技术的研究具有重要的意义。
本文介绍的苏丹红类药物残留检测技术有高效液相色谱法，荧光分析法，电喷雾解吸电离质谱法，毛细管电泳法，分子印迹技术，酶联免疫吸附法。
关键词：苏丹红；药物残留；检测技术
苏丹红属与工业染料，是人工合成的亲脂性偶氮染料，易溶于有机溶剂，经常被当作食品添加剂而应用。
苏丹红主要包括苏丹红Ⅰ( C16 H12 N2 O) 苏丹红Ⅱ（C18 H16 N2 O) 苏丹红Ⅲ( C22 H16 N4 O) 苏丹红Ⅳ( C24 H20N4 O)，其中苏丹红Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ都是苏丹红I的衍生物，在欧盟,苏丹红类药物被划分为第三类致癌物质[1]。
苏丹红Ⅰ含有“偶氮苯”，当苏丹红类药物在人体内代谢后,偶氮苯就会被降解,然后产生一种中等毒性的致癌物“苯胺”，能够对人体的肝、肾器官产生毒性作用，如果长期食用含有苏丹红类药物的食品还可能诱发膀胱癌，所以全球大多数国家都禁止将苏丹红类药物用于食品生产。
为了有效遏制在食品中添加苏丹红类药物，我们必须建立起行之有效的检测方法，因此探索对苏丹红类药物残留检测技术的研究具有重要的意义。
目前有关苏丹红类药物的检测技术有高效液相色谱法，荧光分析法，电喷雾解吸电离质谱法（DESI-MS），毛细管电泳法，分子印迹技术，酶联免疫吸附法。
1、高效液相色谱法
我国使用高效液相色谱法[2]检测苏丹红药物的一个主要依据是欧盟标准。
高效液相色谱法具有如下优点：1）适用范围宽。
本方法有较高的提取率，既可以用于检测含苏丹红量相对较多的食品，也可以检测含苏丹红量极少的食品。
无论何种形式的样品，都可以用本标准对食品中的苏丹红药物进行检测。
2）高提取率。
要保证检测取得好的结果，首先应将目标化合物从被检测的样品中完全提取出来。
对于纯油基的样品用正己烷直接溶解，可保证提取率达95%；对于水基的食品，经水和丙酮分散后用正己烷提取，也可保证提取率在85%以上。
3）高纯化性能[6]。
本方法利用了氧化铝对苏丹红的强吸附能力，将中性氧化铝粉作固相萃取并对油脂进行饱和性吸附。
氧化铝可以有效脱除样品中的干扰成分，使液相谱图干净清晰。
4）高浓缩倍数。
本方法可获得纯净的目标化合物的洗脱液，因而可以任意比例的进行浓缩。
目标化合物不因为被浓缩而影响其纯净度，可大大降低检出限，即不会对检测结果的准确性产生影响。
此外，本方法因除去了内源干扰，可以发挥出色谱准确定性定量的优势。
2、荧光分析法
目前针对苏丹红药物的检测方法所采用的高效液相色谱法前处理过程比较复杂，检测时间长，费用高，使用该仪器对消耗的试剂的纯度以及操作人员的水平都有极高的要求，在我国的使用受到限制。
荧光分析法[3]具有选择性好、灵敏度高及检测下限低，所需要的仪器检测费用低等优点，荧光分析法可以很好地与结构相似、荧光光谱重叠的混合物进行同时测定。
在蔡其洪的文献中开展了苏丹红的荧光分析研究，该方法无需对药物分离，只需要选择适当的波长差就可以同时测定苏当红药物，检测限也与我国的国标法的检出限接近，为快速检测苏丹红药物残留提供了新的方法。
3、电喷雾解吸电离质谱法
近年发展起来的电喷雾解吸电离质谱法[4]（DESI-MS）能够对表面上吸附的物质直接进行解吸电离，在不需要样品预处理的情况下对陶瓷上的爆炸物和衣物、不同形态的药品等复杂样
品进行快速测定。
本研究将DESI-MS 用于食品中微量苏丹红的测定，并对辣椒面、番茄酱和煎鸡蛋等典型的复杂样品无须样品预处理即可采用二级质谱快速检测其中的微量苏丹红染料。
在本文中进行离子化的机理主要是离子-分子间的质子转移反应，探索了不同溶剂的质子化能力对信号的强度具有的影响以及对不同检测样的研究。
本实验中对所有的样品都均匀分布在10 mm2内的平面上，但是实际上由于使用的是丙酮溶液，能够使苏丹红随着溶剂的渗透而扩散到样品的内部，而在样品内部的苏丹红将不能够被DESI 离子化[9]。
因此，本实验的检出限比实际中的检测限要低一些。
4、毛细管电泳法
毛细管电泳安培检测(CE-AD)是毛细管电泳电化学联用技术[5]，该方法用石英毛细管柱，在pH值＞3的情况下，其内表面带负电，与缓冲液接触时形成双电层，在高压电场作用下，形成双电层一侧的缓冲液由于带正电而向负极方向移动，从而形成电渗流，带电粒子在电场作用下，以各自不同速度向其所带电荷极性相反方向移动而形成电泳。
各种粒子由于所带电荷多少、质量、体积以及形状不同等因素引起迁移速度不同而实现分离。
本方法具有分离效率高选择性大、进样量少等优点。
本文在前人的基础上进行改进，采用毛细管电泳安培检测法对苏丹红药物进行分离检测。
本方法以10mM硼砂为缓冲液，pH为9.3，分离电压21kV，12kV电动进样8s，检测电位1.05V，苏丹红在1.13×10-9 -1.13×10-7 M范围内的线性关系良好(r= 0.9993)，其回收率为93.5％-102.7％,实验证明该方法快速、准确、可靠，可以用于实际样品的测定，成为检测苏丹红药物残留的新技术。
5、分子印迹技术
分子印迹技术(Molecular imprinting technique, MIT)是一种新型的分子识别材料，它能够模仿抗体和抗原的特异性识别机制，将模板分子与功能单体相结合，在模板分子周围形成一个高度交联的刚性高分子，在交联剂的作用下共聚得到固体介质，再通过物理或化学方法将模板分子洗脱，在聚合物的网络结构中留下了与模板分子大小和形状相匹配的立体孔穴，获得具有与目标分子空间构型和功能基团排列相匹配的结合位点的分子印迹聚合物。
分子印迹聚合物对模板客体分子表现出高度的选择识别性能[6]。
由于其卓越的分子识别性能，因而具有潜在的应用价值，可以将引分子印迹技术应用到苏丹红药物残留的检测中来。
6、酶联免疫吸附法
酶联免疫吸附法[7]由于其快速、灵敏度高等优点受到各国研究者的青睐，也成为检测苏丹红药物的主要技术之一。
由于ELISA技术条件要求低，携带方便，操作简便和经济，常以试剂盒的形式出现且易于商品化，已成为一种应用最为广泛和发展最为成熟的生物检测与分析方法，但也存在反应物稳定性差、免疫抗体时间长、存在非特异性反应等缺点和不足，因而发展人工抗体成为新的研究方向，酶联免疫吸附检测法有望在苏丹红类药物残留的检测中的得到广泛应用。
结语
随着国际食品贸易的日益扩大，食品中苏丹红类药物残留对公众的健康构成危害。
以上几种检测苏丹红类药物残留的技术在该领域内有着很大的应用价值和发展前景。
但是这几种方法各自有不足之处。
因此，人们对于苏丹红类药物残留的检测研究仍会不断的持续，相信在不久的将来，一些新型检测苏丹红类药物残留的技术会取代原来传统的检测技术而在该领域发挥更大的作用。
参考文献
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