微生物培养基管理规程
微生物培养基管理规程
一、目的：建立微生物培养基管理规程，规范培养基的管理，保证培养基的质量。
二、范围：适用于检验用微生物培养基的管理。
三、职责：1、品质部：微生物室对培养基的使用负责，包括日常贮存、配制及登记使用情况等。
2、供应部：从可靠的供应商处采购，必要时应当会同品质部对供应商进行评估。
四、内容：1、培养基的管理1.1培养基的购买1.1.1培养基保管人或岗位检验人根据培养基使用情况及剩余量及时向化验室负责人进行申购，经过审批后方可购买，应当从审计合格的供应商处采购，生产厂家应尽量稳定，一次性购入不应过多。
1.2培养基的接收1.2.1培养基购进后，培养基保管人负责接收，并填写相应的接收记录。
1.3培养基的保管1.3.1购进后的培养基应核对品名、数量等，并按照说明书要求的条件进行储存。
1.4培养基的发放1.4.1培养基保管员负责培养基的发放工作，发放本着先进先出的原则。
1.4.2培养基发放前，发放人检查外观是否良好，确认无误后方可发放。
1.4.3填写领用记录1.5培养基制备前的准备工作：1.5.1在使用前，先检查培养基名称及有效期等信息，同时检查其外观，确保符合实验要求。
1.5.2干粉培养基在第一次开瓶使用后及时填写开封人、开封日期及有限期至。
1.5.3配制培养基采用的水为纯化水，配制容器为按实验用清洁管理规程（XYK/SMP-QC0018）内容项下3进行处理的容器。
6培养基的使用6.1在使用前，先检查培养基名称及有效期等信息，同时检查其外观，确保符合实验要求。
6.2干粉培养基在第一次开瓶使用后及时填写开封人、开封日期及有限期至。
2、培养基的制备2.1不同种类培养基根据说明书的要求进行称量、配制、过滤、分装、灭菌。
脱水培养基应完全溶于水中，再进行分装与灭菌，配制时若需要加热助溶，应注意不要过度加热，以避免培养基颜色变深，如需要添加其他组分时，加入后应充分混匀。
2.3 应确定配制的每批灭菌后培养基的pH值（应冷却至室温25℃测定）。
微生物培养基管理规程
1 目的建立检验检测用培养基管理规程，规范检测人员的操作流程。
2 范围适用于检验检测用培养基的管理。
3 职责3.1实验室负责人负责本办法的监督和实施。
3.2检测人员承担培养基的配制、灭菌及保存等工作。
3.3质控人员负责培养基的有效性控制等工作。
4 工作程序4.1培养基的申购根据检测项目、工作量和工作进度的需求，提前一个月进行所需的培养基申购。
建议实验室储备常用培养基一次购买一个季度或者半年的量。
4.2培养基的验收培养基到货后，微生物室检测人员应进行验收。
验收内容包括核对品名、数量、规格、生产厂商，应与申购单一致；检查培养基包装有无破损、包装是否完整、产品是否在有效期内，填写《培养基验收记录表》。
4.3培养基的贮藏未开封的脱水培养基在阴凉、干燥、和避光条件下贮存。
已开封的脱水培养基应盖紧，并严格按照供应商提供的贮存条件、有效期和使用方法进行培养基和试剂的保存和使用。
灭好菌的培养基置相应已灭菌区域备用，灭菌后一般培养基储存期为7天。
4.4培养基的配制4.4.1培养基的添加量、pH值、高温灭菌的时间或温度，都需遵照规定;培养基名称、配方（成品培养基记录体积和重量)、配制日期和配制人员姓名都必须详细记录，填写《培养基配制记录表》。
4.4.2培养基配制批号原则:比如2021年07月01日配制的培养基，配制批号为:210701。
配制好的培养基贴好标签。
(注:同一天同一培养基配置多次的，在原批号后加“-”加“数字”表示，如210701-01）。
4.4.3水及容器的要求：配置培养基应使用室纯水机制出来的水，不得使用自来水，特殊说明时采用蒸馏水或去离子水。
培养基配制使用的容器和配套器具应洁净。
4.4.5称量、溶解及分装：小心称量所需量的脱水合成培养基（需佩戴手套、口罩或在通风柜中操作，以防接触性和吸入含有有毒物质的培养基粉末)，先加入适量的水，充分混合，然后加水至所需的量后，根据说明书要求选择是否加热，并重复或连续搅拌使其快速分散，必要时应完全溶解，制作斜面时培养基需加热煮沸至完全溶解后分装，分装体积不超过容器体积的2/3。
微生物实验室培养基管理规定
微生物实验室培养基管理规定编号：版本：编制：日期：审定：日期：批准：日期：生效日期：管理部门：发放部门：生产部 质管部 工程部 研发部 PMC 采购部 仓库 营销中心 人事行政中心 财务部1.目的：为了规范微生物检验室所用的培养基的制备、贮藏、质量控制及接收，确保检验结果的可靠性和准确性。
2.范围：适用于舒友仪器设备限公司实验室微生物培养基的使用与管理。
3. 职责：微生物室检验人员负责培养基的接收、制备、贮藏、质量控制及储存工作。
4. 管理内容：4.1定义：4.1.1培养基(Media)：是微生物试验的基础，直接影响微生物试验结果。
适宜的培养基制备方法、贮藏条件和质量控制试验是提供优质培养基的保证。
4.2 培养基的制备微生物实验室使用的培养基可按处方配制，也可使用按处方生产的符合规定的脱水培养基。
在制备培养基时，应选择质量符合要求的脱水培养基或按单独配方组分进行配制。
脱水培养基应附有处方和使用说明，配制时应按使用说明上的要求操作以确保培养基的质量符合要求，结块或颜色发生改变的脱水培养基不得使用。
脱水培养基或单独配方组分应在适当的条件下贮藏，如低温、干燥和避光，所有的容器应密封，尤其是盛放脱水培养基的容器。
商品化的成品培养基除了应附有处方和使用说明外，还应注明有效期、贮藏条件、适用性检査试验的质控菌和用途。
为保证培养基质量的稳定可靠，各脱水培养基或各配方组分应准确称量，并要求有一定的精确度。
配制培养基最常用的溶剂是纯化水。
应记录各称量物的重量和水的使用量。
配制培养基所用容器不得影响培养基质量，一般为玻璃容器。
培养基配制所用的容器和配套器具应洁净，可用纯化水冲洗以消除清洁剂和外来物质的残留。
对热敏感的培养基如糖发酵培养基其分装容器一般应预先进行灭菌，保证培养基的无菌性。
脱水培养基应完全溶解于水中，再行分装与灭菌。
配制时若需要加热助溶，应注意不要过度加热，避免培养基颜色变深。
如需要添加其他组分时，加人后应充分混匀。
微生物实验室良好规范 USP_1117
公用系统取样：如，水，无菌取样方式
微生物实验室布局与操作
环境监测取样
仪器设备的摆放与移除对无菌操作要求较低 设备仪器应同时与微生物培养基同时摆放
各类无菌检验：应在控制环境中进行
无菌制剂 原料药 发酵菌种 生物制品菌种
隔离器 <1208>
样品操作
样品操作
操作与储存条件：关键 微生物样品：水、环境监测样、生物负荷样 关键参数： 样品成分 包材成份 储存时间 储存温度 取样操作至检验开始的时间 严格控制 期间的储存条件 样品转移到较远处检测 运输条件确认：时间、温度等 USP <1231> 医药用水
检验时间大于72小时，按天表达
30-35℃, 3 – 5天 上午或下午开始培养，也应同样时间结束
人员培训
人员培训
微生物学教育背景 员工 主管 经理 职责明确 操作规程的培训 检验方法描述 文件编号便于检索化验员接受的培训内容 建立个人培训档案 确认后方能独立操作 培训记录时效性：现行版本与SOP
化验室记录的维护
化验室记录应包括的要素
日期 样品名称 化验员姓名 规程号 记录检验结果 偏差 参数记录
设备、微生物菌种、培养基批号
主管/复核人签名
化验室记录的维护
记录 关键设备，按期校验、有维保记录、使用日志 设备温度（水浴、培养箱、灭菌柜），可追溯 SOP SOP名称与版本号 方法描述应具体详细 书写修改： 单线划掉，签字、日期 原数据不得擦掉、或涂抹 检验结果 原始平板计数：便于复核 图表：装订应安全、数据可读；骑缝签字
首次结果无效
做出结论 进行复验（按复验SOP） 必要时重新取样
Thank You !
人员培训
微生物培养基配制操作规程
微生物培养基配制操作规程1. 引言微生物培养基的配制是微生物学研究中重要的实验操作之一。
培养基的配制质量直接影响微生物培养实验的结果，因此，需要严格按照操作规程进行培养基的配制。
本文档介绍了微生物培养基的配制操作规程，以确保培养基的质量和稳定性。
2. 材料和仪器•试剂：包括蛋白胨、葡萄糖、琼脂、酵母粉、磷酸二氢钾等。
•仪器：包括天平、电热板、烧杯、移液器等。
3. 培养基配制操作步骤3.1 准备工作•清洗容器：将烧杯、烧瓶等容器用肥皂水彻底洗净，再用去离子水冲洗干净，确保容器干净无杂质。
•消毒操作：将容器用高温高压自动消毒器进行消毒处理。
充分消毒后，放置在无菌条件下待用。
3.2 培养基成分配制1.清量试剂：根据配方，使用天平准确称取所需的试剂。
注意避免交叉污染，每次称取完一个试剂后，清洁秤盘。
2.溶解试剂：按照配方所需的顺序，将试剂加入适量的去离子水中，并使用电热板加热搅拌溶解。
3.pH调节：根据培养基的需求，使用磷酸二氢钾或氢氧化钠溶液进行pH调节。
使用pH计检测pH值，调节至所需范围内。
3.3 琼脂平板制备1.蒸汽消毒：将琼脂平板瓶放入高温高压自动消毒器中，进行蒸汽消毒处理。
注意避免瓶内产生真空现象，以免使琼脂变质。
2.冷却倒填：倒出适量的琼脂溶液，均匀铺平于无菌工作台上，并迅速冷却至约40℃左右。
3.加药：将需要添加的抗生素等药物加入琼脂中，并充分混匀。
4.转移菌液：待琼脂冷却凝固后，使用无菌技术将待测微生物菌液转移到琼脂平板上。
3.4 培养基灭菌1.灭菌器验证：使用化学指示剂验证培养基灭菌器的灭菌能力，确保达到灭菌要求。
2.灭菌操作：将配制好的培养基装入无菌烧瓶或试管中，使用高压灭菌器进行灭菌处理，温度和时间根据不同培养基的需求进行设置。
3.冷却保存：灭菌完成后，将烧瓶或试管放置在无菌条件下，待其冷却至室温后，即可进行保存。
4. 注意事项1.操作无菌技术：操作过程中，需要严格采用无菌技术，防止外源菌的污染。
培养基和检定菌管理制度
培养基和检定菌管理制度一、概述为了保障实验室内培养基和检定菌的质量，确保实验结果的准确性和可靠性，特制定本管理制度。
本制度适用于实验室内培养基和检定菌的采购、储存、保管、使用和处理等各个环节。
二、培养基的管理1. 培养基的采购1.1 实验室内所需的培养基应由专门负责采购的人员进行统一采购，采购前应审核供应商的资质和质量保证协议。
1.2 采购人员应根据实验需要的类型和用途，选择合适的品牌和规格的培养基。
1.3 采购人员应对采购的培养基进行验收，并及时将验收结果登记在培养基验收记录表上。
2. 培养基的储存和保管2.1 培养基应储存在干燥、阴凉、通风的环境中，避免高温和潮湿。
2.2 培养基在储存和保管过程中应避免受到日光直射，应放在避光的柜子或箱子内。
2.3 储存室内应有定期检查的制度，确保培养基的有效期和质量。
2.4 培养基的容器上应贴有标签，标注培养基的名称、批号、保质期和储存日期等信息。
3. 培养基的使用和处理3.1 使用培养基前应先进行检查，验证培养基的标签和有效期。
3.2 使用培养基时应遵循相应的操作规程，确保使用过程中的洁净和无菌。
3.3 使用完的培养基应按照规定的程序进行处理，避免对环境和人员造成污染。
4. 培养基的废弃4.1 培养基使用过程中产生的废弃物应按照实验室内的废弃物管理制度进行处理。
4.2 废弃的培养基应分类存放，并在指定的时间内送到指定的处理单位进行处理。
5. 培养基的检定5.1 对新购的培养基应进行检定，确保其质量符合要求。
5.2 对储存一段时间的培养基应进行定期的检定，确保其有效期和质量。
三、检定菌的管理1. 检定菌的采购和保存1.1 实验室所需的检定菌应由专门负责采购的人员进行统一采购，采购前应审核供应商的资质和质量保证协议。
1.2 采购人员应根据实验需要的类型和用途，选择合适的品种和规格的检定菌。
1.3 采购人员应对采购的检定菌进行验收，并及时将验收结果登记在检定菌验收记录表上。
第二节 微生物的培养基
3.增殖培养基（complete media） 在普通培养基中加入一些某种微生物特别喜 欢的营养物质，增加这种微生物的繁殖速度，逐 渐淘汰其他微生物，这种培养基称为增殖培养基。
常用于菌种筛选。
Eg. 要分离出能利用石蜡油进行发酵的酵母菌， 只需在配方里使用石蜡油作碳源。
4.选择性培养基（selected media） 一类根据某微生物的特殊营养要求或其对某 化学、物理因素的抗性而设计的培养基，具有使 混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能，广泛用
2．半固体培养基： 一般用0.2%--0.7%琼脂作凝固剂 用作观察细菌的运动特征、噬菌体效价、各种 厌氧菌的培养机菌种保藏等。
3．液体培养基： 不含任何凝固剂，它常用于大规模的工业 生产及实验室进行微生物生理代谢等研究。
凝固剂必须具有的特点：
a. 不被微生物液化、分解和利用
b. 在微生物生长的范围内保持固体 状态 c. 凝固点的温度对微生物无害 d. 不因消毒灭菌的高温处理而破坏
例如枯草芽孢杆菌：
一般培养：肉汤培养基或LB培养基； 自然转化：基础培养基； 观察芽孢：生孢子培养基；
产蛋白酶：以玉米粉、黄豆饼粉为主的产酶培养基；
根据不同的工作目的，微生物不同的营养需 要，运用自己丰富的生物化学和微生物学知识来
配制最佳的培养基。
培养基的配制4个原则
2、营养协调 基本遵循10倍递减关系 注重C/N比 H20 （10-1） > C （10-2） > N （10-3） > （P、S） （10-4） > K、Mg （10-5） >生长因子（10-6）
高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不仅 不能维持和促进微生物的生长，反而起到抑制或杀 菌作用。
培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响 微生物的生长繁殖和（或）代谢产物的形成和积 累，其中碳氮比（C／N）的影响较大。
微生物培养及保藏标准操作规程
1. 目的规范微生物使用及保藏的相关操作，避免二次污染。
2. 范围适用于企业内所有微生物的使用及保藏3. 职责微生物保管人员负责保藏，质量监督员监督执行情况。
4. 内容4.1培养基需经验证合格后准许使用，使用前需灭菌。
4.2质检菌种的培养及菌种保藏4.2.1大肠埃希菌，金黄色葡萄球菌，枯草芽孢杆菌，白色念珠菌的活化及培养固体平板法：选用适用细菌培养的培养基（如：LB培养基；营养琼脂培养基等）灭菌。
酒精灯旁打开融化的无菌培养基瓶口，在酒精灯火焰上通过2~3次后，打开无菌平皿上盖，在酒精灯火焰上在开口处灼烧2~3次，将培养基到入平皿中，盖上平皿上盖，水平放在超净台上冷却完全凝固后使用。
每次倒平板尽量将培养基到完，并及时放回冰箱4℃保存。
点燃酒精灯，酒精灯外焰灼烧接种针（环），烧至通红，冷却后，在酒精灯旁用接种针（环）轻轻挑取待活化的菌种，进行划线培养。
待长出单菌落，挑取单菌落进行液体振荡培养过夜。
平板制备示意图菌种划线培养示意图4.2.2黑曲霉的培养黑曲霉的培养选择马铃薯葡萄糖培养基，将土豆洗净去皮，切成小块，加入水煮沸20min 后，纱布过滤，清液中加入琼脂粉加热溶解后加入葡萄糖。
待葡萄糖溶解后，分装在试管中，塞上管塞，高压蒸汽灭菌后，将试管摆斜面等凝固后接种使用。
接种时用接种环挑沾取黑曲霉孢子，并在试管斜面上由内向外划波浪线。
接种完毕后塞回试管塞并在霉菌培养箱中进行培养，一般5-7天长出孢子。
孢子长出后，放置在4℃冰箱中保藏。
斜面固体培养基的制备接种环的灼烧示意图试管斜面的接种示意图4.2.3菌种的保藏菌种保藏可分为液体甘油保藏及试管斜面保藏。
大肠埃希菌，金黄色葡萄球菌，枯草芽孢杆菌，白色念珠菌都采用甘油菌保藏法。
黑曲霉孢子悬液可做甘油保藏。
甘油保藏：接种环灼烧冷却后，挑取单菌落进行过夜增值培养16-18h。
移液器吸取1ml 新鲜培养物于1.5ml离心管中，4500r/min常温离心5min，弃上清。
微生物的培养-培养基的配制
发光如星制作
02 培养基的配制及分类
1.培养基 (1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其_生_长__繁__殖__ 的营养基质。 (2)营养组成：一般都含有 水、碳源、氮源 和无机盐。此外，还需要满足 微生物生长对 pH 、特殊营养物质以及O2的需求。 (3)种类 ①按物理状态可分为液体培养基和 固体培养基 。 ②按功能可分为选择培养基和鉴别培养基。
√C.有的培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求
D.营养物质的浓度越高越好
2. 关于微生物的营养，下列说法正确的是( ) A．同一种物质不可能既作碳源又作氮源 B．凡是碳源都能提供能量 C．除水以外的无机物仅提供无机盐
√D．无机氮源也可能提供能量
感谢您的观看
4．培养基的成分及功能
营养物质
作用
功能
主要来源
碳源 氮源 水
能为微生物代谢提供 碳元素
构成生物体的细胞物质和一些代谢 产物，有些是异养生物的能源物质
无机碳源：CO2、NaHCO3 等；有机碳源：糖类、脂质、
蛋白质、有机酸等
产物
无机化合物：N2、NH3、铵 盐、硝酸盐等；有机氮源：
以制备牛肉膏蛋白胨固体培养基为例 (1)计算：依据配方比例，计算配制100 mL的培养基时，各种成分的用量。 (2)称量：准确地称取各种成分。 (3)溶化
(4)灭菌
①灭菌前，调节 pH ②方法：高压蒸汽灭菌法。压力为 100 kPa，
温度为 121 ℃，灭菌时间为 15～30 min
(5)倒平板：待培养基冷却至50 ℃左右时，在酒精灯火焰旁倒平板。
2．培养基的配制原则 （1）目的要明确：配制时应根据微生物的种类、培养目的等确定配制的 培养基种类。 （2）营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。 （3）pH要适宜：细菌为6.5～7.5，放线菌为7.5～8.5，真菌为5.0～6.0，培 养不同微生物所需pH不同。
D-SMP-001-01培养基配制标准操作规程
北京博康健基因科技有限公司培养基管理标准操作规程一、目的：本规程规范了微生物实验室培养基的申购、配制、培养基质量控制、储存、使用、废弃处理等。
二、范围：本规程适用于微生物实验室检验用的所有培养基。
三、责任：QC部质检员对本规程实施负责。
四、内容：1．操作依据：《中国药典》2010年版二部五、正文1.培养基（Media）是指人工配制的生物营养物质，即用人工方法将多种物质按各种微生物生长繁殖的需要配成的一种混合营养物。
通常指干粉培养基（Dehydrated Medium）和配制好的琼脂（Agar）、肉汤（Broths）、稀释液（Diluents）等等。
2.程序2.1.购买2.1.1.质量控制部提出采购计划，并填写《采购计划》，注明培养基名称、数量、质量要求、生产厂家等，由相关人员审核，交采购部采购。
2.1.2.培养基买回后，由使用部门填写领料单，由物流部发出。
2.1.3.领回后的干粉培养基，开瓶后应贴上《开启标签》，注明开口日期、有效期至、开口人、贮存条件，并且不得把原标签覆盖。
使用时填写《干粉培养基使用记录》。
2.1.4.检验人员必须依据培养基生产厂家的操作说明进行配制，并填写《培养基配制使用记录》，配制记录上注明所用培养基的批号；盛装配制好的培养基的容器外应贴《培养基标签》，标签应注明：名称、批号、配制人、配制日期、有效期至等信息。
批号定义为：同一批灭菌的培养基为一批，批号编号方式为年XX，月XX，日XX，流水号XX，例如：2010-05-01配制的培养基第一批灭菌的培养基批号为：10050101。
2.1.5.配制好的培养基应在一定时间内，按说明书规定时间进行灭菌，避免微生物滋生。
2.1.6.必要时，灭菌后的培养基在配制后必须进行pH值的测定以确保符合药典及生产厂家的规定。
2.2.培养基质量控制2.2.1.为了保证微生物检验的质量，在使用前，每批配制好的培养基在灭菌后用于供试品检验之前都应进行培养基质量控制检查。
微生物检定用培养基管理制度
微生物检定用培养基管理制度
1。
微生物检验（包括无菌检查)用培养基应按照药典规定的处方制备或选用按该处方生产的符合规定的脱水培养基.
2.制备培养基时应使用洁净的玻璃器皿及纯化水.
3。
配制培养基应按规定的程序进行，注意培养基的pH值应符合规定。
4.分装好的培养基及时密封后必须在配制当天(2小时内最佳）进行灭菌处理，灭菌的方法应经验证合格.
5.制备好的培养基只能进行一次蒸气灭菌处理。
6.制备好的培养基应保存在2~25℃避光环境中。
7.培养基若保存于非密闭容器中，一般在三周内使用；若保存于密闭容器中，一般可在一年内使用。
8.培养基的配制、灭菌应做好记录。
每个已灭菌的培养基容器外应做好标记，注明名称、配制日期、有效期。
9.培养基必须在有效期内使用.
10.无菌检查用培养基符合无菌性检查和灵敏度检查要求后，方可投入使用。
11.制备好的培养基在储存期间出现失水、沉淀、过期、棉花塞松弛或脱落等异常情况时，应停止使用，销毁处理。
12。
染菌培养基必须经蒸气灭菌后处理。
微生物实验室培养基适用性操作规程
微生物实验室培养基适用性操作规程建立培养基适用性检查操作规程，保证培养基的质量，确保检验结果的准确性。
本规程规定了培养基适用性检查方法和操作要求，适用于微生物实验室计数用培养基、控制菌检查用培养基的适用性检查。
1、简述1.1 培养基适用性检查试验可用于确定实验室所使用培养基(包括购置的不同批号的成品培养基、不同批号的脱水培养基、按处方自行配制培养基所用不同批次的原材料等)、制备程序（包括水质控制、配制方法、灭菌程序等）、保存条件（温度、湿度、时间及盛装培养基的容器条件等）等是否满足微生物限度检查要求。
1.2 计数用培养基适用性检查包括需氧菌、霉菌及酵母菌总数计数。
1.3 控制菌检查用培养基适用性检查包括促生长能力、抑制能力及指示特性的检查。
2 计数用培养基适用性检查微生物限度检查中计数用培养基有5种，胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基、R2A琼脂培养基、平板计数培养基。
2.1 培养基及配制2.1.1 培养基：胰酪大豆胨琼脂培养基、胰酪大豆胨琼脂对照培养基；沙氏葡萄糖琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂对照培养基；R2A琼脂培养基、R2A琼脂对照培养基；平板计数培养基。
2.1.2 配制：照《培养基配制标准操作规程》配制。
2.2 试剂及稀释剂配制2.2.1 试剂：pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液、聚山梨酯80、氯化钠。
2.2.2 稀释剂配制➢∙pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液：称取pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液14.63g,加水1000mL溶解，分装，灭菌（121℃、15min）。
➢∙0.05％（mL/mL）聚山梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液：取已经灭菌好的聚山梨酯80（1mL），加入pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液，摇匀，即得。
➢∙0.9％无菌氯化钠溶液：称取氯化钠9.0g，加水溶解使成1000mL，分装，灭菌（121℃、15min）。
3 试剂及消毒液配制3.1 试剂新洁尔灭溶液、84消毒液、苯酚、75％医用消毒酒精。
微生物培养基配制及灭菌时间控制
微生物培养基配制及灭菌时间控制微生物培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。
由于微生物具有不同的营养类型，对营养物质的要求也各不相同，加之研究的目的不同，所以培养基的种类很多，使用的原料也各有差异，但从营养角度分析，微生物培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。
微生物培养基配制过程1.配制溶液向容器内加入所需水量的一部分,按照培养基的配方,称取各种原料,依次加入使其溶解,最后补足所需水分，对蛋白胨、肉膏等物质,需加热溶解,加热过程所蒸发的水分,应在全部原料溶解后加水补足。
配制固体培养基时,先将上述已配好的液体培养基煮沸,再将称好的琼脂加入,继续加热至完全融化.并不断搅拌,以免琼脂糊底烧焦。
2.调节pH值用pH试纸(或pH电位计、氢离子浓度比色计)测试培养基的pH值,如不符合需要,可用10%HCl或10%NaOH进行调节,直到调节到配方要求的pH值为止。
3.过滤用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培养基过滤.用纱布过滤时,最好折叠成六层,用滤纸过滤时,可将滤纸折叠成瓦棱形,铺在漏斗上过滤。
4.分装已过滤的培养基应进行分装.如果要制作斜面培养基,须将培养基分装于试管中.如果要制作平板培养基或液体、半固体培养基,则须将培养基分装于锥形瓶内。
分装时,一手捏松弹簧夹,使培养基流出,另一只手握住几支试管或锥形瓶,依次接取培养基。
分装时,注意不要使培养基粘附管口或瓶口,以免浸湿棉塞引起杂菌污染。
装入试管的培养基量,视试管和锥形瓶的大小及需要而定.一般制作斜面培养基时,每只15×150毫米的试管,约装3～4毫升(1/4～1/3试管高度),如制作深层培养基,每只20×220毫米的试管约装12～15毫升。
每只锥形瓶装入的培养基,一般以其容积的一半为宜。
5.加棉塞分装完毕后,需要用棉塞堵住管口或瓶口。
堵棉塞的主要目的是过滤空气,避免污染.棉塞应采用普通新鲜、干燥的棉花制作,不要用脱脂棉,以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。
微生物实验室培养基管理规程
大肠埃希菌
6.2.1.4.1促生长能力检查
6.2.1.4.1.1液体培养基促生长能力检查
分别接种不大于100cfu的试验菌于被检培养基和对照培养基中，在相应控制菌检查规定的培养温度及不大于规定的最短培养时间下培养，与对照培养管比较，被检培养基管试验菌应生长良好。
6.2.1.4.1.2固体培养基促生长能力检查
6.2培养基的使用
6.2.1培养基的适用性检查
新购进的每批培养基均应进行适用性检查。随机抽取相同批号的干粉培养基1瓶，按照要求配制后，进行适用性检查。
6.2.1.1培养基的适用性检查可在供试品检查前或与供试品检查同时进行。
6.2.1.2进行培养基适用性检查应填写，《计数用培养基适用性检查记录》和《控制菌检查用培养基适用性检查记录》。
6.2.3.9配制后培养基的批号管理
培养基的批号由培养基配制当天的年月日组成，年份取后2位，月和日不足2位时，分别在数字前加0，如2018年03月03日配制的培养基，其批号应为180303。
6.2.4配制后培养基的使用
6.2.4.1领用配制好的培养基时应及时填写《培养基、稀释液配制灭菌使用记录》。使用前，须仔细检查培养基外观和效期，如发现失水、沉淀、被污染、瓶塞松动等异常情况，则立即弃去，不得再用。
大肠埃希菌
麦康凯液体培养基
麦康凯琼脂培养基
促生长能力
抑制能力
促生长能力+指示特性
大肠埃希菌
金黄色葡萄球菌
大肠埃希菌
沙门菌
RV沙门菌增菌液体培养基
木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基
三糖铁琼脂培养基
促生长能力
抑制能力
促生长能力+指示特性
指示能力
乙型副伤寒沙门菌
微生物检验用培养基标准管理规程
标准操作规程目的：建立一个微生物检验用培养基标准管理规程。
范围：适用于QC责任者：QC化验员、QC主任。
规程：1. 微生物检验用培养基的管理应由QC指定专人负责，此人应具有微生物学专业知识，并经过培训合格。
2. 培养基制备前的准备工作2.1.制备培养基所用的玻璃器皿如：吸管、试管、三角瓶等必须按微生物限度检查法中相应的清洁规程准备好。
•2.2.对新购进的培养基初次使用前必须进行质量检查，并做好记录。
内容包括：名称、配制日期、接种菌名称、接种菌培养基培养结果、结论、检验日期、检验者。
3. 培养基的制备3.1. 按批准的规定程序进行称量、配制、过滤、分装、灭菌。
3.2. 填写配制记录。
内容：名称、配制量、配方（比）、操作方法中重要参数（时间、压力、温度）、配制日期、配制者、截止使用日期。
3.3. 在每个已灭菌的培养基容器外做好标记，注明名称、截止使用期。
3.4. 每类培养基设定编码如下：营养琼脂斜面培养基为A、营养肉汤培养基为B、玫瑰红钠琼脂培养基为C、胆盐乳糖培养基为D……每个编码后的前二位数为年号，后三位数为配制顺序号，如2001年10月3日配制营养琼脂斜面培养基培养基一批，则编号为A01001，其中A为代号，01为年号（即2001年）001为第一次配制。
4. 培养基的质量检查：标准操作规程4.1. 对初次使用前或新购进的培养基均要进行验证、检查，并做好检查记录。
内容：名称、配制日期、接种菌名称、接种菌培养基（阳性检查）结果、未接种菌培养（阴性检查）结果、结论、检查日期、检查者。
4.2. 无菌检查：配制好的培养基应澄清无沉淀，pH符合要求。
将已制备好的平板，按其培养要求，营养琼脂30－35℃培养48小时，虎红琼脂25－28℃培养72小时，应无菌落生长，否则培养基不能使用。
4.3. 灵敏度试验：将已制备好的培养基，用规定的已知菌做生长试验，以评价培养基的灵敏度，不合格者不能用。
将做好的伊红美兰平板，用大肠杆菌标准株划线，置36℃培养24小时后，大肠杆菌应生长良好。
0002016-01 微生物培养基管理规程
目录1.目的32.范围33.定义34.职责35.程序36.相关文件9..7.附件98.历史记录9..9.发放部门9..1.目的建立质量控制实验室培养基管理的规程，指导培养基的购买、接收、领用、配制、适用性检查、使用、贮藏及处理。
2.范围适用于广州科锐特生物科技有限公司质量控制实验室微生物检查用培养基和缓冲液的管理。
3.定义3.1一批（用于实验室配制的培养基）：用脱水培养基配制的培养基，同一次配制且同一次灭菌的，称为一批。
4.职责4.1QC负责本文件的起草、修订、审核、培训及执行。
4.2QA负责本文件的审核及文件执行过程中的监督。
4.3质量负责人负责本文件的审批。
5.程序5.1培养基的申购5.1.1由培养基使用人员根据实验需要提出购买计划，按公司采购程序购买。
应当从可靠合格的供应商处采购，生产厂家应尽量稳定，必要时应当对供应商进行评估，并且一次购入量不宜过多。
供应商需提供培养基的COA，接收人需要核对COA中的信息、，需包括培养基适用性检查结果、有效期、保存条件等内容。
厂家培养基的COA需由综合管理组统一管理储存。
5.2培养基的接收5.2.1培养基购入后，由接收人负责核对培养基名称、规格、数量、生产厂家是否相符，需核对培养基适用性检查结果、有效期等内容，仔细检查培养基包装是否破损，有破损的要剔出；每月定期盘点已接收的培养基，及时剔除过期的培养基。
5.2.2核对无误后，在《培养基台账》上填写相关的信息，并在保存容器外贴上《培养基标签》，不覆盖厂家原有标签。
5.2.3《培养基台账》的内容应包括：品名、接收编号、出厂批号、规格、来源、数量、接收人、接收日期、有效期等。
5.2.4接收编号规则：MM+年份（两位数字）十月份（两位数字）+三位流水号（从001开始，如此类推），例如2019年1月接收的第8批脱水培养基或第8批成品培养基，编号为MM1901008。
若相同生产批次的同种培养基在不同时间接收、不同种类相同批号的培养基、不同生产商同种培养基相同批号都需分别编号。
微生物的培养基
微生物的培养基培养基（medium）是人工配制的,适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质。
无论是以微生物为材料的研究,还是利用微生物生产生物制品,都必须进行培养基的配制，它是微生物学研究和微生物发酵工业的基础。
一、配制培养基的原则1. 选择适宜的营养物质总体而言,所有微生物生长繁殖均需要培养基含有碳源、氮源、无机盐、生长因子、水及能源,但由于微生物营养类型复杂,不同微生物对营养物质的需求是不一样的,因此首先要根据不同微生物的营养需求配制针对性强的培养基。
自养型微生物能从简单的无机物合成自身需要的糖、脂类、蛋白质、核酸、维生素等复杂的有机物,因此培养自养型微生物的培养基完全可以(或应该)由简单的无机物组成。
例如,培养化能自养型的氧化硫硫杆菌(Thiobacillus thiooxidans)的培养基组成（见表6-9）。
在该培养基配制过程中并未专门加入其它碳源物质,而是依靠空气中和溶于水中的CO2为氧化硫硫杆菌提供碳源。
培养其它化能自养型微生物与上述培养基成分基本类似,只是能源物质有所改变。
对光能自养型微生物而言,除需要各类营养物质外,还需光照提供能源。
培养异养型微生物需要在培养基中添加有机物,而且不同类型异养型微生物的营养要求差别很大,因此其培养基组成也相差很远。
例如,培养大肠杆菌的培养基组成比较简单(表6-9),而有些异养型微生物的培养基的成份非常复杂,如肠膜明串珠菌需要生长因子,若配制培养它的合成培养基时,需要在培养基中添加的生长因子多达33种,因此通常采用天然有机物来为它提供生长所需的生长因子。
就微生物主要类型而言,有细菌、放线菌、酵母菌、霉菌、原生动物、藻类及病毒之分,培养它们所需的培养基各不相同。
在实验室中常用牛肉膏蛋白胨培养基（或简称普通肉汤培养基）培养细菌(表6-9);用高氏1号合成培养基培养放线菌(表6-9);培养酵母菌一般用麦芽汁培养基,它是将麦芽粉与4倍水混匀,在58～65℃条件下保温3～4小时至完全糖化,调整糖液浓度为10о巴林, 煮沸后用纱布过滤,调pH为6.0配制而成。
微生物培养基的使用流程
微生物培养基的使用流程1. 准备工作在使用微生物培养基进行培养之前，需要进行一些准备工作，确保操作的安全和有效性。
•清洁实验室台面和工作区域，使用消毒液擦拭干净，避免微生物污染。
•准备所需的培养基和试剂，确保其保存完好，过期的培养基和试剂不要使用。
•检查培养器具的无菌性，如培养皿、试管、移液器等，确保其完整且无细菌污染。
2. 制备培养基微生物培养基是供微生物生长和繁殖所需的营养物质，正确制备培养基对于微生物的成功培养至关重要。
2.1 准备培养基成分根据所需培养的微生物的要求，准备相应的培养基成分。
常见的培养基成分包括：•碳源：如葡萄糖、果糖等，提供微生物生长所需的能量。
•氮源：如胰蛋白胨、酵母提取物等，提供微生物生长所需的氮源。
•矿物质盐：如钠盐、钙盐等，提供微生物生长所需的微量元素。
•pH缓冲剂：如磷酸盐缓冲液等，调节培养基的pH值，使其适合微生物生长。
•琼脂：用于固化培养基，以便于微生物的生长观察和分离。
2.2 制备培养基按照实验室制定的配方和步骤，将培养基成分依次加入无菌的蒸馏水中，充分溶解后加热煮沸，杀灭其中的细菌和酵母等杂质。
然后将溶液倒入无菌培养器具（如培养皿、试管等）中，待其凝固后即可使用。
为确保培养基的无菌性，可以在制备过程中添加适量的抗生素或抗真菌药物，抑制背景细菌或真菌的生长。
3. 培养微生物制备好培养基后，即可进行微生物的培养。
3.1 准备微生物菌种从已有的菌种中选取合适的菌株，进行预培养。
预培养的目的是增加菌株的数量，以便于后续的实验操作。
取一小部分菌株悬浮于培养基中，然后置于恒温培养箱中静置培养一段时间。
3.2 培养微生物取一块已经凝固的培养基，用消毒的铁铲或玻璃棒将微生物菌株均匀涂布在培养基表面。
涂布应避免交叉污染，保持操作的无菌性。
将涂布好的培养基培养皿倒置放置于恒温培养箱中，并设置合适的温度和时间，促进微生物的生长。
4. 培养基的保存培养基的保存对于后续的实验操作至关重要，确保培养基的质量和无菌性。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
微生物培养基管理规程 Prepared on 22 November 2020
Standard Operating Procedure
1、目的：建立培养基管理规程，保证培养基的正确使用。
2、范围：微生物限度检查用的培养基。
3、责任人：微生物限度检查员。
4、正文：
培养基的配方必须符合现行版药典要求。
所用试剂纯度至少为化学纯。
培养基由经过培训的微生物限度检查员配制。
培养基的消毒必须严格按现行版药典规定执行。
培养基凝固后应透明、无沉淀。
培养基使用前须按规定灭菌，达到无菌后在冷藏箱中贮存。
灭菌后的培养基一般在二周内用完，否则应检查培养基是否无菌。
检查培养基是否无菌，可将细菌培养基经30～35℃，48小时培养，霉菌培养基经20～25℃，72小时培养后检查无菌方可使用。
检查合格的培养基必须在三日内使用。
经加热使用后剩余的培养基不得再重复使用。
培养基使用完毕须将用具及时清洗干净、晾干，保存在规定位置防止污染。