2019年春高中生物专题1基因工程1.1DNA重组技术的基本工具第1课时预习学案新人教版
2019-2020高中生物专题1基因工程1DNA重组技术的基本工具检测(含解析)
1.1 DNA重组技术的基本工具一、选择题题型一对基因工程的诞生及概念的理解1．科学家将发光基因导入烟草细胞内，培育出了发光的烟草，以下有关该过程中应用的技术，叙述正确的是（）A．该技术是在细胞水平上进行设计和施工的B．该技术的操作环境是在生物体内C．该技术的原理是基因突变D．该技术的优点是定向产生人类需要的生物类型答案D解析基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品,D正确；该技术是基因工程技术，是在DNA分子水平上进行设计和施工的,A错误；该技术的操作环境是在生物体外，B错误；基因工程的生物学原理是基因重组，C错误。
2．下列叙述符合基因工程概念的是( )A．在细胞内直接将目的基因与宿主细胞的遗传物质进行重组，赋予生物新的遗传特性B．将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人的干扰素的菌株C．用紫外线照射青霉菌,使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株D．自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上答案B解析基因工程不能在生物细胞内直接将目的基因与宿主细胞的遗传物质进行重组，不符合基因工程的概念,A错误;将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人的干扰素的菌株，符合基因工程的概念，B正确；用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株，属于诱变育种，不符合基因工程的概念,C错误；基因工程是通过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物新的遗传特性，噬菌体自行感染细菌并将自身DNA 导入细菌细胞不符合基因工程的概念，D错误.题型二限制酶来源及作用3．下列有关基因工程中限制酶的描述,正确的是（）A．限制酶只能识别6个或8个脱氧核苷酸组成的序列B．限制酶的活性受温度的影响C．限制酶能识别和切割RNA和DNAD．限制酶只能从原核生物中提取答案B解析限制酶能够识别并切割双链DNA分子上特定的核苷酸序列，大多数限制酶能够识别由6个核苷酸组成的序列，少数可以识别由4、5或者8个核苷酸组成的序列，A、C错误；限制酶的化学本质是蛋白质，活性受温度影响，B正确;限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，在真核生物细胞内也可能存在，例如酵母菌，D错误。
选修3专题一 基因工程第1课时DNA重组技术的基本工具
高中生物人教版选修3 专题1 基因工程1.1 DNA重组技术的基本工具(编写人：宋英坚 )班别姓名学号第小组【核心素养目标】1. 了解基因工程的基本概念；2. 简述DNA重组技术所需的三种基本工具；3．说出三种工具的基本作用是什么；【基础知识梳理】（课前自主学习课本P1-7，完成基础知识）一、基因工程的概念基因工程是指按照人们的意愿,进行严格的设计,并通过体外DNA重组和①等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
由于基因工程是在②水平上进行设计和施工的,因此又叫作DNA重组技术。
二、DNA重组技术的基本工具1.“分子手术刀”——③(1)来源:主要是从④中分离纯化出来的。
(2)作用:能够识别双链DNA分子的某种特定的⑤, 并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的⑥断开。
(3)结果:DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式——⑦或平末端。
(4)大部分限制性核酸内切酶所识别的序列由⑧个核苷酸组成,也有少数限制酶的识别序列由4、5或8个核苷酸组成。
无论是6个核苷酸还是4个核苷酸,都可以找到一条中心轴线,中心轴线两侧的双链DNA上的碱基是⑨排列的。
2.“分子缝合针”——⑩。
(1)种类:根据酶的来源不同,可以分为两类,即连接酶和连接酶。
(2)作用:将双链DNA片段缝合起来,恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的。
(3)区别:E·coli DNA连接酶只能将双链DNA片段互补的之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA 连接酶能“缝合”,但连接平末端之间的效率比较低。
3.“分子运输车”——载体(1)作用:将送入受体细胞。
(2)种类:质粒、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒等。
最常用的载体是,它是一种具有能力的双链环状DNA分子。
1/ 4【课堂探究】（组内互学—合作完成—小组展示—教师点评）（18分钟）限制性核酸内切酶问题探究1.限制性核酸内切酶是从哪里获得的?2.限制性核酸内切酶是否具有专一性?体现在哪些方面?3.某种限制酶只能识别GAATTC序列,并在G和A之间将这段序列切开,如果目的基因是试画出经该限制酶切割之后所得的黏性末端。
第1课时 基因工程的操作工具
第1课时基因工程的操作工具第1课时基因工程的操作工具课程一.1 DNA重组技术的基本工具【课前导学】1.1 DNA重组技术的基本工具一、基因工程的原理：基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外赋予生物新的基因特征，创造更符合人们需求的新生物类型和生物产品。
因为基因工程是在水平水平上设计和建造的，所以也被称为基因工程。
二、限制性核酸内切酶1.切割DNA的工具是，也称为。
2、这类酶在生物体内能将外来的dna切断，即能够限制异源dna的侵入并使之失去活力，但对自己的dna却无损害作用，这样可以保持细胞原有的遗传信息。
3.由于这种切割是在DNA分子内进行的，因此被称为限制性内切酶（简称限制性内切酶）。
4.DNA分子的限制性内切酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式，即和。
三、dna连接酶――“分子缝合针”根据DNA连接酶的不同来源，它们可分为两类：一类是从大肠杆菌中分离得到的，称为e?colidna连接酶。
e?colidna连接酶只能将连接起来，不能将双链dna片段平末端之间进行连接。
另一种是从T4 DNA连接酶中分离出来的。
T4 DNA连接酶可以“缝合”互补和双链DNA片段，但连接效率相对较低。
四、基因进入受体细胞的载体――“分子运输车”1.在基因操作过程中，载体有两个用途：一是作为载体将目标基因转移到宿主细胞；第二种是利用它在宿主细胞中复制大量目标基因。
2、现在通常使用的载体是，它是一种相对分子质量较小、独立于拟核dna之外的环状dna，有的细菌中有一个，有的细菌中有多个。
3.质粒可以通过细菌之间的连接从一种细菌转移到另一种细菌，这种连接可以复制或整合到细菌假核DNA中，并通过假核DNA的复制进行复制。
4、其他载体还有和等。
5、作为载体必须具备以下条件：能在宿主细胞中复制并稳定保存；具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接；它有一些用于筛选的标记基因，如抗生素耐药基因、产品颜色反应基因等[摘要]归纳点1基因工程的概念基因工程的别名操作环境操作对象操作水平基本过程结果归纳点2基因工程的工具及其比较基因剪接技术或DNA重组技术→ 拼接→ 介绍→ 在生物体外的基因DNA分子水平上表达人类所需的基因产物1。
生物选修3专题1_基因工程__1.1DNA重组技术的基本工具_训练案及答案
高中高效课堂 高一生物 训练案一、选择题：1．在基因工程中，科学家所用的“剪刀”、“针线”和“载体”分别是指( )A.大肠杆菌病毒、质粒、DNA 连接酶B.噬菌体、质粒、DNA 连接酶C.DNA 限制酶、RNA 连接酶、质粒D.DNA 限制酶、DNA 连接酶、质粒 2．不属于质粒被选为基因运载体的理由是 （ ）A ．能复制 B.有多个限制酶切点 C ．具有标记基因 D ．它是环状DNA3．下列四条DNA 分子，彼此间能连接在一起的一组粘性末端是 （ ）① ②③ ④A ．①②B ．②③C ．③④D ．②④ ４．质粒是基因工程中最常用的运载体，它的主要特点是①能自主复制 ②不能自主复制 ③结构很小 ④蛋白质 ⑤环状RNA ⑥环状DNA ⑦能“友好”地“借居”A ．①③⑤⑦B ．①④⑥C ．①③⑥⑦D ．②③⑥⑦５．有关基因工程的叙述中，错误的是 （ ）A ．DNA 连接酶将黏性未端的碱基对连接起来B ．限制性内切酶用于目的基因的获得C ．目的基因须由载体导入受体细胞D ．人工合成目的基因不用限制性内切酶６．实施基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限性内切酶。
一种限制性内切酶能识别DNA 子中的GAATTC 顺序，切点在G 和A 之间，这是应用了酶的（ ）A ．高效性 B.专一性 C ．多样性 D.催化活性受外界条件影响７．人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因的主要作用是A . 提高受体细胞在自然环境中的耐药性 B. 有利于对目的基因是否导入进行检测C. 增加质粒分子的分子量 D ．便于与外源基因连接8．下列属于基因运载体所必须具有的条件是（多选） （ ）A 、具有某些标志基因B 、具有环状的DNA 分子C 、能够在宿主细胞内复制D 、具有多种限制性内切酶9．下列哪些可作为基因工程技术中常用的基因运载工具（多选） （ ）A ．大肠杆菌B ． 质粒C ．动物病毒D ． 线粒体 10．在基因工程中使用的限制性核酸内切酶，其作用是( )A.将目的基因从染色体上切割出来B.识别并切割特定的DNA 核苷酸序列C.将目的基因与运载体结合D.将目的基因导入受体细胞11．多数限制性核酸内切酶切割后的DNA 末端为A 、平头末端B 、3突出末端C 、5突出末端D 、粘性末端 12．在基因工程中通常所使用的质粒是（ ） A 、细菌的染色体DNA B 、细菌拟核外的DNA C 、病毒染色体DNA D 、噬菌体DNA13．下列关于限制酶的说法不正确的是( )A.限制酶广泛存在于各种生物中，在微生物细胞中分布最多B.不同的限制酶识别不同的核苷酸序列C.限制酶能识别不同的核苷酸序列，体现了酶的专一性D.限制酶的作用只是用来提取目的基因 14．（05全国Ⅰ）镰刀型细胞贫血症的病因是血红蛋白基因的碱基序列发生了改变。
2019高中生物 专题1 基因工程 1.1 DNA重组技术的基本工具学案 新人教版选修3
1．1 DNA重组技术的基本工具[学习目标] 1.基因工程的概念、诞生和发展。
2.DNA重组技术所需三种基本工具的作用。
3.基因工程中载体需要具备的条件。
方式一抗虫棉的研究开发是中国发展农业转基因技术，打破跨国公司垄断，抢占国际生物技术制高点的成功事例。
抗虫棉的应用使棉铃虫得到了有效控制，使杀虫剂用量降低了70%～80%，有效保护了农业生态环境，减少了农民喷药中毒事故，为棉花生产和农业的可持续发展做出了巨大贡献。
师：要实现抗虫基因在棉花中的表达，提前要做哪些关键工作？生：要将抗虫基因切割下来；要将抗虫基因整合到棉花的DNA上。
师：这里存在一个基因转移的实际问题，就是如何将控制抗虫的基因转入棉花细胞的问题。
师：中国有句俗语叫“没有金刚钻儿，不揽瓷器活儿”。
科学家们在实施基因工程之前，苦苦求索，终于找到了实施基因工程的三种“金刚钻儿”，使基因工程的设想成为了现实。
这三种“金刚钻儿”是什么？有什么特点和具体作用？下面我们就来学习这方面的内容。
方式二科学设想，能否让禾本科植物也能固定空气中的氮？能否让细菌“吐出”蚕丝？能否让微生物产生人的胰岛素、干扰素等珍贵的药物？经过多年努力，科学家于20世纪70年代创立了可以定向改造生物的新技术——基因工程。
这一技术是在DNA分子水平上进行的，在微小的DNA分子上进行的操作，需要专用的工具。
这些工具是什么？各自的作用是什么？让我们一起来了解一下吧！一、基因工程的概念和诞生1．基因工程的概念基因工程是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
又称为DNA 重组技术。
2．基因工程的诞生(1)理论基础①DNA是遗传物质的证明。
②DNA双螺旋结构和中心法则的确立。
③遗传密码的破译：所有生物共用一套遗传密码。
(2)技术支持①基因转移载体的发现：质粒有自我复制能力，并且可以在细菌细胞间转移。
人教版高中生物选修3基因工程专题练习
人教版高中生物必修3基因工程专题练习专题1基因工程1.1DNA重组技术的基本工具课下提能一、选择题1．下列关于限制酶的说法正确的是()A．限制酶主要是从真核生物中分离纯化出来的B．一种限制酶通常只能识别一种特定的核苷酸序列C．不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端D．限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键解析：选B限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，A错误；一种限制酶通常只能识别一种特定的核苷酸序列，B正确；DNA分子经限制酶切割后会形成黏性末端或平末端，C错误；限制酶的作用部位是双链DNA分子特定核苷酸之间的磷酸二酯键，D错误。
2．(2019·扬州期末)下列有关限制酶和DNA连接酶的叙述正确的是() A．用限制酶剪切获得一个目的基因时得到两个切口，有2个磷酸二酯键被断开B．限制酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的概率就越大C．序列—CATG↓—和—G↓GATCC—被限制酶切出的黏性末端碱基数不同D．T4DNA连接酶和E·coli DNA连接酶都能催化平末端和黏性末端的连接解析：选B用限制酶剪切获得一个目的基因时得到两个切口，有4个磷酸二酯键被断开，A错误；限制酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的概率就越大，B正确；序列—CATG↓—和—G↓GATCC—被限制酶切出的黏性末端碱基数相同，都是4个，C错误；T4DNA连接酶和E·coli DNA连接酶都能催化黏性末端的连接，其中只有T4DNA连接酶还可以连接平末端，D错误。
3．(2019·深圳期末)下列关于基因工程中的DNA连接酶的叙述不正确的是()A．DNA连接酶的化学本质是蛋白质B．DNA连接酶能够连接两个DNA片段之间的磷酸二酯键C．基因工程中可以用DNA聚合酶替代DNA连接酶D．根据来源不同，DNA连接酶可分为E·coli DNA连接酶和T4DNA连接酶两大类解析：选C DNA连接酶的化学本质是蛋白质，根据来源不同可分为E·coli DNA连接酶和T4DNA连接酶两大类，DNA连接酶连接的是两个DNA片段之间的磷酸二酯键，而DNA聚合酶连接的是DNA片段与游离的脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，因此在基因工程中不能用DNA聚合酶替代DNA连接酶。
2019-2020学年高中生物专题1基因工程1.1DNA重组技术的基本工具课堂演练新人教版选修
1.1 DNA重组技术的基本工具课堂演练当堂达标1 •科学家们经过多年的努力，创立了一种新兴生物技术一一基因工程。
实施该工程的最终目的是（）A. 定向提取生物体的DNA分子B. 定向地对DNA分子进行人工“剪切”C. 在生物体外对DNA分子进行改造D. 定向地改造生物的遗传性状解析：基因工程的内容就是在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”,对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需的基因产物，也就是定向地改造了生物的遗传性状。
答案：D2. 下列关于限制酶的说法，正确的是（）A. 限制酶广泛存在于各种生物中，其化学本质是蛋白质B. —种限制酶只能识别一种或一类特定的核苷酸序列C. 不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端D. 限制酶均能特异性地识别由6个核苷酸组成的序列解析：限制酶主要存在于微生物中，A错误；限制酶具有专一性，即一种限制酶只能识别一种或一类特定的核苷酸序列，B正确；不同的限制酶切割DNA后会形成黏性末端或平末端，C错误；限制酶均能特异性地识别核苷酸序列，但识别的核苷酸序列不一定是由6个核苷酸组成的，D错误。
答案：B3. 下列关于DNA连接酶的作用的叙述，正确的是（）A. 将单个核苷酸加到某DNA片段末端，形成磷酸二酯键B. 将断开的两个DNA片段的骨架连接起来，重新形成磷酸二酯键C. 连接两条DNA链上碱基之间的氢键D. 只能将双链DNA片段互补的黏性末端连接起来解析：选项A是DNA聚合酶的作用，故A项错误。
DNA连接酶能将双链DNA片段末端连接起来，重新形成磷酸二酯键，故B项正确、C项错误。
D项只涉及了E - coli DNA连接酶的作用T4 DNA连接酶还可以连接平末端，故D项错误。
答案：B4 •如下图是基因工程主要技术环节的一个基本步骤，这一步骤需用到的工具酶是 （ ）A. DNA 1接酶和解旋酶B. DNA 聚合酶和限制性核酸内切酶C. 限制性核酸内切酶和 DNA 连接酶D. DNA 聚合酶和 RNA 聚合酶DNA 连接酶。
2019年春高中生物基因工程1.1DNA重组技术的基本工具课件新人教版选修
2．下表为常用的限制性核酸内切酶(限制酶)及其识别序列和切割
位点，以下说法中，推断正确的是( )
限制性
识别序列
限制性核
识别序列
核酸内切酶 和切割位点 酸内切酶 和切割位点
BamHⅠ
↓ GGATCC
KpnⅠ
EcoRⅠ
↓ GAATTC
Sau3AⅠ
HindⅡ
↓ GTYRAC
SmaⅠ
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基因工程的工具酶
探究 1 限制酶的切割方式 (1)上下交错切割：限制酶在 DNA 双链的不同位置切割 DNA(即 在识别序列的中轴线两侧切割)，产生的 DNA 片段末端不是平 齐的，即黏性末端，如下图：
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该 EcoRⅠ限制酶的识别序列为__—__G__A_A_T__T_C__—___，切点是在 _G__和__A_之__间__。
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(2)与限制酶的关系
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观察下图，讨论限制酶切割和 DNA 连接酶的位置在________(填 “1”“2”“3”或“4”)处。
提示：2、4
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与 DNA 分子相关的四种酶的比较
种类 限制酶
项目
DNA 连接酶
DNA 聚合酶
解旋酶
作用底物 DNA 分子 DNA 分子片段 脱氧核苷酸 DNA 分子
注：Y 表示 C 或 T，R 表示 A 或 G。
↓
GGTACC ↓
GATC ↓
CCCGGG
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A．一种限制酶只能识别一种核苷酸序列 B．限制酶切割后一定形成黏性末端 C．不同的限制酶可以形成相同的黏性末端 D．限制酶的切割位点在识别序列内部
2019-2020年高中生物专题1基因工程1.1DNA重组技术的基本工具讲基础版含解析新人教版选修
2019-2020年高中生物专题1基因工程1.1DNA 重组技术的基本工具讲基础版含解析新人教版选修一、基因工程的概念【知识点讲解】(1)供体：提供目的基因。
(2)操作环境：体外。
(3)操作水平：分子水平。
(4)原理：基因重组。
(5)受体：表达目的基因。
(6)本质：性状在受体体内的表达。
(7)优点：克服远缘杂交不亲和的障碍，定向改造生物的遗传性状。
二、基因工程的基本工具【知识点讲解】(1)限制性核酸内切酶(简称：限制酶)①来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。
②作用：识别特定的核苷酸序列并切开特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
③结果：产生黏性末端或平末端。
(2)DNA 连接酶①种类：按来源可分为E·coli DNA 连接酶和T 4DNA 连接酶。
②作用：将双链DNA 片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
③DNA 连接酶和限制酶的关系(3)载体①种类：质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。
②质粒的特点⎩⎪⎨⎪⎧ 能自我复制有一个至多个限制酶切割位点有特殊的标记基因【典型例题1】限制性核酸内切酶、DNA 连接酶等酶的作用1.如图为DNA 分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制酶、DNA 聚合酶、DNA 连接酶、解旋酶作用的正确顺序是( )A.①②③④B.①②④③C.①④②③D.①④③②【答案】C【解析】限制酶可在特定位点对DNA分子进行切割；DNA聚合酶在DNA分子复制时将脱氧核苷酸连接成脱氧核苷酸链；DNA连接酶可将限制酶切开的磷酸二酯键连接在一起；解旋酶的作用是将DNA双链解开螺旋，为复制或转录提供模板。
【典型例题2】载体的作用及特点分析下列关于载体的叙述中，错误的是( )A.载体与目的基因结合后，实质上就是一个重组DNA分子B.对某种限制酶而言，载体最好只有一个切点，但还要有其他多种酶的切点C.目前常用的载体有质粒、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒D.载体具有某些标记基因，便于对其进行切割【答案】D。
高中生物专题1基因工程1.1DNA重组技术的基本工具预基础版含解析新人教版选修3
专题1 基因工程 1.1 DNA重组技术的基本工具（预）【预习目标】1.简述DNA重组技术所需三种基本工具的作用。
2.认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。
【知识梳理】一、基因工程的概念基因工程又叫做技术或技术，是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外和等技术，赋予生物以新的，从而创造出更符合人们需要的新的和。
二、基因工程中的工具1.限制性核酸内切酶⑴简称：。
⑵来源：主要是从中分离纯化而来的一类酶。
⑶种类：约4000种。
⑷功能：识别双链DNA分子某种；使每一条链中的断开。
⑸酶切后的DNA末端：、。
2.DNA连接酶⑴作用：将两个DNA分子片段“”起来，恢复被切开了的两个核苷酸之间的。
⑵种类：和。
3.基因进入受体细胞的载体⑴必备条件：①能够在受体中进行，或整合到上，随进行同步复制。
②多个，供外源DNA片段插入；③具有，便于鉴定和选择。
⑵载体的种类：①质粒：是一种的、结构、独立于细菌之外，并具有能力的分子。
②的衍生物。
③病毒。
⑶真正被用作载体的质粒是的。
【课前热身】1.基因工程技术也称为DNA重组技术，其实施必须具备的四个必要条件是（）A.目的基因、限制性内切酶、运载体、体细胞B.重组DNA、RNA聚合酶、限制性内切酶、连接酶C.工具酶、目的基因、运载体、受体细胞D.模板DNA、信使RNA、质粒、受体细胞2.不属于质粒被选为基因运载体的理由是（）A.能复制B.有多个限制酶切点C.具有标记基因D.它是环状DNA3.下列有关基因工程中限制性核酸内切酶的描述，错误的是（）A.一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列B.限制性核酸内切酶的活性受温度影响C.限制性核酸内切酶能识别和切割RNAD.限制性核酸内切酶可从原核生物中提取4.DNA连接酶催化的反应是（）A.DNA复制时母链与子链之间形成氢键B.黏性末端碱基之间形成氢键C.两个DNA片段黏性末端之间的缝隙的连接D.A、B、C都不正确。
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DNA重组技术的基本工具课前预习学案一、预习目标简述DNA重组技术所需的三种基本工具。
二、预习内容1、基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过______________和_______等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
由于基因工程是在__________水平上进行设计和施工的，因此又叫做______________。
2、培育转基因抗虫棉的操作过程至少需要三种工具，即_________________的“手术刀”、_______________________的“缝合针”、将体外重组好的DNA导入受体细胞的“_________”。
3、切割DNA的工具是________________，又称______。
这类酶主要是从________中分离纯化而来的。
它们能够________________________________________，并且使每一条链中特定部位的_________________的____________断开。
DNA分子经过限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式——________和______。
4、将切割下来的DNA片段拼接成新的D NA分子，是靠____________来完成的。
根据酶的来源不同，可以将这些酶分为两类：一类是从________中分离得到的，称为E·coliDNA连接酶；另一类是从T4噬菌体中分离出来的，称为_____________。
这两类酶都可以恢复被限制酶切开了的____________________________。
5、质粒是一种裸露的、________、独立于细菌染色体（即拟核DNA）之外，并具有_________________的_______________分子。
它有一个至多个______________，供外源DNA 片段插入其中。
携带外源DNA的质粒进入受体细胞后，停留在细胞中进行________，或者整合到染色体DNA上，随染色体DNA____________。
它还有特殊的____________，如抗四环素、氨苄青霉素等标记基因，供重组DNA的__________。
在基因工程中所使用的运载体除质粒外，还有_________________、___________等。
三、提出疑惑课内探究学案一、学习目标及重难点1、简述DNA重组技术所需的三种基本工具。
2、认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。
学习重点：DNA重组技术所需的三种基本工具的作用。
学习难点：基因工程载体需要具备的条件。
二、学习过程1、基因工程的概念回答：什么是基因工程？2、科技探索之路（基因工程是如何发展起来的？阅读课本P2—3页）思考并回答：（1）基因工程是在哪些学科的基础上发展起来的？（2）哪些基础理论的突破催生了基因工程？（3）哪些技术发明促进了基因工程的实施？（4）你觉得，基因工程的诞生和发展能否离不开理论研究和技术创新？3、限制性核酸内切酶——“分子手术刀”思考并回答：（1）从噬菌体侵染细菌的实验来看，细菌等单细胞原核生物容易受到自然界外源DNA 的入侵，那么这类原核生物之所以长期进化而不绝灭，有什么保护机制？由此可知，限制酶可以从哪些生物中分离出来？（2）限制酶是如何切割DNA分子的？（3）参考课本P4图1—2，指出限制酶能破坏那个磷酸二酯键。
（4）以EcoRI为例，画出限制酶切割后形成的末端。
4、DNA连接酶——“分子缝合针”思考并回答：（1）DNA连接酶是怎么分类的？（2）DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事儿吗？有哪些区别？（3）E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶作用效果一样大吗？为什么？5、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”思考并回答：（1）载体的作用是什么？为什么需要载体？把单独的DNA片段导入受体细胞不行吗？（2）我们选用从霍乱弧菌中分离出来的质粒做载体，可以吗？为什么？（3）我们能不能用肉眼直接观察到载体进入受体细胞？那如何鉴定呢？（4）如果载体上没有限制酶切割位点，能否把目的基因运输进入受体细胞？6、活动：模拟操作重组DNA分子（分组进行；完成后小组之间进行交流）1、下图是基因工程主要技术环节的一个基本步骤，这一步需用到的工具是（）A．DNA连接酶和解旋酶 B．DNA聚合酶和限制性核酸内切酶C．限制性核酸内切酶和DNA连接酶 D．DNA聚合酶和RNA聚合酶2、依右图有关基因工程的工具酶功能的叙述，不．正确的是（）A.切断a处的酶为限制性核酸内切酶B.连接a处的酶为DNA连接酶C.切断b处的酶为解旋酶D.切断b处的酶为限制性核酸内切酶3、以下说法正确的是（）A．所有的限制酶只能识别同一种特定的核苷酸序列B．质粒是基因工程中惟一的载体C．载体必备的条件之一是：具有一个或多个限制酶切点，以便与外源基因连接D．基因治疗主要是对有缺陷的细胞进行修复4．、不．．属于质粒被选为基因运载体的理由是（）A．能复制 B．有多个限制酶切点C．具有标记基因 D．它是环状DNA5、科学家选用的细菌质粒往往带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因的主要作用是（）A．提高受体细胞在自然环境中的耐热性 B．有利于检测目的基因否导入受体细胞C．增加质粒分子的相对分子质量 D．便于与外源基因连接课后练习与提高1、限制酶是一种核酸切割酶，可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列。
下图为四种限制酶BamH I，EcoR I，HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列。
箭头表示每一种限制酶的特定切割部位，其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合？其正确的末端互补序列为何？（）A. BamH I和EcoR I；末端互补序列—AATT—B. BamH I和HindⅢ；末端互补序列—GATC—C. EcoR I和HindⅢ；末端互补序列—AATT—D. BamH I和Bgl II；末端互补序列—GATC—2、在基因工程中，把选出的目的基因（共1000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸460 个），放入DNA扩增仪中扩增4代，那么，在扩增仪中应放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数是（）A．540 个 B．7560个 C．8100 个 D．17280 个3、基因工程是DNA分子水平的操作，下列有关基因工程的叙述中，错误的是 ( )A、限制酶只用于切割获取目的基因B、载体与目的基因必须用同一种限制酶处理C、基因工程所用的工具酶是限制酶，DNA连接酶D、带有目的基因的载体是否进入受体细胞需检测4、下列关于DNA连接酶的叙述中，正确的是（）A. DNA连接酶连接的是两条链碱基对之间的氢键B. DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖C. DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和核糖D. 同一种DNA连接酶可以切出不同的黏性末端5、与“限制性内切酶”作用部位完全相同的酶是：（）A．反转录酶B．RNA聚合酶C．DNA连接酶 D．解旋酶6、下列有关质粒的叙述，正确的是（）A ．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器B ．质粒是细菌细胞质中能自主复制的小型环状DNA 分子C ．质粒只有在侵入宿主细胞后才能在宿主细胞内复制D ．细菌质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立进行的7、关于右图DNA 分子片段的说法正确的是 （ ）A ．限制性内切酶可作用于①部位，解旋酶作用于③部位B ．②处的碱基缺失导致染色体结构的变异C ．把此DNA 放在含15N 的培养液中复 制2代，子代中含15N 的DNA 占3/4D ．该DNA 的特异性表现在碱基种类和（A+T ）/（G+C ）的比例上8、下列有关基因工程的叙述，正确的是： （ ）A ．DNA 连接酶的作用是将两个黏性末端的碱基连接起来B ．目的基因导入受体细胞后，受体细胞即发生基因突变C ．目的基因与运载体结合的过程发生在细胞外D ．常使用的运载体有大肠杆菌、噬菌体和动植物病毒等9、限制酶在DNA 的任何部位都能将DNA 切开吗？以下是四种不同限制酶切割形成的DNA 片段：(1) …CTGCA (2) …AC (3) GC ……G …TG CG …（4）…G (5) G … (6) …GC…CTTAA ACGTC … …CG(7) GT … (8)AATTC …CA … G …请用DNA 连接酶将它们连接起来:______和_____能连接成_________________________;______和_____能连接成_________________________;______和_____能连接成_________________________;______和_____能连接成_________________________。
10、下图是利用基因工程办法生产人白细胞干扰素的基本过程图，据图回答：（1）①过程需要___________酶的参与。
（2）②物质是从大肠杆菌分离出的_________________。
其化学本质是________________，它必须能在宿主细胞中__________________________。
(3)③过程表明目的基因______________________________________________。
A T TG C A T T 15N 14N … …。