钩藤总生物碱提取工艺研究

钩藤总生物碱提取工艺研究
窦月1，周洪雷1，蔡梅超1，查慧敏
2
（1.山东中医药大学，山东济南250355；2.山东省警官培训学院，山东济南250014）
摘要：目的：优选钩藤总生物碱的提取工艺。

方法：以钩藤总碱含量和提取液干膏率为综合评价指标，对乙醇用
量、
浓度、提取时间及次数四因素进行正交考察。

结果：钩藤总碱的最佳提取工艺为10倍量75%乙醇提取3次，提取时间2h 。

结论：提取工艺可稳定可行。

关键词：钩藤；总生物碱；提取中图分类号：R284．2文献标识码：A 文章编号：1000－1719（2011）05－0944－02
Study On Extraction Processes Of Total Alkaloids From Ramulus Uncariae Cum Uncis
DOU Yue 1，ZHOU Hong-lei 1，CAI Mei －chao 1，ZHA Hui-min 2
（1.Shandong University of TCM ，Jinan 250355，Shandong ，China ；2.Shandong Training Police College ，Jinan 250014，Shandong ，China ）
Abstract ：Objective ：Investigate the best extract artwork of expressed total alkaloids from Ramulus Uncariae Cum Uncis．Meth-ods ：The orthogonal design was adopted with extractive yield and the content of total alkaloids as indices．Four factors were studied
in this experiment ，including the alcohol consumption ，alcohol concentration ，time of extraction ，and times of extraction．Results ：The best extract process is extract 3times with 10times 75%alcohol ，each time for 2h．Conclusion ：This extract process is stable and feasible．
Key words ：Ramulus Uncariae Cum Uncis ；total alkaloids ；extraction 收稿日期：2010－09－25
基金项目：国家重点基础研究发展计划（973计划）资助项目
（2007CB512601）；山东省科技发展计划项目（2008GG2NS02011）。

作者简介：窦月（1985－），女，山东聊城人，硕士研究生，研究方向：中药
化学成分及质量控制。

通讯作者：周洪雷（1967－），男，教授，博士研究生导师，研究方向：中药
及天然药物有效成分及中药质量控制研究。

钩藤为茜草科植物钩藤Uncaria rhynchop hylla （Miq．）jacks ，大叶钩藤U．macrophylla Wall．，毛钩藤U．hirsute havil．，华钩藤U．sinensis （Oliv．）havil．，或无
柄果钩藤U．sessilif mctus Roxb．的干燥带钩茎枝［1］。

钩藤具有清热平肝，息风定惊的功效，药理研究表明钩
藤具有显著的降压作用，其有效成分为钩藤总生物碱
类。

目前提取钩藤总生物碱多采用有机溶剂提取
法
［2］
，水煮浓缩法和乙醇提取法［3］。

本实验采用乙醇回流提取，利用正交实验设计，对钩藤总生物碱的提取
率进行考察。

1材料与仪器1.1
药材钩藤购于建联大药店，经本校中药鉴定教
研室李峰教授鉴定为钩藤U．rhynchop hylla （Miq．）
jacks 。

1.2
试剂
盐酸、氨水、乙醇、三氯甲烷等均为分析
纯。

1.3仪器旋转蒸发器；电热干燥箱。

2方法与结果
2.1
钩藤总生物碱的提取分离方法
根据文献资
料
［4］
，采用乙醇回流提取，选择乙醇浓度（A ），提取次
数（B ），提取时间（C ），乙醇。

用量（D ）为考察因素，选用L 9（34
）正交表进行正交实验设计，
因素水平安排见表1。

以干膏中钩藤总碱的含量和提取液干膏率为综合评价指标。

综合指标=钩藤总碱含量/钩藤总碱含量最大值ˑ0.6+干膏率/干膏率最大值ˑ0.4。

表1
因素水平表
水平乙醇浓度（A ）提取次数（B ）
提取时间（C ）
乙醇用量（D ）
175116285228395
3
3
10
2.2
钩藤总碱含量的测定精密称取钩藤总碱
0.2g ，20mL 蒸馏水超声溶解，氨水调pH 至10，转入分液漏斗，
氯仿萃取3次（30，20，20mL ），合并氯仿液，用20mL 蒸馏水水洗，氯仿液置蒸发皿中水浴蒸干，残渣用无水乙醇溶解，
再蒸干，残渣加4mL 氯仿溶解，精密加0.0100moL /L 硫酸液20mL ，置水浴上除去氯仿，放冷至室温，过滤，滤液置于三角瓶中，加3滴甲基红－亚甲蓝指示剂，用0.0175moL /L 氢氧化钠液滴定至由浅橙红色转变为黄绿色。

2.3干膏率的测定取提取液置蒸发皿中，水浴挥干，照干燥失重法测定，计算出干膏率。

2.4结果分析由表2可知，因素A 的极差最小，数据处理时作为最小误差项。

由表3可以看出，各因素对钩藤总碱提取工艺的影响程度为：D ＞B ＞C ＞A 。

最佳工艺为条件为A 1B 3C 2D 3，即提取时间2h ，提取次数3次，乙醇浓度为75%，加液量10倍。

表2钩藤总碱提取正交实验与结果
序号A B C D总碱（%）干膏率（ɢ）综合指标111110.86459.6880.369 21222 1.53684.6620.571 31333 2.880100.8360.841 42123 3.92260.5000.840 522310.86471.3680.415 62312 2.54458.4660.621 73132 2.75442.0780.588 83213 2.71233.5620.548 93321 2.20849.4920.534 K1 1.781 1.797 1.538 1.318
K2 1.876 1.534 1.945 1.780
K3 1.670 1.996 1.844 2.229
R0.2060.4620.4070.991
2.5验证实验用初步确定的最佳工艺对同一批药材进行3次实验，测定总碱平均含量0.375%，干膏率101.06ɢ。

3讨论
本实验选择乙醇浓度（A），提取次数（B），提取时间（C），乙醇用量（D）为考察因素，结果表明D对提取
收稿日期：2010－09－29
作者简介：姜慧祯（1962－），女，山东烟台人，主任中药师，学士，研究方向：中药检验及质量标准。

工艺影响最大，因素B，C次之，A最小。

结合生产成本考虑，最佳工艺为条件为A
1
B
3
C
2
D
3
，即提取时间2h，提取次数3次，乙醇浓度为75%，加液量10倍。

表3方差分析
方差来源离差平方和自由度均方F值显著性A0.00720.0041
B0.03620.018 5.0520.165
C0.30020.15 4.2250.191
D0.13820.06919.5190.049
F0.05（2，2）=19。

钩藤总生物碱是其降压有效成分，其中钩藤碱、异钩藤碱、柯诺辛因碱等含量较高，但是仅以一种或几种含量来评价钩藤不够全面。

故本实验采用的是滴定法测定总生物碱的含量，能够有效地评价钩藤药材。

参考文献
［1］国家药典委员会．中华人民共和国药典：一部［S］．北京：化学工业出版社，2010：240－241．
［2］李维锋，姜建国．大叶钩藤总生物碱提取溶剂的研究及钩藤碱的纯度测定［J］．食品科技，2007，3（8）：157－158．
［3］孙秀华．几种药材提取方法评析［J］．西化药学杂志，1989，4（4）：27．
［4］李晓云，叶小利，牛小花，等．正交设计优选钩藤碱的提取工艺［J］．2009，5（1）：49－50．
至宝三鞭精中马钱苷的含量测定
姜慧祯1，林娜2
（1．烟台市药品检验所，山东烟台264000；2．烟台市毓璜顶医院，山东烟台264000）
摘要：目的：建立HPLC法测定至宝三鞭精中马钱苷的含量。

方法：采用反相高效液相色谱法，C18色谱柱，流动相为四氢呋喃－乙腈－甲醇－0．05%磷酸溶液（1ʒ8ʒ4ʒ48），检测波长为236nm，流速为1.0mL/min，柱温40ħ。

结果马钱苷在0.0185 0.738μg范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.9984），该制剂中马钱苷的平均回收率为99.9%，RSD为0.99%（n=5）。

结论：本方法简便、准确、可靠，可用于至宝三鞭精中马钱苷的含量测定。

关键词：马钱苷；高效液相色谱；至宝鞭精
中图分类号：R284文献标识码：A文章编号：1000－1719（2011）05－0945－03
HPLC determination of the Contents Loganin in Jibaosanbianjing
JIANG Hui-zhen1，LIN Na2
（1.Yantai Institute for Drμg Control，Yantai264000，Shandong，China；2.Yantai Yuhuangding Hospital，Yantai264000，Shaodong，China）
Abstract：Objective：To establish an HPLC method for determination of Loganin in Jibaosanbianjing．Methods：The HPLC method was carried on C18column using Tetrahydrofuran－Acetonitrile－Methanol－0.05%Phosphoric acid（1ʒ8ʒ4ʒ48）as mobile phase，and the detection wavelength was236nm，the flow rate was1.0mL/min and the temperature of column was40ħ．Results：In the HPLC method，the calibration curve for Loganin was linear in the range of0.0185 0.738μg．The average recovery was99.9%，RSD was0.99%（n=5）．Conclusion：The method is convenient，precise and reliable for determining the content of Loganin in Jibaosanbianjing
Key words：Loganin；HPLC；Jibaosanbianjing
至宝三鞭精收载于卫生部药品标准（中药成方制剂）第十八册［1］。

由鹿鞭、海狗鞭、广狗鞭、蛤蚧、海马、鹿茸、人参等40余味中药组成的复方制剂。

补血生精，健脑补肾。

用于体质虚弱，阳痿遗精，未老先衰，神。