SBA实验要求
介孔分子筛SBA
介孔分子筛SBA 15的脂肪酶固定量分析测定【摘要】利用吸附法将假丝酵母脂肪酶(candida rugosa lipase，CRL)固定在介孔分子筛SBA 15上，对比了由单波长紫外分光光度法、双波长紫外分光光度法和二辛可宁酸法(bi cinchoninic acid method，BCA)法测定的酶蛋白浓度及酶蛋白固定量。
结果表明: SBA 15对紫外吸收有明显干扰，单波长紫外法测定结果远大于双波长紫外法和BCA法，双波长紫外法和BCA法测定结果较接近。
利用BCA法测定了不同浓度CRL在介孔分子筛上的固定量，考察了固定化酶的泄漏量。
在编号分别为Lu001和LLSD1的介孔分子筛SBA 15上的载酶量分别为16.6和114.12 mg/g(/)。
在缓冲溶液中SBA 15固定化酶的泄漏率只约为0.5%，可作为良好的酶固定化载体。
【关键词】介孔分子筛SBA 15，脂肪酶，酶蛋白固定量，紫外分光光度法，二辛可宁酸法1 引言介孔材料孔径介于微孔与大孔之间，具有大的表面积和多维孔道结构，介孔硅基分子筛SBA 15具有高度有序的六边形直孔结构，孔径在5～50 nm范围，对酶分子具有较强吸附能力，是固定化酶的新材料[1]。
将酶固定于介孔分子筛上有利于保持酶活稳定性，便于酶的重复利用。
高的酶固定量和低的酶泄露量是固定化效果的重要指标。
介孔分子筛载体的酶固定量测定方法有紫外分光光度法[2,3]、BCA(bicinchoninic acid method)法[4]、Bradfo rd法[5,6]、凯氏定氮法[7]及Lowry法[8]等。
针对不同分析方法的酶固定量测定结果差异以及介孔分子筛干扰未见报道，无法判断不同分析方法所测结果的可比性。
为此，本研究分别采用常见的单波长紫外分光光度法、双波长紫外分光光度法和BCA法考察了CRL在介孔分子筛SBA 15上的固定量和介孔分子筛对紫外吸收的影响，分析了不同SBA 15的固定量差异，考察了固定化酶的泄露量，为将介孔分子筛固定化脂肪酶用于催化反应的后续研究奠定了基础(医药学/临床医学论文/)。
布洛芬药物缓释实验步骤整理
1. 药物的装载过程
药物装载过程是在45℃的条件下，将0. 3 g的样品加入到20 mL布洛芬的正己烷溶液中(其IBU浓度为30 g/L)，搅拌72 h，直到用紫外分光光度计测得的溶液浓度保持不变后，迅速冷却至室温过滤。
把得到的粉末快速用纯净的正己烷冲洗1遍，洗掉瓢附在表而的布洛芬，把在室温下风干得到的装载有药物布洛芬的体系称为S-IBU(负载布洛芬的SBA-15) }
2. 药物的控制释放方法
称取0. 02 g的S-IBU加入到60 mL pH值为2. 0,4. 0和7. 4的磷酸盐缓冲液中，在37℃条件下于圆底烧瓶中搅拌均匀后静置。
当悬浮沉淀清晰，取3. 0 mL清晰的溶液到石英比色皿中，用紫外分光光度计扫描吸收强度后，再将其返回至烧瓶中。
继续搅拌，依照上述方法继续测得其在不同时间段的吸收峰。
(完整word版)综合实验 介孔氧化硅SBA-15的水热法合成(1)
实验2 介孔氧化硅SBA-15的水热法合成一、目的要求1．了解介孔材料的结构特点；2．掌握软模板法制备介孔材料的反应机理；3．掌握水热法合成介孔氧化硅SBA-15的方法；4．了解介孔材料的常规结构表征方法。
二、实验原理2.1 介孔材料概述长期以来，多孔材料因其在工业催化、吸附分离、离子交换等许多领域的巨大影响一直吸引着众多研究者的目光。
随着时代的发展，多孔材料的应用范围已经扩展到生物、医药、电子、电镀、光学、传感、信息等诸多新兴领域。
时至今日，每年关于多孔材料的研究报道数以万计，其中包括新材料的开发，新的合成方法的开拓，以及对材料结构、组成和形貌控制等方面的研究；研究大多致力于提高材料的稳定性、实用性，以期拓宽材料的实际应用范围，使多孔材料可以更为经济环保地应用于工业或者日常生活之中。
在多孔材料中，介孔材料因其具有较大孔径、高比表面和优良稳定性等独特的性质而倍受关注。
根据国际纯粹与应用化学学会（IUPAC）的定义，多孔材料可以根据孔径的大小划分为三类：微孔材料(microporous materials, d < 2 nm)，介孔材料(mesoporous materials, 2 nm < d < 50 nm)，大孔材料(macroporous materials, d > 50 nm) [9]。
介孔的意思是介于微孔和大孔之间，所以介孔材料的孔径介于2~50 nm 之间。
介孔材料属于纳米材料领域的范畴，然而有时介孔材料的孔径可能会因为改变合成条件或经过修饰等原因而略小于2 nm，但是实际上材料的物理化学性质、制备方法、合成机理等等没有明显变化，因此这一类材料也被归属于介孔材料的范围。
2.2 介孔材料的合成介孔材料的合成一般通过“模板法”进行；而常用的“模板”又被分为两类：“内模板”(endotemplate) 和“外模板”(exotemplate)，如图1所示[1]。
“内模板法”主要包括了“软模板法”(soft templating)，一般是用表面活性剂、高分子聚合物等作为模板，反应通常在溶液相中进行。
大豆凝集素
大豆凝集素
3.每个浓度分别取9个 1.5 mL灭菌离心管， 每管中加入胃蛋白酶溶液 0.1 mL，37℃保 温10 min，然后再向各管中依次加 入相应 浓度的目的蛋白(SBA)0.1 mL(37℃预热) 。 4.准确计时，反应结束后立即加入0．618 mol／L 的NaCO3，溶液0．05 mL终止酶 解反应。
虽然血凝法能够简捷、快速测定凝集素含 量，但对所选择的红细胞有严格要求，具 有种属特异性，如对兔和人红细胞的凝集 反应最敏感，如所选择红细胞不当，则会 导致所测大豆凝集素活性偏低。实验选择 兔心脏血进行红细胞凝集反应，实验效果 良好。
结语：
对于动物营养领域来讲，应进一步研究豆类凝集 素对不同种属动物抗营养作用，及不同含量凝集 素对不同种属动物抗营养作用，特别是豆类加工 产品中凝集素含量因加工条件差异变化较大，而 豆类制品是人类食品和畜禽日粮中主要原料之一， 因此豆类加工产品低含量凝集素对不同种属动物 抗营养影响及可能产生病理变化也应引起足够重 视。
其产生抗营养作用的根源，所以有关 这方面的研究尤为重要。 动物采食大豆凝集素后，消化道内部 分未被降解并具有完整生物活性的大 豆凝集素会结合到肠道内细胞表面的 特异性受体上，进而引发了一系列抗 营养作用的产生。
大豆凝集素生物活性的测定：
采用兔红细胞凝集法进行生物活性鉴定。 用96孔“V”型血凝板进行细胞凝集试验， 观察红细胞的凝集程度。
理化生实验考试a类实验的要求和b类实验的要求
理化生实验考试a类实验的要求和b类实验的要求A类实验的要求：1. 实验目的清晰明确：A类实验要求学生具备深入理解和掌握实验原理、方法和技术的能力。
在进行A类实验时，学生需要明确实验目的，并能准确描述实验设计和所使用的设备、材料。
2. 实验方案详细完整：A类实验要求学生制定详细的实验方案，包括实验步骤、数据记录和处理方法等。
学生需要合理安排实验时间，并预先评估实验过程中可能遇到的问题和风险。
3. 实验操作规范准确：A类实验要求学生熟悉实验仪器的使用方法，严格按照实验方案进行操作。
学生需要注意实验条件的控制，如温度、压力、pH值等，并保证实验数据的准确性和可靠性。
4. 数据处理与分析精确有效：A类实验要求学生对实验数据进行仔细记录和处理，并能运用适当的统计方法进行数据分析。
学生需要准确计算实验结果，并进行合理的推论和结论。
5. 安全意识和实验守则：A类实验要求学生具备良好的安全意识，能正确使用实验室设备和个人防护用品。
学生需要遵守实验室的安全规定和操作流程，防止事故的发生。
B类实验的要求：1. 实验目的明确简单：B类实验注重培养学生基本的实验操作技能和观察能力。
实验目的相对简单明确，通常涉及常见的化学反应、物理现象或生物实验。
2. 实验步骤清晰简单：B类实验的实验步骤相对简单明了，学生需要按照实验指导书或教师提供的实验方案进行操作。
实验过程中可能需要进行一些基本的测量和记录。
3. 数据记录与分析基础准确：B类实验要求学生正确记录实验数据，并进行基本的数据分析。
学生可以使用简单的统计方法，如平均值计算和图表绘制，来展示实验结果。
4. 安全操作与实验规范：B类实验要求学生遵守实验室的安全规定，正确佩戴个人防护用品，并按照实验指导书或教师要求进行实验操作。
学生需要注意实验条件的控制，如温度、时间等。
总之，A类实验要求学生具备深入理解和掌握实验原理的能力，注重实验设计和数据处理；而B类实验主要培养学生的实验操作技能和基本观察能力，注重实验步骤和基础数据分析。
葡萄糖质量浓度的测定
葡萄糖质量浓度的测定
葡萄糖作为一种重要的能量来源，在许多生物化学过程中扮演着关键角色。
在工业发酵、食品加工、医学研究等领域，准确测定葡萄糖质量浓度是至关重要的。
本文将介绍葡萄糖质量浓度的测定方法。
实验准备
在进行葡萄糖质量浓度的测定之前，需要对发酵液样品进行适当的处理。
首先，将发酵液样品在12,000 r/min的速度下离心，以分离出悬浮的固体颗粒，取得清澈的上清液。
样品稀释
由于直接测定的样品可能浓度过高，超出测定仪器的检测范围，因此需要将上清液进行稀释。
通常取10 μL的上清液，用去离子水稀释100倍，以便于测定。
使用SBA-40型生物传感分析仪
SBA-40型生物传感分析仪是一种基于固定化酶传感技术的智能化仪器，能够快速准确地测定葡萄糖质量浓度。
将稀释后的样品放入分析仪中，仪器会自动进行测定。
测定原理
SBA-40型生物传感分析仪的测定原理是基于酶催化反应。
仪器内部装有固定化酶膜，当葡萄糖通过酶膜时，会与酶发生反应，产生电化学信号。
数据读取与分析
分析仪内的传感器会检测由酶催化反应产生的电化学信号的变化，这些信号与葡萄糖的浓度成正比。
仪器内置的微电脑会根据信号的变化计算出葡萄糖的质量浓度，并在显示屏上显示结果。
结果输出
用户可以直接从仪器的显示屏上读取葡萄糖的质量浓度，或者通过连接到计算机的方式导出数据进行进一步分析。
通过上述步骤，可以快速准确地测定葡萄糖质量浓度，为相关领域的研究和生产提供重要数据支持。
SBA-40型生物传感分析仪的应用，使得葡萄糖测定变得更加简便和高效。
介孔分子筛SBA15的研究进展
介孔分子筛SBA15的研究进展介孔分子筛SBA15是一种具有规则排列介孔结构的硅铝酸盐材料，由于其独特的孔道结构和良好的吸附性能而备受。
在众多工业领域，SBA15被广泛应用于催化剂、吸附剂、分离膜等领域。
近年来，随着材料科学和纳米技术的迅速发展，SBA15的研究取得了显著的进展。
本文将介绍SBA15的制备方法、结构特点和应用现状，并展望未来的研究方向。
介孔分子筛SBA15的制备方法主要包括模板法、反模板法、无模板法等。
其中，模板法是最常用的制备方法，通过将硅源、铝源和模板剂混合加热，再经过脱模板和高温焙烧得到SBA15。
反模板法则是将已合成的SBA15作为模板，通过离子交换和热处理得到目标分子筛。
无模板法是通过调控反应条件，直接合成SBA15，但难度较大。
SBA15具有有序的介孔结构，孔径大小可在2-10纳米范围内调节，具有较高的比表面积和孔容。
介孔分子筛SBA15在很多领域都显示出了广泛的应用前景，如催化剂、吸附剂、分离膜等。
在催化剂领域，SBA15作为酸性催化剂，可用于裂化反应、异构化反应、烷基化反应等。
在吸附剂领域，SBA15对某些金属离子和有机物具有较好的吸附性能，可用于水处理、气体分离和有害物质的吸附。
在分离膜领域，SBA15具有较高的透水性和选择性，可用于分离水和有机溶剂。
然而，目前的研究还存在着一些不足之处。
SBA15的制备方法仍需进一步优化，以提高产率和纯度。
SBA15的应用领域还有待进一步拓展，尤其是在光电、储能等新兴领域的应用研究尚处于起步阶段。
对于SBA15的孔道结构和表面性质的研究仍需深入，以更好地理解其性能和应用。
本文采用模板法合成了介孔分子筛SBA15，并通过XRD、N2吸附-脱附等表征方法对其结构和性能进行了详细研究。
同时，利用原位红外光谱和量子化学计算等方法，对SBA15的表面性质和吸附机理进行了深入探讨。
通过调整模板剂的种类和浓度，成功合成了具有有序介孔结构的SBA15分子筛。
脑膜炎SBA方法总结
SBA方法简介
原理：血清杀菌活性(SBA)测定评估血清中针对细菌分离物的补体依赖性抗体的杀菌活性。
该试验是评估感染和疫苗诱导抗体补体介导的功能活性的首选方法。
实验材料：Neisseria meningitidis serogroup A、Neisseria meningitidis serogroupW等脑膜炎相关细菌亚型。
baby rabbit serum (BRS) as external source of complement。
操作步骤：将细菌进行系列稀释，与血清抗体及补体在96孔微量滴定板中孵育，放置于37℃，5%CO2培养箱中3h，然后接种于琼脂板上过夜16h，对菌落进行计数，根据与试验中获得的最大细菌生长相关的50%减少所需的血清稀释倒数来计算滴度值。
参考文献：1，Development of a high-throughput method to evaluate serum bactericidal activity using bacterial A TP measurement as survival readout；
2，Efficacy and Effectiveness of the Meningococcal Conjugate Group A Vaccine MenAfriVac® in Preventing Recurrent Meningitis Epidemics in Sub-Saharan Africa。
酯交换法制备仲丁醇的关键技术研究
2019年 第7期 广 东 化 工 第46卷 总第393期 · 69 ·酯交换法制备仲丁醇的关键技术研究石象鹏，湛明，余良军，井晓兢(惠州宇新化工有限责任公司 开发部，广东 惠州 516081)[摘 要]本文研究了在阳离子酸性树脂催化剂存在下，乙酸仲丁酯与甲醇酯交换制备仲丁醇。
分布评价了A-16、A-36、NKC-9、ZH-400等四种催化剂在酯交换反应中的表现，确定长反应时间条件下ZH-400催化剂的酯交换活性最佳。
以其为催化剂，在控制变量的基础上，对醇酯比、反应时间、反应温度等影响仲丁醇收率的因素进行了优化，确定了反应物进料醇酯比2︰1、催化剂与反应物体积比1︰1、反应温度80~85 ℃的最佳反应条件。
[关键词]仲丁醇；酯交换；阳离子酸性树脂；催化剂[中图分类号]TQ [文献标识码]A [文章编号]1007-1865(2019)07-0069-02Research on Sec-Butyl Alcohol Production by TransesterificationShi Xiangpeng, Zhan Ming, Yu Liangjun, Jing Xiaojing(Research and Development Department, Huizhou Yussen Chemical Co., Ltd., Huizhou 516081, China)Abstract: In this paper, a preparation method of sec-butyl alcohol through the transesterification between sec-butyl acetate and methanol upon acid cation exchange resin was studied. The catalytic effects of four acid cation exchange resins were inspected in the transesterification. ZH-400 resin exihibited the best activity. Over it, the conditions for preparing sec-butyl alcohol, including molar ratio of methanol to sec-butyl acetate, reaction time and temperature, were optimized by controling variates. The optimum conditions were determined as follows: methanol/ sec-butyl acetate molar ratio of 2︰1, catalyst/reactant volume ratio of 1︰1 and reaction temperature of 80~85 ℃.Keywords: sec-butyl alcohol ；transesterification ；acid cation exchange resin ；catalyst仲丁醇(简称SBA)又称2-丁醇，是一种重要的化工中间体，广泛应用于多种化学品的合成，如香料、染料和润滑剂等，但最主要的应用是经催化脱氢生产重要化工产品甲乙酮，约占总消耗量的90 %[1-2]。
理化生实验考试a类实验的要求和b类实验的要求(一)
A类实验的要求：- 确保实验安全- 确保实验器材完好无损- 确保实验环境整洁- 准备充分- 了解实验原理和操作步骤- 熟悉实验器材的使用方法- 记录详细数据- 准确记录实验过程中的各项数据- 注意实验中的异常现象并记录- 分析实验结果- 对实验数据进行分析和总结- 探讨实验过程中遇到的问题及解决方法例如，对于A类实验的要求，比如化学实验中的酸碱中和实验，首先要确保实验安全，使用玻璃仪器时要检查是否有裂纹，化学品要放在防火柜中。
其次是准备充分，要熟悉酸碱反应的原理和操作步骤，了解实验器材的使用方法，比如PH 试纸、酸度计等。
然后在实验过程中要记录详细数据，包括每次加入的酸碱溶液的量、PH值的变化等。
最后要对实验结果进行分析，总结实验中出现的问题，比如PH值不准确的原因可能是仪器不准确，需要校准。
B类实验的要求：- 提出明确假设- 提出实验的明确假设或问题- 设计实验方法来验证假设- 控制实验变量- 确保实验中只改变一个变量- 控制其他变量保持恒定- 进行实验操作- 按照设计好的实验步骤进行操作- 记录实验中的各项数据- 分析实验结果- 分析实验结果与假设是否一致- 探讨实验中可能存在的误差举例来说，对于B类实验的要求，比如生物实验中的植物生长实验，首先要提出明确的假设，比如“添加不同浓度的肥料对植物生长的影响”。
然后要控制实验变量，确保只改变肥料的浓度，其他条件保持一致。
接着进行实验操作，按照设计好的实验步骤进行操作，并记录实验中的各项数据，比如植物的生长速度、叶片数量等。
最后要对实验结果进行分析，看实验结果是否与假设一致，如果不一致，探讨可能存在的误差，比如温度、光照等因素对植物生长的影响。
SBA-40C型生物传感分析仪操作指南
序言生物传感器是一项生物新技术，它把生物活性物质巧妙地与传感器技术、计算机技术结合，导致了传统的烦琐的化学分析方法的一场革命，并即将对生物技术产业中的生化反应器的自动控制产生深刻的影响。
生物传感器是生物技术产业的有机组成部分之一,也是我国的国家生物技术“七五”、“八五”及“九五”重点攻关计划项目之一，对生物技术的发展起条件保证作用，对传统生物技术产业的改造也有很大的实用价值；将为工业控制、临床检验、体育训练、食品分析和环境保护等领域的快速方便的检测提供新方法、新控制手段和新仪器。
经过几年来的发展，我们研制的几种生物传感器已开发成为特殊的生化仪器，这些仪器得到了一定程度的普及：单电极的生物传感器用于我国体育领域的耐力项目科学训练，用户达到24省市的140多家（1989-1994年使用SBA-30型分析仪，1994年以后改型成为SBA-50型分析仪）；双电极生物传感分析仪（1992-1995年使用SBA-40A型分析，1996年以后改型成为SBA-40B型分析仪、98年11月以后又已改型为SBA-40C型分析仪）可以同时分析谷氨酸、葡萄糖、乳酸中的任二种成分，在工业发酵领域已有几十家用户，国内50％以上的万吨级谷氨酸发酵工厂已用它们来控制发酵、糖化、等电离交回收等生产过程，在等电离交回收工段应用谷氨酸传感器可以收到立竿见影的效果：杜绝了大量谷氨酸的流失，可比原控制方法至少增加1倍回收产率；葡萄糖传感器用于淀粉糖化的控制可以增加葡萄糖的得率，提高糖液质量；在发酵上应用谷氨酸葡萄糖乳酸生物传感器，为谷氨酸的发酵生产控制开拓了一条新路，控制好发酵中的乳酸的含量，可以明显提高产酸率。
新型的四电极的生物传感在线分析系统（SBA-60型在线分析系统）列入了国家“九五”生物技术重点攻关项目，与小发酵罐联用后可以模拟大生产的谷氨酸发酵，将成为发酵生产工艺管理的得力工具。
第一个应用生物传感器分析食品成分的国家标准已于1996年的年内发布。
SBA-40E生物传感分析仪使用说明
SBA-40E型生物传感分析仪操作说明书第一章仪器的工作原理和性能特点SBA-40E型生物传感分析仪是以固定化酶为关键元件，由微电脑控制分析过程的智能化仪表。
仪器通过更换不同的固定化酶膜而更改分析对象，可同时安装二个固定化酶传感器，一次测定同时得到两种物质的分析结果。
手动进样后，整个测定过程由微电脑控制，自动完成，每个样品的测定周期为一分钟左右。
在临床化验、食品分析、工业发酵、环境检测和科学研究等方面有广泛的用途。
第一节工作原理SBA-40E型生物传感分析仪利用酶促反应来进行定量分析，测定的关键传感器是固定化酶和H2O2电极复合传感器，分析过程基于以下生化反应：底物＋O2＋H2O 固定化酶膜产物＋H2O2谷氨酸谷氨酸氧化酶α-酮戊二酸＋NH4＋葡萄糖葡萄糖氧化酶葡萄糖酸＋H2O2乳酸乳酸氧化酶丙酮酸＋H2O2乙醇乙醇氧化酶乙酸＋H2O2样品经稀释到合适的浓度范围（要求pH在6-8左右），用定量进样针吸取25ul注入反应池内，由反应池搅拌系统混匀。
混匀的底物样品透过酶膜圈外层与固定化酶层接触并反应，反应放出的H2O2再透过酶膜圈的内层与白金-银电极接触并产生电流信号，该电流信号与底物浓度成线性比例关系，经微机控制的信号，可直接显示并打印结果。
第二节生物传感分析仪的特点（1）反应靠固定化酶催化，昂贵的生化试剂可以多次重复使用。
一张酶膜可测定数千次，因此总的测定成本比较低。
（2）操作简便：开机后只需按屏幕提示，向反应池内注入定量（25微升）标样或样品，测定即可完成。
每个样品测定完成后可当场自动(或事后)打印出测定结果(可选同时打印测定序号、测定时间)，测定结果保存在仪器内存中，可随时查看和再次打印。
（3）分析速度快：每个样品的测定周期，包括反应、清洗和电极平衡时间，全部操作约1分钟左右。
（4）结果准确，一般误差小于2％，不受颜色，混浊度等影响。
（5）作为一种特殊的生化仪器，操作维护需要一定的生化知识（如使用带有强酸、强碱性的样品，要事先中和，以免造成酶膜失活），仪器的性能随酶膜使用寿命而有所变化。
SBA 生物传感仪酶法测定谷氨酸定标值的校正
第21卷第5期2002年9月 无锡轻工大学学报Journal of Wuxi U niversity of Light Industry Vol.21 No.5Sep. 2002 文章编号:1009-038X (2002)05-0529-04 收稿日期:2002-04-18; 修订日期:2002-06-25.作者简介:张宏建(1973-),男,河南信阳人,工学学士,助教.SBA 生物传感仪酶法测定谷氨酸定标值的校正张宏建, 段作营, 毛忠贵(江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡214036)摘 要:在味精行业中,目前广泛采用SBA 生物传感仪检测L 2谷氨酸含量.SBA 生物传感仪在检测量程下,定标为100,但在检测谷氨酸发酵液、等电上清液、上清液的浓缩液、脱盐液以及脱色液时,受N H 4+的影响,其结果偏低;为此,其定标必须进行相应的调整,才能准确地检测出样品中的谷氨酸含量.关键词:SBA 生物传感仪;谷氨酸;铵离子中图分类号:Q 51文献标识码:AThe Emendation of C alibrating V alue of G lutamic Acid DetectionUsing Enzymatic Method with SBA 2BiosensorZHAN G Hong 2jian , DUAN Zuo 2ying , MAO Zhong 2gui(The key Laboratory of Industrial Biotechnological under Ministry of Education ,S outhern Y angtze University ,Wuxi 214036,China )Abstract :SBA 2biosensor was widely used for measuring the content of L 2glutamic acid in monosodium glutamate production nowadays.Under the detection range ,the standard solution was set 100.But when we detected the fermenting liquor ,the upper liquid after equipotential point ,the upper liquid of concentrates ,and the desalting and decoloring liquor ,the detecting system was easily interfered by ammonia and it ’s result was on the low side.Thus the standard value must be adjusted accordingly ,and the L 2glutamic acid contents of fermenting liquor then could be exactly detected.K ey w ords :SBA 2biosensor ;glutamic acid ;ammonia 过去谷氨酸的含量都采用华勃式呼吸器测定,其原理[1]是利用谷氨酸脱羧酶在一定的温度、体积下与谷氨酸反应,使谷氨酸脱羧放出CO 2,再用华勃式呼吸器测定放出CO 2的压力、体积并以一定公式换算谷氨酸的含量;但该方法测定时间较长,准确性相对较差.为了准确、快速地检测出发酵液等料液中谷氨酸的含量,目前采用SBA 生物传感仪酶法逐步取代华勃法测定谷氨酸,并在味精行业中得到广泛应用.SBA 生物传感仪酶法可通过自动记录、自动计算、分别显示,打印出L 2谷氨酸的含量,测定时间明显缩短.但在实际应用中,因受N H 4+的影响,SBA 法在规定定标为100时,测出味精清洁生产样品中的谷氨酸含量偏低.为此,实验中利用回收率来校正SBA 酶法定标,同时找出N H 4+对SBA 生物传感仪测定样品时的影响.1 材料与方法1.1 实验材料与设备SBA 生物传感仪由山东省科学院提供;华勃式呼吸仪由上海科技大学提供;旋光仪由菱花集团提供;发酵液、等电上清液、四效浓缩液、脱盐液、脱色液、味精(纯度为99.9%)、麸酸等均由山东济宁市菱花集团提供;其余试剂为市售国产分析纯试剂.1.2 味精清洁生产流程待测样品均来自味精清洁生产过程中,其工艺流程[2]如下:1.3 SBA 法测定原理SBA生物传感仪的原理是利用酶促反应进行定量,样品的分析原理如下:底物+O 2+H 2O固定化酶产物+H 2O 2在测定谷氨酸含量时,底物为谷氨酸,固定化酶为谷氨酸氧化酶,产物为α2酮戊二酸和N H 4+.含有样品的底物在样品室内迅速按一定比例混合均匀,底物透过酶膜圈的外层与固定化酶层接触并反应,放出的H 2O 2再透过酶膜圈的内层与白金2银电极接触,产生电流信号,电流信号与底物浓度呈线性关系,经微机控制直接显示和打印.1.4 测试方法1.4.1 样品的稀释1发酵液、四效浓缩液稀释100倍,等电上清液稀释50倍,脱盐液、脱色液稀释200倍.吸取1mL 待测样品移入容量瓶中调p H 至接近中性,定容后供SBA 仪测定谷氨酸含量.1.4.2 样品的回收率检测 在已测定的谷氨酸稀释样品中添加一定量的谷氨酸,使谷氨酸含量维持在SBA 法测定量程范围内,再用SBA 生物传感仪检测样品中的谷氨酸含量.回收率=u 2-u 1A式中:u 1———未添加谷氨酸时SBA 的读数;u 2———添加谷氨酸后SBA 的读数;A ———添加谷氨酸的量(质量浓度).1.4.3 SBA 法定标值的计算 利用SBA 仪两次测量谷氨酸的结果,可计算加入已知量的谷氨酸回收率,并以此推导出SBA 法正确的定标值.定标值=A u 2-u 1式中:u 1———未添加谷氨酸时SBA 的读数;u 2———添加谷氨酸后SBA 的读数;A ———添加谷氨酸的量(质量浓度).2 结果与分析在山东省菱花味精集团进行味精清洁生产调试过程中,发现SBA 在检测发酵液、等电上清液、四效浓缩液、脱盐液及脱色液时,定标为100,进样量为25μL 时测定的结果比实际值偏低,再与华勃式呼吸仪相校正也证明了这一点.在硫酸铵存在下,SBA 仪的谷氨酸氧化酶可能受到抑制.SBA 生物传感仪在测定底物时,产物为α2酮戊二酸和N H 4+,从酶反应动力学看,很可能在一定的N H 4+质量浓度下,对反应产生抑制作用,使酶反应不充分,谷氨酸的实际测定值低于理论应测值.2.1 SBA 法测定G lu 线性有效质量浓度范围的确定为了避免测定误差,在测定发酵液、等电上清液、四效浓缩液、脱盐液及脱色液时,对SBA 仪测定G lu 有效质量浓度范围进行校正(见表1).表1 SBA 法测定G lu 线性有效质量浓度范围的确定T ab.1 The conf irmation of G A linear valid concentrationrange using SBA methodG lu 加样量/(μg/L )SBA 读数G lu 加样量/(μg/L )SBA 读数2020.11001004040.51201198081.0160150 表1表明,加样量在40～120μg/L 范围内,测定的线性较好(R 2=0.9997),在以后的实验中将尽量保证总加样量在这一范围内.2.2 不同质量浓度的(NH 4)2SO 4对SBA 生物传感仪测定谷氨酸含量的影响 从实验数据可以看出,硫酸铵在极低的质量浓度下就会对谷氨酸氧化膜产生抑制.在低于0.02%时,谷氨酸氧化酶的活力随硫酸铵的增加急剧下降,在高于0.02%时谷氨酸氧化膜的活力随硫酸铵质量浓度的缓慢变化接近一条水平线,可以近似认为抑制达到平衡.这说明SBA 仪所用的谷氨酸氧化酶在N H 4+的存在下仍基本符合酶反应动力学,N H 4+对酶反应有抑制作用,进而影响到仪器对样35 无 锡 轻 工 大 学 学 报 第21卷品的测定值.图1 硫酸铵质量分数对SBA 测定G lu 的影响Fig.1 The effect of (NH 4)2SO 4concentration on Glu content with SBA method2.3 SBA 法测定G lu 定标值的校正2.3.1 SBA 法测定发酵液中G lu 定标值校正的测定1将发酵液稀释100倍,用SBA 法分别测定添加谷氨酸前后G lu 的含量,并计算回收率,推导出准确的定标值(见表2).表2 SBA 法测定发酵液中G lu 定标值的校正T ab.2 The determination of emend ating the calibrating valueof G lu in fermenting liquor with SBA methodNo.SBA 读数/u 1添加谷氨酸量/(μg/L )SBA 读数/u 2回收率/%190.819.64108.791.1292.419.85110.591.2394.620.00112.991.5 从表2可以看出,发酵液中谷氨酸的回收率在91%左右,回收率为100%时,定标应为109,现生产上定标改为110有其合理性,因此建议定标为108～110.2.3.2 SBA 法测定等电母液中G lu 定标值的校正1将等电母液稀释50倍,用SBA 法分别测定添加谷氨酸前后的含量,并计算出回收率,推导出准确的定标值(见表3).表3 SBA 法测定等电母液中G lu 定标值的校正T ab.3 The determination of emend ating the calibrating valueof G lu in upper liquor after equipotential point with SBA methodNo.SBA 读数/u 1添加谷氨酸量/(μg/L )SBA 读数/u 2回收率/%138.885107.480.7246.55087.982.8351.85092.681.6 表3表明,等电母液回收率在80%～83%,建议定标为120～125.2.3.3 SBA 法测定四效浓缩液中G lu 定标值的校正1将四效浓缩液稀释100倍,用SBA 法分别测定添加谷氨酸前后的含量,计算出回收率,推导出准确的定标值(见表4).表4 SBA 法测定四效浓缩液中G lu 定标值的校正T ab.4 The determination of emend ating the calibrating valueof G lu in the concentrates after vaporizing four times with SBA methodNo.SBA 读数/u 1添加谷氨酸量/(μg/L )SBA 读数/u 2回收率/%162.550.0102.780.4257.846.095.882.6354.551.596.681.7 表4表明,四效浓缩液的回收率约在81%～83%,建议定标为120～125.2.3.4 SBA 法测定脱盐液中G lu 定标值的校正1将脱盐液稀释200倍,用SBA 法分别测定添加谷氨酸前后的含量,计算出回收率,推导出准确的定标值(见表5).表5 SBA 法测定脱盐液中G lu 定标值校正的测定T ab.5 The determination of emend ating the calibrating valueof G lu in the desalting liquor with SBA methodNo.SBA 读数/u 1添加谷氨酸量/(μg/L ) ASBA 读数/u 2回收率/%172.840.0106.584.2256.850.098.082.4349.549.188.379.0 从表5看出,脱盐液的回收率为80%～83%,建议定标应为120～125.2.3.5 SBA 法测定脱色液中G lu 定标值的测定将脱色液[3]稀释200倍,用SBA 法分别测定添加谷氨酸前后的含量,计算出回收率,推导出准确的定标值(见表6).表6 SBA 法测定脱色液中G lu 定标值的校正T ab.6 The determination of emend ating the calibrating valueof G lu in the decoloring liquor with SBA methodNo.SBA 读数/u 1添加谷氨酸量/(μg/L )SBA 读数/u 2回收率/%242.650.083.381.4448.450.289.080.9647.445.284.782.5 从表6看出,脱色液回收率为80%～82%,建议应定标为120～125.135第5期张宏建等:SBA 生物传感仪酶法测定谷氨酸定标值的校正2.4 SBA 法测定G lu 定标值校正的验证由表6可知,SBA 法测定脱盐液中G lu 定标值校正为125,稀释倍数为200,对SBA 定标值进行验证.由表7看出,SBA 法测定脱盐液中G lu ,定标值为125时,添加谷氨酸量的回收率为100%,由此说明SBA 校正后的定标值是准确的,其他待测样品校正后的定标值经验证也是准确的.表7 SBA 法测定脱盐液中G lu 定标值校正后的验证T ab.7 The test of calibrating value after emend ation in thedetermination of G lu from the desalting liquor using SBA methodNo.SBA 读数/u 1添加谷氨酸量/(μg/L )SBA 读数/u 2回收率/%172.039.3111.4100.3266.849.1116.0100.0 另外作如下验证实验:用SBA 测定麸酸和味精,定标100时和旋光法基本一致,因为麸酸和味精都是以固体形式存在的,N H 4+几乎不存在,这也说明了铵根离子对SBA 仪中的谷氨酸氧化酶膜有抑制作用.3 结 论用SBA 生物传感议测定清洁生产[4]各工段的样品时,因受N H 4+的影响,其定标都要进行相应的调整;除发酵液回收率在91%左右外,其他样品回收率基本上都在80%～83%左右,理论上将SBA 定标校正为120～125,就能较准确地测量样品中L 2谷氨酸的含量.因此,味精清洁生产工艺中各样品定标建议为:发酵液定标108～110,等电母液和絮清液、四效浓缩液、脱盐液、脱色液定标均为120～125.参考文献:[1]于信令.味精工业手册[M ].北京:中国轻工业出版社,1995.570-587.[2]毛忠贵.生物工业下游技术[M ].北京:中国轻工业出版社,1999.427.[3]SMITH T J ,MA THIAS L J.New methacrylate derivatives based on pyroglutamic acid[J ].Polymer Preprints ,2000,41(2):1254-1255.[4]毛忠贵.味精清洁生产技术———谷氨酸提取的闭路循环新技术[A ].全国发酵行业环境保护和综合利用技术交流会文集[C].北京:中国发酵工业协会,2001.79-83.(责任编辑:杨萌)(上接第518页)[2]O TTE S ,SCHAL K J ,KU EN EN J G.H ydroxylamine oxidation and subsequent nitrous oxide production by the heterotrophicammonia oxidizer A lcaligenes f aecalis [J ].Applied Microbiology &Biotechnology ,1999,51(2):255-261.[3]GU PTA A B.Thiosphaera pantot ropha :A sulphur bacterium capable of simultaneous heterotrophic nitrification and aerobicdenitrification[J ].E nzyme &Microbial T echnology ,1997,21(8):589-595.[4]国家环保局《水和废水监测分析方法》编委会.水和废水监测分析方法(第三版)[M ].北京:中国环境科学出版社,1989.[5]金尚满,程英明,车喜善等.对硝基苯胺—N ,N —二甲基苯胺光度法测定痕量亚硝酸盐.环境化学[J ],1992,11(3):75-77.[6]Y OO H ,AHN K H ,L EE H J ,et al .Nitrogen removal from synthetic wastewater by simultaneous nitrification and denitrifica 2tion (SND )via nitrite in an intermittently 2aerated reactor[J ].W ater R esearch ,1999,33(1):145-154.[7]MULL ER E B ,STOU THAMER A H ,VAN V ERSEV ELD H W.Simultaneous NH 3oxidation and N 2production at reducedO 2tensions by sewage sludge subcultured with chemolithotrophic medium[J ].Biodegrad ation ,1995,6(4):339-349.[8]J ETTEN M S M.Towards a more sustainable munici pal wastewater treatment system [J ].W ater Science T echnology ,1997,35(9):171-180.(责任编辑:杨萌)235 无 锡 轻 工 大 学 学 报 第21卷。
大豆凝集素SBA酶联免疫分析
大豆凝集素（SBA）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T20pg/ml-480pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定植物相关液体样本中大豆凝集素（SBA）含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大豆凝集素（SBA）水平。
用纯化的大豆凝集素（SBA）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入大豆凝集素（SBA），再与HRP标记的大豆凝集素（SBA）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的大豆凝集素（SBA）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大豆凝集素（SBA）浓度。
标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
亚急性试验方案
亚急性试验方案1. 正文概述本文档为亚急性试验方案的撰写说明，旨在提供一个清晰的亚急性试验流程和操作指南。
本方案涉及亚急性试验的目的、实验设计、数据收集和分析等方面的内容。
2. 背景和目的亚急性试验是一种常见的实验方法，用于评估某种物质的亚急性毒性和对生物体的影响。
目的是确定物质在亚急性暴露下对生物体的毒性效应，并据此进行安全性评估和风险评估。
3. 实验安排和试验设计3.1 实验对象选择选择适当的实验对象非常重要，一般情况下常用小鼠、大鼠或其他灵长类动物进行试验。
其选择应考虑到实验物质的用途和预期使用群体，尽可能近似目标人群。
3.2 分组与暴露根据实验设计，将实验对象分为实验组和对照组。
实验组接触或暴露于待测试物质，对照组则不接触或暴露。
3.3 实验参数确定实验参数，包括物质用量、暴露时间和频率等。
根据不同物质的特性和使用方式，确定合理的参数，以能够有效评估物质的亚急性毒性效应。
3.4 实验条件控制为了保证实验结果的可靠性和可比性，必须严格控制实验条件，包括温度、湿度、光照和饮食等因素。
确保实验对象处于相同或类似的环境条件下。
4. 数据收集和处理4.1 数据收集方法记录实验过程中的各种数据，包括实验对象的体重、食物摄入量、水摄入量、行为观察等。
采用合适的数据记录表格或软件进行数据记录，确保数据的准确性和完整性。
4.2 数据处理和统计分析对收集的数据进行处理和统计分析。
常用的方法包括均值、标准差和方差分析等。
根据实验设计和研究目的选择合适的统计方法，进行数据分析和结果解读。
5. 实验安全和伦理问题5.1 实验安全在进行亚急性试验时，必须遵守相关的实验室操作规范和安全操作要求。
正确使用个人防护装备，并按照保存、处置实验物质的指南进行操作。
5.2 伦理问题在进行动物实验时，需要遵循相关的伦理规范，确保实验对象的福利和权益。
确保实验过程中动物的合理使用和合理处理，避免不必要的痛苦和伤害。
6. 实验结果和讨论根据数据分析的结果，撰写实验结果和讨论部分。
s型腺苷蛋氨酸企业标准
s型腺苷蛋氨酸企业标准
S型腺苷蛋氨酸企业标准主要规定了该产品的技术要求、试验方法、检验规则、标志、包装、运输和贮存等方面的内容。
这些标准是为了确保S型腺苷蛋氨酸的生产质量、安全性和有效性，以满足相关法规和市场需求。
具体来说，S型腺苷蛋氨酸企业标准可能包括以下内容：
1.技术要求：规定S型腺苷蛋氨酸的物理、化学和生物学特性，如外观、纯度、稳定性等。
2.试验方法：描述用于检测S型腺苷蛋氨酸各项特性的试验方法，包括样品的采集、处理、分析和结果判定等。
3.检验规则：规定S型腺苷蛋氨酸的检验程序和要求，包括检验项目、检验频次、取样方法等。
4.标志、包装、运输和贮存：规定S型腺苷蛋氨酸的包装标识要求，以及在运输和贮存过程中的注意事项，以确保产品的质量和安全。
需要注意的是，具体的S型腺苷蛋氨酸企业标准可能因不同的生产厂家、不同的产品规格和不同的市场需求而有所差异。
因此，在实际应用中，应结合具体情况参考相应的企业标准。
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EWAN NAT/ACL PT Practice SBA
注意事项：
1．不要使用浏览器的后退按钮或关闭或重新加载在考试中任何考试的窗口。
2．当你完成后不要关闭Packet Tracer，它会自动关闭。
3．点击提交按钮，提交您的评估工作。
描述：
在Packet Tracer技能考试中，你应该：
完成IP划分。
配置网络地址，以满足实验要求。
配置和验证DHCP服务器的实现。
配置和验证广域网技术。
配置EIGRP，以便与其他网络通信。
配置NAT转换是能够与互联网通讯
实现访问控制列表作为安全政策的一部分。
NOTE：使用这些说明的印刷版本，填补表中的缺少地址信息，以帮助步骤1中的配置，验证和故障排除的设备。
NOTE:用户EXEC模式的密码是cisco，特权EXEC模式的密码是class。
下面真正进入实验
第一步：完成的IP寻址的设计与实现。
设计一个解决方案，并根据下列要求填写地址表：
a. 子网的地址空间172.16.1.128/25为R3的局域网提供50个主机地址并且浪
费最少。
b. 分配第一个可用的子网给R3的局域网。
c. 分配第一个子网地址中最小的地址给R3的Fa0 / 0接口
d. 剩余的子网地址空间分配给R1的局域网30个主机地址并且浪费最少。
e. 分配下一个可用子网给R1的局域网
f. 分配该子网的第一个（最低）地址给R1的Fa0 / 0接口
g. 分配该子网的最后一个（最高）主机地址给PC1
h. 完成IP地址的配置：
给R1和R3的LAN接口配置IP地址
给PC1手动配置IP地址，在下一个步中，PC3会从R3上的DHCP服务器得到IP地址。
第二步：配置R3为DHCP服务器并验证。
a．根据以下说明，把R3配置为连接在其Fa0/0上LAN的DHCP服务器：使用R3_LAN（区分大小写）作为DHCP地址池的名字
排除子网中的前三个主机地址
b. 现在已经确定PC3的IP地址。
它可能需要在“静态”和“DHCP”之间切换，PC3的将发送一个DHCP请求。
PC3上应该ping通默认网关。
第三步：配置广域网。
a. R3和R2之间的连接使用PPP协议的CHAP验证，密码是ciscochap，验证R3和R2可以互相ping通。
b.R3和R1之间的连接使用HDLC协议，R3应能ping链接的另一边。
验证R3和R1可以互相ping通。
C．R1和R2之间的链接使用点到点的帧中继子接口。
验证R1和R2可以互相ping通。
第四步：配置和验证EIGRP路由。
a. 在路由R1，R2和R3上配置EIGRP。
使用AS号100
不要使用通配符掩码
不做通告R2和互联网之间的网络
b. 使用出接口参数配置R2的默认路由到互联网，使用一条命令把默认路由传
播到EIGRP路由协议中。
c. 验证PC1和PC3可以互相ping通，并能ping通R1，R2和R3。
您现在还不能够ping
互联网主机。
第五步：在R2上配置一个NAT。
a. 根据以下要求在R2上配置NAT：
只有网络172.16.1.128/25的地址被转换。
访问列表号使用数字1
在R2的S0/1/0接口上配置PAT
b. 验证PC1和PC3可以ping通Internet上的主机
第六步：
a. 根据以下要求配置和应用ACL，ACL号使用50：
拒绝R3局域网上的任何主机访问R1局域网上的主机
R3局域网上的主机应该能ping通其他目的地
b. 验证ACL50能按要求运行
c. 根据以下要求配置和应用一个命名为FIREWALL的ACL：
拒绝来源于互联网的ping请求。
拒绝来源于互联网的Telnet和HTTP流量
允许所有其他IP流量
d. 验证ACL FIREWALL能够按要求运行。
翻译完啦！本人水平有限，将就看吧。
祝你们都顺利通过~
zll。