脂质体
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4）冷冻干燥法：适用于在水中不稳定的药物制 ）冷冻干燥法： 备脂质体。 备脂质体。 5）熔融法：适用于制备多相脂质体，稳定，可 ）熔融法：适用于制备多相脂质体，稳定， 加热灭菌。 加热灭菌。 6）超声波分散法：将类脂材料溶解在有机溶剂 ）超声波分散法： 然后在旋转蒸发器上,在真空下蒸除溶剂 中,然后在旋转蒸发器上 在真空下蒸除溶剂 加 然后在旋转蒸发器上 在真空下蒸除溶剂,加 入缓冲液,再加入一些小玻璃球帮助分散 再加入一些小玻璃球帮助分散， 入缓冲液 再加入一些小玻璃球帮助分散，可形 成多室脂质体，经超声处理，得到小单室脂质 成多室脂质体，经超声处理， 体。此法操作简便，但包封率较低。 此法操作简便，但包封率较低。 7）高压乳匀法：将各成分加入溶剂中，通过高 ）高压乳匀法：将各成分加入溶剂中， 压均质机均匀分散成脂质体。 压均质机均匀分散成脂质体。
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质量检查与评定
1)脂质体的形态与粒度
2)异物：显微镜下观察有无异物（有色斑 块，棒状结晶等）。
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3) 包封率的测定（超速离心法）：取1ml水 杨酸脂质体混悬液置离心机里，10000转/ 分离心5分钟。取0.1ml上清液置试管内， 加蒸馏水9.9ml，摇匀，加入2ml硫酸铁 铵溶液在530nm波长处测定吸光度，由标 准曲线计算未包入脂质体中水杨酸的浓 度。
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实验原理
脂质体系指将药物包封于类脂质双分子层形 成的薄膜中间所制成的超微型球状载体制剂。 优点： 1）酷似细胞结构，有生物膜的特性和功能 2）无毒、无免疫原性，可体内降解 3）对网状内皮系统有趋向性，即被动靶向性 靶向性 4）可包封水溶性和脂溶性药物 5）被包封的药物性质不变，毒性降低，可缓 慢释放 6）延长药物半哀期（t1/2），增加生物利用度 7）促进药物透皮吸收
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操作注意
1）溶解磷脂和胆固醇的乙醚溶液应澄清，否则 ）溶解磷脂和胆固醇的乙醚溶液应澄清， 需过滤除去杂质。 需过滤除去杂质。 2）乙醚液的注入，可用 ）乙醚液的注入，可用1ml的注射器或细滴管滴 的注射器或细滴管滴 至生理盐水的内部，每滴一滴， 至生理盐水的内部，每滴一滴，须使产生的泡 沫消失后再加第二滴。 沫消失后再加第二滴。 3）整个实验过程中，温度可控制在 －60℃， ）整个实验过程中，温度可控制在50－ ℃ 操作中始终要搅拌， 操作中始终要搅拌，加入水杨酸后搅拌的时间 不得少于2h，因为脂质体的形成有个过程， 不得少于 ，因为脂质体的形成有个过程，温 度、滴加速度和搅拌时间对脂质体的形成均有 影响。 影响。
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试剂与器材
1.试剂：水杨酸、卵磷脂、胆固醇、生理 盐水、乙醚、 2.器材：磁力搅拌器、光学显微镜、分光 光度计、离心机
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实验步骤
处方
水杨酸 卵磷脂 胆固醇 生理盐水 0.25g 2g 0.2g 适量
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操作
1）磷脂、胆固醇乙醚溶液的配制：取处方量的
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脂质体分类：可分为三类 1）小单室脂质体：由一层类脂质双分子层 构成，粒径在20－50nm，可称为纳米脂 质体。 2）大单室脂质体：由一层类脂质双分子层 构成，粒径约为100－1000nm。 3）多室脂质体，由多层类脂质双分子层构 成，粒径约在1000－5000nm
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缺点： 1）贮存中稳定性不佳 2）包封率低 3）易被网状内皮系统吞噬和与血浆蛋白结 合，因而，在血循环中的时间不长 4）靶向性不理想 5）透皮促进作用不够强
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脂质体系由磷脂为骨架膜材及附加剂组成。 脂质体系由磷脂为骨架膜材及附加剂组成。 用于制备脂质体的磷脂有天然磷脂，如豆磷脂， 用于制备脂质体的磷脂有天然磷脂，如豆磷脂，卵磷脂 合成磷脂，如二棕榈酰磷脂酰胆碱， 等；合成磷脂，如二棕榈酰磷脂酰胆碱，二硬脂酰磷脂 酰胆碱等。 酰胆碱等。 磷脂在水中能形成脂质体是由其结构决定的。 磷脂在水中能形成脂质体是由其结构决定的。磷脂 具有两条较长的疏水烃链和一个亲水基团。 具有两条较长的疏水烃链和一个亲水基团。当较多的磷 脂加至水或水性溶液中，磷脂分子定向排列， 脂加至水或水性溶液中，磷脂分子定向排列，其亲水基 团面向两侧的水相， 团面向两侧的水相，疏水的烃链彼此对向缔合形成双分 子层，形成椭圆形或球状结构——脂质体。常用的附加 脂质体。 子层，形成椭圆形或球状结构 脂质体 剂为胆固醇，它也是两亲性物质，与磷脂混合使用， 剂为胆固醇，它也是两亲性物质，与磷脂混合使用，可 制备稳定的脂质体，其作用是调节双分子层流动性， 制备稳定的脂质体，其作用是调节双分子层流动性，减 低脂质体膜的通透性。其它附加剂有十八胺、 低脂质体膜的通透性。其它附加剂有十八胺、磷脂酸 等，这两种附加剂可改变脂质体表面电荷的性质。 这两种附加剂可改变脂质体表面电荷的性质。
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Hale Waihona Puke Baidu
实验结果与讨论
1. 绘制显微镜下脂质体的形态图。 2. 测定脂质体粒径大小及粒径分布。 3. 计算脂质体包封率。
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思考题
1．乙醚注入法制备脂质体成败的关键是什 ． 么? 2．制备脂质体时加入胆固醇的目的是什么 ．制备脂质体时加入胆固醇的目的是什么?
卵磷脂、胆固醇溶于15～20ml的乙醚中，即得。 2）水杨酸脂质体的制备：取生理盐水约30ml于 50ml烧杯中，置磁力搅拌器上，加热至50～ 60℃，将含卵磷脂、胆固醇的乙醚液慢慢滴加 于生理盐水中（30min滴完），之后继续搅拌 约10min.，使乙醚完全蒸发除去，加入水杨酸， 再继续搅拌2h，加生理盐水至50ml，取下磁力 搅拌器，镜检，即得。
包封率的测定： C总－C游离 包封率％＝ _________ ×100％ C总 式中：C总－脂质体混悬液中的药物浓度 C游离－未包入脂质体中的药物浓度
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制备方法： 制备方法： 1）薄膜分散法：一种经典的制备方法，将类脂 ）薄膜分散法：一种经典的制备方法， 材料溶解在有机溶剂中,然后在旋转蒸发器上 然后在旋转蒸发器上, 材料溶解在有机溶剂中 然后在旋转蒸发器上 在真空下蒸除溶剂,加入缓冲液 加入缓冲液,再加入一些小 在真空下蒸除溶剂 加入缓冲液 再加入一些小 玻璃球帮助分散，可形成多室脂质体。 玻璃球帮助分散，可形成多室脂质体。 2）注入法：分为乙醚注入法和乙醇注入法。本 注入法： 注入法 分为乙醚注入法和乙醇注入法。 次实验用乙醚注入法，适用于实验室小量制备 次实验用乙醚注入法， 脂质体，制得的脂质体为大单室脂质体。 脂质体，制得的脂质体为大单室脂质体。此法 较温和，包封率高且被氧化的可能性小。 较温和，包封率高且被氧化的可能性小。 3）反相蒸发法：是制备多层脂质体或大单室脂 ）反相蒸发法： 质体的方法，此法包封率高。 质体的方法，此法包封率高。
脂质体的包埋 及包封率测定
1、脂质体的制备 、 2、脂质体包封率 、
的测定
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目录
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1、目的要求 、 2、实验原理 、 3、试剂与器材 、 4、实验步骤 、 5、质量检查 、 6、思考题 、
目的要求
1、掌握注入法制备脂质体的工艺； 2 2、掌握脂质体包封率的测定方法。
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4）冷冻干燥法：适用于在水中不稳定的药物制 ）冷冻干燥法： 备脂质体。 备脂质体。 5）熔融法：适用于制备多相脂质体，稳定，可 ）熔融法：适用于制备多相脂质体，稳定， 加热灭菌。 加热灭菌。 6）超声波分散法：将类脂材料溶解在有机溶剂 ）超声波分散法： 然后在旋转蒸发器上,在真空下蒸除溶剂 中,然后在旋转蒸发器上 在真空下蒸除溶剂 加 然后在旋转蒸发器上 在真空下蒸除溶剂,加 入缓冲液,再加入一些小玻璃球帮助分散 再加入一些小玻璃球帮助分散， 入缓冲液 再加入一些小玻璃球帮助分散，可形 成多室脂质体，经超声处理，得到小单室脂质 成多室脂质体，经超声处理， 体。此法操作简便，但包封率较低。 此法操作简便，但包封率较低。 7）高压乳匀法：将各成分加入溶剂中，通过高 ）高压乳匀法：将各成分加入溶剂中， 压均质机均匀分散成脂质体。 压均质机均匀分散成脂质体。
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质量检查与评定
1)脂质体的形态与粒度
2)异物：显微镜下观察有无异物（有色斑 块，棒状结晶等）。
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3) 包封率的测定（超速离心法）：取1ml水 杨酸脂质体混悬液置离心机里，10000转/ 分离心5分钟。取0.1ml上清液置试管内， 加蒸馏水9.9ml，摇匀，加入2ml硫酸铁 铵溶液在530nm波长处测定吸光度，由标 准曲线计算未包入脂质体中水杨酸的浓 度。
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实验原理
脂质体系指将药物包封于类脂质双分子层形 成的薄膜中间所制成的超微型球状载体制剂。 优点： 1）酷似细胞结构，有生物膜的特性和功能 2）无毒、无免疫原性，可体内降解 3）对网状内皮系统有趋向性，即被动靶向性 靶向性 4）可包封水溶性和脂溶性药物 5）被包封的药物性质不变，毒性降低，可缓 慢释放 6）延长药物半哀期（t1/2），增加生物利用度 7）促进药物透皮吸收
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操作注意
1）溶解磷脂和胆固醇的乙醚溶液应澄清，否则 ）溶解磷脂和胆固醇的乙醚溶液应澄清， 需过滤除去杂质。 需过滤除去杂质。 2）乙醚液的注入，可用 ）乙醚液的注入，可用1ml的注射器或细滴管滴 的注射器或细滴管滴 至生理盐水的内部，每滴一滴， 至生理盐水的内部，每滴一滴，须使产生的泡 沫消失后再加第二滴。 沫消失后再加第二滴。 3）整个实验过程中，温度可控制在 －60℃， ）整个实验过程中，温度可控制在50－ ℃ 操作中始终要搅拌， 操作中始终要搅拌，加入水杨酸后搅拌的时间 不得少于2h，因为脂质体的形成有个过程， 不得少于 ，因为脂质体的形成有个过程，温 度、滴加速度和搅拌时间对脂质体的形成均有 影响。 影响。
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试剂与器材
1.试剂：水杨酸、卵磷脂、胆固醇、生理 盐水、乙醚、 2.器材：磁力搅拌器、光学显微镜、分光 光度计、离心机
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实验步骤
处方
水杨酸 卵磷脂 胆固醇 生理盐水 0.25g 2g 0.2g 适量
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操作
1）磷脂、胆固醇乙醚溶液的配制：取处方量的
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脂质体分类：可分为三类 1）小单室脂质体：由一层类脂质双分子层 构成，粒径在20－50nm，可称为纳米脂 质体。 2）大单室脂质体：由一层类脂质双分子层 构成，粒径约为100－1000nm。 3）多室脂质体，由多层类脂质双分子层构 成，粒径约在1000－5000nm
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缺点： 1）贮存中稳定性不佳 2）包封率低 3）易被网状内皮系统吞噬和与血浆蛋白结 合，因而，在血循环中的时间不长 4）靶向性不理想 5）透皮促进作用不够强
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脂质体系由磷脂为骨架膜材及附加剂组成。 脂质体系由磷脂为骨架膜材及附加剂组成。 用于制备脂质体的磷脂有天然磷脂，如豆磷脂， 用于制备脂质体的磷脂有天然磷脂，如豆磷脂，卵磷脂 合成磷脂，如二棕榈酰磷脂酰胆碱， 等；合成磷脂，如二棕榈酰磷脂酰胆碱，二硬脂酰磷脂 酰胆碱等。 酰胆碱等。 磷脂在水中能形成脂质体是由其结构决定的。 磷脂在水中能形成脂质体是由其结构决定的。磷脂 具有两条较长的疏水烃链和一个亲水基团。 具有两条较长的疏水烃链和一个亲水基团。当较多的磷 脂加至水或水性溶液中，磷脂分子定向排列， 脂加至水或水性溶液中，磷脂分子定向排列，其亲水基 团面向两侧的水相， 团面向两侧的水相，疏水的烃链彼此对向缔合形成双分 子层，形成椭圆形或球状结构——脂质体。常用的附加 脂质体。 子层，形成椭圆形或球状结构 脂质体 剂为胆固醇，它也是两亲性物质，与磷脂混合使用， 剂为胆固醇，它也是两亲性物质，与磷脂混合使用，可 制备稳定的脂质体，其作用是调节双分子层流动性， 制备稳定的脂质体，其作用是调节双分子层流动性，减 低脂质体膜的通透性。其它附加剂有十八胺、 低脂质体膜的通透性。其它附加剂有十八胺、磷脂酸 等，这两种附加剂可改变脂质体表面电荷的性质。 这两种附加剂可改变脂质体表面电荷的性质。
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实验结果与讨论
1. 绘制显微镜下脂质体的形态图。 2. 测定脂质体粒径大小及粒径分布。 3. 计算脂质体包封率。
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思考题
1．乙醚注入法制备脂质体成败的关键是什 ． 么? 2．制备脂质体时加入胆固醇的目的是什么 ．制备脂质体时加入胆固醇的目的是什么?
卵磷脂、胆固醇溶于15～20ml的乙醚中，即得。 2）水杨酸脂质体的制备：取生理盐水约30ml于 50ml烧杯中，置磁力搅拌器上，加热至50～ 60℃，将含卵磷脂、胆固醇的乙醚液慢慢滴加 于生理盐水中（30min滴完），之后继续搅拌 约10min.，使乙醚完全蒸发除去，加入水杨酸， 再继续搅拌2h，加生理盐水至50ml，取下磁力 搅拌器，镜检，即得。
包封率的测定： C总－C游离 包封率％＝ _________ ×100％ C总 式中：C总－脂质体混悬液中的药物浓度 C游离－未包入脂质体中的药物浓度
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制备方法： 制备方法： 1）薄膜分散法：一种经典的制备方法，将类脂 ）薄膜分散法：一种经典的制备方法， 材料溶解在有机溶剂中,然后在旋转蒸发器上 然后在旋转蒸发器上, 材料溶解在有机溶剂中 然后在旋转蒸发器上 在真空下蒸除溶剂,加入缓冲液 加入缓冲液,再加入一些小 在真空下蒸除溶剂 加入缓冲液 再加入一些小 玻璃球帮助分散，可形成多室脂质体。 玻璃球帮助分散，可形成多室脂质体。 2）注入法：分为乙醚注入法和乙醇注入法。本 注入法： 注入法 分为乙醚注入法和乙醇注入法。 次实验用乙醚注入法，适用于实验室小量制备 次实验用乙醚注入法， 脂质体，制得的脂质体为大单室脂质体。 脂质体，制得的脂质体为大单室脂质体。此法 较温和，包封率高且被氧化的可能性小。 较温和，包封率高且被氧化的可能性小。 3）反相蒸发法：是制备多层脂质体或大单室脂 ）反相蒸发法： 质体的方法，此法包封率高。 质体的方法，此法包封率高。
脂质体的包埋 及包封率测定
1、脂质体的制备 、 2、脂质体包封率 、
的测定
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目录
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1、目的要求 、 2、实验原理 、 3、试剂与器材 、 4、实验步骤 、 5、质量检查 、 6、思考题 、
目的要求
1、掌握注入法制备脂质体的工艺； 2 2、掌握脂质体包封率的测定方法。
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