脂质体
药剂学--脂质体介绍
H
+
NH3
H O O P O O
O
C O
COO
HO
O
O
P O O
O
O
P O O
O
O
O O
O O
O
O O
R
R
R
R
R
R
磷脂酸 (phosphatidic acid,PA)
磷脂酰肌醇 (phosphatidyl inositol,PI)
磷脂酰丝氨酸 (phosphatidyl serine, PS)
脂质体的分类按结构分类多囊脂质体的结构脂质体的分类按结构性能分类特殊性能脂质体特殊的脂质材料制成普通脂质体一般脂质材料制成热敏感性脂质体ph敏感脂质体多糖被复的脂质体免疫脂质体长循环脂质体光敏脂质体磁性脂质体脂质体的分类按荷电性分类正电荷脂质体负电荷脂质体中性脂质体脂质体的分类按给药途径分类静脉给药脂质体口服给药脂质体肺部吸入给药脂质体眼部用药脂质体黏膜给药脂质体外用脂质体和经皮给药脂质体局部注射用脂质体肌注关节腔脊髓腔肿瘤内等免疫诊断用脂质体基因工程和生物工程用脂质体第三节脂质体的制备方法薄膜分散法制备方法逆相蒸发法溶剂注入法冷冻干燥法ph梯度法前体脂质体法干膜超声法薄膜振荡分散法薄膜匀化法薄膜挤压法乙醇注入法乙醚注入法一
第二节 脂质体的组成、结构、理化性质与分类
一、脂质体的组成
磷酸骨架
亲水的头部
磷脂 脂质体
疏水的尾部
水溶性分子（胆碱、丝氨酸等）
两条脂肪酸链， （10-24个C原子，0-6个双键）
胆固醇
脂质体的组成
HO
磷脂示意图
胆固醇的结构图
脂质体的组成
磷脂酰胆碱（PC） 中性磷脂 磷脂酰乙醇胺（PE） 鞘磷脂（SM）
脂质体的介绍PPT课件
基因沉默研究
利用脂质体传递小干扰 RNA等分子，实现基因的 沉默和功能抑制。
基因编辑技术研究
利用脂质体传递基因编辑 工具，如CRISPR-Cas9系 统，实现基因的精确编辑 和修复。
05பைடு நூலகம்
脂质体的挑战与前景
稳定性问题
储存稳定性
脂质体在储存过程中容易发生聚 集和融合，影响其药物传递效果。
逆向蒸发法
逆向蒸发法的优点
逆向蒸发法可以制备出粒径较小 、粒度分布较窄的脂质体，且制 备过程中可以加入多种药物，制 备过程简单、快速。
逆向蒸发法的缺点
由于需要使用有机溶剂，可能对 药物产生影响，且制备过程中需 要控制温度和压力等参数，操作 难度较大。
其他制备方法
微射流技术
通过高压水射流将药物和脂质材料混 合在一起，形成脂质体。该方法可以 制备出粒径较小、粒度分布较窄的脂 质体，且制备过程快速、高效。
新材料与新技术的应用
新材料
新型脂质材料如聚乙二醇脂质体、胆固醇脂质体等，具有更好的稳定性和生物 相容性，提高了药物的包封率和靶向性。
新技术
纳米技术、超声波技术、微流控技术等在脂质体制备中的应用，提高了脂质体 的制备效率和均一性，同时为脂质体的功能化提供了更多可能性。
脂质体作为药物传递系统的研究进展
工艺成本
脂质体的制备工艺复杂，需要精密的 设备和专业的技术人员，增加了生产 成本。
市场前景与展望
药物传递领域
化妆品领域
脂质体作为药物传递系统在肿瘤、感染等 疾病治疗领域具有广阔的应用前景。
脂质体在化妆品领域的应用逐渐增多，可 提高皮肤对营养成分的吸收，改善皮肤状 况。
脂质体
脂质体(Liposomes)是由卵磷脂和神经酰胺等制得的脂质体(空心)，具有的双分子层结构与皮肤细胞膜结构相同，对皮肤有优良的保湿作用，尤其是包敷了保湿物质如透明质酸、聚葡糖苷等的脂质体是更优秀的保湿性物质。
脂质体（liposome）是一种人工膜。
在水中磷脂分子亲水头部插入水中，脂质体疏水尾部伸向空气，搅动后形成双层脂分子的球形脂质体，直径25~1000nm不等。
脂质体可用于转基因，或制备的药物，利用脂质体可以和细胞膜融合的特点，将药物送入细胞内部生物学定义：当两性分子如磷脂和鞘脂分散于水相时，分子的疏水尾部倾向于聚集在一起，避开水相，而亲水头部暴露在水相，形成具有双分子层结构的的封闭囊泡，称为脂质体。
药剂学定义脂质体(liposome): 系指将药物包封于类脂质双分子层内而形成的微型泡囊体。
脂质体的分类1.脂质体按照所包含类脂质双分子层的层数不同，分为单室脂质体和多室脂质体。
小单室脂质体(SUV)：粒径约0.02～0.08μm；大单室脂质体(LUV）为单层大泡囊，粒径在0.1～lμm。
多层双分子层的泡囊称为多室脂质体(MIV)，粒径在1～5μm之间。
2.按照结构分：单室脂质体，多室脂质体，多囊脂质体3.按照电荷分：中性脂质体，负电荷脂质体，正电荷脂质体4.按照性能分：一般脂质体，特殊功效脂质体组成和结构脂质体的组成：类脂质（磷脂）及附加剂。
脂质体脂质体如注射给药脂质体的粒径应小于200nm，且分布均匀，呈正态性，跨距宜小。
2、包封率和载药量包封率：包封率=（脂质体中包封的药物/脂质体中药物总量）×100%一般采用葡聚糖凝胶、超速离心法、透析法等分离方法将溶液中游离药物和脂质体分离，分别测定，计算包封率。
通常要求脂质体的药物包封率达80%以上。
载药量：载药量=[脂质体中药物量/（脂质体中药物+载体总量）]×100%载药量的大小直接影响到药物的临床应用剂量，故载药量愈大，愈易满足临床需要。
脂质体
脂质体（Liposomes）是由磷脂胆固醇等为膜材包合而成。
磷脂分散在水中时能形成多层微囊，且每层均为脂质双分子层，各层之间被水相隔开，这种微囊就是脂质体。
脂质体可分为单室脂质体、多室脂质体，含有表面活性剂的脂质体。
按性能脂质体可分为一般质体(包括上述单室脂质体、多室脂质体和多相脂质体等)特殊性能脂质体、热敏脂质体、PH敏感脂质体、超声波敏感脂质体、光敏脂质体和磁性脂质体等。
按电荷性，脂质体可分为中性脂质体、负电性脂质体、正电性脂质体。
脂质体作为药物载体在恶性肿瘤的靶向给药治疗方面极具潜力。
为克服脂质体作为载体的靶向分布不理想、稳定性较差的缺点，近年来开发了一些新型脂质体，如温度敏感型、PL敏感型、免疫、聚合膜脂质体。
前体脂质体概念的提出和研究，提供了克服脂质体不稳定的较好思路。
脂质体作为目前最先进的，被喻为"生物导弹"的第四代给药系统成为靶向给药系统的新剂型。
脂质体的靶向性通过改变脂质体的给药方式、给药部位和粒径来调整其靶向，另外，还可在脂质体上连接某种识别分子，通过其与靶细胞的特异性结合来实现专一靶向性。
靶向性是脂质体作为药物载体最突出的优点，脂质体进入体内后，主要被网状内皮系统吞噬，从而使所携带的药物，在肝、脾、肺和骨髓等富含吞噬细胞的组织器官内蓄积。
1.天然靶向性是脂质体静脉给药时的基本特征，这是由于脂质体进入体内即被巨噬细胞作为外界异物吞噬的天然倾向产生的。
脂质体不仅是肿瘤化疗药物的理想载体，也是免疫激活剂的理想载体。
2. 隔室靶向性是指脂质体通过不同的给药方式进入体内后，可以对不同部位具有靶向性，可以通过各种给药方式进入体内不同的隔室位置产生靶向性。
在组织间或腹膜内给予脂质体时，由于隔室的特点，可增加对淋巴结的靶向性。
3. 物理靶向性这种靶向性是在脂质体的设计中，应用某种物理因素的改变，例如用药局部的pH、病变部位的温度等的改变而明显改变脂质体膜的通透性，引起脂质体选择性地在该部位释放药物。
脂质体及其用于药物包装
有细胞亲和性与组织相容性——脂质体是类似生物膜结构的囊泡，有细胞亲 和性与组织相容性，并可长时间吸附于靶细胞周围，使药物能充分向靶细胞 渗透，因而脂质体可通过融合方式进入细胞内，经溶酶体消化、释放药物。
能降低药物毒性——药物被脂质体包封后，主要被单核—巨噬 细胞系统的吞噬细胞所摄取（在肝、脾和骨髓等网状内皮细胞 较丰富的器官中浓集），而药物在心脏和肾脏中的累积量比游 离药物低得多，从而使药物的心、肾毒性降低
能提高药物的稳定性——显然脂质体可可以增加药物在体外的 稳定性，同时也会增加药物在体内的稳定性，这是由于药物在 进入靶区前被包在脂质体内，使药物免受机体酶等因素的分解。
制备脂质 体的方法
对于脂溶性的、与磷脂膜亲和力高及水溶性较好的药物，被动 载药法较为适用。 ○ 薄膜分散法、冷冻干燥法、注入法、超声波分散法
○ 目前利用物理靶向性设计最成功的例子是温度敏感脂质体,这种脂质体是使用具有一定的相变温 度的脂质混合物作为膜材，在肿瘤局部热疗机的作用下，当温度敏感脂质体进入肿瘤区的毛细血 管床时，脂质体达到相变温度，转变为液晶态，使脂质体中的药物迅速释放。
长效性（缓释性）——脂质体及包封的药物在血循环中保留的时间，多数要 比游离药物长得多.而且可以根据需要, 设计具有不同半衰期的脂质体作为长 效的药物载体。这种药物载体, 使药物缓慢地从脂质体中释放出来, 在细胞的 生长周期中更好地发挥作用, 从而提高治疗指数。
脂质体_精品文档
第四节 脂质体的制备技术
薄膜分散法 逆向蒸发法
Te注x入t 法
去污剂分散法 钙融合法 冻结融解法
脂质体
制备方法
主动包封法 冷冻干燥法
复乳法 离心法 前体脂质体法
………..
• 一、薄膜分散法: • 方法：将类脂溶于有机溶剂中,通入氮气或减压除去有机
溶剂,在容器壁上形成类脂薄膜，然后加入含有水溶性药 物的缓冲液，通过振摇使类脂膜吸水膨胀，弯曲封闭形成 脂质体（大多层脂质体）。 • 举例：三七总皂苷脂质体的制备 • 准确称取处方量的注射用大豆磷脂、胆固醇，加适量乙醚 使其溶解并转移至250ml茄形瓶中，置25℃恒温水浴减 压除去乙醚，使脂质体在瓶壁上成均匀薄膜，茄形瓶置真 空干燥箱内真空干燥过夜，瓶内加入含处方量三七总皂苷 的磷酸盐缓冲液适量以及2粒直径为0.8mm的搅拌子， 25 ℃恒温水浴旋转洗膜1小时，得乳白色混悬液。 • 通过干膜超声法、薄膜-振荡分散法、薄膜-匀化法、薄膜 -挤压法等使薄膜法制得的大多层脂质体分散成单层或大 单层脂质体。
积百分比。 • 药脂包封比：一定质量的类脂所包封药物的质量百分比。
• （１）毒性最低、无免疫原性、无致热原性、能正常代谢和消除。 • （２）脂质体的大小、成分、表面电荷等有很大的选择空间。 • （３）脂质体对亲水性和亲脂性的药物都能包裹。 • （４）制备简单 • （５）靶向分子能以最优结构与靶部位受体结合 • （６）为所包裹药物的靶向性提供新的可能性。 • （７）在载药脂质体表面结合不同的配基将药物递送到特定靶组织和靶细胞
粒径大小不均匀
体内动态 静脉给药后易被网 状内皮细胞捕获
静脉给药后可分 配进入实质细胞 ，静脉给药后血 中的半衰期长
静脉给药后易被 网状内皮细胞捕 获；体内稳定性 比MLV差
脂质体pptpptx(2024)
脂质体可以作为药物载体，将 药物包裹在内部水相或嵌入脂 质双分子层中，通过静脉注射 等方式给药。
脂质体的粒径通常在纳米级别 ，具有良好的生物相容性和生 物可降解性。
4
发展历程
20世纪60年代，脂质体首次被 提出并应用于药物传递系统。
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70年代至80年代，脂质体的研 究进入高峰期，大量关于脂质体 制备、性质和应用的研究涌现。
疫苗佐剂
脂质体可作为疫苗佐剂，增强 疫苗的免疫原性，提高疫苗的
保护效果。
其他领域
如抗感染、抗炎、抗过敏等领 域，脂质体也展现出良好的应
用前景。
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脂质体制备技术
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传统制备方法
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薄膜分散法
将磷脂和胆固醇等膜材溶于有机溶剂中，然后在减压旋转蒸 发仪上去除有机溶剂，形成一层均匀的脂质薄膜，再加入含 药溶液进行振荡或超声处理，使脂质薄膜分散成脂质体。
注入法
将磷脂和胆固醇等膜材溶于有机溶剂中，然后将此溶液经注 射器缓缓注入到含药溶液（如水相）中，搅拌挥发除去有机 溶剂，形成脂质体。
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改良制备方法
逆向蒸发法
将磷脂等膜材溶于有机溶剂如氯仿、乙醚中，加入待包封药物的水溶液进行短时间超声处理，直到形成稳定的 W/O型乳剂，然后减压蒸发除去有机溶剂，达到胶态后，滴加缓冲液，使脂质体混悬于介质中，通过凝胶色谱法 或超速离心法，除去未包入的药物。
针对特殊人群进行安全性评价
对于孕妇、儿童等特殊人群，应进行针对性的安全性评价，以确保用 药安全。
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06
脂质体未来发展趋势与挑 战
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脂质体.ppt.pptx
5.作为基因工程载体 运载核酸至动物细胞 ,运载核酸至植物细胞 .
6.人造血液代用品----- 血红蛋白脂质体 血红蛋白脂质体是一种无抗原、无病毒而携氧、 可用于复苏的液体制品 , 目前正在动物模型上 开展其安全性、有效性及药物动力学研究。
七
给药途径
脂质体的给药途径主要包括 (1)静脉注射；(2)肌内和皮下注射；(3)口服给药；(4) 眼部给药；(5)肺部给药；(6)经皮给药；(7)鼻腔 给药。
五 脂质体的特点
1、靶向性和淋巴定向性：肝、脾网状内皮系统的被 动靶向性。用于肝寄生虫病、利什曼病等单核巨噬细胞系统疾病的防治。如肝利什曼原虫药 锑酸葡胺脂质体，其肝中浓度比普通制剂提高 了200～700倍。 2、缓释作用：缓慢释放，延缓肾排泄和代谢，从而 延长作用时间。 3、降低药物毒性：如两性霉素B脂质体可降低心脏 毒性。 4、提高稳定性：如胰岛素脂质体、疫苗等可提高主 药的稳定性。
3、免疫脂质体：脂质体表面联接抗体，对靶细胞进行识别， 提高脂质体的靶向性。如在丝裂霉素（MMC）脂质体上 结合抗胃癌细胞表面抗原的单克隆抗体3G 制成免疫脂质， 在体内该免疫脂质体对胃癌靶细胞的M85杀伤作用比游离 MMC提高4倍。 4、热敏脂质体：利用在相变温度时，脂质体的类脂质双分 子层膜从胶态过渡到液晶态，脂质膜的通透性增加，药物 释放速度增大的原理制成热敏脂质体。例如将二棕榈酸磷 脂（DPPC）和二硬脂酸磷脂(DSPC)按一定比例混合，制 成的3H甲氨喋呤热敏脂质体，再注入荷Lewis肺癌小鼠的 尾静脉后，再用微波加热肿瘤部位至42℃，病灶部位的放 射性强度明显的高于非热敏脂质体对照组。 5、pH敏感性脂质体：由于肿瘤间质的pH比周围正常组织细 胞低，选用对pH敏感性的类脂材料，如二棕榈酸磷脂或 十七烷酸磷脂为膜材制备成载药脂质体。当脂质体进入肿 瘤部位时，由于pH的降低导致脂肪酸羧基脂质化成六方 晶相的非相层结构，从而使膜融合，加速释药。 总之，脂质体作为药物载体是临床应用较早，发展最为成熟 的一类新型靶向制剂。目前，美国FDA批准上市的脂质体 产品有两性霉素B、阿霉素脂质体。批准进入临床试验的 脂质体有丁胺卡钠霉素。
药剂学脂质体介绍
新型磷脂材料
具有更好的生物相容性和 稳定性，能够提高脂质体 的疗效和安全性。
纳米技术
纳米脂质体具有更小的粒 径和更高的靶向性，能够 实现对病变组织的精准治 疗。
智能化技术
利用智能化技术实现对脂 质体制备过程的精准控制， 提高生产效率和产品质量。
个性化医疗需求下创新发展方向
定制化脂质体
根据不同患者的需求和病情，定制具有特定功能和疗效的脂质体。
03
典型药物脂质体制剂案例分析
抗肿瘤药物脂质体制剂
阿霉素脂质体
将阿霉素包裹在脂质体内，可降低药物毒性，提高疗效，广泛用于 治疗多种恶性肿瘤。
顺铂脂质体
顺铂是一种常用的抗肿瘤药物，但其肾毒性较大。通过脂质体包裹， 可降低肾毒性，提高药物在肿瘤组织的分布。
米托蒽醌脂质体
米托蒽醌是一种拓扑异构酶抑制剂，具有广谱抗肿瘤活性。脂质体剂 型可提高其水溶性，降低心脏毒性。
05
挑战、发展趋势及未来展望
当前面临挑战和问题剖析
01
02
03
稳定性问题
脂质体在储存和运输过程 中容易发生聚集、融合和 泄漏等现象，影响其稳定 性和疗效。
靶向性问题
传统脂质体缺乏主动靶向 性，难以实现对病变组织 的精准治疗。
规模化生产难题
脂质体的制备工艺复杂， 难以实现大规模、高效的 生产。
新型材料和技术在脂质体领域应用前景
广泛应用前景。脂质体型剂可提高生长因子的稳定性和靶向性。
ห้องสมุดไป่ตู้
04
脂质体在化妆品和食品领域拓 展应用
化妆品中作为包裹活性成分载体
保护活性成分
脂质体能够包裹化妆品中的活性成分，如维生素C、维生素E等， 防止其氧化和降解，从而保持其稳定性和生物活性。
脂质体(2h)
一、概述 Introductions
脂质体在体内与细胞的作用过程:分吸附 adsorption 、 脂 交 换 lipid exchange 、 内 吞 endocytosis、融合 四个阶段。 、融合fusion四个阶段。 四个阶段 吸附是脂质体与细胞作用的开始 是脂质体与细胞作用的开始， 吸附是脂质体与细胞作用的开始，受粒子大小和 表面电荷等因素影响； 表面电荷等因素影响； 脂交换是脂质体的脂类与细胞膜上脂类发生交换 是脂质体的脂类与细胞膜上脂类发生交换； 脂交换是脂质体的脂类与细胞膜上脂类发生交换； 内吞作用是脂质体被作为外来异物吞噬 是脂质体被作为外来异物吞噬， 内吞作用是脂质体被作为外来异物吞噬，通过内 吞，脂质体能特异地将药物浓集于起作用的细胞 内； 融合指脂质体的膜与细胞膜融合进入细胞内 指脂质体的膜与细胞膜融合进入细胞内， 融合指脂质体的膜与细胞膜融合进入细胞内，然 后经溶酶体消化释放药物。 后经溶酶体消化释放药物。
二、制备脂质体的材料 Materials for preparation of liposomes • 3．正电荷脂质 ． • 正电荷脂质均为人工合成产品，目前常用 正电荷脂质均为人工合成产品， 的正电荷脂质有： 的正电荷脂质有： • 硬脂酰胺（stearylamine, SA）； 硬脂酰胺（ ）； • 胆固醇衍生物等。 胆固醇衍生物等。 • 正电荷脂质制备的脂质体在基因的传递系 统中应用非常普遍。 统中应用非常普遍。
三、制备脂质体的方法 Preparation of liposomes
2．逆相蒸发法 ．逆相蒸发法Reverse-phase evaporation • 最初由 最初由Szoka提出。一般的制法系将磷脂等膜材溶于 提出。 提出 有机溶剂如氯仿、乙醚等， 有机溶剂如氯仿、乙醚等，加入待包封药物的水溶 水溶液:有机溶剂 有机溶剂=1:3-1:6）进行短时超声，直 液（水溶液 有机溶剂 ）进行短时超声， 至形成稳定的W／ 型乳剂 减压蒸发有机溶剂， 型乳剂， 至形成稳定的 ／O型乳剂，减压蒸发有机溶剂， 形成脂质体。 形成脂质体。 • 用逆相蒸发法制备的脂质体一般为大单层脂质体， 用逆相蒸发法制备的脂质体一般为大单层脂质体， 常称为REVs。 常称为 。 • 本法特点是包封的药物量大，体积包封率可大于超 本法特点是包封的药物量大， 声波分散法30倍 声波分散法 倍，它适合于包封水溶性药物及大分 子生物活性物质如各种抗生素、胰岛素、 子生物活性物质如各种抗生素、胰岛素、免疫球蛋 碱性磷脂酶、核酸等。 白、碱性磷脂酶、核酸等。
脂质体
磷脂、胆固醇与脂溶性药物共溶 于有机溶剂
制备方法
4．逆相蒸发法
W/O乳剂 超 声
混合，超声处理直至形成稳定的W/O乳剂
制备方法
4．逆相蒸发法
蒸发
有机溶剂
磷酸盐 缓冲液
减压蒸发除去有机溶剂 达到胶态后，加入磷酸 盐缓冲液，旋转使器壁
上凝胶脱落，继续减压
蒸发除去有机溶剂，得 到脂质体水性混悬液。
制备方法
制备方法
5．冷冻干燥法
作用机理:
吸附 adsorption
脂交换 lipid exchange 磷酸脂酶消化 内吞 endocytosis 扩散 融合 fusion
膜间转运与接触释放
吸附
内吞、融合
优点
靶向性
细胞亲和性
长效性
优点
组织相容性
降低毒副作用
保护稳定性
应用概况
• 1971年英国莱门等人开始将脂质体用于药物载体。 • 我国上世纪80年代开始进行脂质体的研究工作 • 2000年，世界脂质体产品销售额为12亿美元。2005年，达 33亿美元，增长率为175%。 • 国外已上市的脂质体药物品种有两性霉素、多柔比星和柔红 霉素，均为抗癌药物。抗癌药物脂质体是脂质体最重要的应 用。目前还有约30种脂质体抗癌药物正在临床试验或等待批 准上市。
1 抗癌药物脂质体
应用
2 主动靶向脂质体 3 基因治疗用脂质体
药品名 阿霉素
柔红霉素 长春新碱 紫杉醇 顺铂 维甲酸 羟基喜树碱 氨基喜树碱 拓扑替康 依立替康 Lurtotecan 阿糖胞苷
商品名 Myocet Doxil Caelyx Dox-sl LED MCC-465（免疫脂质体） DaunoXome Onco TCS VincaXome LEP SPI-77 ATTA-IV
第一章绪论脂质体的介绍
第一章绪论细胞是构成生物体最基本的结构单位，与生物体进行生命活动密切相关。
没有细胞，就没有完整的生命。
作为基本单位的细胞具有与生命相同的基本特征，即新陈代谢、遗传和变异、以及自我组织的系统。
所有的细胞都具有共同的物质结构基础：细胞膜、遗传系统、核糖体和酶系统。
[1]细胞的周围有一层由脂双分子层和蛋白质构成的膜，称之为细胞膜或质膜。
质膜不仅是细胞把内部与环境分开的边界，还是细胞与周围环境以及细胞与细胞之间进行物质与信息传递的通道。
质膜是可调控的动态屏障。
构成生物膜的物质主要是40%的脂类和50%-60%的蛋白质。
膜中蛋白质的含量与膜的功能有关，蛋白质的含量越高，膜的功能越强。
[1]描述细胞膜结构的模型公认的是流体镶嵌模型，是在1972年由Singer和Nicolson提出的。
[2]他们认为脂类双分子层是膜的“构架”，球蛋白分子有的镶嵌在脂双层的表面，有的则部分或全部嵌入其内，有的横跨脂质双层。
该模型强调了膜的流动性和不对称性。
脂类分子在水中能够自组装成双层结构，即脂质体。
[3]脂质体被证明在生物膜研究中具有重要意义。
将膜蛋白插入到脂质体中可以在比天然生物膜更简单的环境中研究它们的功能。
膜蛋白本身也非常复杂，而膜多肽则仅仅包含其重要功能序列，结构简单，便于从分子水平上分析细胞膜的结构和功能。
1.1 脂质体的基本性质“脂质体”一词最早于1961年由英国的血液学专家Bangham首先提出。
[4] Bangham和Horne在发现干磷脂的负染电镜照片和细胞膜的非常相似，这个结果首次证明了细胞膜由磷脂双分子层组成，并且首次用薄膜水化法成功制备了脂质体。
脂质体是指由脂质分子组成（同时也包含少量其它物质）的囊泡。
脂质分子是含有亲水头部和疏水区域的两亲性小分子（如图1.1）。
图1.1 脂质分子、胶束、脂质体和双层膜的示意图。
1.1.1 脂质分子的化学结构所有脂质分子的结构都来源于丙三醇、鞘氨醇或固醇的衍生物。
由丙三醇、脂肪酸及含氮类物质组成的脂质为甘油磷脂。
脂质体技术——精选推荐
脂质体技术一、什么是脂质体？脂质体是指药物被一层或多层脂质双层包封成的微小囊泡，各层之间被水相隔开，是一种人工制备的磷脂类生化物质，具有生物膜双分子层结构、并排列有序。
脂质体按照其大小及和层数（脂质体中双分子层的数目）一般分为三类：多层囊（MLV），大单层囊（LUV）和小单层囊（SUV），其主要成分是磷脂。
小单室脂质体的粒径在0.02～0.10μm之间，大单室脂质体的粒径在0.1～1μm之间，多室脂质体是双层或多层同轴心的脂质双层，粒径在1～5μm之间。
脂质体具有人体细胞生物膜的特性与功能，影响细胞的活性，是参与人体新陈代谢、维持人体正常生理机能所必需的基础物质之一，作为药物载体具有靶向性、长效性、包容性、亲脂性和亲水性。
脂质体作为药物载体制剂的研究一直备受广大制剂工作者的关注。
近年来，随着生物技术的不断发展，建立脂双层囊泡（脂质体）技术已经成熟，并且已用于制药工业中的药物释放剂和某些化妆品的配制。
由于脂质体具有无毒性和免疫原性，适用于生物体内降解，能够保护被包封的药物，能缓解、控释药物，具有靶向性，可以提高药物疗效，降低毒副作用等优点，利用脂质体包裹药物已越来越受到重视并将得到更广泛的应用。
二、脂质体与皮肤的作用1、穿透性：由于脂质体外膜与人体细胞外膜结构及成分相似，因此完整的脂质体可以穿过角质细胞、角质细胞之间的间隙和皮肤附属管道开口直接穿透皮肤进入作用部位。
2、水合性：脂质体提供了外源性脂质双层膜，使角质细胞间结构改变，脂质双层中疏水性尾部排列紊乱，脂溶性药物可通过扩散和毛细管作用进入细胞间隙，使角质层湿化和水合作用加强，从而能轻易透入表皮的角质层并到达皮肤的各个部位。
3、融合性：脂质体提供必须脂肪酸和类脂双层膜，脂质体磷脂与角质层脂质融合使角质层组成和结构改变，形成一种扁平的颗粒结构，通过脂质颗粒间隙，脂质体包封的药物便于进入皮肤，经由脂质交换、融合作用，维护皮肤的生理功能。
三、脂质体在化妆品中的应用特点：1、能融于水中的人造细胞膜同仁堂脂质体是一种尖端高科技的活性成分载体，由磷脂双分子构成，内含净水的微型囊泡，囊泡内能包囊定量的养分及精华素，其平均直径为100纳米，是人体细胞直径的1/200～1/300，能轻易穿透人体皮肤表层，与细胞融合，发挥功效。
脂质体(liposomes)
选取不同的分散法
Liposome Preparation
Mechanism of Vesicle Formation
例：维生素B12脂质体制备法
取DPPC和DMPC分别与DCP或 SA按摩尔比（9:1）混合均匀 圆底烧瓶中25ml氯仿溶解， 混合脂类10-4mol/L 旋转薄膜蒸发器上，48℃真空 蒸发至呈干燥薄层
脂质体是一种定向营养物（药物）的载 体，它具有类细胞的结构，进入体内主 要被网状内皮系统吞噬,改变被包封药物 的体内分布，使营养物（药物）主要在 肝、脾、肺和骨髓等组织中蓄积，从而 提高营养物（药物）的效果。
四、脂质体的作用机理
脂质体与普通基质的对比
五、脂质体的特点及其机制
药物组织分布可控性 在制备过程中，可通过改变表面的性质。如 粒大小、表面电荷等，提高脂质体药物对靶 区的选择性和定向性，控制药物的组织分布。 缓释性 药物被包在脂质体内，在组织中的扩散速度 降低，在血液中释放减慢，从而延长药物发 挥作用的时间。
七、脂质体的制备方法
1.薄膜法/干膜分散法（TFV） 2.逆相蒸发法 3.复乳法 4.熔融法 5.注入法 6.冷冻干燥法 7.表面活性剂处理法 8.离心法 9.前体脂质体法 10.钙融合法 11.加压挤出法
1、薄膜法/干膜分散法（TFV）
将磷脂等膜材溶于适量的氯仿或其它有机溶剂 减压旋转除去溶剂，脂质在器壁形成薄膜 加入缓冲液，振摇 形成大多层脂质体
脂质体（liposomes）
一、脂质体概述
英国学者Bangham和Standish将磷 脂分散在水中进行电镜观察：形成 多层囊泡，每层均为脂质双分子层， 中央和各层之间被水隔开。 将这种具有类似生物膜结构的双分 子小囊称为脂质体。
脂质体
1、组成与结构理化性质及其特点 2、口服肠溶胰岛素脂质体 3、紫杉醇长循环脂质体 4、脂质体的现状与未来
一、概述
脂质体 （liposomes,或称类脂小球）是一种类 似生物膜结构的双分子层微小囊泡。
分类： 1、单室脂质体：有一层类脂质双分 子层构成 2、多室脂质体：由基层脂质双分子 层将被包含的水溶性药物的水膜隔开形 成不均匀的聚合体
脂质体包裹胰岛素后，能防止酶
的降解作用! 此外，脂质体通过与 肠道细胞膜融合或者表面吸附，
增加了胰岛素进入细胞的途径，
有助于胰岛素的稳定与吸收
（三）口服肠溶胰岛素脂质体 材料和制备方法
材料
壳聚糖(chitosan) 是甲壳素经脱乙酰作 用后得到的一种天然的带正电荷的多糖, 在自然界为仅次于纤维的最丰富的多聚 物,具有亲水性、生物适应性、生物降解 性和低毒等特点,可以作为脂质体的稳定 组分,同时还可作为吸收促进剂。 但是,壳聚糖作为一种弱碱,需一定量的 酸才能使葡糖胺结构单元展开并转变为 带正电荷的溶液状态。在pH 中性时,壳 聚糖分子将失去电荷并从溶液中沉淀出 来,因而壳聚糖作为吸收促进剂的潜在用 途在大肠、结肠和直肠等碱性环境中受 到限制。
除此之外,脂质体还能诱导补体激活,导 致清除增加以及发生心血管和血液不良 事件的风险
脂质体的修饰
长循坏脂质体 免疫脂质体 糖基脂质体 温度敏感脂质体 PH敏感脂质体
二、紫杉醇长循环脂质体
（一）修饰
以聚乙二醇（PEG）作为修饰材料。 PEG的表面被柔顺而亲水的PEG链 部分覆盖，极性PEG基增强了脂质 体的亲水性，减少血浆蛋白与脂质 体的相互作用，降低被巨噬细胞吞 噬的可能，延长在循环系统的滞留 时间，因而有利于肝脾以外的组织 或器官的靶向作用。
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缺点： 1）贮存中稳定性不佳 2）包封率低 3）易被网状内皮系统吞噬和与血浆蛋白结 合，因而，在血循环中的时间不长 4）靶向性不理想 5）透皮促进作用不够强
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脂质体系由磷脂为骨架膜材及附加剂组成。 脂质体系由磷脂为骨架膜材及附加剂组成。 用于制备脂质体的磷脂有天然磷脂，如豆磷脂， 用于制备脂质体的磷脂有天然磷脂，如豆磷脂，卵磷脂 合成磷脂，如二棕榈酰磷脂酰胆碱， 等；合成磷脂，如二棕榈酰磷脂酰胆碱，二硬脂酰磷脂 酰胆碱等。 酰胆碱等。 磷脂在水中能形成脂质体是由其结构决定的。 磷脂在水中能形成脂质体是由其结构决定的。磷脂 具有两条较长的疏水烃链和一个亲水基团。 具有两条较长的疏水烃链和一个亲水基团。当较多的磷 脂加至水或水性溶液中，磷脂分子定向排列， 脂加至水或水性溶液中，磷脂分子定向排列，其亲水基 团面向两侧的水相， 团面向两侧的水相，疏水的烃链彼此对向缔合形成双分 子层，形成椭圆形或球状结构——脂质体。常用的附加 脂质体。 子层，形成椭圆形或球状结构 脂质体 剂为胆固醇，它也是两亲性物质，与磷脂混合使用， 剂为胆固醇，它也是两亲性物质，与磷脂混合使用，可 制备稳定的脂质体，其作用是调节双分子层流动性， 制备稳定的脂质体，其作用是调节双分子层流动性，减 低脂质体膜的通透性。其它附加剂有十八胺、 低脂质体膜的通透性。其它附加剂有十八胺、磷脂酸 等，这两种附加剂可改变脂质体表面电荷的性质。 这两种附加剂可改变脂质体表面电荷的性质。
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操作注意
1）溶解磷脂和胆固醇的乙醚溶液应澄清，否则 ）溶解磷脂和胆固醇的乙醚溶液应澄清， 需过滤除去杂质。 需过滤除去杂质。 2）乙醚液的注入，可用 ）乙醚液的注入，可用1ml的注射器或细滴管滴 的注射器或细滴管滴 至生理盐水的内部，每滴一滴， 至生理盐水的内部，每滴一滴，须使产生的泡 沫消失后再加第二滴。 沫消失后再加第二滴。 3）整个实验过程中，温度可控制在 －60℃， ）整个实验过程中，温度可控制在50－ ℃ 操作中始终要搅拌， 操作中始终要搅拌，加入水杨酸后搅拌的时间 不得少于2h，因为脂质体的形成有个过程， 不得少于 ，因为脂质体的形成有个过程，温 度、滴加速度和搅拌时间对脂质体的形成均有 影响。 影响。
包封率的测定： C总－C游离 包封率％＝ _________ ×100％ C总 式中：C总－脂质体混悬液中的药物浓度 C游离－未包入脂质体中的药物浓度
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制备方法： 制备方法： 1）薄膜分散法：一种经典的制备方法，将类脂 ）薄膜分散法：一种经典的制备方法， 材料溶解在有机溶剂中,然后在旋转蒸发器上 然后在旋转蒸发器上, 材料溶解在有机溶剂中 然后在旋转蒸发器上 在真空下蒸除溶剂,加入缓冲液 加入缓冲液,再加入一些小 在真空下蒸除溶剂 加入缓冲液 再加入一些小 玻璃球帮助分散，可形成多室脂质体。 玻璃球帮助分散，可形成多室脂质体。 2）注入法：分为乙醚注入法和乙醇注入法。本 注入法： 注入法 分为乙醚注入法和乙醇注入法。 次实验用乙醚注入法，适用于实验室小量制备 次实验用乙醚注入法， 脂质体，制得的脂质体为大单室脂质体。 脂质体，制得的脂质体为大单室脂质体。此法 较温和，包封率高且被氧化的可能性小。 较温和，包封率高且被氧化的可能性小。 3）反相蒸发法：是制备多层脂质体或大单室脂 ）反相蒸发法： 质体的方法，此法包封率高。 质体的方法，此法包封率高。
卵磷脂、胆固醇溶于15～20ml的乙醚中，即得。 2）水杨酸脂质体的制备：取生理盐水约30ml于 50ml烧杯中，置磁力搅拌器上，加热至50～ 60℃，将含卵磷脂、胆固醇的乙醚液慢慢滴加 于生理盐水中（30min滴完），之后继续搅拌 约10min.，使乙醚完全蒸发除去，加入水杨酸， 再继续搅拌2h，加生理盐水至50ml，取下磁力 搅拌器，镜检，即得。
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试剂与器材
1.试剂：水杨酸、卵磷脂、胆固醇、生理 盐水、乙醚、 2.器材：磁力搅拌器、光学显微镜、分光 光度计、离心机
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பைடு நூலகம்
实验步骤
处方
水杨酸 卵磷脂 胆固醇 生理盐水 0.25g 2g 0.2g 适量
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操作
1）磷脂、胆固醇乙醚溶液的配制：取处方量的
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实验原理
脂质体系指将药物包封于类脂质双分子层形 成的薄膜中间所制成的超微型球状载体制剂。 优点： 1）酷似细胞结构，有生物膜的特性和功能 2）无毒、无免疫原性，可体内降解 3）对网状内皮系统有趋向性，即被动靶向性 靶向性 4）可包封水溶性和脂溶性药物 5）被包封的药物性质不变，毒性降低，可缓 慢释放 6）延长药物半哀期（t1/2），增加生物利用度 7）促进药物透皮吸收
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脂质体的包埋 及包封率测定
1、脂质体的制备 、 2、脂质体包封率 、
的测定
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目录
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1、目的要求 、 2、实验原理 、 3、试剂与器材 、 4、实验步骤 、 5、质量检查 、 6、思考题 、
目的要求
1、掌握注入法制备脂质体的工艺； 2 2、掌握脂质体包封率的测定方法。
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脂质体分类：可分为三类 1）小单室脂质体：由一层类脂质双分子层 构成，粒径在20－50nm，可称为纳米脂 质体。 2）大单室脂质体：由一层类脂质双分子层 构成，粒径约为100－1000nm。 3）多室脂质体，由多层类脂质双分子层构 成，粒径约在1000－5000nm
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质量检查与评定
1)脂质体的形态与粒度
2)异物：显微镜下观察有无异物（有色斑 块，棒状结晶等）。
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3) 包封率的测定（超速离心法）：取1ml水 杨酸脂质体混悬液置离心机里，10000转/ 分离心5分钟。取0.1ml上清液置试管内， 加蒸馏水9.9ml，摇匀，加入2ml硫酸铁 铵溶液在530nm波长处测定吸光度，由标 准曲线计算未包入脂质体中水杨酸的浓 度。
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实验结果与讨论
1. 绘制显微镜下脂质体的形态图。 2. 测定脂质体粒径大小及粒径分布。 3. 计算脂质体包封率。
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思考题
1．乙醚注入法制备脂质体成败的关键是什 ． 么? 2．制备脂质体时加入胆固醇的目的是什么 ．制备脂质体时加入胆固醇的目的是什么?
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4）冷冻干燥法：适用于在水中不稳定的药物制 ）冷冻干燥法： 备脂质体。 备脂质体。 5）熔融法：适用于制备多相脂质体，稳定，可 ）熔融法：适用于制备多相脂质体，稳定， 加热灭菌。 加热灭菌。 6）超声波分散法：将类脂材料溶解在有机溶剂 ）超声波分散法： 然后在旋转蒸发器上,在真空下蒸除溶剂 中,然后在旋转蒸发器上 在真空下蒸除溶剂 加 然后在旋转蒸发器上 在真空下蒸除溶剂,加 入缓冲液,再加入一些小玻璃球帮助分散 再加入一些小玻璃球帮助分散， 入缓冲液 再加入一些小玻璃球帮助分散，可形 成多室脂质体，经超声处理，得到小单室脂质 成多室脂质体，经超声处理， 体。此法操作简便，但包封率较低。 此法操作简便，但包封率较低。 7）高压乳匀法：将各成分加入溶剂中，通过高 ）高压乳匀法：将各成分加入溶剂中， 压均质机均匀分散成脂质体。 压均质机均匀分散成脂质体。