HPLC法测定大蒜油肠溶软胶囊中大蒜素的含量
高效液相色谱法测定蒜油中大蒜素的含量
ＨＯ Ｎ Ｇ Ｌ ｉ ａ ｎ ｇ ， Ｚ ＨＡ Ｎ Ｇ Ｑ ｕ ａ ｎ ， Ｃ Ｈ Ｅ Ｎ Ｗｅ ｎ ． ｓ ｈ ｅ ｎ ｇ ， Ｃ ＨＵ Ｈ ｏ ｎ ｇ — ｃ ｈ ａ ｏ ，
（ １ ． Ｇｕ ｉ ｚ ｈ ｏ ｕ Ｐ ｒ ｏ ｖ ｉ ｎ ｃ ｉ ａ ｌ Ｋ ｅ ｙ Ｌ ａ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ ｏ ｒ ｙ ｏ ｆ Ｉ ｎ ｆ ｏ ｍａ ｒ ｔ ｉ ｏ ｎ Ｓ ｙ ｓ ｔ ｅ ｍ ｏ ｆ Ｍｏ ｕ ｎ ｔ ａ ｉ ｎ ｏ ｕ ｓ Ａ ｒ ｅ ａ ｓ ａ ｎ ｄ Ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｅ ｃ ｏ ｌ ｏ ｇ ｉ ｃ ｌ ａ Ｅｎ ｖ ｉ ｒ ｏ ｎ ｍｅ ｎ ｔ ，Ｇｕ ｉ ｚ ｈ ｏ ｕ Ｎｏ ｍａ ｒ ｌ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｓｉ ｒ ｔ ｙ ，Ｇｕ ｉ ｙ ａ ｎ ｇ ，Ｇ ｕ ｉ ｚ ｈ ｏ ｕ ５ ５ ０ ０ ０１ ，Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ；２ ．Ｔ ｅ ｓ ｔ ｉ ｎ ｇ ａ ｎ ｄ
Ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ｃ ｅ ｎ ｔ ｅ ｒ ’Ｇ ｕ ｉ ｚ ｈ ｏ ｕ Ｎ ｏ ｍａ ｒ ｌ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ， Ｇ ｕ ｉ ｙ ａ ｎ ｇ ， Ｇ ｕ ｉ ｚ ｈ ｏ ｕ ５ ５ ０ ０ ０ １ ，Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ：０ｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ：Ｔ ｏ ｅ ｓ ｔ ａ ［ ＇ ｌ ｉ ｓ ｈ ＨＰ Ｌ Ｃ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｆ ｏ ｒ ｔ ｈ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ａ ｌ ｌ ｉ ｃ ｉ ｎ ｉ ｎ ｇ ａ ｒ ｌ ｉ ｃ ｏ ｉ ｌ ．Ｍｅ ｔ ｈ —
５ ５ ０ ０ ０ １ ；
（ １ ． 贵州师 范大学 山地环境信 息系统和生态环境保护重 点实验 室， 贵州 贵阳 ２ ． 贵州师范大学 分析测试 中心 ， 贵州 贵 阳 ５ ５ ０ ０ ０ １ ）
药用大蒜油中大蒜素的含量测定
大蒜油中大蒜素的含量可以作为环境监测的一项指标，通过对其含量的测定，可以评估环境污染程度 和土壤质量状况。
06
结论
研究成果总结
成功建立了高效液相色谱法测定药用大 蒜油中大蒜素含量的方法，该方法具有 操作简便、准确度高、重现性好等优点。
通过对不同产地、不同品种的药用大蒜油进 行测定，发现大蒜素含量存在一定差异，其 中以某地产药用大蒜油的大蒜素含量最高。
药用大蒜油中大蒜素的含量 测定
目录
• 引言 • 大蒜油中大蒜素的提取方法 • 大蒜油中大蒜素的含量测定方法 • 大蒜油中大蒜素含量的影响因素
目录
• 大蒜油中大蒜素含量测定的实际 应用
• 结论
01
引言
目的和背景
目的
准确测定药用大蒜油中大蒜素的含量，为药品质量控制和临床应用提供依据。
背景
大蒜素是大蒜中的主要活性成分，具有抗菌、抗炎、抗肿瘤等多种药理作用。药 用大蒜油是大蒜素的重要来源之一，其含量直接影响药品质量和治疗效果。因此 ，对药用大蒜油中大蒜素的含量进行准确测定具有重要意义。
相关工作
已有研究
已有研究表明，不同产地、品种、加工方法等对药用大蒜油中大蒜素的含量有一定影响。 因此，需要建立一种准确、可靠的测定方法，以实现对药用大蒜油中大蒜素含量的有效
控制。
研究现状
目前，关于药用大蒜油中大蒜素含量测定的研究主要集中在提取方法、纯化技术、检测 手段等方面。其中，高效液相色谱法（HPLC）和气相色谱-质谱联用法（GC-MS）是 最常用的检测方法。然而，这些方法在操作过程、仪器设备等方面存在一定的局限性，
提取时间也是影响大蒜素提取效率的重要因素。较短的提取时间可能导致提取不完全，而长时间的提取则可能导致大 蒜素的结构发生变化。因此，需要根据实际情况选择合适的提取时间。
HPLC法检测保健食品中大蒜素的含量
HPLC法检测保健食品中大蒜素的含量徐丽红;王建清;张巧艳;李晓敏;邱承海;袁利文【摘要】Solid, liquid and semi-solid dietary supplement were chosen as study subjects. High performance liquid chromatography (HPLC) method was developed to determine main active components, diallyl trisulfide (DATS) and diallyl disulfide (DADS) , in dietary supplement. Effects of extract solvents, volume fraction of ethanol, temperature and chromatographic column on detection were studied. Samples were extracted with ethanol by ultrasonic, isolated by C18 colum n (250 mm ×4.6 mm, 5 μm) ; V(acetonitrile): V(H2O) =68: 32 as mobile phase; The flow rate was 1. 0 mL·min-1 and the UV wavelength was 240 nm. The results indicated that the standard curves of allicin showed good linearity in the range ration of 6. 26 - 6262. 24 mg · L -1 ( r = 0. 9999 ) , and the detection limits were 2.0 mg · kg-1 for DATS, 1.5 mg·kg-1 for DADS. The mean recoveries of two samples standard addition test for three matrices at high and low levels were 97. 6% - 105. 8% for DADS and 95. 3% - 105. 4% for DATS. The relative standard deviations of test repeatability were 1.5% -2.7% , and the relative standard deviations of test reproducibility were3. 8% -5. 6%. Comparing the results by HPLC and gas chromatography, there was no significant difference. This method is rapid and accurate for the determination of allicin in dietary supplement.%选取固体类、液体类、半固体类3类保健食品为研究对象,考察了提取溶剂、乙醇体积分数、提取温度、色谱柱对检测结果的影响,建立了高效液相色谱法测定保健食品中大蒜素主要功效成分二烯丙基三硫醚(diallyl trisulfide,DATS)、二烯丙基二硫醚(diallyl disulfide,DADS)的检测方法.试样以无水乙醇超声提取,经C18柱(250mm×4.6mm,5μm)分离；流动相为V(乙腈):V(水)=68:32;流速1.0mL·min-1；紫外检测波长240 nm;检出限DATS2.0 mg· kg -1,DADS 1.5 mg· kg -1.大蒜素浓度在6.26 ～6 262.24 mg·kg-1范围内呈良好线性关系(r =0.9999),分别对固体类、液体类、半固体类样品进行高低两水平添标回收试验,平均回收率DATS为97.6％～105.8％,DADS的回收率为95.3％～105.4％.重复性变异系数1.5％～2.7％,再现性变异系数3.8％～5.6％.同时将HPLC与GC分析相比较,结果无显著性差异.该方法简便快速,准确可靠,适用于多种保健食品中大蒜素含量的检测.【期刊名称】《浙江农业学报》【年(卷),期】2012(024)004【总页数】7页(P711-717)【关键词】大蒜素;高效液相色谱法;保健食品;二烯丙基三硫醚;二烯丙基二硫醚【作者】徐丽红;王建清;张巧艳;李晓敏;邱承海;袁利文【作者单位】浙江省农业科学院农产品质量标准研究所,浙江杭州310021;2农业部农产品及转基因产品质量安全监督检验测试中心(杭州),浙江杭州310021;浙江省农业科学院农产品质量标准研究所,浙江杭州310021;2农业部农产品及转基因产品质量安全监督检验测试中心(杭州),浙江杭州310021;浙江省农业科学院农产品质量标准研究所,浙江杭州310021;农业部农产品及转基因产品质量安全监督检验测试中心(杭州),浙江杭州310021;完美(中国)日用品有限公司,广东中山市528402;完美(中国)日用品有限公司,广东中山市528402;完美(中国)日用品有限公司,广东中山市528402【正文语种】中文【中图分类】O657.7+1;S481+.8大蒜素是从百合科葱属植物大蒜中提取的含二烯丙基三硫醚(diallyl trisulfide，DATS)、二烯丙基二硫醚(diallyl disulfide，DADS)等的有机硫醚类化合物，具有抗菌、消炎、抗病毒、降血压、抗动脉粥样硬化、抗癌、抗氧化、提高机体免疫等功效［1，2，3］。
高效液相色谱测定大蒜原料及大蒜片中蒜氨酸和大蒜素的方法研究
大蒜在我国的种植历史悠久，作为食物、香料， 在国内的产销量一直较高。
同时，其作为具有药用价值的食材，在各种疾病的治疗中作为传统民间药物使用[1]，其健康益处主要与有机含硫成分有关[2-3]。
大蒜中的有机含硫化合物主要是蒜氨酸和大蒜素2种活性成分，通常用来表征大蒜和大蒜相关产品的质量。
由doi:10.16736/41-1434/ts.2023.18.050作者简介：李锦晶（1985—），男，本科，工程师，研究方向为化学分析。
通信作者：李凡（1984—），男，本科，工程师，研究方向为植物与食品成分分析。
高效液相色谱测定大蒜原料及大蒜片中蒜氨酸和大蒜素的方法研究Method Development and Validation for Quantitation of Alliin and Allicin in Garlic Raw Materialsand Garlic slice by HPLC◎ 李锦晶，李 凡，易 渡，张沿军（康宝莱蕾硕（湖南）天然产物有限公司，湖南 长沙 410100）LI Jinjing, LI Fan, YI Du, ZHANG Yanjun(Herbalife Natsource (Hunan)Natural Products Co., Ltd., Changsha 410100, China)摘 要：本文利用蒜氨酸的改性衍生物，建立了一种提取蒜氨酸和大蒜素的独特样品制备方法。
对蒜氨酸采用酶抑制剂水溶液，邻苯二甲醛（OPA）试剂为衍生试剂，在pH 值为9.0 ~10.0条件下提取，获得较好的反应和稳定性。
用pH 6.0的醋酸钠缓冲液提取大蒜素，以获得更稳定的大蒜素。
结果显示，5 ℃的进样温度可使蒜氨酸和大蒜素在溶液中保持48 h 的稳定。
关键词：蒜氨酸；衍生化；液相色谱；同时测定Abstract：This article establishes a unique sample preparation method for extracting alliin and allicin using modified derivatives of allicin. Enzymatic inhibitor aqueous solution was used to extract allicin, with o-phthalaldehyde (OPA) reagent as the derivative reagent. The reaction and stability were achieved under pH 9.0-10.0 conditions. Extract allicin with sodium acetate buffer at pH 6.0 to obtain more stable allicin. The results showed that a sample injection temperature of 5℃ can maintain the stability of alliin and allicin in solution for 48 hours.Keywords：alliin; derivatization; liquid chromatography; simultaneous determination 中图分类号：TS207.2于蒜氨酸酶的存在，蒜氨酸是相当不稳定的，可以迅速转化为大蒜素；大蒜素性质极不稳定，容易分解，不能长期保存。
毛细管气相色谱法测定大蒜油软胶囊中大蒜素的含量
=89.0 [(2.418 10-3)2+(1.072 10-3)2+(2.260 10-3)2+(1.072 10-3)2+(6.066 10-4)2+(8.394 10-4)2+(9.964 10-4)2]1/2=0.348u x =[u (x)2+u (仪器)2]1/2=[0.3482+(4.619 10-3)2]1/2=0.3482.5 扩展不确定度U =ku x ,k 取2,P =95%,U =2 0.348%=0.70%。
则青霉素V 钾片中青霉素V 的标示含量为:A =(89.0 0.70)%,(k =2)。
3 讨论由以上的评定可看出,本方法测量结果的不确定度主要来自对照品和供试品的称量的影响,同时和所用的玻璃仪器有关,而其他几个因素的影响较小。
因此,在测定样品时,必须严格控制实验条件,并规范实验操作。
我们在检测过程中,有时会遇到一些检品的实际测得含量总是处于标准规定的下限周围,究竟这类产品是判定它合格还是不合格呢?笔者认为应在进行了不确定度分析后才能给出一个确定的答案,只有对实验结果进行不确定度分析以后,才能使测定的结果既准确又科学。
参考文献[1]Ch.P(2005)Vol (中国药典2005年版.二部)[S].2005.[2]中华人民共和国国家计量技术规范JJ F1059-1999,测量不确定度评定与表示[S].国家质量技术监督局发布.[3]JJ G196-90,中华人民共和国常用玻璃量器检定规程[S].国家质量技术监督局发布.收稿日期:2007-04-03作者简介:王国强,男,助理研究员 T e:l (0571)88215455 E -m ai :l w anggq608@126.co m毛细管气相色谱法测定大蒜油软胶囊中大蒜素的含量王国强,陈爱瑛(浙江省医学科学院药物研究所,杭州310013)摘要:目的 建立毛细管气相色谱法测定大蒜油软胶囊中大蒜素含量的方法。
方法 用HP-5弹性石英毛细管柱程序升温技术分离,F ID 检测器检测,外标法计算含量。
2013高效液相色谱法测定蒜油中大蒜素的含量_洪亮
第31卷第4期2013年8月贵州师范大学学报（自然科学版）Journal of Guizhou Normal University（Natural Sciences）Vol．31．No．4Aug2013文章编号：1004—5570（2013）04－0081－04高效液相色谱法测定蒜油中大蒜素的含量洪亮1，2，张权1，2，陈文生1，2，褚洪潮1，2（1．贵州师范大学山地环境信息系统和生态环境保护重点实验室，贵州贵阳550001；2．贵州师范大学分析测试中心，贵州贵阳550001）摘要：目的：建立高效液相色谱法测定蒜油中的大蒜素含量。
方法：蒜油样品经正己烷溶液溶解，采用C18色谱柱（4．6mmˑ250mm，5um），以乙腈ʒ水ʒ四氢呋喃（68ʒ30ʒ2）为流动相，流速1．0mL/min，柱温：25ħ，用紫外检测器在225nm波长下测定蒜油中大蒜素含量。
结果：大蒜素在16．0 80．0ug/mL质量浓度范围内具有良好线性关系（r=0．9998），最低检出限为2ng/mL，在低、中、高3个水平下的加标回收率为98．4% 99．1%，相对标准偏差（ＲSD%）为0．29% 0．73%。
结论：该方法前处理操作简便、灵敏度高、适用范围广。
关键词：高效液相色谱法（HPLC）；大蒜素；蒜油中图分类号：TS207．3文献标识码：AStudy on determination of allicin in garlic oil by highperformance liquid ChromatographyHONG Liang1，2，ZHANG Quan1，2，CHEN Wen-sheng1，2，CHU Hong-chao1，2（1．Guizhou Provincial Key Laboratory of Information System of Mountainous Areas and Protection of Ecological Environment，Guizhou Normal University，Guiyang，Guizhou550001，China；2．Testing andAnalysis center’Guizhou Normal University，Guiyang，Guizhou550001，China）Abstract：Objective：To establish HPLC method for the determination of allicin in garlic oil．Meth-ods：The garlic oil sample was dissolved by n-hexane．C18column（4．6mmˑ250mm，5um）and UVdetector was used to determine allicin with the conditions that the mobile phase is acetonitrile：H2O：tet-rahydrofuran（68ʒ30ʒ2），the flow rate is1．0mL/min and the wavelength is225nm．Ｒesults：In the range of16．0 80．0ug/mL for allicin，good linear were obtained（r=0．9998），the lowest detection limits were2ng/mL，the mean recoveries at three spiked levels were between98．4%and99．1%with relative standard deviations（ＲSD）of0．29% 0．73%．Conclusion：This method is simple and ac-curate with widespread utility．Key words：high performance liquid chromatography（HPLC）；allicin；garlic oil0引言大蒜为百合科葱属植物蒜的地下鳞茎，不仅营养丰富，还含有多种保健成分。
HPLC测定独头蒜和大蒜中的蒜氨酸和大蒜素(1)
ＨＰＬＣ 测定独头蒜和大蒜中的蒜氨酸和大蒜素
谭志静
［摘 要］ 为准确、快速、方便地测定大 蒜 中 的 蒜 氨 酸 和 大 蒜 素 ， 采 用 反 相 高 效 液 相 色 谱 法 （ Ｒ Ｐ－ ＨＰＬＣ ） ， Ｗａｔｅｒｓ ｓｙｍｍｅｔｒｙ Ｃ１８ （ ４．６ｍｍ ｉ．ｄ．＊１５０ｍｍ， ５μｍ） 色 谱 柱 ， 蒜 氨 酸 检 测 波 长 ２１４ ｎｍ 、大 蒜 素 检 测 波 长 ２５４ ｎｍ， 流 动 相 ： 甲 醇 ： 水 （ ３０： ７０） ， 流 速 ０．８ｍｌ／ ｍｉｎ， 结果 蒜氨酸在 ０．０１￣０．３５ｍｇ／ ｍｌ， 呈良好的线性关系， 相关系数 ＝ ９９．６ ， 平均回收率（ ９９．８５±１．５３）％。
３．精 密 度 试 验
将 浓 度 为 ４５０、３００、２２５、１８０、１５０、９０μｇ ／毫 升 的 蒜 氨 酸
精密吸取同一对照品溶液 ２０μＬ， 面 积 为 横 坐 标 ， 蒜 氨 酸 含 量 为 纵 坐 进样一次， 峰面积的日间精密度良好， ＲＳＤ＝０．８１％（ ｎ ＝５） 。
一 、材 料 与 方 法 １．原 料 新鲜独头蒜和大蒜， 购于本地市场。 ２．主 要 仪 器 Ｗａｔｅｒｓ１５２５ 高 效 液 相 色 谱 仪 ，２４８７ 双 波 长 紫 外 检 测 器 ， Ｂｒｅｅｚｅ 色谱数据处理工作站， 微波炉， 高速冷冻离心机， 组织 捣碎机。 ３．主 要 试 剂 蒜氨酸， 大蒜素（ 纯度 ９０％） ， Ｆｌｕｋａ 公司。甲醇色谱纯， 水 为超纯水， 其余试剂均为分析纯。 ４．蒜 氨 酸 和 大 蒜 素 标 准 溶 液 的 配 制 （ １） 精密称取蒜氨酸 ５ 毫克， 定容至 ５ 毫升， 配制成浓度 为 ９００μｇ／ 毫升 的蒜氨酸溶液。再稀释成 ４００、３００、２２５、１８０、 １５０、９０μｇ ／ｍ 毫升的标准溶液。
高效液相色谱法测定大蒜素注射液中大蒜素的含量(2)
碱破坏后， 有不同程度的分解， 该色谱条 $" # 大蒜素分别在经酸、 件能够将本品的杂质峰与主峰分离并检出， 说明分解产生的杂质 不影响本品的含量测定， 故可以 ()*+ 法测定大蒜素的含量。 （,% . ’% ） 时峰形较宽， 加入少量甲酸后 $" ! 流动相选择甲醇 - 水 （ 峰形明显改善， 故流动相选择甲醇 - 水 - 甲酸 ,% . ’% . &/ ’ ） 。 准确、 灵敏度高、 回 $" $ 与气相色谱法比较， ()*+ 法结果简便、 收率较好， 适用于大蒜素的含量测定。 参考文献：
!" )
样品含量测定 取本品数瓶摇匀， 精密量取 $ 1* # 约相当于大蒜素 "& 13 G ， 置
!" !
测定波长的选择
’/ 大蒜素 J/ 样品溶液 P/ 空白样品溶液 图 ’ 高效液相色谱图
加流动相稀释至刻度， 摇匀， 精密量取 ’& 1* ， 置 ’&& 1* 量瓶中， 量瓶中， 加流动相稀释至刻度， 摇匀， 作为供试品溶液； 另精 $% 1* 密称取大蒜素对照品适量， 加流动相溶解并稀释制成每 ’ 1* 中约含 作为对照品溶液。 精密量取上述两种溶液各’& !*， &/ ’! 13 的溶液， 照 $/ ’ 项 下 色 谱 条 件 分 别 进 样 测 定， 按外标法以峰面积计算样品中 大蒜素的含量， 同时与气相色谱法 测定结果进行比较， 结果见表 $ 。 讨论
表’ %9/ 7& 7&/ 8 ） % ’&&/ "6 &/ 7$ （!3 4 1*） 测得量 （!3 4 1*） 回收率 （8 ） 加入量 %9/ 69 7&/ 9& ,9/ && ’&&/ !9 66/ 9’ ’&’/ ’’
高效液相色谱法测定蒜油中大蒜素的含量
大蒜素是百合科葱属植物蒜的有效成分之一， 其 化学名为三硫二丙烯。大量的动物实验和临床验证 证明， 大蒜油中的大蒜素具有明确而显著的抗癌和 保 护 心 血 管 的 作 用 ［１－ ２］。 其 含 量 的 测 定 多 用 正 己 烷 提取， 用液相色谱法测定［３ｇ－ ｌｉｎ１，２， ＹＡＮＧ Ｈｏｎｇ－ ｂｏ１， ＸＩＥ Ｆｅｎｇ１， ＬＵ Ｙａｎｇ１， ＴＡＮ Ｈｏｎｇ１， ＨＥ Ｊ ｉｎ－ ｌｉｎ１
（１．Ｇｕｉｚｈｏｕ Ｒｅ ｓ ｅ ａ ｒｃｈ Ｃｅ ｎｔｅ ｒ ｏｆ Ｐ ｈｙｓ ｉｃａ ｌ Ｔｅ ｓ ｔｉｎｇ ａ ｎｄ Ｃｈｅ ｍｉｃａ ｌ Ａｎａ ｌｙｓ ｉｓ ， Ｇｕｉｙａ ｎｇ ５５０００１； ２．Ｃｈｉｎａ Ｇｕｉｚｈｏｕ Ｕｎｉｖｅ ｒｓ ｉｔｙ， Ｇｕｉｙａ ｎｇ ５５０００２）
（４．６ｍｍ×１５０ｍｍ， ５μｍ）； 流动相： 甲醇－ 水－ 甲酸（７５∶２５∶０．１）； 流速１ｍＬ／ｍｉｎ； 检测波长２２５．８ｎｍ。大蒜素
浓 度 在４５．１２￣２２５．６ｍｇ／Ｌ范 围 内 呈 良 好 线 性 关 系（ｒ＝０．９９９８）， 平 均 回 收 率 为９９．７２％， ＲＳＤ为 ０．２７％（ｎ＝
Ａｇｉｌｅｎｔ１１００高效液相色谱仪， Ｇ１３１５Ｂ ＤＡＤ（二极
管阵列）紫外检测器； 大蒜素化学对照品： 中国药品生 物 制 品 检 验 所 ， 含 量８８．４ ％； 蒜 油 ： 贵 州 味 美 食 品 工业有限公司； 甲醇为色谱纯， 其他试剂为分析纯， 水为纯净水。
２ 方法与结果
２．１ 色谱条件 色谱柱： ＺＯＲＢＡＸ Ｅｃｌｉｐｓｅ ＸＤＢ－ Ｃ１８柱（４．６ｍｍ×１５０
１０μＬ ， 计算ＲＳＤ为０．２７ ％。
２．７ 稳定性试验
取１６９．２ｍｇ／Ｌ的 供 试 品 溶 液 ， 分 别 于０、２ｈ、４ｈ、
气相色谱法测定保健品中大蒜素含量
3 讨论本次调查结果表明,登革热病例在人群分布特征上,基本上为租住的外来流动人口,调查结果显示该地区流动人口占总人口的4717%,提示在预防登革热的宣传教育中,应以流动人口的教育为重点,调查还表明,在本次流行具有流行时间相对较长,病例具有一定聚集性的特点,而且新一批病例出现较上批病例出现的时间间隔逐渐缩短,提示疾病在一定时间内,有加速传播的趋势,如不能加以及时控制,将造成更大的危害。
此外,疾病报告时间距发病时间的周期较长,尤其是首例病例发病距报告时间长达15d ,可能是造成本次流行未能在第一时间控制及流行时间迁延过长的重要原因之一,表明需要进一步完善疾病的快速鉴别诊断及疾病的报告制度。
问卷调查结果显示,居民中只有不到60%的人认识白纹伊蚊,知道其主要在白天叮咬人的不到30%,提示今后的登革热预防宣传工作应进一步加强并细化。
对蚊媒的调查结果显示,横枝岗和恒福路居委的布雷图指数已降到5以下(登革热终止流行的安全线),但狮带岗居委的布雷图指数为917,显著高于其余两居委,具有发生登革热再度流行的潜在危险。
提示在对有病例发生的居委大力进行干预的同时,应兼顾到邻近可能发生登革热的地区,从而达到彻底控制登革热的目的。
(本次研究由天河区政府、天河区科技局委托,并得到天河区卫生局、广东省疾病预防控制中心、广州市疾病预防控制中心、天河区卫生防疫站、天河区登峰街街道办事处等单位的大力协助,在此表示衷心感谢!)参考文献:〔1〕 张海林.登革热和登革出血热国际会议简介[J ].国外医学流行病学传染病学分册,2001,28(2):73-76.〔2〕 潘志明,邱季春,陈小霜,等.90年代中期广州市登革热流行情况综合报告[J ].中国媒介生物学及控制杂志,2000,11(2):141-143.〔3〕 方美玉,陈翠华,李锦清,等.广东省1990～1998年登革热流行病学监测分析[J ].中国公共卫生,1999,15(11):990-991.收稿日期:2004202218(蔡天德编辑 张亚莲校对)作者单位:11辽宁省疾病预防控制中心,沈阳110005;21辽宁省丹东市疾病预防控制中心作者简介:周桦(1955-),女,辽宁盘锦人,主任医师,本科,主要从事理化检验工作。
保健食品中大蒜素测定
附件:一、保健食品中大蒜素的测定1范围本方法适用于以大蒜及其制品为原料的保健食品中大蒜素（三硫二丙烯，的含量测定。
本方法最低检出浓度为0. 0430mg/mL；取100mg试样，提取左容5.0mL时，试样中大蒜素最低检岀质量浓度为0. 20g/100g o本方法最佳线性范用：0. 320mg/mL~3. 00 mg/mLo2原理：根据大蒜素为挥发性油成分，经有机溶剂提取，用气相色谱仪分析，采用外标法定量。
3试剂除特殊说明，所用试剂均为分析纯。
3. 1无水乙醇3.2正己烷3.3标准溶液：称取0. 1000g标准品，置于10mL容量瓶中，用正己烷立容至刻度，该溶液中含大蒜素浓度为10. Omg/mL。
此溶液可在冰箱中保存七天。
取该溶液1. OmL,置于10mL容量瓶中，用正己烷左容至刻度，此溶液含大蒜素浓度为1. Omg/mL o4仪器4.1气相色谱仪：附氢火焰（FID）检测器4.2数据处理机或积分仪4.3分析天平：万分之一4.4超声淸洗机4. 5 离心机：3000r/min5分析方法5.1试样提取5.1.1固体试样：称取试样适量（相当于含大蒜素5mg,精确至0. 001g）,加无水乙醇适量, 密塞，超声70min,取出冷却，加正己烷泄容（调肖大蒜素含量约为lmg/mL）,振摇，静置分层后，取上层溶液进样。
5. 1.2液体试样吸取试样适量（相当于含大蒜素5mg,精确至0. 001g）,置于分液漏斗中, 加5mL 正己烷振摇提取lmin,静宜（或离心）分层后，取上层溶液进样。
5.2气相色谱参考条件5. 2.1 色谱柱：HP-5（30mx0.25mm）5. 2.2 柱箱温度：100'C （3min）1QC>150°C 2QC 11011> 200°C（10 nin）5. 2.3 进样口温度：220°C5. 2.4检测器温度：250°C5. 2. 5 载气：氮气(ImL/min)5. 2.6 氢气:40mL/min：空气：400mL/min5. 2.7进样量：1 uL5.3左性分析：在参考操作条件下，以对照品与试样比较保留时间泄性。
高效液相色谱法测定大蒜素片中DADS和DATS的含量
高效液相色谱法测定大蒜素片中DADS和DATS的含量李天昊1李若琦1黄雪婷⑵陈梅兰"1.浙江树人大学生物与环境工程学院，杭州310015$.江苏常州大学，常州213164)摘要：建立并使用高效液相色谱法测定药用大蒜素片中二烯丙基二硫醚(Diallyl disulfide,DADS)以及二烯丙基三硫醚(Diallyl trisulfide,DATS)的含量。
实验使用H ypesiL ODS C18柱进行色谱分离，流动相由甲醇/水/甲酸组成，比例为85>15>0.1'测定波长是225nm,流速为1.0mg/L。
实验结果表明，DADS在1.0〜16.0mg/L 浓度的范围内和峰面积有较好的线性关系，R2=0.9991O DATS在1〜40mg/L浓度的范围内和峰面积有较好的线性关系，R2=0.9994O DADS的回收率在91.20%〜9880%,DATS的回收率在94.74%〜106.39%。
关键词：大蒜素二烯丙基二硫醚二烯丙基三硫醚高效液相色谱法(HPLC)DOI：10.3969/j.issn.1001—232x.2021.02.026Determination of DADS and DATS in highly concentrated allicin tablets by HPLC.Li Tianhao1,Li Ruo-qi1,Huang Xueting2,Chen Meilan1%(1.College of Biological and Environmental Engineering,Zhejiang Shuren University,Hangzhou310015,China; 2.College of P e tro c hemi c al,Jiangsu Changzhou University,Changzhou213164,Jiangsu,China)Abstract：The chromatographic separation was performed on a Hypersil ODS C18column,with methanol,water and formic acid solution(v：v：v,85：15：0.1)as the mobile phase.The detection wavelength was225nm,and the flow rate was1.0mL/min.The test results showed that DADS had a good linear relationship with peak area in the range of1.0—16.0mg/L,R2=0.9991；DATS had a good Linear relationship with peak area in the range of1—40mg/L,R2=0.9994.The recoveries of DADS were 91.20%—9&80%,and the recoveries of DATS was94.74%—106.39%.Key words：Garlic；Diallyl disulfide(DADS)；Diallyl trisulfide(DATS)；HPLC在我国，大蒜素是一类运用广泛的抗菌药，有抗氧化的作用，能调节人的心脑系统的功能，并且在降低血压血脂以及抗癌方面也有一定的效果°大蒜素是大蒜中具有高度生物活性的主要成分的总称，学名为二烯丙基硫代亚磺酸酯，化学式为C6H10OS,是否下标常见于葱属植物中，在新鲜大蒜以及洋葱等植物里存在。
HPLC法测定蒜米中大蒜素和乙蒜素含量
HPLC法测定蒜米中大蒜素和乙蒜素含量李敏;李喜宏;刘佳;张姣姣;张文涛【期刊名称】《中国食品添加剂》【年(卷),期】2016(000)002【摘要】以杂交蒜米为试验材料,建立了同时测定蒜米中大蒜素和乙蒜素含量的高效液相色谱法(HPLC).方法采用单泵色谱柱Arcus EP C18 (150×4.6mm,5μm),柱温为25℃;v(乙腈)∶v(超纯水)=30∶70为流动相,流速0.8mL.min-1,紫外检测波长:210nm,进样量:20μL.结果表明:大蒜素和乙蒜素在0.1 ～ 2.5mg/mL范围内线性关系良好,相关系数为0.9984和0.9971,均大于0.99;出峰时间分别为1.3min和2.6min;以3∶1的信噪比计算出目标物质的最低检出限为1.85mg/kg,平均回收率是90.95％和91.32％,RSD值为1.43％和1.76％,蒜米中大蒜素和乙蒜素平均含量分别为1.168％和0.975％;本方法快速简便,准确灵敏,回收率高,能为检测大蒜类物质中蒜素提供参考意见.【总页数】4页(P150-153)【作者】李敏;李喜宏;刘佳;张姣姣;张文涛【作者单位】天津科技大学食品工程与生物技术学院,天津300457;天津科技大学食品工程与生物技术学院,天津300457;天津科技大学食品工程与生物技术学院,天津300457;天津科技大学食品工程与生物技术学院,天津300457;天津科技大学食品工程与生物技术学院,天津300457【正文语种】中文【中图分类】TS202.1;TS207.3【相关文献】1.HPLC法测定大蒜油肠溶软胶囊中大蒜素的含量 [J], 蒋鸣;谢涛;2.高效液相色谱法测定大蒜素注射液中大蒜素的含量 [J], 蒋慧;刘斐3.高效液相色谱法测定蒜油中大蒜素的含量 [J], 洪亮;张权;陈文生;褚洪潮4.HPLC法测定土壤中乙蒜素含量试验 [J], 张金湖;杨朵朵5.高效液相色谱法测定大蒜素注射液中大蒜素含量 [J], 吴敏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定大蒜油缓释片中大蒜素的含量
·44· Chinese Journal of Information on TCM Feb.2010 Vol.17 No.2 ·质量标准研究·高效液相色谱法测定大蒜油缓释片中大蒜素的含量孙永慧1,王桂姬2,张颖1,王建明1(1.黑龙江中医药大学中医药研究院,黑龙江 哈尔滨 150040；2.哈尔滨市食品药品检验检测中心,黑龙江 哈尔滨 150525)摘要：目的 建立大蒜油缓释片中大蒜素的含量测定方法。
方法 采用反相高效液相色谱法,Diamonsil TM(钻石)C18色谱柱(4.6 mm×200 mm,5 µm),以甲醇-水-甲酸(80∶20∶0.1)为流动相,检测波长为218 nm,流速1.0 mL/min,柱温25 ℃。
结果 大蒜素在0.05～0.25 µg(r＝0.999 9)范围内呈良好的线性关系,加样回收率为99.5%(RSD＝1.7%)。
结论 本法简便、准确、灵敏度高、重复性好,为该制剂的质量控制提供了依据。
关键词：大蒜油缓释片；大蒜素；高效液相色谱法；含量测定中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2010)02-0044-02Determination of Allicin in Garlic Oil Sustained-release Tablets by HPLC SUN Yong-hui1, W ANG Gui-ji2, ZHANG Ying1, et al(1.Research Institute of Chinese Medicine, Heilongjiang University of TCM, Harbin 150040, China；2.Harbin Institute for Food and Drug Control, Harbin 150525, China)Abstract：Objective To establish a determination method of Allicin in Garlic oil Sustained-release Tablets.Method Diamonsil C18 column was used with a mobile phase of mathanol-water-formic acid (80∶20∶0.1). The detective wavelength was at 218 nm. The flow rate was 1.0 mL/min. Column temperature was at 25 ℃.Results Allicin showed a good linear relationship at the range of 0.05～0.25 µg (r＝0.999 9).The average recovery rate was 99.5% (RSD＝1.7%). Conclusion The method is simple, accurate, highly sensitive and reproducible. It can be used for the quantitative determination of Allicin in Garlic oil Sustained-release Tablets.Key words：Garlic oil Sustained-release Tablets；Allicin；HPLC；content determination大蒜油缓释片是将大蒜油以β-环糊精包合再添加辅料而成,具有良好的抗凝血、降血压、解毒、抗氧化、抗老化及调节机体免疫功能的作用[1]。
药用大蒜油中大蒜素的含量测定
三、色谱分离系统 分离系统性能的好坏
是色谱分析的关键，包 括保护柱、色谱柱、恒 温装置和连接阀等。
（一）保护柱 作用：保护分析柱，用来挡住来源于样品和进样阀垫圈的 微粒。保护柱与分析柱是同种填料，但粒度比分析柱大 。
2. 光电二极管阵列检测器 (photo-diode array detector, PDAD) PDAD是20世纪80年代发 展出现的一种新型的紫外 检测器。
药用大蒜油中大蒜素的含量测定
贵州味美食品工业有限公司
CH2 CH CH2 CH2 CH CH2
S S
S
大蒜素(三硫二丙烯，C6H10S3) 目的：建立药用大蒜油中大蒜素的含量测定方法。方法： 采用HPLC法测定，色谱柱Agilent SB -C18柱 （4.6mm×150mm，5µm），流动相乙腈- 水(70:30)， 流速1ml·min-1，柱温30℃，检测波长220nm，进样体积 5µL；结果：大蒜素进样量在0.0884～0.884µg范围内与 峰面积呈良好线性关系（r=0.99997），平均加样回收率 为100.7%（RSD=0.62%，n=9）。结论：本方法操作简 便，准确，重复性良好，适用于药用大蒜油中大蒜素的 含量测定。
175
150
.4713
150
125
125 100
100 75
75
50 50
25
25
.9649
.1038 .1247 .2329
.3126 .3797
.4729
.1048 .1246
0
0
0
2
4
6
8
10 min 0
2
4
6
8
A
B
A.大蒜素对照品高效液相色谱图； B.药用大蒜油样品高效液相色谱图 图1 大蒜素对照品和样品的高效液相色谱图
HPLC非衍生化同时测定大蒜中蒜氨酸及其同系物
FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY食品科技2009年第34卷第12期HPLC 非衍生化同时测定大蒜中蒜氨酸及其同系物Quantitative determination of alliin and its homologues in garlic bynon-derivatization HPLCGUAN Li,TANG Hui *,CUI Li-na,WANG Lu-shi(Key Laboratory of Xinjiang Phytomedicine Resources,Pharmacy College of Shihezi University,Shihezi 832002)Abstract:Objective:To develop a non -derivatization HPLC method to determination of Alliin and itshomologues in garlic.Methods:The analysis was performed on an Agilent ZORBAX SB-C 18column (250mm ×4.6mm ，5.0μm)at 25℃with water as the mobile phase and the flow rate of 0.8mL/min.The detection was set at 220nm.Results:Alliin,isoalliin and methiin,have good linearity in the ranges of 8.003~200.1μg/mL (R 2＝0.9999),2.243~69.34μg/mL(R 2＝0.9998)and 20.54~385.1μg/mL(R 2＝0.9996),respectively.The average recoveries were 98.80%,99.18%and 99.92%,respectively.Conclusion:The developed method is convienent,rapid and accurate with high repeatability,which is suitable to control the quanlity of alliin,isoalliin and methiin in garlic.Key words:garlic;alliin;homologues;HPLC关丽，唐辉*，崔利娜，王鲁石(石河子大学药学院，省部共建新疆特种植物药资源教育部重点实验室，石河子832002)摘要：目的：建立同时测定大蒜中的蒜氨酸及其同系物的HPLC 非衍生化分析方法。
高效液相色谱法测定大蒜油缓释片中大蒜素的含量
高效液相色谱法测定大蒜油缓释片中大蒜素的含量一、背景大蒜素是一种具有抗菌、抗病毒、降血压、预防动脉粥样硬化等多种药理作用的天然活性物质，广泛应用于医学、保健品和食品添加剂等领域。
随着大蒜素及其制剂的使用范围逐年扩大，药品的质量和安全问题越来越引起人们的关注。
大蒜油缓释片是一种含大蒜素的保健品，其中的大蒜素含量是评价其质量的重要指标。
常规的大蒜素检测方法有紫外分光光度法、高效液相色谱法等。
其中，高效液相色谱法具有操作简单、准确度高、灵敏度好的特点，已成为现代化工分析中较为重要的分析方法。
二、测定方法本文采用高效液相色谱法测定大蒜油缓释片中大蒜素的含量，具体步骤如下：2.1 实验仪器与试剂•仪器：高效液相色谱仪、固相萃取仪•试剂：大蒜素参考标准品、大蒜油缓释片样品、甲醇、乙腈、水2.2 样品制备1.取大蒜油缓释片10片，粉碎成细末。
2.取1.0g大蒜油缓释片粉末，加入10mL甲醇，进行超声提取10min。
3.将提取液离心，取上清液，剩余物加入2mL水中，再进行一次超声提取10min，将两次提取液合并。
4.用固相萃取仪将提取液中的大蒜素进行富集，然后用甲醇进行洗脱。
最后浓缩洗脱液，加入2mL乙腈进行重溶。
2.3 色谱条件•色谱柱：Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）•流动相：甲醇:水（50:50，体积比）•检测波长：254nm•流速：1.0mL/min•注射体积：10μL2.4 合适分离条件的的确定将大蒜素标准品的浓度分别逐一注入色谱柱，测量峰面积的变化。
通过标准品峰面积的高度值与浓度值的线性拟合，确定适合分离的条件。
2.5 样品测定用注射器将样品注入色谱柱，根据标准品峰面积的高度与浓度值的线性关系计算得出样品中大蒜素的含量。
三、结果分析采用本方法测得20批大蒜油缓释片样品中，大蒜素的含量均在合理范围内，没有发现明显的质量问题。
高效液相色谱法测定大蒜油软胶囊中大蒜素的含量
高效液相色谱法测定大蒜油软胶囊中大蒜素的含量
宋永贤;孙利;王文泽
【期刊名称】《时珍国医国药》
【年(卷),期】2005(16)6
【摘要】目的:建立测定大蒜油软胶囊中大蒜素含量的方法。
方法:采用高效液相色谱法(HPLC),色谱柱为PlanetsilC18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-水-四氢呋喃(68∶30∶2),流速为1.0ml/min,检测波长为240nm。
结果:大蒜素测定范围为10～200μg·ml-1,相关系数为0.9998,平均回收率为98.7%,RSD为
1.7%(n=8)。
结论:本法快捷、灵敏、准确,可用于测定大蒜油软胶囊中大蒜素含量。
【总页数】1页(P487-487)
【关键词】大蒜油软胶囊;大蒜素;高效液相色谱法
【作者】宋永贤;孙利;王文泽
【作者单位】大连德维尔生物科技有限公司;珍奥集团股份有限公司;辽宁先臻制药
有限公司
【正文语种】中文
【中图分类】R284.2
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定大蒜素注射液中大蒜素的含量 [J], 蒋慧;刘斐
2.高效液相色谱法测定大蒜愈伤组织中大蒜素的含量 [J], 刘兰;陈雅楠;尚云涛;范
宝莉;王振英
3.高效液相色谱法测定大蒜素片中DADS和DATS的含量 [J], 李天昊;李若琦;黄雪婷;陈梅兰
4.高效液相色谱法测定大蒜素注射液中大蒜素含量 [J], 吴敏
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
8生物技术世界 BIOTECHWORLD大蒜素(三硫二丙烯,C6H10S3)为大蒜油中主要的有效成分,是大蒜类保健食品的主要功效成分,同时也是最重要的评价指标。
目前大蒜素的含量测定有重量法、滴定法、气相色谱法、液相色谱法、气相色谱-质谱法等[1～7],高效液相色谱法以其分析准确性高、误差小、方便、普及率高。
本文建立了大蒜素有效成分含量HPLC测定方法,为大蒜油肠溶软胶囊制剂的研究奠定了基础。
1 仪器与试剂A g i l e n t 1100型高效液相色谱仪,紫外检测器,A g i l e n t chemstation色谱工作站;B3200S-T型超声仪(必能信超声上海仪器有限公司);AB204-N型电子分析天平(梅特勒-托利多仪器上海有限公司)。
甲醇(色谱纯 美国天地(TEDIA)试剂公司);甲醇、正己烷、乙腈(分析纯 国药集团化学试剂有限公司 批号:2007122、20090721、20090411);超纯水(江苏康缘药业股份有限公司研究院提供)大蒜素对照品(规格:每支0.5ml,含量为88.4%,中国药品生物制品检定所批号:100384-200501) 大蒜油(吉安市华新天然植物有限公司 批号090323)2 方法与结果2.1 色谱条件色谱柱:Diamonsil C18 色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)流动相:(甲醇:水=85%:15%)柱 温:30℃流 速:1ml/min在此条件下,大蒜油样品的HPLC色谱图中大蒜素吸收峰可与其他成分的吸收峰达到基线分离,适于大蒜素的含量测定。
2.2 检测波长的选择精密称取大蒜素对照品适量,加甲醇制成30.2μg/ml的对照品溶液。
以甲醇作为空白对照,在200～300nm波长范围扫描,检测其吸收曲线及最大吸收波长(λmax),结果发现其光谱图中最大吸收波长为210nm左右,表明大蒜素在210nm有最大吸收,但是靠近末端吸收,参照文献254nm。
故将测定波长定为210nm、254nm,2.3 系统适应性2.3.1 理论塔板数由色谱工作站软件根据理论塔板数计算公式n=5.54(tR/W1/2)2自动计算得理论塔板数为5879。
2.3.2 空白辅料干扰试验阴性供试品溶液的制备:取大蒜油内容物的辅料色拉油、肠溶软胶囊壳材料(明胶、P V P -K 30、甘油、柠檬酸三乙酯、EudargitRL100)再按照上述阴性供试品溶液的制备方法制备供试品溶液。
精密吸取对照品溶液,供试品溶液、阴性供试品溶液各10?l,注入高效液相色谱仪,结果表明,阴性供试品在大蒜素的主峰位置处无色谱峰,故不影响大蒜素的吸收的含量测定。
结果见图2-12.4 对照品溶液的制备取大蒜素对照品精密称定0.37781g,置于50ml棕色量瓶中,用HPLC 法测定大蒜油肠溶软胶囊中大蒜素的含量蒋鸣1 谢涛1(盐城卫生职业技术学院 江苏盐城 224500)摘要:目的:建立HPLC法测定大蒜油肠溶软胶囊中大蒜素的方法。
方法:采用Diamonsil C18 色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇:水=85%:15%,流速:1ml/min,检测波长:210、254nm。
结果:大蒜素在0.0668～0.66797 mg/ml的范围内线性关系良好(r=0.9999),平均加样回收率为100.28%, RSD=1.60%。
结论:HPLC法测定大蒜油肠溶软胶囊中大蒜素的含量测定方法操作简单,结果准确,重复性好。
关键词:HPLC 大蒜素 大蒜油肠溶软胶囊中图分类号:R917文献标识码:A文章编号:1674-2060(2015)10-0008-02作者简介:蒋鸣(1983—),女,汉,硕士研究生,盐城卫生职业技术学院。
对照品(Reference Substances)样品(Sample)空白辅料(Blank accessories)图2-1大蒜素对照品与大蒜油样品HPLC 色谱图(254nm)9BIOTECHWORLD 生物技术世界甲醇溶解超声(功率250w,40KHz)15min、溶液回到室温并稀释至刻度,摇匀,作为对照品母液。
精密量取母液,置于10ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,即得。
2.5 供试品溶液制备方法的考察2.5.1 提取溶剂的考察取大蒜油肠溶软胶囊内容物约0.1g、精密称定,分别在100ml量瓶中用正己烷、乙腈、甲醇各50ml溶解,超声(功率250w,40KHz)提取30min,溶液回到室温,加溶剂至刻度,摇匀,过0.45μm微孔滤囊皮,取续滤液作为供试品溶液。
考察提取溶剂对测定大蒜素含量的影响。
试验结果表明正己烷的提取效率高于其他两组,但是由于正己烷极性较小与摸索的流动相是甲醇和水极性较大,且对照品是用甲醇溶解,故选择提取效率次之的甲醇作为提取溶剂2.5.2 超声提取时间的考察取大蒜油肠溶软胶囊内容物约0.1g、精密称定,分别在100ml量瓶中用甲醇50ml溶解,超声提取15min、30min、45min,溶液回到室温,加溶剂至刻度,摇匀,过0.45μm微孔滤囊皮,取续滤液作为供试品溶液、取10μl进样。
考察超声提取时间对测定大蒜素含量的影响。
试验结果表明选择提取效率较高耗时较短超声15min。
2.5.3 提取溶剂用量的考察取大蒜油肠溶软胶囊内容物约0.1g、精密称定,分别在100ml量瓶中用甲醇25ml、50ml、75ml溶解,超声提取15min,溶液回到室温,加溶剂至刻度,摇匀,过0.45μm微孔滤囊皮,取续滤液作为供试品溶液、取10μl进样。
考察提取溶剂用量对测定大蒜素含量的影响。
由实验结果可知选择提取效率较高的甲醇75ml提取。
供试品最佳制备条件为:0.1g内容物用75ml甲醇,超声提取15min。
2.6 线性关系考察精密称取大蒜素对照品适量,置50ml量瓶中,加甲醇溶解并定容至刻度,摇匀,得浓度为6.6797mg/ml的标准储备液,分别精密吸取上述溶液0.5 ml、1ml、2ml、3ml、5ml至50ml容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得浓度分别为66.80μg/ml、133.59μg/ml、267.19μg/ml、400.78μg/ml、667.97μg/ml的标准品液。
取上述五个不同浓度的标准品液各10μ进样,测定峰面积,以标准品浓度为横坐标(X),峰面积为纵坐标(Y),进行回归,回归方程为:y=5.6823x11.017(R2=0.9999)绘制标准曲线。
结果表明表明大蒜素在0.0668～0.66797 mg/ml的范围内线性关系良好。
2.7 精密度试验精确吸取267.19mg/ml对照品溶液10μl,按上述色谱条件测定,连续进样6次,测定峰面积,经计算RSD=0.40%,表明仪器精密度良好。
结果表明,进样精密度试验结果能满足大蒜素的含量测定的要求。
2.8 重复性试验取大蒜油肠溶软胶囊内容物约0.1g,6份,精密称定,按供试品溶液制备项下平行制备样品溶液,进样10μl,测定大蒜素含量,经计算RSD=0.88%,表明测定方法的重复性良好。
2.9 稳定性试验取大蒜油约0.1g,精密称定,按供试品溶液制备项下制备样品溶液,每隔2h进样一次,分别于0、2、4、6、8、12、18h注入液相色谱仪,进样量10μl,测定大蒜素含量,经计算RSD=1.24%,表明样品在室温下18小时内稳定。
2.10 加样回收率试验取已知含量的大蒜油肠溶软胶囊内容物约0.05g,精密称定,加入含9.5mg大蒜素对照品,按供试品溶液制备项下平行制备样品溶液6份,进样10μl ,测定大蒜素含量,计算加样回收率,经计算RSD=1.60%,6次测定的平均加样回收率为100.28%,表明该方法测定结果准确,结果见表2-2。
2.11 样品测定取大蒜油样品3批,各取约0.1g,精密称定,按供试品溶液制备项下平行制备3份样品溶液,进样10μl,测定大蒜素含量,结果见表2-3,3批样品大蒜素平均含量为183.81。
3 讨论本节建立了大蒜油中大蒜素的含量测定方法,为大蒜油肠溶软胶囊制剂的质量评价提供了一个客观的定量方法。
确立了在254nm 波长下,采用85%甲醇-15%水的HPLC含量测定方法。
在此条件下,能实现大蒜素与其他峰的基线分离,重现性好。
经方法学考察证明该方法准确可靠。
与已报道的大蒜素含量测定方法相比,缩短了分析时间。
从而流动相用量减少,节约成本,提高效率。
参考文献[1]马往校,段敏,孙新涛,等.定硫法测定大蒜中大蒜素含量及影响因素[J] .天然产物研究与开发, 2002,14(6): 22-23.[2]周桦,袁雪芬,张晓伟,等.气相色谱法测定保健品中大蒜素含量[J]·中国公共卫生,2004,20(11):1369.[3]史玉宝,明江波.高效液相色谱法测定大蒜及其制品中的大蒜素[J] .分析测试学报,1997,16(6): 50-51.[4]付松,谢碧俊等. GC/MS 法检测保健食品—大蒜油中大蒜素[J].中国卫生检验杂志,2006,16(12):1461-1463[5]郑屏,盛旋,张祥,等.天然大蒜油及合成大蒜素的气相色谱-质谱分析[J].分析化学,2005,33(9):1321-1323[6]王玉飞,周凯等. GC/MS 法分析大蒜油软胶囊中含硫化合物[J].中国卫生检验杂志.2006,16(10):1173-1175[7]黄力,张宝川等. 高效液相色谱法分析大蒜油中的主要有效成分[J].华北国防医药,2005,17(5):352-354编号 称量（mg） 含量（mg） 加入量(mg)测得量(mg) 回收率（%） 1 55.7 10.09 9.5 19.80 102.20 2 55.5 10.05 9.5 19.43 98.750 3 55.2 10.00 9.5 19.64 101.530 4 55.4 10.03 9.5 19.52 99.78 5 56.0 10.14 9.5 19.75 101.19 6 55.9 10.12 9.5 19.4698.28表2-2加样回收率试验结果批号 峰面积 大蒜素含量(mg/ml) 含量平均值(mg/g)（%） 1 1308 183.032 1387 184.83 183.81 313183.57RSD=0.5%表2-3 三批供试品的含量测定结果。