DAD检测器

DAD检测器

PDA检测器的原理及用法

是由氘- 弧- 放电灯发出的紫外 (UV)波长范围内的光与钨灯发出的可见(VIS) 和短波近红外 (SWNIR) 波长范围内的光组合而成的。采用特殊的后置灯设计，使钨灯灯丝的影像正好聚焦到氘灯的放电孔处，这样在光学上使两个光源结合到一起，使它们放出的光共用同一个光轴进入光源透镜。光线经消色差透镜(光源透镜)后形成一束单色聚焦光进入流通池。每个流通池室和灯都通过石英窗隔开，以便于清洗或更换。在摄谱仪中，通过全息光栅将光线分散到二极管阵列上。从而可同时获得所有波长的信息。

•PDA检测器可以获得的信息

•(1)可得任意波长的色谱图，极为方便;

•(2)可得任意时间的光谱图，相当于与紫外联用;

(3)色谱峰纯度鉴定、光谱图检索等功能，可提供组分的定性信息; •

•(4)可用于有关物质检查检测波长的选择，三维图具有相当的直观性。

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Waters 2996 PDA检测器工作站empower

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岛津检测器PDA 工作站 Lcsolution

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Waters的纯度检测，采用纯度角与阈值角，纯度角小于阈值角即表示峰可能是纯的。

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岛津工作站采用最小峰纯度指数

岛津色谱图经过处理后工作站给予如下信息不纯物 :未检测到

峰纯度指数 : 0.999991

单点阈值 : 0.999924

最小峰纯度指数 : 66

按照岛津工作站的规定，最小峰纯度指数大于零，表示峰是纯的，小于零，有不纯物检测出。

安捷伦工作站计算峰光谱的匹配度是用纯度因子来衡量的

匹配因子为 0 表示不匹配，为 1000 表示光谱一致(理想条件)。通常，大于990 的值表示光谱相似。介于 900 和 990 之间的值表示有一定的相似性，但是必须慎重解释结果。所有低于 900 的值表示光谱是不同的。

不同的软件表示纯度的方式不一样，要区分对待。

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峰纯度的比较原理:

1)光谱比较法:即比对一个峰的上升阶段，峰顶及下降阶段的UV光谱图(DAD很容易得到UV的)进行重叠比较。

2)建立吸收比率图:因为一个纯化合物在两个不同的波长下，其响应值的比例应该是个常数，选择两个不同的波长下要检测峰在不同时间点的响应值的比值与时间画图，如果是一条直线则可判断为纯峰。

3)Waters的色谱及工作站，它的峰纯度曲线的原理是这样的，即:吸收光谱的形状是由不同波长的相对吸光度确定的。化合物吸收光谱的形状是该化合物在溶剂中和测量吸收光谱的 pH 条件下的特征。通过比较多个波长对的吸光度比率。“光谱对照”技术用向量来计量光谱形状的差异。“光谱对照”先将基线校正光谱转换为向量，然后再对向量进行比较。“光谱对照”技术将在 n-维空间中为每个光谱构造一个向量。通过数学方法比较两个光谱向量，计算两个向量的夹角。比较复杂，具体的内容见附件。

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要充分利用好PDA检测器，在有关物质检查或含量测定中它可以帮助解决如下问题: 1、确定有关物质检查波长

2、确定峰的纯度，更好的确定系统适用性

3、确定杂质的紫外吸收光谱

在资料中，特别是有关物质波长确定试验与系统适用性试验时，应附PDA的三维图谱和纯度测定图谱。

注意事项

由于PDA的纯度检测的根本为光谱吸收的比较，所以对于色谱吸收的一些规律仍然适用，如朗伯比尔定律，如果样品浓度过大，则样品会超载，峰最高处的吸收图谱将与低处的吸收图谱产生严重的差异，从而造成纯度的误判，因此一般规定吸收图谱的最大吸收度不得大于1AU。

PDA纯度检测需要扣除空白的影响，如waters的阈值角，岛津的单点阈值，在测定过程中或者需要跑空白图谱，或者需要划定空白基线。基线噪音的影响会严重的影响纯度的测定，因此，波长的选择比较重要，选择合适的波长段进行比较，从而得到准确的结果。

峰的计算范围受积分条件的影响较大，通过积分条件可以得到不同的分析结果，因此需要选择合适的积分条件。

纯度检测只是一个象征性的检测，要想真正确定纯度，应该进行LC-MS测定，对于手性异构体，差向异构体的检测等，效果差的液相色谱条件可能根本检不出差异而造成误判，因此，峰纯度的检测是一个综合的结果，PDA只是一个朝某个方向多迈几步的证据而已。

个人意见。

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